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Desarrollo nacional

Llamas: diagnóstico
eficaz del Rotavirus

Investigadores argentinos diseñaron un método innovador para detectar la

principal causa de la diarrea neonatal, que afecta a niños menores de cinco
años. Basado en nanoanticuerpos VHH, se presenta como una opción rápida y
confiable, surgida de la articulación pública entre el INTA y el Instituto Malbrán.

Por Camila Pía Gandía

Habitante ancestral del continente Con la propiedad de neutralizar al técnico-organizativa para el desarro-
sudamericano, es un símbolo de la cul- agente causal de la diarrea –en niños llo de proyectos tecnológicos del INTA
tura andina y su sistema inmunológico y en bovinos–, los nanoanticuerpos (INCUINTA), destacó que “no sólo re-
abriga respuestas para la salud huma- de esta especie de camélidos dieron emplaza importaciones y pone en va-
na. La llama atesora en su genética lugar al desarrollo de Rotadial, el pri- lor desarrollos del sector público, sino
proteínas grandiosas que permitieron, mer kit de diagnóstico basado en la que complementa las políticas sanita-
gracias al uso de técnicas en biología tecnología VHH. El test es capaz de rias vigentes en el Calendario Nacio-
molecular, seleccionar nanoanticuer- detectar el RV que afecta a los huma- nal de Vacunación”.
pos útiles para detectar y combatir la nos y también a los animales. Celina Las enfermedades diarreicas gra-
infección por Rotavirus (RV) en niños. Vega, investigadora de la plataforma ves son la segunda causa de muer-

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te entre los niños pequeños. Según eran muchas veces factores limitan- En el diseño tuvieron en cuenta algu-
la Organización Mundial de la Salud tes. “Esto impactaba directamente en nos aspectos técnicos novedosos.
(OMS), los Rotavirus son los agentes el sub-diagnóstico de los casos de Como estos anticuerpos son muy re-
infecciosos más comunes. Por año diarrea aguda infantil”, expresó. sistentes, el kit se puede usar a tem-
afectan a 110 millones de infantes, de peratura ambiente, no necesita agita-
los cuales 2 millones requieren hospi- ción ni calor y lectura visual directa.
talización y se calcula que las muertes Rápido, confiable y a medida Además, generalmente estos disposi-
por esta causa superan los 500.000 Rotadial, el kit para el diagnóstico de tivos se comercializan con unas pipe-
casos. Si bien son tratables, el rápi- RV A fue reconocido como caso líder tas costosas que, en este caso, fueron
do diagnóstico tiene un rol estratégico en innovación en el mercado nacional reemplazadas con un sistema de go-
para el manejo clínico del paciente pe- e internacional. teo que lo hace más económico y faci-
diátrico, su evolución satisfactoria y el Rotadial es un test ELISA –del in- lita su utilización. Estas características
control de brotes epidémicos. glés Enzyme-Linked ImmunoSorbent permiten que se realice en cualquier
Juan Stupka, referente de la Red Assay– que utiliza VHH. De acuerdo punto del país, de manera sencilla y
Nacional de Vigilancia de Gastroente- con la investigadora, “este inmunoen- que no requiera de un equipamiento
ritis Virales, aseguró que los decesos sayo se basa en la capacidad de esos específico.
por RV “ocurren principalmente en nanoanticuerpos para reconocer RV A “Ha sido validado contra paneles de
países en desarrollo, debido a la difi- en muestras clínicas, con 99 por cien- muestras de referencia caracterizadas
cultad en el acceso a los servicios de to de especificidad y sensibilidad
salud y representan el 10 por ciento diagnósticas”. Cuando lo identifican,
de las muertes prevenibles en la in- se le unen con alta afinidad y “esta in-
fancia”. En tanto, “se estima que, en
la Argentina, Rotavirus produce entre
teracción se evidencia luego a través
de una reacción colorimétrica, que
Rotadial, el kit
80.000 y 100.000 consultas médi- puede ser detectada a simple vista y para el diagnóstico
cas por año y es responsable del 40 cuantificada a través de un lector de de Rotavirus A
por ciento de las internaciones por densidad óptica”, comentó.
diarrea aguda en los menores de 5 En presencia del virus emite un color
fue reconocido como
años”, manifestó. intenso característico, mientras que en caso líder en
En cuanto a la detección, Vega expli- su ausencia permanece incoloro. “El innovación en el
có que, antes de este desarrollo, “se proceso demora tan sólo dos horas,
realizaba generalmente mediante el desde que se toma la muestra hasta mercado nacional
uso de kits importados”. Tratándose conocer el resultado de la misma, y es e internacional.
de productos originados en el mer- llevado a cabo a temperatura ambien-
cado externo, su valor, disponibilidad te, lo que conduce a un diagnóstico
y tiempos de espera para su compra rápido y confiable”, dijo.

