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UNJVERSlDAD NACIONAL DE INGENIERIA
FACULTAD DE INGENIERL4. QUIMICA Y !Jt.fANUFACTUR.ERA
INFORME TECN!CO
CCtNTROL DE BIOPROCESOS EN
BIOTEC'NOLOGIA ·y BIOIDDROMETALURGIA
PARA OPTAR EL TITULO PROFESIONAL DE:
INGENJ(ERO QUIMICO
PRESENTADO POR
JORGE LUlS WONG DAVILA
PROMOCION 90-ll
lJNI, MARZO DE 1999

A mis padres
INDICE
Indice
I.- INTRODUCCION 3
11.- ACTIVIDAD PROFESIONAL 6
Ila.- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN EL LABORI\TORIO DE

�flCOLOGLI\ Y BIOTECNOLOGIA (L�·IB) / UNAL�.f 6
A.- Organo empresarial 6
B .- Relación profesional-empleador 11
C.- Trabajo profesional realizado 12
D.- Funciones desempeñadas 12
E.- Objetivos principales de las actividades 12
Ilb.- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA E�·1PRESA SINTESIS

QUThHCA SA 14
B.- Relación profesional-empleador 14
D...: Funciones desempeñadas 16
lle.- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA E�1PRESA SOUTHERN

PERU LTD.
B .- Relación profesional-empleador 17
D.- Funciones desempeñadas 19
F.- Alternativas de solución. Análisis técnico-económico 24
l.- LABOR4TORJO DE JfICOL067A Y BJOTEClVOLOGL4 (LHB)

/ Ul\/:4L1'1
G .- Desarrollo y sustentación 26
Apéndice F 82
2
H .- Conceptos complementarios. Soluciones planteadas 82

I .- Control de desarrollo de las etapas de trabajo 82
J .- Determinación de la performance 83
K .- Evaluación económica final 83
L.- Conclusiones y resultados finales 83
JI.- Sf.l\¡TESIS QUL'l,f/CA �"A
G .- Desarrollo y sustentación 85
H.- Conceptos complementarios. Soluciones planteadas 110
J .- Determinación de la performance 114
L .- Conclusiones y resultados finales 115
lll.- SOUTI-IERJ.V PERfJ L TD.
G .- Desan·ollo y sustentación 121

H .- Conceptos complementarios. Soluciones planteadas 156
J . .., Determinación de la performance 160
L.- Conclusiones y resultados finales 163
Referencias/ Bibliografia 164

Apéndice 173
3
INVESTIGACION Y APLICACION INDUSTRIAL DE PROCESOS DE

BIOTECNOLOGIA EN EL PAIS: INSTRUMENTACION Y CONTROL
DE OPERACIONES Y BIOPROCESOS UNITARIOS
I .- INTRODUCCION
Es conocido que a través de la biotecnolo�a se puede lograi· un desat1:ollo en
países en desarrollo. Ella puede ser aplicada a la agricultura, mediante el
tratamiento genético y el cultivo de tejidos, y también en la industria en general,
mediante la producción de diversas enzimas que realizan procesos diversos
(fermentación, acidificación, tratamiento runbiental de residuos
contaminantes, etc).
Está anticipado que, dado el rápido paso del desarrollo de la biotecnología en
las áreas agricola, ambiental así como del cuidado de la salud, lo cual resulta en
una mayo:r variedad de productos y una reducción de costos, la demanda por la
nueva biotecnología en países en desarrollo tendrá un aumento gradual en el
futuro cercano (y ya en el presente). Países en desarrollo que carecen de la
infi.-aestructura para la producción de compuestos y pru·a los procesos de nueva
biotecnología tendrán que depender de la importación de estos productos y en
las licencias de los procesos de los países industrializados, repitiendo el ciclo de
dependencia que ya ha ocutndo con otras tecnologías como la microelectrónica
(Yuthavong & Gibbons, 1994). Es, por lo tanto, importante que los países en
desarrollo formen un grupo capacitado para la biotecnología de punta, así
como la convencional, para así poder cumplir con la creciente demanda.
4
El mercado m11ndial de la biotecnología en

los 90s:
movimiento de ca. $ 66000 millones/ año
■ Otros
11% 7 111m Energía
O Agricultura
23%
14%
• Cuidado de 11111 Alimento

la salud
15%
■ Productos 20%
químicos
17%
Fi1!Ura 1
El mercado mundial de la biotecnología en

los 90s: sector cuidado de la salud
■ Compuestos
sanguíneos -,
■ Otros 1111 Antibióticos
, 6% 30%
8% \
)
\.\\ _,.,.,,,
El Hormonas
21%
11 Anticuerpos
■ lnterferones _/ -"-....__ monoclonales
8% ■ Vacunas 15%
12%
Fie:ura 2
5
Uno de los mayores retos que enfrenta el mundo en el siglo 21 es lograr una
seguridad en alimentos sin degradar la base de los recursos naturales. Las
corporaciones que están envueltas inte1nacionalmente en la agricultura están
emmeltas en un amplio rango de actividades que incluyen el campo de los
fertilizantes, la protección de cultivos, la industria de semillas, la salud animal y
la biotecnología. Las inversiones del sector privado en biotecnología son
multidisciplinatias en las áreas de medicina, farmacéutica, agricultura y
aplicaciones industriales tales como la fermentación. Entre los sectores público
y privado no hay mayor incentivo de colaboración mutua en investigación
agrícola que el enorme reto de la seguridad global de alimentos. Y en el
panorama general, el desarrollo de aplicaciones en biotecnología es de capital
intensivo, requiriendo inversiones sustanciales a largo plazo que a menudo
pueden ser movilizados sólo por el sector privado (James, 1997).
El campo de la investigación y desarrollo, y el campo de la producción
industtial (industtia de procesos), en los que he tenido op01tunidad de n-abajai·,
deben marchar en forma paralela. Específicamente en la biotecnología, es
necesario la armónica cooperación enn-e biólogos, ingenieros y químicos
(Harshbarger et al., 1995).
El siguiente breve tratado profesional se centra en la pat1e de los

mecanismos de control y automatización en procesos que incluyen el
empleo de la biotecnología.
El control de procesos es pa11e del desai-rollo de la inteligencia artificial, la

cual a su vez se identifica con los sistemas expertos (Stephanopoulos &
Stephanopoulos, 1986). Debido a que este informe analiza mi labor en 3
instituciones, se ha analizado sistemas de control con los que he laborado en los
3 casos, y se da pautas para la optimización de los sistemas.
Así, pues:
6
■ Se estudia los fenómenos de transferencia de masa y calor, y los mecanismos de

control y automatización necesarios para procesos de reacción en biotecnología,
aplicados en cultivo de sustrato sólido para la producción de enzimas. Labor
profesional en el LABOR.\.TORIO DE l\:IICOLOGIA Y
BIOTECNOLOGIA (Ll\.fB) /Universidad Nacional Agraria.
■ Asimismo, se estudia la aplicación industtial de la biotecnología para la reacción
en un lecho de catalizador inmovilizado, para la producción de compuestos
medicinales. Labor profesional en la empresa SINTESIS QUI1\-1ICA SA.
■ Finalmente, se estudia los mecanismos de control y automatización adicionales
para los procesos de obtención de cobre a partir de la lixiviación ácida de óxidos
y de la biolixiviación de sulfuros en botaderos. Labor profesional en la empresa
SOUTHERN PERU LTD.
11 .- ACTIVIDAD PROFESIONAL
Ha .- ACTIVID..\D PROFESIONAJ_, EN EL LABORA TORIO DE

