Pilar Obregon - UCC

23. Práctico - Métodos coproparasitológicos cualitativos

COPROPARASITOLÓGICO - EXÁMENES CUALITATIVOS
Toma de muestra
Ya fuimos viendo esto en el práctico, pero complementamos con videos y fijamos conocimientos.
● Perros: a diferencia de los animales de producción, la toma de muestra es al acecho, apenas el
animal defeque para evitar que se contamine (se recolecta del suelo tratando de que esté lo más
limpia y temprana posible, pasadas unas horas se pueden contaminar con larvas de dípteros).
● Gatos: desde la bandeja sanitaria, con las mismas indicaciones.
● Se la coloca en un recipiente de plástico o vidrio con formol al 10% (mantiene las estructuras,
evita la formación de hongos y disminuye el riesgo de zoonosis) ó refrigeradas (4°C). También se
podrían usar bolsas de nylon para el procesamiento veloz, pero no es lo ideal.
○ No hace falta que sean frascos estériles.
○ La conservación es elemental para lograr un buen diagnóstico.
○ Puede estar en heladera entre 48 a 72 hs.
■ Con la refrigeración algunas estructuras se van a modificar y otras no, por
ejemplo: los huevos de Ancylostomas van a eclosionar en larvas y no nos dan una
gran ventana de tiempo; los huevos de Toxocara tardan 30 días en larvar asique
podemos procesarlas más tranquilos.
■ Igualmente, el procesamiento siempre debe ser rápido.
■ Las muestras refrigeradas tienen el problema de que algunos parásitos son
eliminados e inmediatamente infectivos y zoonóticos, hay que tener mucho
cuidado (quistes de Giardia, oncoshporas de Echinococcus granulosus) y además
pueden contener bacterias también → es decir, son muestras biológicamente
activas y hay que procesarlas con el recaudo que corresponde.
● Para algunos parásitos de eliminación discontinua se recomienda realizar muestras seriadas;
tomar un poquito de materia fecal de todos los días durante 3 a 5 días.
○ El problema de la toma de materia fecal fresca es que generalmente la toma es de un
solo dia, y como sabemos que hay parásitos de excreción discontinua y por lo tanto,
puede que sea negativa
○ Lo que se suele hacer para poder tomar muestras seriadas es agregar una solución
formolada en el frasco reservorio para conservarla por más tiempo, manteniendo las
estructuras parasitarias por un período largo (no eterno, porque, por ejemplo, Toxocara y
Ancylostoma igual pueden larvar con el tiempo) pero ayudan y nos dan seguridad por la
desactivación de las estructuras parasitarias biológicas, disminuyendo el componente
zoonótico. Por lo tanto, se le da el frasco al propietario con la indicación de ir colocando
toda la materia fecal fresca que vea, sin que sobrepase el borde del formol.
○ Todas las muestras tomadas, siempre, deben estar identificadas con:
■ Nombre ■ Sexo
■ Edad ■ Propietario
■ Especie ■ Teléfono
■ Raza ■ Mail

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Macroscópicamente: Es lo primero que se debe hacer, podemos observar aspecto, color, presencia de
moco, sangre, etc. y estructuras parasitarias como:
○ Proglótides de cestodes → Dipylidium, pudiendo hacer un diagnóstico, ya que son muy
identificables (semillas de melón o pepino, con ese color y consistencia; o de arroz cuando están
secas. + los poros bilaterales característicos).
○ Muchas veces, si están recién eliminadas, las podemos observar muy móviles, reptando
sobre la materia fecal y desplazándose a los límites de la misma, liberando las capsulas
ovíjeras u onsochpras.
○ Adultos de nematodos (Ascaris → con eliminación espontánea, es bastante frecuente).
○ Toxocara en cachorros de 60 a 65 días.

Toxocara - Proglótides de Dipylidium - Materia fecal infectada por Trichuris

A veces no vemos parásitos, pero podemos ver una materia fecal que nos indica algo: cuando son pequeñas,
frecuentes y mucosas indica que la lesión está en intestino grueso; si son grandes y poco frecuentes, con melena,
son de ID.

Microscópicamente: examen directo y las técnicas de flotación o centrifugación-flotación.

Métodos coproparasitológicos
Examen directo:
➢ Técnica muy poco sensible (es la menos sensible de todas).
➢ La podemos hacer en la camilla del consultorio con el restante de materia fecal del termómetro
al tomar la tº o tomar la muestra luego, pero si o si con materia de no más de 30 minutos,
porque el objetivo de este examen es observar estructuras móviles (larvas de nematodes,
trofozoítos de protozoos), sin que se enfríe o se contamine.
➢ Colocamos una porción de materia fecal fresca diluida en una gota de solución fisiológica y
observamos entre porta y cubre.

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○ No se usa agua porque puede contener cloro, el cual mataría a los agentes.
➢ Podemos observar por ejemplo trofozoitos de Giardia o Trichomonas; o también podemos buscar
larvas de Strongyloides stercolaris.
○ Para el caso de los S.stercoralis es imprescindible este método porque al ser larvíparas,
si no las vemos con el examen directo, se
pierden.
○ En el caso de encontrar trofozoitos, podemos
hacer identificación por el movimiento, pero
luego debemos hacer una tinción (T15) y
nuevo extendido, para contar el número de
flagelos (3 flagelos anteriores =
Tritrichomona / 5 flagelos anteriores =
Pentatrichomona / 8 flagelos + 2 núcleos +
axostilo = Giardia).
■ Se debe colocar una gota de lugol que mata las larvas y las deja inmóviles, para
poder hacer la clasificación morfológica.
■ Esto es en animales gastroentéricos con eliminaciones masivas, no se ven así en
materias fecales normales (porque sino suelen verse quistes de Giardia).
Es importante recordar que al ser un método poco sensible y al estar haciendo un muestreo escaso de
materia fecal, no es raro que la muestra de negativa y eso no significa que no haya parásitos.

Frotis teñidos:
➔ Para observar características morfológicas particulares de cada parásito.
➔ Tinciones:
◆ T 15 modificada para protozoarios (Giardia).
● Es la que más se suele usar porque es bastante útil y sencilla.
● Es modificada por el tiempo de sumersión para teñir más los flagelos, pero con la
normal podemos verla también.

◆ Lugol para larvas de nematodes.

◆ Ziel Nielsen modificada para Cryptosporidium.
Videos al minuto 19 y 28 del práctico Nº 2.

Técnicas cualitativas: Son aquellas que revelan solamente la presencia de elementos parasitarios. Se
caracterizan por ser rápidas de ejecutar y sensibles.
Son las que usamos en pequeños animales generalmente, porque justamente nos interesa saber la
presencia o ausencia de los agentes, sobretodo en aquellas que tienen potencial zoonótico.
Las más utilizadas son la técnica de flotación, la de centrifugación-flotación y el método de Barmann.
Las primeras técnicas utilizan la diferencia de densidades entre las soluciones sobresaturadas y las

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estructuras parasitarias, las cuales flotaran en las primeras porciones del tubo de ensayo. La última es
una técnica de sedimentación y recuperación de larvas.

Soluciones sobresaturadas:
Hay muchas más soluciones, estas son las más comunes y usadas, pero hay un montón
★ Solución de NaCl: 400 grs. de sal en 1 litro de agua. (densidad: 1,18)
○ La ventaja es que la tenemos todos en casa, es muy fácil de conseguir y realizar.
○ Puede ser fina o parrillera.
○ La densidad depende de la saturación de la solución, va de 1,18 a 1,20.
★ Solución de Nitrato de Na: 400grs. de sal en 1 litro de agua. (densidad: 1,18)
○ Sobresaturada puede llegar a 1,25 de densidad.
○ Lo importante es medir la densidad con el densímetro.
○ Ventajas: Flotan la mayoría de los huevos de parásitos más prevalentes.
○ Desventajas: Distorsiona los quistes de Giardia; no flotan bien los huevos de cestodes y
trematodes. Cristaliza rápidamente.

★ Solución de azúcar: hay varios tipos y de ellos depende el tipo de preparación, las densidades
varían entre 1,27 y 1,33. Por ejemplo, hay una de ellas que se hace con 550 gr de azúcar en 1 lt
de agua, con una densidad de 1,30.
○ Se le puede y debe colocar formol para evitar la formación de hongos o bacterias
productoras de gas (2 a 3 ml por solución, o sea entre 3 y 6 ml aprox).
○ Otra solución de este tipo es la: Solución de Benbrook:
■ Se prepara 454 g azúcar granulada + 355 ml agua + 6 ml formol (GS 1.27).
■ Ventaja: Flotan la mayoría de los huevos de parásitos más prevalentes, entre
ellos Trichuris spp. y huevos de cestodos. Causa menos daños y no cristaliza en
las estructuras lo cual da más tiempo de observación.
■ Desventajas: Deforma quistes de Giardia duodenalis por la gran densidad. Es una
solución de alta viscosidad (no usar en flotación sola, sino para centrifugación
flotación), debemos taparla para no atraer hormigas o insectos.

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★ Solución de sulfato de zinc:

○ Se usan para todo pero es muy específica para el diagnóstico de Giardia.
○ Se prepara al 33%, o sea, 330 g ZnSO4 + 1,000 ml agua tibia. (SG 1.18–1.25)
○ Densidad 1,22.
○ Ventajas: Flotan la mayoría de los huevos de parásitos más prevalentes aunque limita
con los de Taenia; es la preferida para diagnóstico Giardia y larvas pulmonares de poco
movimiento (Filaroides), a las cuales deforma muy poco.
○ Desventaja: no flotan bien huevos de cestodes y trematodes, no es tan buena para
Trichuris spp, o Spirocerca lupi.

Técnica de flotación simple:

1. Mezclar 3–5 g ( 1 cucharada de té) de heces con una pequeña cantidad 15 a 20 ml (relación 1 en
5 partes, aproximadamente) de solución sobresaturada de flotación en un vaso de precipitado
plástico de 100 ml.
2. Filtrar la mezcla de materia fecal con solución sobresaturada con un colador de té o doble capa
de gaza.
a. Para que pasen únicamente las estructuras pequeñas, que es donde están las
estructuras parasitarias.
3. Colocar la solución filtrada en tubo de 15 ml, al cargarlo realizar un menisco convexo en su
superficie, colocar cubreobjeto en la superficie del menisco convexo realizado en la boca del
tubo.
4. Esperar al menos 10 minutos (máximo 15 minutos) para permitir la flotación de las estructuras,
retirar el cubreobjeto colocarlo sobre un portaobjeto (deslizándolo), y llevar al microscopio para
observación.
a. La observación se hace de manera ordenada, en guarda griega, para no perdernos
ninguna porción del cubre.

De las soluciones las más utilizadas son el nitrato

de sodio y el cloruro de sodio, igualmente el sulfato
de zinc también podría utilizarse. Las soluciones de
azúcar no se suelen usar tanto porque son muy
densas y tardan mucho en hacer flotar las
estructuras livianas y en sedimentar las estructuras
gruesas, no es muy útil pero igual es una opción.

Video minuto 47:35 → cuando completa con

la pipeta es porque el líquido de solución +
materia fecal no le alcanzó, así que utiliza la
solución sobresaturada que usó primeramente
para terminar de completar el tubo y formar el
menisco.

Recordemos que usamos la solución según la densidad de los huevos o del parásito que queramos
observar. Como la densidad del agua es 1, mientras mayor sea la densidad de la solución, mejor será
para la flotación de los diferentes parásitos y estructuras. La especificidad del método está dada por

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esta diferencia a favor de la solución.

Rango de densidad específica de los huevos de nematodes de caninos y felinos:

○ Huevos Ancylostoma de 1,06.
○ Huevos Toxocara canis d 1,09 - T.cati d
1.10; es un poco más densa, pero si uso una
solución de 1,25 flotan.
○ Huevos Trichuris de 1,15 si uso una
solución de sal común y no tiene la misma
densidad, si no está bien preparada no van a
flotar dando un falso negativo.
○ Huevos de Taenia spp: d 1.23 Si uso
una de sal común bien preparada no va a flotar
porque es más pesado.

Técnica de centrifugación-flotación:
1. Mezclar 3–5 g ( 1 cucharada de té) de heces con una pequeña cantidad 15 a 20 ml (relación 1 en
5 partes, aproximadamente) de solución sobresaturada de flotación en un vaso de precipitado
plástico de 100 ml.
2. Filtrar la mezcla de materia fecal con solución sobresaturada con un colador de té o doble capa
de gaza.
3. Colocar la solución filtrada en tubo de 15 ml.
a. Si se utiliza centrífuga de cabezal móvil bien calibrada, al cargar el tubo realizar un
menisco convexo en su superficie, colocar cubreobjeto en la superficie del menisco
convexo realizado en la boca del tubo. Centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos.
b. Si se utiliza centrífuga de cabezal fijo, cargar el tubo hasta 1⁄2 cm del borde de la boca del
tubo. Centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos, se retira de la centrífuga se coloca en
gradilla se completa con solución sobresaturada utilizada realizando un menisco convexo
y se coloca el cubreobjeto.
4. Esperar al menos 10 minutos (máximo 15 minutos) para permitir la flotación de las estructuras,
retirar el cubreobjetos y colocarlo sobre un portaobjeto (deslizándolo), y llevar al microscopio
para observación.

