Modulo Propagacion y Micropropagacion de Plantas PDF

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD
Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente

Contenido didáctico del curso Propagación y Micropropagación de Plantas
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS AGRÍCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO
AMBIENTE
30161- PROPAGACIÓN Y MICROPROPAGACIÓN DE PLANTAS
JUAN CARLOS PADILLA OSORIO
Director Nacional
PEREIRA, RISARALDA
año 2010
1
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS AGRÍCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO
AMBIENTE
30161- PROPAGACIÓN Y MICROPROPAGACIÓN DE

PLANTAS
2
ASPECTOS DE PROPIEDAD INTELECTUAL Y VERSIONAMIENTO
El contenido didáctico del curso académico: PROPAGACIÓN Y

MICROPROPAGACIÓN DE PLANTAS fue diseñado inicialmente en el año 2005
por el Ingeniero Agrónomo Gabriel Orlando Pardo Rodriguez.
Actualmente, el módulo es actualizado por el Ingeniero Agrónomo Juan Carlos

Padilla Osorio, del CCAV Eje cafetero, zona Occidente quien es Especialista en
Pedagogía para el Desarrollo del Aprendizaje Autónomo (UNAD) y que
actualmente cursa el doctorado en Desarrollo Sostenible con la Universidad
Católica de Ávila, España.
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INDICE DE CONTENIDO
UNIDAD 1. LA PROPAGACIÓN SEXUAL 10
CAPÍTULO 1. LA SEMILLA - GENERALIDADES 10
Lección 1. La reproducción sexual 12
Lección 2. Morfología de la semilla. 13
Lección 3. Germinación de la semilla. 15
Lección 4. Factores que afectan la germinación. 17
 Humedad. 19
 La temperatura. 19
 El Oxígeno. 20
 La luz. 21
Lección 5. Latencia de la semilla. 24
 Tipos de latencia. 26
 Métodos para superar la latencia. 28
CAPÍTULO 2. ANÁLISIS DE SEMILLAS 32
Lección 6. Vigor. 32
Lección 7. Pruebas de vigor. 34
 Pruebas directas. 34
 Pruebas Indirectas. 35
 Pruebas de vigor recomendadas. 35
Lección 8. Análisis de semillas. 38
 Análisis de Pureza. 38
 Análisis de peso. 39
 Análisis de germinación 39
 Germinación por peso. 40
 Valor real 41
Lección 9. Ejercicio de aplicación. 42
Lección 10. Envigoramiento. 44
4
CAPÍTULO 3. LOS VIVEROS. 45
Lección 11. Tipos de viveros y criterios para su establecimiento. 46
 Vivero temporal. 46
 Vivero permanente. 46
 Criterios para el establecimiento de un vivero. 46
Lección 12. Construcción de un vivero. 49
 El ambiente de propagación. 49
 Factores atmosféricos. 49
 Factores edáficos. 49
 Factores bióticos. 50
Lección 13. Tipos de estructuras para la propagación. 51
 Ambientes completamente controlados. 51

 Ambientes semicontrolados. 51
 Ambientes mínimamente controlados. 53
Lección 14. Sistemas de siembra en los viveros. 54
 Germinadores. 55
 Producción a raíz desnuda. 58
Lección 15. Otros aspectos para construcción de viveros. 59
Actividades de Autoevaluación de la Unidad 1 63
UNIDAD 2. LA PROPAGACIÓN ASEXUAL. 65
CAPÍTULO 4. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL (INJERTOS) 65
Lección 16. Generalidades de la propagación asexual. 65
 Mutaciones. 66
Lección 17. El Injerto – generalidades. 68
 Condiciones para realizar un injerto. 69

 Afinidad. 69
 Compatibilidad. 70
 Influencia entre las partes injertadas. 72
 Producción de plantas madre. 73
5
 Selección de plantas madre. 74

 Recomendaciones para tener éxito en la realización de un injerto. 74
Lección 18. Principales técnicas de injertación (Parte 1). 75
 Injerto doble. 75
 Injerto de escudete o yema. 75
 Injerto en T invertida. 76
 Injerto en forma de parche o chapa. 78

 Injerto de hendidura simple. 79
 Injerto de doble hendidura. 80
 Injerto inglés. 82
 Injerto de corona. 83
 Injerto de enchapado lateral. 85
 Injerto de aproximación lateral 85
 Injerto de aproximación en puente. 85
CAPÍTULO 5. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL
(ACODOS Y ESTACAS) 89
Lección 21. Principales técnicas de acodo (Parte 1). 89
 Acodo aéreo. 89
 Acodo de punta. 90
Lección 22. Principales técnicas de acodo (Parte 2). 92
 Acodo subterráneo simple. 92

 Acodo en montículo. 93
Lección 23. Propagación por estacas (Parte 1). 95
 Ventajas e inconvenientes del estacado. 95

 Criterios para la selección de estacas. 95
Lección 24. Propagación por estacas (Parte 2). 97
 Estacas de madera dura. 97

 Estacas de madera suave. 97
 Estacas de hojas 98
6
Lección 25. Enraizamiento de estacas. 99
 Aspectos que influyen en el enraizamiento de estacas. 99
CAPÍTULO 6. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL
(TALLOS MODIFICADOS). 101
Lección 26. Propagación vegetativa por tallos modificados (Parte 1). 101
 Bulbos. 101
 Cormos. 103
 Tubérculos. 105
 Rizomas. 106
 Seudotallos. 107
 Estolones 107
UNIDAD 3. MICROPAGACIÓN DE PLANTAS. 109
CAPÍTULO 7. ASPECTOS BÁSICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS
VEGETALES (PARTE 1) 109
Lección 31. Generalidades del cultivo de tejidos. 109
 Historia del cultivo in vitro. 109

 Definición del cultivo de tejidos. 111
Lección 32. Constitución de un laboratorio de cultivo de tejidos. 113
 Area de preparación. 113

 Area de lavado y esterilización. 113
7
 Area de transferencia. 113

 Area de incubación. 113
 Area de adaptación 114
 Equipo y elementos necesarios para el montaje de un laboratorio 114
Lección 33. Los medios de cultivo. 116
 Composición de los medios de cultivo. 117
Lección 34. Preparación de un medio de cultivo (Parte 1). 123
 Preparación de un medio partiendo de soluciones stock. 125

 Cálculo de soluciones stock. 126
Lección 35. Preparación de un medio de cultivo (Parte 2). 129
 Cálculo de concentraciones hormonales. 129

 Cálculo de ppm y mg/l. 129
 Ejercicio de aplicación. 129
 Cálculo en mM y µM 130
CAPÍTULO 8. ASPECTOS BÁSICOS DEL CULTIVO DE
TEJIDOS VEGETALES (PARTE 2). 131
Lección 36. Control preventivo de la contaminación (Parte 1). 131
 Los tejidos. 131

 El área de trabajo. 132
Lección 37. Control preventivo de la contaminación (Parte 2). 133
 Los instrumentos. 133

 El investigador. 133
Lección 38. La Esterilización y sus métodos. 134
 El autoclave. 134
 Filtración. 135
Lección 39. Posibles respuestas en el cultivo de tejidos vegetales (Parte 1). 136
 Sin respuestas. 136

 Cultivo infectado. 136
 Oxidación del explante. 136
8
Lección 40. Posibles respuestas en el cultivo de tejidos vegetales (Parte 2). 138
 Formación de callo. 138

 Callo más regeneración directa. 138
 Vitrificación. 138
CAPÍTULO 9. LA MICROPROPAGACIÓN DE PLANTAS. 137
Lección 41. Generalidades de la micropropagación. 137
 Ventajas y desventajas de la micropropagación. 137
Lección 42. Etapas de la micropropagación. 141
 Etapa 0: Preparación del material vegetal. 141

 Etapa 1: Establecimiento del cultivo. 141
 Etapa 2: Multiplicación. 141
 Etapa 3: Enraizamiento. 143
 Etapa 4: Endurecimiento 144
 Factores que influyen en la micropropagación. 145
Lección 43. Fases de laboratorio. 148
 Fase de aislamiento. 148

 Fase de inoculación. 148
 Fase de repicado. 148
Lección 44. Propagación por segmentos de hoja y por meristemos. 149
 Propagación por segmentos de hoja. 149

 Propagación por meristemos. 149
 Aplicaciones. 150
 Los explantes. 152
Lección 45. Segmentos nodales. 153
BIBLIOGRAFÍA 158
9
UNIDAD 1. PROPAGACIÓN SEXUAL
CAPITULO 1. LA SEMILLA – GENERALIDADES
INTRODUCCIÓN
Toda planta crece y desarrolla durante su ciclo de vida , dentro del cual la
reproducción hace posible su perpetuación.
Las células vegetales contienen una serie de instrucciones (localizadas en los

genes) que controlan la forma como se desarrollan y dividen dentro de la planta.
Durante el crecimiento normal de la planta, las células se dividen, y las nuevas
células generadas contienen idénticos caracteres e información genética a las
células madre; este tipo (le división se llama Mitosis y ocurre permanentemente
durante la vida de la planta.
Cuando llega la época de reproducción, ésta suele sucederse de dos diferentes

maneras: en la primera se separa una parte del cuerpo vegetal y se desarrolla
como nueva planta. A este tipo de reproducción se le llama asexual o vegetativa y
su estudio y aplicación práctica, será ampliado más adelante.
El segundo tipo de reproducción considerado el más importante es el que se

conoce como reproducción sexual.
Un zigoto resultante de la fertilización o de la unión de los gametos masculinos y

femeninos se convierte en la estructura reproductiva por excelencia de una
planta, que es la semilla obtenida a través de un proceso sexual.
Una semilla es esencialmente un embrión o una planta joven en la etapa de

quietud o inactiva. En este estado, el embrión tiene una tasa metabólica
extremadamente baja.
La mayoría de las semillas pueden sobrevivir con sus reservas almacenadas por
períodos prolongados. La semilla es la forma primaria por la cual una planta se
reproduce en el momento en que las condiciones son las más convenientes.
10
Durante la fertilización, los genes que controlan características de la planta

regeneran y recombinan de muchas diversas maneras, dando por resultado las
semillas que pueden o no ser similares a sus padres.
Las semillas que resultan de la auto-polinizacion pueden producir especímenes

muy homogéneos, mientras que no lo son aquellos que resultan de la
polinizacion cruzada que generalmente proporcionan la diversidad genética para
la obtención y la selección de los nuevos cultivares (variedades cultivadas) y son a
menudo fuentes de variabilidad y diversidad en las plantas.
La regeneración de la semilla es la manera más económica de obtener una gran

cantidad de plantas. La mayoría de las especies de plantas cultivadas se
reproducen por semillas.
11
Lección 1. La reproducción sexual
Durante el proceso de floración, las plantas superiores producen dos tipos de

células especializadas que al unirse realizan la fecundación, como iniciación al
ciclo de reproducción.
En las flores masculinas, se producen sobre las anteras, las células de polen-
células reproductoras masculinas-, las cuales en el proceso de polinización se
trasladarán a las flores femeninas para unirse con los óvulos, que son las células
reproductivas femeninas, producidas en el saco embrionario. Cada óvulo
fecundado tiene la posibilidad de desarrollarse para conformar una semilla y ésta a
su vez, puede originar una nueva planta.
Una secuencia general característica de la reproducción sexual en plantas

superiores, se inicia con la aparición de células reproductivas especializadas
denominadas microsporas y megasporas: por meiosis dando lugar el grano de
polen y al óvulo respectivamente.
La célula madre de la megaspora, mediante divisiones sucesivas, origina la

nucela, que es el tejido en el cual se ubica el óvulo y los tegumentos que le
brindan protección su separación se denomina micropilo y es el lugar por donde
penetra el grano de polen durante la fertilización; el óvulo es llamado gametofito
femenino.
La célula madre de la microspora origina en la flor los granos de polen-gametofito

masculino- los cuales se unirán con los óvulos para conformar un proembrión
(zigoto), el cual se multiplica formando el embrión, elemento fundamental de la
semilla: esta a su vez germina y origina una nueva planta.
Después de la fertilización, el núcleo del zigoto permanece en reposo por un corto

tiempo. El núcleo del endospermo se divide rápidamente y posteriormente solo
después de la división del endospermo ocurre la división del núcleo del zigoto que
forma un filamento conformado por 2-4 células , que al elongarse y continuar
dividiendose forman el suspensor que soportará al embrión en el endospermo y
por procesos de división continua se conforma finalmente el embrión.
12
Lección 2 Morfología de la semilla
Se consideran dos clases en las plantas que producen semillas , las

angioespermas en las que sus semillas llevan sus óvulos dentro del ovario, y las
gimnospermas en las que la estructura que los contiene es muy diferente, pues
no constituye una verdadera flor y las semillas se ubican en pares en la base de
las escalas de los conos.
Entre las angioespermas, las plantas que tienen dos cotiledones se clasifican
como dicotiledoneas y las que cuentan con un solo cotiledón como
monocotiledoneas. Las gimnospermas pueden tener hasta 15 cotiledones.
La mayoría de las semillas consisten en tres porciones: embrión, una planta

miniatura dentro de la semilla; endospermo, reservas almacenadas del alimento
para el embrión creciente; y la cubierta de la semilla (testa), que abarca y protege
el embrión y el endospermo contra el daño, pérdida de exceso de agua, y otras
condiciones desfavorables. El embrión tiene unas o más hojas miniatura de la
semilla (cotiledones), un vástago embrionario (plumula o epicotilo), una raíz
embrionaria (radícula), y una hipocotilo, la zona de la transición entre el vástago
embrionario y raíz.
El endospermo contiene las reservas almacenadas del alimento integradas por

carbohidratos, proteínas, aceites, y otras sustancias bioquímicas. Todas las
semillas contienen reservas almacenadas de alimento en el endospermo, aunque
en ciertas especies. Se pueden encontrar reservas del alimento en los
cotiledones.
En algunas, la cantidad de reservas puede ser absolutamente pequeña,

generalmente, cuanto más grande es la reserva del alimento, mayor es el vigor de
la planta en el semillero. Las semillas de mayor tamaño tienen generalmente más
reservas del alimento que las semillas pequeñas .
Hay cerca de 250.000 diversas plantas con semilla en el mundo. Cada especie
tiene sus el propios morfológico la forma única de semilla, que se puede identificar
por su tamaño, forma, color, y su estructura externa.
13
Figura 1. Semilla de maíz. Semilla con nutrientes en el endospermo
Figura 2. Semilla de fríjol. Semilla con nutrientes almacenados en los cotiledones
14
Lección 3. Germinación de la semilla
El proceso de la germinación comienza con el proceso de imbibición que consiste

en la toma de agua por la semilla. La velocidad y forma como se da este proceso
depende esencialmente de la composición de la semilla, la permeabilidad de su
cubierta, la temperatura del suelo y la duración del proceso .
El segundo proceso ocurre cuando se presenta la activación enzimática que

permite el ablandamiento de tejidos, especialmente de las sustancias de reserva ,
facilitando el transporte de nutrientes hacia al embrión y estimulando las
reacciones químicas que reducen o sintetizan compuestos asimilables por el
embrión. Aquí participan las hormonas de crecimiento vegetal del grupo de las
citokininas. incluyendo la kinetina , actuando en unión con las auxinas
promoviendo la división célular y el crecimiento lateral .
Posteriormente se inicia el crecimiento del embrión , donde generalmente, la

radícula emerge primero de la capa de semilla ablandada o rota, crece hacia
abajo, y se convierte en el sistema primario de la raíz. Mientras la plumula crece
hacia arriba para formar el vástago o brote.
Luego se presenta la ruptura de la cubierta y la emergencia de la plántula y como

último paso el establecimiento de la misma donde ocurre la fotosíntesis a un nivel
capaz de alimentar la planta, generalmente cuando se forman las primeras hojas
verdaderas. En esta etapa, se termina la germinación.
n algunos casos, el cotiledón o los cotiledones no permanecen debajo de la

superficie de la tierra, lo que se conoce como germinación epigea (ver figura 3)
,aunque en la mayoría de las especies , los cotiledones permanecen en el suelo
en el interior de la cubierta seminal (germinación hipógea) . (figura 4)
15
Figura 3 Germinación epígea del frijol.
Figura 4 Germinación hipógea de la arveja
16
Lección 4. Factores que afectan la germinación.
Cada especie de planta tiene sus propios requisitos para que ocurra el proceso de
germinación, siendo los más importantes los siguientes
 Humedad
La necesidad de la humedad es el requisito previo más importante para activar la
germinación. Mientras que algunas semillas requieren poca humedad para la
germinación, otras, tales como la Nymphaea spp. (lirio del agua) y otras plantas
acuáticas, se deben sumergir totalmente en agua.
Las semillas con capas de semilla duras o impermeables pueden requerir un

tratamiento especial (el ablandar o escarificación) para permitir la toma eficiente
del agua. Generalmente, el agua alcanza la semilla a través de contacto con el
medio que por lo general es el suelo. Una vez que el proceso de la germinación
comience, un nivel adecuado de la humedad se debe mantener ,la baja humedad
temporal puede dar lugar a la muerte de la semilla o de la planta de semillero.
Demasiada humedad puede hacer que el suelo se sature de agua y prive a la
semilla del oxígeno, conduciendo a la muerte.
Tabla 1. Contenido de humedad necesaria para que ocurra la germinación de

algunas semillas de especies cultivadas.
Cul t i vo Co nt e ni d o d e hume d a d
Ma í z ( Z e a ma ys) 30.5%
So ya ( G l ycin e ma x) 50.0%
Re mo l a ch a ( Be t a ssp . ) 31.0%
Al g o d ón ( G o ssypiu m sp p . ) 50-55.0%
Hi g u eri lla ( Ri ci n u s co mu n i s) 32-36.0%
Ar r o z ( O r yza sa ti va ) 32-35.0%
Ave n a ( Ave n a sa ti va) 32-36.0%
Ma n í ( Ar a chi s h yp o ga e a ) 50-55.0%
Adaptado de Burck, B. and J. C. Delouche. 1959. W ater absorption by

seeds. Proc. AOSA 49:142
17
La toma de agua por las semillas durante el proceso de germinación se puede

describir usando el siguiente modelo en tres etapas:
Figura 5.Etapas de la toma de agua por la semilla
Las semillas secas en la etapa I (imbibición) tienen un alto potencial negativo del
agua debido a las características coloidales de la capa de semilla.
Las superficies de proteínas, de la celulosa, del almidón, y de otras sustancias

deben primero hidratarse. La toma o la imbibición del agua en la etapa I es física,
dando por resultado el ablandamiento o ruptura de la cubierta de la semilla y un
aumento en el volumen de la semilla. (ver figura 2)
La toma de agua continúa en la etapa II (metabolismo e hidrólisis activos) se

activan las enzimas almacenadas y estimula la síntesis de nuevas sustancias .
Estas enzimas hidrolizan y transforman algunas de las reservas almacenadas que

se usarán para la producción de más células y tejidos finos. Estos procesos
metabólicos bajan el potencial del agua del embrión y de los tejidos finos
circundantes.
La etapa II parece ser una fase relacionada con la toma de agua y el crecimiento.
Durante esta etapa, el índice de la absorción del agua es gobernado por el
potencial osmótico interno.
18
El crecimiento rápido de la etapa III (germinación visible) de la radícula y de la

plúmula define la tercera etapa. ( ver figura 5)
 La temperatura
Cuando la humedad es adecuada, la temperatura es el requisito siguiente en

importancia para la germinación.
La temperatura afecta el nivel en la cual el agua es imbibida y el índice de

procesos metabólicos tales como el desplazamiento de alimentos y las hormonas,
división y alargamiento de células, y otros procesos fisiológicos y bioquímicos.
Los cambios que ocurren durante la germinación comprenden procesos

metabólicos que se producen en estrecha relación con la temperatura, y su efecto
se expresa en la capacidad germinativa o en la velocidad de germinación.
Las temperaturas cardinales para la germinación de las semillas se clasifican en

temperatura óptima, máxima y mínima, donde el intervalo térmico en el que las
semillas germinan son características sujetas a la selección natural. Por esto, con
frecuencia se presentan como adaptaciones muy claras a los hábitat en los que
las plantas se desarrollan, y hay diferencia entre las especies, incluso entre
distintas poblaciones de la misma especie de acuerdo con su distribución
geográfica.
Muchos fisiólogos han considerado que las temperaturas cardinales son

parámetros fisiológicos muy útiles en el estudio de la germinación. Sin embargo,
pueden presentarse dificultades al tratar de fijar en forma precisa las temperaturas
cardinales de una especie, ya que con frecuencia éstas varían según el estado de
maduración de las semillas o son difíciles de detectar debido a la lentitud de la
germinación a ciertas temperaturas.
La temperatura es un factor importante de la regulación de la sincronización de la

germinación, debido a su papel en el control de la inactividad y germinación de la
semilla, además de su adaptación al clima.
Generalmente, las altas temperaturas inducen o refuerzan la inactividad; mientras

las bajas temperaturas superan la inactividad. La mayoría de las semillas pueden
tolerar el tiempo cálido prolongado si se mantienen secas, y algunas pueden
soportar incluso mayores temperaturas extremas.
19
Temperatura mínima. Por debajo de esta temperatura los proces os

de germinación no se pueden detectar visualmente, dentro de un
período razonable de tiempo.
Bajas temperaturas pero por encima del punto de congelación no son

letales a las semillas.
Temperatura máxima. Es la t emperatura por encima de la cual los

mecanismos de germinación no operan y por lo tanto no se da creci -
miento del embrión. En contraste con la temperatura mínima, la má -
xima es fácil de determinar ya que temperaturas superiores a la
máxima causan daños irreversibles a las semillas (excepción a es ta
regla son las semillas que entran en latencia a altas temperat uras).
Temperatura óptima. Esta se puede definir como la temperatura a la

cual se da el porcentaje máximo de germinación en un mínimo de
tiempo.
Como ejemplo, a continuación , se referencian algunas especies y

sus temperaturas de germinación:
T abla 2.T emperaturas de germinación de algunas especies vegetales.
Cultivo T emperatura T emperatura T emperatura
mínima (°C) óptima (°C) máxima (°C)
Arroz 10-12 30-37 40-42
Maí z 8-10 32-35 40-44
T rigo 3-5 15-31 30-43
Tomate 20 20-35 35-40