J\HCOLOGIA Y BJOTECNOLOGJA: Ll\:fB / UNALJ\-1
A .- Organo empresarial
Nombre de la empresa:
LABORATORIO DE IvIICOLOGIA Y BIOTECNOLOGIA (LivIB)
/ Universidad Nacional Agraiia La iv1olina
7
Razón social:
Laboratorio de investigación dependiente de la Universidad Nacional
Agraria La I\tlolina / Facuitad de Ciencias. Institución no lucrativa.
Dirección:
Av. La Universidad s/n
Lima 12
Teléfono: O 1 4352035 - 863
O 1 3495647 - 863
Fax: 1 1 3405670
Sector al que pertenece:

Investigación y Desarrollo en el área de Biotecnología
Estructura orgánica:
■ Dirección
■ Subdirección
■ Asistencia de Investigación
La Figm·a 3 muestra el organigrama en el L:rvIB:
Líneas de Investigación y Desarrollo:
■ Procesos de cultivo en sustrato sólido (SSC)
■ Control y automatización de procesos en SSC
■ Producción de enzimas: Celulasa, xilanasa
■ Inmovilización de enzimas
· ■ Desarrollo de nuevas cepas de microorganismos
8
Layout
La Figura 4 muestra el esquema del Cuarto minipiloto de

Fe1mentación. La Figura 5 muestra la distti.bución (layout) del
laboratoti.o.
Para la Figura 4 tenemos la siguiente leyenda:
IA./D interface: convertidor analógico / digital
Hl humidificador
Cl compresor
GVl generador de vapor
TVl tanque de vapor
ET estación de trabajo (engineering workstation)
DIRECTOR
JEFE DE
·PROYECTO
�·
� � �
ASISTENTE DE ASISTENTE DE ASISTENTE DE ASISTENTE DE

INVESTIGACION: INVESTIGACION: INVESTIGACION: INVESTIGACION:
MJr.RORTOT ,O�T A MTr.RORTOT .O�T A CONTROL DE INGENIERIA
PROCF.SOS
�
ASISTENTE DE
INVESTIGACION:
BIOQUIMICA
Figura 3
ORGANIGRAMA EN EL LABORATORIO DE l\!IICOLOGIA Y BIOTECNOLOGIA
r - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -,
1- · - · - · - · - · - · - · - · - · - · - · - · ,
r·-·-·-·-·-·-·-·-·-·-·,1.
.. -- NC
i�lii�ii i!i
1 1
: : : =. i
OUTPUT; INPUT:
1 � � :� �iii
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ACTIVACION MEDICION
== J LIQUIDO SATURADO
(rru1la de enUllpia)
L ____________ J
-----------------�,
1
--- -... --
1 NO
,i!íl!I
!i ! l i! !i ll i! i!l l !i
VAPOR SATURADO
,1 [1 1�1 1 1 1
1
----ili l i:g;�:i :i :¡
Fimra
e 4
LABORATORIO DE MICOLOGIA Y BIOTECNOLOGIA
ESQUEMA DEL AREA DE FER1\1ENTACION
11
Figtua 5
PLA.NO DE DISTRIBUCION DE AREAS EN EL Ll\íIB
B.- Relación profesional-empleador

■ Condición: nombramiento
■ Documento probatorio: Certificado de nombramiento y de prestación
de servicios.
C .- Trabajo profesional desarrollado

Cargo desempeñado:
Asistente de Investigación
1 ; 12
Funciones asignadas:
Estudio de los fenómenos de transferencia involucrados en reacciones en
sustrato sólido. Diseño de un sistema de control de procesos para cultivo
en sustrato sólido.
Tiempo de prestación de servicios en la actividad descrita:

Dos años y dos meses.
D.- Funciones desempeñadas y la aplicación de técnicas profesionales

Técnicas de ingeniería necesarias:
Simulación de control de bioprocesos para la óptima operación de una
mini planta piloto, con aplicación de las técnicas de control de procesos y
de análisis matemático. Asimismo, es necesaria la aplicación de las
técnicas y la temia de la transferencia de masa y la transferencia de calor.
Personal administrado:
No hubo personal administrado por mí en esta labor.
Formato de registro de actividades:

El registro de actividades estuvo conformado por los informes periódicos
de las experiencias y avances al Director del Laboratorio.
E .- Objetivos, alcances y características principales de la labor

El LABORATORIO DE l\1ICOLOGL\. Y BIOTECNOLOGLI\.
(LMB) de la Universidad Nacional Agraria es un centro de Investigación
y Desarrollo, donde los actuales trabajos se centran en el
aprovechamiento de residuos vegetales para producción de enzimas, en
especial de celulasa y xilanasa mediante el cultivo en sustrato sólido
(CSS). Asimismo, se estudia actualmente la inmovilización de
microorganismos y de enzimas.
13
Aplicaciones socio-económicas.-
Se busca nuevas fuentes de materias pnmas para aumentar la
producción de biomasa microbiana y de otros productos ( como enzimas)
en la industtia de la microbiología. Desde este punto de vista,. la celulosa
es de especial interés, puesto que puede ser usada como materia prima
renovable y barata para la producción de alimento para animales. Su
utilidad en la producción de biomasa microbiana depende con todo de
vatios factores, tal como se verá más adelante.
Sabemos que un gran porcentaje del carbono orgánico de la biomasa
vegetal es acumulado como lignocelulosa, el principal componente
i
estructural de las paredes vegetales. Este vasto recurso provee
i
•
1 combustible y mate1iales como la madera, el papel y la fibra; también es
la lignocelulosa -es decir, la celulosa unida con la lignina- una fuente
potencial de alimento humano y para animales en general. Esta aplicación
puede ser hecha mediante bioconversión. La resistencia a la
bioconversión de la lignina presente con la celulosa es aun el principal
obstáculo al mayor aprovechamiento biotecnológico de este recurso.
En la naturaleza,. la lignocelulosa es digerida en el estómago de los
rumiantes y en el sistema digestivo de insectos. La madera se degrada en
los bosques, las plantas se descomponen sobre el suelo y en el agua. El
residuo de esta descomposición es reciclado nuevamente al suelo y
contribuve
., a su esttuctura v
., fertilidad. Gradualmente se va acumulando
conocimientos para encauzar estos procesos en aplicaciones
agroindusttiales.
Particulannente, el cultivo en sustt·ato sólido, s1 se llega a conocer y
dominar los mecarusmos inherentes a este proceso, es
socioeconónicamente muy adecua.do para países en desarrollo.
14
Ilb .- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA El\1PRESA SINTESIS

QUI1\.1ICA SA
A .- Organo empresarial
SINTESIS QUll\lIICA SA
Razón social:
Sociedad anónima
Dirección:
Fábrica
Calles 7 y 15 (Carr. Panamericana N. Km 31)
Lima 22
Tel.: O 1 885071
Fax: 1 1 885068
Oficinas administrativas
Calle Bolognesi 125 (piso 11)
Lima 18
Tel.: O 1 44744462
Fax: 1 1 4474420

Empresa química industrial. Sector de fatmoquímica.
En la Figura 4 se puede ver un organigrama de esta institución.
Layout
Podemos ver una disposición de planta en la Figura 16.
Líneas de producción
15
Compuestos B-lactámicos (penicilinas) ; productos medicinales

antibióticos detivados de la penicilina:
■ Amoxicilina
■ Ampicilina
■ Cefalexina
■ Cloranfenicol
■ Cloxacilina
■ Dicloxacilina
■ Oxacilina
Estos productos son vendidos a clientes: Laboratorios en el Perú y

en varios otros países.
B .- Relación profesional-empleador
■ Condición: contrato
■ Documentos probat01ios: certificado de nombramiento, laboral y
de prestación de servicios.

