17.1 09.07.22 INCABIOTEC (Violeta Moreno)

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PONENTE

Blga: VIOLETA MORENO ZUÑIGA


Bióloga egresada de la Universidad Nacional del Santa
Especializada en la producción de semillas de moluscos bivalvos (Argopecten
purpuratus, Anadara tuberculosa, Striostrea prismática, Atrina maura, Nodipecten
subnodosus)

INCABIOTEC SAC
EXPERIENCIA DE MANEJO DE Anadara
tuberculosa “CONCHA NEGRA” EN
TUMBES
HISTORIA

En el año 2010 (Proyecto FINCYT) se incio con las primeras


experiencias de producción de semillas de conchas negras

Se realizo el Repoblamiento de ecosistema manglar con semillas


producidas en laboratorio para incrementar la densidad poblacional

Responsabilidad social de empresas langostineras – Asociaciones de


extractores

Proyectos FINCYT, INNOVATE, PNIPA donde los beneficiarios directos


son Asociaciones de extractores y pescadores de Tumbes.
Protocolos

Acondicionamiento de
reproductores Fijación

Inducción al desove Cosecha de semillas

Despacho y transporte
Cultivo larvario
Desove

Larvicultura

Fijación
Engorde

Jica-Cendepesca – El salvador (209): 1.1 - 2.7mm/mes Flores –Ecuador (2017): 0.7-1mm/mes

Perú (2011) Ecuador (2017-2019)

4.0 3.7
3.5
3.5
3.0 2.6
2.3
2.5 2.0
2.0 1.7

1.5
1.0
0.5
0.0
población8a

población8a
población 3

Población 8b

población 3

Población 8b

Silma Camarones
Crecimientos de 0.3 a
2.6mm/mes
Crecimientos de 2 a 3.2mm/mes
Manejo de semillas de conchas negras
en campo
Crecimiento de 2.24 mm/mes
Crecimiento de 1.5 mm/mes
Manejo de enfermedades
Modos de transmisión
DIAGNÓSTICO DE
PATÓGENOS
Mortalidades con o sin síntomas
específicos

1 Muestreo
Bacteriosis Vibrio y Pseudomonas

2
Extracción ADN/ARN y PCR

3
PCR
4 ITS- PEK
dirigida
16Sr RNA
ATCGGT → Perkinsus sp,
5
Secuenciación (Sanger)
USO DE PROBIÓTICOS Genes antimicrobianos

CODIGO ORGANISMO PORCENTAJE REFERENCIA


DE SIMILITUD

CEPA 4MOL Bacillus velezensis 100% CP054714.1


CN1MOL Klebsiella quasipneumoniae 99% AP022005.1

CN4MOL Bacillus subtilis subsp. inaquosorum 99% KT719485.1


CN7MOL Bacillus amyloliquefaciens 98% KC527055.1
PSEUDOMOL Enterococcus mundtii 100% AP019810.1

PAEMOL Vibrio alginolyticus 98% CP046772.1


S14 MOL Bacillus licheniformis 99% GU945220.1

Frente a 6 patógenos: S7 MOL Bacillus aerieus 98% MF470190.1


S3 MOL Bacillus subterraneus 96% Q684234.1

Pseudomonas sp. (2 cepas), Vibrio parahaemolyticus, Ss14 Bacillus velezensis 99% CP053764.1

Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi y Vibrio cholerae


“DESARROLLO DEL PAQUETE
BIOTECNOLÓGICO PARA EL CULTIVO DE
DIFERENTES ESPECIES DE PECTINIDOS
NATIVOS CON POTENCIAL PARA LA
MARICULTURA EN EL NORTE DE PERÚ.”
COSECHA TOTAL ACUICULTURA : 141.2
PROBLEMÁTICA MIL TN /PRODUCE 2021

