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Columbia Agar Base

Uso Instrucciones
Medio de cultivo nutritivo utilizado para el crecimiento de diversos Suspender 44 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar
microorganismos. con agitación frecuente y hervir durante un minuto para disolución
Al ser suplementado con sangre permite el crecimiento de micro- total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave
organismos exigentes y la clara visualización de reacciones de he- a 121°C durante 15 minutos.
mólisis. También puede ser utilizado como base para la preparación Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina
de agar chocolate. desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- estériles.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Preparación de Agar Chocolate: agregar 5-10 % de sangre ovina
desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
Fundamento enfriado a 45-50 ºC. Calentar a 80 ºC durante 10 minutos mez-
Este medio combina las virtudes de la peptona, la tripteína, el ex- clando frecuentemente. Dejar enfriar a 45-50 ºC y distribuir en pla-
tracto de levadura y el extracto de corazón, que cas de Petri estériles.
favorecen el desarrollo de microorganismos exigentes y la obten-
ción de colonias eugónicas. El almidón incrementa el Características del producto
desarrollo de neisserias y las reacciones de hemólisis de algunos Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
estreptococos. El cloruro de sodio mantiene el balance lizamiento.
osmótico y el agar es el agente solidificante. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Puede ser utilizado como medio base para ser suplementado con Suplementado con sangre ovina: color rojo cereza.
sangre o con antimicrobianos, lográndose así un
un medio mas enriquecido o selectivo de acuerdo al aditivo. Almacenamiento
Si se suplementa con sangre ovina o equina, se puede preparar Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
“Agar Sangre” y lograr así el crecimiento y observación de las reac- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
ciones hemolíticas de los microorganismos inoculados o también
se puede preparar “Agar Chocolate” el cual es un medio de culti- Procedimiento
vo adecuado para el crecimiento de microorganismos exigentes Siembra
en sus requerimientos nutricionales como ser Haemophilus spp. y En superficie, estriar directamente el material en estudio.
Neisseria spp.
Para aislar microorganismos Gram positivos en forma selectiva, Incubación
puede agregarse 10 mg de colistina y 15 mg de ácido nalidíxico El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
por litro de medio de cultivo. Este medio suplementado con antibió- del microorganismo que se quiera recuperar.
ticos es conocido como HV o CoNa y se utiliza En general se recomienda:
especialmente para el aislamiento de Gardnerella vaginalis. Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante
18 a 24 horas.
Contenido y composición Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Código B0211105: envase x 100 g. fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Código B0211106: envase x 500 g. Bacterias anaerobias: en anaerobiosis, a 35-37 º C durante 24-48
horas.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Peptona de carne......................................................................................................... 5.0. Interpretación de los resultados
Tripteína...................................................................................................................................10.0. Observar las características de las colonias.
Extracto de levadura............................................................................................ 5.0. Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
Extracto de corazón.............................................................................................. 3.0. nes de hemólisis:
Almidón ..................................................................................................................................... 1.0. Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido
Agar................................................................................................................................................15.0. a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto
pH final: 7.3 ± 0.2 HOJA 1 DE 2
Columbia Agar Base
de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los CO2 o en anaerobiosis.
microorganismos.
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo Materiales necesarios no provistos
claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me- calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre- miento.
dedor de la colonia en estudio.
Precauciones
CONTROL DE CALIDAD - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o
Escherichia coli Satisfactorio dañado.
ATCC 25922 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o de-
Staphylococcus aureus Satisfactorio terioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 25923 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio to.
ATCC 27853 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Clostridium sporogenes Satisfactorio nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 19404 establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se con-
Columbia Agar Base suplementado con 5% de sangre ovina serva apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Hemólisis mismo según reglamentaciones vigentes.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta
ATCC 19615 Referencias
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa - Ellner, P.D., Stossel, C.I., Drakeford, E., and Vasi F. 1966. A new
ATCC 6305 culture medium for medical bacteriology. Am. J. Clin. Pathol.,
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa 45:502.
ATCC 49619 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins,
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Baltimore, Md.
Medio sin inocular Sin cambios - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Limitaciones Washington, D.C.
- Las reacciones hemolíticas de una amplia variedad de microor- - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
ganismos son diferentes al usar sangre equina respecto al utilizar gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
sangre de carnero, tal es el caso de algunas cepas de estrepto- Tests. Harmonized Method.
cocos grupo D, que producen beta hemólisis en el agar suple- - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbio-
mentado con sangre equina pero no en el agar suplementado con logical Examination of Nonsterile products: Tests for Specified
sangre de carnero, y son mal clasificadas como Estreptococos Microorganisms. Harmonized Method.
Grupo A al usar sangre equina.
- La atmósfera de incubación puede influenciar en el tipo de Indicaciones al consumidor
reacción de hemólisis en los estreptococos beta hemolíticos. Para Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
obtener el mejor rendimiento, incubar las placas en atmósfera con Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2

IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.

LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041