ABSORCIÓN DE GLUCOSA Y PERISTALTISMO

Hernández Larios Jazmín Angélica

1. ¿Cuáles son las funciones del aparato digestivo? Discute brevemente cada una de ellas (aquí significa que tienen que explicarlo CON SUS PALABRAS,
no copiar textualmente lo que viene en los libros): motilidad, digestión, secreción y absorción.
Contiene a los órganos involucrados en la degradación de los alimentos.
La motilidad es el poder mezclar y transportar las sustancias a lo largo del tracto gastrointestinal, donde se mezclan los alimentos y las secreciones, terminando el curso con
la expulsión al ano.
La digestión se trata de una serie de procesos tanto mecánicos como químicos donde se convierten los alimentos que ingerimos en moléculas más pequeñas, esta se puede
dividir en dos la digestión mecánica y la digestión química la primera consiste en la trituración de los alimentos con los dientes, pasando luego a la deglución el musculo liso
y el intestino delgado mezclan los alimentos triturados, las moléculas pasan a disolverse y se mezclan con las enzimas digestivas, la segunda consiste en que los lípidos,
proteínas, ácidos de nucleicos de los alimentos se dividen en moléculas aún más pequeños gracias a la hidrolisis.
Las enzimas digestivas producidas por las glándulas salivales, la lengua, el estómago, el páncreas y el intestino delgado catalizan las reacciones.
La secreción se producen células del tracto gastrointestinal y de los órganos digestivos accesorios secretan; 7 litros de agua, acido, buffers (sustancias amortiguadoras) y
enzimas hacia la luz (espacio interior) del tubo.
En la absorción hay un ingreso de los líquidos secretados, iones y productos de la digestión en las células epiteliales que revisan la luz del del tracto gastrointestinal.

2. Haz un esquema del tracto gastrointestinal con sus nombres y funciones principales (mínimo incluyan
lo siguiente: esófago, estómago, hígado, bazo, páncreas, estómago, duodeno, yeyuno, íleon, colon, recto,
ano).
✓ Esófago
Es un conducto muscular de 18 a 26 cm de longitud que recoge el bolo alimenticio una vez terminada la fase
bucofaríngea de la deglución.
Con una serie de movimientos contráctiles de la pared del esófago, el bolo alimenticio sigue su curso hacia el
estómago. El esófago sólo participa en la progresión ordenada del alimento.

✓ Estomago
Se comunica con el esófago a través de los cardias y con el duodeno a través del píloro. Los anteriores
funcionan como válvulas que regula el paso del alimento.
Funciona principalmente como un reservorio para lamacenar grandes cantidades de comida

Figura 2.1. Esquema del tracto gastrointestinal.

3. Haz un esquema detallado de la anatomía (corte transversal) de la pared intestinal (incluye mínimo: mucosa, submucosa, capas musculares circular
y longitudinal, serosa, villi, plexo mientérico, plexo submucoso).

Figura 3.1. Esquema de la anatomía de la pared intestinal.

4. ¿Qué tipo de musculo conforma al intestino?

El musculo liso
5. ¿Qué es un sincitio de células musculares del músculo liso? ¿Cuál es su función fisiológica?
Sincitio, se trata de un gran número de fibras están conectadas entre ellas por uniones gap que permiten el paso de iones y propagación de potenciales de acción, lo que
permite que la actividad eléctrica y la actividad mecánica ocurran sincrónicamente en esas fibras. A diferencia del músculo esquelético no hay placa neuromuscular, el tipo
de sinapsis es difuso, un solo axón con múltiples varicosidades hace contacto con muchas fibras musculares lisas.
6. Con respecto a la actividad motora del músculo liso intestinal: ¿Qué son las “ondas lentas”, las “contracciones tónicas” y los “potenciales en aguja”
de actividad eléctrica?
✓ Ondas lentas.
No son potenciales de acción, constituyen cambios lentos y ondulantes del potencial de membrana en reposo, no dependen de estímulo externo permiten la apertura cíclica de estímulo
externo. La intensidad de estas ondas oscila entre 5 y 15 milivoltios y su frecuencia varía según la porción del tubo digestivo. El ritmo de contracción en el cuerpo gástrico es de 3/min, el
del duodeno de 12/min y el íleon 8 a 9/min.
Su origen está en las células intersticiales de Cajal entre las terminales y el musculo liso, Las ondas lentas no inducen por sí mismas las contracciones del tubo digestivo, (sólo en el
estómago) por lo que su función principal está en controlar la aparición de los potenciales en espiga que producen la contracción muscular.
✓ Contracciones tónicas.
Son una parte importante del músculo del aparato digestivo, siendo la contracción tónica continua y no asociada a un ritmo eléctrico de las ondas, persistiendo por varios minutos u horas.
La contracción tónica se puede deber a potenciales en espiga repetidos y continuos, o bien a la acción de hormonas u otros factores químicos que inducen la despolarización parcial y
constante de la membrana del músculo liso sin generar potenciales de acción.
✓ Potenciales en aguja.
Estos son potenciales de acción, también se les conoce como ondas en espiga se generan cuando el potencial de reposo del músculo gastrointestinal (de -50 a -60 milivoltios) se hace más
positivo hasta que alcanza los -40 milivoltios por acción de la acetilcolina. La cantidad de potenciales de espiga suele ser de 1 y 10 espigas por segundo. Los potenciales de espiga duran de
10 a 40 veces más que los potenciales de acción de las grandes fibras nerviosas y cada espiga llega a prolongarse de 10 a 20 milisegundos.
Su mecanismo consiste en la despolarización en las aperturas de canales de Ca2+ dependientes de voltaje, la meseta un balance entre la entrada del Ca2+ y la salida de K+ y la repolarización
los cierres de canales de Ca2+, la apertura de K+ dependiente de Ca2+.
7. ¿Qué tipo de actividad eléctrica está relacionada con los movimientos del intestino mencionados en la pregunta anterior? Ayúdate explicando la siguiente figura