• ACTUALMENTE LA ACUICULTURA DE MOLUSCOS SE


CENTRA EN LA PRODUCCIÓN DE ARGOPECTEN
PURPURATUS

• TUMBES SOLO PRODUCE LITOPENAEUS VANAMEI

Situación Actual
De los 10 pectinidos con potencial comercial reportados
para el Perú, solo se ha establecido la acuicultura para
1.
Existen experiencias de cultivo en especies emergentes
Aulacomya ater: choro, Ensis macha: Concha navaja,
Anadara tuberculosa Concha negra, Crassostrea
columbiensis/C. cortiziensis, Sthiostrea prismatica “Ostra
de roca”
Fuente: Anuario pesquero y
acuícola 2020
Especies potenciales: Nodipecten subnodosus, Pteria
Sterna, Atrina maura, Spondilus limbatus.
OBJETIVOS
ALCANZADOS
• ESTANDARIZACIÓN DEL PROTOCOLO DE
PRODUCCIÓN DE SEMILLAS DE UNA ESPECIE DE
PECTINIDO TROPICAL.
• EVALUACIÓN DEL PRE ENGORDE/ENGORDE DE
SEMILLAS EN SISTEMAS DE CULTIVO TIPO LONG
LÍNE EN DIFERENTES AMBIENTES NATURALES.
• CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE UNA ESPECIE
DE PECTINIDO TROPICAL CON POTENCIAL
ACUÍCOLA.
• AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE CEPAS
BACTERIANAS NATIVAS CON POTENCIAL
PROBIÓTICO.
• SANIDAD ACUÍCOLA – MONITOREO PARA LA
DETECCIÓN MOLECULAR DE PATÓGENOS DE
REPORTE OBLIGATORIO SEGÚN LA OIE.

SIADE-ACU-PP004- CONTRATO N°158


Beneficio social
• Capacitación del personal en manejo y
desdoble del cultivo / generar puestos de
trabajos relacionados a la producción de
mano de león- Santa Clarita

Beneficio ambiental
• DISMINUIR LA PRESIÓN EXTRACTIVA (ANIMALES
SILVESTRES).

• AUMENTO DE LA DENSIDAD POBLACIONAL

Beneficio económico
• Diversificación del los mercados.
• Disminuir la sub-explotación de áreas de
cultivos (Paita hasta Tumbes) tanto en el
mar o como policultivo en langostineras.
• Mejorar la economía familiar de los
pescadores/ productores .

SIADE-ACU-PP004- CONTRATO N°158


Área de producción

Producción de semillas de pectinos tropicales


Características de la
especie .
• N. subnodosus se distribuye a lo largo del Pacífico,
desde Baja California Sur, México, hasta Paita, Perú
Keen (1971).
• Morfología: La concha de N. subnodosus es
inequivalva e inequilateral, más larga que alta,
bastante fuerte y sólida, y se considera la más
grande y pesada entre los pectinidos de América
tropical. La coloración externa es variada, tamaño
reportado de hasta 22 mm.
• La valva derecha, posee 9 a 10 costillas, poseen Charnela
nódulos que pueden ser discretos o, en algunos
casos, ausentes. Musculo aductor
(Callo)
• Limitante para su acuicultura:
• Los desoves de las poblaciones naturales son Manto

parciales y asincrónicos: Existe una baja densidad de


organismos y una alta dispersión de las poblaciones
a lo largo de la costa (1-1.7 ind/m2) (Laguna ojo de
liebre – México).
Gónada parte hembra
• Es difícil la captación de semilla de forma natural Gónada parte
macho
PRODUCCIÓN Y ENGORDE DE
SEMILLAS DE PECTINIDOS
TROPICALES
PESCA SELECCIÓN DE
REPRODUCTORES
• Los ejemplares fueron recolectados a lo
largo de la costa de Piura -Tumbes

• Transporte en seco con 90% de


sobrevivencia por un periodo no mayor de
8 horas, a temperaturas aproximadas
de 20°C.

• Aclimatación por periodos de 4 semanas


previa inducción, a temperatura de 26°C ±
1, salinidad 30- 32ppt, pH: 7.5- 8- Flujo
cerrado.

• Dieta: Mix de microalgas: Chaetoceros,


Isochrysis, Pavlova, Tetraselmis,
Nanocloropsys. (1.5 a 2.0 x 106 cél/mL) y
probioticos.
IDENTIFICACIÓN DE
REPRODUCTORES