Cargo desempeñado:
Ingeniero de Supervisión y control de Producción
Control y supervisión del área de Productos Intermedios,
dependiente del Departamento de Producción. En esta área se
produce ácido 6-aminopenicilánico (6-APA).
Tiempo de prestación de senricios:
Desde Junio 1993 hasta Setiembre 1993: Nombrado
Desde Setiembre 1993 hasta Agosto 1995: Contratado
16
D.- Funciones desempeñadas y la aplicación de técnicas

p1·ofesionales
Como Ingeniero de Control y Supervisión, fue necesario aplicar los
conocimientos de Operaciones y Procesos Unitarios para considerar
las posibles mejoras en la optimización de los procesos.
Se adtninistró cuatro trabajadores: un técnico capataz y 3 obreros.
Formato de registro de acthidades:

El control y supervisión de procesos de producción en lotes quedaba
registrado en fonnatos de producción. Un modelo de este formato
se incluye en apéndice.
E.- Objetivos, alcances y características

SINTESIS QUTh fiCA SA es una empresa química industrial que
1
produce sustancias medicinales, de aplicación en la fatmacéutica.

Estas sustancias son 8-lactamatos, derivados penicilánicos de una
base común, que es la penicilina G ó V.
El át·ea de producción en la cual se centra este trabajo es el de
fabricación de 6-i\P A como producto final puro, sólido seco y en
polvo.
El 6-AP A es un ácido proteico que sirve de base para la
manufactura de diversos compuestos derivados de la penicilina.
Estos compuestos derivados (B-lactamatos) son también producidos
en SINTESIS QUil\1.IlCA SA en un proceso conocido como
semisíntesis. Este nombre se da debido a que provienen en este caso
de la base inte1media 6-APA-, no siendo producidas totalmente por
biosíntesis, al contrario que la penicilina G o V propiamente dicha.
17
La estructura básica de las penicilinas es el 6-APA, el que consiste

en un anillo pentagonal de tiazolidina con un anillo cuadrangular B
lactámico condensado.
La penicilina biosintética G ó V (y muy poco tipo 0) son
producidas por fonnentación en forma comercial, a nivel industrial.
Las penicilinas semisintéticas son producidas mediante una ruptura
química ó enzimática de la penicilina G (ó V) para formar 6-APA, el
cual es químicamente 'reciclado' para producir otro derivado
penicilánico.
Debido a sus mejores caracteristicas (estabilidad en medio ácido,
resistencia a las B-lactamasas, mayor efectividad antimicrobiana). las
penicilinas semisintéticas han llegado a ser usadas ampliamente en
terapia.
lle .- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA ElVCPRESA SOUTHERN

PERULTD.
A . - Organo empresarial
T
SOU HERN PERU LTD.
Razón social:
Sociedad de responsabilidad lunitada
Dirección:
Oficina central:
Av. Caminos del Inca 181
Lima 22
Planta de lixiviación LLX / SX ;E \\l: Toquepala
18

Empresa química minero metalúrgica industrial. Sector de minetia.
Podemos verla en el organígrama de la Figura 6.
Layout
Lo podemos ver en la Figura 7.
Líneas de producción
(a) Cobre en placas: - Blister (99,3 ° & de pureza en cobre)
1
- De refineria (99,97<% de pureza en cobre)

- De lixiviación... 99,999 % de pureza en
cobre)
(b) rvfolibdeníta (sulfuro de molibdeno)
Estos productos son vendidos a clientes en el Petú y también son

exportados.
B .- Relación profesional-empleador
■ Condición: funcionario de la empresa.
■ Documentos probatorios: certificado de nombramiento, laboral y
de prestación de servi.cios.
19
Presidente de
Southern Perú
Ltd.
' (
Vicepresidente / CEO
Operaciones de Southern
Perú Ltd.
Gerente
General
(a otras dhisiones)
---------'·····································►
Superintendencia
deLL"X/SX/EW
' (
Jefatura de
Operaciones
LIX/SX/E\tV
' 't '' '� 'f
Coordinación de Coordinación de Coordinación de Coordinación

Operaciones Metalurgia l\,fantenimiento de Seguridad,
LIX/SX/E\V LIX/SX/EW LIX/SX/EW Medio
A..,..., hio.,to ,,
Figura 6
Organigrama en Southern Perú Ltd.
Figura 7
SOVTHER1'\ PERU: PLANTA DE LIX / SX / E\\-'
DIAGRAlVIA DE PROCESO
EXTRACCION POR SOLVENTES
PLS (RICO)/ RAFF (POBRE) SOLUCION ORGANICA RICA

SOLUCION 0RGANICA
::::::;::::::::'.'.�;¡¡¡;:::::•• EL_ECIR0LITO
SOLUCION ORGANICA POBRE FILTRI\.CION / LAVADO
� • �íl�¡íl líl�i�
,, 1ro..:,·.-,¡,;,.·•·•�·•..,.
"', , .,,, �fll�1i��i�I

EW
E2 El Sl
�
PLS (RICO )
BOTADEROS
RAFFPOND
(sulfuros de cobrt>)
PLACASDE
BEH III BBHHIBIBIIII II HBHB EIIE UBIHB BHBHB BHB!II
COBRE
22

Cargo desempeñado:
Ingeniero de Supen.isión de Producción.
Planta de lixiviación: Control y supervisión de Operaciones en la
planta.
Tiempo de prestación de servicios:

Desde el 01.06.97
D.- Funciones desempeñadas y la aplicación de técnicas

profesionales
Como Ingeniero de Control y Supervisión, fue necesatio aplicar los
conocimientos de Operaciones y Procesos Unitarios pat·a considerar
las posibles mejoras en la optimización de los procesos.
En la planta de lixiviación se ha establecido un sistema basado en
coordinación de guai·dia en el A.rea de lVIediante un sistema de
trabajo en equipo polifuncional. Este equipo en cada tumo de
guardia en el A.rea de Operaciones consta de 1 Coordinador y 4
Técnicos Polifuncionales (TPF). Además, durante el día, de 8 am a
5 pm, se administrn la labor adicional de 4 TPFs encai·gados de las
Operaciones de cosecha final de cobre.
El sistema polifuncional y de trabajo rotativo en equipo nos da un
particular esquema:
23
TECNICO
POLIFUNCIONAL (TPF)
Figura 8
Esquema típico de comunicación de equipo polifuncional en el sector de lixiviación
Formato de registro de actividades:

El control y supervisión de producción queda registrado en formatos
de producción, los que en g�neral son impresos automáticamente
24
con data recopilada de la base de datos del sistema integrado Allen

Bradley.
E.- Objetivos, alcances y características

La automatización progresiva adicional de la planta de LLX / SX :'
E\V, empleando sistemas inteligentes -hay un alto grado de
automatización; mas con control clásico en generales uno de los
objetivos de la compañía Southem Perú Ltd. La expansión en las
divisiones desde la mina hasta la fundición y la lixiviación, pasando
por la concentración de minerales, está en pleno proceso.
F.- Alternativas de solución. Análisis técnico-económico