Las primeras ondas son las ondas lentas no despolarizan por lo tanto no causan
contracciones en el musculo liso, los potenciales de espiga (los más alargados) si
llegan al potencial de acción necesario para poder polarizar logrando la
contracción del musculo liso.
Existen factores que pueden estimular e inhibir la despolarización.
Estimulan: La disensión muscular, acetilcolina, el parasimpático
Inhiben: La noradrenalina, adrenalina y el simpático causan hiperpolarización

8. ¿Cuál es el potencial en reposo promedio (mV) de una fibra muscular lisa del intestino?
-50 a -60 mV en reposo
9. ¿Qué es la acetilcolina (ACh) y qué efecto tiene sobre la actividad motora del músculo liso del intestino?
La acetilcolina es un neurotransmisor sintetizado por las neuronas del sistema nervioso periférico, controla la contracción y relajación de los músculos. Estimula la secreción de todos
los tipos de células secretoras gástricas (ácido clorhídrico, pepsinógeno, mucus); estimula la secreción pancreática y actúa estimulando la motilidad intestinal, como también la secreción
de las criptas.
10. ¿Qué es la norepinefrina y cuál es su efecto sobre la actividad motora del músculo liso del intestino? ¿Cuál es la diferencia entre norepinefrina y
noradrenalina?
La norepinefrina es una catecolamina que estimula receptores adrenérgicos alfa1 y, levemente, receptores adrenérgicos beta 1. Disminuye el tono, motilidad y secreción gástrica e
intestinal. La diferencia está en su procedencia ya que la noradrenalina es una sustancia natural, fabricada en el cuerpo, mientras que la norepinefrina es la misma sustancia, pero
sintetizada artificialmente.
11. ¿Qué son las células intersticiales de Cajal y por qué se les llama el “marcapasos del intestino”?
Son células mesenquimales, localizadas entre los nervios entéricos y las células musculares lisas, con cuerpos celulares pequeños y prolongaciones elongadas. Generan ondas lentas
que, a su vez, determinan las contracciones del intestino, por eso son las células marcapasos del tracto gastrointestinal.
12. ¿Qué es el sistema nervioso entérico? Haz un esquema e indica sus partes y funciones más importantes (incluye mínimo: plexo mientérico y submucoso).

Es la parte más compleja del sistema nervioso periférico,

está constituido por una gran cantidad de células gliales y
neuronas 80 a 100 millones de neuronas, que son una
milésima parte de las que existen en el encéfalo, pero la
mayor cantidad que las hay en la medula espinal. El SNE sus
neuronas se organizan en dos plexos dan origen nerviosos
submucoso de Meissner y mientérico de Auerbach.

