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    Siembra Por Estría en Placa y Tubo - Resumen

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    La técnica de siembra elegida depende del objetivo del estudio. La estría recta permite observar características metabólicas o efectos antagónicos. La estría ondulada asegura la dilución progresiva en la placa para obtener colonias aisladas. La extensión con hisopo permite un desarrollo masivo mientras que con asa u perlas se obtienen colonias separadas. En tubos, la estría recta establece el patrón de desarrollo y la ondulada conserva cepas por cortos

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    Siembra Por Estría en Placa y Tubo - Resumen

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    La técnica de siembra elegida depende del objetivo del estudio. La estría recta permite observar características metabólicas o efectos antagónicos. La estría ondulada asegura la dilución progresiva en la placa para obtener colonias aisladas. La extensión con hisopo permite un desarrollo masivo mientras que con asa u perlas se obtienen colonias separadas. En tubos, la estría recta establece el patrón de desarrollo y la ondulada conserva cepas por cortos

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    Siembra por estría en placa y tubo - Resumen

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    La técnica de siembra elegida depende del objetivo del estudio. La estría recta permite observar características metabólicas o efectos antagónicos. La estría ondulada asegura la dilución progresiva en la placa para obtener colonias aisladas. La extensión con hisopo permite un desarrollo masivo mientras que con asa u perlas se obtienen colonias separadas. En tubos, la estría recta establece el patrón de desarrollo y la ondulada conserva cepas por cortos

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    Siembra Por Estría en Placa y Tubo - Resumen

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    La técnica de siembra elegida depende del objetivo del estudio. La estría recta permite observar características metabólicas o efectos antagónicos. La estría ondulada asegura la dilución progresiva en la placa para obtener colonias aisladas. La extensión con hisopo permite un desarrollo masivo mientras que con asa u perlas se obtienen colonias separadas. En tubos, la estría recta establece el patrón de desarrollo y la ondulada conserva cepas por cortos

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    Siembra por estría en placa y tubo, por extensión superficial y siembra en medio líquido

    Siembra por estría en placa

    Los medios sólidos contenidos en cajas de Petri se inoculan mediante la siembra por estría, la cual
    puede ser recta u ondulada. Estas técnicas se emplean para aislar a los microorganismos, observar
    características coloniales y algunas metabólicas.

    Material:

     Asa bacteriológica
     Mechero
     Cajas de Petri con medios de cultivo
     Cultivo de bacterias o levaduras

    Procedimiento:

    Técnica por estría recta:

    Se emplea para observar características metabólicas o efecto antagónico.

    1. Esterilizar asa
    2. Tomar inóculo
    3. Abrir caja Petri
    4. Trazar una o varias rectas en la superficie del medio
    5. Cerrar caja y colocarla en posición invertida
    6. Esterilizar asa

    Técnicas de estría ondulada:

    Estría continua:

    1. Colocar asa en una posición ligeramente inclinada en un punto de la periferia de la placa, se


    distribuye con estrías cerradas hasta cubrir 1/3 de la superficie del medio, sin separar el asa,
    se coloca en posición vertical y continuamos trazando estrías más separadas hasta cubrir
    toda la superficie

    Estría en cuadrantes:

    1. Marcamos los cuadrantes en la base de la caja


    2. Tomar el inoculo con el asa
    3. Se coloca en un punto de la periferia del primer cuadrante y trazamos estrías cerradas hasta
    llegar al centro de la placa procurando no tocar las líneas divisorias
    4. Tapar caja y girarla a la posición del segundo cuadrante
    5. Esterilizamos y tomamos inoculo de la estría del primer cuadrante
    6. Estriamos el segundo cuadrante
    7. Repetir con el tercer y cuarto cuadrante tomando el inoculo del cuadrante anterior
    8. Una vez terminada, se cierra y se coloca en posición invertida
    9. Esterilizar asa

    Estría en cuadrante radial:


    1. Distribuir el inoculo hasta la tercera parte de la caja mediante estrías cerradas
    2. Tapamos la caja y la giramos 90° con respecto a la zona estriada
    3. Estriamos la segunda sección hasta 1/3 del área sin tocar las estrías previas
    4. Cerrar caja y girar nuevamente 90°
    5. Repetir operación dos veces más

    (Variante de este método)

    Estría cruzada:

    1. Después de estriar el primer sector se esteriliza el asa


    2. Se enfría y se cruza la parte final de las ultimas estrías y se procede a estriar la segunda
    sección
    3. Se repite en las siguientes secciones (ya sin esterilizar el asa)

    Interpretación:

    Independientemente de la técnica, la finalidad es obtener colonias aisladas

    Punto crítico: Abrir la caja lo suficiente. Mientras trabajemos en la zona de asepsia, el cultivo no se
    contaminará. En la estría cruzada, el asa debe estar esterilizada y fría antes de inocular cada
    cuadrante

    Resumen: Con la estría recta podemos observar alguna característica metabólica (nutrición,
    degradación de moléculas para obtener energía - catabolismo y síntesis de los compuestos que
    necesitan - anabolismo) o efecto antagónico (inhibición, deterioro o muerte de alguna especie de
    microorganismos por la acción de otra; o una relación entre dos poblaciones en la cual una de ellas
    causa efectos negativos a la otra). Con la ondulada se asegura la dilución progresiva se la muestra
    en la superficie del agar, esto nos permite obtener colonias aisladas.

    Siembra por extensión superficial

    Se emplea para obtener un desarrollo masivo y homogéneo sobre la superficie del medio o para
    separar colonias

    Material:

     Hisopos de poliéster o alginato


     Asa de Digralsky de vidrio o plástico, o perlas de vidrio
     Mechero
     Propipeta y pipeta serológica, o pipeta automática con puntas estériles
     Placas con el medio de cultivo
     Muestra líquida

    Extensión con hisopo:

    1. Sumergir un hisopo estéril en la muestra en condiciones de asepsia. Eliminamos el exceso


    presionando el hisopo sobre las paredes del tubo
    2. Flamear tubo
    3. Tomar placa y abrir en condiciones de asepsia
    4. Introducir hisopo y frotar en toda la superficie
    5. Tapar placa, girar 90° y distribuir inoculo en forma cruzada
    6. Repetir por tercera vez
    7. Con la punta del hisopo cubrir la periferia de la placa (circunferencia)
    8. Tapar placa y colocar de forma inversa
    9. Colocar el hisopo en tubo vacío y lo esterilizamos en autoclave

    Resultado:

    Al sembrar por extensión superficial obtener un desarrollo masivo

    Punto crítico: Para una buena extensión es eliminar el exceso de inoculo del hisopo antes de
    depositarlo en el medio de cultivo

    Extensión con el asa de digralsky:

    Se emplea para extender volúmenes pequeños sobre la superficie del medio de cultivo

    Procedimiento:

    1. En condiciones de asepsia tomamos el inoculo con la pipeta serológica o automática, y


    depositamos de 0.1 a 0.5 mL en la parte central de la superficie del medio de cultivo.
    2. Con el asa estéril y fría extendemos el inoculo con movimientos circulares
    3. Tapar placa y dejar que el inoculo se absorba
    4. Colocar asa en solución desinfectante
    5. Una vez que el inoculo de ha absorbido, colocar la placa en posición invertida

    Resultado:

    Al sembrar por extensión con el asa obtenemos colonias separadas en toda la superficie

    Punto crítico: Extender inmediatamente para evitar que sea absorbido

    Extensión con perlas de vidrio:

    Distribuir el inoculo sobre la superficie

    Procedimiento:

    1. En condiciones asépticas tomar 0.1 a 0.5 mL con una pipeta automática, se colocar en el
    punto medio de la superficie del medio de cultivo y colocar las perlas de vidrio estériles,
    agitar con movimientos en forma de cruz
    2. Retirar perlas en zona de asepsia vertiéndolas en un recipiente de boca ancha, el que
    después será esterilizado en autoclave
    3. Tapar cajas y colocarlas en posición invertida

    Resultado:

    Se obtienen colonias separadas en toda la superficie del medio de cultivo

    Punto crítico: Después de depositar el inoculo extenderlo inmediatamente y asegurarse que las
    perlas se desplacen en diferentes sentidos por toda la superficie del medio
    Resumen: Mediante la inoculación con hisopo obtenemos un desarrollo masivo sobre la superficie
    de la placa y con el asa o perlas, se obtienen colonias separadas

    Siembra en tubo por estría

    Los medios solidos están contenidos en tubos o caja Petri, pero la inoculación se realiza por texnica
    de estría, la cual puede ser recta u ondulada. Los tubos con medio solido en forma inclinada se
    utilizan para estudiar el patrón de desarrollo bacteriano, observar alguna característica metabolico
    o para observar microorganismos por periodos cortos