Estas se expondrán al final, luego de un análisis de los 3 campos
de trabajo. Se resumen en la evaluación independiente de cada
sistema, así como insertas en las conclusiones finales.
G . - Desarrollo y sustentación
I.-L1Jf,B
Generalidades / descripción del sistema / trabajo técnico y de

ingeniería realizado . -
Como se mencionó antes, el objetivo en el Ll\.18 es obtener
productos económicamente rentables por procesos de biotecnología,
por lo que la ingenieria bioquímica para control de procesos y
automatización es aplicada para establecer los mejores mecanismos
de control en el complejo procesos del SSC, y así optimizarlo en
calidad y costos.
25
Con todo, la optimización en la calidad estará dada principalmente

por el establecimiento de una línea de flujo adecuada en el
downstream. Ello es algo que no está incluido aquí, mas se
1nenciona en general las sugerencias para un downstream processing
eficiente para este sistema de SSF.
Definición: fermentación = crecimiento de microorganismos
mediante transferencia de electrones a moléculas orgánicas
aceptoras, lo que es lo usual en condiciones anaeróbicas.
En biotecnología, el término fermentación también se ha ampliado
para describir procesos de oxidación. La fermentación permite sólo
una baja ganancia de energía, requiriendo por lo tanto un alto flujo
de materia.
El residuo agrícola, con hidrato de carbono casi en su totalidad, es
reducido y ítja nitrógeno a la molécula básica, resultando un
aminoácido fácilmene digerible por animales de ganade1ia.
La degradación de la celulosa mediante el hongo Trichoderma
reesei se lleva a cabo a través de un sistema de inducción, que
comprende varias celulasas. En este mecanismo, la celobiohidrolasa
juega un rol principal. Actualmente, se está tratando de crear
sistemas biocatalíticos que rompan (hidrolicen) la estructura
cristalina de la biomasa celulósica. El complejo celulasa ideal debe
ser altamente activo sobre el srn,trato. La Figura ilustra la sinergia del
complejo de enztmas. Actualmente, modelos moleculares
electrónicos de las enzimas nos ayudan a comprender mejor su
mecanismo de reacción.
A continuación se trata en detalle el mecanismo de modelainiento,
simulación y control en el sistema de SSF en el L1vlB.
26
rb-gJucosidasa
CBHI
reductora específica
rExo
no reductora
rEl
endoglucanasa
Figura 9
,..\cción sinergística de celulasas sobre la celulosa
MODELAl\flENTO lVLL\.TEl\·1ATICO EN REACTOR SSF.

Generalidades .-
Establecemos a continuación los parámetros involucrados en el
sistema:
27
La eficiencia, productividad y economía de un CSS son afectadas

por varios factores (Ralph, 1976; Hesseltine, 1972, 1977; Aidoo et
al., 1982; Lonsane et al., 1982, 1985). El factor individual más
importante es el contenido de humedad del medio, lo que hace al
CSS fundamentalmente diferente del cultivo sumergido en medio
liquido. La cantidad restringida de agua disponible produce lo
siguiente:
a) La actividad del agua en sustratos sólidos puede ser
significativamente menor a 0,99, especialmente en cultivos de
sustJ:ato sólido, donde casi no hay agua libre. Ello tiende a
favorecer el crecimiento de hongos filamentosos, los que en
general se desarrollan bien en un rango de actividad de agua de
0,93 a 0,98 (Corry, 1973). La mayoría de las bacterias y
levaduras crece en forma óptima con una actividad de agua
mayor a O, 99.
b) La tl-ansferencia de calor tiende a restringirse (I\tloo-Young et
al., 1983; Rathbun & Shuler, 1983), lo que puede producir
problemas de sobrecalentamiento (Laukevics et al., 1984). El
enfriamiento por evaporación (arrastre de vapor, y
consiguientemente de calor latente) es probablemente el método
de enfriamiento más efectivo para CSS (Laukevi.cs et al., 1984),
a pesar de que ello reduce la disponibilidad de agua (Trevelyan,
1974).
Actividad del agua.-

El parámetro actividad del agua (aw) se define como la razón
presión de vapor de agua sobre la superficie del sustrato a la presión
de vapor de agua pura a la misma temperatura (Scott, 1957):
28
aw = Pvs = lIR
Pvº
La relación entre aw y el contenido de humedad en el sistema no

es lineal: más bien, cambios notables en el contenido de humedad
producen cambios pequeños en la actividad del agua.
En la mayo1ia de los sustratos, el agua libre aparece antes de llegar
a un nivel de contenido de humedad del 80 °/ó (1v1oo-Young et al.,
1983). El rango usual de variación es de 30 <% a 85 <% (Laukevics et
al., 1984; Otiol et al., 1988ª ; Reid, 1989).
El contenido óptimo de humedad para el cultivo de
microorganismos en CSS es altamente dependiente de las
propiedades de enlace con agua que tenga el sustrato. Así, pues, el
nivel de humedad es un parámetro poco confiable para predecir el
crecimiento de un microorganismo. Actualmente se acepta que los
requerimientos de agua de los microorganismos deben definirse en
témtinos de la actividad del agua (aw) del ambiente, y no tanto en
términos del contenido de agua del sustrato sólido.
La disminución del valor de aw tiene un marcado efecto sobre el
crecinúento microbiano (Troller, 1980). En f01ma típica, una
disminución en aw prolonga el periodo de la fase lag (latente) de un
organismo, disminuye la velocidad de crecinúento y resulta en menor
cantidad de biomasa producida.
Generación y remoción de calor metabólico.-

La actividad metabólica de los microorganismos genera una gran
cantidad de calor: 13000 - 14000 KJíKg de sustrato seco usado
(Ryoo, 1990). Debido a la gran conductividad calotifica del sustrato
semisólido, la acumulación de calor es un serio problema en la SSF.
La elevación de temperatura afecta el crecimiento de los
29
microorganismos, la actividad enzimática y la formación de

producto.
La tasa total de transferencia de calor puede ser limitada por las tasas
de transferencia intra e interparticular, por el flujo de trandferencia
de la superficie de la partícula a la fase gaseosa, ó por la velocidad
de remoción del calor en la fase gaseosa. Las características ténnicas
del material orgánico y el bajo contenido de humedad en el CSS
crean condiciones especialmente dificiles para la transferencia de
calor (Saucedo-Castañeda et al., 1990).
La tasa de transferencia de calor de la fase sólida a la fase gaseosa
puede ser considerablemente incrementada mediante el flujo forzado
(convección forzada) del gas (aire) a través del medio sólido.
La transferencia de calor es probablemente el factor más crucial en
procesos de CSS a escala industrial (Laukevics et al., 1984). Los
1necanismos convencionales de enfriainiento por convección ó
conducción son inadecuados para disipar el calor metabólico debido
a la baja conductividad ténnica de la mayoría de sustratos sólidos, lo
que provoca elevados gradientes de temperatura a lo largo del
volumen de control. Sólo el enfiiainiento mediante evaporación
puede producir una aceptable disminución de temperatura. Aunque
la función primaiia de la aereación durante un cultivo en sustrato
sólido es proveer oxígeno pai·a el crecimiento de los
1nicroorganismos y expulsar el dióxido de cai·bono producido,
también sirve para la transferencia de calor y humedad entre las
fases sólida y gaseosa.
La tasa de evaporación, y por tanto la tasa de enfriamiento, puede
ser controlada con una adecuada regulación del flujo de aire seco ó
de la humedad del aire ingresante al reactor. Así, un aumento del
flujo de aire puede usarse para reducir la temperatura en el sustrato.
Cuando la temperatura es de1nasiado baja, una disminución del flujo
30
de aire hará aumentar la temperatura debido a la respiración