Figura 12.1 Sistema Nervioso Entérico

13. ¿Qué es el sistema nervioso autónomo, en qué partes se divide y cuál es el efecto general que tiene sobre la función gastrointestinal?
1. Sistema nervioso central (encéfalo, tronco del encéfalo, cerebelo y medula espinal)
 2. El sistema nervioso periférico (SNP) (ganglios y nervios que salen y entran de la médula y que llegan a todos los órganos, sentidos, músculos y piel) que se a su vez se divide
en:
1. SNP motor: controla los movimientos
2. SNP sensitivo: recoge la información de los sentidos y la sensibilidad tanto consciente (piel) como inconsciente (de las vísceras, órganos, músculos y articulaciones)
3. Sistema Nervioso Vegetativo (o sistema nervioso autónomo SNA). Es el encargado de controlar todas las funciones automáticas del cuerpo, como la digestión, el
ritmo cardiaco, el respiratorio, glándulas, parte de las secreciones hormonales y neuropetídicas.
1. Sistema nervioso simpático: actividad y alerta.
2. Sistema nervioso parasimpático: relajación descanso.
3. Sistema nervioso entérico: se encarga de controlar directamente el sistema gastrointestinal.
Las funciones digestivas están controladas de forma automática por el sistema nervioso autónomo y por tanto muy influenciado por el nivel de activación emocional, la adrenalina, el
estrés o las técnicas de relajación.
El sistema digestivo posee una red extensa de neuronas (100 millones), que van del esófago al ano, se describe como el sistema nervioso entérico (SNE), sus neuronas se organizan
en dos plexos:
• Plexo mientérico (Auerbach). Las motoneuronas, neuronas sensitivas e interneuronas, transmiten estímulos nerviosos a las células musculares de la capa muscular propia,
controlando el movimiento peristáltico.
• Plexo submucoso (Meissner). Las motoneuronas controlan la secreción mediante la transmisión de estímulos nerviosos a las células secretoras de la mucosa, así como
controlan el movimiento de la muscular de la mucosa.
El sistema nervioso entérico (SNE) es una subdivisión del sistema nervioso autónomo que se encarga de controlar directamente el aparato digestivo. Se encuentra en las envolturas
de tejido que revisten el esófago, el estómago, el intestino delgado y el colon.
14. ¿Qué tipos de movimientos tiene el intestino (son dos)? ¿Cuál es la función fisiológica de estos movimientos?
✓ Las contracciones del intestino delgado tienen tres funciones: 1) mezclar quimo con jugo intestinal, bilis y jugo pancreático, lo que permite que estos líquidos neutralicen
ácido y digieran nutrientes de manera más efectiva;
2) combinar quimo y ponerlo en contacto con la mucosa para que se realice digestión por contacto y absorción de nutrimentos.
3) mover residuos hacia el intestino grueso.
✓ Segmentación.
Se realiza por contracciones y relajaciones sucesivas y alternantes de la musculatura circular del tubo digestivo. Los segmentos de contracción presentan una longitud de 1 a
4 centímetros y el tiempo de cada contracción es de unos 5 segundos. El número y frecuencia de segmentaciones es mayor a nivel duodenal y desciende en dirección al
íleon. La función más importante es la mezcla que se produce entre el quimo y las secreciones.
✓ Ondas peristálticas o peristaltismo.
Son ondas de contracción precedidas por una relajación que avanzan a lo largo del tubo recorriendo segmentos de una longitud media entre 10 y 15 centímetros. Constituye
un sistema de propulsión lento que permite el avance del quimo y su contacto con las paredes
15. ¿Cuál es la definición de digestión y absorción intestinal?
Digestión. Se refiere a la partición de las moléculas de los alimentos en subunidades más pequeñas, que pueden ser absorbidas.
Absorción. Se refiere al paso de los productos finales de la digestión a la sangre o la linfa.
16. ¿En qué estructura comienza la digestión de los carbohidratos? ¿Qué enzima está involucrada en este proceso?
La mayoría de los carbohidratos se ingieren como almidón, un largo polisacárido de glucosa en forma de cadenas rectas con ramificaciones ocasionales. La digestión del almidón
comienza en la boca con la acción de la amilasa salival, que hidroliza el almidón en oligosacáridos.
17. ¿Qué es la amilasa pancreática, ¿dónde se secreta y cuál es su función principal?

La amilasa es una α-1,4-glucosidasa que participa en la digestión de los polisacáridos hidrolizando enlaces α-1-4. La amilasa pancreática se produce en el páncreas y se elimina en el
intestino.
18. Explica el siguiente esquema en función de la amilasa pancreática:
La amilasa divide las cadenas rectas del almidón para producir el disacárido maltosa y el trisacárido maltriosa.
La amilasa pancreática no puede hidrolizar el enlace entre las moléculas de glucosa en los sitios donde el almidón se ramifica. En consecuencia, junto con la maltosa y la maltriosa se
liberan cadenas ramificadas cortas de moléculas de glucosa llamadas oligosacáridos.

19. ¿Qué células del estómago secretan HCl, pepsinógeno y moco?