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Las soluciones más utilizadas para este métodos son: sulfato de zinc y azúcar. Es más sensible que la
flotación simple, salvo en el caso de los Ancylostoma.
Lo ideal es duplicar las muestras por las dudas de que falle, se rompa el tubo o el cubre, etc. sabiendo
que siempre puede ocurrir que recuperemos más estructuras de una que de otra. Duplicar las muestras:
el primer cubre recupera el 98% de huevos y el segundo el 2% restante. Y siempre tener balanceada la
centrífuga.
Video → 1 hr 3 min del práctico nº 2.

Diagnóstico:
Toxocara canis:
● Identificación de huevos por flotación de materia fecal.
● Los huevos son marrones con una cubierta proteica gruesa, morulada o
rugosa.
● Miden 90 x 75 um. Son esféricos y tienen un cigoto en el interior apenas
son excretadas, el mismo cubre toda la superficie del interior.
● Los vamos a encontrar en todos los cachorros que no han sido
desparasitados, a partir de los 30 días, por las formas de transmisión.

Espora: es parecida a un huevo de toxocara pero poseen un tronquito que los mantiene
adheridos al esporangio (según el tipo de espora).

Toxascaris leonina:
● Los huevos son ovales y más claros.
● El cigoto no llena la cavidad.
● La cubierta externa es más lisa que la anterior pero sigue teniendo cierta
rugosidad.
● Como larvan más rápido que los de Toxocara, a veces podemos ver un
pequeño proceso divisorio del cigoto.
● Los encontramos en animales de más o menos 4 meses porque no migran, ni
se transmiten verticalmente.
● Miden de 90 a 100 um.

Dentro de las estructuras

parasitarias más frecuentes en
caninos también encontramos a los
ooquistes de Isospora, que miden
aproximadamente 25 um.

Acá tenemos una imagen

comparativa entre las anteriores.
Caca escala corresponde a 25 um.

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Ancylostoma caninum:
● Flotación con solución sobresaturada de ClNa - Nitrato
de Na - SO4Zn - Azúcar.
○ Son muy livianos (1,06).
● En la materia fecal se eliminan huevos que son ovoideos,
con cubierta fina y con un embrión morulado adentro.
● Ancylostoma y Trichuris, no todo lo que parece
Ancylostoma es Ancylostoma, hay otro parásito que
elimina huevos operculados, pero si se fijan ese está mal
hecho, el opérculo está descentrado, que es característico de ese parásito que lo veremos más
adelante (sagitaria).
● Miden aprox 70 um.

Diagnóstico de
ooquistes por
flotación con solución
sobresaturada de
ClNa y centrifugación
–flotación con azúcar
o SO4Zn.

Trichuris vulpis:
● Es muy común verlo porque tiene alta prevalencia.
● Miden 75 um en su eje mayor.
● El cigoto ocupa todo el interior del huevo.
● Flotación con solución sobresaturada de ClNa.
● Se deben tomar muestras seriadas en varios días.
● Los huevos son ovoides, amarillos o marrones con un opérculo.

Diferencias entre huevos de tricuroides hallados en materia fecal canina 400x:

Los huevos de
Trichuris son más
oscuros, bronce,
tienen los
opérculos bien
simétricos y el
cigoto ocupa todo
el interior. Los de Eucoleus boehmi son más claros y no están totalmente ocupados por el cigoto.

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A. Además, en el huevo de Trichuris (1000X) se

pueden observar unos engrosamientos en los opérculos,
como anillos, que son bien característicos.
B. En Eucoleus no se observan.

Eucoleus boehmi: la cubierta de huevos se encuentra tapizada

de pequeños hoyos.

Eucoleus aerophila: Cubierta externa como una malla reticular,

de anastomosis de anillos y puentes.

Características diferenciales
de huevos de Trichuris vulpis;
Eucoleus (Capillaria) aerophila
y Eucoleus (Capillaria)
boehmi.

Quistes de Giardia:
● Los quistes de Giardia miden 15 micras, son muy chicos.
● Por técnica de centrifugación-flotación con sulfato de zinc.
● Antes de ponerlos en el porta, le colocamos al mismo una gota de lugol, luego colocamos la
muestra y así logramos teñirnos y notar mejor su presencia.
○ También podemos verlos sin teñir.
● Tienen dos trofozoitos dentro con los núcleos como ojitos.

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Método de Baermann - Recuperación de larvas:

● La materia fecal debe ser fresca.
● Materiales necesarios muy básicos.
● Se debe usar agua destilada.
● Tiempo de la técnica al menos 8 hs.
Video 1 hs 40 min.

Se utiliza agua destilada y se deja reposar entre 7

a 24 hs.
Se recuperan 5 a 10 ml del sedimento y se observa
por presencia de larvas

Otro formato para realizar el método de Barmann.

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