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    SEROLOGIA

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    Carmen Nathalia OrdoÑez Vargas
    Este documento compara tres pruebas cualitativas para detectar PCR (PCR-LATEX de MONLAB, FR-LATEX de SPINREACT y ASTO-LATEX de SPINREACT), la prueba de Widal de SPINREACT, la prueba VDRL de WIENER LAB, y la prueba de VIH 1/2 de ALERE. Describe los procedimientos de cada prueba, incluida la adición de suero y reactivos, la mezcla y el tiempo de observación requerido para cada paso. También resume los posibles resultados e interpretaciones de

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    PCR-LATEX (MONLAB) FR-LATEX (SPINREACT) ASTO-LATEX (SPINREACT)

    PROCEDIMIENTO CUALITATIVO PROCEDIMIENTO CUALITATIVO PROCEDIMIENTO CUALITATIVO

    Agregar 25 uL de suero + 25 uL de reactivo Agregar 50 uL de suero + 50 uL de reactivo Agregar 50 uL de suero + 50 uL de reactivo


    (mezclar x 2 min) (mezclar x 2 min) (mezclar x 2 min)
    Observar la presencia o ausencia de Observar la presencia o ausencia de Observar la presencia o ausencia de
    aglutinación aglutinación aglutinación
    PROCEDIMIENO CUANTITATIVO PROCEDIMIENO CUANTITATIVO PROCEDIMIENO CUANTITATIVO
    Muestra positiva se realiza dilución Muestra positiva se realiza dilución Muestra positiva se realiza dilución
    1.- Agregar 25 ul de solfi 1.- Agregar 50 ul de solfi 1.- Agregar 50 ul de solfi
    + + +
    25 ul de suero 50 ul de suero 50 ul de suero

    ⅟2 ⅟4 ⅟2 ⅟4 ⅟2 ⅟4

    ⅟8 ⅟16 ⅟32 ⅟8 ⅟16 ⅟32 ⅟8 ⅟16 ⅟32

    2.- Realizar la dilución 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; 2.- Realizar la dilución 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; 2.- Realizar la dilución 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; 1/32;
    1/32; 1/64…… 1/32; 1/64…… 1/64……
    3.- Agregar 25 uL de reactivo a cada dilución 3.- Agregar 50 uL de reactivo a cada dilución 3.- Agregar 50 uL de reactivo a cada dilución
    (mezclar x 2 min) y observar el corte de (mezclar x 2 min) y observar el corte de (mezclar x 2 min) y observar el corte de
    aglutinación y multiplicar por el factor de aglutinación y multiplicar por el factor de aglutinación y multiplicar por el factor de
    referencia. referencia. referencia.
    La concentración aproximada de PCR en la La concentración aproximada de FR en la muestra La concentración aproximada de ASTO en la
    muestra del paciente se obtiene aplicando la sigte del paciente se obtiene aplicando la sigte formula: muestra del paciente se obtiene aplicando la sigte
    formula: 6x título de la dilución de PCR=mg/l 8x título de la dilución de FR= IU/ml formula: 200x título de la dilución de ASTO= UI/ml
    REACCION DE WIDAL (SPINREACT) VDRL (WIENER LAB) VIH 1/2 (ALERE)
    PROCEDIMIENTO CUALITATIVO PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA PROCEDIMIENTO CUALITATIVO
    Agregar 50 ul de
    O H A B 3.- Interpretar a
    suero
    VDRL los 15 minutos
    +
    1 gota de Reactivo
    VDRL 2.- Agregar 50
    ul de suero

    1.- Retirar lamina


    protectora
    reactivo Ag. O Ag.H Ag.AH Ag.BH
    suero 50ul 50ul 50ul 50ul
    Agitar horizontalmente la placa a 180 rpm Retire la cubierta protectora de la tira y coloque
    durante 4 minutos. Observar inmediatamente en una superficie plana y seca.
    Mezclar 1 minuto a 100 rpm y observar al en microscopio con lente de 40 x Transfiera 50ul de suero en la superficie
    microscopio la presencia o ausencia de absorbente
    microaglutinación.
    PROCEDIMIENO PARA MUESTRAS POSITIVAS PROCEDIMIENO PARA MUESTRAS REACTORAS POSIBLES RESULTADOS

    En los casos positivos se debe realizar ⅟2 ⅟4 ⅟8


    diluciones 1/40 dil ,1/80dil, 1/160 dil y NO REACTIVO
    1/320 dil.
    ⅟16 ⅟32 ⅟64
    reactivo Ag. O Ag.H Ag.AH Ag.BH Titulo
    suero 40ul 40ul 40ul 40ul 1/40 REACTIVO
    Suero 20ul 20ul 20ul 20ul 1/80
    Suero 10 ul 10 ul 10ul 10ul 1/160 1.- Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8,
    suero 5 ul 5ul 5ul 5ul 1/320 1:16, 1:32…. Con 50 uL suero y 50 uL de solución
    fisiológica y realizar para cada dilución la prueba.
    2.- Agregar una gota de Reactivo VDRL para cada
    dilución.
    3.- Mezclar po4 4 minutos a 180 rpm y observar el
    título de corte al microscopio con lente de 40x. INVALIDO
    La determinación de estos anticuerpos forma las La concentración aproximada de Reaginas en la No Reactivo: si aparece solamente una línea de
    bases para el ensayo de Widal que establece que muestra del paciente se obtiene con el título más color rojo(Control) en la ventana de resultado.
    altos niveles de anticuerpos O y H superiores a alto. Reactivo: La presencia de dos bandas de color rojo
    1/80 en suero, es indicativo de infección reciente (“paciente” y “Control”) dentro de la ventana de
    por salmonelosis resultado, sin importar cual aparezca primero
    HEPATITIS A (SD BIOLINE) HEPATITIS B (SD BIOLINE) HEPATITIS C (SD BIOLINE)
    PROCEDIMIENO DE LA PRUEBA

    1.- Agregar 5 uL de Suero en el pocillo “S” con una


    micropipeta o un capilar graduado.

    2.- Agregar 4 gotas del “diluyente” en el pocillo


    “circular”

    3. Interpretar los resultados a los 20 minutos.

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