Células mucosas del cuello, las cuales secretan moco (y suplementan a las células mucosas superficiales, las que revisten la superficie luminal del estómago y las foveolas gástricas).
Células parietales, las cuales secretan ácido clorhídrico (HCl). Células principales (o cimógenas), las cuales secretan pepsinógeno, una forma inactiva de la enzima digestiva de las
proteínas pepsina.
20. ¿En qué estructura ocurre principalmente la digestión de los carbohidratos?
En el intestino delgado, se secretan los fluidos producidos por el páncreas y algunas células de las paredes del intestino, que llevan a solución de enzimas especificas para hidrolizar
los carbohidratos.
21. ¿Qué son los pliegues de Kerckring y cuál es su función en la absorción de nutrientes?
Son pliegues transversales de la mucosa y submucosa (que forman elevaciones semicirculares a helicoidales). Están presentes en duodeno y yeyuno y terminan en la porción proximal
de íleon. Incrementan la superficie del intestino de 2 a 3 veces y disminuyen la velocidad del quimo en el intestino.
Su función principal es la de incrementar el área de superficie para la absorción de nutrientes durante la digestión de los alimentos, sin embargo, también parecen participar en el
flujo del quimo (masa de alimentos pre digerida en la boca y el estómago )
22. ¿Cuál es la función de las glándulas salivales en la digestión? ¿qué tipo de enzimas secretan estas glándulas?
Producen saliva, también llamada esputo, y la segregan hacia la boca a través de aberturas llamadas ductos. La saliva humedece y limpia la boca, inhibe el crecimiento bacteriano,
disuelve moléculas que pueden estimular las papilas gustativas, digiere un poco el almidón y la grasa, y facilita la deglución al unir las partículas de comida en una masa suave (bolo)
y lubricarlas con moco.
✓ Moco, que une y lubrica el bolo alimenticio.
✓ Electrolitos, sales de Na+, K+, Cl–, fosfato y bicarbonato.
✓ Lisozima, una enzima que mata bacterias.
✓ Inmunoglobulina A (IgA), un anticuerpo antibacteriano.
✓ Amilasa salival, un enzima que empieza la digestión del almidón en la boca.
✓ Lipasa lingual, una enzima que empieza la digestión de la grasa en la boca (sobre todo después de que se ha deglutido el alimento).
23. ¿Cuál es la función de las glándulas gástricas del estómago? Menciona 3 factores digestivos que secretan estas glándulas.
Las glándulas gástricas o glándulas fúndicas son glándulas ubicadas en el fundus (una región estomacal) que se encargan principalmente de la secreción de jugos gástricos, electrolitos
y agua. Las glándulas gástricas contienen varios tipos de células que secretan diferentes productos:
1. Células mucosas del cuello, las cuales secretan moco (y suplementan a las células mucosas superficiales, las que revisten la superficie luminal del estómago y las foveolas gástricas).
2. Células parietales, las cuales secretan ácido clorhídrico (HCl).
3. Células principales (o cimógenas), las cuales secretan pepsinógeno, una forma inactiva de la enzima digestiva de las proteínas pepsina.
4. Células tipo enterocromafines (ECL), situadas en el estómago y el intestino, las cuales secretan histamina y 5-hidroxitriptamina (también llamada serotonina) como reguladores
paracrinos del tubo digestivo.
5. Células G, las que secretan la hormona gastrina hacia la sangre. 6. Células D, las que secretan la hormona somatostatina.
24. ¿Cuáles son las funciones del páncreas en la digestión?
El páncreas tiene dos funciones principales, la función exocrina y la función endocrina. Las células exocrinas del páncreas producen enzimas que ayudan a la digestión. Cuando los
alimentos ingresan al estómago, las glándulas exocrinas liberan enzimas dentro de un sistema de conductos que llegan al conducto pancreático principal.
El conducto pancreático libera las enzimas en la primera parte del intestino delgado (duodeno), donde las enzimas ayudan en la digestión de las grasas, los carbohidratos y las
proteínas de los alimentos. La segunda función del páncreas es la función endocrina, la que envuelve la producción de hormonas o sustancias que se producen en una parte del
organismo y que circulan en el torrente sanguíneo para influir en otra parte distinta del organismo.
Las dos hormonas pancreáticas principales son la insulina y el glucagón. La insulina sirve para bajar el nivel de glucosa en la sangre (glucemia) mientras que el glucagón lo aumenta.
Juntas, estas dos hormonas principales trabajan para mantener el nivel adecuado de glucosa en la sangre.
25. ¿En qué órganos ocurre la digestión de los carbohidratos?
En el intestino delgado ocurre la mayor parte de la digestión de los carbohidratos, ahí se secretan los fluidos producido por el páncreas y algunas células de las paredes del intestino,
que llevan en solución enzimas específicas para hidrolizar carbohidratos.