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Características extraordinarias
En el año 2005, los especialistas del INTA iniciaron la lí-
nea de investigación en la tecnología VHH. Se trata de los
fragmentos correspondientes a la porción variable de los
anticuerpos de camélidos, que constituyen las moléculas
más pequeñas existentes en la naturaleza, con la capaci-
dad de reconocer a un agente infeccioso y neutralizarlo.
Mientras los estudios realizados hasta este momento se
centraban en atacar la parte externa del virus, los VHH
obtenidos se unían a una proteína interna.
La capa superficial del virus, contra la cual suelen ge-
nerarse las vacunas, cambia constantemente y de es-
pecie a especie. Por ejemplo, las cepas de Rotavirus A
detectadas hasta el momento poseen 35 variantes en su
capa externa, por lo que para lograr vacunas efectivas se
desarrollan formulaciones multivalentes que inducen an-
ticuerpos contra los serotipos más comunes que afectan
a humanos. Estas vacunas son muy costosas y no inclu-
“Trabajamos con
yen algunos de los serotipos detectados en Sudamérica,
el ideal de África y Asia.
resolver una
problemática que Por su pequeñez y capacidad de escabullirse, los VHH
reconocen la parte interna del virus. A esta característica
afecta
extraordinaria se suma que, a diferencia de otras molé-
fundamentalmente a
culas –que expuestas a altas temperaturas o a cambios
niños en situación en el pH, suelen modificar su estructura–, los VHH man-
de riesgo”. tienen sus propiedades funcionales en pH extremos y
(Celina Vega). resisten altas temperaturas.

por el Instituto Malbrán, lo que garan- tratamiento y el uso indebido de an- co tendrá impacto directo en el manejo
tiza su valor diagnóstico de las cepas tibióticos, que no deben indicarse en clínico satisfactorio del cuadro”.
de Rotavirus circulantes en nuestro caso de diarreas virales. Actualmente, existen en el merca-
país, algo que no puede decirse de Además de diagnosticar la presencia do dos vacunas licenciadas para la
los kits importados”, expresó Vega. del agente infeccioso, el test tiene prevención, compuestas por el virus
La tecnología VHH usada en este en- la finalidad de consolidar el esfuerzo atenuado, altamente eficaces para la
sayo demostró ser capaz de recono- del Estado en la cobertura contra el reducción de la diarrea y la mortali-
cer con alta especificidad todas las RV, que fue incluida el 1º de enero de dad. Sin embargo, presentan algunas
cepas que se analizaron, “lo cual es 2015 en el Calendario Nacional de Va- limitaciones: por un lado, una vez que
una característica diferencial única”, cunación. En este sentido, contempla ocurre la infección, no hay tratamiento
consideró. lo que sugiere la OMS: que cuando se alguno; por el otro, en pacientes inmu-
Entre sus principales ventajas sobre aplican estrategias de vacunación ma- nocomprometidos su eficacia no está
los métodos que se utilizan actualmen- siva se cuente con un plan de vigilan- comprobada. Por lo tanto, “el rápido
te, Stupka resaltó que “es un equipo cia complementario. diagnóstico y manejo clínico del pa-
nacional de alta calidad realizado con Al respecto, Vega comentó: “Tra- ciente pediátrico garantizan, no sólo la
insumos innovadores que permitiría bajamos con el ideal de resolver una evolución satisfactoria del caso, sino
el reemplazo de la importación”. problemática que afecta fundamental- también el control de brotes”, señaló.
Teniendo certeza en la detección, mente a niños en situación de riesgo, Para Stupka, “resulta fundamental
también se disminuirían los costos de donde el acceso a un rápido diagnósti- conocer la epidemiología y la carga

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“Es un equipo
nacional de alta
calidad realizado con
insumos innovadores
que permitiría
el reemplazo
de la importación”
(Juan Stupka).