Soya 8 32 40
 El oxígeno
La mayoría de las semillas requiere una fuente adecuada de oxígeno durante la

germinación. El oxígeno se requiere para el proceso de respiración que permite
oxidar los almidones, las grasas, y otras reservas de alimento, y su utilización es
proporcional a la cantidad de la actividad metabólica.
20
Así, un medio de germinación debe ser flojo, friable, y bien aireado. Las semillas
sembradas en suelos pesados pueden germinar mal, especialmente durante
estaciones húmedas , cuando el suelo se satura y carece a menudo del suficiente
oxígeno.
Profundizar la semilla al plantarla es desfavorable porque la fuente del oxígeno

puede ser restringida o puede suceder que las plantas de semillero no puedan
alcanzar la superficie, especialmente si el suelo o el medio es duro.
 La luz
Si las condiciones de humedad y temperatura son adecuadas, la mayoría de las

semillas germinan en condiciones de oscuridad, particularmente las semillas de la
mayoría de las plantas agrícolas.
Otras son inhibidas parcialmente o totalmente por la luz o la requieren para
germinar.
El estudio del efecto de la luz sobre la germinación se ha mantenido en el primer

plano del interés de los fisiólogos y de los ecofisiólogos durante mucho tiempo.
Actualmente, la cantidad de información disponible en este campo es muy grande.
La fotoinducción o fotoinhibición de la germinación es uno de los casos más claros
del control de un proceso fisiológico por un factor ambiental.
No se sabe cuántas especies de plantas superiores presentan semillas

fotoblásticas (germinación regulada por la luz), ya que la fisiología de las semillas
de la gran mayoría de las plantas no ha sido investigada; sin embargo, existen
evidencias que indican que el porcentaje de especies con semillas fotoblásticas es
particularmente alto entre las plantas anuales.
Las interacciones entre la luz y la temperatura se saben para algunas clases de

semilla. Por ejemplo, la fotosensibilidad puede ser superada alternando altas y
bajas temperaturas.
Son tres las principales bandas del espectro lumínico que tienen acción sobre la
germinación, y corresponden a la franja de 660 nanómetros (rojo), 730
nanómetros (rojo lejano) y la luz comprendida entre 400 y 500 nanómetros (azul),
aunque con efectos mucho menos claros.
Tanto el rojo como el rojo lejano son absorbidos por un compuesto denominado
fitocromo, que es una cromoproteína que actúa como sensor. Este pigmento en su
21
forma activa es inductor de la germinación e interviene en procesos de

permeabilidad, activación de enzimas y expresión genética. La conversión del
fitocromo inactivo (Pr) a fitocromo activo (Pfr) por lo general se lleva a cabo bajo el
efecto de la luz roja, y la reacción opuesta ocurre bajo el efecto del rojo lejano.
Estas dos formas del fitocromo corresponden a cada uno de sus picos de
absorción de luz. Esta reacción de conversión en ambos sentidos está relacionada
con la inducción y la inhibición de la germinación, y puede ser modificada o
controlada por otros factores ambientales como la temperatura o el termoperiodo.
La intensidad de la luz, el fotoperiodo y la cantidad de rojo en relación con el rojo
lejano presente (denominada relación R:RL) modulan la respuesta de las semillas
a la luz a través de este pigmento. La cantidad de fitocromo activo presente en
una semilla en el momento de su liberación determina si ésta puede germinar en
la oscuridad o si requerirá luz para iniciar el proceso.
En los lugares cubiertos de vegetación la luz que llega al suelo es pobre en rojo y
rica en rojo lejano, mientras que en los lugares abiertos ambas longitudes de onda
llegan en igual proporción, debido a que la luz no ha sido filtrada por un dosel
vegetal. El mecanismo de captación de la luz del fitocromo es sensible
principalmente a la calidad de luz, lo que permite a las semillas detectar, en
particular, la proporción de R:RL que llega al suelo.
De esta manera, algunas semillas de plantas de sol pueden permanecer latentes

cuando son dispersadas hacia lugares que están densamente cubiertos de
vegetación y que no serían propicios para su establecimiento. La hojarasca que
cubre al suelo también modifica la relación R:RL, así como otras propiedades
físicas del suelo.
Este tipo de latencia regulada por la luz es muy común en semillas que
permanecen latentes en la oscuridad, enterradas en el suelo, hasta que son
expuestas a la luz durante las prácticas agrícolas. Cuando estas semillas alcanzan
la superficie del suelo quedan expuestas a la luz y germinan.
En las semillas pequeñas la conversión del fitocromo normalmente se realiza a

muy bajas intensidades de luz; sin embargo, la temperatura y el fotoperiodo tienen
influencia directa en el resultado final del proceso, expresado en porcentaje y
velocidad de germinación.
En ocasiones el proceso fisiológico que induce la germinación necesita la luz, y la

germinación total sólo se obtiene cuando la luz y la temperatura actúan
22
simultáneamente. En algunos casos, la temperatura puede provocar que las

semillas germinen en la oscuridad, aun cuando generalmente requieren luz.
La luz y la fluctuación de temperatura interactúan de muchas maneras para

determinar la germinación de las semillas presentes en el suelo en el momento en
que las condiciones para el establecimiento de las plantas son las óptimas.
La regulación de la germinación producida por las fluctuaciones de temperatura, la

calidad de la luz incidente o alguna combinación de ambos factores es común en
hierbas y plantas colonizadoras. Los sensores ambientales de estas semillas
detectan cambios en su ambiente que les indican la aparición de condiciones
favorables para la germinación y establecimiento de las plantas. Estos cambios se
dan cuando la cubierta de plantas se destruye, cuando desaparece la capa de
hojarasca o cuando las semillas son desenterradas por algún disturbio, producto
de un fenómeno natural o de la perturbación por el hombre.
23
Lección 5. Latencia de la semilla.
Una vez que la semilla ha completado su desarrollo se inician los cambios que
darán lugar al establecimiento del reposo en las semillas Este reposo o reducción
del metabolismo se denomina quiescencia cuando la causa de que no ocurra la
germinación es por no disponer de condiciones exógenas adecuadas.
En cambio, el reposo de las semillas se denomina latencia ,dormición, letargo,

reposo o vida latente y se refiere a la ausencia o inhibición del crecimiento vegetal
y en particular, de la germinación por causas internas, aun cuando las condiciones
externas sean adecuadas (temperatura, humedad, luz, etc.)
Algunos autores emplean el término dormición, para referirse a la falta de

germinación debida a un medio desfavorable o a mecanismos inhibidores
residentes en las semillas.
El fenómeno de la dormancia es común, principalmente en semillas de

determinadas hortalizas y forrajeras, algunas frutales , arbóreas y ornamentales,
que no germinan después de la cosecha debido a los mecanismos internos, de
naturaleza física o fisiológica, que bloquean la germinación.
Estos mecanismos son genéticos y acontecen durante el ciclo de vida de la

especie, durante la maduración de la semilla, de modo que, después de la
dispersión, la semilla todavía no estará apta para germinar. Ésta dormancia, que
se instala en la fase de maduración de la semilla, es denominada primaria.
No obstante, en algunas especies, el bloqueo a la germinación se establece luego

de la dispersión de la semilla, inducido por ciertas condiciones de estrés o por un
ambiente desfavorable a la germinación, caracterizando otro tipo de dormancia,
denominada secundaria.
De esta forma, la dormancia de la semilla es un importante estadio del ciclo de

vida de las plantas, caracterizada por la ausencia temporal de la capacidad de
germinación, permitiendo que las especies vegetales sobrevivan a las
adversidades, principalmente a aquellas que dificulten o impidan el crecimiento
vegetativo de la planta. Se trata, por lo tanto, de un fenómeno fundamental para la
perpetuación y la supervivencia de muchas especies vegetales en los más
variados ecosistemas.
También es gracias a la dormancia que semillas de muchas especies no germinan

en el fruto cuando este está todavía prendido a la planta, pues, luego de la
24
maduración fisiológica, y en condiciones ambientales favorables a la germinación -

como, por ejemplo, aumento de la humedad por el exceso de lluvias -, semillas sin
bloqueos al crecimiento del embrión podrán germinar en la planta madre.
Cabe resaltar que la mayoría de las plantas cultivadas actualmente es

representada por variedades, cultivares e híbridos genéticamente mejorados por
procesos de selección que eliminaron la dormancia, pues los objetivos de la
agricultura moderna son la rapidez y la uniformidad de la germinación de la semilla
y de la emergencia de la plántula en campo.
No obstante, existen muchas especies que tienen la supervivencia garantizada por

la dormancia. Lo que varia bastante entre las especies vegetales es el período de
duración de la dormancia, que puede ser de apenas algunos días, de algunos
meses o de varios años. Inclusive para una misma especie, este período puede
variar en función del genotipo, del ambiente donde la semilla fue producida y de
otros factores.
Además, semillas originadas de una misma planta tienen intensidades distintas

de dormancia, para que la germinación ocurra a lo largo del tiempo, en intervalos
regulares, a medida que la dormancia es superada, aumentando la probabilidad
de supervivencia de los individuos.
De esta forma, el impedimento a la germinación de la semilla, establecido por la

dormancia, se constituye en una estrategia benéfica, por distribuir la germinación a
lo largo del tiempo y permitir a la especie "escapar" de condiciones adversas al
crecimiento de la plántula.
Se trata, por lo tanto, de un fenómeno que contribuye para que la germinación de

la semilla ocurra solamente en una época o estación favorable al desarrollo de la
plántula, garantizando la supervivencia de la especie.
Principales causas de la dormancia de semillas
Pueden considerarse las siguientes:
a. Impermeabilidad al agua.
b. Baja permeabilidad a los gases.
c. Resistencia mecánica al crecimiento del embrión.
25
d. Permeabilidad selectiva a los reguladores del crecimiento.
e. Bloqueos metabólicos
f. Presencia de inhibidores.
g. Embriones rudimentarios
h. Adquisición de mecanismos inhibidores.
Las causas por las que no germinan pueden deberse a la existencia de un periodo
cronológicamente regulado de interrupción del crecimiento y de disminución del
metabolismo durante el ciclo vital. Ésta es una estrategia adaptativa de
supervivencia frente a condiciones ambientales desfavorables que se presenta en
algunos seres vivientes.
En las plantas superiores puede existir latencia o interrupción del crecimiento en el

tejido meristemático, por ejemplo en las yemas de crecimiento de las ramas, así
como en las semillas.
El establecimiento de la latencia puede estar regulado por factores hereditarios

que determinan los mecanismos fisiológicos endógenos de las plantas, los cuales
interactúan con factores del ambiente en el que las plantas crecen; esto da lugar,
a la larga, a cambios evolutivos en las plantas.
Entre las condiciones más importantes del ambiente se encuentran las

variaciones climáticas de temperatura y humedad, las variaciones microclimáticas
derivadas de aspectos fisiográficos y bióticos, como la calidad espectral de la luz y
el termoperiodo, así como las características específicas del lugar a las que las
plantas se han adaptado para establecerse y crecer.
Las variaciones micro y macroclimáticas, así como las condiciones hormonales y

nutricionales de la planta progenitora tienen gran influencia en el establecimiento
de la latencia de sus semillas durante su desarrollo, por lo cual pueden existir
variaciones entre cosechas de semillas de una especie, según la época y el lugar
de producción.
 Tipos de latencia
Latencia innata o endógena
Las semillas viables, especialmente de muchas especies de arboles, pueden no

germinar después de un tiempo considerable incluso en condiciones en que el
ambiente para la germinación parece ser ideal.
26
Se presenta en el momento en el que el embrión cesa de crecer (cuando la semilla

aún está en la planta madre) y continúa hasta que el impedimento endógeno cesa,
en ese momento las semillas están en condiciones de germinar en cuanto se
presentan las condiciones ambientales adecuadas.
Latencia inducida o secundaria
Este tipo de latencia se produce cuando las semillas están en condiciones

fisiológicas para germinar y se encuentran en un medio que presenta alguna
característica muy desfavorable, como poco oxígeno, concentraciones de CO2
mayores a las de la atmósfera, temperatura alta, etc., lo que puede producir
alteraciones fisiológicas reversibles en las semillas. En estos casos, las semillas
pueden caer en un estado de latencia secundaria en el que ya no pueden
germinar a pesar de continuar vivas. En algunos casos este tipo de latencia se
rompe por medio de un estímulo hormonal. Algunas veces la latencia inducida
también puede sumarse a otros tipos de latencia o sustituirlos.
En muchas especies, la germinación retrasada resulta de condiciones internas de

los tejidos finos del almacenaje del embrión y del alimento, o de una porción de
estos tejidos finos, que deben experimentar ciertos cambios de desarrollo (los
embriones rudimentarios o no maduros) o fisiológicos antes de que las semillas
germinen.
Si los cambios fisiológicos y mecánicos ocurren: se sintetizan las hormonas y
actúan las enzimas del crecimiento o se desactivan las hormonas activadas, que
inhiben la germinación y se absorbe el agua , se rompe este tipo de latencia.
Latencia impuesta o exógena
En la naturaleza esta latencia se presenta en semillas aptas para germinar en

condiciones adecuadas de humedad y temperatura media, es decir, adecuadas al
hábitat que ocupan, pero que continúan latentes por falta de luz, requerimientos
especiales de temperatura, oxígeno o de otro factor. Esta latencia está controlada
por las condiciones físicas del ambiente que rodea a la semilla, y se presentan en
aquellas que se encuentran en el suelo y que germinan sólo después de una
perturbación que modifique el régimen lumínico o el contenido de oxígeno.
La presencia de inhibidores químicos de la germinación en el embrión o la

inmadurez de éste son probablemente las causas principales de esta latencia. La
duración de la latencia innata es muy variable según la especie, en algunos casos,
incluso puede variar entre las semillas de un mismo individuo.
27
Las semillas de las plantas de las familias de Cornaceae, de Geraniaceae, de

Fabaceae, de Malvaceae, y de Convolvulaceae se caracterizan por esta
condición .
 Métodos para superar la latencia
Como métodos para superar la latencia de las semillas se encuentran la

escarificación y la estratificación de las semillas.
La escarificación
Consiste en romper, gastar o remover parte o toda la cubierta de la semilla a
través de métodos físicos y /o químicos.
Entre los tratamientos físicos se encuentran:
 Agua caliente. Este tratamiento esteriliza la superficie de las semillas. La

temperatura y duración del tratamiento son los factores que determinan su
efecto sobre la impermeabilidad y viabilidad de las semillas.
Figura 6. escarificación con agua caliente
. Tomado de viveros .2002
 Calentamiento en seco. Consiste en incrementar la temperatura de las

semillas durante cierto tiempo, colocándolas sobre una plancha térmica o
dentro de un horno.
28
 Productos cáusticos. Generalmente se utiliza ácido sulfúrico o ácido

clorhídrico , que debe cubrir dos veces el volumen ocupado por las semillas,
utilizando un envase de cristal, y revolviendo suavemente con una barra de cristal
durante el tratamiento.
La duración de la exposición ácida dependerá de grueso de la capa de semilla y
dependiendo de la especie en tiempos que van desde quince minutos a 3 horas o
más de exposición .
Es importante tener en cuenta que para reducir la concentración del ácido con
agua, esta no se debe adicionar al ácido, sino que el ácido se debe agregar
lentamente en el agua para evitar reacciones violentas.
La inmersión de las semillas en estas sustancias, y, en general, su uso, implica

grandes riesgos para los operarios, quienes deben ser cuidadosamente
entrenados y en el momento del contacto protegerse con anteojos, guantes y
delantales resistentes a los ácidos y álcalis. Se debe contar también con una
abundante provisión de agua corriente.
Una vez realizado el tratamiento de acuerdo al tipo de semilla , es indispensable,

un lavado de las mismas con abundante agua para eliminar trazas del ácido.
 Escarificación mecánica. Su efectividad depende de que se retire la mayor

parte de la cubierta externa, mediante productos abrasivos tales como lijas , o
una rueda abrasiva o por el rompimiento total de la cubierta de la semilla.
Un vaso mecánico pequeño alineado con papel de lija o llenado con arena o
grava puede ser más práctico para cantidades más grandes de la semilla . La
cantidad de semillas en el vaso debe ser suficiente permitir que todas las semillas
sean desgastadas.
Figura 7. Escarificación mecánica
Tomado de viveros . 2.002
29
Las máquinas comercialmente diseñadas están también disponibles para

escarificar cantidades grandes de semilla. Estos escarificadores desgastan o
marcan con una cicatriz las semillas entre dos superficies de caucho que
impulsan generalmente las semillas contra superficies ásperas tales como papel
de lija. La severidad de la abrasión o del impacto se debe controlar para prevenir
daño a la semilla .
Dentro de los tratamientos químicos se encuentran:
 Fermentación e intemperización. La descomposición de las cubiertas, sobre

todo si son carnosas, se puede lograr poniendo las semillas en agua o en la
pulpa del fruto y dejándolas fermentar durante varios días.
 Aceptores de electrones. Compuestos como el azul de metileno, cloruro de

trifeniltetrazolio, nitratos, nitritos y peróxido de hidrógeno eliminan la dormición
leve, ya que actúan como reoxidantes alternos del NADPH, o bien inhiben la
catalasa. Las sustancias más usadas son los nitratos y el agua oxigenada, su
efecto estimulante se limita, principalmente a la dormición leve.
Entre los nitratos se usa principalmente el de potasio y, con menor frecuencia, el

de amonio.
 Hormonas. Las sustancias más empleadas son las giberelinas, las

citoquininas-Kinetina, benziladenina y 6-aminopurina, el etileno y la fucocinina.
 Inhibidores de la respiración. Unicamente tienen efecto sobre la dormición

leve. Son útiles los inhibidores de la glucólisis, el ciclo de Krebs y la
fosforilación oxidativa; los productos terminales de la fermentación también
actúan como inhibidores de la respiración al activar la vía de las pentosas
fosfatadas
La estratificación
Corresponde a otro método para superar la latencia y consiste en estimular al

embrión para que pueda desarrollarse utilizando principalmente el manejo del
suelo y de la temperatura.
30
 Estratificación por bajas temperaturas. Consiste en ubicar semillas en un

sustrato , principalmente arena , manteniendo una temperatura alrededor de 4
C, durante un tiempo alrededor de uno a cuatro meses .
 Estratificación cálida. Este tratamiento consiste en ubicar semillas en un

sustrato sin destruir las cubiertas, el sustrato empleado debe estar esterilizado
para evitar infecciones, manteniendo el sustrato a una temperatura óptima
para el crecimiento de los embriones que depende de la especie manejada.
 Combinación de estratificación cálida con enfriamiento en húmedo. En

general, es una metodología similar a la anterior, pero posteriormente es
seguido de un período de enfriamiento en húmedo en un tiempo igual al de la
etapa de estratificación cálida.
31
CAPITULO 2: ANÁLISIS DE SEMILLAS
Lección 6. Vigor
El vigor hace relación a la capacidad de una semilla par producir una germinación
rápida y uniforme, así como un rápido crecimiento de la planta bajo condiciones
generales de campo.
La semilla como elemento vivo nunca está completamente inactiva, aunque la
actividad dentro de ella puede ser tan baja que la mayoría de las veces es
imposible medirla. Así, puede mantenerse por años en el suelo si ésta no
encuentra condiciones favorables para germinar.
Las semillas poseen un mecanismo de protección marcadamente complejo y

efectivo que las ayuda a asegurar su supervivencia. Tienen un mecanismo de
acción retardada "un reloj natural" el cual asegura que permanezcan inactivas o
dormantes en tiempos difíciles, hasta que se presenta otro momento más
adecuado lo suficientemente largo y favorable que asegure el establecimiento de
las plantas.
El simple hecho de que una semilla absorbe agua, se hinche y desarrolle una
pequeña raíz, no garantiza que ésta continúe creciendo y llegue a formar una
planta adulta.
Estas pueden solamente tener vigor suficiente para formar una raíz, o puede
empezar a formar un rebrote y después morir. Puede incluso crecer y formar una
planta, pero que sea tan débil que no pueda establecerse por sí sola en el suelo y
continuar desarrollándose normalmente en contra de factores ambientales
adversos.
Vigor de semillas y deterioro están fisiológicamente ligados, son aspectos

inversamente proporcionales de la calidad de semillas. El deterioro tiene una
connotación negativa, mientras que el vigor tiene una connotación positiva; el vigor
disminuye a medida que el deterioro aumenta. Deterioro es el proceso de
envejecimiento y muerte de las semillas, en cuanto vigor es el principal
componente de la calidad afectado por el proceso de deterioro.
Como un primer acercamiento a la determinación del vigor de las semillas se

utilizan las pruebas de germinación en las cuales se puede evaluar:
 Vigor de germinación, entendido como la obtención de la germinación de una

planta vigorosa y sana en el menor tiempo posible.
32
 Poder de germinación, entendida como el vigor de germinación cuando por lo

menos el 50% de las semillas hallan germinado.
 Capacidad de germinación, entendida como la sumatoria del vigor y el poder

de germinación.
A pesar de que la prueba de germinación es la medida aceptada del efecto final

del deterioro de las semillas, o sea, pérdida de la capacidad de germinar.
Es importante entender que la prueba de germinación no es una medida adecuada
del potencial de una semilla para la producción de plantas, ni para que se tenga
una total apreciación de su potencial , ni de su vigor.
Las pruebas de germinación buscan la optimización y patronización de las

condiciones de la prueba de manera que se puedan optimizar los resultados.
Pero, estas son realizadas en un medio esencialmente artificial y esterilizado, con

un grado adecuado de humedad , en germinadores, ajustados a una temperatura
optima para la especie de semilla probada, por un tiempo largo lo suficiente para
permitir que tanto semillas "débiles" como semillas vigorosas germinen y
desarrollen plántulas normales.
Además, los principios de optimización y maximización de las pruebas de

germinación son relativamente poco sensibles para la determinación de plántulas
normales y anormales, apenas las plántulas muy enfermas y deformadas son
normalmente excluidas del porcentaje de germinación.
Plántulas débiles, semidefectuosas y robustas tienen el mismo peso en el

porcentaje de germinación, que es un parámetro de la calidad de semilla
cuantitativo y no cualitativo , pues , una semilla o germina o no germina; ella es o
100% germinable o 0% (muerta o anormal).
Este porcentaje de germinación es relativamente válido para el momento que se

realiza la prueba de germinación, pero, el proceso de deterioro de la semilla y su
relación con la germinación, continúa y por y tanto sigue ocurriendo la pérdida de
la germinación, así, la naturaleza progresiva del deterioro y sus efectos menores
no son considerados sino hasta el momento de la realización de la prueba.
33
Lección 7. Pruebas de vigor
Las pruebas de vigor proporcionan una información adicional a la brindada por la

Prueba de Germinación Estándar.
Desde que el vigor es un atributo solamente de semillas capaces de germinar, las

pruebas de vigor son designados para evaluar uno, varios o la mayoría de los
efectos menores del deterioro sobre el potencial de desempeño de las semillas.
Las pruebas de vigor desde un punto de vista relativo al desarrollo, pueden ser
agrupadas dentro de tres categorías :
1) Pruebas que evalúan daños de los sistemas básicos biológicos/bioquímicos: por

ejemplo, la degradación de las membranas como reflejada en la conductividad,
resistencia, turbidez y acidez del agua de imbibición de las semillas, tasa de
respiración y coeficiente respiratorio, la reacción de tetrazolio y la actividad de
otros sistemas de enzimas. Evidencia valiosa de daños en las membranas y
cambios en la permeabilidad puede ser obtenida a partir de la observación directa
de la profundidad de coloración en las pruebas con tetrazolio de algunos tipos de
semillas.
2) Pruebas que miden la velocidad e intensidad de las actividades y respuestas

fisiológicas: por ejemplo, velocidad de germinación y de crecimiento y desarrollo
de plántulas, peso verde y/o seco de plántulas.
3) Pruebas que miden cambios en la resistencia o tolerancia a condiciones de

estrés: por ejemplo, la prueba de frío para semillas de maíz (frío, suelos
húmedos), pruebas de germinación bajo frío para algodón (temperaturas frías sub-
óptimas), pruebas de envejecimiento acelerado y deterioro controlada (alta
temperatura, contenido de agua de la semilla y/o humedad), pruebas de arena o
ladrillo molido (alto impedimento mecánico).
Estas a su vez pueden separarse por pruebas directas y pruebas indirectas
 Pruebas directas
Son aquellos que simulan las adversidades que la semilla puede encontrar en el
campo , procurando establecer bajo condiciones controladas de laboratorio los
factores desfavorables responsables por la reducción de la emergencia en el
campo
34
Como ejemplo se puede citar la prueba del frío, las pruebas directas,
son difíciles de estandarizar entre laboratorios y tienden a dar
resultados más variables que las pruebas de g erminación.
Prueba del Frío
El fundamento teórico de esta prueba es que la condición fría y

húmeda del suelo retarda la act ividad tanto de la semilla como de los
microorganismos del suelo. Sin embargo, como las semillas est án en
desventajas relativament e mayor, serán más susceptibles al ataque
de microorganismos causantes de pudrición. Las semillas vigorosas
producirán plántulas capaces de resistir el ataque de estos
microorganismos en mayor grado que las semillas débiles.
 Pruebas Indirectas
Los tests indirectos son aquellos que miden determinados atributos fisiologicos de
la semillas que posteriormente se correlaciona con su desempeño en el
campo.
Dentro de estas pruebas indirectas de vigor sobresalen:
1. Pruebas bioquímicas: prueba de respiración, test de GADA, prueba del

tetrazolio, prueba de la conductividad eléctrica.
2. Pruebas fisiológicas: primero conteo de germinación, velocidad de

germinación.
3. Pruebas de resistencia: germinación a baja temperatura, inmersión en agua

caliente.
 Pruebas de Vigor recomendadas
Prueba de Envejecimiento Acelerado

Se basa en someter a las semillas a un estrés antes de conducir el ensayo
germinación tradicional. Se utilizan condiciones totalmente opuestas a un buen
almacenamiento, esto es alta humedad relativa cercana al 100% y alta
temperatura, durante un período de tiempo de varias horas.
35
Los resultados del ensayo de envejecimiento acelerado se comparan con los del
ensayo de germinación estándar y en la medida que estos valores sean elevados
y estén próximos podemos decir que el lote posee una buena condición de vigor.
Por otro lado cuando los valores de ambas pruebas se separen
considerablemente el lote es considerado como de bajo vigor.
Conductividad Eléctrica
El fundamento de esta prueba es la mayor o menor liberación de electrolitos

(iones, azucares, aminoácidos, etc.) al medio de imbibición por parte de las
semillas de acuerdo a la condición fisiológica de las mismas.
Después de la madurez fisiológica, la semilla presenta una condición de bajo

contenido de agua, la cual es variable en función de las condiciones ambientales,
principalmente la humedad del aire.
Luego con la pérdida de humedad de la semilla, las membranas celulares sufren

un proceso de desorganización estructural, estando más desorganizadas cuando
menor sea el contenido de agua de la semilla perdiendo así temporalmente su
integridad estructural
La integridad de las membranas celulares, está en función del grado de

alteraciones bioquímicas, de deterioro y/o daños físicos, influyendo de manera
significativa en las características de los lixiviados que serán liberados desde la
semilla , debido a la pérdida de la integridad de las membranas celulares y una
mayor permeabilidad de las mismas.
Prueba Topográfica por Tetrazolio
Esta prueba se fundamenta en una reacción bioquímica de coloración mediante la

cual los tejidos vivos se tiñen de color rojo y los tejidos muertos permanecen sin
tinción. Se puede realizar un diagnóstico acerca de la naturaleza de los daños que
existen en la semilla y a la vez se puede establecer su nivel de viabilidad y vigor.
La principal ventaja de esta prueba es la rapidez de la ejecución y obtención de

resultados, lo que confiere agilidad a las decisiones tomadas en el proceso
productivo.
Esta prueba es muy utilizada en la comercialización de semillas de gramíneas

forrajeras tropicales y los resultados obtenidos han comprobado su eficiencia en
estimar el potencial fisiológico de esas semillas. A pesar de esas ventajas
36
verificadas en su uso, no debe ser considerado un substituto de la prueba de

germinación, pues sus resultados no caracterizan anormalidades y otros disturbios
de las plántulas, la presencia de microorganismos y la dormancia de semillas.
37
Lección 8. Análisis de semillas
Para realizar ajustes en la cantidad de semilla requerida se pueden realizar

análisis de peso de la semilla y germinación en condiciones de campo, mientras
algunos análisis requieren de ciertas condiciones especiales tales como balanzas
de precisión.
 Análisis de pureza
La pureza hace referencia a la mezcla normal de semillas puras con impurezas,

corno pueden ser polvo, ramitas, hojas, semillas de otras especies o en general
todo aquello que no sea la semilla pura, denominado material inerte; la pureza
normalmente se expresa en porcentaje.
La metodología utilizada en la determinación del porcentaje de pureza, es como

sigue:
Se toman dos muestras (en total unas 2.500 semillas, si el tamaño lo permite) para
evaluarlas independientemente y establecer su promedio; cada muestra es
sometida a un proceso de pesado y selección manual de la semilla y las
impurezas; una vez se tienen los dos grupos. se pesan por aparte los
componentes (semilla pura e impurezas) y se procede a calcular el porcentaje de
pureza mediante la siguiente fórmula:
% de pureza = peso de la semilla pura x 100
peso total
A manera de ejemplo:
repetición peso semilla peso total
pura
1 13,678 g 16,789 g
2 14,632 g 16,532 g
total 28,31 g 33.321 g
% de pureza = 28,31 x 100
33,321
% de pureza = 84,96 %
38
 Análisis de peso
Este análisis muestra el peso de la semilla, usualmente expresado en relación con

un millar de unidades puras; para facilitar el trabajo, se toman semillas puras , y se
agrupan en 8 muestras o repeticiones, de cien (100) semillas cada una.
Se procede a pesar por separado cada muestra, tomando los valores de cada
grupo para obtener la sumatoria y dividiendo luego por el número de muestras
para hallar el promedio, cifra representativa de todo el lote. Una vez hallado el
peso promedio de 100 unidades, se calcula para 1.000, así:
Repetición peso en gramos de 100

semillas
1 2,684
2 2,605
3 2,599
4 2,789
5 2,568
6 2,876
7 2,556
8 2,345
total 21,022
Peso Promedio de 100 semillas 21,022/8 = 2,62775 g