26. ¿Cómo se llama la proteína que transporta glucosa desde la luz del intestino hacia las células intestinales (enterocitos)?
SGLT, transportadores de glucosa acoplados a Sodio.
✓ SLGT1, transporta una glucosa o galactosa por 2 Na+ su concentración es de 0.3 mM.
✓ SLGT3, transporta una glucosa por 2 Na+ su concentración es de 6 mM.
✓ GLUT5, transporta fructuosa su concentración es de 10 mM.
✓ GLUT7, transporta glucosa y fructosa su concentración es 0.3 y 0.6 mM.
✓ GLUT9, transporta fructuosa.
✓ GLUT12, transporta glucosa presente alta afinidad a la glucosa.
27. Explica de manera concisa la siguiente figura que esquematiza el transporte de glucosa a través del enterocito. Menciona tipos de transporte (pasivo,
activo, simport, antiport, etc):

La absorción de la glucosa en el epitelio intestinal implica el co-transporte de Na+ por el SGLT-1 en un

trasporte activo y el mantenimiento del gradiente de Na+ gracias a la bomba de Na+/K+. De forma secundaria
y salida de Na+ al espacio basolateral genera la suficiente fuerza osmótica para arrastrar y absorber agua
hacia los capilares. la fructosa se absorbe mediante otro tipo de transportador, el Glut-5, una proteína que
atraviesa la membrana 12 veces. Finalmente, el paso de la glucosa y la fructosa hacia la sangre se lleva a
cabo a través del Glut-2, un transportador de baja afinidad y alta capacidad de transporte, salen mediante
un transporte pasivo
 Sesión practica
1.¿Qué partes del intestino se van a utilizar para la práctica de peristaltismo y cuáles para la de absorción? ¿Por qué?
En la práctica de peristaltismo se ocupa el duodeno ya que es el que tiene mayor movilidad y en la de absorción de glucosa no importa que parte del intestino delgado sea ya que solo
se quiere ver como la mucosa influye en la absorción de glucosa.
2. ¿Qué es la solución de Tyrode? ¿De qué está compuesta? ¿Para qué sirve?
Es una solución isotónica que se utiliza en experiemtos fisiologicos y cultivo de tejios como las preparaciones de mamiferos, debe gasearse con 95% de oxígeno y N2, 5% de dióxido de carbono. Cuando se utiliza
para aplicaciones de cultivo celular y experimentos de fisiología con el fin de lograr un pH apropiado.está compuesta por:

NaCl 8.5 g/L

MgCl2 0.01 g/L
NaHPO4 0.05 g/L
NaHCO3 1 g/L
KCl 0.2 g/L
CaCl2 0.2 g/L
H2O 1L
Sirve para la irrigación del peritoneo
3. ¿Qué tipo de moléculas son la ACh, adrenalina, sulfato de atropina y el citrato de sodio? ¿Cuál es el efecto que tiene cada una de ellas sobre la actividad
motora del intestino?
✓ La ACh es un neurotransmisor, activa la motilidad intestinal ya que provoca la secreción gástrica.
✓ Adrenalina hormona que disminuye el tono de motilidad y secreción gástrica.
✓ Sulfato de atropina es un alcaloide antimuscarínico, causa relajación en el musculo liso, disminuye el tono, amplitud y frecuencia de las contracciones peristálticas.
✓ Citrato de sodio es un antioxidante inhibe la movilidad intestinal.
4. ¿Qué es el 2,4-dinitrofenol y cuál es su mecanismo de acción? ¿Por qué este compuesto afecta la absorción de glucosa?
Es un agente que desacopla la cadena de transporte de electrones de la fosforilación oxidativa. Afecta a la absorción de la glucosa porque favorece la glucolisis.
5.Haz un esquema detallado de cómo se armará el equipo para peristaltismo y absorción de glucosa.

Equipo para peristaltismo

 Procedimiento para absorción de la glucosa.

6. Menciona las hormonas que pueden regular el peristaltismo e indica en qué sentido lo modulan (activan o inhibien).
Las principales hormonas que controlan la digestión son la gastrina, la secretina y la colecistocinina.
• La gastrina hace que el estómago produzca un ácido que disuelve y digiere algunos alimentos. Es necesaria también para el crecimiento celular normal de la mucosa del estómago, el intestino
delgado y el colon.
• La secretina hace que el páncreas secrete un jugo digestivo rico en bicarbonato. El bicarbonato ayuda a neutralizar el contenido ácido del estómago cuando entran en el intestino delgado.
Además, estimula al estómago para que produzca pepsina, una enzima que digiere las proteínas, y al hígado para que produzca bilis.
• La colecistocinina (“CCK” en inglés) hace que el páncreas produzca las enzimas del jugo pancreático, y hace que la vesícula biliar se vacíe. También fomenta el crecimiento celular normal del
páncreas.
7. ¿Qué son las enzimas digestivas y cuál es su función?
Son catalizadores que ayudan a descomponer las proteínas, los carbohidratos y las grasas en una forma más simple, lo que les permite ser absorbidos por el cuerpo.
8. ¿Qué órganos secretan amilasa, tripsina, lipasa, maltasa, sacarasa y lactasa? ¿Cuál es el sustrato de estas enzimas?

✓ Amilasa: Páncreas y glándulas salivares, hidroliza almidón para transformarlo en melosa.

✓ Tripsina: Se produce en el páncreas y se secreta en el duodeno, hidroliza péptidos para transformarlos en aminoácidos.
✓ Lipasa: Se secreta en las glándulas serosos (de Von Ebner) en la zona dorsal posterior de la lengua, se encarga de degradar las grasas para convertirlas en ácidos grasos mediante
hidrolisis.
✓ Sacarasa: Se secreta en el intestino delgado, en el borde del cepillo de las vellosidades intestinales, rompe el enlace b-glucosídico de la sacarosa, para producir glucosa y fructosa.
✓ Maltasa: Se secreta en intestino delgado, en el borde del cepillo de las vellosidades intestinales, y convierte la maltosa (disacárido) en glucosa.
✓ Lactasa: Enzima producida en el intestino delgado, se encarga de convertir la lactosa en glucosa y galactosa mediante hidrolisis

Bibliografía
• (2019, 24 febrero). SIST. DIGESTIVO Y SIST. NERVIOSO, JUNTOS PERO NO REVUELTOS. Vitamsana. https://vitamsana.com/sistema-digestivo-y-sistema-nervioso-juntos-pero-no-revueltos/

• Bermúdez, V., Bermúdez, F., Arraiz, N., Leal, E., Linares, S., Mengual, E., ... & Carrillo, M. (2007). Biología molecular de los transportadores de glucosa: clasificación, estructura y distribución. Archivos venezolanos de

Farmacología y Terapéutic

• Fisiología Motora Gastrointestinal. (2020, 1 diciembre). Fisiologia. http://puramedicinauaem.blogspot.com/2012/10/fisiologia-motora-gastrointestinal.html

 Análisis de la metodología absorción de la glucosa
Preparación de sacos intestinales
Iniciamos el procedimiento experimental con el sacrificio de la rata por medio de administración de pentobarbital que consiste en un sedante que induce al sueño seguida de la trasección
de la médula espinal. Se abre el abdomen con una incisión en la línea media abdominal vamos a extraer el intestino luego de cortar sus uniones píloro-duodenal e íleo-cecal, los pedazos
se colocan en una caja de Petri que con solución de Tyrode fría y aeración.
Vamos a cortar el intestino en trozos de 2 a 3 cm de longitud, se inserta una cánula (un tubo que se inserta al cuerpo para remover, aportar fluido o tomar muestras) en la luz del
segmento intestinal se toma una jeringa con solución salina de Tyrode, lavar los segmentos intestinales. El tejido no debe presentar perforaciones ya que puede haber escape de la
solución durante el experimento.
Para llevar a cabo la inversión de los segmentos intestinales. Anudamos con un hilo uno de los extremos del segmento de manera que quede ocluido completamente; con ayuda de una
varilla de vidrio se impulsa el extremo ocluido hacia el extremo abierto, deslizándolo por la varilla. La superficie mucosa del intestino queda por fuera y los cabos de hilo del extremo atado
quedan por dentro del saco invertido. Con unas pinzas tomamos el saco intestinal introducimos por el extremo abierto el tubo de vidrio de la cámara de órganos aislados hasta que
sobrepase unos 5 mm, amarrar cuidadosamente este extremo a la varilla.
Colocar el saco intestinal en la cámara de órganos aislados para hacer los experimentos posteriores.

Experimento control.
El saco intestinal se coloca dentro de la cámara y lo llenamos con solución salina de Tyrode que se encuentre a 37°C utilizando una cánula acoplada a una jeringa o una pipeta Pasteur,
revisamos que el saco no presente fugas éste se sumerge en una solución de Tyrode-glucosa, también a 37°C. Se debe tener cuidado que tanto la solución interior como la exterior no
sobrepasen el borde superior del saco atado a la varilla, inmediatamente acoplar el sistema de aeración que consiste en una bomba de aire para pecera; la preparación debe estar en
baño de maría para mantener constante la temperatura.

Toma de muestra.
Tomamos una muestra en el tiempo cero, de la solución exterior y de la interior del saco intestinal, utilzamos una cánula conectada a una jeringa o una pipeta Pasteur. Con tiras reactivas
determinamos la concentración de glucosa en las muestras; luego de deje 15 minutos mediremos de nueva cuenta la concentración de glucosa, pero esta vez sólo de una muestra del
interior del saco. Haremos determinaciones cada 15 minutos hasta completar 5; En la última determinación medimos nuevamente la concentración de glucosa en el exterior del saco. Es
importante verificar que las condiciones de aeración y temperatura se mantengan constantes durante todo el experimento.

Efecto de la ausencia de oxígeno en la absorción intestinal de glucosa.

Colocar un saco intestinal que contenga en su interior solución salina de Tyrode a 37°C dentro de una cámara que contenga solución salina de Tyrode-glucosa a 37°C, la preparación se
mantiene sin adaptar el sistema de aeración, pero manteniendo la temperatura constante.
Hacer determinaciones de glucosa de la solución interior y de la exterior del saco y proseguir con las determinaciones en la misma forma y en los tiempos descritos anteriormente.

