Estudio comparativoo de sistemas de desinfección

esinfección de barricas de vino

como alternativas al empleo del sulfuroso
Antonio Palacios; Ixone Borinaga y David Castillo
Laboratorios Excell Ibérica. Polígono La Portalada. C/ Planillo Nº 12, 26006 Logroño, La Rioja ([email protected]
[email protected]). Tel.
941 445106 – www.labexcell.com

1-. Introducción:

El uso de barricas de roble en la elaboración y crianza de los vinos es una práctica que se considera como
un elemento muy favorable
avorable en la participación y evolución organoléptica de los vinos.
vinos Durante la crianza
en barricas, los intercambios vino/madera
ino/madera enriquecen en aromas y sensaciones gustativas el producto,
además de favorecer una micro-oxigenación
oxigenación que provoca una estabilidad
estabilidad física y química en el producto y
le confiere la delicadeza, equilibrio
brio y complejidad aromática tan apreciadas por el consumidor. La barrica
usada, no posee el mismo potencial que el de una nueva, pero encierra todavía un excelente valor de
utilización para numerosos vinos y productos alcohólicos a un coste menor, por lo que su buen
mantenimiento es imprescindible para este fin.

Los problemas que se presentan durante la crianza del vino están esencialmente asociados
asoc a
las contaminaciones microbiológicas o químicas. En ocasiones, el desarrollo de una flora
indeseable puede alterar el producto de manera importante, incluso volverlo inapropiado para
su consumo. La utilización de barricas usadas, mal mantenidas, aumenta aum dicho riesgo,
pudiendo dar lugar a la aparición del
de picado acético, el carácter fenolado
olado o “Brett”, el picado
láctico,, enfermedad de la grasa o la enfermedad del amargor.

Además, los depósitos de tartrato formados durante la crianza se acumulan adheridos en las
paredes internas de la barrica y sirven de refugio a los procesos microbianos como
potenciales contaminantes.. Se ha establecido que una barrica usada de 225 litros contiene
alrededor de 5 litros de vino retenidos en los primeros milímetros de las duelas, lo que
representa un volumen de vino muy importante nada desdeñable. La L estructura micro--porosa
de la madera,, sobre todo en el roble francés, favorece la penetración de los microorganismos
en profundidad y vuelve su limpieza y desinfección particularmente en tareas de difícil
resolución, especialmente crítico en el caso de contaminación por parte de Brettanomyces,
Brettanomyces
levadura causante del carácter fenolado del vino.

En este sentido, ell carácter fenolado del vino es un problema sensorial importante ante, ya que ciertos
compuestos fenólicos
enólicos volátiles tienen umbrales de detección bajos y se hacen dominantes de los aromas
del vino, escondiendo
condiendo el carácter varietal, afrutado e incluso de la madera. Brettanomyces produce fenoles
volátiles como el 4-vinilguayacol
vinilguayacol y el 4-vinilfenol
4 vinilfenol a partir de ácidos hidroxicinámicos,
hidroxicinámicos como ferúlico y p-
cumárico respectivamente. Los vinilderivados igualmente pueden acabar convirtiéndose en etil-derivados.
etil

Los fenoles volátiles tienen un aroma característico que en muchos

muchos casos se considera un defecto en los
vinos. Se les denomina según la terminología inglesa “phenolic off-flavour”
off flavour” (POF). Se ha comprobado
que el género Saccharomyces solo llega a producir los vinilfenoles, pero si en el proceso de elaboración
posteriormente
mente aparecen levaduras contaminantes del tipo Brettanomyces/Dekkera,
Brettanomyces/Dekkera estos pueden ser
transformados a etilfenoles.

La problemática sensorial de los fenoles volátiles es un tema muy tratado en la actualidad. Esta
problemática afecta especialmente a vinos de crianza o que pasan cierto tiempo en barrica.
barrica De modo
genérico, los vinos que contienen niveles apreciables de fenoles volátiles se les describen con
co carácter
“Brett”. Los descriptores típicos del carácter fenolado del vino son: plástico, goma quemada, tirita,
medicina (farmacia), aromas
romas animales,
animales estiércol, boñiga, cuadra, establo, sudor de caballo, perro mojado,
calcetín usado.

En la gráfica inferior (figura 1) se representa un estudio sensorial de vinos Crianza

Crianza de Rioja, tomando en
consideración 13 vinos representativos de la región que fueron analizados organolépticamente por 4
expertos en el ámbito internacional a nivel de mercados. En el eje horizontal se representan las la
puntuaciones de preferencia hedónica y en el eje vertical las unidades olfativas
ivas de etilfenoles de los vinos
catados (concentración de etilfenoles en µg/L
g/L de los vinos/umbral sensorial). Lo que podemos deducir de
este estudio es que si parece necesaria la ausencia o baja concentración por debajo del umbral sensorial de
los etilfenoles para poder obtener una alta valoración por los expertos, sin embargo, la ausencia de los
mismos, no garantiza el éxito en cata. Es necesario y entonces posible, construir valor sensorial mediante
buenas prácticas enológicas sobre vinos, pero siempre y cuando éstos estén “limpios”. Como podemos
observar, el coeficiente de correlación no es muy elevado, debido precisamente a que en bajas
valoraciones de cata existen vinos tanto con altos contenidos en etilfenoles como bajos.

Figura 1: recta de correlación entre etilfenoles y análisis

sensorial en vinos crianza de Rioja.

El mechado de sulfuroso ha sido una práctica tradicional muy utilizada en las bodegas para la
desinfección de barricas. Es una práctica que se ha utilizado desde la época de los romanos y que ayuda a
mantener el parque de barricas en buen estado frente a microorganismos alterantes. La forma tradicional
consiste en la quema de una pastilla de azufre en el interior de las barricas vacías, la combustión del
azufre produce el dióxido de azufre, que es el que tiene efectos biocidas sobre la madera.

La problemática actual proviene de la Directiva 98/8 del Parlamento Europeo y del Consejo de 16 de
Febrero de 1998 sobre Biocidas, transpuesta en España mediante el Real Decreto 1054/2002. El objetivo
de la norma, es la protección de la salud de las personas, de los trabajadores, y del medioambiente. Se han
establecido una serie de fechas y procedimientos de revisión y/o evaluación del riesgo de las nuevas
sustancias activas consideradas como biocidas, y de las ya existentes para distintos usos o categorías
también preestablecidos, y que están contenidas en los anexos. Se ha establecido además un Programa de
Evaluación del Riesgo que tiene varios pasos: identificación de las sustancias activas existentes,
notificación de la industria del interés de la inclusión de alguna de estas sustancias en alguno de los
anexos y la revisión de la permanencia o no, para alguno de los usos concretos que se establecen, y en el
que entra el SO2 como biocida. La normativa se enmarca en el proceso de revisión de la legislación
comunitaria y nada tiene que ver con el contenido en esta sustancia en los vinos de forma natural, ni con
la práctica enológica de adición de sulfuroso para proteger a los vinos de la oxidación o como
conservante.

Si se quiere continuar utilizando el SO2 para la limpieza de barricas; el sector, tiene que defender su
registro y autorización, por razones industriales, comerciales o económicas, y demostrar que no presenta
problemas de seguridad e higiene en el trabajo, ni que presenta impactos negativos en el medioambiente,
que impidan continuar utilizándolo. Nos parezca absurda la norma o no, que a priori lo parece, el sector
debe reaccionar en dos direcciones, ambas necesarias y muy complementarias. La primera en la
realización del estudio previamente mencionado para anular y/o retrasar la aplicación de la directiva, y la
segunda, en el estudio de técnicas alternativas que puedan sustituir al SO2 en la desinfección de barricas.
En el presente artículo se presentan estudios comparativos realizados en bodegas durante más de dos años
de trabajo y seguimiento.

2-. Pasos imprescindibles y tecnologías posibles en el mantenimiento de barricas de madera:

Para un buen mantenimiento de las barricas de madera en bodega es necesario llevar a cabo un trabajo
exhaustivo, secuencial, ordenado y profesionalizado como se expone a continuación.

2.1-. Enjuague: eliminación de manchas macroscópicas poco o no adheridas a la superficie. Para

ello se utilizan tubos de enjuague, que trabajan a presión baja o media (2-15 bares) con caudales
que pueden variar entre los 10 y los 45 l/min y permiten únicamente la eliminación de las manchas
más burdas o de los residuos de productos de limpieza, bien por disolución o mediante su arrastre.
2.2-. Limpieza: eliminación de las manchas adheridas y de los gérmenes gracias a la acción
mecánica y/o química de los detergentes. Para ello se utiliza agua caliente (65-85°C), lo que
acelera y aumenta la eficacia del proceso de limpieza; la temperatura debe ser adaptada a la
eventual presencia de productos de limpieza y alta presión (100-120 bares) para facilitar la acción
mecánica sobre los depósitos incrustados; existe riesgo de destrucción de la estructura de la
madera, inexistente si < 120 bares; necesita la utilización de cabezales rotatorios multi-
direccionales y tubos de aspersión adaptados para cubrir toda la superficie de la barrica en poco
tiempo y con el mínimo consumo posible de agua, junto con una fuerte aspiración de las aguas
residuales de lavado, por lo que se aconseja lavar con equipos que laven con la boca de la barrica
hacia abajo, lo que facilita una limpieza más segura y eficaz.

En la madera, incluso la limpieza más eficaz es superficial. Es imposible limpiar realmente más
allá de los 0,5 a los 1,5 mm de profundidad simplemente con agua, aunque sea a alta presión. La
acción del detergente permite acelerar la limpieza ayudando a desincrustar los depósitos presentes
en los micro poros abiertos de las duelas de los toneles. Pero estos detergentes bajo ningún
concepto deben penetrar demasiado profundamente en la madera, ya que en tal caso sería
imposible garantizar su eliminación total mediante el aclarado. La acción del detergente debe
limitarse a la superficie de las duelas y la penetración no debe exceder los 2 ó 3 mm. Los agentes
químicos empleados son alcalinos fuertes (hidróxido de sodio), alcalinos moderados (carbonato de
sodio), tensio-activos y agentes quelantes, también llamados secuestradores o complejantes.

