Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud.

2016;14(2):110-121
Doi: 10.18004/Mem.iics/1812-9528/2016.014(02)110-121
Artículo de Revisión/ Review Article

Presente y futuro de los anticuerpos recombinantes

terapéuticos

Patricia Langjahr I,II, Pablo Sotelo III

I Dpto de Inmunología, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción.
Paraguay
II Cátedra de Inmunología Clínica, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Asunción. Paraguay
III Dpto. de Biotecnología, Dir. de Investigaciones, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de
Asunción. Paraguay

Langjahr PI,II, Sotelo P III. Presente y futuro de los

Cómo referenciar este artículo/ anticuerpos recombinantes terapéuticos. Mem. Inst.
How to reference this article: Investig. Cienc. Salud. 2016;14(2):110-21

RESUMEN
Los anticuerpos constituyen un componente fundamental del sistema inmune,
permitiendo el reconocimiento con alta especificidad y posterior destrucción de moléculas
extrañas. Los anticuerpos monoclonales, producidos por la tecnología del hibridoma,
presentan desventajas para su uso en terapia humana debido a su origen en una especie
diferente. La ingeniería genética posibilitó la utilización de los anticuerpos monoclonales
para terapias humanas, generando los anticuerpos recombinantes terapéuticos. Así, los
anticuerpos recombinantes se han transformado en un importante grupo de fármacos; con
decenas de ellos aprobados para terapia humana y cientos en desarrollo. Se utilizan con
éxito como tratamiento para un amplio rango de patologías, tales como cáncer,
autoinmunidad e infecciones, siendo desde hace años el biofármaco con mayores ventas.
Inicialmente todos los anticuerpos recombinantes terapéuticos presentaban la estructura
convencional de los anticuerpos. Sin embargo, más recientemente, se han generado nuevos
diseños que no poseen las características estructurales naturales, como los anticuerpos de
simple cadena y bi-específicos. Debido al desarrollo y éxito de la tecnología de anticuerpos
recombinantes, se espera un aumento constante en el número de anticuerpos terapéuticos
contra nuevos blancos, además de la generación de nuevas estructuras, usos y estrategias
terapéuticas. En esta revisión, nos centraremos en las características estructurales y los
nuevos formatos de anticuerpos, así como su aplicación clínica en el tratamiento de diversas
patologías. Además analizaremos los nuevos formatos de anticuerpos que se encuentran en
el mercado y la aparición de los anticuerpos biosimilares.

Palabras clave: inmunoglobulinas, anticuerpos monoclonales, proteínas recombinantes,

anticuerpos terapéuticos

Present and future of therapeutic recombinant antibodies

ABSTRACT
Antibodies are a key component of the immune system, acting in the highly specific
recognition and subsequent destruction of foreign molecules. Monoclonal antibodies
produced by hybridoma technology have disadvantages for use in human therapy because
of its origin in a different species. Genetic engineering enabled the use of monoclonal
antibodies for human therapies, generating recombinant therapeutic antibodies.
Thus, the recombinant antibodies have become an important group of drugs; dozens of
them are approved for human therapy and there are hundreds in development. They are
successfully used as a treatment for a wide range of pathologies, such as cancer,
autoimmunity and infections, being the biopharmaceutical with higher sales. Initially
therapeutic recombinant antibodies showed the conventional structure of the antibodies.
Fecha de recepción: junio 2016. Fecha de aceptación: agosto 2016
Autor correspondiente:Patricia Langjahr. Dpto. de Inmunología, IICS, UNA y Pablo Sotelo, Dpto. de
Biotecnología, Dir. de Investigaciones, Facultad de Ciencias Químicas, UNA, Paraguay
E-mail: [email protected], [email protected]
Langjahr et al Presente y futuro de los anticuerpos recombinantes terapéuticos.

However, more recently, new designs that do not have natural structural features have
been generated such as single chain formats and bi-specific antibodies. Due to development
and success of recombinant antibody technology, a steady increase in the number of new
therapeutic drugs against new targets is expected in addition to the generation of new
structures, uses and therapeutic strategies. In this review, we will focus on their structural
features and clinical application in the treatment of various pathologies. We will also discuss
new formats of antibodies and the emergence of biosimilar antibodies.

Keywords: immunoglobulins, antibodies, monoclonal, recombinant proteins, therapeutic

antibodies

INTRODUCCIÓN
El uso de anticuerpos en el tratamiento de enfermedades se remonta a 1890 cuando Emil
Von Behring describió que la inoculación de animales con pequeñas dosis de toxinas
permitía generar un suero capaz de neutralizar a éstas. Sin embargo, no fue hasta 1986
que se aprobó el primer anticuerpo monoclonal murino para uso terapéutico (1,2).
Posteriormente, y gracias al desarrollo de la ingeniería genética, se generaron los primeros
anticuerpos recombinantes con secuencias humanas, constituyéndose en uno de los
mayores avances en la medicina y principal componente de la industria biofarmacéutica. En
la última década los anticuerpos recombinantes se han posicionado como el grupo de
fármacos biotecnológicos con mayores ventas en Estados Unidos (3,4).
En esta revisión nos centraremos en las características estructurales de los anticuerpos
recombinantes, su uso clínico y los nuevos formatos de anticuerpos recombinantes.

