AUTOMATIZACIÓN EN EL LABORATORIO CLÍNICO

INTRODUCCIÓN

El área de Química Clínica fue una de la primera área en automatizarse, especialmente debido al auge
en el volumen de muestras manejadas en los hospitales y al cambio de políticas en la solicitud de
pruebas individuales por perfiles completos, para chequeos más profundos en los pacientes con
diferentes patologías crónicas como la diabetes, otros trastornos endocrinológicos, etc. Así como el
nuevo concepto de chequeos de rutina para el descubrimiento de trastornos asintomático (Presión
Sanguínea, Cáncer, etc.) Esto además de la necesidad de la rapidez y las nuevas tendencias mundiales
en la modernización de las metodologías y estándares de calidad. Pero para poder conocer acerca de la
automatización en el área de Química Clínica es necesario primero entender los conceptos sobre los
cuales se basan estos equipos.

Hay muchas ventajas en la automatización de las áreas de laboratorio clínico, uno de ellos es
incrementar el número de pruebas que realiza un laboratorio clínico en un determinado periodo de
tiempo. Otro es reducir los costos de mano de obra calificada, otro aspecto importante es reducir el
índice del error humano para bajar así la variabilidad de resultados de laboratorio. Esto permite
mejorar los resultados en los programas de control externo de la calidad y se corrigen los errores
inherentes a la metodología. Además se eliminan los errores potenciales de los procesos manuales por
mal pipeteo, calculo y trascripción de resultados.

EL ENTORNO AUTOMATIZADO DEL ÁREA DE QUÍMICA CLÍNICA

Actualmente hay que estar muy consciente de las distintas fases a las cuales se va a aplicar el proceso
de la automatización, tomando en cuenta las tres fases principales de un proceso metodológico:

Fase preanalítica
Fase Analítica
Fase postanalítica

En la mayoría de los procesos es lo mas común automatizar a la fase analítica del procedimiento
metodológico, pero siempre en la búsqueda del concepto de calidad total actualmente se han
incorporado las tres fases en un solo conjunto denominado el Entorno automatizado del área de
química clínica. En este entorno hay que saber reconocer los pasos necesarios para imitar y mejorar
las técnicas manuales. Los pasos principales en un procedimiento generalmente se pueden enumerar:

1. Preparación e identificación de la muestra.

2. Medición de la muestra y entrega.
3. Sistemas de reactivos y entrega
4. Fase de Reacción química
5. Fase de Medición.
6. Procesamiento de señal y manejo de datos.

La exactitud y precisión pueden tener variaciones mínimas empleando equipos automatizados, cuando
se les da el mantenimiento y uso adecuado. De lo contrario se corre el riesgo de tener errores
sistemáticos graves que puede afectar los resultados emitidos; el control de calidad ayuda a detectar,
corregir y prevenir estos tipos de errores.

las principales áreas automatizadas en el laboratorio clínico son:  Química Clínica  Hematologia
 Inmunodiagnostico o tamizaje  Fraccionamiento y extracción de componentes de banco de
sangre.
ESTADÍSTICA APLICADA AL CONTROL DE CALIDAD EN BIOQUÍMICA CLÍNICA

La estadística proporciona al Químico Clínico las herramientas necesarias para el tratamiento objetivo
y la interpretación de datos (resultados, valores de referencia, valores de material control, etc.) así
como para el diseño de experimentos y su correcta evaluación. Es necesario conocer los elementos
indicadores de la calidad como son la exactitud (veracidad) y la precisión. Para ello se calcula el
Coeficiente de Variación (CV) para medir la imprecisión y el % de Veracidad para saber la
inexactitud.

Existen dos tipos de control de calidad, el interno (CCI) y la evaluación externa (EEC). El CC! es
aquel que realiza un laboratorio para evaluar y validar todos los análisis que en él se llevan a cabo;
puede ser dentro del mismo ensayo, intraanálisis, para estimar la precisión y la desviación o en
ensayos del mismo mensurando en diferentes días, Interanálisis, con el cual se evalúa la
reproducibilidad y la desviación con respecto a los anteriores.

Tanto el CCI como la EEC son capaces de detectar los errores y alertar sobre funcionamientos
incorrectos, asi como, identificar, cuantificar y eliminar los errores.