2.3-. Desinfección: la desinfección no equivale a esterilización (total eliminación de gérmenes).

Supone la destrucción de gérmenes viables para reducir en profundidad las poblaciones residuales
mediante la acción química y/o física.

2.3.1-. Desinfección por vías químicas: se realiza mediante agentes acidificantes como el dióxido
de azufre, empleado en forma líquida sobre el vino en solución de metabisulfito de sodio y en
forma gaseosa sobre la madera y el vino, mediante combustión de azufre o la utilización de gas
licuado.

También mediante agentes oxidantes, aunque su utilización puede alterar la composición de la

madera. Los oxidantes halogenados (clorados y bromados) han de evitarse debido al riesgo de
formación de fenoles halógenados precursores de halo-anisoles como el 2,4,6-tricloroanisol (TCA)
y el 2,4,6-tribromoanisol (TBA).

Se emplean entonces peróxidos, como el peróxido de hidrógeno (agua oxigenada; H202), con
acción lenta y poco eficaz a menos de 60°C; sales de peróxido (percarbonato de sodio, Na2C03-
5H202) o persulfato de potasio (KHSO5); ácido peracético, con acción desinfectante en frío a partir
de un 1%. El permanganato (permanganato de potasio KMnO4) con acción desodorizante pero
escasamente desinfectante. El ozono (O3) es una gas muy oxidante, tóxico (límites de exposición
en fase gaseosa de 120 µg/m3/24h, 200 µg/m3 en el lugar de trabajo, 400 µg/m3/h suelo de
toxicidad) y explosivo. Su utilización sólo es posible tras su disolución en agua fría para producir
una solución de ozono activo que contenga entre 3 y 5 mg/L de O3.

El ozono produce una desinfección rápida a pH neutro por acción directa y por sus productos de
degradación en el agua, en concreto de los radicales libres O- y HO-. El ozono es un desinfectante,
no tiene propiedades limpiadoras. Teniendo en cuenta su modo de actuación, es indispensable
emplearlo sobre superficies perfectamente limpias para poder desinfectar. El uso de ozono
constituye una técnica perfectamente eficaz para la desinfección en frío de las cubas de acero
inoxidable, resinas epóxicas, canalizaciones y cadenas de embotellado. En el caso de recipientes
de madera, reacciona parcialmente enfrentada al ozono limitando su acción, en concreto, en
profundidad.

El problema suscitado en la actualidad deriva de la buena eficacia en el efecto biocida y

antioxidante que la práctica del mechado tiene en el sistema tradicional de la limpieza de barricas.
Como vemos en la tabla 1, la utilización de una pastilla de 7,5 g mediante combustión, lo que
permite consumir el oxígeno del interior de la barrica, facilita el mantenimiento de la fracción de
sulfuroso libre al cabo de los 4 meses y medio, lo que ayuda a inhibir el crecimiento de
Brettanomyces y tener una baja concentración de etilfenoles al final de las pruebas, comparando
con el mechado tradicional y con la corrección directa en vino.
 Tabla 1: comparativa en la aplicación de sulfuroso directamente en vino y en barrica
mediante mechado de cilindros de 5 y 7,5 gramos.
Condiciones de
adición de Parámetro medido t =0 t = 3 meses t = 4,5 meses
sulfitos

Pastilla de 7,5 g SO2 libre (mg/l) 22 16 13

de azufre por Brettanomyces/ml 6 0 1
barrica Etil-fenol (µg/l) 285 285 293

Pastilla de 5 g de SO2 libre (mg/l) 14 11 8

azufre por Brettanomyces/ml 6 0 0
barrica Etil-fenol (µg/l) 285 285 288

Solución
sulfurosa SO2 libre (mg/l) 13 10 6
Añadida Brettanomyces/ml 6 510 1200
directamente al Etil-fenol (µg/l) 285 296 652
vino 2g/Hl

2.3.2-. Desinfección por vías físicas:

La vía térmica más empleada es el uso de generadores de agua caliente móviles mediante
compresor, que pueden producir agua a 80-90°C entre 80 y 210 bares. La utilización a
temperaturas más altas es ilusoria, ya que en tal caso los caudales son muy débiles. Una presión de
100-120 bares es suficientemente respetuosa con la madera. Este dispositivo permite limpiar sin
detergentes y desinfectar la superficie; la eficacia desinfectante está limitada en profundidad, ya
que el aumento de la temperatura es demasiado lento. El vapor de agua a 105°C debido a la baja
conductividad térmica de la madera exige tratamientos prolongados para que sean eficaces; la
aplicación de vapor debe, por tanto, ser efectuada inmediatamente después de la limpieza con agua
caliente para aprovechar el calor absorbido por la madera; después de un lavado de 5 min a 85°C,
calentando la madera a 35°C a 5 mm de profundidad, se ha de aplicar el vapor a 105ºC durante
más de 4 min para desinfectar a 5 mm de profundidad (temperatura > 55°C) y a más de 7,5 min
para desinfectar a 15 mm, (ver figura 2).
Figura 2: Temperaturas que alcanza la madera en diferentes puntos de profundidad. S1: temperatura del aire en
la barrica S2: temperatura a 5 mm. dentro de la madera. S3: temperatura a 15 mm. S4: Temperatura a 25 mm.