microbiana. En este último caso, se debe tener cuidado en evitar que
el oxígeno se convierta en limitante en la reacción (Carmel & :tvloo
Young, 1980b). El aire seco puede remover una cantidad mayor de
calor del medio sólido que el aire saturado de humedad, pues, el aire
saturado carga ya una energía extra de 58,2 J/1 a 25 ºC (Reid, 1989).
Con todo, el aire seco también puede dar problemas por secado
excesivo del sustrato en el medio.
En general, el mantener una temperatura y una humedad
constantes en cultivos de sustrato sólido es generalmente dificil
(Tengerdy, 1985). El tipo de reactor puede tener gran influencia en
la calidad del control de temperatura. Se ha descrito (Barstow et al.,
1988) la operación de un sistema integrado de control de
temperatura y humedad, donde un programa con valores fijados
(seteados) de control para temperatura, humedad y humedad relativa
(del aire) 1nantenían una temperatura y un contenido de humedad
constantes durante el cultivo de Rhizopus oligospon.ts en maíz
granulado en un bioreactor de tambor rotatorio de 15 l. En este
sistema, fluye aire seco hacia el sustrato forzando un enfriamiento
evaporativo, balanceándose a su vez el sistema con agua fria rociada
sobre el sustrato para mantener un contenido constante de humedad.
Estudios realizados en fermentación de pajilla de trigo mediante
Chaetomium cellulo{vticum (Dale et al., 1988) demostraron que el
cambio en la actividad del agua durante esta fermentación es casi
nuló. Con todo, sabemos que el nivel de agua en este proceso es
crucial. Por lo tanto, se concluye que no es el estado termodinánúco
del agua lo que importa aquí (equilibrio humedad en sustrato
humedad del aire en el reactor), sino más bien la humedad en el
sustrato propiamente dicha. El concepto es aquí forzar evaporación
de agua para remover el calor metabólico, reemplazando al núsmo
31
tiempo el agua evaporada segun se necesite. De este modo,

podremos controlar también la temperatura en el sistema.
En el caso del microrganismo Trichoderma, se sugiere una

temperatura de más de 30 ºC en un medio de pajilla (bagacillo) pai-a
su desan-ollo y la producción de celulasa (Deschamps et al., 198 5).
Control aséptico:
El control frente a microorganismos contaminantes se puede
realizar a un pH ácido, entre 3 y 5. Para el crecimiento de
Trichoderma reesei, un pH adecuado es de 3, 5 - 4. Ello a)'uda a
minimizar la contaminación por bacterias (\Vood, 1982; Gibbons et
al., 1986; Yang, 1988).
Observando el sü;tema del reactor piloto, notamos que la
diferencia de presión de entrada-salida en el bioreactor también
a)'uda a que microorganismos extraños fuera del volmen de control
no penetren en el sistema. El aire pasa por un filtro antes de entrar al
compresor (ver Figura 4). Además, un diseño helicoidal del agitador
en al bioreactor resulta ser el más adecuado para la transferencia de
masa y calor en un cultivo en sustrato sólido. Así, pues, el bioreactor
diseñado en el LNIB es del tipo tanque agitado, con una rosca
helicoidal, sitnilar a las empleadas en el modelo INRA-Dijon
(Durand & Chereau, 1988), aunque el eje de nuestJ.·o reactor es fijo,
frente al modelo mencionado, el cual tiene ejes móviles. cuestión
está diseñado La transferencia de masa depende tanto de las
características propias del sólido como de la humedad presente, del
tamaño de partícula (malla) y del flujo de aire.
32
VARIABLES Y NOI\:fENCLATURA:
HA Humedad absoluta del aire (g agua/g aire seco)

F Flujo total (l/rnin)
i
FA Flujo de aire seco (l rnin)
Fw Flujo de agua._L) (limin)
Fv Flujo de aguaM (l/rnin)
Fco2 Flujo de C02 (l/min)
T Temperatura en el volumen de control / reactor (ºC)
Temperatura exterior (del ambiente/alrededores) (ºC)
h Entalpía (cal/g)
IlRo Coeficiente de transferencia calori:fica (cal/m2 -rnin-ºC)
Calor específico (calig-ºC)
Masa de sustrato (seco)
l\lIB Biomasa (1nasa de microorganismos) (g)
!Vlp i\,fasa de producto formado (g)
l\llw Ivlasa de agua(L) (g)
Ivlv 1\1asa de agua(v') (g)
1\1T 1\1s + MB + Mp + l\llw
Flujo másico (g/rnin)
p Densidad (gil)
Q!vfETAB Flujo de calor 1netabólico (cal/g-rnin)

A Area de superficie externa de reactor (m2 )
A, Calor latente de vaporización/condensación (cal/g)
X Concentración de bioniasa (g microorg./g materia seca)
t Tiempo (min)
33
Subíndices:
AMB de los alrededores

s masa seca (sustrato seco)
A arre
agua{!.,)
V
1 linea 1 (entrada aire / agua0-1)

2 linea 2 (entrada agua(L.) con aire: goteo o rocío)
3 linea 3 (salida)
SP set point
1 Entrada de aire
2 Entrada de agua (goteo, aspersión)
3 Salida de aire /vapor/ C02 del reactor
4 Salida de aire seco de compresor
5 Entrada de aire seco a humidíficador
6 Entrada de aire seco a reactor
7 Entrada de agua a generador de vapor
8 Salida de vapor regulado de generador
Se desc1i.be las ecuaciones de balance de masa y energía para el

proceso.
Balance de masa/ energía.-

Condiciones de asunción previa (ver Figura ):
34
■ La linea 2, para goteo y rociado de agua saturada, está normalmente

cerrada, y sólo se abre momentáneainente para regular alguna variable
del proceso en el sistema de control. Por ello, en principio sólo hay
una entrada y una salida.
■ En el balance de energía se desprecia la producida por el trabajo de
corte y agitación realizado por el agitador.
■ La agitación es casi perfecta.
■ La generación de agua por 1netabolismo es despreciable, así como su
coeficiente de mantenimiento.
■ El proceso es semicontinuo (hay una masa sólida en lote, pero un
continuo flujo de aire / vapor / C02).
■ La tasa de consumo de 02 por los microorganismos para efectos de
balance de masa es despreciable.
■ La vaiiación de masa seca (l'vf) en el tiempo es despreciable.
En una pritnera instancia, se puede asumir una razón de consumo

de 02 aproximadamente igual a la de generación de C02 ( Sugama &
0kazaki, 1979) Y para efectos de un balance de masa para el análisis
de la relación entre las vaiiables manipulables en control (funciones
de transferencia), se puede considerar despreciable.
Establecemos entonces las ecuaciones con los pai·ámetros necesarios

a considerar en una reacción bioquímica en.estado sólido:
Sea:
ro2 = d0'.?. velocidad consumo de 02 � O
dt
tasa de generación de agua por metabolismo � O

35
(esta generación se produce por reacción homogénea)
rc02 = dmco2 tasa de generación

dt
d(Mw + Ivly) velocidad de acumulación de agua (gímin)

dt
Además, sabemos que
tnv3 = p,uF,\3l-IA3
F,u = O
1) Balance de masa.-
ENTR<\.DA + GENERACION/CONSUMO SALIDA + ACUMULACION
t t t t
Existe una generación de agua y de dióxido de carbono, así

como un consumo ('generación negativa') de oxígeno. Ello se
debe al metabolistno de los microorganismos.
(a) Balance de masa total (Bl\1n:
P1F1 + P2F2 + rw + rc02 + r02 = P3F3 + dlvl:r

dt
36
(b) Balance de masa por componentes (B�fC):
- Flujo de aire
pA..F',u + dl'v16
dt
- Flujo de agua (líquido+ vapor):
Pv�v3 + P,,13F,v3 + d(J\.f�y + J\.fy)

dt
donde rw Fw3 o (no hay salida de agua líquida)
l'vlw » l'viv
Luego: Pv1Fv1 + Pw2Fw2 •� Pv'3Fv3 + d1\:h.:

dt
PA1FA1 HA1 + Pw2Fw2 •� P,uFA3 HA.3 + dl\!1�

dt
Pi F1 ~
~· PA1 FA1 (PAl F Al >> Pv1 Fv1)
P3 F3
~ PA3 F. .u (P,u FA3 » Pv"3 Fv'3)
PAt F Al ~~· PA3 F,u
P,u ·~
~ P,u = PA
Entonces,
FA1 :::: FA3 = FA
rco2 = Fco2 3
37
2) Balance de energía (BE).-

Es análogo al balance de masa:
Ivletabolismo:
EIN + EGEN = EoUT + EoANADA + ACUivL + LlQi,
donde
EIN = energía del aire y del vapor de la linea 1, y del agua
liquida de la linea 2
EoEN - energía del metabolismo
Eour energía del aire y del vapor de la linea 3
EGANADA = energía del VC al ambiente o viceversa (es función
del coeficiente de transferencia de calor)
LlQL = calor latente
Entonces:
- Pv1Fv1) + d_[(lvls + MB + lvlp + :t\1w + l\!lv) CpT]

dt
Se asume afre saturado, en equilibrio.

