LINEA LIQUIDA

Glicemia
C enzimática AA
Para la determinación de glucosa en suero, plasma,
orina o líquido cefalorraquídeo

SIGNIFICACION CLINICA INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

La patología más común relacionada con el metabolismo de REACTIVOS
los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. El diagnóstico Durante el uso, el Reactivo A puede colorearse ligeramente
precoz y el control de los pacientes diabéticos, tienen por no afectando su funcionamiento siempre que se procese
objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones resultantes un Blanco con cada lote de determinaciones y un Standard
de la hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado. periódicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco
Dado que existen múltiples factores causales de hiper o sean superiores a 0,160 D.O.
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición
fisiológica y/o la patología presente en el paciente. MUESTRA
Suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo (LCR)
FUNDAMENTOS DEL METODO a) Recolección:
El esquema de reacción es el siguiente: - Suero o plasma: se debe obtener suero de la manera usual
GOD o plasma recolectado con anticoagulantes comunes.
glucosa + O2 + H2O ácido glucónico + H2O2 - Orina: si se trata de una muestra aislada, utilizar prefe-
rentemente orina fresca. En caso de no poder realizar
POD
el ensayo de forma inmediata, conservar la muestra en
2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato quinonimina roja
refrigerador (2-10oC). Puede realizarse el ensayo en orina
de 24 horas. En este caso, recolectar la muestra en un
REACTIVOS PROVISTOS
recipiente oscuro conteniendo 5 ml de ácido acético glacial
S. Standard*: solución de glucosa 100 mg/dl (1 g/l).
y conservarlo en hielo.
A. Reactivo A: solución conteniendo glucosa oxidasa
- LCR: en caso de utilizar LCR, el ensayo debe realizarse en
(GOD), peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF), buffer
forma inmediata a la obtención de la muestra.
fosfatos pH 7,0 y 4-hidroxibenzoato en las siguientes con-
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
centraciones:
plasma, se recomienda el uso de Anticoagulante G (EDTA/
GOD (microbiana)................................................. ≥ 10 kU/l fluoruro) para su obtención.
POD (rábano).......................................................... ≥ 1 kU/l c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
4-AF..................................................................... 0,5 mmol/l interferencias por: bilirrubina hasta 10 mg/dl, triglicéridos
Fosfatos................................................. 100 mmol/l, pH 7,0 hasta 500 mg/dl y hemoglobina hasta 350 mg/dl. El ácido
Hidroxibenzoato................................................... 12 mmol/l ascórbico interfiere en la determinación en orina en cualquier
concentración.
REACTIVOS NO PROVISTOS Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Calibrador A plus de Wiener lab. drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
INSTRUCCIONES PARA SU USO destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis)
Reactivos Provistos: listos para usar. por hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a
la que se conserva la sangre, siendo máxima a 37oC. Este
PRECAUCIONES proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales extracción. El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo
de trabajo en el laboratorio de química clínica. para su con­servación. De esta forma la glucosa es estable
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 4 horas a tem­peratura ambiente o 24 horas refrigerada. En
acuerdo a la normativa local vigente. caso de no poder procesarse la muestra de la forma indi-
cada, deberá adicionarse un conservador en el momento
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE de la extracción.
ALMACENAMIENTO El LCR puede contaminarse con bacterias y otras células
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) por lo que la determinación debe realizarse de inmediato.
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man- En caso de no poder procesarse de esta manera, centrifugar
tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. el LCR y conservarlo 3 días a 2-10oC o 5 horas a 20-25oC.

* No provisto en todas las presentaciones 864122524 / 01 p. 1/12

MATERIAL REQUERIDO (no provisto) En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. de referencia:
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Suero o plasma
-Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
Adultos: 74 - 106 mg/dl (4,11 - 5,89 mmol/l)
- Baño de agua a 37oC.
Niños: 60 - 100 mg/dl (3,33 - 5,55 mmol/l)
- Reloj o timer.
Neonatos: 1 día: 40 - 60 mg/dl (2,22 - 3,33 mmol/l)
mayor a 1 día: 50 - 80 mg/dl (2,78 - 4,44 mmol/l)
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en Orina aislada fresca
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). 1 - 15 mg/dl (0,06 - 0,83 mmol/l)
- Temperatura de reacción: 37oC Orina de 24 horas
- Tiempo de reacción: 5 minutos < 0,5 g/24 hs (< 2,78 mmol/24 hs)
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo A: 1 ml LCR
- Volumen final de reacción: 1,01 ml Niños: 60 - 80 mg/dl (3,33 - 4,44 mmol/l)
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo A pueden Adultos: 40 - 70 mg/dl (2,22 - 3,89 mmol/l)
variarse proporcionalmente (Ej.: 20 ul Muestra + 2 ml Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
Reactivo A). valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad hábitos
alimenticios y otros factores.