El tratamiento electro-magnético por microondas permite el calentamiento de la madera a través

de la excitación del agua contenida en el material; la selección de la longitud de onda permite
calentar la madera desde el centro de las duelas con poca energía; la forma y disposición del
magnetrón y la rotación de la barrica permiten un irradiación homogénea dentro de la Caja
metálica de Faraday que refleja las ondas.

En la aplicación de ultrasonidos se introduce un sonotrón dentro de la barrica llena de agua a 60°C

reciclada; los ultrasonidos (150 kHz) producen en la superficie de la madera y en los primeros
milímetros altas presiones al nivel microscópico (>2000 bares) por cavitación del agua,
eliminando los compuestos que impregnan la madera y destruyen los micro-organismos al mismo
tiempo que provoca su desinfección.

La proyección de hielo seco utiliza el contraste térmico entre la madera y el hielo seco (-80°C) con
ausencia de uso de agua (tratamiento seco), permitiendo eliminar todos los compuestos
precipitados en la superficie de la madera; se necesita sacar uno de los fondos para tener acceso a
toda la superficie interna de la barrica y trabajar con mucha ventilación para no acumular el gas
 carbónico; es bastante eficiente y rápido, pero también caro y no garantiza la desinfección al nivel
de profundidad de las duelas.

El empleo de oxígeno negativo lleva algún tiempo estudiándose en Francia. Los iones negativos de
oxígeno O¯ se generan de la siguiente forma: O2 + 2e¯ lo transforman en 2O¯ (iones negativos de
dioxígeno O2¯), que posteriormente continúan según el siguiente esquema: O2 + e¯ a O2¯. Se trata de
un fenómeno de ionización de moléculas de oxígeno del aire, tal y como ocurre en la atmósfera
durante una tormenta eléctrica. Los iones negativos de oxígeno originados contribuyen a la
limpieza natural del aire, ya que el oxígeno negativo posee un efecto fungicida y bactericida
(mediante destrucción por oxidación) y un efecto químico (destrucción de olores por efecto
eléctrico). Sobre la barrica tiene un efecto superficial interesante, siendo inocuo sobre la calidad de
la madera.

4-. Resultados de los ensayos de desinfección de barricas llevados a cabo en bodegas:

En esta sección se van a presentar los resultados de los análisis microbiológicos y de las aguas de lavado
de barricas usadas obtenidos antes y después de la aplicación de vapor, ozono, microondas y ultrasonidos
sobre barricas o duelas siguiendo la metodología de tomas de muestras patentado por Excell (Brevet
Français N° 0851143). Los análisis microbiológicos se han
realizado mediante siembra de las aguas de lavado de las barricas
usadas sobre medios de cultivo selectivo con su correspondiente
incubación y también mediante PCR a tiempo real. Los análisis
químicos de contaminantes procedentes del metabolismo
microbiano se han realizado mediante cromatografía de gases y
espectrometría de masas sobre las mismas aguas de lavado de
barricas usadas obtenidas en el muestreo mencionado.

4.1-. Aplicación de vapor: En este ensayo se ha realizado una comparación de un lavando tipo estándar
con agua caliente sobre un lote de 5 barricas homogéneas con vino que presentaba problemas de
desviaciones microbianas por actividad bacteriana frente a ese mismo lavado pero incorporando una
aplicación de vapor de agua sobre las barricas. Como se puede observar en la tabla 2, gracias a la
aplicación de vapor se consigue erradicar el problema de contaminación microbiana por parte de bacterias
lácticas y acéticas.
Tabla 2: resultados del análisis microbiológico sobre aguas de lavado de 5 barricas homogéneas.

Bacterias acéticas Bacterias lácticas

Tipo de lavado de barricas (UFC/100 mL) (UFC/100 mL) Levaduras (UFC/mL)
Barrica lavado estandar sin vapor 15 4 nd
Barrica lavado estandar con vapor nd nd nd

4.2-. Aplicación de ozono: En este ensayo se ha realizado una comparación de un lavando tipo estándar
(agua caliente + vapor) sobre un lote de 10 barricas homogéneas con vino que presentaba problemas de
desviaciones microbianas por actividad bacteriana y de levaduras tipo Brettanomyces frente a ese mismo
lavado pero incorporando una aplicación de ozonización a 5 ppm en agua durante 3 minutos sobre las
barricas. Como se puede observar en la tabla 3, dichos contaminantes desaparecen después de la
aplicación del ozono, aunque queda una pequeña población residual de Brettanomyces.
Tabla 3: resultados del análisis microbiológico sobre aguas de lavado de 10 barricas homogéneas.
Bacterias acéticas Bacterias lácticas Brettanomyces
Tipo de lavado de barricas (UFC/100 mL) (UFC/100 mL) (UFC/100 mL)

Lavado normal
40 nd 14

nd nd 3
Lavado normal + apl icación de O3

En este caso también se ha realizado análisis químicos de los contaminantes derivados del metabolismo
microbiano para ver las posibilidades de limpieza química. Como se puede observar en la tabla 4 dichos
contaminantes no desaparecen, pero disminuyen de forma significativa.
 Tabla 4: resultados del análisis microbiológico sobre aguas de lavado de 5
barricas homogéneas.