Peso promedio de 1.000 semillas = 26,2775 g
 Análisis de Germinación
La muestra requerida para el análisis de germinación, es de un mínimo de 400

semillas, evaluadas en 4 repeticiones de 100 unidades cada una.
Las réplicas se siembran en un sustrato adecuado. que puede ser tierra, arena,
papeles absorbentes o algodón; se distribuyen los 100 gramos de cada ensayo en
39
forma uniforme, controlando hasta donde sea posible, la temperatura (cuyo nivel,
va de acuerdo al hábitat de cada especie, la luz (que haya suficiente luz,
preferiblemente luz del día) y la humedad (proporcionando un riego diario, bien
dosificado, es decir que las semillas permanezcan húmedas por lo menos hasta el
inicio de la germinación).
A cada repetición se le evalúa el porcentaje de germinación mediante la siguiente

fórmula:
% germinación = semillas germinadas x 100
semillas sembradas
repetición semilla semilla % de

sembrada germinada germinación
1 100 82 82
2 100 78 78
3 100 80 80
4 100 71 71
total 400 311
% germinación = 311 x 100
400
% germinación = 77,75%
 Germinación por peso
Cuando el tamaño de la semillas muy pequeño, es más complejo separar las

semillas de las impurezas, en este caso la evaluación se hace de la siguiente
manera: se toman 4 réplicas de un gramo cada una con semillas e impurezas y se
siembran.
Cuando ocurre la germinación, se hace un conteo de las semillas germinadas en

cada réplica y se calcula el promedio para el ensayo. El resultado se expresa en
términos de plántulas germinadas por unidad de peso, así:
40
repetición semilla número de

sembrada semillas
germinadas
1 1g 25
2 1g 32
3 1g 28
4 1g 22
total 4g 107
Promedio de germinación = 107/ 4 g
Promedio de germinación = 26,75 semillas por gramo
Por tanto para 1.000 g de semilla germinarán 26.750 semillas
 Valor real
El valor real relaciona la pureza de la semilla con el porcentaje de germinación;

tiene un uso muy extendido en el sector agrícola y se expresa con la siguiente
fórmula:
Valor real = % pureza x % germinación
100
Ejemplo:
% de germinación 96%
% de pureza 85%
Valor real = 85% x 96%
100
Valor real = 81,6 % esto es, el 81,6% de las semillas pueden germinar.
41
Lección 9. Ejercicio de aplicación.
La densidad de plantas de un cultivo es de 25.000 plantas /Ha y se sabe que

1000 semillas tienen un peso promedio de 48 g, con una pureza del 96% y un
porcentaje de germinación del 89%.
Determinar los requerimientos de semilla, conociendo además que se hará

semillero para luego transplantar al sitio definitivo, por lo que se estima tener un
10% más de plantas
Como primer lugar calcularemos el valor real así:
Valor real = 89% x 96%
100
Valor real = 85,44%
Esto nos indica que por cada 100 semillas sembradas 85,44 germinarán
adecuadamente, entonces para asegurar que 100 semillas germinen , tendremos:
Semillas germinación
100 85,44
X 100
X= 100 x 100/ 85,44 = 117,04 semillas
Para obtener 100 semillas germinadas requiero de sembrar 117,04 semillas, ahora
cono se requieren 25.000 plantas/ Ha incrementando un 10% más requeriremos
la germinación de :
25.000 + 25.000 x 10 = 27.500 semillas
100
42
Para el cálculo de semillas totales requeridas para asegurar un 100% de

germinación, tendremos:
Semillas germinadas semillas sembradas
100 117,04
27.500 x
X = 27.500 x 117,04/ 100= 32.186 semillas
Ahora teniendo en cuenta que el peso promedio de 1000 semillas es de 48 g,

para 32.186 semillas requerimos de :
Semillas gramos
1000 48
32.186 x
x= 32.186 x 48/ 1000 = 1.544,9 g  1.550 g de semilla
43
Lección 10. Envigoramiento
Existen algunos métodos que pueden recuperar o aumentar el vigor de una

semilla, como métodos de envigoramiento sobresalen:
 El pre-remojo con secamiento lento, consiste en remojar la semilla en agua ,

para posteriormente permitir el secado de la semilla a condiciones ambientales
bajo sombra
 El tratamiento con sustancias químicas en solución tales como ácido bórico,

ácido giberelico, nitrato de potasio y cloruro de sodio.
 Fermentación de semillas en su propio jugo, fermentándose por varios días

muy útil para semillas de hortalizas.
 Ación de un campo magnético, ubicando el micrópilo en contacto directo con

un campo magnético.
 Peletización de la semilla, realizando el recubrimiento de la semilla con

micronutrientes.
44
CAPITULO 3: LOS VIVEROS
INTRODUCCIÓN
Independientemente del sistema de propagación los primeros días de vida de la

nueva planta son los más críticos para su supervivencia. Con el propósito de
lograr que un mayor número de plantas sobreviva a esta etapa a fin de que las
plantas puedan ser producidas rápida, eficiente y económicamente se utilizan
instalaciones especiales denominados viveros en las que se modifican las
condiciones ambientales y se proporcionan las condiciones de crecimiento más
favorables para que las nuevas plantas continúen su desarrollo.
Dependiendo de su finalidad, los viveros se pueden clasificar como temporales o

permanentes.
45
Lección 11. Tipos de viveros y criterios para su establecimiento.
 Vivero temporal.
Se establece en áreas muy cercanos a las zonas donde se realizará la plantación,

Generalmente se ubican en áreas relativamente pequeñas y se utilizan por
periodos cortos de tiempo o en forma intermitente, buscando que la producción
coincida con la temporada de lluvias. Para su funcionamiento se requiere poca
infraestructura, generalmente se realiza a cielo abierto y la inversión es baja. Su
desventaja radica en que, pueden estar situados en áreas de difícil acceso, no son
fáciles de vigilar y por lo tanto la producción queda más expuesta a daños por
animales u otros factores.
 Vivero permanente.
Es la extensión de terreno dedicado a la obtención de plantas con diferentes fines

(reforestación, frutales, flores, etc.), ya sea en áreas rurales o centros urbanos. Su
instalación requiere una inversión mayor en equipo, mano de obra y extensión del
terreno, y debe contar con vías de acceso que permitan satisfacer oportunamente
la demanda de plantas.
 Criterios para el establecimiento de un vivero
La mala elección del sitio donde se establece el vivero repercute directamente en

una baja calidad de la producción de plántulas, lo cual a la larga se reflejará en
una alta mortalidad en la plantación. Por ello es fundamental la selección del sitio
donde se establecerá el vivero. Las condiciones del sitio son más determinantes
cuando la producción se obtiene a raíz desnuda (por camas de crecimiento).
Se pueden considerar y tener en cuenta los siguientes aspectos:
 Los viveros deben estar localizados en áreas con una buena iluminación
natural, tanto en el transcurso del día como durante toda la estación de
crecimiento, así que los viveros deberán estar ubicados donde reciban total
radiación solar durante casi todo el día. Cualquier cantidad de sombra puede
reducir la productividad y aumentar los costos, principalmente si se requiere
proporcionar energía lumínica artificial .Esta situación se vuelve más crítica en
los lugares donde existen condiciones permanentes de nubosidad.
 De la orientación del terreno y su topografía, al igual que la textura del suelo,

depende en gran parte el buen drenaje del vivero. Para el caso de suelos de
textura fina la pendiente deberá ser suave (de 2 a 3%) y en el caso de suelos
arenosos y profundos se recomienda nivelar el terreno.
46
 La textura del suelo es muy importante en el cultivo de plantas a raíz desnuda,

ya que además de regular el drenaje y la erosión deberá facilitar la extracción
de las plántulas y promover el crecimiento vegetativo. Un suelo bien drenado
asegura su aireación, por lo que es conveniente verificar que no existan capas
endurecidas en los primeros centímetros del suelo.
 Otro aspecto importante se relaciona con las características del suelo tales
como la acidez del suelo, el contenido de materia orgánica y su disponibilidad
de nutrientes.
 Después de la luz solar, un suministro confiable de agua de buena calidad

resulta ser el factor más importante para la selección del sitio El abastecimiento
de agua y su calidad para el riego son fundamentales teniendo en cuenta su
suministro abundante y constante y su calidad determinada por dos factores:
las partículas suspendidas(sedimentos o plagas) y por las sales disueltas. Los
sedimentos tales como arcillas, cieno y partículas finas de arena, deberán ser
filtradas en forma mecánica o removidas mediante tratamientos químicos ya
que son abrasivos y pueden desgastar rápidamente el equipo como bombas,
inyectores de fertilizante y aspersores.
Las plagas pueden también estar suspendidas en el agua. El agua de fuentes

superficiales, especialmente de estanques en áreas agrícolas puede contener
semillas de malezas y esporas de hongos, algas, musgos y hepáticas. Filtros
especialmente diseñados pueden remover estos elementos pero el costo de los
filtros se incrementa a medida que el tamaño de las partículas es más pequeño.
Las sales disueltas de iones de diferentes minerales pueden estar disueltos en

al agua a utilizar para el riego, tales como el sodio (Na+) y el cloro (Cl-) o
algunos cationes, tales como los iones de calcio (Ca2+) y de magnesio (Mg2+)
que se encuentran presentes en las aguas “duras”, pueden ser problemáticos o
benéficos, dependiendo de sus concentraciones.
 La superficie seleccionada para el establecimiento del vivero, deberá ser lo

suficientemente grande para contener las áreas de crecimiento y las diferentes
instalaciones que se requieran, así mismo la forma del terreno puede ser más
importante que la misma superficie, dado que los invernaderos tienden a ser
instalaciones elongadas. En forma adicional a las necesidades inmediatas, se
deberá evaluar los sitios potenciales para el establecimiento del vivero en
cuanto a superficie, pensando que existan necesidades futuras de ampliación.
 Las restricciones ecológicas y políticas que no eran considerados hasta hace

algunos años, han llegado a ser uno de los criterios de evaluación más críticos,
donde se debe articular la legislación y normatividad sobre el uso del suelo ,
el uso de plaguicidas, así como la potencial contaminación del suelo y aguas
47
subterráneas como un elemento fundamental para el establecimiento de un

vivero.
Como criterios secundarios podemos considerar:
 El sitio para el futuro vivero debe ser abierto y protegido, con un clima lo más
homogéneo posible, donde no se tengan problemas de temperaturas extremas
o fuertes vientos, pero si donde exista un grado de viento moderado para la
ventilación durante las épocas calurosas.
Cuando el viento es fuerte, puede ser necesario, que éste posea suficientes
abrigos, que restrinjan la acción del viento; en caso de que no existan, se deben
planificar cortinas rompevientos, preferiblemente con árboles de la región.,
ubicadas a una distancia mínima de 15 metros al vivero evitar el sombreado
excesivo, que pueda afectar el desarrollo de las plantas .
 Es muy importante conocer qué tipo de plantas se encuentran adaptadas a las

condiciones climatológicas que prevalecen en la zona donde el vivero se va a
establecer. Asimismo, es necesario contar con los registros climáticos que
indiquen las épocas de riesgo, como las heladas, las sequías y la cantidad y
distribución del periodo de lluvias.
 La topografía general de un sitio potencial es importante por razones

económicas y biológicas. Un sitio relativamente plano reduce el costo de
nivelación del terreno durante la construcción e incrementa la facilidad para el
movimiento de equipo, materias primas, materiales y vehículos después de que
el vivero ha sido establecido .
 La distancia entre la ubicación potencial del vivero y los centros de entrega

también es un factor que debe ser considerado.
48
Lección 12. Construcción de un vivero
Una vez que el sitio ha sido seleccionado, el siguiente paso para desarrollar el
vivero es considerar en que grado es necesario realizar modificaciones
ambientales que permitan la producción de un cultivo con un alto grado de
calidad, dentro de un tiempo determinado.
 El ambiente de propagación
Las condiciones de un vivero que produce bajo cubierta han sido modificadas
radicalmente del ambiente natural, por lo cual el ambiente de propagación, no se
limita a un tipo de estructura en particular o a un sistema de producción, sino a la
combinación de estas dos partes que están relacionadas entre sí y donde
participan factores atmosféricos, edáficos y bióticos.
 Factores atmosféricos.
Los principales factores del ambiente atmosférico son: luz, temperatura, humedad
y dióxido de carbono Los factores ambientales son fuertemente afectados por la
ubicación geográfica y por el tipo de instalaciones del vivero, por lo cual, deberán
tomarse muy en cuenta al momento de la selección del sitio y de la construcción
de las estructuras para la propagación.
El clima del sitio determinará qué tipo de ambiente de propagación se requerirá. Si

tanto el ambiente como el tiempo de producción no son limitantes importantes,
entonces el vivero puede establecerse con instalaciones a cielo abierto o con una
estructura de propagación de bajo costo.
Por otra parte, si el clima es adverso y la planta requiere ser producida en un

tiempo muy corto, entonces será necesario establecer un invernadero
completamente automatizado.
El vivero que logra acoplar los requerimientos biológicos del cultivo a las
condiciones ambientales del sitio, podrá ser la opción más económica, por lo cual
al análisis del sitio donde se ubicará el vivero, es vital antes de que sea
seleccionado el ambiente de propagación.
 Factores edáficos.
Los dos factores principales del ambiente edáfico son el agua y los nutrientes
minerales En los viveros, los factores edáficos son independientes de la ubicación
49
del vivero y pueden ser completamente controlados por el tipo de contenedor, el

sustrato y las prácticas culturales.
 Factores bióticos.
Tanto los componentes atmosféricos como edáficos contienen otros organismos

que pueden afectar el crecimiento de la planta. Una de las primeras ventajas del
cultivo de producción en invernadero, es que se cuenta con un mayor control
sobre los factores biológicos y puede realizarse un manejo sobre las plagas y
enfermedades.
Un buen diseño de vivero en contenedor, reflejará las condiciones ambientales en

el sitio y los requerimientos biológicos de un cultivo específico. Un ambiente de
propagación que es ideal para un grupo de plantas, puede no serlo para otro
desde el punto de vista económico o biológico.
Sin embargo, muchos viveros producen una gran cantidad de diferentes especies,
por lo cual es muy común que tengan que diseñarse ambientes de propagación
para satisfacer los requerimientos de varios grupos de cultivos.
Tabla 3 . Criterios a considerar para el establecimiento de un vivero.
Tomado de Manual de viveros. Depto. de Agricultura de Estados Unidos. 1.995
50
Lección 13. Tipos de Estructuras para la Propagación
Los viveros en contenedor pueden ser clasificados por la cantidad relativa de

modificación ambiental en: ambientes totalmente controlados, ambientes
semicontrolados y ambientes mínimamente controlados.
 Ambientes completamente controlados
Requieren de una estructura de propagación que contiene todo el equipo

necesario para el control ambiental, a efecto de mantener en niveles óptimos los
factores limitantes potenciales
Operativamente, un ambiente de propagación completamente controlado tiene

muchos atributos biológicos positivos Éstos son adecuados para casi cualquier
tipo de clima, y debido al alto grado de control ambiental, el riesgo por perder un
cultivo debido a climas severos es muy bajo.
Sin embargo, este tipo de estructuras son las más caras de construir y operar,
debido a los altos requerimientos de energía.
Los invernaderos se incluyen en esta categoría siendo el método tradicional para

la producción de plantas pudiendo estar equipados completamente para controlar
el ambiente de propagación. Los invernaderos utilizan radiación solar, la cual es
“atrapada” dentro de una estructura transparente para convertirla en calor (el
“efecto invernadero”).
El inconveniente de la cubierta transparente es que los invernaderos tienen

inherentemente un bajo nivel de aislamiento y requieren de equipos tanto para un
buen calentamiento, como enfriamiento, a efecto de mantener un buen control de
la temperatura.
Donde generadores de dióxido de carbono pueden ser utilizados para promover

tasas de rápido crecimiento y sistemas de irrigación con inyectores para la
fertilización, pueden proporcionar cantidades óptimas de agua y todos los
principales nutrientes esenciales.
 Ambientes semicontrolados
Esta categoría incluye una gran variedad de estructuras de crecimiento que, son
diseñadas para controlar sólo ciertos aspectos del ambiente Algunos de estos
tipos de estructuras, incluyen las de malla media sombra y los túneles, que son
comúnmente utilizados para el endurecimiento y el almacenamiento de plantas en
forma intermitente.
51
Desde un punto de vista económico, los ambientes semicontrolados son baratos

en cuanto a su construcción y operación, aunque existe una variación significativa
entre los diferentes tipos de estructuras.
Se incluyen:
Los invernaderos de paredes móviles. Son una modificación de los invernaderos

tradicionales. Su característica principal es que cuentan con un techo
permanente y transparente, con paredes móviles que pueden ser enrolladas o
abiertas hacia el lado opuesto .
Este diseño permite una flexibilidad considerable en el control del ambiente, en el

momento que se requiera, las paredes laterales son bajadas para mantener una
temperatura ideal.
Cuando las condiciones ambientales son favorables, las paredes pueden ser
levantadas para permitir la ventilación natural eliminando la necesidad de contar
con un sistema de enfriamiento.
Además de esta clase de modificaciones, a estos invernaderos se le puede

integrar algunos o todos los equipos de control ambiental disponibles para los
invernaderos tradicionales, y así lograr modificar la mayoría de los factores
limitantes.
Además de la casa sombra que comúnmente se encuentran equipadas con

sistemas de irrigación y fertilización. Aunque tradicionalmente han sido
utilizadas para el endurecimiento de la planta o como áreas de mantenimiento,
Las casas sombra son utilizadas en los viveros para la propagación de ciertas
especies, así como para finalizar la producción de cultivos con diferentes
regímenes.
Generalmente, las plantas o estacas son desarrolladas en la casa sombra en sus

primeras fases para completar su período de crecimiento en el invernadero,
.En climas fríos, este tipo de estructura es utilizada para el mantenimiento de la

producción .este tipo de estructuras con techos permanentes y paredes laterales
móviles y con cubierta polisombra puede lograr los objetivos culturales y además,
excluir insectos y otro tipo de plagas del área de crecimiento.
La selección del material para la sombra es importante en cuanto a su color y

porcentaje de sombreamiento.
52
 Ambientes mínimamente controlados
Que normalmente son estructuras a cielo abierto fueron desarrolladas para

producir plantas donde las condiciones ambientales no son limitantes., se debe
contar con un buen sistema de drenaje y un adecuado control de arvenses (que
puede incluir el uso de una cubierta en el sustrato utilizado) por lo general se
encuentran equipadas con líneas de riego semifijas por las cuales es posible
aplicar el riego y la fertilización.
El material vegetal puede estar ubicado en camas, plataformas o directamente en

el suelo.
Aunque las estructuras a cielo abierto son las más económicas para la producción
de plantas, las tasas de crecimiento son bajas. Los daños climáticos tales como
heladas o lluvias torrenciales son una constante preocupación, pues el riesgo de
perder el cultivo es el más alto de entre todos los diferentes ambientes de
propagación .
Figura 8. Tipos de estructuras para la propagación de plantas
Tomado de Manual de viveros. Depto. de Agricultura de Estados Unidos. 1.995
53
Lección 14. Sistemas de siembra en los viveros
Antes de iniciar la siembra de semillas en el vivero es necesario tener claro cuál es

el método de cultivo que se usará, pues su elección está directamente relacionada
con su desarrollo y manejo, tanto en el vivero como en los sitios de plantación.
(ver tabla 4).
Para la siembra de material vegetal se requiere un sustrato que debe cumplir con
las siguientes condiciones:
- El sustrato debe ser lo suficientemente firme y denso para mantener el material

vegetal en su sitio durante el enraíce.
- Debe retener la suficiente humedad para que no sea necesario regarlo con
mucha frecuencia.
- Debe ser lo suficientemente poroso, de modo que se escurra el exceso de agua

y permita una aireación adecuada.
- Debe estar libre de malezas, nemátodos y otros patógenos.
- No debe tener un nivel excesivo de salinidad.
- Debe poderse esterilizar con vapor o químicos sin que sufra efectos nocivos.
- Debe existir una adecuada provisión de nutrientes para todo el período de

crecimiento, pudiendo suplirse con fertilizantes de lenta liberación.
Normalmente ningún sustrato reúne estas condiciones en su totalidad por lo tanto

se utilizan sustratos en mezcla compuestos que incluyen arena gruesa ,perlita,
escoria o grava fina, para mejorar la capacidad de infiltración ; turba, vermiculita ,
humus u otros materiales como fuente de nutrientes y de retención de humedad .
Los métodos de cultivo en viveros se dividen en: cultivo a raíz desnuda, en camas
de crecimiento o germinadores y en envases de crecimiento (utilizando
recipientes de gran variedad de materiales y dimensiones).
Se pueden iniciar por medio de la siembra directa de las semillas u obteniendo las
plántulas por medio de almácigos (semilleros), para posteriormente trasplantarlas.
54
Tabla4. Comparación entre el sistema de germinador y raíz desnuda
Aspecto Ventaja o desventaja Característica
Selección del sitio de Menos exigente que raíz Desarrollo de plantas

producción de plántulas desnuda independiente de la
calidad del subsuelo
Tiempo de cultivo Menor tiempo Permite un mayor uso

continuo del germinador
Crisis de trasplante Menos severa Menor daño del sistema

radicular
Control de las condiciones Mejor control Se pueden normalizar y

de crecimiento optimizar las condiciones
de crecimiento
Tiempo de permanencia Menor Por presentar mayor

en el vivero crecimiento inicial
Capacidad para soportar Mayor Se favorece la

estrés por agua supervivencia y el
establecimiento
Costos de producción Mayores Por requerir el uso de

envases , una etapa de
adaptación y su posterior
movilización al sitio
definitivo
Cuidado y preparación Mayor Las plantas a raíz

del sitio de plantación desnuda presentan una
mayor adecuación a las
condiciones ambientales.
 Germinadores
La semilla en las eras de germinación puede sembrarse de dos maneras en líneas

o surcos o al voleo.
55
Para el primer caso, con la superficie nivelada se hacen surcos de una

profundidad no superior a dos veces el tamaño de la semilla, la distancia entre
líneas puede variar entre 4 a 10 cm dependiendo de la especie a sembrar .
En los surcos trazados , se distribuye la semilla de tal forma que se evite la

superposición de las semillas.
Mientras la siembra al voleo, implica la nivelación del suelo esparciendo la semilla

sin manejar distancias de siembra.
Figura 9. Sistema de siembra.
Tomado de viveros. 2002
Trasplante
Las semillas que han sido sembradas en los germinadores, permanecen allí ,
hasta que se haga necesario su traslado al sitio definitivo o para que pueda
completar su crecimiento y desarrollo en otro sitio definido para el material vegetal.
El objeto del trasplante es disminuir la competencia que existe en la siembra;

aumentar el espacio vital entre las plantas jóvenes; desarrollar el sistema
radicular, favorecer el acceso a los elementos nutritivos; formar muchas
ramificaciones radiculares, pues el crecimiento en altura está disminuido, y
posibilitar el transporte y acomodamiento en su lugar.
El trasplante se efectúa rápidamente después de la germinación, en cuanto se

desarrollan algunas hojas o agujas. Desde cualquier punto de vista es preferible
realizarlo prematuramente, pues así se garantiza una buena recuperación y se
elimina la posibilidad de la detención pasajera del crecimiento (crisis del
trasplante); también ayuda a colocar verticalmente a la joven raíz en la tierra sin
encorvarla y sin que se dañen las raicillas.
56
Para el proceso del trasplante , se someten las plántulas a un proceso de

endurecimiento en el cual se reduce la aplicación de agua al germinador por tres
días y al momento del tras plante se humedece el suelo para facilitar la extracción
de las plántulas sin dañar el área de raíz , colocándolas en un balde con agua
fresca, protegiéndolas del calor del sol.
En climas medios y cálidos se aconseja dejar las plántulas a la sombra luego del
proceso de trasplante por un tiempo cercano a las dos semanas; eliminando poco
a poco el sombrío hasta que queden finalmente expuestas a las condiciones
naturales, esta labor se realiza con el propósito de que adquieren la consistencia
necesaria que permita su supervivencia en el sitio definitivo de plantación.
Figura 10. Actividad de trasplante
Tomado de viveros .2002
57
 Producción a raíz desnuda
En el caso de producción a raíz desnuda , las plántulas se dejan crecer en la era

hasta cuando completen las características para ser llevadas al sitio definitivo de
plantación.
Es conveniente aplicar una poda de raíz , en el momento del trasplante al sitio

definitivo, para asegurar que no quede la raíz principal doblada , lo que podrá
afectar el posterior desarrollo de la planta.
Figura 11. Producción a raíz desnuda.
Tomado de Viveros . 2002
58
Lección 15. Otros aspectos para la construcción de viveros
Con base en la identificación de la demanda de plantas y de un análisis de

mercado, el diseñador del vivero podrá tener una buena idea sobre cuáles son las
especies y la cantidad de planta a producir en cada cultivo.
El nivel de producción definirá las dimensiones del área de crecimiento; mientras

que los requerimientos biológicos de las especies a producir, determinarán los
tipos de ambientes de producción que serán necesitados.
Sin embargo, los constructores deberán tener siempre en cuenta la posibilidad de

que en el futuro, los niveles de producción o el número de especies consideradas
inicialmente, pueden incrementarse.
En este sentido, es importante considerar una adecuada flexibilidad durante el

establecimiento del vivero a fin de que se tenga la capacidad de responder a
oportunidades futuras de producción.
Es posible diseñar un vivero de contenedores sin contar con información

específica de producción, pero en tal caso las personas con conocimientos sobre
el comportamiento del mercado, deberán decidir sobre los niveles de producción
estimados y las especies posibles de producir.
Necesidad de diferentes ambientes de producción.
Si la producción programada puede hacerse de manera simultánea y bajo

ambientes muy similares, puede ser conveniente la utilización de estructuras
grandes
Este tipo de estructuras son inherentemente menos costosas en su construcción, y

generan un costo por unidad de superficie más eficiente.
Sus sistemas de riego y fertilización son simples de diseñar, y su costo por

calentamiento es menor, ya que su menor perímetro reduce el área de pérdida de
calor., además la cantidad de plantas afectadas por el “efecto de borde ” será
menor que con otros diseños.
Las estructuras de grandes dimensiones pueden ser divididas en ambientes

separados mediante una cortina móvil o puertas corredizas, aunque los sistemas
para el control ambiental deben estar diseñados de acuerdo con ello.
Mientras un conjunto de pequeños ambientes de producción pueden ser usados

para generar una gran variedad de ambientes, de acuerdo a los requerimientos
59
de las especies a cultivar, además de permitir diferentes programas de producción

durante el año. Si el cultivo consiste de especies con requerimientos totalmente
diferentes, entonces es conveniente la división por grupos que sean
biológicamente compatibles.
El número de grupos determinará a su vez la cantidad mínima de ambientes de

producción necesarios, a menos que se tenga que producir en diferentes
momentos del año en un sistema de producción múltiple.
El contar con varios ambientes de producción pequeños, también permite una

mayor flexibilidad en la propagación, manejo y producción. Desde un punto de
vista de planeación de viveros, los ambientes pequeños son más ventajosos
porque pueden irse agregando más estructuras en forma paulatina, sin tener que
interrumpir la producción y el riesgo de que el total de la producción se dañe es
bajo.
Para viveros permanentes se deben incluir en su diseño, como mínimo las

siguientes subáreas:
 Cercas
Se construyen con el fin de independizar el área del vivero y restringir la entrada

de animales y/o personas que pueden afectar la producción, a zonas específicas
del vivero ,además facilitan las labores de vigilancia.
 Eras de germinación
Es el sitio donde se produce la germinación de las semillas , se conoce también

como eras de germinación o germinadores.
Los germinadores tienen una altura variable según sea el material con el cual se
construyan, pudiendo ubicarse a nivel del suelo o a una mayor altura. Su longitud
es variable aunque por lo general no supera los 20 metros y un ancho que no
supera los 1,40 metros ; la separación entre germinadores promedia es de 40 cm
y se requiere para facilitar el paso de los operarios.
En terrenos pendientes , las eras de germinación son diseñadas ajustándose a la

inclinación del terreno, mediante variaciones en los taludes para impedir la caída
de la era y garantizar su completa nivelación; se pueden adelantar trabajos de
adecuación del terreno, especialmente el uso e terraplenes, aunque es un proceso
costoso.
60
Figura 12. Eras de germinación
Tomado de viveros .2002
 Caminos
En el vivero deben existir caminos principales y secundarios, para la movilización

propia de las actividades de la producción.
Los caminos principales, son aquellos por los cuales circulan los vehículos que
llevan materiales al vivero, principalmente tierra y los que llevan el material
producido; deben ser lo suficientemente anchos para permitir el paso de vehículos
pesados corno volquetas y estar ubicados equidistante de las eras para facilitar las
labores de carga.
Los caminos secundarios son los que se encuentran entre las eras y sirven para el
paso de tractores, carretillas y operarios. El adecuado diseño de las vías
interiores, influye en la eficiencia de los tiempos y movimientos de las labores
propias del vivero.
61
Figura 13. Caminos en el vivero
Tomado de viveros. 2002
 Sistema de riego
El sistema de riego en el vivero es de dos clases: El utilizado para las eras de

propagación, que normalmente es un sistema de microaspersión y el sistema de
riego para las eras de crecimiento y producción de gota más gruesa, donde se
emplea usualmente el sistema de aspersión.
 Bodegas
Para el almacenamiento de abonos, fungicidas, insecticidas, herbicidas, semillas y

demás insumos y para el almacenamiento de equipos y herramientas
 Oficina de administración
Para las labores administrativas del vivero como planificación de la producción,

control de personal, registro de costos, ventas, etc.
62
ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIÓN DE LA UNIDAD
Sembrar diez (10) semillas de maíz por matera, sembradas a una profundidad de
3cm en cinco (cinco) materas plásticas, utilizando como sustrato arena que debe
permanecer húmeda durante el ensayo.
En el cuadro 1 debe registrarse el porcentaje de germinación por matera y por día,

donde debe realizar un gráfico días –porcentaje de germinación por matera,
mientras en el cuadro 2 debe registrar la información solicitada.
Con la información obtenida del cuadro 2 de las cinco materas, calcule el

promedio y la desviación estándar para cada caso.
Cuadro1.
MATERA % de No de días donde No de días donde ocurre la

germinación ha germinado el germinación de la primera
a los 10 días 50% de las semilla
semillas
63
Cuadro 2. (Incluir en las casillas número de semillas que germinan cada día).
DIAS A GERMINACION
MATERA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Con la información desarrollada, consolidar un informe que incluya introducción,

objetivos, marco teórico con una revisión bibliográfica sobre la importancia de las
pruebas de germinación en campo, vigor y poder germinativo.
64
UNIDAD 2. LA PROPAGACIÓN ASEXUAL
CAPITULO 4. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL (INJERTOS)
Lección 16. Generalidades de la propagación asexual.
La reproducción asexual o vegetativa comprende la reproducción de partes

vegetativas de la planta original.
Para ello se utilizan tejidos vegetales que conserven la potencialidad de

multiplicación y diferenciación celular para generar nuevos tallos y raíces a partir
de estructuras meristemáticas presentes en diversos órganos.
La propagación vegetativa comprende desde procedimientos sencillos, conocidos

de tiempos inmemoriales por los campesinos de todo el mundo, hasta
procedimientos tecnológicamente muy avanzados, basados en la tecnología del
cultivo de tejidos vegetales.
Para asegurar el éxito en los procedimientos empleados en la propagación

vegetativa se requiere:
 Conocer los procedimientos técnicos y de manipulación del material vegetal a

reproducir.
 Conocer la estructura y forma de desarrollo de la planta.
 Conocer los diferentes métodos que pueden ser empleados en la propagación

de una determinada especie.
Como razones para emplear la propagación vegetativa sobresalen las siguientes:
 Mantenimiento de clones
 Propagación de plantas sin semilla o que aunque presenten formación de

semilla, estas sean poco viables o de bajo poder germinativo.
 Evitar que la fase juvenil de la planta sea prolongada.
65
 Razones económicas.
Un clon pude definirse como un conjunto genéticamente uniforme de individuos

derivados de un individuo común a través del uso de la propagación vegetativa.
En virtud de la totipotencia del tejido vegetal, es decir, de su capacidad para
formar yemas y raíces adventicias, casi cualquiera de los órganos de una planta
vascular tiene relación con su propagación vegetativa al sufrir modificaciones
anatómicas y funcionales que le permiten desarrollarse en un organismo vegetal
completo e independiente, con las mismas características genéticas de la planta
progenitora.
 Mutaciones
Aunque es importante precisar que dicha uniformidad genética puede verse

afectada por la interacción genotipo- ambiente, presentándose mutaciones
espontáneas , estas mutaciones pueden darse en cambios en la estructura del
cromosoma o cambios en el número de cromosomas a nivel del núcleo celular o
también en plastos y mitocondrias que normalmente afecta el contenido de
clorofila.
Otra manifestación mutacional permite la conformación de quimeras, que se

componen de la mezcla de dos o más tejidos diferentes genéticamente que
crecen en forma separada pero adyacentes en la misma planta.
Las quimeras pueden ocurrir a nivel de hojas, ramas, frutos y plantas enteras,
siendo más evidente a nivel de fruto y de yema.
Tabla 5. Tipos de mutaciones.
MUTACIONES
 Morfológicas
 Letales
TIPOS
 Condicionales
 Bioquímicas
 De resistencia
 Ocurre en tejido somático
MUTACION SOMATICA  Se mantiene por propagación
vegetativa
 No transmisible sexualmente
 Ocurre en células sexuales
MUTACION GERMINAL
 Se mantiene y estabiliza por
propagación sexual
MUTACIONES CROMOSOMICAS  Inversión.
66
 Duplicación
 Translocación
 Reducción
 Cambio en el nivel de ploidía
 Tejidos de constitución genética
QUIMERAS diferente
 En ciertos casos afectan nivel de
ploidía
 Mutación directa. Cambios de un
único par de nucleótidos.
 Mutación de transición: Purina
sustituida por otra purina o
pirimidina por otra pirimidina.
MUTACIONES GENICAS  Mutación de transversión :Purina
sustituida por pirimidina o al
contrario.
 Mutación por adición o deleción de
un par o varios pares de
nucleótidos: cambios de fase en
tramos del ADN.
67
Lección 17. El injerto – Generalidades.
El injerto es un sistema de multiplicación vegetativa en el cual se presenta la

unión en forma intima de una planta con parte de otra de la misma especie o de
una especie muy cercana, que después crecerán juntas y darán origen a un
individuo nuevo manifestándose como una unidad biológica.
Las dos partes se denominan patrón o porta-injerto , que es la parte que recibe el
injerto que conserva el sistema radicular y la otra parte se denomina vástago,
púa , yema o injerto que permitirá la conformación de brotes , ramas , hojas, flores
y frutos.
Figura 14.relación patrón-injerto .
Tomado del Manual del fruticultor moderno.1992
Esta técnica presenta como ventajas, sobre todo para el cultivo de árboles
frutales y de ornato, que permite utilizar como base del injerto plantas ya
establecidas que sean resistentes a condiciones desfavorables , enfermedades o
plagas , utilizándolas como receptoras de injertos de plantas más productivas y
con frutos de mejor calidad y mayor producción.
Además de acelerar la producción de frutos, con posibilidades de lograr plantas

homogéneas por sus características de resistencia y producción.
68
Siendo posible además el cambio de variedades de poco valor en el mercado por

variedades de mayor aceptación.
Las técnicas de injerto son muy variadas ( alrededor de 150 tipos de injertos) y
existe un método óptimo para cada propósito y tipo de planta.
Pero podemos hablar en forma general de dos grandes clases:
- injerto de púa: o injerto es un pequeño trozo de rama separado de la planta

madre que contiene varias yemas en reposo y que cuando se une con el
patrón, forma la porción superior del injerto y de la cual crecen el tallo y las
ramas, o ambos, de la planta injertada.
- injerto de yema: la púa o injerto se reduce en tamaño de manera que contenga

una sola yema.
 Condiciones para realizar un injerto
Para tener éxito en la realización de un injerto se requieren unas condiciones

tanto físicas como fisiológicas , como condiciones físicas que influyen en la unión
del injerto se encuentran las condiciones de temperatura, humedad, y oxígeno
presentes mientras ocurre la formación del callo .
Además de la actividad de crecimiento del patrón y su estado fisiológico, la forma

de realización del injerto, la contaminación por patógenos y las condiciones
ambientales en la fase posterior al injerto
Mientras las condiciones fisiológicas hacen relación con la afinidad y

compatibilidad patrón-injerto, que se basan en la posibilidad de que los tejidos de
ambos se unan y cumplan conjuntamente funciones fisiológicas.
 Afinidad
Siendo esencial que el cámbium o zona generatríz de la púa se coloque en

contacto estrecho con el cámbium del patrón. El cámbium es un tejido delgado de
la planta situado entre la corteza (floema) y la madera (xilema). Sus células son
meristemáticas, esto es, capaces de dividirse y formar nuevas células.
El injerto no puede funcionar si las zonas generatrices del patrón y del injerto no
están en contacto intimo, ya que posteriormente se presentará la formación de un
callo que favorecerá la unión y posterior proliferación de tejidos nuevos, que darán
origen a nuevas células cambiales y permitirán el desarrollo de los haces
vasculares.
69
La afinidad se presenta en mayor grado en la medida que se injerten variedades

de una misma especie, que entre especies del mismo género o entre géneros
distintos de la misma familia botánica.
 La compatibilidad
Se puede llegar a confundir la afinidad con la compatibilidad, la afinidad

comprende el hecho de que pueda realizarse la unión patrón-injerto. Mientras la
compatibilidad se relaciona con la facultad de que la unión permanezca en forma
satisfactoria a lo largo del tiempo.
La diferencia entre injerto compatible e incompatible no está bien definida. Desde

especies que tienen una relación estrecha y unen con facilidad, hasta otras no
relacionadas entre sí incapaces de unirse, hay una graduación intermedia de
plantas que forman una soldadura, pero con el tiempo muestran síntomas de
desarreglo en la unión o en su hábito de crecimiento.
Figura 15. Incompatibilidad patrón –injerto.
La incompatibilidad suele manifestarse con alguno de estos síntomas:
 Alto porcentaje de fallos en el injerto.

 Amarillamiento del follaje, a veces defoliación y falta de crecimiento.
 Muerte prematura de la planta.
70
 Diferencias marcadas en la tasa de crecimiento entre patrón y

variedad.
 Desarrollo excesivo de la unión, arriba o debajo de ella
 Ruptura por la unión del injerto.
La aparición, de forma aislada, de uno o varios de los síntomas antes descritos no

significa necesariamente que la unión sea incompatible. Estos síntomas pueden
ser consecuencia de condiciones ambientales desfavorables, presencia de
enfermedades o malas técnicas de injerto .
La incompatibilidades se pueden agrupar , sin importar su grado o el momento de

su aparición en dos :
 Incompatibilidad localizada: Comprende aquellos casos en los que el punto de

unión, o tejidos muy cercanos a él, presentan irregularidades en su desarrollo ,
manifestados en índices diferentes de crecimiento en grosor entre ambas
partes ( engrosamientos o abultamientos anormales),separación de los tejidos
y ruptura de la unión Si se utiliza un patrón intermedio se elimina esta reacción.
En este tipo de unión con frecuencia la estructura de la unión es mecánicamente

débil, presentando una interrupción en la continuidad de los tejidos vasculares.
 Incompatibilidad traslocada: Este tipo de incompatibilidad produce

degeneración del floema formándose una línea de color pardo o una zona
necrótica en el injerto. La unión presenta dificultades al movimiento de
carbohidratos, ocurriendo una acumulación en la parte superior y una
reducción abajo.
Este tipo de incompatibilidad está relacionada de forma clara con diferencias

genéticas entre el patrón y la variedad. Teniendo en cuenta la combinación de
sistemas fisiológicos, bioquímicos o anatómicos diferentes. En algunos casos se
ha demostrado que algunos compuestos que produce el patrón reaccionan con
otros de la variedad, originando otros nuevos compuestos que inhiben la actividad
del cambium. La reducción de la concentración de azúcares que llegan a la raíz
por dificultades de traslocación a través del injerto puede liberar en ella
compuestos tóxicos que producen su degeneración y muerte.
En otros casos, en las superficies en contacto de dos especies incompatibles, se

deposita una capa de suberina a lo largo de la pared celular, formándose una capa
necrótica de espesor creciente que conduce a la desecación de la púa o yema .
71
 Influencia entre las partes injertadas.
Al igual que una planta sin injertar , en la planta injertada existirán relaciones
determinantes entre la parte aérea y el sistema radical, es evidente que aunque
formen una unidad biológica , sus diferencias a nivel genético, la interrelación
entre patrón e injerto pueden superar las influencias presentes a nivel ambiental, y
se evidencian principalmente en el vigor y la precocidad. Y siendo más evidentes
las influencias del patrón sobre la variedad injertada .(Ver tabla 6)
Tanto el patrón como la copa mantienen individualmente, a través de toda su vida,

su carga genética original; de manera que el fruto producido por una planta
injertada tendrá, fundamentalmente, las características propias de la especie y
cultivar correspondiente a la planta madre de la cual se extrajeron las yemas, al
margen del patrón sobre el cual se haya realizado la injertación. Es decir, no existe
mezcla de características de los frutos del patrón y del injerto. Sin embargo,
existen influencias recíprocas que pueden alterar la manifestación de algunos
caracteres originales de una u otra pare de la planta.
Tabla 6. Influencia del patrón sobre la variedad
Tipo de influencia características
Sobre el vigor Plantas de diferente capacidad de desarrollo

comparativamente con una sin injertar.
Patrones obtenidos por semilla, gran heterogeneidad

con respecto al tamaño de planta. La disminución del
vigor permite mayores densidades de siembra y
facilidad de labores culturales.
Sobre la precocidad Se afecta el período vegetativo.
La injertación por sí misma acelera la fase productiva.
Sobre la época de Se afecta el período reproductivo , por cambios en la

floración relación carbono-nitrógeno, importante para la
ocurrencia de la floración.
Sobre la productividad La relación entre el transporte de raíz y la producción

de fotoasimilados se manifiesta en la productividad,
por afectar el desarrollo de las yemas florales y el
llenado de frutos.
72
Sobre el fruto No es muy clara ni grande , con patrones

enanificantes los frutos maduran en forma más
temprana, presentan un mejor color y un mayor
tamaño.
Sobre la longevidad A mayor precocidad menor longevidad , sin embargo

una mayor productividad puede compensar la
reducción en longevidad.
 Producción de patrones
La selección adecuada del patrón deriva en una mayor producción, por ello es
necesario conocer el comportamiento y características de los mismos.
En términos generales se distinguen dos tipos de patrones:
 Los provenientes del multiplicación por semilla o francos.
 Los propagados vegetativamente o clonales.
Los patrones francos son los más empleados universalmente , una de sus
principales ventajas es la facilidad de obtención y en consecuencia su bajo costo
relativo, presentando además un buen desarrollo radica, además de la reducida
posibilidad de transmisión de virus , ya que son pocos los virus que pueden
transmitirse por semillas sexuales .
Sin embargo estos patrones presentan como desventajas la imposibilidad de

lograr ciertas condiciones de resistencia a factores desfavorables, o de
enanificación o de precocidad, al no existir patrones francos que reúnan todas las
características deseables en todos los casos, como otro inconveniente se
presenta gran heterogeneidad de los materiales injertados principalmente en vigor
, debido a la variabilidad genética presente en el patrón.
Los patrones clonales o de multiplicación vegetativa , aseguran una mayor

homogeneidad en vigor, lo que puede influir favorablemente en la rentabilidad, sin
embargo su costo es más elevado que el de un patrón franco, debido al mayor
trabajo y a la mayor inversión que se requiere para su obtención, por otra parte , la
fácil transmisión de enfermedades virosas se convierte en su mayor desventaja,
lo que implica mayores medidas de control de la sanidad del material.
73
 Selección de plantas madre
Las plantas madre serán aquellas plantas de las cuales se obtendrán los injertos,
estas plantas madre serán plantas de una variedad identificada y conocida, por lo
cual deben manifestar en todos sus aspectos las características propias de la
variedad. Además de ser un material sano, sin presencia de plagas ni
enfermedades, en edad productiva, con alta producción de frutos de buena
calidad , peso y tamaño.
Para asegurar los cuidados necesarios para mantener la sanidad ,se hace
necesario que se encuentren localizados en un área pequeña aquellos materiales
que serán destinados como donantes de material de propagación.
Estas plantas madre requieren un trabajo permanente de identificación de las

mejores ramas y yemas, además de observar su productividad por lo cual es
normal llevar un libro de registros.
 Recomendaciones para tener éxito en la realización de un injerto
1. Selección de la metodología de injertación a utilizar de acuerdo con las

especias a injertar.
2. Selección del método de acuerdo con el estado fenológico y tamaño del

material vegetal.
3. Uso de material vegetativo fresco o almacenado en condiciones adecuadas.
4. Realización del injerto en un ambiente favorable, fresco y húmedo, ya sea en

campo o en vivero.
5. Ejecución del trabajo con rapidez y limpiamente.
6. Uso de herramientas adecuadas y bien afiladas.
7. Empleo de materiales selladores y de amarre.
8. Protección del injerto con sombra.
9. Realización de los tratamientos adecuados a cada tipo de injerto.
74
Lección 18. Principales técnicas de injertación (Parte 1)
 Injerto doble
Es la combinación posible que se puede realizar entre dos clones de plantas en un

arreglo o disposición vertical. Esto supone la inserción de un clon entre patrón y el
injerto. Esta inserción permitirá el desarrollo de una planta con tres tipos de
especies vegetales, a esta porción entre injerto y patrón se le conoce como patrón
intermedio.
El uso de este patrón intermedio es importante para la solución de ciertos

problemas de incompatibilidad, es decir, el patrón intermedio sirve de conector
entre especies vegetales que normalmente son incompatibles.
Además el uso de este patrón intermedio también es asociado con ciertas

características deseadas con las que pueda aportar y que se encuentren ausentes
tanto en la púa como en el patrón. También se ha comprobado que el patrón
intermedio influye sobre el crecimiento de los árboles aportando también sus
características.
 Injerto de escudete o yema
Es el tipo de injerto más utilizado en fruticultura ,ya que requiere de la utilización

de poco material vegetativo, una sola yema por cada injerto; su ejecución es muy
rápida con un alto porcentaje de prendimiento, utilizando patrones juveniles de
escaso diámetro; con posibilidad de reinjertar , en caso de fallas, sin que se dañe
el patrón.
Una condición importante para tener éxito se basa en contar con un patrón en
estado vegetativo, es ir en crecimiento activo, con un diámetro variable entre 0.5 a
2.5 cm.
Procedimiento
 Sobre la corteza del patrón se realiza un corte longitudinal , de poca

profundidad de entre 2 a 3 cm de longitud.
 Inmediatamente se efectúa un corte transversal en la parte superior del

primer corte, con una longitud variable de 0.5 a 1.5 cm, de tal forma que se
conformen dos ángulos rectos en forma de T.
75
 Previamente se ha seleccionada la vara portayemas, siendo de vigor medio,

de árboles en etapa productiva, esta se corta en horas de la mañana o se
tiene almacenada en frío en condiciones de humedad, a las cuales se les
retiran las hojas.
 A la vareta se le retira la yema , para ello, se realiza un corte transversal

debajo de la yema a 1.5 a 2 cm de la misma, que penetre un poco más de la
corteza y luego un poco más profundo , terminando el corte nuevamente
superficialmente y retirando posteriormente el exceso de madera .
 Para ubicar la yema se introduce de arriba hacia abajo por el espacio libre
que el corte en T en la corteza del patrón determina, resbalando suavemente
hasta que la yema ajuste por debajo de la corteza del patrón, a la madera de
él.
 Se sella con cinta de polietileno, dejando libre a la yema.
 Se desata a los 15 ó 20 días aproximadamente si ha agarrado. Si se deja

mucho tiempo atado se pueden perder por quedar ahogados una vez
brotados.
Figura 16. Injerto en T.
 Injerto en T invertida
El procedimiento de injertación es similar al proceso anterior , presentándose dos

variaciones , la primer es que el corte transversal de la corteza se realiza en la
parte inferior del corte longitudinal correspondiente y la segunda es que la yema
es empujada de abajo hacia arriba.
76
Es recomendado para regiones donde la precipitación es muy elevada o donde el