Efecto del 2-4 dinitrofenol en la absorción intestinal de glucosa.

Colocar un saco intestinal en una cámara de órganos aislados en la manera descrita anteriormente, llenar el saco intestinal con una solución de Tyrode a 37°C, en este caso el saco se
colocará en una solución de Tyrode-glucosa con 2-4 dinitrofenol (solución exterior). Se mide la concentración de glucosa en el tiempo cero dentro y fuera del saco intestinal y, al igual
que en los experimentos anteriores, se realizan 5 determinaciones cada 15 minutos.

Determinación de glucosa por medio de tiras reactivas

Tomamos una gota de la solución problema puede ser del interior del saco intestinal o de la solución exterior, con una cánula limpia conectada a una jeringa. Colocamos la gota de la
solución problema en la zona reactiva de la tira y se deja reaccionar durante el tiempo establecido por el fabricante de la tira (el tiempo necesario para la reacción está indicado en el
recipiente de las tiras y puede variar), el cambio de color se efectuará de acuerdo con la concentración de glucosa presente en la muestra y éste deberá ser comparado con la escala
cromática proporcionada en el recipiente de las tiras, la lectura debe efectuarse bajo buenas condiciones de luz.
Los resultados que aparecen después de 3 minutos o sólo en los bordes de la zona de prueba no tienen significado confiable. Este método es semicuantitativo y está basado en la
reacción enzimática de la glucosaoxidasa-peroxidasa específica para glucosa, la que se manifiesta con una reacción colorida en la tira reactiva
 Analisis de la metodología peristaltismo
Para el inicio del procedimiento experimental procedemos a preparar el dispositivo para el registro gráfico de la actividad del músculo liso con un transductor de fuerza sujeto a un
soporte universal. En el mismo soporte coloque la cámara para órganos aislados de manera que quede debajo del miógrafo. El tapón de la cámara debe tener su sistema de tubos de
desagüe y de burbujeo funcionando, éste se colocará en la parte inferior de la cámara.
En un vaso de precipitados con colocar solución salina para mamífero en la flama del mechero, de manera que se mantenga la temperatura a 37°C, no debe exceder la temperatura
indicada. De la misma manera, tenga un vaso de precipitados con agua a temperatura de 37°C la cual se cambiará frecuentemente en la parte externa de la cámara de órganos aislados
para ayudar a mantener constante la temperatura de la solución salina en la que estará sumergida la preparación biológica.
Para el inicio del registro conectamos el cable del transductor de fuerza en el canal 1, al encender la unidad seleccionar BSL PRO, antes de iniciar el registro seleccinar MP35 oprimir
Set Up Channels activar canal 1 seleccionar Preset saldrá una lista de transductores seleccionamos fuerza (0-50 g) el programa se ajusta automáticamente todos los valores de
amplificación y de filtros correspondientes para este transductor, se debe comprobar que el canal seleccionado registre una señal analógica. Una vez seleccionado el canal y el transductor
que será utilizado se debe proceder a la calibración del transductor, seleccione la opción Scaling y aparecerá una ventana que permite llevar a cabo la calibración. Coloque cuidadosamente
el gancho en forma de “S” en el transductor de fuerza, en el orificio correspondiente a la sensibilidad de 0-50 g (en el experimento el hilo que estará atado a un extremo del músculo
deberá estar amarrado a este gancho), una vez colocado el gancho y sin que esté en movimiento se debe indicar en el renglón correspondiente a CAL1 que el peso corresponde a 0
gramos y entonces se debe seleccionar la opción CAL1, aparecerá un valor de voltaje en la pantalla; después se procederá a colocar con cuidado la pesa de calibración de 5 g anotando
el valor en el renglón correspondiente a CAL2 y en el momento en el que esté inmóvil se debe seleccionar CAL2, aparecerá un valor de voltaje que debe ser diferente al de CAL1.
Ya realizada la calibración se debe regresar a la pantalla inicial y nuevamente se debe seleccionar la opción MP35 y del menú que aparezca se debe seleccionar la segunda opción (Set
Up Acquisition), aparecerá una ventana que permite establecer las características de la adquisición de los datos del registro, se recomienda establecer las siguientes condiciones: en la
parte superior debe seleccionarse, de izquierda a derecha, “Record”, “Append” y “Disk” con esta selección se podrán registrar segmentos (uno para cada variable) los cuales serán unidos
por el programa y guardados en el disco duro de la computadora; en el siguiente renglón aparece la opción para la frecuencia de muestreo, cambiamos la opción de muestreo ya que
esperamos obtener segmentos que tengan una duración entre 2 y 4 minutos, un valor de 10 minutos evitará la pérdida de información.
Preparación biológica
Iniciamos el procedimiento experimental con el sacrificio de la rata por medio de administración de pentobarbital que consiste en un sedante que induce al sueño seguida de la
trasección de la médula espinal. Se abre el abdomen con una incisión en la línea media abdominal vamos a extraer el intestino luego de cortar sus uniones píloro-duodenal e íleo-cecal,
los pedazos se colocan en una caja de Petri que con solución de Tyrode fría y aeración.
Cortar tramos de intestino con longitud entre 2 y 3 centímetros que correspondan a la región del duodeno ya que presenta la mayor movilidad. Sólo si es necesario, inserte una cánula
en la luz del segmento intestinal y con una jeringa que contenga solución de Tyrode lave con cuidado los segmentos intestinales.
En una caja de Petri con solución salina coloque el segmento intestinal y ate uno de los extremos con un hilo haciendo pasar la aguja a través de la pared, teniendo cuidado de que no
quede cerrada la luz intestinal; deje los cabos del hilo lo suficientemente largos. Realice la misma atadura en el otro extremo, de tal manera que se obtenga un tubo abierto a través del
cual podrá fluir libremente la solución dentro y fuera del intestino.
Con un hilo sujetar uno de los extremos al ganchillo del tapón inferior de la cámara de órganos aislados, introduzca el segmento intestinal por debajo de la cámara con ayuda de unas
pinzas de disección, coloque el tapón en su lugar
Llenar la cámara con solución de Tyrode a 37°C; sujete el otro extremo del intestino al ganchillo del miógrafo, debe tenerse cuidado de no estirar demasiado el segmento intestinal, acople
inmediatamente el sistema de aeración, es importante que el burbujeo sea lento ya que si este es excesivo dificultará el registro debido al movimiento ejercido por el aire. La preparación
debe estar en baño de maría para mantener constante la temperatura del sistema.
Para iniciar el registro de cada uno de los segmentos debe seleccionarse en la parte inferior derecha de la pantalla la opción “Start” y para suspender la captura se debe seleccionar
“Stop”. Entre cada segmento el programa colocará una marca y durante el registro de cada segmento se podrán colocar marcas (oprimiendo F9) y se podrá anotar el significado de cada
una de estas marcas.
Para todos los procedimientos que continúan registrar siempre la actividad basal antes de iniciar.
REGISTRO DE LA ACTIVIDAD BASAL
Vamos a registrar la actividad mecánica generada por el intestino delgado
Con la preparación sumergida en solución de Tyrode a 38°C y con el burbujeo de aire regulado, registre la actividad mecánica generada por el intestino delgado. Tener un registro basal
con duración entre 30 y 60 segundos y el análisis de los efectos provocados por las variables se deben hacer con su propio registro basal.
A. EFECTO DE LA TENSIÓN
Producir una distensión del tejido intestinal, por medio del tensiómetro, aproximadamente del 20 al 30 % de su longitud inicial; registre la actividad mecánica del intestino durante 40
segundos y luego regrese el segmento intestinal a su longitud inicial y continúe registrando durante otros 40 segundos. Detener el registro.
B. EFECTO DEL CALCIO
Agregar 5 gotas de la solución de citrato de sodio (marque con F9) y registre durante 60 a 90 segundos. Sin detener el registro se debe agregar 5 gotas de solución de cloruro de calcio
(F9). Detener el registro lavar la preparación muscular recambiando la solución de Tyrode a 37°C para eliminar las soluciones que se añadieron.