SECUENCIA REPRODUCTOR
TTACAAAAACATGGCTCCCCGGGTAACATGGGGAGTCGTGCCTTCCCGGTGAGTCTGCGGGCTTAAACGGACGCGGTAAAGCGTGC
Caracterización molecular mediante gen TAAGGTAGCTAAATTATGGCCTATTAATTGTAGGTCCTGTGAATGGTTTGACGAGTCTTCAACTGTCTCTAGTTTTTTTGGTGAACTTG
AATTGGATGTGCAAATGCTTCCATGGGTAAGAAAGACGAGAAGACCCCGTGAAGTTAGAAATTTTGGTTGTTGGTGAGCTTTGTTGG
mitocondrial COI y nuclear 16S ARN GTGTAGGTTAGGCCACTTTAAGTGGTTTGAAAGAAAAGTGAACAGCGATAGTTTTGGCTGGGGCAGCAAAGAAGCAAGGTTAGACT
TCTTTAGTTTAAGGACAGGTGTGTGACGACCCACAAGTTTGTTGGTGTGATTAGCAGAAGAAGTTACTCCGGGGATAACAGCGTAA
CTGCCTTGATAGTTCTTATAGATGGGCGGGTTTGCGACCTCGATGTTGGCTCTGGATATCCTAAGGCTTGCAGGCGGTCTTTAGGGTT
MP C+ RN SN Ce GGTTCGTTCGCCCATGAAAATCTGACGTGATCTGAGT

PCR SECUENCIA DE LA SEMILLA F1


CCTGTTTTACAAAAACATGGCTCCCCGGGTAGCATGGGGAGTCGTGCCTTCCCGGTGAGTCTGCGGGCTTAAACGGACGCGGTAAAG
CGTGCTAAGGTAGCTAAATTATGGCCTATTAATTGTAGGTCCTGTGAATGGTTTGACGAGTCTTCAACTGTCTCTAGTTTTTTTGGTGA
600pb ACTTGAATTGGATGTGCAAATGCTTCCATGGGTAAGAAAGACGAGAAGACCCCGTGAAGTTAGAAATTTTGGTTGTTGGTGAGCTTT
TGGGGTGTAGGTTAAGTCACTTTAAGTGGTTTAAAGAAAAGTGAACAGCGATAGTTTTGGCTGGGGCAGCAAAGAAGCAAGGCTAG
ACTTCTTTAGTTTAAAGACAGGTGTGTGACGACCCACAAGTTTGTTGGTGTGATTAGCAGAAGAAGTTACTCCGGGGATAACAGCGT
AATCTGCCTTGATAGTCCTTATAGATGGGCGGGTTTGCGACCTCGATGTTGGCTCTGGATATCCTAAGGCTTGCAGGCGGTCTTTAGG
GTTGGTTCGTTCGCCCATGAAAATCTGACGTGAGCTGA
• Biológicos: Incremento de las tasas de alimentación.
INDUCCIÓN AL Incorporación de tejido gonádico de procedencia
DESOVE fresca o congelada (0% desovados)
• Alcanza la madurez a los 80 mm (aprox 1 • Químicos:
año)
Peróxido de hidrogeno, peróxido de amonio.
• Físicos: shock térmico mediante flujo
continuo. Inyección de neurotransmisores (músculo y gonadas).
Pruebas de dosis óptimas para la inducción
SEROTONINA -Eficiencia del 100% en machos a los 30
minutos

Fecundación: Tarrinas individuales para evitar la


autofecundación.
Relación : ovocito: espermatozoide 1: 4-8.
Observación de huevos fecundados a los 30 minutos .
Desove de reproductores
de Nodipecten subnodosus
CULTIVO LARVAL

Larva D Larva umbonada


24 Horas 8 días
Larva con ojo
12 días

Larva D
temprana 24 Horas
Cultivo Larvaria 27°C

Larva pediveliger
15 días

Reproductores

Larva
0.8 -1 mm semillas
metamorfoseada
1.5 -2 meses
20 días

3 CULTIVOS LARVARIOS 5 000 000 (1 Producción


17 850 000 (2 Producción
ASENTAMIENTO Y FIJACIÓN
• Larva Pediveliger : sobrevivencia 9 -33%
• Se cosecho de 2-5mm altura valvar
PRODUCCIÓN DE CULTIVOS LARVARIOS
% DE SOBREVIVENCIA DE OVULO FECUNDADO A LARVA PEDIVELIGER
01-NS-2019 02-NS-2019
100 89
01-NS-2021 02-NS-2021

84

40.7
33.1

33.1
9
0.8 1
OVULO FECUNDADO % SOBREVIVENCIA LARVA D % SOBREVIVENCIA LPDV

POBLACIÓN % SOBREVIVENCIA ( PD a
semillas 2 a 5 mm)
• 01-NS.2021 pre engorde en laboratorio.
01-NS-2019 1.14 • 02-NS-2021directo a mar de rango de talla de
02-NS-2019 10 2- 8mm (Temperaturas mas bajas de cultivo
01-NS-2021 4.375 20-22°C)
02-NS-2021 2
PRE – ENGORDE Y COSECHA DE SEMILLAS