riego se realiza con manguera , ya que disminuye la posibilidad de que entre agua
a través e los cortes e interfiera con el proceso de prendimiento.
77
Lección 19. Principales técnicas de injertación (Parte 2).
 Injerto en forma de parche o chapa.
En este método , se utiliza un pedazo de corteza, de forma rectangular con una

yema, y que forma un parche, incrustándose en el patrón en un hueco del mismo
tamaño y forma realizado en él al quitar el correspondiente pedazo de corteza.
Para que el injerto tenga éxito es fundamental que la chapa tenga las mismas
medidas y forma del hueco realizado en el patrón, ajustando perfectamente y con
una buena coincidencia de los cortes transversales de arriba y de abajo más que
los cortes longitudinales.
Es empleado con éxito en materiales de corteza dura o en patrones no juveniles

de hasta dos años de edad o en patrones de hasta 10 cm de diámetro.
Figura 17. Injerto de parche.
Procedimiento
 En el patrón se selecciona un sitio liso que no tenga yemas, a una altura de 15

a 20 cm del suelo.
 Se realizan dos cortes longitudinales y dos cortes transversales de unos 2,5

cm. de ancho y 2,5 cm de largo.
 La chapa así marcada no se remueve del patrón hasta no se obtenga y

desprenda de la vareta el material que contiene la yema.
78
 En la vareta se procede de manera similar , desprendiendo la chapa, con la

mayor rapidez posible se desprende la chapa del patrón y se ubica la nueva
chapa.
 Se amarra el parche con cinta de polietileno o polivinilo, dejando al descubierto

la yema.
 Se realiza un despunte al patrón, dejando suficiente follaje para que siga

ocurriendo la fotosíntesis
 Se desata a los 15 días aproximadamente. si no se desata se pueden perder

por quedar ahogada una vez brotada la yema.
 Se deja una porción de tallo por arriba del chapa , para amarrar el brote y que
pueda tener un crecimiento vertical.
 Injerto de hendidura simple
Este tipo de injerto es el más recomendable cuando el patrón y la púa tienen el

mismo diámetro, por ejemplo, entre 0,5 a 3 cm.
Se puede emplear tanto en condiciones en campo como sobre patrones
previamente arrancados y arreglados.
Figura 18. Injerto de hendidura simple.
79
Procedimiento
• Se corta con unas tijeras de podar el patrón a la altura deseada y se le hace un

corte a lo largo por el centro de unos 6 cm de longitud.
• La púa debe tener al menos un año, el mismo tamaño que el patrón, y 2 ó 3
yemas. Si el patrón es de mayor diámetro que la púa, sólo pueden estar en
contacto por un lado.
 A la púa se le corta un bisel por ambos lados.
• Se introduce de tal manera que la corteza del patrón y la de la estaca se toquen

para que el cambium de ambos elementos quede en contacto.
• Se ata la unión con cinta de injertar y se encera con pasta o mástic para injertar.
Se pone también cera en la punta de la púa.
• No se desata hasta que las yemas hayan brotado y midan unos 5-10 cm. Más
tiempo tampoco es bueno porque puede quedar estrangulado al dificultar el paso
de savia.
 Injerto de doble hendidura
Se utiliza sobre relativamente gruesos, prefiriendo la implantación de dos varetas

siempre que el diámetro del patrón tenga capacidad para ello.
En el caso de que las dos varetas injertadas prendan se realiza posteriormente la

selección de la que presente mejores características, principalmente de vigor.
Figura 19. Injerto de doble hendidura
80
Procedimiento
Todo el proceso de injertación, amarre y sellado es similar al de la hendidura

simple, variando solo en el hecho de colocar dos cuñas en cada extremo de la
hendidura.
81
Lección 20. Principales técnicas de injertación (Parte 3).
 Injerto Ingles
Es uno de Los métodos de injerto más empleado, teniendo en cuenta la unión que
se presenta entre el patrón y la vareta, utilizando tanto patrones como varetas del
mismo diámetro.
Figura 20. Injerto Inglés.
Procedimiento
 Tanto en el patrón como en la vareta se efectúan exactamente los mismos

cortes de las mismas medidas.
 Se realiza un corte inclinado, a manera de bisel, en la vareta, este corte se
comienza a 1 cm aproximadamente debajo de la yema.
 Luego de realizar un corte en sentido longitudinal que penetra en general,

1 cm y que se efectúa en el lugar que marque un tercio de la longitud del
corte oblicuo. Este segundo corte se realiza en la vareta a un tercio de la
82
parte inferior del corte inclinado, y en el patrón a un tercio de la parte

superior de él.
 Una vez hechos los cortes se puede observar tanto en la vareta y en el

patrón una lengüeta o muesca,. Resbalando los dos planos inclinados uno
sobre otro, se logra el ensamblaje y acoplamiento de las dos muescas.
 Una vez ensambladas las dos partes del injerto se debe efectuar el amarre,
no tanto para mantenerlas unidas sino para protegerlos de la pérdida de
agua por contacto con el aire.
Como variantes del injerto ingles se utilizan en el injerto Ingles de silla cuando el
patrón es mucho más grueso que la vareta donde el injerto se realiza no en el
centro del patrón sino lateralmente.
Figura 21 .Injerto Ingles de silla .
 Injerto de corona
Se utiliza , cuando los patrones son de considerable diámetro, principalmente en la

reconstrucción de árboles o para cambiar variedad.
83
En este tipo de injerto las varetas deben ser colocadas entre la corteza y la
madera del patrón.
Figura 22 .Injerto de corona
Procedimiento
 En cada corte transversal efectuado sobre una rama gruesa se colocan

varias púas, pero por lo general no deben estar ubicadas a distancias
menores de 5 cm entre sí.
 En el patrón debe introducirse entre corteza y madera las varetas, afiladas y

adelgazadas por un lado, de tal modo que constituyan un tejido uniforme,
pero de escaso grosor que pueda penetrar sin dificultad entre corteza y
madera, sin romper la corteza.
 A la corteza se le efectúa en cada lugar donde se hará un injerto, un corte

longitudinal que llegue hasta la madera y de longitud variable ( alrededor de 5
cm de largo).
 Las varetas se preparan realizando debajo de la yema y en el lado opuesto

un corte que penetre hasta aproximadamente un tercio del grosor, para
84
posteriormente realizar un corte en bisel, mientras en el lado opuesto se

puede realizar un pequeño corte semejante, no paralelo al primer corte sino
ladeado para facilitar el contacto entre vareta y patrón.
 Lista la vareta se introduce bajo la corteza separada, justamente en

contacto con la parte de la corteza que limita con el corte longitudinal y que
no fue levantada o separada de la madera.
 Para lograr una buena unión se pueden utilizar puntillas de cabeza ancha y
plana de tal manera que penetren en la corteza y la vareta, y ajusten todo a
la madera del patrón y se recubre con cera.
 Injerto de enchapado lateral
Con este tipo de injerto se pueden utilizar patrones de diferente edad y diámetro,
sin que la vareta sea del mismo diámetro.
Figura 23 .Injerto de enchapado lateral.
Procedimiento
 Realizar un corte longitudinal sobre el patrón entre 3 a 10 cm, en un lugar

liso sin nudos, este corte es superficial aunque implica llegar a la madera.
85
 Cerca de la base del corte, a 0.5cm aproximadamente, se realiza otro corte

transversal inclinado de tal modo que una vez efectuado se desprende la
mayor pite de la sección delimitada por el primer corte, quedando una
pequeña muesca.
 A la vareta que contiene varias yemas, se quitan las hojas cortándolas por
el pecíolo, a la vareta se le efectúa un corte longitudinal semejante en
forma y longitud al que se hizo en el patrón.
 Por el lado contrario a este primer corte se realiza otro pequeño corte
inclinado que se une al primero formando en la base una pequeña cuña.
 Se procede a hacer la unión ya que se permite el acoplamiento perfecto

entre las partes amarrando con una cinta de polietileno de tal manera que la
cinta pase por arriba entre ambas partes para evitar la posible entrada del
agua de lluvia o riego por la unión de los dos elementos.
 A las dos o tres semanas puede observarse el procedimiento del injerto, en

caso afirmativo se procede a despuntar el patrón para promover la
brotación de yemas de la vareta.
 Injerto de aproximación lateral
Se emplea en espacios en donde normalmente los procedimientos habituales

fallan debido a una lenta soldadura de los tejidos.
Esta lentitud carece de importancia ya que el material que se injerta no se separa

de la planta original, sino hasta el momento en que haya ocurrido el prendimiento
del injerto.
Figura 24 .Injerto de aproximación lateral
86
Procedimiento
 Tanto en el patrón como en la vareta, que deben ser diámetros similares,

se realizan cortes longitudinales en la corteza que llegue hasta la madera,
de modo que forman superficies ovaladas iguales.
 Estas superficies se ponen en contacto una con la otra, se amarran

fuertemente y se cubren con cera.
 Injerto de aproximación en puente
Se utiliza para revigorizar árboles viejos o con ataques de plagas o enfermedades

que afecten el sistema radical.
Figura 25. Injerto en puente.
Procedimiento
87
 Se plantan alrededor del árbol afectado, varios pequeños patrones,

preferiblemente obtenidos por semilla.
 Se practican en el árbol, cortes longitudinales dobles, paralelos, de una

longitud variable de 10 a 20 cm, que permitan la extracción de una tira de
corteza de anchura semejante a la de los patrones delgados.
 En la parte superior de estos cortes longitudinales se práctica un corte

transversal que permita la formación de una lengüeta en la corteza
ranurada de 1 cm de longitud.
 En los patrones, en la cara que se dirige hacia la ranura practicada en el

árbol, se efectúa un corte longitudinal de las mismas dimensiones tanto de
largo como de ancho, penetrando hasta una tercera parte del grueso del
patrón.
 Posteriormente se efectúa otro corte en la cara posterior, inclinando en bisel

a 1 cm de la parte terminal, formando una pequeña cuña afilada que se
introducirá en la muesca que se hizo en el árbol.
 En el patrón se arquea y se pone en contacto con el patrón, asegurando la

unión con puntillas cada 2 cm aproximadamente, penetrando la madera de
un árbol y se recubre con cera.
88
CAPITULO 5. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL

(ACODOS Y ESTACAS)
Lección 21. Principales técnicas de acodo (Parte 1).
El acodo consiste en obtener raíces en ramas o brotes antes del corte o

separación del material vegetativo de la planta madre, por lo cual es un
procedimiento seguro ya que no se corre el riesgo de falta de prendimiento,
mientras no haya una formación adecuada de raíces y que son de difícil resultado
si se utiliza la propagación por estacas.
Es un procedimiento de propagación muy conveniente para aquellos materiales

que ofrecen dificultad para la emisión de raíces y que son de difícil resultado si se
utiliza la propagación por estacas.
Para lograr la emisión de raíces se requiere de que el acodo se encuentre en

continuo contacto con cierto grado de humedad y una buena relación de
reguladores de crecimiento a nivel endógeno ( que pueden ser suplidos a nivel
exógeno).
A nivel comercial es un sistema poco empleado debido a la lentitud para obtener

un número elevado de plantas, siendo empleado para obtener árboles con raíz y
patrones vegetativos.
El acodamiento puede ocurrir en forma natural (como en la mora) o en forma

artificial donde tratamientos a los tallos tales como el arqueamiento de ramas que
permite una acumulación de reguladores de crecimiento localizado facilita la
formación de raíces. Como la exclusión de la luz en el sitio donde se van a formar
raíces adventicias que permite el ahilamiento (elongación y adelgazamiento del
tallo) y el blanqueamiento (perdida de pigmentos) facilita el desarrollo y formación
de raíces.
 Acodo aéreo
Esta forma de acodo puede ser practicada en frutales de hoja perenne en

cualquier época del año y en caducifolios en época previa al reposo.
Consiste en realizar en una rama de alrededor de un año de edad un corte

transversal en forma de anillo, de 1-2 cm de ancho, que implique el levantamiento
y remoción de una capa de corteza, de tal manera que esta herida y sus zonas
89
vecinas deben ser cubiertas por un material que retenga gran cantidad de
humedad como el musgo o en algunos casos espuma que se coloca envolviendo
completamente dicha sección y formando una masa compacta y completamente
humedecida.
Esta cubierta humedecida a su vez se recubre por polietileno para evitar la pérdida
de la humedad, este polietileno se amarra tanto arriba como debajo de la sección
anular.
Previamente a la realización del acodo deben eliminarse las hojas cercanas donde
se realizara el corte. Igualmente es conveniente antes de recubrir con el musgo
aplicar un producto enraizador sobre el corte para facilitar el enraizamiento.
Figura 26. Acodo aéreo.
Tomado de Viveros . 2002
 Acodo de punta
Es un tipo de acodo poco visual, pero con gran éxito en mora y frambuesa,. Estas
plantas emiten ramas muy alargadas, que al ser delgadas son muy flexibles y que
tienden a doblarse hasta el suelo, cuando la punta de las ramas toma una forma
un tanto arqueada se realiza el acodamiento.
El acodamiento se realiza con la apertura de zanjas o agujeros en el suelo, no

muy profundos, en los cuales se entierran las puntas de las ramas.
90
Posteriormente se obtiene una pequeña planta desarrollada a partir del ápice

vegetativo enterrando su propio sistema radical que puede ser separada de la
planta madre.
Figura 27. Acodo de punta.
91
Lección 22. Principales técnicas de acodo (Parte 2)
 Acodo subterráneo simple
Este acodo puede realizarse en aquellas plantas que producen ramas lo

suficientemente largas y flexibles que pueden ser inclinadas y mantenidas
enterradas en una parte mientras su parte terminal permanece libre, siendo
utilizada para mora, frambuesa y vid principalmente.
En algunos casos se puede requerir la ayuda de un gancho que colocado en la

parte inferior de la rama la sostenga firmemente fijada entre su levantamiento
natural.
Figura 28. Acodo subterráneo simple.
Pueden realizarse incisiones transversales, anillos totales o parciales que

favorezcan la emisión de raíces, al igual que la aplicación de reguladores de
crecimiento tipo auxinas que favorezcan el enraizamiento.
Como una variante se puede realizar el acodo subterráneo compuesto en donde la

rama flexible es enterrada en una parte dejando una posición libre y a su vez
volver a enterrar otra porción libre, esto es un acodo simple repetido para la misma
rama más de una vez.
92
Figura 29. Acodo subterráneo compuesto
 Acodo en montículo
Este tipo de acodo se emplea en la floricultura, no necesariamente para obtener

plantas de forma directa, sino para propagar patrones vegetativos que
posteriormente serán injertados.
Los pies madre deben tener una certificación varietal completa sanidad, en una
primera etapa los pies madre estarán sembrados en surcos y cuando estén
establecidos se podarán dejando de cada planta un pedazo de brote arriba de la
superficie del suelo de aproximadamente 30- 40 cm, lo que permitirá la emisión de
abundantes brotes.
A estos nuevos brotes se les debe podar y cuando tengan una longitud de 10 cm
se realiza un aparque de tal manera que queden cubiertos hasta la mitad de su
longitud, lo que facilitará la emisión de raíces si se realiza cuando los brotes son
juveniles. Nuevamente cuando los brotes tengan de 10- 15 cm se realiza un
último aporque, en el cual se cubren las ramas 10cm con el suelo.
Finalmente se separan los brotes enraizados.
93
Figura 30. Acodo en montículo.
94
Lección 23. Propagación por estacas (Parte 1)
Es un método muy usado conveniente para la propagación de algunas especies y

para la obtención de patrones en algunos frutales.
Consiste en el corte de material vegetativo, ya sea en pedazos de brotes, ramas o

raíces, que se colocan en un medio de suelo que favorezca la emisión de raíces y
la brotación de la parte aérea, obteniendo una nueva planta igual genéticamente a
la planta original
Según la parte de la planta de donde se obtienen los segmentos (cortes o

fragmentos) se ha dividido en cortes de: hojas, de brotes o renuevos, de raíz y de
ramas.
La propagación vegetativa mediante segmentos de ramas o brotes es uno de los

métodos más usados para propagar plantas leñosas en vivero. Según las
características de madurez de la madera de donde se obtienen las ramas o brotes,
se habla de estacas de madera dura, y de madera suave.
 Ventajas e inconvenientes del estacado
Ventajas:
- Notable simplicidad del procedimiento.
- Obtención de gran número de plantas a partir de una sola planta madre
- Gran rapidez.
- Homogeneidad de las plantas obtenidas.
- Necesidad de poco espacio
- Bajo costo de operación.
Desventajas:
- Reducidos Porcentajes de procedimiento en algunas especies y

variedades.
 Criterios para la selección de estacas
Como pasos y criterios para obtener estacas se pueden considerar los siguientes
1) Seleccionar plantas donantes vigorosas y sanas preferentemente de un banco
de plantas donantes o de un grupo de plantas previamente seleccionadas .
95
2)La obtención de ramas de la planta donante debe realizarse por la mañana o por
la tarde (antes de las 10 am o después de las 4 pm), con la finalidad de evitar la
pérdida de agua durante las horas de mayor insolación.
3) Elegir preferiblemente los segmentos basales o centrales de la rama, ya que

normalmente allí se encuentran yemas de un estado y edad fisiológica adecuado
, además que en la rama es donde se tienen más reservas alimenticias necesarias
para el desarrollo de las nuevas raíces.
4) El tamaño de los segmentos puede variar entre 10 a 75 cm de longitud, el

criterio adecuado para elegirlo depende de la especie y del tipo de estaca ,
incluyendo por lo menos dos nudos, aunque lo recomendable es de cuatro a seis,
sobre todo cuando los entrenudos son muy cortos. El diámetro de las ramas en
que se realizan los cortes puede ser de 0.5 a 5 centímetros.
5) El corte basal se hace justo abajo de un nudo (sitio donde preferentemente se

forman raíces adventicias) y el corte superior se realiza de 1.5 a 2.5 cm arriba del
otro nudo.
6) Ya cortados los brotes se marcan con el número de la planta donante (número

de clon), se introducen lo más rápidamente posible en bolsas de plástico con
algún material que retenga bastante agua y se cierran para evitar la pérdida de
humedad. Deben mantenerse en un sitio fresco y sombreado y en cuanto sea
posible se trasladan al área de enraizamiento del vivero.
Figura 31. Obtención de estacas.
Tomado de vivero .2002
96
Lección 24. Propagación por estacas (Parte 2)
 Estacas de madera dura
Este tipo de estacas son fáciles de preparar, no son fácilmente perecederas,

pudiendo ser transportadas a grandes distancias ,y por lo general presentan alto
prendimiento aunque pueden requerir de un tiempo mayor que otros tipos de
estacas, las estacas de madera dura se preparan de una longitud de 20-30 cm ,
donde se incluyen por lo menos dos nudos, el corte en la base de la estaca se
hace recto, por debajo de un nudo y el corte superior de realiza en forma diagonal,
dos centímetros arriba de un nudo. El diámetro de la estaca puede variar entre
0.5-3 cm, dependiendo de la especie, pero nunca inferior a 0.5 cm.
Se puede hablar de tres tipos de estacas de madera depende como se haga el

corte , pudiendo ser de mazo (incluye una sección del tallo de madera más vieja),
de talón o tacón (la porción de madera vieja es más pequeña) y el recto (no
incluye madera vieja)
Figura 32. .Tipos de estacas de madera dura
A .Recta B.Talón C. De mazo
 Estacas de madera suave
Este tipo de estacas presenta cierto grado de flexibilidad, pero están

suficientemente duras para quebrarse si se dobla mucho. El material más usado
procede de las ramas laterales de la planta madre o donante que se encuentran
en crecimiento activo, se cortan con una longitud entre los siete a 15 cm,
97
dejando de dos a tres entrenudos, realizando el corte en la base de las estacas

por debajo de un nudo, eliminando las hojas inferiores pudiendo dejar las hojas
superiores o parte de ellas si son de gran tamaño para reducir la transpiración.
Es importante por ello mantener las estacas en un sitio húmedo y sombreado

desde el momento del corte hasta el proceso de enraizamiento, debido a la
presencia de hojas que continúan transpirando activamente y a las condiciones
diferenciales de madurez en las ramas jóvenes
 Estacas de hojas
Este tipo de propagación no es tan frecuente en la naturaleza como los dos

anteriores. Sin embargo, es posible encontrarlo en las hojas de algunos helechos,
que forman una especie de acodadura al entrar en contacto con el suelo; en otras
especies, entre las que se encuentran las violetas africanas, Gloxinias y otras
Gesnariaceas , Begonia rex y otras Begoniaceas y las Peperomias, se producen
raíces a partir de sus hojas y posteriormente tallos que conduce a la formación de
nuevos individuos.
En la mayoría de estos casos las raíces adventicias y los brotes que se originan,
se forman en la base de la hoja y raramente esta se vuelve parte de la nueva
planta.
En el caso de la violeta africana y otras Gesnariaceas, se puede utilizar toda la

hoja o porciones más pequeñas que incluya una porción de peciolo.
Para las begonias se puede plantar toda la hoja con gajo, manteniendo el pecíolo
entero, o se puede colocar la hoja en porciones sobre arena húmeda y sobre las
venas principales aparecerán los nuevos brotes.
98
Lección 25. Enraizamiento de estacas
Teniendo en cuenta que no todas las plantas tienen la capacidad de enraizar

naturalmente, se hace necesario en muchas ocasiones aplicar sustancias
hormonales que provoquen la formación de raíces., es el caso de las auxinas
como el ácido indolacético (AIA), y el ácido naftalenacético (ANA) que estimulan
la formación y el desarrollo de las raíces cuando se aplican la base de las estacas.
Estas sustancias solas o en combinación pueden ser aplicadas por medio del
remojo de la base de las estacas (de 2 a 3 cm) en soluciones acuosas y con bajas
concentraciones de auxina (de 4 a 12 horas), según las instrucciones de los
preparados comerciales. Sin embargo, este método es lento y poco exacto, difícil
de realizar cuando los cortes son numerosos .
Otra forma de realizar la aplicación del producto enraizador es la dilución del

producto en alcohol etílico como solvente, realizando una aspersión sobre la base
de la estaca antes de colocarlas en el sitio de propagación.
 Aspectos que influyen en el enraizamiento de estacas
- Edad del árbol madre.