C. EFECTO DE LA ACETILCOLINA
Agregar una gota de la solución de acetilcolina (F9), el efecto debe ser inmediato, de no ser así agregue otra gota y así sucesivamente hasta observar su efecto. Sin detener el registro
agregue 5 gotas de la solución de atropina (F9) y registre durante 60 a 90 segundos.

D. EFECTO DE LA ADRENALINA
Agregar 5 gotas de la solución de adrenalina (F9), registrar durante 2 minutos. Recambiar la solución de Tyrode a 37°C para remover la solución añadida.

E. EFECTO DE LA AERACIÓN
Hacemos un registro basal de la actividad del intestino desconectamos el sistema de aeración proporcionado por la bomba de aire, observamos el efecto que produce la ausencia de
oxígeno sobre la actividad del músculo, registramos lo observado durante 2 minutos después de quitar el aire y conectar de nuevo al sistema de burbujeo.

F. EFECTO DE LA TEMPERATURA
Realizamos un registro de actividad basal del intestino, sin detener el registro y evitando movimientos cambiamos el agua del baño María vamos a observar el efecto que produce la
temperatura baja sobre la contracción del músculo intestinal. Registramos por 2 minutos sin suspender el registro, recambie la solución de Tyrode como el agua del baño para recuperar
la temperatura de 37°C.