38
Para analizar la dinámica del proceso, tomamos las funciones de

transferencia según las ecuaciones anteriores, que describen al
modelo.
Del balance de agua:
d1v1w
dt
Y en un estado estacionario:
d1'.-·hvs
dt
Funciones de transferencia.-
Ahora, bien, lo que sigue es la adaptación de estas ecuaciones de

flujo de materia y flujo de energía a un sistema de funciones de
t1·ansferencia.
Una función de transferencia nos permite relacionar parátnetros de
entrada a un sistema con parámetros de salida de un sistema. Esto
significa que, al conocer el valor de una variable particular en el
proceso (mediante un mecanismo sensor), se puede conocer qué -y
cuánto- otra variable del proceso se debería alterar (voluntariamente)
para que el proceso conserve su estado estacionario. Esto último es
el objetivo en nuestro estudio.
·.-···'t.·-•• ···
39
Para obtener las relaciones enb:e variables manipuladas y

variables medidas, se emplea el procedimiento matemático de
transformadas de Laplace. Esto nos ayuda a visualizar las
variaciones del sistema con respecto a un estado estacionario teórico.
En el desarrollo de estas relaciones, a continuación, no se detalla

formas, leyes ó teoremas matemáticos ( detalles específicos pueden
obtenerse de tratados de matemática superior):
Tomamos un proceso continuo, con las lineas (1), (2) y (3)
normalmente abiertas.
Sea X = variable de proceso

Xs = variable de proceso en estado estacionario (valor ideal)
Sea: X=X-Xs
Entonces:
d.Mw = PA (ILL\.1 - HA3)FA + Pw FW2

dt
Tomando transformadas de Laplace
sMw(s) - Mw(o) = PA (HA1 - HA3) FA(s) + Pw FW2(S)
Asumiendo que para t = O, I\!lw = O, entonces
sMw(s) = PA (ILt\1 - HA3) FA(S) + Pw FW2(s)

40
luego :
J\·hv(S) = Q,1 (HA1 - HA3) FA(S) + Qw F,v2(S) .............. (1)

s s
Es decir,
donde: ½1 = QA (HA.1 - H.i\.3}

s
(Ges función de transferencia)
Del balance de energía :
C pT 4_(1V15 + iv1B + J\tlp + :rvlw) + (1'v15 + :rvlB + I\ 1p + :tv1w) C p dT =

1
dt dt
PwFw2hw2 + Q:r,,.1ETAB + li4ATAMB - lr4AT
l'vls + :rvrB + :tvlp + JVlw » I\.fv
Por lo tanto:
JVls + I\ 1B + :tvlp + :tvlw
1 - :tvh (JVlv es relativamente pequeño)
41
Y donde:
masa seca
Cp del sistema es aproxitnadamente constante. No hay mucha

variación de temperatura en el volumen de control del reactor, que
es lo que se puede asuinir en un sistema con control automático.
dl'vl!l = O ( asumido -ver asunciones más arriba)

dt
Q�1ETAB yQ1X dl'vf!l

dt
Ahora bien, nuestro objetivo es el control óptimo durante la fase

de producción de enzitna ( celulasa), la cual es mayor durante la fase
de crecimiento estacionatia del ciclo de vi.da del microorganismo ( T.
reesei.). En esta fase,
dl'\11!! .� O
dt
luego
Qr,.,fETAB ::::::: O ( es pequeño comparado con los restantes flujos de

energía)
Entonces
C pT_g(l'v1nRY + l'v1w) + (l'v1nRY + l'VIv..:)Cp dT = a1FA + a2Fw2 + a3 + a4 T

dt dt
42
donde C p , a1 y a2 son CONSTANTES:
a1 PA[hA1 + HA1hv1 - hA3 - HA3hv3 + 'A (HA1 - HA3)]

a2 Pw h\\12
33 llnoATAMB
� = - lhloA
Del análisis del sistema, hemos concluido que los parámetros

importantes a controlar del proceso son:
- Humedad en el reactor (masa de agua en el reactor): l\1w

- Temperatura en el reactor: T
Por lo tanto, un objetivo de control es mantener un porcentaje de

humedad constante en la 'fase' semisólida: estudios (Kim et al.,
1985; Gutiérrez-Correa, 1995) indican que el contenido adecuado
de humedad es ah-ededor de 60 °/ó en peso en base seca.
ivl� 0,6
ivloRY
Entonces lVIoRY - 1,667 l\1w
Recordamos también que:
dl\-Iw - PA(HA1 - HA3) FA + Pw Fw2

dt
43
Valores numéricos de variables de proceso .-

(en apéndice se adjunta tablas termodinámicas y psicrométricas)
I\-1-w ~~ constante (en un sistema de control afinado) = 6000 g

iVInRY peso seco (pajilla) en bioreactor = 10000 g
HA1 O,030 g agua/g aire seco
HA3 0,055 g aguaíg aire seco
hA1 75,12 cal!g
h,u = 72,72 cal/g
hv1 = 140, 85 cal/g
hv3 136,35 cal/g
hw2 40 cal/g
592 ca1/m2-min-ºC
ep 0,63 cal/g-ºC ~-· constante
TAlVIB 25 ºC = 298 ºK
A 0,652 1n2
/\, 540 cal!g
FA.sP 11/min (a T.,\J,,m)
Fw2sP 0,2 ml/min (") = 0,00021/min (con agitación de 1 rp1n)
1,15 gíl (aprox. constante)
Pw = 1000 gil (constante)
TSP 37 ºC = 31O ºK
a1 -16,77 cal/1
a2 40000 cal/1
a3 9656 ca1/min
a4 -386 cal/min-ºC
Yco2lx. = 1 g lg
YQíC02 2500 callg (Cooney et al., 1984)
44
YQrx 2500 calig

(*) Estimado como flujo de set point adecuado para un equilibrio
Asimismo : 1\.1T y � varían en el tiempo
La ecuación de energía no es lineal, mas se puede hacer una

linealización matemática mediante una aproximación con expansión
en series de Taylor, para un rango pequeño aceptable de control.
Del estado estacionario, y con las sustituciones correspondientes,
tenemos en forma linealizada:
dT = (-0,00006 Jhio - o, 00003) T - o, 00015 FA - 48, 73 F\V2

dt
donde:
-0,00015
s + (0,00006 � + 0,00003)
-48 73
s + (0,00006 � + 0,00003)
Finalmente, tenemos las 2 relaciones de entrada , salida que se

emplean para el sistema de control:
45
Estas 2 ecuac10nes de pruner orden representan los modelos

postulados para este proceso: 1 modelo para la variabk controlada
HU1\-1EDAD (masa de agua) y otro para la variable controlada
TEl\lIPERATlTRL\.. Este es un sistema I\:111\ 10 en el que pesar de su
1
relativa sencillez, hay valores fijados que deberán verificarse ó