- Tamaño de la estaca
- Contenido de las reservas de la estaca.
- Epoca de corte de la estaca.
- Uso de hormonas de enraizamiento.
- Epoca de estacado.
- Forma de ejecución del estacado.
- Tipo de suelo.
- Condiciones ambientales.
Teniendo en cuenta lo anterior , se deriva que el ambiente en el cual las estacas

son puestas a enraizar es de vital importancia. y por tanto las estacas deben estar
en un sitio que reúna unas condiciones optimas para a asegurar la obtención de
nuevo material vegetal.
Este sitio se denomina propagador , que consiste en una construcción que evita la
pérdida de agua del medio que rodea a las estacas, para ello se puede contar con
sistemas de aspersión que regulen automáticamente la frecuencia y la intensidad
de la aspersión, en el caso de utilizar invernaderos con control de luz y humedad.
99
Sin embargo, la humedad también se puede controlar de manera sencilla en un

compartimiento que tenga una tapa transparente para permitir el paso de la luz y
evitar la pérdida de humedad.
Las estacas ya preparadas se siembran rápidamente tomando en cuenta las

siguientes indicaciones: los cortes deben colocarse a una profundidad de 2 a 3
cm; para asegurar que queden firmes es necesario compactar un poco el sustrato
de enraizamiento; cuando se utilizan estacas multinodales con varias hojas se
debe evitar que las hojas inferiores queden en contacto con el medio de
enraizamiento para evitar su daño.
100
CAPITULO 6. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL

(TALLOS MODIFICADOS)
Lección 26. Propagación vegetativa por tallos modificados (Parte 1)
 Bulbos
Constan de un "disco basal" de cuyo ápice surge el tallo floral, se desarrollan

sobre tallos cortos y engrosados, a partir de yemas axilares de hojas carnosas. De
éstas obtienen elementos de reserva .El engrosamiento se forma en la base de las
hojas. Se desarrollan subterráneamente en forma de tallos carnosos, cubiertos
con hojas engrosadas a manera de escamas que funcionan como órganos de
reserva.
Es posible que se produzca más de un bulbo a partir de cada yema. En algunos

casos se desarrollan masas de bulbos en el extremo del tallo, cada uno de ellos
llamados bulbilos, los cuales pueden ser dispersados lejos del bulbo parental. En
el centro de los bulbos existe un meristemo vegetativo o un vástago floral.
Los bulbos se clasifican a su vez en tunicados y escamosos; los tunicados, que

están cubiertos por escamas secas y membranosas superpuestas que protegen al
bulbo y le dan una estructura más o menos sólida. A esta clase pertenecen la
cebolla y el tulipán; los escamosos o no tunicados, que no presentan la cubierta
seca y sus escamas de consistencia carnosa están separadas y unidas a la placa
basal.
Los hijuelos que emiten los bulbos pueden ser separados para la multiplicación.
Algunas plantas que se reproducen por bulbos son: Narcissus, amaryllis, lilium, ,
tulipa, veltheimia, zephyrantes, etc.
101
Figura 33. A. Bulbo tunicado. B. Bulbo dentado.
Tomado de Botany. Hill et al ,1.990
102
 Cormos
Los cormos son muy parecidos a los bulbos en lo que se refiere a su aspecto
externo. A diferencia de los bulbos están recubiertos de hojas secas, no de
escamas. Presentan una base hinchada con nudos y abultamientos en el interior,
en ocasiones mostrando yemas.
Los pequeños cormos que se producen en la parte inferior son aptos para la
reproducción después del engrose; la parte superior emite un cormo muy
desarrollado. Algunas plantas que se reproducen por cormos son: Crocus,
acidanthera, colchicum, freesia, gladiolus, ixia, sternbergia, trotonia, watsonia.
Se forman en las yemas de las axilas de las hojas de un tallo robusto y suculento
que proporciona los nutrientes necesarios para la nueva estructura, la cual se
desprenderá del progenitor y se desarrollará subterráneamente como un tallo
corto, erecto y sólido con nudos y entrenudos. Los cormos tienen forma de esferas
aplanadas dorsoventralmente, como los del gladiolo y el azafrán. Están envueltos
en delgadas hojas escamosas que los protegen del daño físico y de la pérdida de
agua, pero que no funcionan como estructuras de almacenamiento, a diferencia de
las escamas de los bulbos.
Éste desarrolla raíces adventicias ventrales o basales. El ápice del cormo es un

vástago terminal que se desarrollará en las hojas y en un vástago floral terminado
por una inflorescencia, y en cada uno de los nudos se producen las yemas
axilares
El cormo se multiplica ramificándose simpódicamente, y si se corta un cormo,

manteniendo una yema en cada sección, cada uno de estos segmentos
desarrollará un cormo nuevo.
Sobre el extremo inferior del cormo se producen pequeñas estructuras semejantes

a los estolones conocidos como cormelos o cormillos. La muerte del cormo
parental permitirá la separación de los cormos hijos.
103
Figura 34. A. Cormo de Gladiolo.
104
 Tubérculos
Son estructuras gruesas, suculentas, que actúan también como estructuras de

reserva. Se forman en el extremo de tallos subterráneos delgados. Un ejemplo
muy conocido lo constituye la papa.
Los tubérculos presentan en su superficie nudos con hojas escamosas, arreglados

de manera espiral, y cada uno de ellos consta de una o más yemas pequeñas.
Cuando se inicia el crecimiento del vástago principal las raíces adventicias se

desarrollan en la base del tubérculo y las yemas horizontales se alargan y
producen tallos etiolados en forma de estolones. A partir de los tubérculos que han
formado ramas horizontales se forman tubérculos nuevos
Figura 35. Tubérculo de papa.
Tomado de http://3.bp.blogspot.com
105
 Rizomas
Son tallos que se desarrollan bajo tierra, normalmente en sentido horizontal.
Presentan varias yemas que pueden ser divididas para la reproducción. Algunas
plantas que se reproducen por rizoma son: Achimenes, canna y zantedeschia.
Se generan a partir del crecimiento horizontal de un tallo subterráneo, por lo
general más robusto que el que da origen a un estolón. Las viejas porciones se
degradan y se separan en fragmentos que deberán enraizar de manera
independiente.
Este tallo subterráneo presenta hojas escamosas en las axilas, donde se pueden
generar yemas axilares, además de presentar raíces adventicias
Una vez formado el vástago principal se da un crecimiento continuo. Cada

estación de crecimiento presenta un crecimiento simpodial por medio de la yema
axilar o monopodial por medio de la yema terminal.
El rizoma funciona como órgano de almacenamiento de reservas. De esta manera

se propagan especies de importancia económica, tales como el bambú, la caña de
azúcar, el plátano, así como algunos pastos.
Figura 36..Rizoma de pasto y rizoma de Canna indica .
106
Lección 30. Propagación vegetativa por tallos modificados (Parte 5).
 Seudobulbos
Consisten en partes engrosadas y aéreas del tallo que presentan determinadas

especies muy características, como las orquídeas cattleya.
Son crecimientos tuberosos del tallo completo o de parte de éste o de las ramas.
En las axilas de las escamas de la base de los pseudobulbos se forman vástagos
nuevos o pseudobulbos en serie que conectan segmentos del tallo .
 Estolones
Constan de secciones relativamente largas y delgadas de tallos aéreos

horizontales con entrenudos largos y cortos alternados que generan raíces
adventicias.
La separación de estos segmentos enraizados permite el desarrollo de plantas

hijas. La fresa es un ejemplo de las especies que comúnmente presentan este tipo
de propagación .
Figura 37.Estolón de fresa
Tomado de: commons.wikimedia.org
107
ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIÓN DE LA UNIDAD 2
 Investigue tres (3) tipos de injertos que realicen en su región sobre especie
de interés económico, realizando un diagrama gráfico y explicativo del
procedimiento (pasos) de cada una de las técnicas investigadas.
 Investigar cuales son las especies vegetales más importantes sembradas

en Colombia que son reproducidas por los métodos de acodo y estaca.
108
UNIDAD 3. MICROPROPAGACIÓN DE PLANTAS
CAPITULO 7. ASPECTOS BÁSICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

(PARTE 1)
Lección 31. Generalidades del cultivo de tejidos.
 Historia del cultivo in vitro
En 1.665, Hooke realiza la primera descripción de una célula.
En 1.674, Leeuhenhoek, realiza la descripción de la vida celular.
En 1.838 Schleiden, Establece el concepto celular en plantas sobre la totipotencia

celular.
En 1.846, Nageli establece que las células vegetales se forman por división de
células vegetales existentes.
En 1.892 Sachs indica que las plantas sintetizan sustáncias para poder formar
órganos.
En 1902, Hänning realiza un cultivo de embriones, aunque esto no se puede

considerar como el inicio del cultivo in vitro ya que los embriones no necesitan
hormonas para crecer.
En esa misma año, Haberlandt realizó un cultivo de células aisladas del mesófilo
de hoja, sin consiguir células en división.
En 1.909, Kuster realiza el primer intento de fusión de protoplastos vegetales , sin

lograr su supervivencia.
En 1922 Robbins comienza a usar extractos de levadura y de tiamina para realizar

los medios de cultivo , logrando cultivar in vitro ápices de raíz por corto tiempo.
En 1933 Thimann demuestra la influencia de las hormonas en el crecimiento

vegetal.
En 1934, Gautheret realiza un cultivo en condiciones asépticas del tejido cambial

de árboles.
En 1.936, La Rue realiza el cultivo de embriones en Gimnospermas.
109
En 1937, Went y Thimann descubren la primera auxina: el ácido indolacético o

IAA.
En 1939, Gautheret cultiva segmentos de raíz de zanahoria en un medio con sales

minerales, sacarosa, vitaminas y auxinas y teoriza sobre la posibilidad de
crecimiento sin límite.
En 1.941,Van Oberbekk utiliza la leche de coco en el cultivo de embriones de

Datura.
En 1944, Skoog descubrió que los callos se podían diferenciar aplicando

hormonas.
En 1950, Hoagland y Aaron establecieron los 11 tipos de sales que necesitaban

las plantas para su crecimiento.
En 1952, Morel y Martin realizan la primera aplicación del microinjerto y obtienen

plantas libres de virus por meristemos.
En 1957, Skoog y Miller establecieron las cantidades de auxinas y citoquininas

que se necesitaban para diferenciar un callo.
En 1958, Steward obtuvo callos de zanahoria que posteriormente diferenció a una

planta completa.
En 1960, Cocking obtuvo protoplastos empleando enzimas de digestión
En 1.962 , Murashige y Skoog, formulan el medio MS, uno de los medios más
empleados.
En, 1.964, Nitsch lograr la inducción floral en condiciones in vitro.
Para el mismo año, Guha y Maheswary, obtienen plantas haploides a partir de

anteras de Datura.
En 1.965, Ledoux, realiza pruebas para introducir DNA extraño en células.
En 1.971 Kao et al y Takebe, realizan pruebas para la regeneración de plantas

provenientes de protoplastos.
En 1.972, Carlson et al, fusionan protoplastos y regeneran hibridos.
En 1.977,mediante la utilización de anteras China ( arroz) y Japón (tabaco) logran

variedades mejoradas .
110
En este mismo año, Chilton et al, lograr la integración del plásmido Ti de

Agrobacterium en plantas.
En 1.978, Melchers et al, lograr la hibridación somática entre tomate y papa.
En 1.984, primera patente de un gen de una planta.
 Definición de cultivo de tejidos
Como puede observarse en el desarrollo histórico del cultivo de tejidos vegetales

distintas partes de la planta fueron utilizadas ( tejidos de hoja , de tallo de raíz,
meristemos, protoplastos , anteras, etc).
Teniendo en cuenta que estas técnicas presentan características comunes como:
 Ocurren a microescala , se requiere una parte de un tejido vegetal.
 Se optimizan las condiciones ambientales , esto es, se homogenizan

condiciones físicas, nitricionales y hormonales.
 Se excluyen todos los microorganísmos.
 Generalmente no se reproduce el patrón normal de desarrollo de un planta.
 Existe la capacidad de manipular células individuales lo que permite nuevas

alternativas no posibles en la reproducción y mejoramiento vegetal
convencional.
Estas técnicas de cultivo –no convencionales- solamente hasta después de 1.945

se agruparon bajo el nombre de cultivo de tejidos vegetales, aunque también se
conoce como cultivo in vitro, que es un término muy genérico que se refiere más
bien a la metodología usada que al propio objetivo de ese método. En sentido
estricto, in vitro quiere decir "dentro de vidrio", es decir, el cultivo de plantas o de
alguna de sus partes (pero también de células y tejidos animales) dentro de
recipientes de vidrio en condiciones de ambiente controlado.
Roca (1993) establece que el cultivo de tejidos in vitro de plantas comprende la

combinación de un grupo heterogéneo de técnicas mediante las cuales una parte
separada de la planta o explante (embriones, órganos, tejidos, células ,
protoplastos, meristemos , etc.) se cultiva asépticamente en un medio de
composición química definida , incubado en condiciones ambientales controladas.
Y donde múltiples potencialidades como las mostradas en la figura 38 son útiles

para el uso, rescate y preservación de recursos vegetales.
111
Figura 38. Potencialidades del cultivo de tejidos
112
Lección 32. Constitución de un laboratorio de cultivo de tejidos.
Un laboratorio de cultivo de tejidos consta de las siguientes áreas o secciones,

principalmente:
 Area de preparación
Se utiliza principalmente para preparar los medios de cultivo, pero debe proveer
también un espacio para almacenamiento de materiales de vidrio y de plástico y
de los reactivos químicos. Debe contar con mesas de trabajo para la preparación
de los medios y para colocar las balanzas, medidor de pH, agitador magnético, y
un espacio para el refrigerador.
 Area de lavado y de esterilización
El área de lavado debe incluir un lavadero grande y una fuente de agua de alto
grado de pureza, para tal efecto debe tenerse un destilador de agua. Esta área
debe contar con un espacio para almacenar el agua destilada en botellas
plásticas.
El área de esterilización debe contar con un espacio para el autoclave, y debe

incluir un espacio para una estufa, y una estufa de secado, además de una
estantería para almacenar material de vidrio no estéril.
 Area de Transferencia
En esta área del laboratorio se realiza el trabajo de excisión, inoculación y

transferencia de los explantes a los medios de cultivo. Aquí se encuentra ubicado
la cámara de flujo laminar y se puede ubicar un estante con puerta que permita
almacenar material estéril.
 Area de incubación
El área de incubación o crecimiento in vitro debe proporcionar un buen control de

la temperatura ( promedio 25 °C) y de la iluminación ( 1000 a 5000 lux). En el
cuarto se instala estantes metálicos con dimensiones variables, el ancho entre
0.30 m a 1 m, el largo de acuerdo al tamaño del cuarto, la altura total entre 1.8 a
2.2 m y la distancia entre entrepaños de 0.20 a 0.50 m. Estos estantes se
encuentran provistos de lámparas fluorescentes, donde puede ser conveniente
113
que los balastos queden instalados afuera del cuarto y la regulación del tiempo de
funcionamiento de las lámparas está controlado por un reloj temporizador.
 Area de Adaptación
Está área es vital para lograr la adaptación del material producido in vitro y puede
estar constituida por un invernadero.
Es importante anotar que las áreas que conforman el Laboratorio con excepción
del área de adaptación , deben tener pisos lavables en materiales cerámicos o de
caucho de alta duración, así mismo las paredes del laboratorio deben ser blancas,
con pintura lavable de alta resistencia, evitando en las esquinas que formen
ángulos de 90° (esquinas curvas).
 Equipos y elementos necesarios para el montaje de un laboratorio
Cuarto de incubación
Iluminación fluorescente
Estantería metálica
Termómetro de máximas y mínimas
Reloj temporizador* para la regulación del fotoperiodo.
Cuarto de siembra
Cámara de flujo laminar

Estante para material de vidrio estéril
Area de preparación de medios
Refrigerador pequeño
Balanza analítica (precisión hasta 0.01 g)
Balanza de precisión ( precisión hasta 0.1 mg)
Phmetro
Destilador de agua
Desionizador
Autoclave
Microondas*
Placa caliente con agitación magnética
Area de lavado
Lavadero metálico
114
Horno de secado y esterilización
Otros equipos , materiales y reactivos
Material para cerrado de tubos y frascos (papel aluminio,tapones, algodón, etc)

Suministro de agua , gas y electricidad
Probetas de 100ml, 500ml y 100ml
Pipetas graduadas de 1ml, 2ml, 5 ml, 10 ml.
Frascos de vidrio de diferentes volúmenes
cajas de petri
Beaker de 100ml,250 ml, 600 ml, 1000 ml.
Erlenmeyer de 25 ml,125 ml,250 ml, 500 ml,1000 ml
Amplia gama de productos químicos
Sacarosa*
Agar-agar
Hipoclorito de Sodio, Hipoclorito de Calcio.
Etanol (96%)
Mangos para bisturi
Cuchillas para bisturi
Tijeras pequeñas
pinzas metálicas cortas
pinzas metálicas largas
Mechero de alcohol
Papel para envolver
Papel filtro
Toallas de papel
Espátulas
Detergente anionico
Cepillos de lavado para frascos
Elementos de aseo
Rollo de Parafilm
Frascos lavadores plásticos
Gradillas metálicas
Cestillos metálicos
Depósito de agua destilada
Escurridores
115
Lección 33. Los medios de cultivo
Aunque se han formulado una gran cantidad de medios de cultivo, antes de iniciar
una investigación, es necesario definir los objetivos para determinar cual medio se
va a emplear, ajustándolo y modificándolo si es necesario.
El éxito en un trabajo con cultivo de tejidos se debe principalmente a la elección

del medio de cultivo por cuanto existe una interacción entre el explante utilizado y
los requerimientos nutricionales., teniendo en cuenta que los requerimientos
nutricionales para un crecimiento in vitro óptimo varían con la especie, e incluso
son específicos de acuerdo a la parte de la planta que se esté cultivando y a la
respuesta que se desea obtener.
Desde 1.940 se han realizado una gran cantidad de trabajos referentes a las
necesidades nutricionales de explantes utilizando medios estrictamente
definidos. En términos generales , la mayor parte de los explantes se pueden
cultivar en un medio que contenga una mezcla de sales minerales asegurando al
menos el mantenimiento del mismo sin presentar cambios en crecimiento y
diferenciación.
Mientras algunos tejidos solamente en medios completamente definidos y

complementados con ciertos microelementos, vitaminas y sustancias promotoras
de crecimiento pueden ser cultivados obteniendo respuestas favorables al cultivo
in vitro.
Teniendo en cuenta la gran cantidad de información que puede obtenerse de la

literatura sobre el cultivo de tejidos vegetales , esta puede convertirse en una
herramienta valiosa para la selección de un medio de cultivo , la dificultad se
deriva de la confiabilidad de la información obtenida , pues , normalmente se
omiten o no son completos y claros algunos de los procesos desarrollados .
Por ello es importante comprender la parte básica del sistema biológico con el cual
se espera trabajar, tal como la definición del material desde el punto de vista
taxonómico, genético y de desarrollo, ya que se presenta variabilidad en la
respuesta obtenida de acuerdo al genotipo utilizado y de la forma como se realice
el cultivo.
A menudo el problema se basa en la interpretación de los materiales biológicos

empleados en los trabajos experimentales, encontrándose diferencias en las
descripciones morfológicas de los orígenes de los explantes.
116
Así mismo las supresiones o modificaciones de varios o muchos de los

compuestos utilizados en los medios básicos frecuentemente complejizan la
interpretación de los resultados obtenidos. Para obviar esta dificultad es
conveniente que la información indique la designación de las sales minerales y de
los suplementos de crecimiento y el valor del pH del medio.
El desarrollo de los materiales in vitro es altamente dependiente de la interacción

entre la ocurrencia natural de procesos de organogénesis , la presencia natural de
reguladores de crecimiento y de reguladores en el medio, por ello las respuestas
pueden mostrar marcadas diferencias de acuerdo a la combinación de estos
factores.
 Composición de los medios de cultivo
Podemos en forma general decir que un medio de cultivo contiene:
 Una fuente de carbono.

 Nutrientes minerales
 Vitaminas.
 Un agente gelificante ( en el caso de medios sólidos o semisólidos)
 Hormonas vegetales.
 Otros compuestos.
Generalmente cuando se hace referencia a un medio basal se hace referencia a

aquel medio que contiene una fuente de carbono, nutrientes minerales y
vitaminas.
Fuentes de carbono
Son la fuente de carbono y energía, y más teniendo en cuenta que los explantes
cultivados in vitro son ampliamente heterotróficos, en sus primeras fases.
La sacarosa es la fuente más utilizada ( 1 al 5%), pudiendo reemplazarse por

glucosa y en menor medida por maltosa y galactosa.
Nutrientes minerales
En los medios de cultivo cualitativamente se encuentran los mismos elementos (

macro y Micronutrientes) que son requeridos esencialmente para el crecimiento de
plantas. (ver tabla 8 función de los macro y micronutrientes ).
117
Vitaminas
Si bien todos los medios contienen comúnmente vitaminas que in vitro favorecen
el crecimiento de tejidos, hasta el momento la única vitamina que se considera
necesaria en medios de cultivo es la Tiamina(0.1- 1 mg/L).
Aunque se han señalado efectos benéficos del ácido pantotenico, la piridoxina, la

riboflavina, y el ácido nicotínico.
Agente gelificante
En los medios semisólidos o sólidos comúnmente se utiliza el agar (0.3-1%),

considerándose importante la pureza del mismo, pues sus minerales trazas
pueden alterar la respuesta in vitro.
Hormonas vegetales o reguladores de crecimiento
Los fitoreguladores, fitohormonas, reguladores de crecimiento vegetal, hormonas

de crecimiento vegetal, son compuestos orgánicos sintetizados por las plantas
superiores, que influyen sobre el crecimiento y desarrollo, actúan generalmente en
un lugar diferente a donde son producidas y se encuentran presentes y activas en
muy pequeñas cantidades.
En el cultivo in vitro , estos compuestos naturales o sintéticos juegan un papel

muy importante ya que la clase y concentración interactúa con el genoma de la
planta, siendo responsables de la distribución de los compuestos que la planta
biosintetiza y determinan el crecimiento relativo de todos los órganos de la planta.
En general los explantes in vitro podrían presentar las siguientes necesidades

hormonales:
1. Explantes que no requieran ni auxinas ni citoquininas

2. Explantes que requieran solo auxinas.
3. Explantes que requieran solo citoquininas.
4. Explantes que requieran tanto auxinas como citoquininas.
En el caso de especies en las que no se haya trabajado previamente se deben

plantear las necesidades hormonales, su concentración absoluta y relativa y si son
necesarias otros tipos de hormonas.
Si se requiere la utilización de reguladores especialmente auxinas y/o

citoquininas, se debe establecer el tiempo en el cual permanecerán los explantes
en cada etapa, ya que se puede producir el efecto de habituación, es decir,
cultivos in vitro que inicialmente necesitan reguladores, para su crecimiento y/o
formación de órganos, después de algunos repicados , necesitan menores aportes
118
de ellos, ya que han acumulado parte de los reguladores aportados en el medio de

cultivo y si se mantiene el nivel inicial puede generar alteraciones en los nuevos
explantes. ( ver tabla 7 , Hormonas y concentraciones de trabajo).
 Auxinas
Producen elongación celular y expansión de los tejidos, división celular (formación

de callos), formación de raíces adventicias, inhibición de la formación de brotes
axilares y adventicios.
La formación de raíces se observa en bajas concentraciones , mientras la

producción de callos se obtiene con concentraciones altas.
Dentro de las principales auxinas se encuentran:
 El ácido--indolacético (AIA) que se produce de manera natural en las plantas,

siendo sensible a la acción de enzimas, se oxidan en la luz y es termolabil.
 El ácido-- indolbutírico (AIB)
 El ácido naftalen-acético (ANA), su principal uso es la producción de
rizogénesis.
 El ácido indol-propionico (AIP).
 El 2,4 D o ácido 2,4 dicloro fenoxiacético.
 El 2,4,5 T o ácido 2,4,5 tricloro fenoxiacético. Estos dos últimos son utilizados
principalmente para la formación de callos, afecta procesos de fotosíntesis y
puede producir vitrificación de los explantes.
 Citoquininas
Poseen una alta actividad sobre la división celular , retardan la senescencia de

los órganos vegetales, promueven la formación de vástagos axilares
disminuyendo la dominancia apical , inducen la iniciación del crecimiento en tallos
y yemas, y el rompimiento del letargo en yemas y semillas de muchas especies.
Para el cultivo de tejidos se utilizan las siguientes citoquininas:
 Kinetina: 6-Furfuril-amino-purina
 2ip: 6-Dimetil-amino-purina
 BA: 6-Bencil adenina.
 BAP: 6-Bencil-adenin- purina.
 Zeatina: 6- (4-hidroxi-3 metilbut-2-enilamino) purina.
 Adenina.
119
En general la concentración de trabajo está en función de su Molaridad así:

Para la proliferación de tejidos 10-7 – 10-6 M.
Formación de yemas sobre callos 10-6 – 10-5 M.
Proliferación de meristemos axilares 10-5 – 10-4 M
 Giberelinas
Las giberelinas son un grupo de compuestos que inducen la elongación de los

entrenudos y el crecimiento de los meristemos o yemas en condiciones in vitro,
también pueden romper la dormición de embriones aislados o yemas, inhiben
también la formación de raíces y de brotes adventicios .
La Principal giberelina utilizada en condiciones in vitro es la GA 3
Tabla 7. Hormonas y concentraciones de trabajo
Auxina Peso mol Diluyente esterilización Concentración

de trabajo
(ppm)
2,4D 221 Etanol AC 0.1-10 optimo

5
NaOH 1N
AIA 175.2 Etanol AC/F 0.001-10

Óptimo 0.1-1
NaOH 1N
AIB 203.2 Etanol AC/F 0.1-10
NaOH 1N
AIP 189.2 NaOH 1 N AC/F 0.1-10
ANA 186.2 NaOH 1 N AC 1-10 optimo 2
2,4,5 T 255.5 Etanol AC 0.01-5
Citoquinina Peso mol Diluyente esterilización Concentración

de trabajo
(ppm)
120
BAP 309.4 Etanol AC/F 0.1-5
BA 225.3 NaOH 1N F 0.01-5
ZEATINA 219.2 NaOH 1N AC/F 0.01-5
KINETINA 215.2 NaOH 1N AC/F 0.1-5
Giberelina Peso mol Diluyente esterilización Concentración

de trabajo
(ppm)
KGA3 384.5 Agua AC/F 0.01-5
GA3 346.4 Etanol AC/F 0.01-5
AC =autoclave; F= filtración.
Otros compuestos
Existen un tipo variado de compuestos que son incorporados a los medios de

cultivo, sobresaliendo principalmente :
 Leche de coco(5-15% v/v)

 Antioxidantes ( ácido cítrico, ácido ascorbico)
 Aminoácidos ( Sulfato de Adenina (2-120 ppm), glicina, asparagina, cisteína,
tirosina, glutamina,etc.)
 Carbón activado ( 0.1-5%)
 Caseína hidrolizada(0.1-1%)
 Jugos de frutas
 Extractos de papa o levadura.
 Purinas y Pirimidinas.
121
Tabla 8 Función de los Macro y Micronutrientes
Macronutrientes Función
Nitrógeno Síntesis de ácidos nucleicos, proteínas,

clorofila
Magnesio Síntesis de clorofila y ribosomas

Fósforo Forma parte de la energética celular
Potasio Regulación osmótica, actividad
enzimática, translocación de azucares
Calcio Componente de la membrana celular,
Azufre Síntesis de aminoácidos
Sodio Importante el halofitas, y rutas C4 y