• Sistema suspendido en linternas cuneras (L02)


tanques de 5TM.
• Densidad de siembra de 1000 semillas/piso de
semillas de 2 a 5 mm
• Periodo de duración 40 a 63 días, llegando a
tener tallas de 7 a 12 mm
• Sobrevivencia de 92.9%
COSECHA Y TRANSPORTE DE SEMILLAS
• Tamaño de cosecha en un talla por encima de los
5mm
• Transporte en seco (tipo sándwich)
• Tiempo 5 horas
• Siembra en sistema long line a partir de 5 m de
profundidad / densidad 500x piso.
ENGORDE EN DISTINTOS
AMBIENTES
CRECIMIENTO EN SISTEMAS
SUSPENDIDOS – LOS
ORGANOS
60 51

42
50
38
34
40
25

30
16

20
3
10

0
15.12.20 16.01.20 14.02.20 06.03.20 07.04.20 06.05.20 18.06.20

PROMEDIO ALTURA VALVAR mm

ALTO mm
PROMEDIO DE VELOCIDAD
DE CRECIMIENTO /MES 8.3

• Se logró monitorear por 06 meses (junio 2020),


talla 51mm, mescla de animales.
• Octubre se recuperó animales a talla de 75 mm
de altura valvar
CRECIMIENTO EN SISTEMAS SUSPENDIDOS – NUEVA ESPERANZA
80

80

70
53.98 58.41
60 46.98

50

40 27

30
17.47
20
8.66
10

0
14.01.20 12.02.20 12.03.20 16.06.20 15.07.20 13.08.20 16.10.20

ALTURA VALVAR
ALTOmm
PROMEDIO DE CRECIMIENTO /MES
8.89

• A los 9 meses de cultivo intermedio y


engorde se obtuvo reproductores de
80mm.
• Se estableció la F1- selección de
reproductores
CRECIMIENTO EN SISTEMA
LONG LINE – LOS PINOS 57
60

50 45

40
34
30
30
22

20 17
12
10
8
10 6

0
SIEMBRA Monitoreo 1 Monitoreo 2 Monitoreo 3 Monitoreo 4

01-NS-2021 (A) 01-NS-2021 (B) 02-NS-2021 (A)

ALTOmm
PROMEDIO DE CRECIMIENTO /MES
12

• Dos (02) poblaciones, crecimiento aun


en evolución.
• Porcentaje de retorno (larva PV a
Semilla en mar) entre 2 al 4%.
• 96 000 semillas en mar y 30 000 en
laboratorio.
COMPARATIVAS DEL CRECIMIENTO EN MM
LOS ÓRGANOS 01-NS-2019 NUEVA ESPERANZA 02-NS-2019
80
ZORRITOS- LOS PINOS 01-NS-2021 (A) ZORRITOS- LOS PINOS 01-NS-2021 (B) 75
70

ZORRITOS- LOS PINOS 02-NS-2021 (A)


59 68

53
57 60

51
46.98
45
42 42
37.5 38
34 34
30
27
25
22
17.47
17
15
12
8.66
8
5
3

SIEMBRA MONITOREO 1 MONITOREO 2 MONITOREO 3 MONITOREO 4 MONITOREO 5 MONITOREO 6 MONITOREO 7 MONITOREO 8 MONITOREO 9
SOBREVIVENCIA EN DIFERENTES SECTORES
100 98
01-NS-2019 02-NS-2019
90.72
90 87.63 01-NS-2021 (A) 01-NS-2021 (B)
83 82.47
02-NS-2021 (A)
80
73
70 67.67
63.67 59.79
60
60 58 56.7 58
53.33
50.52
50 46.2
42
40

30

20

10

0
SIEMBRA Monitoreo 1 Monitoreo 2 Monitoreo 3 Monitoreo 4 Monitoreo 5 Monitoreo 6 Monitoreo 9
DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES
Amplificación del 16S rRNA, mitocondrial,
control interno