Tipo de contaminante Lavado normal +

químico Lavado normal aplicación de O3
Acetato de etilo (mg/L) 0,5 0,1
4-EF (µg/L) 33,7 11
4-EG (µg/L) 4,3 0,4
TCA (ng/L) nd nd
TeCA (ng/L) nd nd
TBA (ng/L) nd nd
PCA (ng/L) nd nd

En un segundo ensayo, se aplicó ozono en agua a diferentes concentraciones en 3 lotes diferentes de

barricas: Barricas A con ozono al 65% aplicado durante 180 segundos (5 ppm), Barricas D con ozono al
80% aplicado durante 180 segundos (5 ppm) y Barricas M con ozono al 65% aplicado durante 90
segundos (3 ppm). Se comparó el lavado tradicional con la combinación de agua caliente y vapor en el
mismo lavado, incluyendo posteriormente el ozono en agua. Se puede observar un efecto más potente
sobre la muerte de Brettanomyces con esta última combinación (barras en azul). De forma colateral se
puede observar en el mismo gráfico la desaparición de anisoles encontrados impregnando la madera, (ver
figura 3).

Figura 3: resultados del análisis microbiológico mediante medios de cultivo selectivos de Brettanomyces partiendo de aguas de
lavado de los 3 lotes de barricas (A, D y M), grafico izquierda y análisis mediante cromatografía de gases de metabolitos
contaminantes, gráfico de la derecha.

1000 Células de Brettanomyces /mL

70 Concentración del
metabolito contaminante
60 en aguas de escurrido de
u.f.c/mL

100 barricas usadas (GCSM)

50

40
10
30

20
1
10 Barrica D2-3 (Ozono 65%-180'')
Barrica D2-2 (L. Normal)
0 Barrica D2-1 (S. Lavar)
Barrica D1-2 (L. Normal)
Barrica D1-1 (S. Lavar)

Aprovechando los datos de análisis de metabolitos, se realizó un estudio estadístico mediante Análisis de
Componentes Principales (ACP) cuya representación se puede observar en la figura 4, donde las barricas
sin lavar en negro de todos los lotes se encuentran muy cercanas a todas las variables que representan
contaminación por etilfenoles, acetato de etilo y anisoles. Las lavadas mediante la técnica tradicional en
rojo ocupan una posición intermedia y las lavadas en combinación con ozono en azul se sitúan en las
posiciones más lejanas de los contaminantes en el plano factorial.

Figura 4: resultados del análisis estadística mediante ACP de los análisis de metabolitos en
aguas de lavado de todos los lotes de barricas analizadas por CG/SM.
Variables (ejes F1 y F2: 83,77 %) Observaciones (ejes F1 y F2: 83,77 %)
1
3
Barrica M1-1 (S.
4-EG (µg/L) Barrica M2-1 (S.
Lavar)
0,75 Acetato de Lavar)
etilo (mg/L) 2
4-EF (µg/L) Barrica M2-3 Barrica A1-1 (S.
0,5 1 Lavar)
(Ozono 65%-90'')
Barrica A1-2 (L.
PCA (ng/L) Barrica D2-3 Normal) Barrica D2-1 (S.
0,25 0 (Ozono 65%-180'') Barrica A2-2 (L. Lavar)
F2 (34,76 %)

Barrica A2-1 (S.

F2 (34,76 %)

Barrica A2-3 Barrica M1-2 (L. Normal) Lavar)

(Ozono 80%-180'') Normal) Barrica D2-2 (L.
0 -1
Normal)
Barrica M2-2 (L. Barrica D1-1 (S.
TCA (ng/L) -2 Normal) Lavar)
-0,25
TBA (ng/L)
-0,5 -3

Barrica D1-2 (L.

TeCA (ng/L)
-4 Normal)
-0,75

-5
-1
-6 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5
-1 -0,75 -0,5 -0,25 0 0,25 0,5 0,75 1
F1 (49,01 %)
F1 (49,01 %)

Uno de los temores reincidentes en la aplicación de ozono sobre la madera es la posible incidencia sobre
su composición y la actividad residual oxidante que pueda quedar sobre la barrica y que pueda afectar
posteriormente al vino. En este segundo ensayo se evaluó el acetaldehído formado en el vino a la semana
y a los 6 meses (en cuatro casos, ver figura 5). Los resultados muestran que no hubo diferencias
significativas, aunque las barricas con mayor tiempo de aplicación de ozono presenta una cantidad un
poco mayor de acetaldehido.

Figura 5: resultados del análisis de acetaldehído en los vinos a la semana y

a los 6 meses (en 4 casos) de crianza.
25
mg/L Acetaldehido
20

15

10 IX-2011
II-2012
5

0
Barricas Barricas Barricas Barricas Barricas Barricas
sin tratar Lavado Ozono T1 Ozono T2 Azuelado Barena
tradicional

En este mismo ensayo a nivel microbiológico se obtuvo una buena eficacia frente a Brettanomyces en
todos los casos, incluyendo azuelado y arenado realizados. La eficacia sobre bacterias lácticas fue algo
menor y casi insignificante sobre las bacterias acéticas como se observa en la figura 6.

Figura 6: resultados del análisis microbiológico en aguas de lavado de

bacterias acéticas y lácticas, Brettanomyces y levaduras mediante medios de
cultivo selectivos.

100000
10000 u.f.c/mL
1000
100
Bact. acéticas
10
Bact. lácticas
1
Brettanomyces
Levaduras

Para evaluar el efecto del ozono sobre los aromas que la madera puede ceder al vinos se realizaron
análisis mediante cromatografía de gases y espectrometría de masas (ver resultados en la figura 7). Como
se desprende de la observación de los resultados, no se produjeron diferencias significativas entre los
diferentes tratamientos, aunque a nivel del siringol, allilsiringol e isoeugenol si aumentaron su
concentración en los lotes de barricas con mayor tiempo de exposición al ozono. Análisis realizados
después de 6 meses de crianza sobre las barricas.

Figura 7: resultados del análisis de volátiles de la madera cedidos al vino después de 6 meses de crianza mediante
cromatografía de gases y espectrometría de masas.

25 1200
μg/L μg/L
1000
20
800
Barricas sin tratar Barricas sin tratar
15 600
Barricas Lavado 400 Barricas Lavado
10 tradicional tradicional
200
Barricas Ozono T1 Barricas Ozono T1
5 0

0 Barricas Ozono T2 Barricas Ozono T2

4.3-. Aplicación de ozono en gas: También es posible aplicar ozono en forma de gas, lo que puede
aumentar el grado de penetrabilidad sobre la madera a través de sus poros. Para evaluar su efecto se
realizó la siguiente prueba con una máquina capaz de alcanzar 30 ppm de O3 en el interior de la barrica.
La aplicación se realizó durante un tiempo de 10 minutos. Los resultados visibles sobre la figura 8
muestran que no se consiguió el efecto esperado, a pesar de que hubo una bajada significativa de la
vialidad de Brettanomyces. Seguramente la causa sea no alcanzar una concentración de ozono suficiente
en el interior de la barrica.

Para mejorar la aplicación de ozono gaseoso se recomienda entonces alcanzar una riqueza de 100 ppm
como mínimo y si es posible, trabajar a una presión positiva de 1 bar o 1,5 bares mediante bombeo en
lugar de trabajar solo con exposición.

Figura 8: resultados del análisis microbiológico de Brettanomyces en aguas

de lavado mediante PCR a tiempo real.

Brettanomyces ufc/mL (PCR)

100000

10000

1000

100

10

1
Antes O3 Después O3

4.4-. Aplicación de microondas: Para ello se han estudiados diferentes trenes de ondas electromagnéticas
de alta frecuencia sobre duelas de barricas que han contenido vino contaminado durante 36 y 72 meses y
sobre duelas inoculadas de forma artificial por Brettanomyces y bacterias
lácticas. Posteriormente, las duelas se han sometido a las pulsaciones de alta
frecuencia obteniéndose los resultados de la tabla 5. En dicha tabla se puede
comparar las poblaciones de microorganismos viables antes y después del
tratamiento. Algunas duelas no resultaron estar contaminadas, pero en los casos
donde si había contaminación, esta desaparece después de cada aplicación,
siendo incluso eficaz con los tratamientos de trenes de ondas más suaves y con
menores tiempos.

La gran ventaja del método es que permite inactivar microorganismos sin calentar la madera, como se
puede observar en la figura 9, donde se muestra la aplicación de tres pulsos al 90% de potencia durante
50 segundos cada una. El máximo de temperatura en el exterior de las duelas no supera los 45ºC, por lo
que se trata de un tratamiento térmico muy inofensivo frente a la composición de la madera.
Figura 9: representación de las ondas electromagnéticas empleadas en los
tratamientos más intensos u seguimiento de la temperatura en la parte exterior
de las duelas.

A nivel microbiológico se realizaron análisis por PCR a tiempo real sobre las aguas de lavado y también
sobre medios de cultivos específicos. En la figura 10 a la izquierda observamos los resultados antes
(negro) y después (amarillo) de la aplicación de microondas. Observamos un nivel de recuperación de
contaminantes muy buena. En la parte derecha observamos los resultados de los medios de cultivo, donde
vemos que Brettanomyces ya no es activa.
Figura 10: resultados del análisis microbiológico sobre diferentes duelas tratadas con microondas. Izquierda: PCR a tiempo real
y derecha: medios de cultivo selectivos.

