Guias de Bioquimica Regencia
Guias de Bioquimica Regencia
Guias de Bioquimica Regencia
Practica Nº 1
Docente:
RINA MARTINEZ CARDEÑO
UNIVERSIDAD DE SUCRE
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACIA
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PROGRAMA DE TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACIA – UNIVERSIDAD DE SUCRE
RINA MARTINEZ CARDEÑO
INTRODUCCIÓN
CONTENIDO
PRACTICA Nº 5: ENZIMAS
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PROGRAMA DE TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACIA – UNIVERSIDAD DE SUCRE
RINA MARTINEZ CARDEÑO
PRACTICA N° 1
NORMAS GENERALES DE TRABAJO EN EL LABORATORIO
Objetivos:
Teoría Relacionada
Procedimiento
Normas del laboratorio
Identificación de reactivos
Cuestionario
a. Muy básicas.
b. Inestables a la luz.
c. Elija un reactivo específico de los utilizados en la sesión de trabajo y
anote la información que contiene la etiqueta que acompaña al
recipiente.
Utensilios de sostén. Son utensilios que permiten sujetar algunas otras piezas de
laboratorio.
BIBLIOGRAFIA
http://www.monografias.com/trabajos13/manubio.shtml
http://capra.iespana.es/capra/bioseguradad/bioseguridad.html
http://www.qb.fcen.uba.ar/microinumo/higieneyseguridad.htm
Koneman, E. Diagnostico microbiológico, Editorial médico panamericana, 110 - 11.
www.who.int/entity/csr/resources/publications/biosafety/CDS_CSR_LYO_2004_11
SP.pdf
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PROGRAMA DE TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACIA – UNIVERSIDAD DE SUCRE
RINA MARTINEZ CARDEÑO
PRACTICA Nº 2
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
OBJETIVO:
Identificar carbohidratos en muestras orgánicas utilizando reactivos
específicos
TEORÍA RELACIONADA
MATERIALES Y REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
Reacción de Molish:
En un tubo de ensayo tome 2 ml de la solución problema, agregue 2 gotas de
solución de alfa naftol, luego añada cuidadosamente por las paredes del tubo
aproximadamente 1 ml de H2SO4 concentrado hasta que se formen dos capas,
observe cuidadosamente cualquier cambio de color en la interfase.
Repita la prueba con soluciones de otros azúcares
Reacción de Tollens:
Coloque en un tubo de ensayo 1 ml de Reactivo de Tollens, añada 2 ml de la
solución problema, caliente en baño María durante 10 o 15 minutos. Observe si
hay formación de un espejo de plata en las paredes del tubo de ensayo.
Reacción de Seliwanoff:
En un tubo de ensayo mezcle 1 ml de solución problema y 1 ml del reactivo.
Caliente a ebullición la mezcla, el desarrollo de un color rojo en 2 minutos, es
indicativo de que la prueba es positiva para la presencia de cetosas.
Hidrólisis de la Sacarosa
Tome tres tubos de ensayo y coloque en cada uno 2 ml de solución de sacarosa,
y agregue igual volumen de cada uno de las siguientes sustancias así: agua al
primero, HCl al 10% al segundo y NaOH al 10% al tercero. Caliente todos los
tubos en baño de María y agregue a cada tubo 1 ml de reactivo de Fehling,
caliente nuevamente y observe en cada caso el grado de hidrólisis que hubo.
CUESTIONARIO
PRACTICA N° 3
QUÍMICA DE LÍPIDOS
OBJETIVO:
Identificar propiedades físicas y químicas de lípidos mediante pruebas
sencillas de laboratorio
TEORÍA RELACIONADA
Los lípidos son un grupo grande y heterogéneo de biomoléculas orgánicas,
presentes en las células, solubles en solventes orgánicos no polares como
benceno, cloroformo, éter, tetracloruro de carbono y son insolubles en agua.
Podemos encontrar que se establecen varias formas de clasificar los lípidos, pero
en una forma de clasificarlos es en complejos y simples, o saponificables e
insaponificables, según que por hidrólisis generan o no sales de ácidos grasos o
jabones.
Emulsión de lípidos
Prepare 2 tubos de ensayo de acuerdo con el siguiente esquema.