ESTRUCTURA DE LOS ANTICUERPOS

Los anticuerpos, también conocidos como inmunoglobulinas, son moléculas producidas
por los linfocitos B activados y constituyen un componente fundamental del sistema
inmune, ya que permiten el reconocimiento y posterior destrucción de patógenos, células
tumorales y moléculas foráneas.
Los anticuerpos o inmunoglobulinas presentan cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas
pesadas (IgP) y dos cadenas livianas (IgL), las cuales forman una estructura característica
tipo Y (Figura 1a). Ambas cadenas se subdividen en una región constante (RC) y una
variable (RV). Esta última, presenta la función de reconocimiento y unión al antígeno o
molécula blanco y está compuesta por los extremos aminoterminal de las cadenas pesadas
y livianas. Las RV, tanto de la cadena IgP como de la IgL presentan gran diversidad de
secuencia aminoacídica, la cual se concentra en tres regiones que presentan mayor
variabilidad, denominadas regiones hipervariables o regiones determinantes de
complementariedad (CDR, por sus siglas en inglés). Estas regiones interaccionan
mayoritariamente con el antígeno y por lo tanto son cruciales para la afinidad y
especificidad del anticuerpo. La RC de los anticuerpos presenta funciones denominadas
efectoras, tales como citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (ADCC, por sus siglas
en inglés) y citotoxicidad dependiente de complemento (CDC, por sus siglas en inglés), las
cuales permiten la destrucción del blanco reconocido por el anticuerpo. Las funciones
efectoras son dependientes del isotipo de inmunoglobulina y de las modificaciones
postraduccionales de la RC, donde la glicosilación de la asparragina 297 es un componente
fundamental (5).

Figura 1: A) Esquema de anticuerpo.

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ANTICUERPOS RECOMBINANTES
Los anticuerpos monoclonales (AcMo) son producidos por los hibridomas, principalmente
de origen murino, desarrollados por Milstein y Kohler en 1975, lo cual les valió el premio
Nobel en 1984 (6). Los AcMo derivan de una sola célula de linfocito B, por lo tanto
presentan una secuencia y especificidad única dirigida contra un solo blanco.
Inicialmente, los AcMo murinos se utilizaron en terapia humana, sin embargo,
demostraron baja eficacia en terapias que requieren tratamientos prolongados y con
múltiples dosis en individuos inmunocompetentes. Esto deriva principalmente de la reacción
inmune contra las secuencias murinas del anticuerpo o respuesta HAMA (human anti-mouse
antibody); la cual provoca una rápida eliminación del AcMo de la circulación sanguínea,
además de incrementar la posibilidad de sufrir una anafilaxia (7–9).
A fin de superar esta limitación, mediante la ingeniería genética, se procedió a reemplazar
las secuencias murinas del AcMo por secuencias de anticuerpos humanos. La modularidad
estructural de los anticuerpos facilitó la fusión de secuencias de la RV antígeno-específico de
un AcMo murino a la secuencia de la RC de un anticuerpo humano, generando los
anticuerpos quiméricos (Figura 1b)(10). Esto permitió disminuir la respuesta HAMA y
además aportó la capacidad de realizar las funciones efectoras a estos anticuerpos.
Posteriormente, a fin de disminuir el porcentaje de secuencia murina presente en los
anticuerpos recombinantes, se desarrollaron los anticuerpos humanizados que contienen un
90% de material humano. En estos AcMo las regiones CDR de un AcMo murino son
incorporadas a un anticuerpo humano (Figura 1b). Más recientemente, han sido
desarrollados los anticuerpos totalmente humanos, los cuales presentan un 100% de
secuencias de anticuerpo humano. Existen al menos tres métodos para la obtención de
anticuerpos totalmente humanos. El primero corresponde al uso de ratones productores de
inmunoglobulinas humanas, en los cuales se eliminan los genes murinos de
inmunoglobulinas mediante la técnica de inactivación génica o knock out y se incorporan los
genes de inmunoglobulinas humanas por medio de transgénesis. Estos ratones al ser
inoculados con un antígeno de interés son capaces de producir solamente anticuerpos con
secuencias humanas (11,12).

Figura 1. B) Diagrama de las diferentes estructuras de anticuerpos recombinantes, en

negro se grafican las secuencias murinas y en gris las secuencias humanas.

Otra técnica, más ampliamente utilizada, es la construcción de genotecas de RV de

anticuerpos (GEAB). En esta tecnología, las RV son fusionadas al dominio N-terminal de la
proteína estructural PIII del bacteriófago M13. Así, es posible producir una colección de
fagos (entre un millón a diez mil millones de clones diferentes) donde cada virus
filamentoso exponga en su superficie una sola RV, con una única especificidad antigénica.
Los fagos obtenidos a partir de la genoteca, pueden ser seleccionados mediante la unión del
anticuerpo a un antígeno de interés in vitro (Figura 2) (13–15).
La más reciente de las tecnologías para generar anticuerpos totalmente humanos es el
sistema de aislamiento de células secretoras de inmunoglobulinas. En este método se
procede a aislar células únicas de linfocitos B humanos secretores de anticuerpos de
pacientes vacunados o convalecientes, utilizando citometría de flujo acoplada a cell sorting.
Posteriormente, a partir de una célula individual se obtiene la secuencia del ADN

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complementario de IgP e IgL. Esta secuencia es sintetizada y utilizada para producir el AcMo
humano (16).

Figura 2: Esquema de la construcción de genotecas de regiones variables de anticuerpos.

A) Las secuencias de DNA de las regiones variables de cadenas pesadas (RVP) y livianas
(RVL) de anticuerpos son amplificadas a partir de linfocitos humanos. B) Estas secuencias
son incorporadas en el genoma del fago M13 y expresadas en su superficie acopladas a la
proteína PIII. C) La genoteca obtenida es utilizada para seleccionar fagos contra blancos
específicos in vitro. D) Una vez obtenido el fago, se construye el anticuerpo recombinante
humano utilizando la secuencia presente en el genoma del fago.