El personal seleccionado para llevar a cabo el control de calidad es supervisado por el profesional
encargado de control de calidad del laboratorio, responsable de indicar las medidas correctivas por
tomar, en caso de presentarse algún tipo de alarma, tendencia o desplazamiento en los análisis. Es
responsabilidad del personal:
• El mantenimiento de equipo
• Uso racional de calibradores y reactivos
• La normativa y calibración del equipo
• La preservación, reconstitución y transporte de calibradores, controles y reactivos

Fórmula 1. Fórmula del coeficiente de variación.

CV= Desviacion estandar x100

Promedio

Fórmula 2. Fórmula del % de veracidad.

%Veracidad= Valor observado-Valor consenso x 100

Valor consenso

Fórmula 3. Fórmula de la puntuación del índice de varianza (PIV)

PIV = %V x100
CVS

El valor de Z–score, se interpreta en cuanto a la magnitud de la desviación del valor obtenido por el
laboratorio frente al valor asignado,con relación a la desviación del grupo.

Fórmula 4. Fórmula del calculo de Z-score.

Z-score= Valor obsevado-media consenso

Desviacion estandar consenso
Factores de determinaciones de calidad deficiente
• Calibración defectuosa • Curvas precalibradas
• Deterioro de la fuente de luz del instrumento
• Deterioro de la integridad del filtro de luz
• Instrumento graduado en forma incorrecta (Espectrofotómetro)
• Material sucio
• Modificación de los métodos originales sin haber comparado la exactitud de los resultados
• No usar patrones
• Reactivos deteriorados o preparados incorrectamente
• Técnica deficiente
• Uso de suero control inadecuado

VALORES DE REFERENCIA

Los valores de referencia para la determinación de glucosa son los obtenidos en la práctica de glucosa.

OBJETIVO

El alumno aprenderá el uso básico del analizador Selectra XL para la determinación de glucosa sérica,
por el método de la Glucosa Oxidasa.

Qué el alumno maneje correctamente el equipo automatizado y realice las determinaciones

correspondientes a la asignatura de análisis clínicos (dependiendo de los reactivos en stock).
Que el alumno lleve a cabo las cartas de control de calidad y las interprete.

FUNDAMENTO

El fundamento de la determinación de glucosa por el método automatizado es el correspondiente a la

determinación de glucosa por el método enzimático de glucosa oxidasa.

MATERIAL Y EQUIPO

Copillas especiales para el equipo Selectra XL

Portacopillas
Micropipetas de 100 μL y 200 μL

MATERIAL BIOLÓGICO

Para la determinación de glucosa por el método automatizado se puede utilizar:

Suero
Plasma
PROCEDIMIENTO

Se analizará diez veces la misma muestra, previa medición del blanco de reactivos y control(es).
Empleará las copas especiales para depositar la muestra en diez posiciones en el rotor de muestras.
Para el uso básico del equipo automatizado Selectra XL consulte el Apéndice 1 al final de este
manual.
Calcule el promedio, desviación estándar, % de veracidad y el CV para la corrida analítica.
Comparar los resultados obtenidos con el método automatizado, con el método manual y discutir las
diferencias, errores y recomendaciones en base a sus resultados.
Elaborar dos cartas control tipo Youden, en una utilizara los valores obtenidos en su técnica manual, y
en la segunda los valores del analizador Selectra XL, empleara el valor unitario de cada tubo de
manera que se interprete como si fuese un laboratorio, al cual se evaluará.
Calcular el Z score en cada punto y evalue a cada laboratorio con respecto a su valor obtenido.
Calcule el PIV en cada punto, y evalúe a cada laboratorio con respecto a su valor de PIV obtenido.

DATOS EXPERIMENTALES

Resultados de la determinación de glucosa

Concentración de
%veraci Control
Copa Equipo glucosa
dad
(mg/dL) (mmol/L) 1 2 3
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
X
DE
CV

TRATAMIENTO DE LOS DATOS

Calcular del promedio, desviación estándar, % de error y el CV para la corrida analítica.

Concentración de Glucosa Z
Tubo Equipo %V PIV
Método Manual Método Automatizado score
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
X
DE
CV

Tabla 1. Puntuación del PIV

Valores del PIV Interpretación

1 a 50 Excelentes
51 a 100 Muy Buenos
101 a 150 Regulares
151 a 200 Malos
201 a 300 Muy Malos
301 a 400 Pésimo

La escala de interpretación,acorde con ISO17043 es:

|Z-score| ≤2 Satisfactorio
2< |Z-score| ≥3 Cuestionable
|Z-score| >3 Insatisfactorio

BIBLIOGRAFÍA

Todd-Sanford, Davidsohn, John Bernard Henry. 2002. Diagnóstico y tratamiento clínico por el
laboratorio. Ed. Salvat Barcelona, España.
Roy N. Barnett. 1983. Estadística en el laboratorio clínico: aplicaciones al control de calidad y valores
de referencia. Reverte España.
Instructivo de uso Selectra XL. 2009. Randox. México
Azzimonti Renzo, Juan Carlos. La concordancia entre dos tests clínicos para casos binarios:
problemas y solución. Acta bioquím. Clín. Latinoam.
Alva E S y cols. Programa de evaluación de la calidad entre laboratorios, Análisis procesos. Lab acta
1992; (4): 156-62.
Alva E. S, y cols. , Programa de evaluación de la calidad entre laboratorios, Resultados de cuatro años.
Lab acta 1994; (6): 131-37. 11. Brambila E. y cols.
Estadigrafos aplicados en el programa de evaluacion externa de la calidad (PEEC) Gobierno de Chile.
2012
ANOTACIONES
 APENDICE

CONSTRUCCION DE LAS GRAFICAS DE YOUDEN

Las gráficas de Youden se utilizan para analizar datos entre laboratorios y comparar tanto la
variabilidad dentro de un mismo laboratorio como la variabilidad entre laboratorios.

Este gráfico se utiliza para evidenciar de manera visible la dispersión de los resultados del grupo de
laboratorios representados por un punto en los ejes cartesianos y se utiliza una elipse/cuadros de
confianza del 95% para interpretar estos resultados. Esta gráfica tiene la ventaja de que los
laboratorios pueden evidenciar fácilmente como difieren sus resultados de los demás participantes.

8 8

7 7
LABORATORIO2
LABORATORIO2

6 6

5 5

4 4

3 3

2 2
2 2 3 3 44 5 5 6 67 8 7 9 8
LABORATORIO1
 A B

Figura 1. Ejemplo de graficos de Youden. A) Grafico de Youden empleando el circulo de confianza. B)

Grafico de Youden empleando los cuadros de confianza.

Componentes del gráfico de Youden

Origen Es el punto de coordenadas ( , ) donde se da origen al plano corresponde a las medianas o

promedios respectivos de los resultados de X y de Y de todos los laboratorios participantes.

Ejes XY Coordenadas con escala adecuada para representar todos los resultados de los laboratorios
participantes

Líneas medianas Líneas paralelas a los ejes que pasan por el punto origen y dividen al gráfico en
cuatro cuadrantes

Línea de 45º Línea diagonal a 45º que pasa por el origen bisectando los cuadrantes inferior izquierdo
y superior derecho

Resultados del laboratorio Punto de coordenadas ( , ) resultados de las concentraciones de la

característica determinada por los laboratorios en las muestras A y B respectivamente

Círculo/Cuadro límite del 95 % Círculo con centro en el origen (valores de consenso) y radio igual
a la desviación típica multiplicada por un factor de confianza, de tal forma que el círculo contendría al
95 % de los resultados si los errores sistemáticos fueran eliminados. Es igualmente valido obtener las
desviaciones estandar 1DS y 2 DS de los valores en X y Y respectivamente y trazar un cuadrado que
contendra igualmente el 95% de los resultados.

Criterios
de

interpretación:

−Entre + 1 DS se considerará bueno.

−Entre + 1 DS y + 2 DS será aceptable.
−Fuera de + 2DS será inaceptable.
−La exactitud es considerada como la proximidad de los valores al origen.
−Se considerarán valores divergentes aquellos que se encuentres en los cuadrantes superior izquierdo
e inferior derecho en donde uno de los sueros controles da valores altos y el otro bajos con respecto al
origen.
−Se considerarán como valores consistentes, aquellos que se encuentren en el cuadrante superior
derecho e inferior izquierdo, en donde los controles dan valores altos o bajos con respecto al origen.
Los puntos en el cuadrante inferior izquierdo y superior derecho pero alejados del origen reflejan
una tendencia de resultados altos o bajos en ambos materiales.
-Los puntos alejados de ambos ejes indican resultados erráticos.
-Los puntos conformando una elipse angosta y alargada indican dificultades con el método.
-Un punto cercano a uno de los ejes pero alejado del otro indican resultados buenos en un
material pero malos en el otro.
-Los puntos cercanos a la línea de 45° pero alejados del origen indican errores sistemáticos.
-Los puntos alejados de la línea de 45° indican errores aleatorios grandes y son evidencia clara de
desviación importante con el método de ensayo utilizado.