TUBOS Nº 1 2
Ml de agua destilada 7 5
Ml de sales biliares - 2
Gotas de aceite 3 3
Determinación de la acidez:
Pese cuidadosamente 2 gr de grasa o mida 2 ml de aceite y suspéndala en 10 ml
de un solvente adecuado. Agregue 1 ml de solución de fenolftaleína, mezclar
cuidadosamente y titular con KOH 0,1 M hasta que el color rosado pálido
permanezca por más de 20 a 30 segundos. Anotar el volumen de álcali gastado y
calcular el valor de acidez de la grasa de acuerdo con la siguiente relación.
Saponificación de las grasas
Preparación de la solución saponificada: En un tubo de ensayo grande, tome
aproximadamente 2 g de grasa y 6 ml de KOH etanólico al 20%, colóquelo por 30
minutos en un baño de María, agregue luego 6 ml de agua destilada.
Con la solución saponificada prepare 3 tubos de ensayo de acuerdo con el
siguiente esquema:
TUBO Nº 1 2 3
ml solución saponificada 2 2 2
Pruebas de instauración
TUBO Nº 1 2 3 4
ml cloroformo 5 5 5 5
A cada tubo añada solución de HUBL, gota a gota, con agitación, hasta reproducir
el color desarrollado en el tubo Nº 1
CUESTIONARIO:
PRACTICA Nº 4
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS
OBJETIVO:
Caracterizar proteínas en la solución de albúmina mediante ensayos
químicos con reactivos específicos
TEORÍA RELACIONADA:
Las moléculas proteicas van desde las largas fibras insolubles que forman el
tejido conectivo y el pelo, hasta los glóbulos compactos solubles, capaces de
atravesar la membrana celular y desencadenar reacciones metabólicas. Tienen
un peso molecular elevado y son específicas de cada especie y de cada uno de
sus órganos. Se estima que el ser humano tiene unas 30.000 proteínas distintas,
de las que sólo un 2% se ha descrito con detalle. Las proteínas sirven sobre todo
para construir y mantener las células, aunque su descomposición química
también proporciona energía, con un rendimiento de 4 kilocalorías por gramo,
similar al de los hidratos de carbono
MATERIALES Y REACTIVOS:
PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra
TUBO Nº Condición
A Calentamiento hasta coagulación
B 1 gota de HCL [ ]
C 1 gota de NaOH
CUESTIONARIO
Define que es punto isoeléctrico de una proteína y que utilidad tiene este
Describa el fundamento de la electroforesis y la cromatografía como
método de estudio de las proteínas y su utilidad en el campo de la
medicina.
Consulte de que manera se hace la determinación de proteínas en el
laboratorio clínico. Qué utilidad tiene esto como prueba diagnostica y cual
es el fundamento del método.
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PROGRAMA DE TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACIA – UNIVERSIDAD DE SUCRE
RINA MARTINEZ CARDEÑO
PRACTICA Nº 5
ENZIMAS
OBJETIVO:
TEORÍA RELACIONADA
Todas las enzimas son proteínas globulares que se combinan con otras
sustancias, llamadas cofactores o grupos prostéticos, lo que las convierte en
proteínas conjugadas, para catalizar las numerosas reacciones químicas del
organismo.
Las enzimas poseen un sitio activo en forma de hendidura donde posee los
grupos químicos específicos que reaccionan con el sustrato para generar un
producto. Estas moléculas, son las principales responsables del metabolismo y de
su regulación, tienen puntos catalíticos a los cuales se acopla el sustrato igual que
una mano a un guante para iniciar y controlar el metabolismo en todo el cuerpo.
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, gradilla, Beacker, Baño de María, plancha de calentamiento,
pinzas para tubo de ensayo, gradilla, Agua, Reactivo de Fehling, solución de HCl,
Lugol, solución de almidón al 2%
PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra:
El pH y la Actividad enzimática
Tome tres tubos de ensayo, agregue en cada uno solución de saliva y márquelos
como ABC.
TUBO A. 2 ml de Solución de NaOH 1M
TUBO B: No se le adiciona nada
TUBO C: 2 ml de HCL 1 M
CUESTIONARIO:
1. Cual es el pH óptimo para la actividad de la tialina
2. Cómo explica la acción incontinua de la Tialina en el estómago
3. Muestre con ejemplos la aplicación clínica de las enzimas
4. Consulte acerca de las aplicaciones clínicas de las enzimas
5. ¿Que utilidad diagnóstica tiene el uso de las enzimas?