NUEVA GENERACIÓN DE ANTICUERPOS RECOMBINANTES

Inicialmente todos los AcMo recombinantes utilizados en terapia presentaban la
estructura convencional de los anticuerpos. Sin embargo, más recientemente y
aprovechando las características modulares de la molécula, se han generado diseños de
anticuerpos terapéuticos que no poseen las características estructurales naturales. Así, se
desarrollaron los anticuerpos de regiones variables en simple cadena (scFv, por sus siglas
en inglés), en los cuales las RV de las cadenas IgP y IgL son fusionadas mediante una
secuencia de unión flexible (Figura 3), reconstituyendo el sitio de unión al antígeno (17,18).
La simplicidad de esta molécula ha permitido su producción en sistemas de expresión
bacteriano con una alta eficiencia, sin embargo, es importante notar que estos AcMo al
carecer de RC no poseen funciones efectoras (19).
Utilizando al scFv como módulo de base se han generado múltiples tipos de anticuerpos,
entre ellos los anticuerpos multivalentes, los cuales presentan varios sitios de unión a
blancos (Figura 3). Además, se ha podido fusionar en una sola molécula, dos scFv con
diferentes especificidades, generando lo que se denomina anticuerpos bi-específicos (Figura
4) (20). Uno de los modelos más exitosos de este tipo de anticuerpos es la tecnología de
anticuerpos de anclaje de linfocitos T (BiTE, por sus siglas en inglés). Este tipo de
anticuerpo está constituido por dos scFv, uno con especificidad por un marcador de
linfocitos T y el otro capaz de unir a un marcador tumoral (21).

Figura 3: Diagrama de estructuras de anticuerpos de simple cadena y multímeros.

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La ingeniera genética de anticuerpos también se ha enfocado en realizar modificaciones

estructurales en las RC de los anticuerpos con el fin de incrementar las funciones efectoras
y mejorar su eficacia terapéutica. De los diferentes isotipos de inmunoglobulinas, las
gamma (IgG) son las que presentan la mejor capacidad de desarrollar funciones efectoras
como ADCC y CDC (22). Recientemente, se han identificado mutaciones en la RC que
aumentan la afinidad por el receptor de Fc gamma III (FcgRIII), permitiendo generar
anticuerpos con una mayor capacidad de ADCC (23–25). Además, el patrón de glicosilación
de los anticuerpos constituye un componente fundamental en las funciones efectoras; se ha
observado que al remover residuos externos de fucosa de la RC se logra un incremento de
ADCC en más de 100 veces (26,27). Recientemente, los anticuerpos Mogamulizumab y
Obinutuzumab, con una disminución en residuos de fucosa, han sido aprobados para su uso
(28,29).
Por otro lado, modificaciones en interacciones electroestáticas o hidrofóbicas en las RC
han permitido las interacciones entre IgP de anticuerpos con RV diferentes, generando
anticuerpos denominados tri-específicos (Figura 4) (30,31).

Figura 4: Diagrama de estructuras de anticuerpos bi- y tri-específicos. La combinación de

regiones variables de dos anticuerpos diferentes (anticuerpo 1 y anticuerpo 2) se fusionan
formando un anticuerpo bi-específico. El anticuerpo tri-específico presenta dos regiones
variables diferentes y una región constante.

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USOS TERAPÉUTICOS DE LOS ANTICUERPOS RECOMBINANTES

Los anticuerpos recombinantes se han transformado en un importante grupo de

fármacos; más de 40 anticuerpos terapéuticos están aprobados para terapia humana y
cientos se encuentran en distintas fases de desarrollo y ensayos clínicos (4). Se utilizan
como tratamiento para un amplio rango de patologías, tales como cáncer, autoinmunidad e
inflamación, trasplante de órganos, enfermedad cardiovascular, enfermedades infecciosas y
enfermedades oftalmológicas (Tabla 1). El éxito de los anticuerpos terapéuticos ha
producido un gran impacto tanto en la biomedicina como en la industria biotecnológica.

Tabla 1. Anticuerpos recombinantes terapéuticos según uso clínico.

Nombre genérico (comercial) Blanco Tipo de Anticuerpo

Cáncer

Alemtuzumab (Campath) CD52 Humanizado

Bevacizumab (Avastin) VEGF Humanizado
Brentuximab vedotin (Adcetris) CD30 Quimérico
Cetuximab (Erbitux) EGFR Quimérico
Ibritumomab (Zevalin) CD20 Murino conjugado a itrio-
90 o indio-111
Ipilimumab (Yervoy) CTLA-4 Humano
Ofatumumab (Arzerra) CD20 Humano
Panitumumab (Vectibix) EGFR Humano
Pertuzumab (Perjeta) HER2 Humanizado
Rituximab (Rituxan) CD20 Quimérico
Tositumomab (Bexxar) CD20 Murino conjugado a iodo-
131
Trastuzumab (Herceptin) HER2 Humanizado
Pembrolizumab (Keytruda) PD-1 Humanizado
Blinatumomab (Blincyto) CD3, CD19 Bi-específico
Catumaxomab (Removab) CD3,EpCAM y Tri-específico
MФ
Enfermedades autoinmunes, inflamatorias y alérgicas

Adalimumab (Humira) TNFα Humano

Belimumab (Benlysta) BlyS Humano
Canakinumab (Ilaris) IL-1β Humano
Certolizumab pegol (Cimzia) TNFα Fab humanizado pegilado
Golimumab (Simponi) TNFα Humano
Infliximab (Remicade) TNFα Quimérico
Natalizumab (Tysabri) Integrina-α4 Humanizado
Omalizumab (Xolair) IgE Humanizado
Rituximab (Rituxan) CD20 Quimérico
Tocilizumab (Actemra) IL-6R Humanizado
Subunidad
Ustekinumab (Stelara) p40 de IL-12 Humano
e IL-23

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Tabla 1 – Continuación

Infecciones
Proteína F de
Palivizumab (Synagis) virus sincicial Humanizado
respiratorio
Toxina de
Raxibacumab (ABthrax) Bacillus Humano
anthracis
Cardiología
Glicoprot.
Abciximab (ReoPro) Fab quimérico
IIb/IIIa
Evolocumab (Repatha) PCSK9 Humano
Alirocumab (Praluent) PCSK9 Humano

Trasplante de órganos

Basiliximab (Simulect) CD25 Quimérico

CD, cluster de diferenciación; VEGF, factor de crecimiento endotelial vascular; EGFR, receptor del factor de
crecimiento epidérmico; CTLA-4, antígeno 4 del linfocito T citotóxico; HER2, receptor 2 del factor de
crecimiento epidermal humano; PD-1, proteína ―muerte programada 1‖; EpCAM, molécula de adhesión
epitelial celular; MФ, macrófago; TNFα, Factor de Necrosis Tumoral alfa; BlyS, estimulador de linfocito B;
IL-1β, interleuquina 1 beta; IgE, inmunoglobulina E; IL-6R, recpetor de interleuquina 6; IL-12,
interleuquina 12; IL-23, interleuquina 23; Fab, fragmento de unión al antígeno; PCSK9, proproteína
convertasa subtilisina/kexina tipo 9.

Anticuerpos recombinantes en el tratamiento del cáncer

El uso de los anticuerpos recombinantes durante la última década representa una de las
estrategias terapéuticas más exitosas para pacientes con neoplasias, tanto hematológicas
como de tumores sólidos. Adicionalmente, presentan la ventaja que la mayoría de ellos
muestran menos efectos adversos en comparación con los agentes quimioterapéuticos
convencionales (32).
Los mecanismos por los cuales los anticuerpos, utilizados exitosamente en la clínica,
producen el efecto anti-tumoral incluyen: i) acción directa del anticuerpo sobre las células
tumorales, mediante la unión a marcadores específicos del tumor (bloqueo o activación de
un receptor, inducción de apoptosis, entrega de un agente citotóxico, entre otros); ii)
efectos sobre la vasculatura y estroma del tumor; iii) inducción de muerte de la célula
tumoral por mecanismos inmunes (CDC, ADCC, regulación de la función de linfocitos T)
(33).
El primer anticuerpo recombinante para el tratamiento del cáncer aprobado por la
Administración de Medicamentos y Alimentos (FDA, por sus siglas en inglés) en 1997 es el
Rituximab, un AcMo quimérico de tipo IgG1 dirigido contra la molécula CD20, marcador de
linaje de linfocitos B. El Rituximab es uno de los anticuerpos más utilizados en terapia anti-
tumoral y está indicado para el tratamiento del linfoma no-Hodgkin de linfocitos B CD20+,
produciendo la depleción de estas células circulantes (34). Además, está aprobado para el
tratamiento de la leucemia linfocítica crónica y enfermedades autoinmunes. Entre los
mecanismos de acción ejercidos por el Rituximab se encuentran la ADCC, la CDC y la
quimio- y radio-sensibilización de las células tumorales (35).
Posteriormente varios anticuerpos recombinantes han sido aprobados para el tratamiento
del cáncer (Tabla I). Entre ellos se destaca el Trastuzumab, AcMo humanizado IgG1 cuyo
blanco es el dominio extracelular de la proteína oncogénica receptor 2 del factor de
crecimiento epidermal humano denominado HER2/neu o ERBB2, miembro de la familia del
receptor de factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Su uso fue aprobado por la FDA en
1998 para el tratamiento del cáncer de mama metastásico que sobre-expresa HER2
(HER2+) y ha demostrado gran éxito, mejorando la sobrevida de pacientes (36). Este
anticuerpo actúa suprimiendo la señalización del receptor contra el cual va dirigido, además
actúa induciendo factores anti-angiogénicos y a través del mecanismo de ADCC (37). En el
2010 la FDA aprobó el uso de Trastuzumab para el tratamiento de carcinoma gástrico
metastásico y de la unión gastroesofágica que sobre-expresan HER2 (38).

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A pesar de estos logros, alrededor de 15% de los pacientes tratados con Trastuzumab
sufren recaídas (39)(40). Debido a esto se desarrolló Pertuzumab, AcMo humanizado anti-
HER2 dirigido contra un epitopo diferente, lo que permite actuar bloqueando la dimerización
de HER2 con otros miembros de la familia de HER (EGFR, HER3 and HER4) inhibiendo de
esta manera la señalización del receptor. En el 2012, la FDA aprobó el uso de Pertuzumab
en conjunto con Trastuzumab y el agente quimioterapéutico Docetaxel para el tratamiento
de pacientes con cáncer de mama HER2+ metastásico que no recibieron previamente
agentes anti-HER o quimioterapia (41).
La inhibición de la vascularización o angiogénesis del tumor mediante anticuerpos se
utiliza en el tratamiento de tumores sólidos. El AcMo humanizado Bevacizumab, dirigido
contra el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), fue el primer anticuerpo anti-
angiogénico aprobado en 2004 para el tratamiento de cáncer colorrectal metastásico y de
carcinoma de pulmón de células no pequeñas (42). Adicionalmente, ha sido utilizado en el
tratamiento de leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, cáncer de mama, melanoma,
carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, cáncer de próstata, entre otros (43).
Otra estrategia importante para el tratamiento del cáncer consiste en direccionar a los
linfocitos T citotóxicos hacia el tumor, con la finalidad de que estos se activen por
proximidad y destruyan a la células tumorales. Para ello se han desarrollado los anticuerpos
bi-específicos de tipo BiTE, capaces de unirse a la célula tumoral y al linfocito T en forma
simultánea. En este grupo se encuentra el anticuerpo bi-específico Blinatumomab aprobado
para casos de leucemia linfoblastíca aguda (ALL) (20). Es de notar que existen varios
anticuerpos BiTE en proceso de aprobación.
El Catumaxomab utilizado en ascitis maligna es un anticuerpo considerado tri-específico,
ya que posee dos RV diferentes (uno capaz de unir a un linfocito T y el otro a un marcador
tumoral) y una RC pudiendo unirse a tres tipos de células en forma simultánea (44).
Anticuerpos recombinantes en el tratamiento de enfermedades autoinmunes e
inflamatorias
Los anticuerpos recombinantes utilizados para el tratamiento de enfermedades
autoinmunes e inflamatorias producen el efecto terapéutico a través de diferentes
mecanismos, tales como bloqueo o neutralización de citoquinas o factores de crecimiento,
bloqueo de un receptor, depleción de tipos celulares específicos (45).
Entre los anticuerpos terapéuticos bloqueantes de citoquinas más exitosos se encuentran
los AcMo antagonistas del Factor de Necrosis Tumoral alfa (TNFα). El primer anticuerpo
terapéutico aprobado en 1998 para el tratamiento de enfermedades inflamatorias fue el
Infliximab. Este anticuerpo ha demostrado ser exitoso en el tratamiento de la artritis
reumatoide y otras patologías inflamatorias (46). El Infliximab es un AMo quimérico, el cual
se une de manera específica tanto a la forma soluble de la citoquina y como también a la
unida a la membrana celular, principalmente de macrófagos. La unión del anticuerpo a la
citoquina bloquea su unión al receptor y además induce apoptosis de las células que
presentan TNFα a nivel de la membrana celular (45).
El desarrollo de la ingeniería de anticuerpos condujo a la producción de otros agentes
bloqueantes del TNFα (Tabla I), como el Adalimumab, un AcMo totalmente humano
derivado de una librería de fagos (45) (47).
En la terapia para las enfermedades autoinmunes también se utilizan anticuerpos que se
unen a un receptor, bloqueando la unión ligando-receptor. Entre ellos se encuentran: el
Tocilizumab, un AcMo anti-receptor de IL-6 (IL-6R), para artritis reumatoide y artritis
idiopática juvenil sistémica (48); el Natalizumab, un anti-subunidad α4 de integrinasα 4β1 y
α4β7, indicado para esclerosis múltiple y enfermedad de Crohn (49)(50).
Anticuerpos recombinantes en cardiología
Las plaquetas participan en los mecanismos fisiopatológicos del síndrome coronario agudo
y de las complicaciones trombóticas en la intervención coronaria percutánea. A fin de inhibir
la agregación plaquetaria se utiliza el Abciximab, una molécula de fragmento de unión al
antígeno (Fab) quimérica indicada en la intervención coronaria percutánea. Abciximab se
une al receptor plaquetario glicoproteína IIb/IIIa e impide la adhesión al fibrinógeno, factor
von Willebrand y otras moléculas adhesivas. Adicionalmente, Abciximab se une al receptor
de vitronectina (aVb3) presente tanto en las plaquetas como en las células endoteliales
(51).
Anticuerpos anti-proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (PCSK9), denominados
genéricamente como ―inhibidores de PCSK9‖, se utilizan para el tratamiento de la
hipercolesterolemia y se encuentran aprobados para el uso en pacientes con niveles
elevados de colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-C) no controlados por los
tratamientos convencionales (52). Entre ellos se encuentra Evolocumab, AcMo totalmente

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humano, aprobado en el 2015 por la FDA para el tratamiento de pacientes con

hipercolesterolemia familiar o enfermedad cardiovascular aterosclerótica. Estos agentes
inhiben la actividad de la enzima PCSK9, la cual produce degradación hepática del receptor
de lipoproteínas de baja densidad (LDLR) permitiendo un aumento del receptor y por lo
tanto una disminución en los niveles de LDL-C en sangre (53,54).
Anticuerpos recombinantes en infectología
El AcMo quimérico IgG1 Palivizumab está dirigido contra la proteína F del virus
respiratorio sincicial (VRS), fue aprobado en 1998 por la FDA para la profilaxis de la
infección con VRS en niños con alto riesgo, tales como niños prematuros o con enfermedad
cardíaca congénita. Este AcMo, al unirse al virus, inhibe su fusión con las células
endoteliales pulmonares previniendo la infección (55).
Raxibacumab es un AcMo humano aprobado por la FDA en el 2012 para el tratamiento o
prevención del ántrax, causado por el Bacillus anthracis. Este anticuerpo neutraliza las
toxinas de la bacteria, uniéndose al antígeno protectivo e impidiendo la unión a su receptor,
de este modo inhibe la entrada de las toxinas bacterianas factor letal (LF) y de edema (EF)
a la célula (56).

BIOSIMILARES
La caída de las patentes de gran parte de los anticuerpos terapéuticos en los últimos años
ha permitido el desarrollo de los denominados anticuerpos biosimilares. Este término se
aplica a aquellos biofármacos producidos por un fabricante diferente al del biofármaco
innovador, utilizando sus propios bancos celulares, procesos y métodos analíticos. Por lo
tanto, los biosimilares pese a tener la misma secuencia no son idénticos al producto de
referencia.
Existe un amplio debate sobre los requerimientos a nivel de ensayos clínicos necesarios
para la aprobación y registro de AcMo biosimilares. En torno a este tema, la agencia de
registro de medicamentos europea (EMA) ha liderado el proceso y ha establecido criterios
de bio-comparabilidad para el registro de estos productos. Así, en el 2013 los primeros
AcMo biosimilares al Infliximab fueron comercializados en Europa, bajo los nombres de
Resima e Inflectra.
Actualmente hay un fuerte interés en la introducción de AcMo biosimilares en diferentes
mercados de Latinoamérica; en abril del 2015 Brasil aprobó el uso del primer AcMo
biosimilar (57). Se espera que esta clase de productos, debido a su menor precio, permita
una mayor penetración de los AcMo recombinantes en el mercado. Sin embargo, temas
como los criterios de calidad, seguridad y farmacovigilancia deben ser abordados y
discutidos por las autoridades pertinentes con el fin de asegurar el beneficio de los
pacientes.

CONCLUSIÓN
Debido a su alta eficacia en el tratamiento de diferentes tipos de patologías, existen más
de 300 anticuerpos recombinantes terapéuticos en diferentes fases de ensayos clínicos
contra múltiples blancos.
Se estima que el número de anticuerpos aprobados se encuentra limitado principalmente
por número de blancos antígenos con funciones conocidas. La disponibilidad de nuevos
blancos validados es uno de los mayores desafíos para el desarrollo de nuevos productos.
Sin embargo, a medida que las ―omicas‖ y la biología de sistemas avancen en comprender
el proteoma humano se podrá contar con nuevos blancos para el desarrollo de anticuerpos
recombinantes.
Los distintos diseños de anticuerpos plantean nuevas posibilidades y usos para los AcMo,
desde moléculas multiméricas capaces de unir y neutralizar una gran cantidad de blancos
hasta su uso como transportador de moléculas tóxicas o virus a células tumorales. Dentro
de esta área, merece un comentario particular el desarrollo de los anticuerpos bi- y tri-
específicos, ya que amplían las funciones terapéuticas de los AcMo a áreas anteriormente
impensables. Un ejemplo de ello es el AcMo humanizado ACE910/RG6013, que se encuentra
en fase II para su uso en casos de hemofilia A. Este AcMo es capaz de unir los factores de
coagulación IXa y X y gracias a esto reemplazar al factor VIII de la coagulación (58).
La aparición de nuevas técnicas de producción, así como la introducción de los
biosimilares sugieren una disminución en los precios de estos productos, lo que permitirá
una mayor penetración de los mismos en mercados emergentes como los de Latinoamérica.

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Langjahr et al Presente y futuro de los anticuerpos recombinantes terapéuticos.

En conclusión, dado el desarrollo y éxito de la tecnología de AcMo recombinantes, se

espera un aumento constante en el número de anticuerpos terapéuticos contra nuevos
blancos, además del desarrollo de nuevas estructuras, usos y estrategias terapéuticas.

Agradecimientos
PS agradece el apoyo del INBIO y la DGICT UNA.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Cosimi AB, Colvin RB, Burton RC, Rubin 11. Wells WA. Eek, a XenoMouse: Abgenix,
RH, Goldstein G, Kung PC, et al. Use of Inc. Chem Biol. 2000 Aug;7(8):R185–6.
monoclonal antibodies to T-cell subsets 12. Davis CG, Gallo ML, Corvalan JR.
for immunologic monitoring and Transgenic mice as a source of fully
treatment in recipients of renal human antibodies for the treatment of
allografts. N Engl J Med. 1981 Aug 6 cancer. Cancer Metastasis Rev.
;305(6):308–14. 1999;18(4):421–5.
2. Thistlethwaite JR, Cosimi AB, Delmonico 13. Bazan J, Całkosiński I, Gamian A. Phage
FL, Rubin RH, Talkoff-Rubin N, Nelson display — A powerful technique for
PW, et al. Evolving use of OKT3 immunotherapy.
monoclonal antibody for treatment of 2012;(December):1829–35.
renal allograft rejection. Transplantation 14. Hust M, Thie H, Schirrmann T, Dübel S.
. 1984 Dec;38(6):695–701. Antibody Phage Display. 2008;
3. Aggarwal S. What’s fueling the biotech 15. Daly SJ, Dillon PP, Manning BM, Dunne
engine - 2012 to 2013. Nat Biotechnol. L, Killard A, Kennedy RO. Production
2014;32(1):32–9. and Characterization of Murine Single
4. Ecker DM, Jones SD, Levine HL. The Chain Fv Antibodies to Aflatoxin B 1
therapeutic monoclonal antibody Derived From a Pre-immunized Antibody
market. MAbs. 2015;7(1):9–14. Phage Display Library System.
5. Deisenhofer J. Crystallographic 2002;1:255–74.
refinement and atomic models of a 16. Wrammert J, Smith K, Miller J, Langley
human Fc fragment and its complex WA, Kokko K, Larsen C, et al. Rapid
with fragment B of protein A from cloning of high-affinity human
Staphylococcus aureus at 2.9- and 2.8- monoclonal antibodies against influenza
A resolution. Biochemistry. 1981 Apr 28 virus. Nature. 2008 May 29
;20(9):2361–70. ;453(7195):667–71.
6. Köhler G, Milstein C. Continuous 17. Bird RE, Walker BW. Single chain
cultures of fused cells secreting antibody variable regions. Trends
antibody of predefined specificity. Biotechnol . 1991 Apr ;9(4):132–7.
Nature. 1975 Aug 7 ;256(5517):495–7. 18. Huston JS, Tai MS, McCartney J, Keck P,
7. Legouffe E, Liautard J, Gaillard JP, Rossi Oppermann H. Antigen recognition and
JF, Wijdenes J, Bataille R, et al. Human targeted delivery by the single-chain Fv.
anti-mouse antibody response to the Cell Biophys . ;22(1-3):189–224.
injection of murine monoclonal 19. Huston JS, Levinson D, Mudgett-Hunter
antibodies against IL-6. Clin Exp M, Tai MS, Novotný J, Margolies MN, et
Immunol. 1994 Nov ;98(2):323–9. al. Protein engineering of antibody
8. Klee GG. Human anti-mouse antibodies. binding sites: recovery of specific
Arch Pathol Lab Med . 2000 Jun activity in an anti-digoxin single-chain
;124(6):921–3. Fv analogue produced in Escherichia
9. Dillman RO, Shawler DL, McCallister TJ, coli. Proc Natl Acad Sci U S A; 1988 Aug
Halpern SE. Human anti-mouse ;85(16):5879–83.
antibody response in cancer patients 20. Weidle UH, Kontermann RE, Brinkmann
following single low-dose injections of U. Tumor-antigen-binding bispecific
radiolabeled murine monoclonal antibodies for cancer treatment. Semin
antibodies. Cancer Biother. 1994 Oncol. Elsevier; 2014;41(5):653–60.
;9(1):17–28. 21. Brischwein K, Parr L, Pflanz S, Volkland
10. Takeda S, Naito T, Hama K, Noma T, J, Lumsden J, Klinger M, et al. Strictly
Honjo T. Construction of chimaeric target cell-dependent activation of T
processed immunoglobulin genes cells by bispecific single-chain antibody
containing mouse variable and human constructs of the BiTE class. J
constant region sequences. Nature. Immunother . ;30(8):798–807.
1985; 314(6010):452–4.

Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud. 2016;14(2):110-121 119

Langjahr et al Presente y futuro de los anticuerpos recombinantes terapéuticos.
22. Kaneko E, Niwa R. Optimizing 31. Gunasekaran K, Pentony M, Shen M,
Therapeutic Antibody Function. Garrett L, Forte C, Woodward A, et al.
BioDrugs . 2011;25(1):1–11. Enhancing antibody Fc heterodimer
23. Lazar GA, Dang W, Karki S, Vafa O, formation through electrostatic steering
Peng JS, Hyun L, et al. Engineered effects: applications to bispecific
antibody Fc variants with enhanced molecules and monovalent IgG. J Biol
effector function. Proc Natl Acad Sci U S Chem . American Society for
A. 2006 Mar 14 ;103(11):4005–10. Biochemistry and Molecular Biology;
24. Shields RL, Namenuk AK, Hong K, Meng 2010 Jun 18 ;285(25):19637–46.
YG, Rae J, Briggs J, et al. High 32. Scott AM, Wolchok JD, Old LJ. Antibody
resolution mapping of the binding site therapy of cancer. Nat Rev Cancer .
on human IgG1 for Fc gamma RI, Fc Nature Publishing Group;
gamma RII, Fc gamma RIII, and FcRn 2012;12(4):278–87.
and design of IgG1 variants with 33. Scott AM, Allison JP, Wolchok JD.
improved binding to the Fc gamma R. J Monoclonal antibodies in cancer
Biol Chem . 2001 Mar 2 ;276(9):6591– therapy. Cancer Immun .
604. 2012;12(14):1–8.
25. Stavenhagen JB, Gorlatov S, Tuaillon N, 34. Maloney DG, Liles TM, Czerwinski DK,
Rankin CT, Li H, Burke S, et al. Fc Waldichuk C, Rosenberg J, Grillo-Lopez
optimization of therapeutic antibodies A, et al. Phase I clinical trial using
enhances their ability to kill tumor cells escalating single-dose infusion of
in vitro and controls tumor expansion in chimeric anti-CD20 monoclonal antibody
vivo via low-affinity activating Fcgamma (IDEC-C2B8) in patients with recurrent
receptors. Cancer Res . 2007 Sep 15 B-cell lymphoma. Blood . 1994 Oct 15
;67(18):8882–90. ;84(8):2457–66.
26. Umaña P, Jean-Mairet J, Moudry R, 35. Eisenbeis CF, Caligiuri MA, Byrd JC.
Amstutz H, Bailey JE. Engineered Rituximab: converging mechanisms of
glycoforms of an antineuroblastoma action in non-Hodgkin’s lymphoma? Clin
IgG1 with optimized antibody- Cancer Res . 2003 Dec 1 ;9(16 Pt
dependent cellular cytotoxic activity. 1):5810–2.
Nat Biotechnol . 1999 Feb ;17(2):176– 36. Spector NL, Blackwell KL. Understanding
80. the mechanisms behind trastuzumab
27. Schuster M, Umana P, Ferrara C, therapy for human epidermal growth
Brünker P, Gerdes C, Waxenecker G, et factor receptor 2-positive breast cancer.
al. Improved effector functions of a J Clin Oncol . 2009 Dec 1
therapeutic monoclonal Lewis Y-specific ;27(34):5838–47.
antibody by glycoform engineering. 37. Hudis CA. Trastuzumab--mechanism of
Cancer Res . 2005 Sep 1 ;65(17):7934– action and use in clinical practice. N
41. Engl J Med . 2007 Jul 5 ;357(1):39–51.
28. Mössner E, Brünker P, Moser S, 38. Gunturu KS, Woo Y, Beaubier N,
Püntener U, Schmidt C, Herter S, et al. Remotti HE, Saif MW. Gastric cancer
Increasing the efficacy of CD20 antibody and trastuzumab: first biologic therapy
therapy through the engineering of a in gastric cancer. Ther Adv Med Oncol .
new type II anti-CD20 antibody with SAGE Publications; 2013 Mar
enhanced direct and immune effector ;5(2):143–51.
cell-mediated B-cell cytotoxicity. Blood . 39. Lionakis MS, Lahdenranta J, Sun J, Liu
2010 Jun 3 ;115(22):4393–402. W, Lewis RE, Albert ND, et al.
29. Subramaniam JM, Whiteside G, Development of a ligand-directed
McKeage K, Croxtall JC. approach to study the pathogenesis of
Mogamulizumab: first global approval. invasive aspergillosis. Infect Immun.
Drugs . 2012 Jun 18 ;72(9):1293–8. 2005;73(11):7747–58.
30. Ridgway JB, Presta LG, Carter P. 40. Nahta R, Hung M-C, Esteva FJ. The
―Knobs-into-holes‖ engineering of HER-2-targeting antibodies trastuzumab
antibody CH3 domains for heavy chain and pertuzumab synergistically inhibit
heterodimerization. Protein Eng . 1996 the survival of breast cancer cells.
Jul ;9(7):617–21. Cancer Res . 2004 Apr 1 ;64(7):2343–
6.

Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud. 2016;14(2):110-121 120

Langjahr et al Presente y futuro de los anticuerpos recombinantes terapéuticos.
41. Jiang H, Rugo HS. Human epidermal cancer. Nat Nanotechnol.
growth factor receptor 2 positive 2012;7(10):677–82.
(HER2+) metastatic breast cancer: how 50. Ghosh S, Goldin E, Gordon FH, Malchow
the latest results are improving HA, Rask-Madsen J, Rutgeerts P, et al.
therapeutic options. Ther Adv Med Oncol Natalizumab for active Crohn’s disease.
. 2015;7(6):321–39. N Engl J Med . 2003 Jan 2 ;348(1):24–
42. Hurwitz H, Fehrenbacher L, Novotny W, 32.
Cartwright T, Hainsworth J, Heim W, et 51. Dziewierz A, Rakowski T, Dudek D.
al. Bevacizumab plus irinotecan, Abciximab in the management of acute
fluorouracil, and leucovorin for myocardial infarction with ST-segment
metastatic colorectal cancer. N Engl J elevation: Evidence-based treatment,
Med . 2004 Jun 3 ;350(23):2335–42. current clinical use, and future
43. Ribatti D. From the discovery of perspectives. Ther Clin Risk Manag.
monoclonal antibodies to their 2014;10(1):567–76.
therapeutic application: An historical 52. Gouni-Berthold I, Berthold HK. PCSK9
reappraisal. Immunol Lett . Elsevier antibodies for the treatment of
B.V.; 2014;161(1):96–9. hypercholesterolemia. Nutrients . 2014
44. Fan G, Wang Z, Hao M, Li J. Bispecific Dec ;6(12):5517–33.
antibodies and their applications. J 53. Foltz IN, Karow M, Wasserman SM.
Hematol Oncol . 2015 ;8:130. Evolution and emergence of therapeutic
45. Chan AC, Carter PJ. Therapeutic monoclonal antibodies what
antibodies for autoimmunity and cardiologists need to know. Circulation.
inflammation. Nat Rev Immunol. 2013;127(22):2222–30.
2010;10(5):301–16. 54. Gouni-Berthold I, Berthold HK. PCSK9
46. Lipsky PE, van der Heijde DM, St Clair antibodies for the treatment of
EW, Furst DE, Breedveld FC, Kalden JR, hypercholesterolemia. Nutrients.
et al. Infliximab and methotrexate in 2014;6(12):5517–33.
the treatment of rheumatoid arthritis. 55. Lanari M. VS. AS. GS. FG. The use of
Anti-Tumor Necrosis Factor Trial in humanized monoclonal antibodies for
Rheumatoid Arthritis with Concomitant the prevention of respiratory syncytial
Therapy Study Group. N Engl J Med . virus infection. Clin Dev Immunol.
2000 Nov 30 ;343(22):1594–602. 2013;2013.
47. Bykerk VP. Adalimumab for early 56. Kummerfeldt CE. Raxibacumab:
rheumatoid arthritis. Expert Rev Clin Potential role in the treatment of
Immunol . 2008 Mar ;4(2):157–63. 7 inhalational anthrax. Infect Drug Resist.
48. Fleischmann RM, Halland A-M, Brzosko 2014;7:101–9.
M, Burgos-Vargas R, Mela C, Vernon E, 57. TEIXEIRA FV, KOTZE PG, DAMIÃO
et al. Tocilizumab inhibits structural AOMC. Anvisa Approves the First
joint damage and improves physical Biosimilar Monoclonal Antibody Based
function in patients with rheumatoid on Comparability in Brazil. Arq
arthritis and inadequate responses to Gastroenterol . 2016;53(2):60–1.
methotrexate: LITHE study 2-year 58. Uchida N, Sambe T, Yoneyama K,
results. J Rheumatol . 2013 Feb Fukazawa N, Kawanishi T, Kobayashi S,
;40(2):113–26. et al. A first-in-human phase 1 study of
49. Ghosh D, Lee Y, Thomas S, Kohli AG, ACE910, a novel factor VIII-mimetic
Yun DS, Belcher AM, et al. M13- bispecific antibody, in healthy subjects.
templated magnetic nanoparticles for Blood . 2016 Mar 31;127(13):1633–41.
targeted in vivo imaging of prostate

Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud. 2016;14(2):110-121 121