CAM
Micronutrientes Función
Molibdeno Síntesis de proteínas
Hierro Oxido-reducción
Manganeso Síntesis de Clorofila
Boro Actividad meristemática
Cobre Proceso de lignificación
Zinc Oxidación e hidrolización de

compuestos fenólicos
Cobalto Componente de la vitamina B12
Cloro Evolución del O2 en la fotosíntesis
122
Lección 34. Preparación de un medio de cultivo (Parte 1)
La preparación de medios puede realizarse de dos formas, una de ellas es a

través de medios comerciales con premezclas de los elementos constituyentes
del mísmo, entre estos se consiguen los medios MS, B5, Nitsch and Nitsch, With,
Hiller, Vacin and Went, Anderson y otros . (ver tabla 9)
La otra forma , es a partir de soluciones stock concentradas o soluciones madre ,

siendo una práctica habitual en todos los laboratorios preparar soluciones stock
concentradas de los distintos componentes, agrupados teniendo en cuenta que
algunas sustancias son incompatibles con otras y producen fenómenos de
precipitación como es el caso por ejemplo del Calcio y el Magnesio que forman
precipitados con fosfatos.
Es habitual trabajar con una solución stock de macronutrientes, una de

micronutrientes, una de hierro con un agente quelante, otra de vitaminas y mio-
inositol, así como con soluciones específicas para los demás componentes del
medio
Las soluciones stock se deben mantener en frascos ámbar, con una etiqueta que
los identifique con fecha de preparación. Estas pueden mantenerse durante un
cierto tiempo en la nevera o en el congelador, para el caso de macro y
micronutrientes pueden almacenarse hasta por un año, para vitaminas por tres
meses.
Mientras para las hormonas como el AIA debe emplearse antes de dos semanas
de preparación, el ácido ascorbico y las giberelinas se preparan en el momento de
la utilización, por lo cual es conveniente mantener soluciones stock de hormonas
por muy corto tiempo. (ver Tabla 7)
Tabla 9.Composición de algunos medios de cultivo
COMPOSICION DE ALGUNOS MEDIOS DE CULTIVO
Constituyentes Medios (mg l-1)
White's Heller's MS B5 Nitsch's
NH4NO3 - - 1.650,0000 - 720,0000
KNO3 80,0000 - 1.900,0000 2.500,0000 950,0000
CaCl2.2H2O - 75,0000 440,0000 150,0000 -
123
CaCl2 - - - - 166,0000
MgSO4.7H2O 737,0000 250,0000 370,0000 250,0000 185,0000
KH2PO4 - - 170,0000 - 68,0000
K2SO4 - - - - -
(NH4)2SO4 - - - 134,0000 -
Ca(NO3)2.4H2O 288,0000 - - - -
NaNO3 - 600,0000 - - -
Na2SO4 200,0000 - - - -
NaH2PO2.H2O 19,0000 125,0000 - 150,0000 -
KCl 65,0000 750,0000 - - -
KI 0,7500 0,0100 0,8300 0,7500 -
H3BO3 1,5000 1,0000 6,2000 3,0000 10,0000
MnSO4.4H2O 6,6500 0,1000 22,3000 - 25,0000
MnSO4.H2O - - - 3,0000 -
ZnSO4.7H2O 2,9700 1,0000 8,6000 2,0000 10,0000
Zn.Na2.EDTA - - - - -
Na2MoO4.2H2O - - 0,2500 0,2500 0,2500
MoO3 0,0001 - - - -
CuSO4.5H2O 0,0010 0,0300 0,0250 0,0250 0,0250
CoCl2.6H2O - - 0,0250 0,0250 -
AlCl3 - 0,0300 - - -
NiCl2.6H2O - 0,0300 - - -
FeCl3.6H2O - 1,0000 - - -
FeSO4.7H2O - - 27,8000 27,8000 27,8000
Na2.EDTA.2H2O - - 37,3000 37,3000 37,3000
124
Fe2(SO4)3 2,5000 - - -
Inositol - - 100,0000 100,0000 100,0000
Acido 0,5000 - 0,5000 1,0000 5,0000

Nicotínico
Piridoxina HCl 0,1000 - 0,5000 1,0000 0,5000
Tiamina HCl 0,1000 - 0,1000 10,0000 0,5000
Glicina 3,0000 - 2,0000 - 2,0000
Acido Fólico - - - - 0,5000
Biotina - - - - 0,0500
Sacarosa 20,0000 30,0000 20,0000 20,0000
pH 5,5 5,7 5,5
 Preparación de un medio partiendo de soluciones stock
Para la preparación de un medio de cultivo a partir de soluciones stock, se

desarrollan los siguientes pasos:
1. En un erlenmeyer agregue un volumen conocido de agua destilada esteril.
2. Añadir el volumen de soluciones de macronutrientes, micronutrientes y

vitaminas , agitando.
3. A continuación, añadir la solución stock que contenga la fuente de hierro y

agitar.
Se debe tener en cuenta que se debe utilizar una pipeta por solución stock
agregada , además de tomar el volúmen requerido de acuerdo al a cantidad de
medio a preparar.
4. Agregar la fuente de carbono y agitar hasta que se disuelva completamente.
5. Completar con agua destilada esteril al volumen requerido de Medio, agitar y

ajustar el pH para que se encuentre entre 5,7-5,9., añadiendo NaOH 0.1 N o
HCl 0.1N al medio.
125
6.Si el medio a preparar se requiere que sea semisólido o sólido, se agrega el

agente gelificante, agitando y calentando la solución hasta que se formen un
rosario de burbujas , sin dejar ebullir.
7.Verter el contenido en los recipientes de cultivo, procediendo a taparlos y

esterilizandolos en autoclave..
8. Cuando finalice el proceso de esterilización, dejar enfriar el material para que el

medio adquiera una textura gelatinosa.
El medio de cultivo puede permanecer en buenas condiciones durante una

semana si se almacena a temperatura ambiente, y hasta un mes si se conserva a
4 ºC.
Conviene tener en cuenta que algunos de los componentes del medio de cultivo
pueden ser termolábiles (algunas vitaminas, algunos reguladores,...). En este
caso, la esterilización de la solución que contienen la substancia termolábil debe
hacerse por filtración y añadirse una vez esterilizada al medio de cultivo .
 Cálculo de soluciones stock
Para el cálculo de las soluciones stock, como un primer criterio se debe determinar
los requerimientos de medio de cultivo, teniendo en cuenta el tiempo de
almacenamiento máximo.
Como ejemplo se realizarán los cálculos para soluciones stock del medio MS, en
los cuales se requieren 5 litros de medio para un tiempo de experimentación de
seis meses y se prepararán 2 litros de una solución stock de vitaminas .(columna
4)
Ya definidas las necesidades del medio de cultivo y el agrupamiento de las

soluciones stock se define cual es el volumen en mililitros de cada solución
necesarios para la preparación de un litro de medio, normalmente se utilizan
valores fácilmente divisibles por si se requiere preparar no un litro de medio sino
menores volúmenes.(columna 5)
126
Tabla 10. Cálculo de soluciónes stock, Medio MS
COMPUESTO SOLUCION mg/L L de medio mL de mL de la Peso final

requeridos solución solución en gramos
stock para 1 stock
L de medio
(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7)
NH4NO3 A 1650 5 20 100 8,25
KNO3 B 1900 5 20 100 9,5
MgSO4.7H20 370 1,85
MnSO4.H2O 22.3 0.1115
KH2PO4 C 170 5 5 25 0,85
ZnSO4.7H2O 8.6 0, 043
CuSO4.5H2O 0.025 0,000125
CaCl2.2H2O 440 2,2
CoCl2.H2O 0.025 0,000125
Na2MoO4.2H2O D 0.25 5 5 25 0,00125
H3BO3 6.2 0.031
KI 0.83 0,00415
Na2.EDTA 37.3 0,0746

E 2 5 10
FeSO4.7H2O 27.8 0,0556
Tiamina-HCl 0.02 0,00004
Glicina 0.4 0, 0008

F 2 5 10
Acido nicotínico 0.1 0,0002
Piridoxina 0.1 0,0002
Mioinositol G 100 2 10 20 0,2
127
Como siguiente paso se calcula el volumen a preparar de la solución stock así:

mL/L de solución stock x Número de litros a preparar
Solución A: 20 mL/ L x 5 L  100 mL

Solución D: 5 mL/ L x 5 L  25 mL
Solución E : 5 mL/ L x 2 L  10mL
Solución G : 10 mL/ L x 2 L  20mL (ver columna 6)
Después se calcula la cantidad total en gramos a pesar de cada uno de los

compuestos del medio así:
mg/L del compuesto x Número de litros a preparar
Solución A con NH4NO3 : 1.650 mg/L x 5 L  8.250 mg ; 8,25 g

Solución C con ZnSO4.7H2O: 8,6 mg/L x 5 L  43 mg ; 0,043 g
Solución D con CoCl2.H2O : 0.025 mg/L x 5 L 0,125 mg ; 0,000125 g
Solución E con FeSO4.7H2O : 27,8 mg/L x 2 L 55,6 mg ; 0.0556 g
(Para los demás cálculos ver columna 7).
128
Lección 35. Preparación de un medio de cultivo (Parte 2)
 Cálculo de concentraciones hormonales
En el cultivo de tejidos vegetales se acostumbra hablar de concentraciones de

uso y trabajo de sustancias tales como las hormonas vegetales en partes por
millón (ppm) , mg/L, mM y M tomando como referente su uso en un litro de
medio.
Por tanto es necesario clarificar la forma de realizar los cálculos de

requerimientos utilizando cualquiera de estas unidades.
 Cálculo de ppm y mg/L
Cuando se habla de partes por millón se habla de tener como base un millón de
partes, para el caso de una ppm tendremos que:
En una concentración donde se tenga 1 ppm expresado como notación decimal

quedaría enunciado así:
1x 10-6 mg
Ahora tomando como base un litro de medio quedaría expresada así:
1x 10-6 mg/L
Teniendo en cuenta que hablamos de una parte por un millón de partes se puede
concluir que:
1 ppm es equivalente a 1 mg/L
 Ejercicio de aplicación
En medio litro de medio se requiere la adición del producto A en una

concentración de 50 ppm, Un producto B en una concentración de 50 mM/L (
peso molar 745) y un producto C en una concentración de 5M/L ( peso de una
mol 245). Calcular para cada producto la cantidad a pesar .
129
Para el producto A tendremos:
1 ppm = 1 mg/L
Por tanto :
50 ppm = 50 mg/L
Como se preparará medio litro de medio y no un litro , la cantidad a pesar del

producto A será de :
25 mg
 Cálculo en mM y M
Para poder realizar cálculos de mM y M , se requerirá conocer el peso de una

mol del compuesto a trabajar , para aclarar el cálculo utilizando estas unidades
continuaremos realizando el ejercicio de aplicación.
Para la sustancia B el peso de una mol es de 745 g , y 1 Mol tendrá 1000 mM,
por tanto el peso de una mM será de :
745 g / 1000 = 0,745 g
Como se requiere añadir al medio 50 mM/L , entonces se requiere :
0,745 g x 50 = 37,25 g/L
de los cuales se requerirán 18,625 g del compuesto B para el medio litro

requerido.
Para el compuesto C tendremos que una mol tiene 1 x106M, por tanto si un mol
del compuesto pesa 245 g , el peso de una M será de :
245 g /1 x106 = 0,000245 g
Como se requiere añadir al medio 5 M/L , entonces se requiere :
0,000245 g x 5 = 0,001225 g/L
de los cuales se requerirán 0,0006125 g o 0,6125 mg del compuesto C para el

medio litro requerido.
130
CAPITULO 8. ASPECTOS BÁSICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

(PARTE 2)
Lección 36. Control preventivo de la contaminación (Parte 1).
El cuidado primordial que se debe tener al hacer cultivo in vitro es la conservación

del material y los medios de cultivo libres de microorganismos.
Donde la contaminación por hongos y bacterias( incluyendo Agrobacterium,

Bacillus, Corynebacterium, Enterobacter, Lactobacillus, Pseudomanas,
Staphylococcus, y Xanthomonas.), son uno de los mayores problemas que
afronta quien trabaja en este campo.
Aunque tambien se pueden presentar levaduras y virus , estos últimos son de

difícil detección y pueden influir en etapas posteriores del cultivo.
Las siguientes son las fuentes donde se encuentran contaminantes y sobre los
cuales se requieren medidas de prevención:
 Los tejidos
La puesta en cultivo es un proceso que consiste en obtener material vegetal in

vitro libre de microorganismos, a partir de material vegetal ex vitro.
Estos tejidos pueden llevar contaminantes tanto en su superficie como en su

interior, para la desinfección superficial de estos tejidos, aunque existen una gran
variedad de productos químicos que se pueden utilizar como desinfectantes
superficiales, en la actualidad es casi generalizado el empleo de etanol (70%) y
del hipoclorito de Sodio (NaOCl) en concentraciones del 1 al 3% , un producto
alternativo al hipoclorito de sodio es el hipoclorito de calcio (Ca(COCl) 2) que se
utiliza en concentraciones del 2 al 12%.
Otro agente esterilizante es el cloruro de mercurio (HgCl2), el cual se disuelve en

agua a una concentración de 0,01-0,5 (p/v). El material vegetal está en contacto
con el producto durante 2-12 minutos, para ser enjuagado concienzudamente con
agua estéril al final del proceso. Este producto debe utilizarse bajo medidas de
seguridad, ya que es nocivo para la salud.
En algunos casos resulta útil la adición de algún agente tensoactivo (TWEEN 20 ú

80 en concentración del 0.01 al 0.1%).
En el proceso de desinfección es conveniente agitar el tejido conjuntamente con la

solución desinfectante, y después de tratar los tejidos con las soluciones
131
desinfectantes, es necesario remover de él, los restos del tejido mediante varias
lavadas de agua destilada estéril con 2 a 3 enjuagues sucesivos ( 2, 5 y 15
minutos , respectivamente).
Este proceso de esterilización superficial presenta, dos problemas: la capacidad

de los agentes esterilizantes para dañar los tejidos vegetales y la presencia de
microorganismos en el interior de dichos tejidos.
En el primer caso, se aconseja disminuir la concentración y/o tiempo de exposición

a los agentes esterilizantes. Con esta medida disminuyen los daños al material
vegetal pero aumenta el porcentaje de contaminación.
En el segundo caso, el proceso de esterilización no tiene el efecto deseado puesto

que los microorganismos internos no se eliminan y pueden proliferar en el medio
de cultivo, por lo cual se puede llegar a requerir productos fungistáticos o
bacteriostáticos, dentro de estos últimos los más recomendados por su amplio
espectro son el Sulfato de Gentamicina, ,el sulfato de estreptomicina, Penicilina,
Kanamicina, y Rifampicina en concentraciones de 10-50 mg/L.
 El área de trabajo
Deben tenerse en cuenta como medidas preventivas la limpieza y orden riguroso

en los mesones de trabajo , limpiándo no solo los mesones sino paredes con
alcohol , hipoclorito o algún detergente., para evitar la acumulación de esporas de
hongos y bacterias.
En el área donde se encuentra la cámara de flujo donde se realiza gran parte de

las manipulaciones propias del cultivo in vitro donde se requieren condiciones de
esterilidad total para evitar la contaminación de los cultivos se deben tener en
cuenta aspectos tales como la limpieza diaria, no introducir ningún material
infectado, no permitir la entrada a objetos o personas innecesarias, no utilizar la
cámara como almacén y antes de comenzar a trabajar en ella encenderla de 15 a
30 minutos antes de su uso.
Así mismo es necesario el mantenimiento de la cámara limpiando los filtros de

forma regular y remplazándolos anualmente.
132
Lección 37. Control preventivo de la contaminación (Parte 2).
 Los instrumentos
Los instrumentos metálicos tales como pinzas requieren de mantener las

condiciones de esterilidad, por lo cual es importante mientras se utilizan colocarlos
en alcohol etílico y flamearlos cuidadosamente, manteniendo varios juegos
mientras se trabaja.
El material de vidrio y los elementos necesarios para la labor de siembra (Pinzas,

espátulas, bisturíes, agua) deben esterilizarse ya sea en autoclave o en estufa, si
es en estufa u horno de acuerdo a la temperatura empleada se requieren unos
tiempos específicos como se muestra a continuación:
Tabla 10.Relación de tiempo y temperatura para esterilización en estufa
Temperatura 0C Tiempo en minutos
121 15-30
140 10-20
160 7-15
160-180 5-10
El material debe envolverse en papel para evitar la adherencia de contaminantes

mientras se guardan y utilizan.
 El investigador
Es la fuente primaria de contaminación por tanto debe utilizar batas de laboratorio

limpias, mascarillas para nariz y boca, gorro para el cabello y polainas, siendo
necesario antes de iniciar su trabajo lavar brazos y manos con agua y jabón y
enjuagarse con alcohol al 70%.
133
Lección 38. La esterilización y sus métodos.
Se entiende por esterilización a la destrucción total de los microorganismos por

medios físicos y se utiliza principalmente sobre los medios de cultivo y el agua a
utilizar en procesos de enjuague de tejidos o de preparación de medios.
Para este proceso se utiliza principalmente el autoclave y la filtración.
 El autoclave
Esteriliza por medio del vapor bajo presión siendo muy eficiente para la
destrucción de bacterias y hongos y sus esporas, Su efectividad depende del
tiempo, de la presión, de la temperatura y del volumen del objeto a esterilizar,
normalmente se acostumbra utilizar una presión de 15 libras; a esta presión la
temperatura del vapor es aproximadamente 121 0C (250 0F), como puede verse a
continuación:
Tabla 11.Relación volumen- tiempo de autoclaveado
Volúmen del medio/recipiente (ml) Tiempo mínimo (minutos)
20-50 15
75 20
250-500 25
1000 30
1500 35
2000 40
Nota: el tiempo se empieza a contar cuando se alcanza la presión de 15 libras.
Las ventajas de este sistema son:
 Velocidad.
 Destrucción adicional de virus.
 Simplicidad
Mientras sus desventajas son:

 Puede haber cambios en el pH del medio de 0.3 a 0.5 unidades.
134
 Algunos compuestos se pueden separar: zeatina, ácido giberélico, sacarosa,

Extractos vegetales, enzimas.
 Pueden producirse reacciones químicas que resulten en una pérdida de
actividad, si la temperatura es demasiado alta.
 A altas temperaturas los azúcares pueden caramelizar, resultando tóxicos al
explante.
 .por un proceso muy largo de autoclaveado se puede despolimerizar el agar o
puede ocurrir precipitación de sales.
 Filtración
La filtración se usa cuando se deben añadir al medio sustancias termolábiles,

donde las soluciones o medios líquidos pasan a través de un filtro de membrana,
donde son retenidas partículas de microorganísmos de mayor tamaño que el
correspondiente tamaño de poro del filtro.
Los filtros que se utilizan son de Nitrato o acetato de celulosa , con tamaño de
poro de 0,22 μ.
Como mayor ventaja presenta que las sustancias termolábiles, pueden pasar a
través del filtro sin sufrir ninguna modificación, como desventajas se encuentran la
adsorción de componentes del medio en la membrana, y si el poro no es lo
suficientemente pequeño, pueden pasar virus, además de ser un proceso más
complejo que el uso del autoclave, pues, se pueden presentar contaminantes
cuando existe una presión excesiva en el filtro, o se encuentran fugas en la línea
de vacío.
El compuesto filtrado se añade después de que el resto del medio se ha

autoclaveado y está a una temperatura razonable.
135
Lección 39. Posibles respuestas en el cultivo de tejidos vegetales (Parte 1).
El establecimiento de los cultivos de tejidos vegetales , esto es ,la separación de

un determinado tipo de explante y los procesos relacionados con su incubación,
dependerán en gran medida del explante y del sistema de cultivo que se emplee,
los que a su vez dependerán del objetivo perseguido.
Para su aplicación en la agricultura , independientemente del sistema de cultivo in

vitro el producto final del proceso debe ser la regeneración de plantas completas.
Sin embargo ,en algunos casos es posible encontrar repuestas no deseadas

dentro del proceso investigativo y aplicativo , en general podemos hablar de
respuestas tales como:
 Sin respuestas
En esta situación no se observa ningún cambio apreciable en el explante, aunque

en la mayoría de los casos lo que se puede observar es un explante vivo que se
conserva así debido a los elementos nutricionales presentes hasta que el medio
se agote ocurriendo la muerte del explante .
 Cultivo infectado
Pudiendo presentarse en parte del material sembrado o en su totalidad, como

consecuencia de contaminación de tipo exógena, endógena o combinada.
Para identificar donde se presenta la contaminación es importante revisar los

pasos seguidos y los procesos desarrollados durante el proceso de desinfección,
aislamiento y siembra del explante.
 Oxidación del explante
Ocurre un oscurecimiento del explante revelado por el oscurecimiento de la

superficie del medio, debido a la presencia de polifenoles.
Muchas plantas son ricas metabólicamente en compuestos fenólicos los cuales se

manifiestan después que un tejido se lesiona durante la disección in vitro.
La oxidación de explantes se relaciona con la inhibición de la actividad de la

enzima Polifenoloxidasa (PPO) , bloqueando el metabolísmo celular e induciendo
136
el oscurecimiento de los explantes hasta la muerte del tejido celular en algunos

casos .
El control de la oxidación puede realizarse en el proceso de desinfección del

material vegetal, en el momento del aislamiento de explantes o en el medio de
cultivo utilizando para ello ácido cítrico, ácido ascorbico, polivinilpirrolidona o
carbón activado, este último en el medio de cultivo.
137
Lección 40. Posibles respuestas en el cultivo de tejidos vegetales (Parte 2).
 Formación de callo
La formación de callo, como un proceso en el cual tanto la elongación celular

como la división celular ocurren de manera desordenada y caótica , debe tomarse
como una respuesta indeseable a menos que se busque variabilidad para la
obtención de materiales para mejoramiento vegetal, debido a procesos de
mutación inducida.
 Callo más regeneración indirecta
En este caso ocurre primero la formación de un callo, pero posteriormente ocurre

la regeneración de estructuras que pueden conducir a la conformación de una
nueva planta.
Una primera posibilidad es el proceso de organogénesis indirecta que permite la

conformación de vástagos y brotes de los cuales se derivarán nuevas plantas, en
el caso de que se logre la conformación de brotes aéreos y raíces en forma
independiente dentro del explante, este material se debe eliminar por presentar
una variabilidad genética muy alta con alta inestabilidad en su respuesta.
La otra posibilidad es el proceso conocido como embriogénesis somática por el

cual se conforman estructuras bipolares similares a los embriones cigóticos y del
cual se puede derivar una planta completa.
 Vitrificación
El proceso de vitrificación, hiperhidratación, suculencia, o cristalización se refiere

a un conjunto de características físicas, que describen cambios en las hojas, tallo
y raices que le dan a la plántula una apariencia cristalina, acuosa, húmeda y
translúcida.
Estos desórdenes, van a impedir el normal establecimiento de plantas

micropropagadas a condiciones ex vitro.
Las causas de estas malformaciones están ligadas a las especiales

características del cultivo in vitro: factores nutricionales sobredimensionados y/o
superfluos (elementos minerales, carbohidratos) y elevadas dosis de reguladores
de crecimiento,, que producen un efecto subtóxico global; una baja intensidad
luminosa durante la incubación; y la humedad relativa y un potencial hídrico, que
son el factor clave para explicar estas complejas anormalidades morfogenéticas
producidas en condiciones de cultivo de tejidos in vitro.
138
CAPITULO 9. LA MICROPROPAGACIÓN DE PLANTAS
Lección 41. Generalidades de la Micropropagación
Cuando se evidencia que la mayoría de plantas que se propagan mediante

metodologías in vitro utilizan pequeños trozos de tejido o de órganos en
condiciones asépticas, con el fin de conseguir nuevas plantas, se podría pensar
que no se presenta una gran diferencia entre la propagación convencional y la
micropropagación.
El termino de Micropropagación , desarrollado por Hartmann y Kester en 1.968 es

utilizado como término general para designar cualquier técnica in vitro aplicada a
la propagación de plantas.
Por tanto en la micropropagación se busca reproducir de la forma más aproximada

posible todos los factores que puedan incidir en la propagación cuando esta
sucede en forma convencional , aunque lo veremos más adelante , otros factores
propios de la técnica de cultivo pueden afectar la respuesta esperada.
La micropropagación "in vitro" de plantas como lo presenta Roca (1993) se puede

definir como *cualquier procedimiento aséptico que comprenda la manipulación ,
en las plantas, de órganos, tejidos o células que produzcan poblaciones de
plántulas y que permitan el desvío tanto del proceso sexual normal como de la
propagación no aséptica que se practica convencionalmente*
Esto es posible gracias a la propiedad de totipotencia que tienen las células

vegetales; esto es la capacidad de regenerar una planta completa cuando están
sujetas a los estímulos adecuados
 Ventajas y desventajas de la micropropagación
Las ventajas son las siguientes:

 Elevada velocidad de propagación. Esto se debe a que las condiciones de
cultivo están controladas (luz, temperatura, composición del medio, niveles y
relaciones hormonales, principalmente.)
 Poco material de partida. Para hacer un cultivo in vitro no se requieren grandes

cantidades de material vegetal pudiendo lograrse resultados óptimos utilizando
material seleccionado de forma adecuada antes de iniciar el cultivo, que
permite además manejar menores espacios que en la propagación
convencional y la reducción en tiempo y en costos.
139
 Multiplicación de especies. Permite la propagación de especies de difícil

propagación convencional, o protegidas o en peligro de extinción.
 Mayor control sobre la sanidad del material que se micropropaga. Es el caso

de la obtención de plantas libres de virus, partiendo de meristemos .
 Producción continua. Ya que la producción de nuevos materiales se puede

mantener durante todo el año, sin ser afectadas por condiciones ambientales
externas.
Como desventajas presenta:
 Problemas de contaminación. Las fases tempranas del cultivo se contaminan

con mucha facilidad, lo que produce grandes pérdidas económicas.
 Especificidad. Las técnicas de cultivo aplicadas a una especie vegetal pueden

no servir para otra especie vegetal, o incluso para otra variedad Ello implica
desarrollar métodos específicos para cada caso.
 Inversión inicial elevada. El coste inicial del cultivo es alto, sobre todo por el
mantenimiento de la planta en condiciones controladas y por las instalaciones
que se necesitan. Esto debe compensarse con una alta producción de plantas
y con un valor añadido sobre el producto final.
 Instalación y personal especializado. Los cultivos in vitro, por el hecho de que

requieren estar muy controlados, deben de realizarse en instalaciones
altamente especializadas y con un personal con alta formación en el campo.
 Las técnicas de propagación no deben producir alteración genética. Esto es ,

durante ninguna parte del proceso se deben permitir la formación de callos,
que favorecen cambios mutacionales .
140
Lección 42. Etapas de la micropropagación
 Etapa 0: Preparación del material vegetal
El empleo de explantes que se encuentren expuestos a bajos niveles de

contaminantes exógenos y endógenos puede resolverse con el manejo que se le
dé a la planta donante durante esta etapa.
La planta donante debe elegirse sobre la base de un proceso de selección ,

teniendo en cuenta las características agronómicas y/o potenciales deseables.
Una vez seleccionados los individuos, es preciso definir el tipo de explante a

establecer en condiciones in vitro. En general, los órganos jóvenes o bien
rejuvenecidos son los que tienen mejor respuesta en el establecimiento que los
obtenidos a partir de materiales adultos.
La elección del explante apropiado constituye el primer paso para el

establecimiento de los cultivos in vitro, dicha elección está determinada por el
objetivo perseguido y la especie vegetal utilizada.
Si por ejemplo se busca la proliferación de callos , es factible la utilización de una

amplia gama de explantes desde que contenga células nucleadas vivas, si la
obtención de callos no está limitada por el tipo de explante , la selección del
mismo se hará teniendo en cuenta la disponibilidad , facilidad de manipulación,
homogeneidad, baja contaminación por microorganismos y rápida respuesta in
vitro.
Con respecto a la especie vegetal es importante tener en cuenta la variabilidad

genética asociada con el genotipo, ya que es frecuente que en condiciones
homogéneas del medio de cultivo y ambiente las respuestas in vitro de un
determinado explante de una especie difiera en respuesta con otro explante
distinto de la misma especie.
La respuesta de los explantes puede variar de acuerdo con el estado de

desarrollo y la edad, considerándose la misma como la edad el material es decir
el período de tiempo desde cuando se originó.; la edad fisiológica , donde el
explante se considera joven o viejo de acuerdo a si es derivada de un aparte de la
planta que se encuentre en una fase juvenil o adulta; la edad secuencial
considerando que las células no diferenciadas se encuentran en órganos juveniles
y células diferenciadas se encuentran en órganos más viejos.
141
Aspectos tales como pretratamientos a explantes , las condiciones de crecimiento

de las plantas donantes, y la época del año en que se toma el material también
pueden afectar la respuesta del explante.
 Etapa 1: Establecimiento del cultivo
En esta etapa los principales procesos a controlar son la selección, el aislamiento

y la esterilización de los explantes.
El objetivo de esta etapa es establecer explantes axénicos, donde la selección y la

concentración de los productos para la eliminación de los contaminantes, así como
el tiempo de desinfección se determinan, en gran medida experimentalmente por
pruebas y evaluaciones de prueba y error.
 Etapa 2: Multiplicación
El objetivo de esta etapa es mantener y aumentar la cantidad de brotes para los

nuevos ciclos de multiplicación sucesivos y poder destinar parte de ellos a la
siguiente etapa
Es importante señalar que en esta etapa, cualquiera que sea la vía de

regeneración empleada, para procesos de micropropagación es conveniente evitar
la formación de callo para disminuir el riesgo de variabilidad . En esta etapa, los
medios de cultivo, los reguladores de crecimiento y las condiciones de crecimiento
juegan un papel crítico sobre la multiplicación clonal de los explantes.
Los medios de cultivo influyen por una parte por la presencia de los nutrientes
requeridos por el explante para su mantenimiento y por otra parte las condiciones
de pH del medio , pudiendo afectar la solidificación de los agentes gelificantes en
medios de cultivo sólidos , la solubilidad y la absorción de algunos componentes
del medio de cultivo, así como la actividad enzimática.
Los tipos de reguladores, sus combinaciones y rangos de concentraciones deben

ser optimizados para cada especie, genotipo y etapa de multiplicación .
Así mismo, las condiciones del cuarto de incubación tales como fotoperíodo e
intensidad lumínica y las condiciones de temperatura tienen una alta incidencia
en la respuesta del explante.
La temperatura a la que está expuesto el explante cultivado in vitro afecta a la

mayoría de procesos fisiológicos y por consiguiente es un factor fundamental a
controlar.
142
Normalmente, se pueden obtener resultados satisfactorios con temperaturas de

incubación que oscilan entre los 20 y 28 0C, con valores promedio de 25 º C.
La luz es uno de los factores principales que determinan el desarrollo de los

organismos autótrofos, en ello radica la importancia de controlar el factor luz en los
cultivos in vitro.
Los aspectos relacionados con la luz que son importantes en los cultivos in vitro
son:
 La cantidad de luz: LA IRRADIACIÓN (alrededor de 25 W/m2 o 100 µmol/m2s )

La calidad de la luz: EL ESPECTRO (la fuente de luz más usada es la lampara
fluorescente luz día.
 La alternancia de los ciclos de luz con los de oscuridad: EL

FOTOPERÍODO(En forma general se utilizan 16 horas de luz y 8 horas de
oscuridad)
En esta etapa si hay presencia de compuestos fenólicos que producen oxidación

y liberación de exudados al medio , se puede inhibir el crecimiento de los
explantes.
Para controlar y limitar al mínimo la producción y oxidación de los compuestos

fenólicos, se pueden emplear agentes absorbentes de fenoles en el medio de
cultivo, tales como el carbón activado y la polivinilpirrolidona o antioxidantes como
el ácido ascórbico o el ácido cítrico .
Es recomendable además lograr que la tasa de intercambio gaseoso entre los

ambientes del recipiente y externo sea óptima, evitándose la acumulación de CO2
y de etileno por una parte y por otra parte el manejo de la humedad relativa.
En este sentido, el sellado del recipiente es importante, teniendo en cuenta que el

intercambio gaseoso es más limitado con el empleo de una tapa de aluminio, que
con un film de polietileno extensible. En algunos casos la utilización de una tapa
perforada con tapón de gasa es altamente recomendable
143
 Etapa 3: Enraizamiento
En esta etapa se produce la formación de raíces adventicias. En las especies

herbáceas es relativamente fácil mientras que en las especies leñosas es
complicado por su limitada capacidad rizogénica.
El enraizamiento puede realizarse tanto en condiciones in vitro como ex vitro. En

el primer caso pueden emplearse varios tipos de sustratos y reguladores de
crecimiento (auxinas) para promover la rizogénesis..
En un medio solidificado con agar, los nutrientes se reducen de 1/2 a 1/4 de la

composición original, y la sacarosa se reduce a una concentración final de 1-2%.
El empleo de agar aunque por un lado favorece la rizogénesis en forma más

sincrónica como resultado del contacto íntimo del material con el medio de cultivo ,
por otro lado produce raíces usualmente delgadas y poco funcionales.
 Etapa 4:Endurecimiento
Una planta que se ha originado in vitro difiere en muchos aspectos de las

originadas in vivo. Las plantas cultivadas in vitro tienen generalmente la cutícula
escasamente desarrollada, Las células en empalizada tampoco están muy
desarrolladas, son pequeñas y se encuentran en pequeñas cantidades.
Debido a la alta humedad (90-100%), Los estomas no son suficientemente

operativos, siempre están abiertos.
Como consecuencia , cuando se transfiere la planta al suelo, se produce una

transpiración cuticular extra, ya que la humedad del aire en las condiciones in vivo
es muy baja. Así mismo las hojas de una planta producida in vitro son
frecuentemente finas, blandas, y fotosintéticamente poco activas, y en
consecuencia mal adaptada a las condiciones que pueden encontrar in vivo,
además de existir una pobre conexión vascular entre vástagos y raíces.
Por lo anterior, las plantas producidas in vitro requieren un cierto tiempo para
aconstumbrarse a las condiciones in vivo, de tal manera que quedan
¨endurecidas¨ para afrontar el medio ambiente.
En esta etapa las plantas enraizadas in vitro o para enraizar in vivo, pero
obtenidas in vitro, se sacan del medio gelatinoso retirando los residuos del medio
adheridas a la planta, siendo sembradas en un sustrato estéril contenido en
cámaras de vidrio o plásticas, utilizando como sustratos escoria fina, vermiculita
144
más tierra ( relación 1:2), cascarilla de arroz más tierra ( relación 1:3) y suelo
cernido.
La plantas así sembradas deben cubrirse con bolsas plásticas o con vasos
desechables, manteniendo una alta humedad relativa, e incorporando
fertilizantes foliares , la cobertura se irá retirando de manera secuencial hasta que
no exista dicha cobertura.
Figura 39. Etapas de Micropropagación y sus potencialidades
 Factores que influyen sobre la micropropagación
 Genotipo: la capacidad de regeneración es muy variada, generalmente

regeneran mejor las Dicotiledóneas que las Monocotiledóneas , y se presenta
mayor regeneración entre plantas herbáceas que en las leñosas. Además
existen grandes diferencias en la capacidad de división celular y regeneración
en plantas de la misma variedad pero de distinta variedad o cultivar.
 Edad fisiológica del explante: Mientras más joven y menos diferenciado esté el
tejido mejor será la respuesta in vitro.
145
 Posición del explante dentro de la planta: o topófisis que indica como la

influencia de la posición del explante, afecta el crecimiento y desarrollo in vitro
, pudiendo explicarse este fenómeno por la acumulación endógena de
fitoreguladores y por la edad en tiempo del material donante de explantes.
 El explante: Siendo una parte de un tejido o de un órgano al aislarlo, el tamaño

del explante puede tener influencia en el proceso de micropropagación,
teniendo en cuenta que es más difícil inducir una respuesta en estructuras muy
pequeñas que en estructuras de mayor tamaño, debido a la acumulación de
sustancias de reserva y contenidos hormonales , por otra parte el proceso de
desinfección es más complejo en estructuras grandes que en estructuras de
menor tamaño.
 Superficie de exposición: Si la superficie de exposición es demasiado grande

se producirá etileno, que es perjudicial para el proceso de micropropagación,
pero por otra parte cuanto mayor sea la superficie, mayor será la capacidad de
absorción de nutrientes y reguladores.
 Posición de siembra: los explantes pueden situarse en el medio en diferentes

formas ( ver figura 40 )Polar, con su base fisiológica apoyada sobre el medio.
Apolar, al revés, invertido.
Figura 40. Posición de siembra de los explantes. Tomado de Roca
Teniendo en cuenta los anteriores aspectos, como criterios deseables para

obtener éxito en el proceso de micropropagación in vitro se pueden considerar:
146
 Que se mantenga la estabilidad genética de las plántulas obtenidas, para ello

es deseable la utilización de meristemos , yemas y segmentos nodales donde
se mantiene la estabilidad genética.
 Realización de una selección cuidadosa del material de partida.
 Es deseable que la transferencia de etapa a etapa no sea compleja.
 Así mismo la propagación in vitro no debe ser compleja.
 No debe perderse la capacidad de regeneración, para ello es conveniente no

utilizar muchos repicados.
 Debe ser económicamente viable.
147
Lección 43.Fases de laboratorio
En el laboratorio se presentan tres fases que siempre ocurrirán sin tener en cuenta
el tipo de explante o la metodología de micropropagación utilizada , estas son:
 Fase de aislamiento
Los explantes deben separarse de la planta donante, esta labor de corte y

separación del explante se puede realizar sobre una placa de cristal estéril,
presentando como desventaja que los instrumentos cortantes pierden rápidamente
su filo, o también sobre papel de filtro estéril, siempre debe tenerse en cuenta el
tamaño de la sección cortada.
 Fase de inoculación.
Durante la inoculación o siembra, el tubo o frasco conteniendo el medio de cultivo

sólido debe estar en principio en posición horizontal, pues, esto reduce
fuertemente la posibilidad de contaminación, sobre todo cuando no se trabaja con
cámara de flujo laminar.
El flameado del cuelo de tubo o frasco es desaconsejable por la entrada de etileno

en el recipiente.
El método de inoculación sobre medios sólidos depende en gran medida del tipo
de explante con que se trabaje, las semillas y embriones se ubican sobre el
medio, al igual que los meristemos; mientras explantes de hojas, yemas,
segmentos nodales, se introducen ligeramente en el medio.
 Fase de repicado.
Esta fase involucra principalmente el paso del explante y de la plantula obtenida a

las diferentes etapas de la micropropagación , o por otra parte al número de veces
que separo brotes obtenidos in vitro para aumentar el material propagado.
Pero, puede realizarse además porque el medio nutritivo esta agotado (se
presentan síntomas de deficiencia) o el medio se seca, o por que el tejido u
órgano ha crecido de tal forma esta ocupando todo el frasco; o por cambios de
coloración en el medio, o por que se han presentado alteraciones en la estructura
del medio.
148
Lección 44. Propagación por segmentos de hoja y por meristemos
 Propagación por segmentos de hoja
A pesar de que todos los cultivos de tejidos se generan de órganos o de sus

secciones, la organogénesis del progenitor no siempre se mantiene durante el
desarrollo in vitro. Sin embargo, un cultivo de órganos tiene como objetivo el
alcanzar a partir de una estructura organizada, la morfología y la fisiología que lo
identifican con los órganos de su especie.
Hoy en día, el cultivo de segmentos de hoja se sigue utilizando, a pesar de que el

interés por el cultivo de órganos ha disminuido. Es importante anotar que se
incluye en esta forma de micropropagación a las hojas modificadas tales como
pétalos e inflorescencias.
Se ha practicado el cultivo de hojas partiendo de material juvenil, en un medio

simple , que contenga sacarosa en concentraciones del 2-3%, en un medio sólido
para explantes grandes y líquido para explantes pequeños, cultivándose
usualmente en luz, con un ciclo de oscuridad.
El cultivo de hojas se ha usado en la propagación masiva por ejemplo de Cafeto,

Cattleya, , Miembros de la Familia Gesnariaceae como Saintpaulia; Sinningia;
Sttreptocarpus ; Episcia; Nautilocalyx ; Achimenes; Kohleria.
Además de las Begonias , Algunas Solanáceas cono tabaco, Petunia , etc. y en

Helechos.
El cultivo de hojas posibilita además la evaluación de los efectos de los nutrientes

y hormonas, a través de la evaluación de los síntomas de deficiencia en cultivo in
vitro.
 Propagación por meristemos
En los primeros estadios de desarrollo embrionario vegetal la división celular tiene

lugar en todo el organismo, pero a medida que el embrión se desarrolla y se
transforma en una planta adulta la adición de nuevas células se restringe a ciertas
partes de la misma, mientras que el resto de la planta se especializa para otras
actividades especificas.
Estos grupos de células que retienen su actividad embrionaria durante toda la vida
de la planta se denominan meristemos.
149
Estos meristemos se pueden clasificar como primarios o apicales proceden

directamente de células embrionarias , se sitúan en los extremos de la raíz y el
tallo, y determinan el crecimiento en longitud de la planta y los meristemos
secundarios o laterales se originan a partir de células adultas que recuperan su
capacidad de división. Se localizan en posición lateral en los órganos que los
presentan, y hacen que éstos crezcan en grosor (crecimiento secundario). ( Ver
figura 41)
Figura 41. Clasificación de los meristemos. Tomado de Margara 1.988
 Aplicaciones
Multiplicación masiva
Aprovechando el potencial morfogenético que tienen los meristemos, esto es, que
los meristemos están diferenciados para formar órganos , por lo cual en
condiciones in vitro solo se requiere la elongación y la formación de raiz sin que
se presenten alteraciones genéticas, y así es posible lograr la producción y
multiplicación de diversas especies vegetales.
150
Producción de plantas libres de enfermedades
Teniendo en cuenta que los virus pueden ser transmitidos en la multiplicación

sexual( alrededor de 80) y que muchos cultivos comerciales propagados
vegetativamente contienen virus sistémicos, la alternativa de utilización de los
meristemos apicales , frecuentemente combinada con prácticas de quimio y
termoterápia para la producción de materiales libres de enfermedades con
resultados éxitosos, desde los trabajos de Morel y Martin en 1.952 quienes fueron
los primeros en obtener plantas libres de virus en Dalia.
Aunque en una planta un virus puede encontrarse en toda ella distribuido en forma
desigual, no se encuentra ubicado en el meristemo apical posiblemente por tres
mecanísmos como son :1.la competencia en el meristemo, entre las partículas
viricas y la producción celular; 2. La falta de elementos vasculares en el meristemo
dificultando el transporte de las partículas viricas; 3.presencia de inhibidores
naturales en la zona meristemática.
La termoterápia se utiliza para aumentar las posibilidades de obtener plantas libres

de virus en casos difíciles (varios virus presentes), puede ser ineficaz, si la planta
es muy sensible al calor, ya que la termoterápia combina la utilización de una
temperatura y un tiempo de tratamiento tal que la planta o parte de ella sea capaz
de sobrevivir, pero que permita la inactivación del virus., pero también de hongos y
micoplasmas
Algunos virus son más estables que otros, y esto causa diversos problemas en su
erradicación, por lo que necesitan periodos más largos para unos y más cortos
para otros, con diferentes tratamientos. Algunas especies son dañadas por las
altas temperaturas continuas, por lo que se recomienda una alternancia de
temperaturas altas y bajas, disminuyéndose así los daños causados en los tejidos
de las plantas.
La Quimioterapia, consiste en la aplicación de productos químicos al medio de

cultivo, lo que ocasiona una mayor probabilidad de obtener plantas de patógenos,
por lo que al aplicarse diferentes productos quimioterapéuticos de manera
exógena al medio de cultivo, se está asegurando la obtención de material sano.
La forma como se realiza la siembra de meristemos puede observarse en el

siguiente esquema:
151
Figura 42. Cultivo de meristemos
 Los explantes
Los explantes para el cultivo de meristemos pueden clasificarse como:

 Apical dome : cúpula meritemática sin primordios foliares.
 Meristem tip: incluye la región meristemática subapical con dos primordios

foliares. (Ver figura 43)
 Shoot tip: Incluye la región meristemática con varios primordios foliares hasta
una longitud de dos centímetros.
El cultivo de shoot tip es ventajoso cuando la eliminación de virus no es parte del

objetivo del trabajo, mientras apical dome y meristem tip son utilizados para la
limpieza de enfermedades.
152
Figura 43. El meristemo y sus partes
153
Lección 45. Segmentos nodales
Con este nombre se conoce el aislamiento de una yema, junto con una porción de
tallo para obtener un vastago a partir de la yema.
Este es el método más natural de propagación vegetativa de las plantas in vitro, ya

que también se aplica en condiciones in vivo.
El aislamiento por este método es imposible para plantas en roseta, y cuando las
posibilidades de infección son altas.
La velocidad de propagación depende del número de yemas disponibles.
El método de segmentos nodales ha producido un éxito apreciable en papa, yuca,

uva, peral, rosa, etc.
Una variación en el uso de las yemas axilares, siendo la diferencia más

importante, que se utiliza casi exclusivamente para plantas sin tallos, donde
generalmente se necesita la citoquinina para el desarrollo de las yemas.
En la práctica se usa una combinación de los dos métodos, se permite a una yema
que se desarrolle y posteriormente se añade citoquinina para inducir la formación
de vástagos axilares.
Yemas axilares y terminales pueden ser inducidas a desarrollarse in vitro. Una

única yema puede producir un único tallo, o dependiendo de la especie y del
medio, puede producir múltiples tallos. El proceso puede continuar
indefinidamente, si los tallos formados de las yemas iniciales desarrollan nuevas
yemas sobre su parte basal.
Los brotes basales o axilares se pueden producir a partir del explante

directamente o bien a partir de callos derivados del explante primario, actualmente
se prefiere la producción directa del explante, ya que a partir de callos su
formación ha sido difícil y frecuentemente presentan anormalidades genéticas.
La regeneración de órganos ( por formación adventicia o por nueva formación) que

no estén presentes en el momento del aislamiento, es un proceso
extremadamente complejo pudiéndose distinguir las siguientes etapas:
 Desdiferenciación de células diferenciadas ( que induce probablemente a una

redefinición y rejuvenecimiento de las células).
 División celular, generalmente seguida por formación de callo.
154
 Iniciación de órganos (formación) y desarrollo de órganos.
Debido a que las especies perennes y leñosas, a diferencia de las anuales y

bianuales, han mostrado mayor dificultad para su micropropagación, los avances
para estas especies no ha progresado rápidamente, teniendo en cuenta a que los
tejidos y los órganos diferenciados son poco sensibles en condiciones in vitro.
Es posible iniciar procesos de micropropagación en algunas especies, con

explantes tomados de árboles maduros, a través de la utilización de yemas
terminales de tallos que presentan crecimiento juvenil.
Arboles adultos que hayan demostrado unas características deseables son muy
atractivos para la propagación masiva. Sin embargo, es usualmente más difícil
establecer cultivos in vitro de árboles adultos, que de plantas juveniles, por ello
para facilitar el proceso in vitro o se pueden seleccionar tejidos juveniles dentro del
árbol o se pueden realizar pre-tratamientos de partes del árbol donante.
Algunos de estos pre-tratamientos incluyen aspersiones de citoquininas sobre las

yemas antes de la incubación in vitro ; el uso de injertos de yemas maduras sobre
ramas juveniles antes de la excisión para el cultivo in vitro; la utilización de ramas
colocándolas en agua destilada adicionada con auxinas, citoquininas y ácido
giberélico, para posteriormente tomar las yemas desarrolladas..
Figura 44 .Explantes nodales.
155
Figura 45. Método de segmentos nodales 1. Meristemo o ápice caulinar. 2.

Aislamiento de un nudo. 3. Desarrollo el vástago. 4. Ramificación axilar. 5.
Enraizamiento
156
ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIÓN DE LA UNIDAD 3
 Investigar tres (3) métodos de mejoramiento genético de plantas a partir de

la metodología de la micropropagación, indicando especies vegetales de
interés comercial sobre las cuales se han utilizado dichas técnicas.
157
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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

30161- PROPAGACIÓN Y MICROPROPAGACIÓN DE PLANTAS

JUAN CARLOS PADILLA OSORIO

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

30161- PROPAGACIÓN Y MICROPROPAGACIÓN DE

ASPECTOS DE PROPIEDAD INTELECTUAL Y VERSIONAMIENTO

El contenido didáctico del curso académico: PROPAGACIÓN Y

Actualmente, el módulo es actualizado por el Ingeniero Agrónomo Juan Carlos

UNIDAD 1. LA PROPAGACIÓN SEXUAL 10

CAPÍTULO 1. LA SEMILLA - GENERALIDADES 10

Lección 1. La reproducción sexual 12

Lección 2. Morfología de la semilla. 13

Lección 3. Germinación de la semilla. 15

Lección 4. Factores que afectan la germinación. 17

Lección 5. Latencia de la semilla. 24

CAPÍTULO 2. ANÁLISIS DE SEMILLAS 32

Lección 7. Pruebas de vigor. 34

Lección 8. Análisis de semillas. 38

Lección 9. Ejercicio de aplicación. 42

Lección 10. Envigoramiento. 44

CAPÍTULO 3. LOS VIVEROS. 45

Lección 11. Tipos de viveros y criterios para su establecimiento. 46

Lección 12. Construcción de un vivero. 49

Lección 13. Tipos de estructuras para la propagación. 51

 Ambientes completamente controlados. 51

Lección 14. Sistemas de siembra en los viveros. 54

Lección 15. Otros aspectos para construcción de viveros. 59

Actividades de Autoevaluación de la Unidad 1 63

UNIDAD 2. LA PROPAGACIÓN ASEXUAL. 65

CAPÍTULO 4. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL (INJERTOS) 65

Lección 16. Generalidades de la propagación asexual. 65

Lección 17. El Injerto – generalidades. 68

 Condiciones para realizar un injerto. 69

 Selección de plantas madre. 74

Lección 18. Principales técnicas de injertación (Parte 1). 75

Lección 19. Principales técnicas de injertación (Parte 2). 78

 Injerto en forma de parche o chapa. 78

Lección 20. Principales técnicas de injertación (Parte 3). 82

CAPÍTULO 5. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL

Lección 21. Principales técnicas de acodo (Parte 1). 89

Lección 22. Principales técnicas de acodo (Parte 2). 92

 Acodo subterráneo simple. 92

Lección 23. Propagación por estacas (Parte 1). 95

 Ventajas e inconvenientes del estacado. 95

Lección 24. Propagación por estacas (Parte 2). 97

 Estacas de madera dura. 97

Lección 25. Enraizamiento de estacas. 99

 Aspectos que influyen en el enraizamiento de estacas. 99

CAPÍTULO 6. MÉTODOS DE PROPAGACIÓN ASEXUAL

(TALLOS MODIFICADOS). 101

Actividades de Autoevaluación de la Unidad 2 108

UNIDAD 3. MICROPAGACIÓN DE PLANTAS. 109

CAPÍTULO 7. ASPECTOS BÁSICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS

VEGETALES (PARTE 1) 109

Lección 31. Generalidades del cultivo de tejidos. 109

 Historia del cultivo in vitro. 109

Lección 32. Constitución de un laboratorio de cultivo de tejidos. 113