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B0211005 B0211006
Hektoen Entérico Agar
USO INSTRUCCIONES Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento Suspender 76 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo- de Salmonella spp. y Shigella spp. a partir de heces y alimentos. sar de 10 a 15 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir hasta lograr una disolución completa. No esterilizar en autocla- FUNDAMENTO ve. En el medio de cultivo la proteosa peptona y el extracto de levadu- Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles. ra aportan los nutrientes para el desarrollo microbiano. La lactosa, sacarosa y salicina son los hidratos de carbono fermentables. Las CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO sales biliares inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, de Medio de cultivo deshidratado: color púrpura, homogéneo, libre algunos coliformes y de la mayoría de las cepas de Pseudomonas deslizamiento. spp. El azul de bromotimol y la fucsina ácida son los indicadores Medio de cultivo preparado: color verde amarronado. de la fermentación de hidratos de carbono, mientras que el citrato de hierro actua como indicador de la formación de SH2 a partir del ALMACENAMIENTO tiosulfato debido a que se forma sulfuro de hierro, compuesto de Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. color negro. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante. PROCEDIMIENTO El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibi- Siembra ción de este microorganismo por las sales biliares está disminuida Directa, estriando la superficie del medio de cultivo. por la adición de cantidades relativamente elevadas de proteosa Se incrementa la recuperación de patógenos fecales si las heces peptona y de hidratos de carbono así como la baja toxicidad de los fueron incubadas previamente en caldo de enriquecimiento. indicadores presentes en el medio de cultivo. Incubación CONTENIDO Y COMPOSICIÓN En aerobiosis, a 33-37 ºC durante 18 a 24 horas. Código B0211005: envase x 100 g. Se logra una mejor diferenciación entre especies de Salmonella y Código B0211006: envase x 500 g. Shigella al incubar las placas durante 48 horas.
FÓRMULA (en gramos por litro) INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
PROTEOSA PEPTONA ..................................................................................................12.0 Se debe determinar la fermentación de lactosa y la producción de EXTRACTO DE LEVADURA........................................................................................... 3.0 SH2. SALES BILIARES..................................................................................................................... 9.0 Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias amarillas LACTOSA .....................................................................................................................................12.0 o anaranjadas. SACAROSA ................................................................................................................................12.0 Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del SALICINA ........................................................................................................................................ 2.0 color del medio, verde-azuladas. CLORURO DE SODIO......................................................................................................... 5.0 Microorganismos productores de SH2: colonias con centro ne- TIOSULFATO DE SODIO ................................................................................................... 5.0 gro. CITRATO DE HIERRO Y AMONIO ........................................................................... 1.5 AZUL DE BROMOTIMOL..........................................................................................0.065 FUCSINA ÁCIDA...................................................................................................................... 0.1 AGAR ...............................................................................................................................................14.0 pH FINAL: 7.5 ± 0.2 CONTROL DE CALIDAD PRECAUCIONES - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- MICROORGANISMOS CARACTERISTICA DE COLONIAS sivo. Salmonella enteritidis Verde azuladas con o sin centro negro - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- ATCC 13076 ñado. Salmonella typhimurium Verde azuladas con o sin centro negro - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- ATCC 14028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Shigella flexneri Verdes, elevadas, húmedas - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- ATCC 12022 to. Shigella sonnei Verdes, elevadas, húmedas - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- ATCC 25931 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Proteus mirabilis Verde azuladas con o sin centro negro establecidas por el laboratorio. ATCC 43071 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Escherichia coli Rosa salmón rodeadas en algunas ocasiones por va apropiadamente. ATCC 25922 un precipitado biliar - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del Klebsiella pneumoniae Rosa salmón rodeadas en algunas ocasiones por mismo según reglamentaciones vigentes. ATCC 700603 un precipitado biliar Enterococcus faecalis Inhibido REFERENCIAS ATCC 29212 - King S. and Metzger W.I. 1967. A new medium for the isolation of Staphylococcus aureus Inhibido Salmonella and Shigella species. Bact. Proc. Am. Soc. ATCC 25923 Microbiol., p. 77. - King S. and Metzger W.I. 1968. A new plating medium for the iso- CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO lation of enteric pathogens. I. Hektoen Enteric Agar. Appl. Microbiol., Medio sin inocular Sin cambios 16 (4) 577. - King S. and Metzger W.I. 1968. A new plating medium for the isolation of enteric pathogens. II. Comparison of Hektoen Agar with LIMITACIONES SS and EMB Agar. Appl. Microbiol., 16 (4) 579. - No autoclavar el medio de cultivo ya que el calentamiento excesi- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification- vo puede afectar la composición del mismo. No es necesario este- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti- rilizar el medio de cultivo debido al alto efecto inhibitorio del medio more, Md. frente a la flora Gram positiva. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of - Las cepas de Proteus pueden no ser inhibidas y crecer como co- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, lonias similares a especies de Salmonella o Shigella. Por eso es ne- Washington, D.C. cesario realizar pruebas bioquímicas de identificación microbiana. INDICACIONES AL CONSUMIDOR MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- miento. AUTORIZACIÓN ANMAT PM -1292 - 22 Dir. Técnico: Bioq. Alejandro Rossi 03/2021 - REV .02
SÍMBOLOS UTILIZADOS
DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES
IN VITRO DETERMINACIONES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO