Lab Proteinas

LABORATORIO DE BIOQUIMICA AMBIENTAL
PRACTICA 3: RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
ANDREA CAROLINA VERGEL RANGEL 1651081
LEIDY GABRIELA RAMÍREZ JAIMES 1651082
MG. FRANCISCO RAMON BRITO CARREÑO
UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE
SAN JOSÉ DE CÚCUTA, 27 DE SEPTIEMBRE 2018

MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS
Agitador de vidrio
Espátula Acetato de plomo al 1%
Gotero Ácido nítrico concentrado Digestor
Gradilla Ácido Tánico al 5%
Pinza para tubo de ensayo Alcohol etílico
Pipeta graduada 5ml Amoniaco
Tubo de ensayo Cloruro de sodio solido
Cloruro férrico al 1%
Nitrato de plata al 1%
Papel indicador universal
Reactivo de Millón
Solucion CuSO4 al 1%
Solución de Albúmina
Solución NaOH 10%
Sulfato de Amonio
METODOLOGÍA
Reacciones de coloración
1. Prueba de Biuret
Agregamos 1ml de la solución de Añadimos 2,5ml de NaOH al 10%.

proteína (albúmina).
Luego 2 gotas de CuSO4 al 1%. Agitamos y observamos que da un color

violeta es decir que da positivo para enlaces
péptidicos de la albumina.
2. Reacción Xantoproteica
Agregamos 1ml de la Luego agregamos 2-5 Calentamos suavemente
solución de proteína gotas de HNO3. sobre el mechero de
(albúmina) Bunsen.
Observamos que después de calentar la Luego añadimos unas gotas de NaOH

muestra esta se puso algo amarillo dando positiva para la fenilalanina, ya que
demostrando así que es positiva. esta depende de la nitrificación del anillo
bencénico de la proteína obteniendo un
color naranja.
2. Prueba de Millón
Agregamos 5ml de la Luego 0.5ml del reactivo Para posteriormente

solución de proteína de Millón. llevarlo al mechero de
(albúmina). Busen hasta su ebullición.
Observamos la formación de un
color rojo dando positivo para la
presencia del grupo Hidroxifenil Y
por consiguiente es positiva para
tirosina.
Reacciones de coagulación
1. Coagulación por calor
Agregamos 3ml de la solución de proteína (albúmina) y calentamos en el

mechero de Bunsen. Observamos como la estructura de la proteína se desnaturalizo y se destruye
su estructura terciaria.
2. Coagulación alcohólica
Agregamos 1ml de la solución de proteína (albúmina) y luego 2ml de alcohol etílico
(etanol).Observamos que la proteína al ser expuesta a un alcohol como lo es el etílico cuyo PH 6
y es acido causa que la albumina se desnaturalice para sí verse que en la parte de superior queda
como unos grumitos blancos.
3. Prueba de Heller
Agregamos 2ml de la solución de proteína Observamos que dio positivo para la

(albúmina).Luego añadimos 1ml de HNO3. albumina porque se forma un anillo de
precipitado proteico en la interfase de los
dos líquidos.
Reacciones de precipitación
1. Sales de metales pesados

FeCl3.
Observamos que la proteína se precipito

debido a que estaba en presencia de una sal
de metal pesado como lo FeCl3 que causa la
Agregamos 2ml de la
desnaturalización de la Albumina.
solución de proteína (albúmina) y 3 gotas de
Agregamos 2ml de la solución de proteína Observamos que la proteína se precipito.

(albúmina) y 3 gotas de AgNO3.
2. Reactivo de Alcaloidal
Agregamos 2ml de la solución de Añadimos 3 gotas de ácido tánico al 5%.

proteína (albúmina). Observamos que la albumina se precipito.
3. Sales neutras
Agregamos 3ml de la solución de Luego añadimos un exceso de NaCl
proteína (albúmina). hasta que ya no disuelva más.
Observamos que la proteína se precipito.

INTRODUCCION
Como los carbohidratos, las proteínas están compuestas de unidades más pequeñas. Los
monómeros que construyen a las proteínas se conocen como aminoácidos, los cuales se
encuentras unidos por enlaces peptídicos. Existen alrededor de veinte aminoácidos diferentes.
Pero ¿Qué son los aminoácidos?.
Los aminoácidos son moléculas orgánicas formadas por un grupo amino (-NH2) y un grupo
carboxilo (-COOH) unidos al mismo átomo de carbono (éste se llama carbono alfa, por ser
contiguo al carboxilo), además, a este carbono alfa se unen un hidrógeno y una cadena lateral o
radical R de estructura variable, la cual es un factor fundamental para diferenciar a los
aminoácidos.
En la siguiente práctica haremos diferentes pruebas con el fin de identificar los diferentes
aminoácidos que conforman a la Albumina (proteína), así como se harán varias pruebas de
coagulación y precipitación con el fin de observar la desnaturalización de la proteína.
CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?

R: La desnaturalización de la Albumina se manifiesta por la pérdida de sus estructuras de
orden superior esta se ve cuando se forma una capa blancuzca en la parte superior.
2. ¿Cómo podemos saber que una sustancia desconocida es una proteína?

R: Para poder determinar proteínas en una sustancia desconocida la prueba general que
se realiza es la de Biuret, en la si cambia a un color violeta indica positivo para proteína.
3. Que coloración da la reacción de Biuret

R: Un color violeta
4. Una proteína coagulada ¿podría dar la reacción de Biuret?

