Muestras Oculares

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Muestras Oculares

Generalidades

El método de recogida de material biológico ocular depende de la estructura o secreción


a la que se quiera acceder para su estudio. En caso de estructuras superficiales, se
deberá recoger la muestra sin alterarla previamente con tratamientos o colirios tópicos y
mínimamente durante los métodos de recogida. No deben admitirse muestras si han
transcurrido más de 24 horas de la toma y sin medio de transporte. Las instrucciones de
recogida de muestras oculares que se muestran en este artículo son una recopilación de
las recomendadas por la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y
Microbiología Clínica[ CITATION Etx18 \l 3082 ].

Ilustración 1. Muestras oculares. Recuperado de: https://www.sap.org.ar/docs/Congresos2017/Infectolog


%C3%ADa/Martes%2025/Dra._Segretin_estado_actual.pdf

Técnicas de Obtención

Exudado conjuntival

El exudado conjuntival debe obtenerse antes de la instauración de tratamiento tópico


con colirios. Se frota la conjuntiva tarsal con un hisopo de Dacron o alginato cálcico
conservado en medio de transporte de Amies. Si la mucosa está seca, hay que empapar
la torunda en caldo triptona-soja (TSB) en caldo infusión cerebro-corazón (BHI) antes
de tomar la muestra. Además, debe obtenerse una segunda muestra sin medio de
transporte para poder efectuar un examen microscópico. Si se sospecha infección por
Chlamydia hay que tomar una torunda adicional y colocar la muestra en el medio de
transporte específico que utilice el laboratorio. Del mismo modo en caso de infección
vírica la muestra debe introducirse en medio de transporte adecuado para virus. Durante
la toma de la muestra ha de evitarse el contacto con el borde del párpado para no
arrastrar microbiota colonizante[ CITATION Rod12 \l 3082 ].
Ilustración 2. Exudado conjuntival. Recuperado de: http://tomamuestrasbiologicas.blogspot.com/2015/05/exudado-
conjuntival.html

Raspado corneal

La muestra debe tomarse antes de instaurar el tratamiento antibiótico, sobre todo si es


un colirio. Se calcula que el inóculo bacteriano en los raspados puede variar entre 100 a
300 UFC en total de la muestra en un volumen que oscila entre 1 y 3 µL (Kaye, 2003).
El inóculo es tan bajo que se afecta de forma significativa por la presencia de
antibióticos tópicos, reduciendo la sensibilidad del cultivo en un 30-40%. No existe
consenso sobre el instrumento o el procedimiento a seguir para la toma de muestra. Se
pueden utilizar tanto espátulas de Kimura, hoja BardParker, hojas de bisturí por el
extremo no cortante (número 15), agujas estériles o bien escobillones empapados en
caldo tioglicolato o una combinación de ambos. La espátula o la hoja de bisturí
permiten desbridar la capa superficial y acceder a los microorganimos que invaden las
capas más profundas. Se debe raspar tanto el fondo de la úlcera como los
bordes[ CITATION Rod12 \l 3082 ].

Ilustración 3. Raspado corneal. Recuperado de: https://www.youtube.com/watch?v=aVEYJr-k214

Biopsia corneal
Está indicada la toma de una biopsia corneal si la infección no responde al tratamiento o
si los cultivos de los raspados han sido negativos y continúa la sospecha clínica de
queratitis infecciosa. También está indicada si la infección se localiza en las capas
profundas del estroma inaccesibles al raspado. La biopsia puede realizarse con el
microscopio quirúrgico con una hoja pequeña, utilizando trépanos de 2-3 mm de
diámetro. Se lleva a cabo trepanación no penetrante y con ayuda de cuchillote o espátula
se finaliza la queratectomía parcial. De forma anecdótica, también se ha utilizado laser
para realizar queratectomías superficiales[ CITATION Rod12 \l 3082 ].

Ilustración 4. Biopsia corneal. Recuperado de: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-


21762015000100015

Lente de contacto

El cultivo de la lente de contacto tiene utilidad en los casos de sospecha de infección por
Acanthamoeba spp[ CITATION Rod12 \l 3082 ].

Ilustración 5. Lente de contacto. Recuperado de: https://visionyoptica.com/superficies-actuales-de-lentes-de-


contacto-2/

Humor vítreo

Las muestras para el diagnóstico microbiológico deben tomarse antes de la instauración


del tratamiento antibiótico, especialmente si éste se administra mediante inyección
intravítrea. Puede obtenerse una muestra de humor vítreo, por aspiración con jeringa en
el quirófano o preferentemente por vitrectomía y lavado para evitar tracciones vítreas.
El análisis del humor acuoso tiene una escasa sensibilidad para determinar la etiología
de una vitritis[ CITATION Rod12 \l 3082 ].

Ilustración 6. Humor vítreo. Recuperado de: https://www.agenciasinc.es/Noticias/El-humor-vitreo-de-los-ojos-


ayuda-a-determinar-el-momento-de-la-muerte

Lente intraocular

Puede cultivarse en los casos de endoftalmitis postquirúrgica tras implante. Una vez
extraída, se introduce en 0,5 ml de solución salina estéril y se remite al
laboratorio[ CITATION Rod12 \l 3082 ].

Ilustración 7. Lente intraocular. Recuperado de: https://www.clinica-aver.com/y-por-que-una-lente-intraocular-


para-la-cirugia-de-catarata/

Exudado palpebral

Para obtener este exudado se debe frota el borde del párpado o de la zona ulcerada con
una torunda de algodón o alginato cálcico previamente humedecida en caldo TSB o
BHI[ CITATION Rod12 \l 3082 ].
Ilustración 8. Exudado palpebral. Recuperado de: https://empendium.com/manualmibe/chapter/B34.III.23.26.1.

Muestras del aparato lagrimal

Si hay exudado purulento procedente del canal o del saco lagrimal, hay que aspirarlo
con jeringa. También se puede aspirar el material obtenido en el curso de una
dacriocistotomía o canaliculotomía. Si se observan concreciones en el canal deben
extraerse con una espátula o cureta y a continuación se extienden sobre un portaobjetos
para su posterior tinción. Si se realiza la extirpación del saco o de la glándula lagrimal,
se debe introducir en suero salino estéril para remitirlo al laboratorio [ CITATION Rod12 \l
3082 ].

Ilustración 9. Muestras del aparato lagrimal. Recuperado de: https://www.google.com/search?


q=Muestras+del+aparato+lagrimal+&tbm=isch&ved=2ahUKEwjsm7fX677yAhWHLt8KHV0zAbgQ2-
cCegQIABAA&oq=Muestras+del+aparato+lagrimal+&gs_lcp=CgNpbWcQA1Cc3wRYnN8EYJ7iBGgAcAB4AIABb4gBb5I
BAzAuMZgBAKABAaoBC2d3cy13aXotaW1nwAEB&sclient=img&ei=AjofYeySM4fd_Abd5oTACw&bih=949&biw=911#i
mgrc=2WIGcan_5FyTsM

Sangre

En caso de endoftalmitis hematógena han de practicarse hemocultivos por punción


venosa.
Ilustración 10. Endoftalmitis. Recuperado de: https://areaoftalmologica.com/blog/salud-ocular/endoftalmitis/

Transporte

EXUDADOS

En general, para el transporte de las muestras se recomienda la utilización de medios de


transporte, como el medio de Amies si se han utilizado torundas, y su conservación
refrigerada (4-8ºC) hasta el momento de su procesamiento en el laboratorio [ CITATION
Sec08 \l 3082 ].

RASPADO CORNEAL

Tradicionalmente, el raspado de la úlcera se sembraba directamente en medios sólidos


en la misma consulta del oftalmólogo, debido al volumen de muestra tan pequeño. Esta
práctica presenta varios inconvenientes: 1) hay que mantener varios medios de cultivo
en la consulta, 2) es difícil la siembra en la superficie del agar utilizando la mayoría de
las veces una hoja de bisturí, sobre todo para personal no experimentado en las técnicas
microbiológicas, 3) el manejo de medios enriquecidos fuera del ambiente controlado del
laboratorio favorece su contaminación, 4) es necesario raspar varias veces la úlcera y a
veces no es posible debido a la delgadez de la córnea, y por último, 5) una vez realizada
la siembra hay que enviar las placas con rapidez al laboratorio para su incubación en
una atmósfera apropiada. Se ha analizado la alternativa de utilizar medios de transporte
en lugar de la inoculación directa, obteniéndose un rendimiento similar para la
recuperación de bacterias y hongos, simulando intervalos de 3-4 horas e incluso 24
horas tras la toma de la muestra. Se puede utilizar como transporte un hisopo en medio
Amies o caldo peptonado como el BHI. El medio líquido presenta la ventaja frente a la
utilización de hisopos que permite una homogeneización una vez que llega al
laboratorio, por lo que se puede realizar un único raspado. A partir del caldo, una vez
homogeneizado, se pueden realizar las extensiones para el examen microscópico, el
subcultivo en varios medios sólidos y, además, el mismo caldo sirve como medio de
enriquecimiento[ CITATION Sec08 \l 3082 ].

