Algunas Propiedades de Las Proteínas

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6 MANUAL PRÁCTICAS BIOQUÍMICA

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
ALGUNAS PROPIEDADES DE LAS PROTEÍNAS

OBJETIVOS


 Realizar ensayos de precipitación de proteínas al mezclarlas con sales de metales
 pesados, o con reactivos ácidos.
 Verificar la importancia de la reacción de Biuret para el reconocimiento de
proteínas.

TEORÍA RELACIONADA

Las proteínas son un grupo de biomoléculas caracterizados por su gran variedad


estructural y enorme diversidad de funciones biológicas. Las proteínas de cada ser vivo,
animal o vegetal son específicas ya que están codificadas por su genoma. A pesar de que
desempeñan la misma función, las proteínas presentan ligeras variaciones estructurales
en las diferentes especies. Químicamente pueden diferenciarse en proteínas simples,
constituidas únicamente por aminoácidos y proteínas complejas que contienen material
adicional como carbohidratos, lípidos o ácidos nucleicos.

Las proteínas pueden variar sus características de solubilidad mediante alteraciones en el


medio acuoso en el que se hallen disueltas. Cuando una proteína se disuelve en agua, las
fuerzas hidrofílicas, electrostáticas y los puentes de hidrógeno, participan positivamente,
aportando un mayor grado de solubilidad entre más efectivas sean estas interacciones.
Sin embargo factores físicos como el calor, radiaciones, variaciones en los valores de pH
y la presencia de solventes que afecten estas interacciones, pueden producir serias
alteraciones en la solubilidad. Algunas veces pueden ocurrir cambios en la estructura
nativa de la proteína y se considera que en estas condiciones la proteína se ha
desnaturalizado. El fenómeno físico observado en este caso, es la formación de un
coágulo o proceso de coagulación.

MATERIALES Y REACTIVOS

10 tubos de ensayo 1 Beaker de 400 ml


1 Pinza para tubo de ensayo 1 Gradilla
1 Estufa o calentador 1 termómetro

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
7 MANUAL PRÁCTICAS BIOQUÍMICA

Reactivo de Biuret Acido tánico al 10%


Ácido Pícrico saturado Sulfato cúprico al 2%
Ácido Acético 10% Ferrocianuro de potasio acuoso.
Buffer pH 4.7 Acetato de plomo al 2 %
Soluciones: Albúmina, caseína y gelatina Cloruro de mercurio al 2%

PROCEDIMIENTO:

1. Preparación de soluciones de proteínas.

a). Solución de albúmina:


Se prepara mezclando lentamente una clara de huevo con aproximadamente 100ml de
agua, la mezcla se filtra sobre gasa para eliminar la mayor parte de la espuma.

b). Solución de Caseína:


Se toma 1 g de caseína y se le agrega lentamente 100 ml de NaOH 0.5 M. Con agitación
continua, reposar la mezcla durante 5 min y de haber espuma se filtra sobre gasa.

2. Precipitación de Proteína.

a) Precipitación con sales metálicas: En una serie de tres tubos se adiciona en cada
uno 1 ml de solución ALBÚMINA de huevo; adicione a uno 4 gotas de solución de cloruro
mercúrico al 2%, al segundo 4 gotas de una solución de acetato de plomo al 2%, más 3
gotas de ácido acético y al tercero 4 gotas de sulfato cúprico al 2%. , obsérvese
cuidadosamente la formación o no de precipitados. Explique.

a.1. Precipitación con sales metálicas: En una serie de tres tubos se adiciona en cada
uno 1 ml de solución CASEÍNA; adicione a uno 4 gotas de solución de cloruro mercúrico
al 2%, al segundo 4 gotas de una solución de acetato de plomo al 2%, más 3 gotas de
ácido acético y al tercero 4 gotas de sulfato cúprico al 2%. , obsérvese cuidadosamente la
formación o no de precipitados. Explique.

b) Precipitación con reactivos ácidos: En tres tubos de ensayo coloque en cada uno
1.5 ml de solución de Caseína. Añádale al primero 3 gotas de una solución acuosa
saturada de ácido pícrico, al segundo igual cantidad de una solución de ácido tánico al
10% y al tercero 3 gotas de una solución acuosa de ferrocianuro de potasio y 1 gota de
ácido acético al 10%. Observe lo que ocurre.
b.1. Precipitación con reactivos ácidos: En tres tubos de ensayo coloque en cada uno
1.5 ml de solución de albúmina. Añádale al primero 3 gotas de una solución acuosa
saturada de ácido pícrico, al segundo igual cantidad de una solución de ácido tánico al
10% y al tercero 3 gotas de una solución acuosa de ferrocianuro de potasio y 1 gota de
ácido acético al 10%. Observe lo que ocurre.

3. Reacciones colorida:

Las proteínas pueden formar compuestos coloreados al reaccionar con determinados


reactivos, entre los que se encuentra el reactivo de Biuret.

Reacción de Biuret: Es característica del enlace peptídico.

a) A 1.5 ml de la solución de caseína, añada 1 ml de reactivo de Biuret. Deje reposar la


mezcla y observe lo que ocurre.

b) A 1.5 ml de la solución de albúmina, añada 1 ml de reactivo de Biuret. Deje reposar la


mezcla y observe lo que ocurre.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Consultar en forma clara y breve en que consiste la desnaturalización de las
proteínas.
2. Explique qué sucede cuando el cabello se somete a los tintes, de ris y alisado, este
proceso es reversible o irreversible.
3. Explique por qué las pezuñas, los cuernos, las uñas, el cabello y las plumas no se
disuelven con el agua.
4. Consultar de qué depende la solubilidad de las proteínas.
5. Explique cuando es positiva la reacción de Biuret, escriba la reacción
6. Consulte otras técnicas utilizadas para la cuantificación de proteínas.

BIBLIOGRAFÍA:

PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. México. MaGraw- Hill


Latinoamericana, S.A.

CONN, E. y Stumpf, P.K. Bioquímica F.

LÓPEZ, E y ANZOLA, C. Guías de laboratorio de Bioquímica. Facultad de Ciencias.


Universidad Nacional sede Bogotá.

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