1nodificarse posteriormente.
Así, pues, aquí hay :
- Dos variables controladas : 1\-Iw,si, T<s)
- Dos variables manipuladas : FA(S), F,v2,s>
Las variables GP1. GP2• Gp3 y Gp4 son las 4 funciones de

transferencia que relacionan las 2 salidas con las 2 entradas. Un
cainbio en FA o en Fw2 afecta a ambas variables controladas. Las
2 relaciones anteriores son, pues, interdependientes.
Nota: Recordemos que G representa una función en el dominio de

Laplace: real - imaginario.
46
Haciendo un diagrama de bloques adecuado para las variables

tnanipuladas, tenemos la Figura 10.
El valor de l\:h disminuye por consumo microbiano, y � también

disminuye, debido a corrosión / incrustación, por lo que podría
incluirse un factor de corrección que opere cada cierto tiempo (e.g.
cada mes, es decir, de modo discreto) para compensar al sistema de
control a aplicar.
Al inicio, y durante un tiempo t razonable (inicio de proceso y en
lazo de control)
Ivh 16000 g = 16 Kg
FA(S) Iv1wcs)
Fw2<_s)
Figura 10
PROCESO CON 2 SALIDAS CONTROLADAS Y 2 VARIABLES
l\tV\NIPl.JLADAS
47
1\-h disminuye por consumo microbiano, y � también disminuye,

debido a corrosión / incrustación.
Al inicio, y durante un tiempo t razonable (inicio de proceso y en

lazo de control)
16000 g 16Kg
AJ. inicio:
lhJo = 35544,35 cal
h-m2 -ºC
592
Variación:
■ La constante � disminuiría 2 �-i> cada mes por corrosión e

incrustación. Esta variación la introduce el propio operador cada
periodo. Pero para un lote (batch) de reacción, en el cual la duración
es de 2-4 días, este valor se asume constante durante el tiempo de
reacción.
■ Asinlismo, el valor de l\.h vaiia :
Se ha asumido una función sitnilai· a las curvas de variación

obtenidas en otras pruebas de SSF (con Rhyzopus oligosporus).
48
(�l Asumido aproximado en este tipo de sustratos.
Antes de continuar con el análisis de los lazos de control,

establezcamos las funciones de transferencia de los mecanismos de
medición y de los elementos de control final.
l\·1ECANIS1\'IO DE l\·1EDICION (SENSOR) .

Los 2 insttumentos de medición empleados aquí son
Higrómetro.
Data técnica (Concept Control & Engineering)
tr-u = 0,25 min (aprox.)

KM1 = 1
luego: Gr-u =
--�l
0,25 s + 1
Termocupla.-
Data técnica (Cole-Panner 1990 Catalog)
Tennocupla tipo K
Posición: dentro de reactor
t:r.12 = 6 s = o, 1 min
En general, la función de transferencia del proceso para una

termocupla (modelo capacidad unitaria-resistencia) es de primer
orden (Kinzie, 1973 ).
49
Kl\<12 = 1
Luego, tenemos la función de transferencia para el sensor

termocupla flexible en reactor:
Gr,..12 Kr,..12_
__ __1
tl\12S + 1 0,ls + 1
ELE1\:1ENTO DE CONTROL FINAL .-

Están conformados por las válvulas solenoides Vl y V2íV3, una
resistencia y un motor de agitadm· de 1·eactor. Los elementos de
interés _para cálculo en los lazos de control son las válvulas
solenoides V 1 y V2AíV2B, y un relay para la activación del motor.
Para estas váh,ulas y para el relay tenemos un mecanismo ON/OFF:
Vl: Gy ¡ =
K Fl =
1
°'"...,
T') .
. �2 =
KF2 =
1
Formación de lazos de control .-
Formando 2 lazos de control acoplando :
FA con IV1w
Fvn con T
50
�'
La Figura 11 muestra los lazos cerrados de control para d
proceso:
']\,1wsP(S)
----- FA(S
Gc1
Fw2(S)
TsP(S) Tes)
Figura 11
PROCESO CON2 SALIDAS CONTROLADAS Y 2 VARIABLES
NV\NIPL�.t\DAS ENLAZO CERRADO
· Recordando las funciones del proceso:
1\1w<S) = G:P1FA(S) + G:P2FW2(S)

51
Sean Ge 1csi y Gc 2<si las funciones de transferencia de los 2

controladores, para las 2 funciones de transferencia en lazo cenado.
Luego, los valores de las variables manipuladas en lazos de control
son :
Fw2cs¡ = Gc2 ( TSP(Sl - GJ\u T(si )
Como nuestro objetivo es controlar tanto la humedad como la

temperatura -interactuantes-, entonces el esquema del sistema consta
de 2 lazos, ambos cerrados.
Entonces, para ambos lazos cerrados:
Luego, tenemos las siguientes relaciones entrada-salida para lazo

cerrado:
Donde P representa otras funciones de transferencia:
P1(S) Gc1GP1 + Gc1Gc2º1..-12filp1GP4 - GP2Gp3)

52
p4(S) GczG1 + Gc1Ge2º1.n ill1G1 - GzG�)

Q
Análisis sin interacción entre los lazos.-
Sea GP2 = GP3 = O (sin intei·acción)
GP2 = 1000 o
s
Gp3 = -0.00015 o ⇒
s +(0,00006 futo
+ 0,00003)
ivlw = _Qp1Gc1_ IvlwsP T ---ª-P4GC2 TSP

Gp 1Gc1 + 1 Gp4Gc2 + 1
53
Consideraciones matemáticas:
Análisis de estabilidad.-
Recordemos que se analiza la estabilidad de un sistema

independientemente de si éste está controlado o no. El criterio
general de estabilidad (mediante la localización de los polos -raíces ó
eigenvalores- de la función de transferencia) es:
Si hay al menos un polo (raíz) con pat1e real positiva, entonces el

sistema es INESTABLE.
Por tanto, los valores de p y s deben ser negativos.

No se ha hecho una ape11ura del lazo de control para la curva de
reacción de proceso (PRC) de Cohen-Coon para la respuesta
dinámica sin control. Este análisis de sintonización se podría hacer
postetionnente, una vez corriendo el proceso y con un control
aceptable, pai·a mejorar aun más la respuesta.
Obtención de valores de parámetros adecuados para control

proporcional-integral-derivativo (PID). -
Aplicando control proporcional (P) Gc1

Gc2
Esto es, ajustando un control P dentro del lazo de control

adaptativo.
54
Kc¡ = constante = GANANCIA DEL CONTROLADOR

Nota : En este análisis se dará valores de Kc¡ , t¡, con unidades
de minutos.
Sintonización de cada lazo por separado.

Lazos no interactuantes: control P
De los denominadores de las ecuaciones dadas más arriba para l\.·1w y
T no interactuantes, se establece las siguientes ecuaciones
características
Gc1Gi>1 + 1 =O
Ge2Gp4+ 1=O
Cálculo de ganancia más adecuada :

De estas ecuaciones:
Lazo 1 cerrado/ lazo 2 abierto:
Kc1 (-0,029 'i + 1 =O => s = 0,029 Kc1

l'- s /1
NOTA:
En el desarrollo de estas ecuaciones y las siguientes, se establecerá
datos numéricos, sobre todo para la etapa inicial, de modo que
podamos tener gráficas de curvas de respuesta del sistema de control
(controladores) frente a cambios unitarios, tanto en la humedad
como en la temperatura del volumen de control.
Luego, vemos que s > O, siempre.