HUMOR VÍTREO

Las muestras de aspirado vítreo o lavados tras vitrectomía deben remitirse de forma
urgente al laboratorio. Una alternativa para el transporte y posterior cultivo del aspirado
vítreo es la inoculación, directa tras la obtención, en viales de hemocultivo pediátricos,
ya que se trata de muestras con un escaso volumen[ CITATION Sec08 \l 3082 ].

MUESTRAS DEL APARATO LAGRIMAL

Tanto los aspirados como las muestras resultantes de una extirpación quirúrgica deben
remitirse en contenedores con atmósfera reducida para detección de microorganismos
anaerobios[ CITATION Sec08 \l 3082 ].

BIOPSIAS Y LENTES

Deben remitirse al laboratorio de forma urgente en contenedor estéril con una pequeña
cantidad de solución salina[ CITATION Sec08 \l 3082 ].

-Muestras Dentales

Generalidades

El estudio de la microbiota bucal y de las enfermedades infecciosas de la cavidad bucal


involucra una serie de etapas que van desde la toma y transporte de la muestra hasta el
aislamiento e identificación de los agentes etiológicos, por procedimientos especiales de
cultivo y pruebas diferenciales de las especies aisladas[ CITATION Gui20 \l 3082 ].

Técnicas de Obtención

En primer lugar, la muestra clínica a ser tomada representa una porción o cantidad de
material biológico que es sometida a pruebas para determinar la presencia o ausencia de
microorganismos específicos. Es importante destacar que para la toma de una muestra
deben tenerse en cuenta los siguientes requisitos: ser seleccionada del área afectada, con
el fin de aislar e identificar los agentes etiológicos del proceso infeccioso; obtener una
cantidad adecuada, para realizar las diferentes pruebas diagnósticas; evitar arrastrar
flora microbiana que habita normalmente en piel y mucosas; y debe ser tomada antes de
administrar antimicrobianos al paciente. Después de realizar la toma de la muestra, esta
debe ser rotulada con el nombre del paciente, número historia clínica, fecha, y origen de
la misma. Esta información debe corresponder con los datos de la orden de solicitud del
estudio microbiológico[ CITATION Gui20 \l 3082 ].

 Placa subgingival y supragingival: Tras aislar la zona de donde se obtendrá la


muestra con rollos de algodón. Se obtiene la muestra con curetas y se seca con
algodón estéril[ CITATION Gar931 \l 3082 ].

Ilustración 11. Placa subgingival y supragingival. Recuperado de: https://ipnperio1.wordpress.com/sistema-


ecologico-bucal/placa-supragingival-y-subgingival/

 Canal dental: Se desinfecta y se introducen en el canal 1 ó 2 puntas de papel


hasta el fondo del canal[ CITATION Gar931 \l 3082 ].

Ilustración 12. Canal dental. Recuperado de: https://dentistaentuciudad.com/blog/que-es-un-tratamiento-de-


canales/

 Bolsa periodontal: Tras limpiar la placa supragingival se toma la muestra con


cureta estéril introduciéndola lo más vertical posible hasta el fondo de la bolsa
periodontal[ CITATION Gar931 \l 3082 ].
Ilustración 13. Bolsa periodontal. Recuperado de:
http://www.policlinicarampa.sld.cu/docencia/supercursos/periodoncia_hc_aps/8e.html

 Abscesos: Tras desinfección, puncionar el contenido del mismo[ CITATION


Gar931 \l 3082 ].

Ilustración 14. Abscesos. Recuperado de: https://www.propdental.es/blog/odontologia/remedios-caseros-para-los-


abscesos-dentales/

Transporte

Finalmente, la muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio, pues existen


factores que pueden modificar la composición inicial, tales como: temperatura,
humedad y algunas sustancias que producen los microorganismos que pueden inhibir el
crecimiento de otros. Si se sospecha de la existencia de microorganismos aerobios o
anaerobios en el proceso infeccioso, las muestras pueden ser transportadas al laboratorio
por diversos procedimientos. Sobre este punto es importante recordar que la mayor
parte de los microorganismos asociados a las enfermedades de la cavidad bucal son
anaerobios facultativos o anaerobios estrictos, esta premisa deberá tenerse en cuenta a la
hora de efectuar el transporte de muestras al laboratorio, ya que deben tomarse en
cuenta ciertas precauciones, como por ejemplo, el uso de medios de transporte
especiales que permitan la viabilidad de los microorganismos hasta ser sembrados en los
medios de cultivo selectivos[ CITATION Gui20 \l 3082 ].

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