PROCEDIMIENTO CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l)
(Desconocido) colocar: Glucosa (g/24 horas) x 55,5 = Glucosa (mmol/24 hs)
B S D
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Standard - 10 ul -
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Muestra - - 10 ul
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador automático
Incubar 5 minutos en baño de agua a 37 C o 25 minutos
o
Express Plus(*).
a 15-25oC. Luego leer en espectrofotómetro a 505 nm o a) Reproducibilidad: procesando 20 replicados de una
en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando misma muestra en 5 días diferentes, se obtuvo:
el aparato a cero con el blanco.
Precisión intraensayo
Nivel D.S. C.V.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL 90,7 mg/dl ± 1,26 mg/dl 1,39 %
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que 278 mg/dl ± 3,08 mg/dl 1,11 %
la absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
Precisión interensayo
CALCULO DE LOS RESULTADOS Nivel D.S. C.V.
100 mg/dl 90,1 mg/dl ± 1,73 mg/dl 1,92 %
glucosa (mg/dl) = D x f f= 299 mg/dl ± 4,86 mg/dl 1,62 %
S
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
METODO DE CONTROL DE CALIDAD glucosa a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad entre 99 y 101%.
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 mg/dl. Para
de glucosa, con cada determinación. valores superiores, diluir la muestra con solución salina
y repetir el ensayo, multiplicando el resultado final por el
VALORES DE REFERENCIA factor de dilución.
Se analizaron con Glicemia enzimática AA líquida, 120 d) Correlación: se determinó el valor de glucosa en 154 mues-
muestras de individuos en ayunas, de ambos sexos, con tras de suero en un rango comprendido entre 23 y 503 mg/dl,
edades comprendidas entre 20 y 45 años, provenientes de con Glicemia enzimática AA líquida de Wiener lab. y un kit
la ciudad de Rosario (Argentina), sin síntomas de diabetes comercial basado en el mismo principio, obteniéndose el
o cualquier otra enfermedad aparente. Se encontró que el siguiente coeficiente de correlación:
95% de los resultados cubrieron el siguiente rango: r = 0,9997; pendiente b =1, 0257; intersección a = 1,9485
e) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,54 mg/dl
Suero o plasma: 70 a 110 mg/dl y la sensibilidad analítica es de 4,2 mg/dl.

(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 864122524 / 01 p. 2/12
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS SÍMBOLOS
Para las instrucciones de programación debe consultarse el Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Manual del Usuario del Analizador en uso. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Para la calibración puede emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador. Este producto cumple con los requerimientos previstos

PRESENTACION
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
- 1 x 250 ml c/Standard (Cód. 1400071).
- 4 x 250 ml c/Standard (Cód. 1400060).
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- 6 x 60 ml (Cód. 1009313).
- 6 x 60 ml (Cód. 1009617).
V Uso diagnóstico "in vitro"

- 6 x 60 ml (Cód. 1009925). Contenido suficiente para <n> ensayos

- 6 x 60 ml (Cód. 1008138)*.
X
- 12 x 50 ml (Cód. 1009260). H Fecha de caducidad
- 4 x 40 ml (Cód. 1009803).

BIBLIOGRAFIA
l Límite de temperatura (conservar a)

- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and  No congelar

Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
1288 (1974). F Riesgo biológico
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
Volumen después de la reconstitución
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Cont. Contenido
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Ziegenhorn, J.; Newman, U.; Hegen, A. - J. Clin. Chem. g Número de lote
Clin. Biochem. 15/1:13 (1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963). Elaborado por:
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
M
W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of America, Nocivo
2001.
Corrosivo / Cáustico

Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

*
Marcado CE pendiente 864122524 / 01 p. 3/12
 LINHA LÍQUIDA

Glicemia
C enzimática AA
Para a determinação de glicose em soro, plasma,
urina ou líquido cefalorraquidiano

SIGNIFICADO CLÍNICO INDÍCIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORAÇÃO

A patologia mais frequente relacionada com o metabolismo DOS REAGENTES
dos hidratos de carbono é a diabetes mellitus. O diagnós- Durante o uso, o Reagente A pode desenvolver uma leve
tico precoce e o controle dos pacientes diabéticos, têm por cor, o que não altera seu funcionamento desde que seja
objeto evitar a acetoacidose e as complicações resultantes processado um Branco em cada lote de determinação e um
da hiperglicemia, pelo tratamento adequado. Padrão periodicamente. Descartar os reagentes quando as
Posto que existem muitos fatores casuais de hiper ou hipo- leituras do Branco estejam acima de 0,160 D.O.
glicemia, devem-se considerar em cada caso a condição
fisiológica e a patologia do paciente. AMOSTRA
Soro, plasma, urina ou líquido cefalorraquidiano (LCR)
FUNDAMENTO DO MÉTODO a) Coleta:
O esquema da reação é o seguinte: - Soro ou plasma: coletar soro da maneira habitual ou plasma
GOD obtido com anticoagulantes usuais.
glicose + O2 + H2O ácido glucônico + H2O2 - Urina: para uma amostra isolada, utilizar preferivelmente
POD urina recém coletada. Caso de não seja realizado o
2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato coloração vermelha ensaio na hora, conservar a amostra sob refrigeração
(2-10ºC). O ensaio pode ser realizado em urina de 24
horas. Neste caso, coletar a amostra em um recipiente
REAGENTES FORNECIDOS
escuro que contenha 5 ml de ácido acético glacial e
S. Padrão*: solução de glicose 100 mg/dl (1 g/l).
conservá-lo em gelo.
A. Reagente A: solução contendo glicose oxidase (GOD),
- LCR: caso seja utilizado LCR, o ensaio deve ser realizado
peroxidase (POD), 4-aminofenazona (4-AF), tampão
imediatamente após a coleta da amostra.
fosfatos pH 7,0 e 4-hidroxibenzoato nas seguintes con-
b) Aditivos: se a amostra a utilizar for plasma, recomenda-
centrações:
se o uso de Anticoagulante G (EDTA/fluoreto), para sua
GOD (microbiana)................................................. ≥ 10 kU/l obtenção.
POD (rábano).......................................................... ≥ 1 kU/l c) Substâncias interferentes conhecidas: não se obser-
4-AF......................................................................0,5 mmo/l vam interferências por: bilirrubina até 10 mg/dl, triglicerídeos
Fosfatos................................................. 100 mmol/l, pH 7,0 até 500 mg/dl, nem hemoglobina até 350 mg/dl. O ácido
Hidroxibenzoato................................................... 12 mmol/l ascórbico interfere na determinação em urina em qualquer
concentração.
REAGENTES NÃO FORNECIDOS Referência bibliográfica de Young para efeitos de drogas
Calibrador A plus da Wiener lab. neste método.
d) Estabilidade e instruções de armazenamento: a
INSTRUÇÕES DE USO destruição enzimática da glicose sanguínea (glicólise) por
Reagentes Fornecidos: prontos para uso. hemácias e leucócitos é proporcional à temperatura na qual o
sangue é conservado, até o máximo de 37oC. Contudo, este
PRECAUÇÕES processo não se inibe em estado de congelamento, razão
Os reagentes são para uso diagnóstico "in vitro". pela qual deve-se centrifugar o sangue até 2 horas após
Utilizar os reagentes observando as precauções habituais sua extração. O sobrenadante límpido deve ser transferido a
de trabalho no laboratório de análises clínicas. outro tubo para sua conservação. Nestas condições a glicose
Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas é estável 4 horas a temperatura ambiente ou 24 horas sob
conforme à regulação local vigente. refrigeração (2-10oC). Caso de não ser possível processar
a amostra na forma indicada, deve ser acrescentado um
ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE conservante na hora da extração.
ARMAZENAMENTO O LCR pode ser contaminado com bactérias e outras células,
Reagentes Fornecidos: estáveis sob refrigeração (2-10oC) logo a determinação deve ser realizada de imediato.Caso
até a data do vencimento indicada na embalagem. Não não seja processado na forma indicada, centrifugar o LCR
manter a temperaturas elevadas por períodos prolongados. e conservá-lo por até 3 dias a 2-10oC ou 5 horas a 20-25oC.

* Não fornecido em todas as apresentacões 864122524 / 01 p. 4/12

MATERIAL NECESSÁRIO (não fornecido) A literatura (Tietz, N.W.) faz menção da seguinte faixa de
- Espectrofotômetro ou fotocolorímetro. referência:
- Micropipeta e pipetas para medir dos volumes indicados.
Soro ou plasma
- Tubo ou cubas espectrofotométricas de faces paralelas.
Adultos: 74 - 106 mg/dl
- Banho-maria 37oC.
Crianças: 60 - 100 mg/dl (3,33 - 5,55 mmol/l)
- Relógio ou timer.
Neonatos: 1 dia: 40 - 60 mg/dl (2,22 - 3,33 mmol/l)
> 1 dia: 50 - 80 mg/dl (2,78 - 4,44 mmol/l)
CONDIÇÕES DE REAÇÃO
- Comprimento de onda: 505 nm em espectrofotômetro ou Urina isolada recém coletada:
em foto­colo­rímetro com filtro verde (490-530 nm). 1 - 15 mg/dl (0,06 - 0,83 mmol/l)
- Temperatura de reação: 37oC Urina de 24 horas:
- Tempo de reação: 5 minutos < 0,5 g/24 horas (< 2,78 mmol/24 horas)
- Volume de amostra: 10 ul
- Volume de Reagente A: 1 ml LCR
- Volume final de reação: 1,01 ml Crianças: 60 - 80 mg/dl (3,33 - 4,44 mmol/l)
Os volumes de Amostra e Reagente A podem variar-se Adultos: 40 - 70 mg/dl (2,22 - 3,89 mmol/l)
proporcionalmente (Ex.: 20 ul Amostra + 2 ml Reagente É recomendável que cada laboratório estabeleça seus
A). próprios valores de referência, considerando sexo, idade,
hábitos alimentares e outros fatores.

PROCEDIMENTO CONVERSÃO DE UNIDADES AO SISTEMA SI

Em três tubos marcados B (Branco), P (Padrão) e D Glicose (mg/dl) x 0,0555 = Glicose (mmol/l)
(Desconhecido), colocar: Glicose (g/24 horas) x 55,5 = Glicose (mmol/24 horas)
B P D
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Padrão - 10 ul - Vide Substâncias interferentes conhecidas em AMOSTRA.
Amostra - - 10 ul
DESEMPENHO
Reagente A 1 ml 1 ml 1 ml
Os ensaios foram realizados no analisador automático Ex-
Colocar em banho-maria durante 5 minutos a 37oC ou 25 press Plus(*).
minutos a 15-25oC. Logo após ler no espectrofotômetro a a) Reprodutibilidade: processando 20 duplicatas da mesma
505 nm ou em fotocolorímetro com filtro verde (490-530 nm) amostra em 5 dias diferentes, obteve-se:
levando o aparelho a zero com o Branco.
Precisão intra-ensaio
Nível D.P. C.V.
ESTABILIDADE DA MISTURA DA REAÇÃO FINAL 90,7 mg/dl ± 1,26 mg/dl 1,39 %
A cor da reação final é estável 30 minutos. Ler a absorbância 278 mg/dl ± 3,08 mg/dl 1,11 %
durante este período.
Precisão inter-ensaio
CÁLCULO DOS RESULTADOS Nível D.P. C.V.
100 mg/dl 90,1 mg/dl ± 1,73 mg/dl 1,92 %
glicose (mg/dl) = D x f f= 299 mg/dl ± 4,86 mg/dl 1,62 %
P
b)  Recuperação: agregando quantidades conhecidas de
glicose a diferentes soros, obteve-se uma recuperação
MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE
entre 99 e 101%.
Processar 2 níveis de um material de controle de qualidade
c)  Linearidade: a reação é linear até 500 mg/dl. Em
(Standatrol S-E 2 niveles) com concentrações conhecidas
valores superiores, diluir a amostra com solução salina e
de glicose, com cada determinação.
repetir o ensaio, multiplicando o resultado final pelo fator
de diluição.
VALORES DE REFERÊNCIA
d) Correlação: determinou-se o valor de glicose em 154 amos-
Analisaram-se com Glicemia enzimática AA líquida, 120
tras de soro numa faixa compreendida entre 23 e 503 mg/dl,
amostras provenientes de indivíduos em jejum, pertencentes
com Glicemia enzimática AA líquida da Wiener lab. e um
a ambos sexos, com idades entre 20 e 45 anos, habitantes
kit comercial baseado no mesmo princípio, obtendo-se o
da cidade de Rosario (Argentina), sem sintomas de diabetes
seguinte coeficiente de correlação:
ou outras doenças. Encontrou-se que o 95% dos resultados
r = 0,9997; pendente b = 1,0257; interseção a = 1,9485
cobriram a seguinte faixa:
e) Sensibilidade: o mínimo limite de detecção é 0,54 mg/dl
Soro ou plasma: 70 - 110 mg/dl e a sensibilidade analítica é de 4,2 mg/dl.

(*)
Marca registrada da Ciba Corning Diagnostics 864122524 / 01 p. 5/12
PARÂMETROS PARA ANALISADORES AUTOMÁTICOS SÍMBOLOS
Para a programação consultar o manual de uso do analisador Os seguintes símbolos são utilizados nos kits de reagentes
a ser utilizado. para diagnóstico da Wiener lab.
Para a calibração, pode-se utilizar Calibrador A plus da
Wiener lab., conforme os requerimentos do analisador. Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europeia

APRESENTAÇÃO C 98/79 CE para dispositivos médicos de diagnóstico "in

vitro"
- 1 x 250 ml c/Padrão (Cód. 1400071).
- 4 x 250 ml c/Padrão (Cód. 1400060). P Representante autorizado na Comunidade Europeia
- 6 x 60 ml (Cód. 1009313).
- 6 x 60 ml (Cód. 1009617).
V Uso médico-diagnóstico "in vitro"

- 6 x 60 ml (Cód. 1009925). Conteúdo suficiente para <n> testes

- 6 x 60 ml (Cód. 1008138)*.
X
- 12 x 50 ml (Cód. 1009260). Data de validade
H
- 4 x 40 ml (Cód. 1009803).

REFERÊNCIAS
l Limite de temperatura (conservar a)

- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and  Não congelar

Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
1288 (1974). F Risco biológico
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969). Volume após a reconstituição
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Cont. Conteúdo
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Ziegenhorn, J.; Newman, U.; Hegen, A. - J. Clin. Chem. g Número de lote
Clin. Biochem. 15/1:13 (1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963). Elaborado por:
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Che-
M
mistry, W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of Nocivo
America, 2001.
Corrosivo / Caústico

Irritante

i Consultar as instruções de uso

Calibr. Calibrador

b Controle

b Controle Positivo

c Controle Negativo

h Número de catálogo

* Marcação CE pendente 864122524 / 01 p. 6/12

 LIQUID LINE

Glicemia
C enzimática AA
For glucose determination in serum, plasma, urine or
cerebrospinal fluid

SUMMARY INSTABILITY OR DETERIORATION OF REAGENTS

Diabetes mellitus is the pathology most commonly related to During its use, the Reagent A may develop a light pink col-
carbohydrates metabolism. Early diagnosis and the periodic oration which does not affect its performance as long as a
check of diabetic patients are aimed to prevent both ketoaci- Blank is processed for each determination lot and a Standard
dosis as well as complications of the symptoms coming from periodically. Discard when the Blank readings are higher
hyperglycemia, by means of a proper therapy. than 0.160 O.D.
Due to the existence of many causative factors of hypo- or
hyperglycemia, physiological conditions and specific patho- SAMPLE
logical features should be individually considered for each Serum, plasma,urine or cerebrospinal fluid (CSF)
patient. a) Collection:
- Serum or plasma: obtain serum in the usual way, by checking
PRINCIPLE the complete clot formation. If plasma is used, collect with
The reaction system is as follows: ordinary anticoagulants, centrifuging sample before testing.
GOD - Urine: if the urine specimen is a random sample, prefer-
Glucose + O2 + H2O Gluconic Acid + H2O2 ably use fresh urine. If the assay cannot be performed
immediately, store sample at 2-10oC. Urine testing may be
POD
performed within 24 hours. In such case, collect the urine in a
2 H2O2 + 4-AP + 4-Hydroxybenzoate red quinoneimine
dark container with 5 ml of glacial acetic acid and store in ice.
- CSF: if CSF is used, perform the assay immediately after
PROVIDED REAGENTS
sample collection.
S. Standard*: 100 mg/dl (1 g/l) glucose solution.
b) Additives: if plasma is used as sample, it is recommended
A. Reagent A: solution containing glucose oxidase (GOD),
to use Wiener lab.'s Anticoagulante G (EDTA/fluoride).
peroxidase (POD), 4-aminophenazone (4-AP), phosphates
c) Known interfering substances: no interferences are
buffer pH 7.0 and 4-hydroxybenzoate, in the following con-
observed from bilirubin up to 10 mg/dl, triglycerides up to
centrations:
500 mg/dl and hemoglobin up to 350 mg/dl. The ascorbic
GOD (microbial).....................................................≥ 10 KU/l acid interferes with any concentration of urine determination.
POD (horse-radish).................................................≥ 1 KU/l See Young, D.S. in References for effect of drugs on the
4-AP.......................................................................0.5 mmol present method.
Phosphate............................................... 100 mmol, pH 7.0 d) Stability and storage instructions: the enzymatic de-
Hydroxybenzoate...................................................12 mmol struction of blood glucose (glycolysis) by red blood cells and
leukocytes is proportional to the temperature at which blood
NON-PROVIDED REAGENTS is stored, reaching its maximum at 37oC. This process is
Wiener lab.'s Calibrador A plus. not inhibited by freezing, thus, blood should be centrifuged
within 2 hours after collection. The clear supernatant must
INSTRUCTIONS FOR USE be transferred to another tube for storage. In this manner,
Provided Reagents: ready to use. glucose is stable for 4 hours at room temperature or 24 hours
refrigerated.
WARNINGS When it is not possible to process the sample as indicated
Reagents are for “in vitro” diagnostic use. above, add a preservative to the blood when collecting.
Use the reagents according to the working procedures for The CSF may be contaminated with bacteria and other cells.
clinical laboratories. Thus, the test should be immediately performed. Otherwise,
The reagents and samples should be discarded according centrifuge the CSF and store for 3 days at 2-10oC or for 5
to the local regulations in force. hours at 20-25oC.

STABILITY AND STORAGE INSTRUCTIONS REQUIRED MATERIAL (non-provided)

Provided Reagents: stable in refrigerator (2-10oC) until the - Spectrophotometer or photocolorimeter.
expiration date shown on the box. Do not expose to high - Micropipettes and pipettes capable of measuring the stated
temperatures for long periods of time. volumes.

* Non-provided with all kit sizes 864122524 / 01 p. 7/12

- Tubes or spectrophotometric cuvettes. Newborns: 1 day old: 40-60 mg/dl (2.22-3.33 mmol/l)
- Water bath at 37oC. > 1 day old: 50-80 mg/dl (2.78-4.44 mmol/l)
- Watch or timer. Fresh random urine
1-15 mg/dl (0.06-0.83 mmol/l)
ASSAY CONDITIONS
- Wavelength: 505 nm in spectrophotometer or in photocol- 24-hour urine
orimeter with green filter (490-530 nm). < 0.5 g/24 hrs (< 2.78 mmol/24 hrs)
- Reaction temperature: 37oC CSF
- Reaction time: 5 minutes Children: 60-80 mg/dl (3.33-4.44 mmol/l)
- Sample volume: 10 ul Adults: 40-70 mg/dl (2.22-3.89 mmol/l)
- Reagent volume: 1 ml
- Final reaction volume: 1.01 ml It is recommended that each laboratory establishes its own
Sample and Reagent A volumes may be varied proportionally reference values for their own patients, considering age, sex,
(e.g. 20 ul Sample + 2 ml Reagent A). dietary habits and other factors.

SI SYSTEM UNITS CONVERSION

PROCEDURE Glucose (mg/dl) x 0.0555 = Glucose (mmol/l)
In three test tubes labeled B (Blank), S (Standard) and Glucose (g/24 hours) x 55.5 = Glucose (mmol/24 hrs)
U (Unknown) place:
PROCEDURE LIMITATIONS
B S U See Known interfering substances under SAMPLE.
Standard - 10 ul -
PERFORMANCE
Sample - - 10 ul
The assays were performed in an Express plus analyzer(*).
Reagent A 1 ml 1 ml 1 ml a) Reproducibility: testing 20 replicates from the same sam-
Incubate tubes for 5 minutes in water bath at 37oC or for 25 ple in 5 different days, the following results were obtained:
minutes at 15-25oC. Read in spectrophotometer at 505 nm or Intra-assay precision
in photocolorimeter with green filter at 490-530 nm, setting
Level S.D. C.V.
the instrument to zero O.D. with Blank.
90.7 mg/dl ±1.26 mg/dl 1.39 %
278 mg/dl ± 3.08 mg/dl 1.11 %
STABILITY OF FINAL REACTION Inter-assay precision
Final reaction color is stable for 30 minutes, thus absorbance Level S.D. C.V.
should be read within that period. 90.1 mg/dl ± 1.73 mg/dl 1.92 %
299 mg/dl ± 4.86 mg/dl 1.62 %
CALCULATIONS
100 mg/dl b) Recovery: adding known amounts of glucose to different
Glucose (mg/dl) = U x f f= sera, a recovery between 99 and 101% was obtained.
S c) Linearity: reaction is linear up to 500 mg/dl. For higher
values, dilute the sample with saline solution, repeat the test
QUALITY CONTROL METHOD and multiply final result by the dilution factor.
Each time the test is performed, analyze two levels of a qual- d) Correlation: glucose values of 154 serum specimens
ity control material (Standatrol S-E 2 niveles) with known covering a range from 23 mg/dl to 503 mg/dl were determined
glucose concentration. using the Wiener lab’s Glicemia enzimatica AA líquida kit
and a commercial kit based on same principle. The correla-
REFERENCE VALUES tion coefficient was:
In a study performed with Wiener lab.'s Glicemia enzimática r = 0.9997, slope b = 1.0257 and intercept a = 1.9485.
AA líquida among 120 fasting individuals from Rosario (Ar- e) Sensitivity studies: minimum detection limit is 0.54 mg/dl
gentina), from both sexes (between 20 and 45 years old), and analytical sensitivity is 4.2 mg/dl.
without presenting symptoms of diabetes or other diseases,
95% of results, cover this range: PARAMETERS FOR AUTOANALYZERS
For programming instructions check the user manual of the
Serum or plasma: 70 - 110 mg/dl
autoanalyzer in use.
In the literature (Tietz, N.W.) the following Reference Value For calibration can be use Wiener lab’s Calibrador A plus,
range is mentioned: following the autoanalyzer requirements.
Serum or plasma
Adults: 74-106 mg/dl (4.11-5.89 mmol/l) WIENER LAB PROVIDES
Children: 60-100 mg/dl (3.33-5.55 mmol/l) - 1 x 250 ml w/Standard (Cat. Nº 1400071).

864122524 / 01 p. 8/12 (*)

TM Ciba Corning Diagnostics
- 4 x 250 ml w/Standard (Cat. Nº 1400060). SYMBOLS
- 6 x 60 ml (Cat. Nº 1009313). The following symbols are used in the packaging for Wiener
- 6 x 60 ml (Cat. Nº 1009617). lab. diagnostic reagents kits.
- 6 x 60 ml (Cat. Nº 1009925).
- 6 x 60 ml (Cat. Nº 1008138)*. This product fulfills the requirements of the European
- 12 x 50 ml (Cat. Nº 1009260).
- 4 x 40 ml (Cat. Nº 1009803).
C Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic medical devices

REFERENCES
P Authorized representative in the European Community
- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and
Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
V "In vitro" diagnostic medical device

1288 (1974). X Contains sufficient for <n> tests

- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969). H Use by
- Young, D.S. et. al. - Clin. Chem. 21/5:304 D (1975).
- Ziegenhorn, J.; Newman, U.; Hegen, A. - J. Clin. Chem. l Temperature limitation (store at)
Clin. Biochem. 15/1:13 (1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963).  Do not freeze
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. F Biological risks
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Che-
Volume after reconstitution
mistry, W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of
America, 2001. Cont. Contents

g Batch code

M Manufactured by:

Harmful

Corrosive / Caustic

Irritant

i Consult instructions for use

Calibr. Calibrator

b Control

b Positive Control

c Negative Control

h Catalog number

* CE mark pending 864122524 / 01 p. 9/12

 LINIA PŁYNNA

Glicemia
Nr kat. 1400060 Nr kat. 1009803
C enzimática AA
Metoda enzymatyczna do oznaczania glukozy w surowicy
Nr kat. 1009260 Nr kat. 1400071 krwi, osoczu, moczu lub płynie mózgowo-rdzeniowym
Nr kat. 1009313 Nr kat. 1009925
Nr kat. 1009617 Nr kat. 1008138

WSTĘP Nie pozostawiać w wysokich temperaturach przez dłuższy

Patologia cukrzycy głównie odnosi się do metabolizmu czasu.
węglowodanów. Wczesna diagnoza i okresowe badania oraz
prawidłowe leczenie pacjentów z cukrzycą mają zapobiegać BRAK TRWAŁOŚCI I POGORSZENIE JAKOŚCI
zarówno kwasicy ketonowej jak i powikłaniom związanym z ODCZYNNIKÓW
hyperglikemią. Każdy pacjent powinien zostać zaopatrzony W trakcie użycia Odczynnik A może przybrać lekko różowe
indywidualnie ze względu na obecność wielu czynników zabarwienie, które nie wpływa na jakość testu tak długo jak
prowadzących do hyper- i hypoglikemii, w różnych stanach ślepa próba jest oznaczana dla każdej serii testu i okresowo
klinicznych o zróżnicowanych patomechanizmach. wobec próby wzorcowej. Nie należy stosować odczynnika
gdy odczyt ślepej próby przekracza 0,160 O.D.
ZASADA DZIAŁANIA
Układ reakcji jest następujący: MATERIAŁ BADANY
oksydaza Surowica krwi, osocze, mocz lub płyn mózgowo-rdzeniowy (PMR)
glukozowa a) Pobranie:
Glukoza + O2 + H2O kwas glukonowy + H2O2 - Pobrać surowicę krwi w klasyczny sposób lub osocze na
peroksydaza zwykły antykoagulant.
2 H2O2 + 4-AP + 4-Hydroksybenzoesan - Mocz: w przypadku dowolnej próbki moczu, najlepiej
czerwona chinonoimina wykonać badanie niezwłocznie po uzyskaniu próbki.
W przypadku nie możliwości wykonania oznaczenia
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI natychmiast, przechować próbki w lodówce (2-10oC).
S. Próba wzorcowa*: 100 mg/dl (1 g/l) roztwór glukozy. Badana może być również 24 godzinna zbiórka moczu.
A. Odczynnik A: roztwór zawierający oksydazę glukozową W tym przypadku, zebrać próbkę do ciemnego pojem-
(GOD), peroksydazę (POD), 4-aminofenazon (4-AP), nika zawierającego 5 ml kwasu octowego lodowatego i
bufor fosforanowy pH 7,0 oraz 4-hydroksybenzoesan, w przechowywać w lodzie.
następujących stężeniach: - PMR: W przypadku badania PMR, oznaczenie powinien
być wykonany niezwłocznie po uzyskaniu próbki.
GOD (mikrobiologiczna)........................................≥ 10 KU/l b) Substancje dodatkowe: jeśli materiałem badanym jest
POD (chrzanowa)....................................................≥ 1 KU/l osocze zaleca się zastosowanie Anticoagulante G (EDTA/
4-AP.......................................................................0,5 mmol fluoride) Wiener lab.
Bufor fosforanowy................................... 100 mmol, pH 7,0 c) Znane interakcje: żadne interakcje nie były obserwowane
Hydroksybenzoesan...............................................12 mmol z bilirubiną do 10 mg/dl, trójglicerydami do 500 mg/dl oraz
hemoglobiną do 350 mg/dl. W przypadku oznaczenia w pró-
NIEDOSTARCZANE ODCZYNNIKI bce moczu, obserwowano interakcji z kwasem askorbinowy
Calibrador A plus Wiener lab. niezależnie od stężenia.
Zobacz źródło: Young, D.S. w sprawie wpływu leków w tej
INSTRUKCJA UŻYCIA metodzie.
Dostarczane odczynniki: gotowe do użycia. d) Trwałość i instrukcja przechowywania: enzymatyczny
rozpad glukozy we krwi (glikoliza) w czerwonych krwinkach
OSTRZEŻENIA i leukocytach jest proporcjonalna do temperatury prze-
Odczynniki diagnostyczne do zastosowania "in vitro". chowywania, osiągając swe maksimum w temperaturze
Stosować odczynniki zgodnie z procedurami dla laboratoriów 37oC. Ten proces nie jest zahamowany przez zamrożenie,
klinicznych. dlatego krew powinna zostać odwirowana w ciągu 2 godzin
Odczynniki i materiał badany odrzucać zgodnie z lokalnymi od pobrania. Czysty nadsącz należy przenieść do innej
przepisami. probówki w celu przechowywania. W ten sposób glukoza
jest trwała przez 4 godziny w temperaturze pokojowej lub
TRWAŁOŚĆ I WARUNKI PRZECHOWYWANIA 24 godziny w lodówce.
Dostarczane odczynniki: trwałe w lodówce (2-10oC) do Kiedy test nie jest możliwy do wykonania z zachowaniem
końca daty ważności umieszczonej na opakowaniu. powyższych warunków należy dodać środki konserwujące

*Niedostarczane we wszystkich rozmiarach zestawów 864122524 / 01 p. 10/12

w trakcie pobrania. WARTOŚCI REFERENCYJNE
PMR może być zanieczyszczony bakteriami i innymi ko- W badaniu przeprowadzonym z użyciem Glicemia enzimática
mórkami, z tego powodu oznaczenia powinny być wykon- AA líquida Wiener lab. na populacji 120 osób na czczo z
ywane natychmiast. W razie niemożliwości bezzwłocznego Rosario w Argentynie, obojga płci, pomiędzy 20 a 45 rokiem
oznaczania, należy odwirować PMR i przechować do 3 dni życia, bez objawów cukrzycy i innych chorób, 95% wyników
w temperaturze 2-10oC lub do 5 godzin w temperaturze zawierało się w następujących zakresach:
20-25oC. Surowica krwi lub osocze: 70 - 110 mg/dl

WYMAGANE MATERIAŁY I SPRZĘT (niedostarczane) W piśmiennictwie (Tietz, N.W.) następujący zakres wartości
- Spektrofotometr lub fotokolorymetr. referencyjnych jest uznawany:
- Mikropipety i pipety do pomiaru określonych objętości. Surowica krwi lub osocze
- Probówki lub kuwety spektrofotometryczne. Dorośli: 74 - 106 mg/dl (4,11 - 5,89 mmol/l)
- Łaźnia wodna o temp. 37oC. Dzieci: 60 - 100 mg/dl (3,33 - 5,55 mmol/l)
- Zegarek lub stoper. Noworodki: 1 dzien: 40 - 60 mg/dl (2,22 - 3,33 mmol/l)
starsi od 1 dnia: 50 - 80 mg/dl (2,78 - 4,44 mmol/l)
WARUNKI DLA PRZEPROWADZENIA TESTU Dowolna próbka moczu
- Długość fali: 505 nm w spektrofotometrze lub fotokolory- 1 - 15 mg/dl (0,06 - 0,83 mmol/l)
metrze z zielonym filtrem (490-530 nm).
- Temperatura reakcji: 37oC. 24 godzinna zbiórka moczu
- Czas reakcji: 5 minut. < 0,5 g/24 hs (< 2,78 mmol/24 hs)
- Objętość materiału badanego: 10 ul. PMR
- Objętość odczynnika: 1 ml. Dzieci: 60 - 80 mg/dl (3,33 - 4,44 mmol/l)
- Objętość reakcji końcowej: 1,01 ml. Dorośli: 40 - 70 mg/dl (2,22 - 3,89 mmol/l)
Objętości Materiału badanego i Odczynnika A mogą różnić się Zaleca się dla każdego laboratorium ustalenie własnych
proporcjami (np. 20 ul Materiał badany + 2 ml Odczynnik A). wartości referencyjnych dla własnej populacji pacjentów
biorąc pod uwagę wiek, płeć, zwyczaje żywieniowe i inne
czynniki.
PROCEDURA
W trzech probówkach oznaczonych B (Blank - Próba KONWERSJA JEDNOSTEK SI
ślepa), S (Standard - Próba wzorcowa) oraz U (Unknown Glukoza (mg/dl) x 0,0555 = Glukoza (mmol/l)
- Nieznany materiał badany) umieścić: Glukoza (g/24 horas) x 55,5 = Glukoza (mmol/24 hs)
B S U
OGRANICZENIA PROCEDURY
Próba wzorcowa - 10 ul -
Zobacz znane interakcje w rozdziale MATERIAŁ BADANY.
Materiał badany - - 10 ul
Odczynnik A 1 ml 1 ml 1 ml CHARAKTERYSTYKA TESTU
Badania wykonano w analizatorze Express plus(*).
Inkubować probówki przez 5 minut w łaźni wodnej o temp. a) Powtarzalność: wykonano 20 powtórzeń testu tego
37oC lub przez 25 minut w temp. 15-25oC. Odczytać samego materiału badanego w ciągu pięciu różnych dni,
absorbancję w spektrofotometrze przy 505 nm lub w otrzymano następujące wyniki:
fotokolorymetrze z zielonym filtrem przy 490-530 nm,
ustawiając aparat na zero na ślepej. Precyzja w trakcie badania
Poziom S.D. C.V.
90,7 mg/dl ±1,26 mg/dl 1,39 %
TRWAŁOŚĆ REAKCJI KOŃCOWEJ 278 mg/dl ± 3,08 mg/dl 1,11 %
Barwa reakcji końcowej jest trwała przez 30 minut, stąd Precyzja w trakcie badania
absorbancja powinna być odczytana w tym czasie.
Poziom S.D. C.V.
OBLICZENIA 90,1 mg/dl ± 1,73 mg/dl 1,92 %
Glukoza (mg/dl) = U x f 299 mg/dl ± 4,86 mg/dl 1,62 %
100 mg/dl b) Odzyskiwanie: poprzez dodanie znanych ilości glukozy
f= do tych samych próbek surowicy otrzymano odzysk pomiędzy
S 99 a 101%.
c) Linijność: reakcja jest linijna do 500 mg/dl. Dla wyższych
METODA KONTROLI JAKOŚCI wartości rozcieńczyć materiał badany solą fizjologiczną,
W trakcie przeprowadzania badania, za każdym razem, powtórzyć badanie i pomnożyć ostateczny wynik przez
należy przeprowadzać analizę jakości na dwóch poziomach współczynnik rozcieńczenia.
(Standatrol S-E 2 niveles) ze znanym stężeniem glukozy. d) Korelacja: przy pomocy zestawu Glicemia enzimatica AA

864122524 / 01 p. 11/12
líquida Wiener lab. oraz podobnego na rynku opartego o tę Oznaczenia
samą zasadę działania oznaczono glukozę w 154 próbkach Następujące symbole są zastosowane na opakowaniach
uzyskując zakres 23 mg/dl do 503 mg/dl. zestawów odczynników diagnostycznych.
Współczynnik korelacji wynosił: Ten produkt spełnia wymagania Dyrektywy Europej-
r = 0,9997, współczynnik regresji slope b = 1,0257 i wyraz
wolny intercept a = 1,9485. C skiej 98/79 EC dla wyrobów medycznych używanych
do diagnozy "in vitro"
e) Badania nad czułością: granica minimalnej wykrywalności
wynosi 0,54 mg/dl a czułość analityczna wynosi 4,2 mg/dl.
PAutoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej
V Wyrób do diagnostyki "in vitro"
PARAMETRY DLA ANALIZATORÓW AUTOMATYCZNYCH
Celem programowania zapoznać się z instrukcją obsługi X Zawartość wystarczająca dla <n> badań
używanego analizatora automatycznego. Użyć przed
Do kalibracji należy zastosować Calibrador A plus Wiener H
lab, zgodnie ze specyfikacją analizatora automatycznego. l Ograniczenie dopuszczalnych temperatur

WIENER LAB DOSTARCZA  Nie zamrażać

- 1 x 250 ml + Próba wzorcowa (Nr kat. 1400071).
F Ryzyko biologiczne
- 4 x 250 ml + Próba wzorcowa (Nr kat. 1400060).
- 6 x 60 ml (Nr kat. 1009313). Objętość po rozpuszczeniu
- 6 x 60 ml (Nr kat. 1009617).
- 6 x 60 ml (Nr kat. 1009925). Cont. Zawartość
- 6 x 60 ml (Nr kat. 1008138).
- 12 x 50 ml (Nr kat. 1009260). g numer serii
- 4 x 40 ml (Nr kat. 1009803).
M Wytwórca
ŹRÓDŁA
- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and Substancja szkodliwa
Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
1288 (1974). Substancja żrące
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969). Substancja drażniąca
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. i Przed użyciem zapoznać się z instrukcją
- Ziegenhorn, J.; Newman, U.; Hegen, A. - J. Clin. Chem.
Calibr. Kalibrator
Clin. Biochem. 15/1:13 (1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963).
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Che- b Próba kontrolna

mistry, W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of

America, 2001.
b Próba kontrolna dodatnia

c Próba kontrolna ujemna

h Numer katalogowy

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
PM-1102-153 2000 Rosario - Argentina
864122524 / 01 p. 12/12 UR201215