EXTRACCIÓN EXTRACCIÓN DETECCIÓN


DE TEJIDO DE ADN POR PCR Y
VARIANTES Herpesvirus

07 PATÓGENOS DE REPORTE OBLIGATORIO

Martelia sp

Bonamia exitiosa y B ostreae


SELECCIÓN DE PROBIÓTICOS
CEPA ESPECIE
P1 Vibrio parahaemolyticus

P3 Bacillus thuringiensis

P4 Bacillus subtillis
P5 Vibrio alginolyticus
P6 Bacillus velezensis
P7 Bacillus velezensis
P9 Bacillus velezensis
P10 Vibrio alginolyticus
P11 Halomonas sp.
P12 Vibrio alginolyticus

Cepa Origen Colonia Forma Gram Disposición Foto

Colonias de
color verde Bacilos Gram
3A Semilla Aislados
(Vibrio cortos (-)
chromagar)
Análisis metagenómico
100%

90%

80%

70%

60%

50%

40%

30%

20%

10%

0%
ESTOMAGO BRANQUIA

vibrio marinomonas pseudoalteromonas shewanella tenacibaculum


alteromonas photobacterium marinobacter marinobacterium clostridium
psychrosphaera arcobacter epulopiscium thalassolituus idiomarina
mesonia mesoflavibacter thalassomonas brumimicrobium otros
PRODUCCIÓN DE ALIMENTO VIVO PARA EL MANTENIMIENTO DE LOS
CULTIVOS DE PECTINIDOS – MICROALGAS
Examen mensual de microbiología de las cepas de microalgas
CETRIMIDE TCBS
(UFC) (UFC)
Isochrysis 0 0
Nannochloropsis 0 0
Pavlova 0 0
Ch. calcitrans 0 0
Ch. gracilis 0 0
Tetraselmis 0 0
Thalassiosira 0 0
Control 0 0

Resultados de la microbiología mensual de las


siete cepas de microalgas antes de ser
sacadas a producción, para evitar el ingreso
de agentes patógenos.

Cultivos puros e intermedios a 18°C en laboratorio – seis cepas producidas en rutina para alimentación de semilla y larva
“DETERMINACIÓN DE LA
DIVERSIDAD MOLECULAR DE
MOLUSCOS BIVALVOS EN LA REGIÓN
DE TUMBES.
DETERMINACIÓN DE LA DIVERSIDAD/ POTENCIAL ACUÍCOLA.
Disponibilidad espacio temporal-Ecosistema Costero norte Manglar

Diferentes sustratos: TEJA/


SOGUILLA/MALLA NETLON/
MALLA RACHE.

Evaluación de tiempo 30 días


/ 45 días y 60 días
.
Evaluación de la diversidad y disponibilidad de larvas en los diferentes sistemas suspendidos de captación

Desarrollo de Multiplex PCR –


diversidad de larva de interés
Caracterización molecular de
larvas por metagenómica
dirigida - gen COI/ 18Sr RNA/
16sr RNA
• Más de 20 especies fijadas – 30 días de 5mm
• 45 días se originó una muerte masiva del recurso mejillón y Atrina - calidad de agua.
• Sector el habilitado presentó una diversidad un mayor número de pectinidos y
Ostras.
• A los 60 días de captación se pudo observar sobrevivencia de especies como Ostra,
atrina y mejillón)- Colmatado .
Componente 2: . Seguimiento y Evaluación de las operaciones de engorde en
diferentes sistemas de cultivo..
• Los animales han sido separados por
especie para evaluar el crecimiento
(Gallegos).

• Éxito solo en captadores de netlón y rache

• Desdoble de especies de acuerdo al


crecimiento actualmente en sistemas
suspendidos (L06) animales superiores a 1
cm en todas las especies.

• Mayor crecimiento Atrina maura en 30 días


animales hasta de 90mm.
STRIOSTREA PRISMATICA
“OSTRA ROCA” “OSTRA NATIVA”

En Tumbes, a pesar de su
biodiversidad y condiciones para
la acuicultura solo se cultiva
langostino; se requiere identificar
nuevas especies con potencial
acuícola
STRIOSTREA PRISMATICA
DESOVE

Fig.04: Desove de Striostrea prismatica “ostra”

▪ Shock térmico
▪ 15 a 30 millones de óvulos/hembra
LARVICULTURA

Óvulos fecundados

Larva tipo D

Larva Umbonada
GRACIAS ………..
Equipo de trabajo:, K. Pretell, V. Moreno, J
Bonilla, J. Zavala;, Carlos Fiestas D,
Guevara, Y. Saavedra, J. Silva, B Macco.
Coordinador : B. Diringer.
C
MUCHAS GRACIAS

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