de esta enfermedad para el diseño de dos instituciones públicas: el INTA y la de Biología Molecular (EMBL, por sus
estrategias e intervenciones en salud, Administración Nacional de Laborato- siglas en inglés). Por su capacidad in-
con el propósito de prevenir y controlar rios e Institutos de Salud (ANLIS). En novadora, fueron patentados en más
las enfermedades que tienen un alto el primer caso, por un equipo de inves- de 30 países, conjuntamente por el
impacto en la población”. tigadores del Instituto de Virología e IN- INTA y la empresa Algenex de Espa-
En esa línea, explicó que el kit “no CUINTA del Centro de Investigación en ña. (Ver recuadro: Características
expresa cómo cambia el virus, pero Ciencias Veterinarias y Agronómicas extraordinarias)
al integrarlo a la vigilancia y median- (CICVyA). Por el otro lado, especialis- Viviana Parreño, responsable del
te el envío de las cepas detectadas al tas del Laboratorio de Gastroenteritis Laboratorio de Virus Entéricos del Ins-
Laboratorio Nacional de Referencia, Virales del Instituto Malbrán. tituto de Virología y referente del pro-
permite este monitoreo o vigilancia El trabajo se inició, hace más de 10 yecto INCUINTA, indicó que “tuvieron
molecular con un alto impacto a nivel años, cuando los investigadores del la novedosa propiedad de neutralizar
país” y manifestó que “garantiza tener organismo tecnológico agropecuario a todos los Rotavirus, independiente-
los medios para vigilar la circulación trabajaban en un equipo de detección mente del serotipo y de la especie de
del virus y si la vacunación generó un para la diarrea en vacas y, como re- origen”.
impacto positivo en la salud”. sultado, obtuvieron el “primer nanoan- Para producirlos se inmuniza una
ticuerpo contra Rotavirus, mientras llama y, cuando alcanza su máxima
Como caso líder en el mercado
pensaban en el diagnóstico para ter- defensa contra el agente infeccioso,
nacional e internacional recibió el
neros”, aseguró Wigdorovitz. se le extrae sangre, se seleccionan los
Premio Innovar 2016 en la categoría
Producto Innovador y parte del reco- Esa herramienta, sumada a la de- linfocitos circulantes y de allí el ARN
nocimiento fue también la distinción manda del Malbrán, dio lugar al de- –ácido ribonucleico– mensajero, que
por la Organización Mundial de la sarrollo del kit específico para salud contiene los anticuerpos que elabora
Propiedad Intelectual (OMPI). Al res- humana. “Fue realizada por un equipo el camélido. Con el material se arma
pecto, Andrés Wigdorovitz, director de investigadores en una institución una biblioteca de genes que se em-
de INCUINTA, sostuvo que es un re- pública y contó con la participación de plea para seleccionar los VHH que
conocimiento a 10 años de estudio: INCUINTA, donde se maduran los de- están dirigidos contra la proteína o an-
“Hay mucho trabajo de investigación y sarrollos”, destacó. tígeno de interés, en este caso VP6 de
la distinción es la visualización de un En la base del test de diagnóstico Rotavirus.
largo camino”. están los nanoanticuerpos VHH de- “Al principio nos pareció que tenía
sarrollados por Lorena Garaicoechea, mucho potencial, por lo que hacían
del Laboratorio de Virus Diarreico del en otros laboratorios del mundo, pero
Resultado de la vinculación
INTA Castelar, en el contexto de su jamás imaginamos que nosotros,
Este producto, totalmente desarrolla- tesis doctoral y en colaboración con desde Argentina, íbamos a llegar
do en la Argentina, fue realizado entre científicos del Laboratorio Europeo tan lejos”, aseguró.

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Resguardo mundial
La complejidad de esta investigación radicó inicialmen-
te en el hecho de transferir y desarrollar la tecnología
VHH contra Rotavirus A. Posteriormente, el conocimien-
to de que los nanoanticuerpos generados y caracteriza-
dos presentaban cualidades únicas fomentó su protec-
ción mediante una patente.
Por otro lado, el resguardo del desarrollo por parte de
Este producto, la Organización Mundial de la Propiedad Intelectual
totalmente (OMPI), asegura al INTA la exclusividad sobre el mismo
desarrollado en en más de 15 países donde la patente fue reivindicada.
la Argentina, El grupo de trabajo desarrolla nanoanticuerpos VHH
fue realizado entre contra otros patógenos de importancia. Al respecto,
dos instituciones Parreño resaltó que “es una de las principales líneas
públicas: el INTA de INCUINTA y promete dar origen a nuevas patentes y
y la ANLIS. productos para la salud pública y sanidad animal”.

primer Elisa basado en nanoanti-

cuerpos VHH para detectar Rotavi-
rus A en humanos del mundo”.
Del estudio también participaron
Marina Bok, Gustavo Asenzo, Matías
Aduriz y Juan Degiuseppe. A partir
de los resultados obtenidos, el grupo
de investigacion de INCUINTA siguió
con el desarrollo de VHH contra otros
agentes infecciosos: norovirus –agente
causal de diarrea por alimentos en hu-
manos de todas las edades–, influenza
H1N1 y otros agentes virales de inte-
rés veterinario, como el de la diarrea
viral bovina y de la arteritis viral equina.
Además, desarrollan nanoanticuerpos
contra anticuerpos IgG de humanos,
bovinos, ratones, cobayos e IgY aviar.
En paralelo al kit, y en el marco de
la investigación en VHH iniciada en el
año 2005, el grupo dirigido por Parre-
ño está desarrollando un alimento fun-
cional y un biofármaco para prevenir y
Para el financiamiento del desarro- Rotadial –de 500.000 determinacio- tratar las diarreas por Rotavirus A en el
llo, pidieron un PICT Start Up al Fon- nes– fue entregado a la ANLIS. contexto de un proyecto FONARSEC
do para la Investigación Científica y Al respecto, Parreño resaltó: “Si el con tres empresas nacionales.
Tecnológica (FONCYT) del Ministerio desempeño del kit es óptimo es estos
de Ciencia, Tecnología en Innovación ensayos multicéntricos, de lo cual es- Más información:
Productiva de la Nación. Con esa sub- tamos convencidos, el siguiente paso Viviana Parreño
vención sumada a 300.000 pesos des- será presentar el registro al ente regu- [email protected]
tinados por el Ministerio de Salud de lador de la producción de estos equipos Juan Stupka
la Nación, el primer lote de reactivos en salud humana –ANMAT– y sería el [email protected]

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