Avances en El Desarrollo de Bioprocesos

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Avances en el desarrollo de bioprocesos: adición aldólica catalizada porramnulosa-1-fosfato aldosa

recombinante

Inés Ardao Palacios – Bellaterra (Barcelona) 19 de octubre 2009

Este trabajo es una aportación al desarrollo de un bioproceso catalítico empleando ramnulosa-1-


fofato aldolasa recombinante como biocatalizador para la producción estereoselectiva de un
compuesto precursor de inhibidores de glicosidasas de acción terapéutica mediante adición
aldólica de dehidroxiacetona fosfato y (S)-Cbz-alanina.

EVALUCIÓN DE DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO Y CONDICIONES PARA LA PRODUCCIÓN DE


CONIDIOS DE TRICHODERMA SPP MEDIANTE FERMENTACIÓN EN LÍQUIDO Y SÓLIDO

Tania María Gómez Bolívar - Cartago, 2017

El objetivo de este trabajo es evaluar distintos sustratos y condiciones para la producción de


conidios (es una espora) de Trichoderma spp. mediante la fermentación en líquido y en sólido.

Para esto primeramente se evaluó en la fermentación líquida distintos medios de cultivo, donde el
mejor resultado se obtuvo con el medio de cebada con 2,0 x 10 8 conidios/ml al tercer día de
fermentación y al presentar numerosas complicaciones, como contaminación bacteriana y
producción de otras estructuras, se decidió continuar con la fermentación sólida y optimizar las
condiciones bajo estos otros sistemas de cultivo. Los sustratos evaluados en la fermentación
sólida fueron: arroz, puntilla-granza, puntilla-granza-linaza y puntilla-broza, bajo diferentes
condiciones: distintas concentraciones de inóculo (2,0 x 105 y 2,0 x 106 conidios/ml),
temperaturas de 25°C y 30°C, fotoconidiación (luz azul y luz blanca), tiempo de apertura de la
bolsa e inóculo micelial. Resultando como mejores sustratos la puntillagranza-linaza y la puntilla-
granza con el mayor inóculo, y por otro lado el inóculo micelial o fermentación bifásica logra
acortar los tiempos de fermentación. Mientras que la utilización de la temperatura de 30°C
permite usar el sustrato Puntilla-Broza, además de mejorar el proceso de secado sin afectar la
germinación.

CONCLUSIONES

La fermentación en sustrato sólido favorece el proceso de conidiación, además es una alternativa


más limpia, evitando el desperdicio de agua y materia orgánica. Usando como inóculo micelio de
Trichoderma spp. se reducen los tiempos de fermentación, alcanzando la máxima concentración a
los 5 días de la inoculación, consiguiendo hasta 2,10 x 109 conidios/ml en el sustrato puntilla-
granza-linaza. La puntilla-granza y la puntilla-granza-linaza predominan como los mejores sustratos
en todas las condiciones evaluadas. Cuando la FSS (fermentación de sustrato solido) se mantiene a
30°C se logra una deshidratación mayor del sustrato puntillabroza, lo que promueve una buena
producción de conidios.

Fermentador acoplado al sistema de aireación; Fuente: CENIBiot, 2017.

EVALUACIÓN DEL DESARROLLO IN VITRO DE Stevia rebaudiana BERTONI CON EL EMPLEO DE


SISTEMAS DE MICROPROPAGACIÓN SEMI-SÓLIDO, INMERSIÓN TEMPORAL RITA Y
BIORREACTOR DE BURBUJEO.

Karol María Jiménez Quesada - Cartago, 2011

La presente investigación se enfocó en comparar la efectividad de tres sistemas para la


micropropagación de esta planta: medio semi-sólido, inmersión temporal en RITA e inmersión
permanente en biorreactor de burbujeo, bajo condiciones de 22 ± °C, luz directa, 2000 lux y un
fotoperíodo de 16 horas.

Se determinó que un tratamiento en RITA con 5 minutos de inmersión cada 8 horas favorece las
características de color, vigorosidad y desarrollo radical de los explantes, además de generar
excelentes resultados en cuanto a brotación, elongación, número de hojas, masa seca y masa
fresca. El crecimiento en mediosemisólido se vio afectado por la temperatura, y la incidencia de
luz directa ocasionó la acumulación de antocianinas en los explantes. El crecimiento de biorreactor
no se recomienda para la micropropagación de S. rebaudiana, ya que causa malformaciones y
decoloración en las hojas, que constituyen la principal fuente de compuestos de interés.