Brettanomyces (células/g) Brettanomyces (u.f.c/g)

100000 100000

10000 10000

1000 1000

100 100

10 10

1 1

4.5-. Aplicación de ultrasonidos: Este ensayo se realizo únicamente en duelas contaminadas y no sobre
barricas enteras, tal y como se hizo en el ensayo de microondas. Para ello, las duelas de 36 y 72 meses de
contacto con vino contaminado por Brettanomyces y bacterias lácticas y acéticas se sumergieron en un
baño de ultrasonidos con agua a 65ºC y se realizó el siguiente ensayo experimental. Cada lote de duelas
se sometió a ultrasonidos durante 3, 10 y 20 minutos. Posteriormente se realizaron los análisis
correspondientes raspando 5 mm la madera y macerando los trozos en vino sintético para su posterior
análisis microbiológico.

Figura 11 y Tabla 5: resultados del análisis microbiológico de 5 barricas homogéneas. Figura 11: en negro y gris antes del
tratamiento, en verde después del tratamiento. Tabla 5: filas con fondo blanco antes del tratamiento y filas con fondo oscuro
después del tratamiento con microondas.
Bacterias Bacterias Brettano
u.f.c./gramo
1000 acéticas lácticas myces
Bacterias acéticas
Lote C36 25 0 0
Bacterias lácticas
Brettanomyces Lote C36 (3 min y 65ºC) 0 0 0
100 Lote C72 254 0 0
Lote C72 (3 min y 65ºC) 0 0 0
Lote B36 622 1333 225
10 Lote B36 (10 min y 65ºC) 36 9 0
Lote B72 142 0 0
Lote B72 (10 min y 65ºC) 70 0 0
1 Lote A36 1618 494 53
Lote A36 (20 min y 65ºC) 0 0 0
Lote A72 92 0 0

Lote A72 (20 min y 65ºC) 96 0 0

Según los resultados, el tratamiento resultó muy interesante para inactivar las contaminaciones
microbiológicas por parte de Brettanomyces, que desaparecieron en todas las duelas. También hubo un
efecto muy significativo sobre las bacterias lácticas, que aparecieron en población muy pequeña en una de
las duelas tratadas durante 10 minutos. Sin embargo, el efecto no fue tan evidente sobre las bacterias
acéticas, mostrando éstas una particular resistencia en la mayoría de las duelas tratadas.

4.6-. Proyección de hielo seco: Otra técnica ya experimentada en Australia y en USA es la aplicación de
hielo seco sobre las paredes internas de las barricas. Este ensayo no fue realizado por Excell, tabla 7.
Tabla 7: resultados químicos sobre Barricas 2004 de roble francés.

Barricas usadas
6/5/07 11/19/07 1/27/08
Control Control Tratado Control Tratado
SO2 Libre 31 38 37 26 28
SO2 Total 47 52 45 52 58
pH 3.43 3.4 3.4 3.41 3.4
AV 0.038 0.044 0.041 0.048 0.052
Brettanomyces 70 310 <10 460 <10
4EP 10 17 13 15 13
4EG <4 <4 <4 5 4
Taninos 265 125 120 90 95
Fenoles volátiles 1110 1200 1160 1260 1240
4.7-. Arenado de las barricas: Se trata de un tratamiento de barricas más que un proceso de
desinfección. El tratamiento se realiza por decapado físico-mecánico mediante proyección de un abrasivo
natural: el mineral se proyecta con una presión regulable en función del estado del tonel, siendo el
objetivo a lograr la máxima conservación del tostado inicial. El decapado se efectúa sobre un grosor que
oscila entre 0,2 y 0,4 milímetros. El mineral y los residuos son evacuados por proyección hidráulica y
mediante agua declorada. Para lograr la asepsia del tonel y descontaminarlo al máximo, se aplica
posteriormente vapor seco por encima de 100º durante varios minutos. Después de esta primera fase de
asepsia, se lleva a cabo un enjuague para eliminar los coloides y los colorantes (antocianos).
Posteriormente se aplica azufre gaseoso.

Como ventajas, se obtiene la recuperación de la oxigenación estimulada por la liberación de los poros de
la madera y regenera la superficie de contacto y la asepsia por la acción combinada de tres tratamientos:
procedimiento físico eliminando los depósitos orgánicos y minerales: sarros, sulfatos, colorantes,
coloides, así como la película de flora microbiana de superficie (mohos, bacterias, y levaduras diversas,
como Brettanomyces bruxellensis), el vapor seco, que mata los microorganismos al desnaturalizar las
proteínas de membrana celular y el gas sulfuroso a presión, que penetra a través de los poros.

Se evaluó el efecto de los tratamientos sobre la composición volátil de la madera. Como se puede
observar en la figura 12, existe un aumento de ciertos compuestos volátiles cedidos al vino después de 6
meses de crianza, principalmente representado por el aumento de aldehídos fenólicos en comparación con
el lavado clásico y lavado con vapor y aplicación de sulfuroso. En este caso también se quiso evaluar el
efecto de la crianza en barrica nueva.

