Practica4 MontserratGutierrez

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UNIVERSIDAD VERACRUZANA

Facultad de Bioanálisis

Bioquímica Clínica Enzimática

Reporte de Práctica Determinación


Cuantitativa de LDH (lactato
deshidrogenasa)

Alumna: Montserrat Alheli Gutierrez


Barrientos

Matrícula: S180133660

Académico: Mtro. Ricardo Vázquez


Ballona
INTRODUCCION

Esta prueba mide el nivel de lactato deshidrogenasa (LDH), también conocida como
deshidroginasa del ácido láctico, en la sangre o a veces en otros líquidos del cuerpo.
La LDH es un tipo de proteína conocida como enzima. La LDH cumple una función
importante en la producción de energía por el cuerpo. Se encuentra en casi todos
los tejidos del cuerpo, entre ellos, los de la sangre, el corazón, los riñones, el cerebro
y los pulmones.

Cuando se produce daño en estos tejidos, liberan LDH en el torrente sanguíneo o


en otros líquidos corporales. Cuando los niveles de LDH en la sangre o en otros
líquidos del cuerpo están altos, puede indicar que ciertos tejidos del cuerpo han
sufrido daño por una enfermedad o una lesión.

FUNDAMENTO

La lactato deshidrogenasa (LDH) cataliza la reducción del piruvato por el NADH,


según la siguiente reacción:

Piruvato + NADH + H+ àLDH à L-lactato + NAD+

La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio determinado


fotometricamente, es proporcional a la concentración catalítica de LDH en la
muestra ensayada1 .

MATERIAL Y REACTIVOS

• R1 (piruvato)
• R2 (NADH)
• Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
• Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC ( 0,1ºC)
• Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
• Equipamiento habitual de laboratorio

TECNICA

1. Preincubar el reactivo de trabajo, muestra y patrón a la temperatura de


reacción 30/37ºC. Ajustar a 0 el fotómetro con agua destilada.
2. Pipetear en una cubeta:
3. Reactivo de trabajo 1.0 mL
4. Muestra o control 20 μL
5. Mezclar suavemente por inversión. Insertar la cubeta en el compartimiento
termostatado del instrumento y poner el cronómetro en marcha.
6. Incubar durante 30 segundos, y anotar la absorbancia inicial.
7. Repetir las lecturas exactamente a los 1,2 y 3 minutos.
8. Calcular la diferencia entre absorbancias.
9. Calcular el promedio de los resultados para obtener el cambio promedio en
absorbancia por minuto (ΔA/min).

RESULTADOS

El resultado de la absorbancia final fue de 0.074 A


Validamos el resultado Multiplicando la absorbancia de 0.074 A, por el factor de
conversión 9690 y nos arrojó un total de 717.06

Se convierte la absorbancia en unidades internacional: 0.074 x 9690 = 717.06 UI/L


a 37 °C.
Para obtener los valores en nanokatales hacemos: 717.06 UI/L X 16.67 (factor de
conversión). Dando un total de 11953.39 nKa.

VALORES DE REFERENCIA

37ºC
230-460 U/L

CONCLUSION
Ante los resultados obtenidos se indentifico con su valores de referencia, se
encuentran en un rango alto, dando a entender que hay actividad de la enzima,
como concecuencia puede tener algun tipo de enfermedad en el higado, ataques
cardiacos, anemia, trauma muscular, fracturas óseas, cáncer, infecciones tales
como la meningitis, la encefalitis o el VIH o descartando cualquier tipo de
enfermedad puede ser por consumo de farmacos.

REFERENCIA
Inserto SPINREACT
https://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BEIS16_LDH_
02-2015.pdf

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