CONCLUSIONES

La inmersión temporal en RITA durante 5 minutos cada 8 horas (T9) generó los mejores
resultados para la micropropagación in vitro de Stevia rebaudiana, con explantes color verde
intenso, sin estrés por luz o temperatura, y vigorosidad y desarrollo radical dados por un adecuado
desarrollo anatómico y fisiológico, en ausencia de hiperhidricidad. Además fue superior a
cualquier otro tratamiento en cuanto a tasa de brotación, el desarrollo de hojas, y el crecimiento
de los explantes. La micropropagación de S. rebaudiana en el biorreactor de burbujeo utilizado
es este ensayo, ocasionó la deformación y decoloración de las hojas, que constituyen el órgano
más importante para la extracción de esteviósidos, por lo que no resulta recomendable para
esta especie, dada su importancia comercial. El sistema de cultivo de S. rebaudiana en medio
semi-sólido es severamente afectado por la luz directa y temperaturas inferiores a 25°C,
perjudicando mayoritariamente el crecimiento, y provocando la acumulación de antocianinas, lo
que indica estrés en las plántulas. Todos los tratamientos comparados presentaron un insuficiente
desarrollo radical, en comparación con el subcultivo de S. rebaudiana en medio semi-sólido a 25
°C, por lo que se requieren estudios alternativos enfocados en el desarrollo de este órgano para
que sea posible su aclimatación en invernadero

ESCALAMIENTO DE CULTIVOS CELULARES DE MORINDA CITRIFOLIA A UN BIORREACTOR


TIPO TANQUE AGITADO DE 7 LITROS, PARA LA PRODUCCIÓN DE ANTRAQUINONA ROJA
COMO ALTERNATIVA PARA TINTE DE ORIGEN NATURAL.
Jorge Madrigal Rueda - Cartago, Junio, 2017

El objetivo de este proyecto fue evaluar el proceso de escalamiento de suspensiones celulares de


Morinda citrifolia en biorreactor tipo tanque agitado de 7 litros para la producción de
antraquinonas. Además, se evaluó el efecto de hidróxido de sodio como elicitor ( elicitor es
utilizado para referirse a un grupo diversos de compuestos estructurales (extrínsecos o
aportados) que actúan como moléculas señalizadoras cuando existe peligro), tanto a
nivel de matraz como en biorreactor.

Biorreactores en operación (controlador y frasco de cultivo) Fuente: CENIBiot, 2017.

. Se logró obtener un crecimiento de biomasa máximo de 10, 51 g/L en 20 días de cultivo, con 9,89
mg EAG/g de extracto liofilizado. En las suspensiones celulares se determinó que con el pH 11 se
obtenía la mayor acumulación de compuestos fenólicos (4,38 mg EAG/g de extracto liofilizado),
con un crecimiento en la producción del 92,02%, en los biorreactores se logró aumentar la
producción fenoles de 2,0 mg EAG/g de extracto liofilizado a 3,52 mg EAG/g de extracto liofilizado,
después de 6 hora de elicitar. Por medio de Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (HPLC) se
determinó que 6 horas después a la elicitación, se presentó la mayor concentración e intensidad
de compuestos. Esto también se percibió al realizar la espectrometría de masas, donde se
determinó la presencia de antraquinonas como: alizarina, antragalol, purpurina, rubiadina,
sorajidiol y munjistin. Las diferencias entre los tratamientos de pre y post elicitación, sugieren que
el hidróxido de sodio tuvo un efecto inductor en la síntesis de antraquinonas.

CONCLUSIONEs

Mediante el cultivo de células en suspensión de Morinda citrifolia en biorreactor tipo


tanque agitado de 7 litros, se obtuvo 10, 51 g/L de biomasa seca, así como, 9,89 mg EAG/g
de extracto liofilizado. La elicitación mediante hidróxido de sodio a nivel de matraz,
produjo un aumento de la concentración de compuestos fenólicos, siendo el tratamiento
con pH 11 el de mayor producción de estos compuestos (4,38 mg EAG/g de extracto
liofilizado). La elicitación mediante la adición de hidróxido de sodio en biorreactor,
aumentó la síntesis de compuestos fenólicos, pasando de 2,0 mg EAG/g de extracto
liofilizado a 3,52 mg EAG/g, a las 6 horas. El método de Folin-Ciocalteu, permitió
cuantificar compuestos fenólicos en cultivos celulares de M. citrifolia. Se determinó
mediante espectrometría de masas, la presencia de diversas tipos de antraquinonas,
como: alizarina, antragalol, purpurina, rubiadina, sorajidiol y munjistin, en el extracto de
6 horas después de elicita
HAN REALIZADO EN EL TEMA DE BIOPROCESOS.

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