Figura 12: resultados del análisis de la composición volátil de la madera después de 6 meses de crianza
en barricas con lavado clásico, lavado con vapor, arenado y barricas nuevas.

2000 Suma fenoles

volátiles
1500 Suma lactonas

Suma derivados
1000 fenoles
Suma aldehidos
500 fenólicos
Suma derivados
furánicos
0
Barrica L. Barrica Barrica Barrica
Clásico Vapor + Barena Nueva
SO2

5-. Cuadro sinóptico resumido de las distintas tecnologías de desinfección de barricas: En el presente
cuadro (tabla 9) se presentan de forma resumida las ventajas y desventajas de las diferentes técnicas
existente en la actualidad para la limpieza y desinfección de las barricas de vino en bodega, donde se
incluye el mechado o la quema de azufre. La principal conclusión que podemos obtener, es que en la
actualidad no existe una técnica que por fácil, económica y eficacia pueda suplir en su totalidad al
mechado. Sin embargo sí se empieza a dilucidar que con la aplicación de técnicas existentes o en
desarrollo, según el estado de las barricas y la naturaleza de los contaminantes químicos y
microbiológicos, o la combinación de varias de ellas en una secuencia lógica, se puede hacer frente a una
posible aplicación de la antipática y poco razonable directiva europea de prohibición del empleo de
sulfuroso en la desinfección de barricas.

Por otra parte, tampoco hay razones para pensar que el mechado de barricas es la técnica que nos ha
salvado sistemáticamente de todos los males y contaminantes microbianos en la crianza del vino, pues en
la actualidad son problemas a los que las bodegas deben hacer frente, así que nunca estará de más seguir
aumentando el conocimiento de alternativas e innovando para poder mejorar el estado del arte en la
desinfección de barricas, ya que éstas, más que un continente, son un elemento dinámico de mejora y
enriquecimiento de la calidad organoléptica del vino y una de las inversiones más importantes realizados
en bodega que hay que proteger.
 Tabla 9: resumen de las principales ventajas y desventajas de las técnicas existente y en
desarrollo de desinfección de barricas.

Tipos de Tratamiento INCONVENIENTES VENTAJAS

Acción limitada, formación Buena conservación del
Sulfuroso de sulfitos, tiempo largo de vino. Activo frente a
acción, inestable (mecha) bacterias acéticas
Acción superficial e Fácil aplicación. Es un buen
Agua ozonizada intermedia. Reactividad desinfectante. Eliminación
con materia orgánica. de anisoles
Muy inocuo (tiempo). Buen
Tiempos largos. Inercia
Vapor agente desinfectante.
térmica de la madera
Económico
Tiempos largos de Muy económico, aplicación
Oxígeno negativo aplicación. Efecto ambiental, inocuo en
superficial madera
Elimina tartratos fácilmente.
Gasto de agua y energía,
Activo a nivel de superficie e
Ultrasonidos tiempo de aplicación,
intermedio. Muy inocuo con
inversión
la madera
Desinfecta pero no limpia. Buena acción biocida. Ataca
Microondas (p-
No disponible a nivel desde dentro a fuera.
electromagnéticos)
industrial Inocuo con la madera

Conclusiones finales:

• El mantenimiento de barricas para el vino es una tarea indispensable para desarrollar y mejorar la
calidad de los vinos a corto, medio y largo plazo.
• Una conservación efectuada en recipientes limpios y desinfectados permite al vino desarrollarse de
manera armoniosa a lo largo de su proceso de envejecimiento en botella sin necesidad de
tratamientos previos.
• En caso contrario, será necesario y con frecuencia estabilizar de manera enérgica el vino en el
momento del embotellado para evitar la alteración de su calidad.
• Es indispensable respetar reglas simples y elementales para conseguir una limpieza y una
desinfección eficaces. Por otro lado, incluso si se ha realizado un trabajo perfecto, la desinfección es
siempre temporal.
• No es posible esterilizar la madera y su estructura particular hace difícil una desinfección perfecta.
• Cuando se ha realizado de manera química, la desinfección no es sino superficial, ya que es
imposible hacer penetrar los agentes desinfectantes profundamente en la madera sin riesgo de dejar
residuos nefastos o de alterar la calidad de las interacciones madera-vino.
• Únicamente los procedimientos térmicos permiten eliminar la contaminación profunda, pero es
necesario el empleo de tecnología y procesos de trabajo lentos si verdaderamente queremos hablar
de desinfección.
• Las técnicas de renovación de las barricas que consisten en la eliminación, mediante procedimientos
físicos de la capa superficial de las duelas en contacto con el vino, producen una limpieza más
profunda pero no desinfectan.
• Los intercambios madera-vino son, sin duda, mejorados, pero no recuperan los niveles de las
barricas nuevas.
• Las técnicas empleadas en el estudio han mostrado una buena eficacia frente a la eliminación de
contaminantes microbianos.

Bibliografía:

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