Iso Practica 5

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UNIVERSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO

AREA DE SALUD: CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

GV.EA.D.15

G
HITO 3
DOCENTE: Silvia Vargas Cadena

ASIGNATURA: Inmunología II

CARRERA: BIOQUIMICA Y FARMACIA


Nombre y Apellidos: Mishiel Nicole Gomez Centellas C.I.: 9939576

Sede: La Paz Fecha: 08-05-2022


Inicial Paterno

PRACTICA 5 PRUEBAS DE INMUNOSEROLOGIA


FACTOR REUMATOIDEO LATEX (FR LATEX)

FUNDAMENTO

Los anticuerpos antiestreptolisina o se detectan en suero por su reacción con la


estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de látex. Los anticuerpos
antiestreptolisina reaccionan con la estreptolisina produciendo una aglutinación visible
macroscópicamente.

MATERIAL Y METODOS

MUESTRA
Suero fresco. Estable 7 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC. Las muestras con restos de
fibrina deben ser centrifugadas antes de usar.

EQUIPO
Espectrofotómetro
Centrifuga
Agitador

MATERIAL
- placas de plástico o vidrio fondo negro
- 1 tapa gotero de 25 ul

- pipetas y micropipetas capaces de dispensar los volúmenes indicados

- palillos mezcladores descartables

- cronómetro

- lámpara o fuente de luz

- tubos de Kahn

REACTIVOS

 Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliestireno recubiertas con


estreptolisina O.
 Control Positivo: suero conteniendo antiestreptolisina O en concentración
superior a 250 UI/ml.
 Control Negativo: dilución de proteínas séricas no reactivas.
 Solución fisiológica (para la técnica semicuantitativa).

PROCEDIMIENTO

Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente. Agitar el Reactivo A antes de


usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.

Las disoluciones se realizó en las plazcas negras y en tubos.

Realizamos turbidimetría para así ver que tanto se ve turbio. va a ver 200 U L DE
nuestra muestra y 500 de suero y se hace el procedimiento de disolución hasta ver cuál
es más turbio

Método cualitativo
 Añadir Reactivo A 1 gota (25 ul)
 Añadir Muestra o Controles 25 ul
 Mezclar con palillo descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una
suspensión uniforme en la superficie delimitada de la placa.
 Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y
observar macroscópicamente el resultado dentro de los 2 minutos.
Método semicuantitativo

Se hace usando el espectrofotómetro va a medir la turbidimetría de las disoluciones,


peor en la practica nos falto la cuantitativa pero lo que se hace es:

Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en tubos de Kahn.

a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de los tubos.

b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo No 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta dilución al


tubo No 2 y mezclar, continuando así las diluciones hasta el último tubo. Las diluciones
así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc

VALORES DE REFERENCIA

Hasta 200 UI/m

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

Negativo: suspensión homogénea.

Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos.

Se califica de 1 a 4 +.

Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible


macroscópicamente. El nivel aproximado de antiestreptolisina O en la muestra, puede
ser calculada por la fórmula siguiente:

ASO (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (200 UI/ml)

Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. El nivel de ASO es de 2 x 200 = 400 UI/m

BIBLIOGRAFIA

1. https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum
%20espanol/aso_latex_directo_maxi_sp.pdf

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