R: Claro que sí, el reactivo reacciona con cualquier proteína liquida o sólida.
5. Si se realiza la reacción de Biuret sobre un aminoácido como la Glicina. ¿Es positiva

o negativa? ¿Por qué?
R: Si se analiza un solo aminoácido daría negativa, ya que no hay ningún enlace
peptídico.
BIBLIOGRAFÍA
 Ortiz Rojas, L. and Carvajal Valderrama, M. (s.f.). MANUAL DE LABORATORIO DE

BIOQUÍMICA. Cúcuta: Universidad Francisco De Paula Santander.
 Paricahua ito, w. Desnaturalizacion de la proteina a temperaturas y ph, extremos.

Obtenido de https://www.monografias.com/trabajos93/desnaturalizacion-proteina-
temperaturas-y-ph-extremos/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-ph-
extremos.shtml
 Proteína. Obtenido de http://www.quimica.es/enciclopedia/Prote%C3%ADna.html

 Reaccion De Biuret - Documentos de Investigación - sebaoth. (2013). Obtenido de
https://www.clubensayos.com/Temas-Variados/Reaccion-De-Biuret/927537.html
 santiago, l. Custionario bioquimica Obtenido de

http://www.academia.edu/5558623/Custionario_bioquimica
 Desnaturalización de las proteínas. Obtenido de
http://www.ehu.eus/biomoleculas/proteinas/desnaturalizacion.htm
CONCLUSIONES
 Se pudo observar que al haber un cambio de coloración a rojo violeta, la albumina

presentaba enlaces peptídicos, como debería ser, ya que por ser una proteína está
formada por aminoácidos que se encuentran unidos por este tipo de enlace.
 Al realizar la reacción xantoproteica se pudo observar que la albumina es un proteína

soluble, es decir, un proteína globular, debido a que se dió un cambio de coloración
de transparente a amarillo claro, asimismo esta prueba por teoría debe dar positiva para
todas aquellas proteínas que presenta aminoácidos aromáticos como es el caso de la
albumina, asimismo al agregar NaOH hubo un cambio en el ph y en la coloración
(amarillo-anaranjado) determinando la presencia de fenialanina.
 Con la prueba de Millon se pudo determinar que efectivamente la albumina está

formada por tiroxina, ya que se generó un coágulo blanco que por calentamiento pasa al
rojo carne.
 Esta prueba de héller permitió la determinación de proteinuria (proteínas) ya que
observamos la aparición de un anillo precipitado proteico en la interfase entre el ácido
nítrico y la albúmina dando así positivo para la misma.
 Las proteínas se coagulan por el calor debido a que sus moléculas tienen un gran tamaño
que originan que se formen con el agua soluciones coloidales que se precipitan formando
coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70°C.
 La albumina al ser tratada con un alcohol etílico se forman coágulos generando así un
proceso irreversible y se debe a la desnaturalización por este agente que al actuar sobre la
proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

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LEIDY GABRIELA RAMÍREZ JAIMES 1651082

MG. FRANCISCO RAMON BRITO CARREÑO

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE

SAN JOSÉ DE CÚCUTA, 27 DE SEPTIEMBRE 2018

MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS

Espátula Acetato de plomo al 1%

Gotero Ácido nítrico concentrado Digestor

Gradilla Ácido Tánico al 5%

Pinza para tubo de ensayo Alcohol etílico

Pipeta graduada 5ml Amoniaco

Tubo de ensayo Cloruro de sodio solido

Papel indicador universal

Solución NaOH 10%

Agregamos 1ml de la solución de Añadimos 2,5ml de NaOH al 10%.

Luego 2 gotas de CuSO4 al 1%. Agitamos y observamos que da un color

Observamos que después de calentar la Luego añadimos unas gotas de NaOH

Agregamos 5ml de la Luego 0.5ml del reactivo Para posteriormente

1. Coagulación por calor

Agregamos 3ml de la solución de proteína (albúmina) y calentamos en el

Agregamos 2ml de la solución de proteína Observamos que dio positivo para la

1. Sales de metales pesados

Observamos que la proteína se precipito

Agregamos 2ml de la solución de proteína Observamos que la proteína se precipito.

Agregamos 2ml de la solución de Añadimos 3 gotas de ácido tánico al 5%.

Observamos que la proteína se precipito.

1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?

2. ¿Cómo podemos saber que una sustancia desconocida es una proteína?

3. Que coloración da la reacción de Biuret

4. Una proteína coagulada ¿podría dar la reacción de Biuret?

5. Si se realiza la reacción de Biuret sobre un aminoácido como la Glicina. ¿Es positiva

 Ortiz Rojas, L. and Carvajal Valderrama, M. (s.f.). MANUAL DE LABORATORIO DE

 Paricahua ito, w. Desnaturalizacion de la proteina a temperaturas y ph, extremos.

 Proteína. Obtenido de http://www.quimica.es/enciclopedia/Prote%C3%ADna.html

 santiago, l. Custionario bioquimica Obtenido de

 Se pudo observar que al haber un cambio de coloración a rojo violeta, la albumina

 Al realizar la reacción xantoproteica se pudo observar que la albumina es un proteína

 Con la prueba de Millon se pudo determinar que efectivamente la albumina está

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