    Técnicas:

    Estría recta:

    Se emplea para realizar la caracterización macroscópica del cultivo en estudio

    Material:

     Asa
     Mechero
     Medios de cultivo en tubo
     Cultivos de bacterias o levadura

    Procedimiento:

    1. Con asa estéril, fría y en zona aséptica, tomamos el inoculo que puede ser liquido o sólido y
    trazamos un línea recta sobre la superficie del mismo (tubo con agar). Retiramos el asa,
    flameamos el tubo, lo tapamos y lo colocamos en la gradilla. Esterilizamos el asa

    Estría ondulada:

    Obtener un desarrollo abundante del microorganismo y para conservarlo por periodos cortos

    Material:

     Asa
     Mechero
     Agar inclinado (medios del cultivo en tubos)
     Cultivos de bacterias o levaduras

    Procedimiento:

    1. Con asa estéril fría y en zona aséptica, tomamos el inoculo, destapamos el tubo,
    introducimos el asa hasta la base donde comienza la parte inclinada y distribuimos el inoculo
    trazando estrías cerradas en forma ondulatoria hasta cubrir toda la superficie del medio.
    Retiramos el asa. Flameamos tubo, cerramos, colocamos en la gradilla, esterilizamos el asa

    Picadura y estría:

    Para realizar algunas pruebas metabólicas se utiliza una combinación de las técnicas de siembra por
    picadura y estría
    Material:

     Aguja de siembra
     Mechero
     Medios de cultivo en tubo (kligler)
     Cultivos en placa

    Procedimiento:

    1. Tomar el inoculo con la aguja de siembra


    2. Introducir en forma vertical en la parte no inclinada del medio cuidando no tocar el fondo
    del tubo
    3. Se retira y se siembra por estría recta la superficie inclinada del medio

    Punto crítico: No tocar el fondo. Deslizar suavemente, no romper el agar

    Resumen: La selección de la técnica depende del objetivo del estudio. Para establecer el patrón de
    desarrollo se usa la estría recta, si se quiere conservar una cepa es con estría ondulada y si se quiere
    estudiar características metabólicas se emplea la picadura con estría recta

    Siembra en medio líquido

    Se emplea para preparar diluciones, enriquecer un inoculo, homogeneizarlo o cuantificar

    Material:

     Mechero
     Asa, hisopo o pipetas
     Tubos o matraces con el medio de cultivo líquido o con solución salina
     Muestra líquida

    Procedimiento:

    Con asa

    1. Esterilizar y dejar enfriar


    2. Tomar el tubo, homogeneizar y destapar, flamear, introducir el asa, usmergir y sacarla
    evitando tocar las paredes. Teniendo cuidado de que en el arillo se mantenga una película
    del inoculo
    3. Tapar el tubo
    4. Destapar matraz, flamearlo, introducir asa con inoculo, agitar el asa para dispensar el
    inoculo
    5. Sacar asa, flamear y esterilizar

    Con hisopo

    1. Previamente esterilizado
    2. Sujetar tubo, destapar, flamear, introducir hisopo, impregnar con muestra, eliminar
    excesos, sacar hisopo y tapar tubo
    3. Sujetar tubo donde colocaremos el inoculo, abrir, flamear, introducir hisopo y agitar,
    eliminar exceso, retirar y tapar recipiente.
    4. Colocar hisopo en tubo vacío, tapar y esterilizar en autoclave

    Con pipeta serológica o Pasteur

    1. Desenvolver la pipeta, colocar bulbo, mantener cerca del mechero


    2. Abrir recipiente que contiene la muestra
    3. Introducir pipeta, succionar inoculo, retirar pipeta, flamear recipiente, tapamos
    4. Destapar recipiente donde colocaremos el inoculo, flamear boca, introducir pipeta y liberar
    inoculo
    5. Flamear boca, tapar, colocar pipeta en recipiente con desinfectante

    Con pipeta automática

    Similar a la anterior, mantener la punta intercambiable en zona aséptica ya que esta entrará en
    contacto con la muestra y el medio de cultivo a inocular

    Puntos críticos: Mantener el dispositivo en zona aséptica. No tocar con las manos las puntas.

    Precauciones: Tener organizado todo, incluir solución desinfectante

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