55
Por lo tanto, cuando el lazo 2 está abierto, el lazo 1 es

INESTABLE siempre, en cualquier etapa del proceso, para
cualquier ganancia Kc 1. El lazo 1 no puede ser controlado si no se
ejerce acción sobre la pe1turbación en el bloque 1.
Lazo 1 abie110 í lazo 2 cerrado :
Kc2 1 -48 73 7 + 1=O ,

L s + (0,00006 � + 0,00003) J
⇒ s = 48, 73 Kc2 - (0,00006 � + 0,00003)
luego, lazo 2 es estable si :
Kc2 < 0.00006 � + 0.00003

48,73
Y donde, para t E [to, t i ] (lapso inicial de tiempo):
s1 Kc2 < 0,0008 g/min-ºC
en cualquier caso, lazo 2 es estable.
Recordemos que los valores limites (rangos) obtenidos en

sintonización por separado no garantizan estabilidad para el sistema
total de control, en el que, de hecho en nuestro caso, ambos lazos
deben mantenerse cerrados. Por ello, se debe hacer otra
sintonización con los 2 lazos en interacción mutua.
56
Sintonización con ambos lazos cerrados

Lazos interactuantes ( controlador· P)
Ecuación cai:acteristica
La estabilidad de las salidas de lazo cen-ado de 2 lazos interactuantes
se detennina por las raíces de la ecuación
Recordemos que si hay por lo 1nenos una raíz positiva en esta

ecuación, entonces los 2 lazos interactuantes son inestables.
Por lo tanto : s debe ser < O siempre.
De aquí:
( -0,029 Kc1- + l l ( -48 73 Kc2___ + i'1 -

\. s ) 1
, s + (0,00006 lh1o + 0,00003) )
'\
1000 ( -O 00015 l Kc1Ke2 = O
s �- s + (0,00006 lliio + 0,00003)
Simplificando y ordenando
s2 + (0,00006 lhlo + 0,00003 - 0,029 Kc1 - 48, 73 Ke2) s + (1,56 Kc1

Kc2- O, 000001 7 lhlo Kc1 - O, 0000009 Kc1) = O
57
Para esta ecuación de segundo grado se puede aplicar el criterio de

estabilidad de Routh-Hutwitz.
Si se cutnple por lo menos una de las siguientes desigualdades:
O, 00006 � + O,00003 - O, 029 Kc1 - 48, 73 Kc2 < O,
1,56 Kc1 Kc2 - 0,0000017 fr� Kc1 - 0,0000009 Kc1 < O
entonces el comportamiento es INESTABLE.
En la ETAPA INICIAL, los valores numéricos para que el sistema

sea estable serían (resolviendo las inecuaciones)
Kc 1 <= 0,002 � + 0,001 - 1680,3 Kc2
Kc2 >= O, 0000011 � + O, 0000006
La ganancia indica el grado de sensibilidad. Por lo tanto, se escoge

una ganancia alta
. -1
(en min) Sea: Kc1 = 0,8333 lntn
Kc2 0,8333 gimin-ºC e•) ➔
ó bien Kc1 = 1 min-1

Kc2 1 gimin-ºC (*)
➔
Control PID: es más adecuado para control de temperatura.

58
Ahora, bien, calculando valores para la constante derivativa <tr)

para control PID :
Kc1 r 1 + _1_ +
/
Gc1 t01S 1
' t11S )
r 1 + _l_ +
/
Gc2 Kci tD2s 1
\ tus /
1
Entonces, aplicando los criterios anteriores, se obtiene valores de

t0 que permiten estabilidad al sistema :
tm > 0,82 h
t02 > 0,76 h
Luego, se puede fijar un valor adecuado de t0, no muy elevado:

t01 1 h
t02 1 h
Nota:
dimensión unidades
t h
1/h
g/h-ºC
Disefio de lazos de control no interactuantes.-

59
El arreglo de ganancia relativa indica c01no deben acoplarse las

entrndas con las salidas para formar lazos de control con la menor
cantidad de interacción.
Para mantener ivlw constante : ]'vlw O
1 Fw2
HA3 - HA1
Introduciendo al elemento dinámico : D1 - Gi

G1
donde E�
Fw2
y donde el valor de Fw2 es la entrada� la cual da como salida la

1nagnitud en la que debe variar FA para cancelar el efecto de Fw2
sobre !vhv-
D1 : Desacopladm·. Cancela cualquier efecto que el lazo 2 pueda

tener sobre el lazo 1, mas NO viceversa.
La razón de tratar de desacoplar a este sistema es la precisión que
deseamos lograr en el contJ:ol de humedad y de temperatura, pues, el
sistema 1nicrobiológico presente es muy sensible a cualquier ligero
cambio en estos parámetros.
Para eliminar interacción del lazo 1 sobre el lazo 2 se sigue el

1nismo procedimiento anterior
T O
60
F w2
Y así, obtenemos los diagratnas de bloques con desacoplamiento

(ver Figura 12 y Figura 13).
Se c01np1ueba que
l'Vlvv'(sJ l'vlwsP(sJ
La Figura 12 representa el lazo desacoplado final para la

te1nperatura. La Figura 13 representa lo mismo para la humedad.
FIGURA 12
LAZO CERRADO DE RESPUESTA DINAMICA DE CONTROL DE TEMPERATURA: DESACOPLADO
Gp1 -Gp2Gp3/
PID Mw
Variación en Sum1 s+1
Gc1 Mw(s)
SPde Mw
(SERVO) Gpeq1
1
0.25s
Gm1
Ge = 9 (1 + 1/18s + 0,033 Mw= masa de agua

Kc=9 El elemento de activación final tiene una
ti= 18 inversa con respecto al Gpeq (válvula
tD= 0,033 con ganancia constante= 1)
Sistema de control: lazo cer<:!�o feedback con desacoplamiento

Entrada/ salida de masa de agua (humedad en
Variación en
PID
Gp4-Gp2Gp3/ p1
s+1
-...------ T
Gf2 T(s)
SPdeT Gc2
(SERVO) Gpeq2
1
0.1s+
Gm2
Ge = 9 (1 + 1/18s + 0,033 T= temperatura

Kc=9 El elemento de activación final tiene una
ti= 18 inversa con respecto al Gpeq (válvula
tD= 0,34 con ganancia constante= 1)
FIGTJR.A. 13
Fermentación en sustrato semisolido: Ll\:IB
•Sistema de control: lazo cerrado feedback con desacoplamiento total: diag1·ama de bloques
entrada / salida para humedad
62
Así, pues, en estas ecuaciones se nota un desacoplamiento total de

los 2 lazos: la variable controlada por cada lazo depende de su
propio set point.
Al conocer las funciones de transferencia para los controladores,

se puede conocer también la función general para un cambio unitario
en el SET POINT (valor fijo deseado) de humedad o de
temperaturn. Gráficas si.tnuladas de la respuesta de control se
1nuestran más adelante. En estas respuestas se trata de establecer un
compromiso entre el tiempo que tarda la variable en retomar su set
point (referido como tiempo de respuesta, con un offset de ±5�'<>), la
sensibilidad ( cantidad de oscilaciones) y la amplitud de oscilación.
Se ve así que el control de humedad no presenta mayores
problemas, no siendo así con el de temperatura. En este último, se
puede, sin embargo, fijar una alta ganancia sin afectar la estabilidad
del sistema.
En general, siempre habrá una cierta interacción, pues, el
sistema no se conoce en fonna exacta. De hecho, los
microorganismos tienen un complejo sistema que no es enteramente
predecible. Con todo, en líneas generales, si se da el medio óptimo
en el biosistema, puede afin.narse que con el mecanismo de control
desacoplado se puede lograr una estabilidad aceptable.
Luego, con los valores ya fijados más arriba, la función de
transferencia en el controlador ( digital) es, al inicio :
CONTROL.IDOR .-
= 50 t 1 +l..+ s l
/ '\
t, 6s )
63
Gc2 = 500 ( 1 + l + s ",

l s 1
\. /
Función objetivo : Ajuste óptimo de los parátnetros del controlador

(sintonización adaptiva óptima).
Para SSF: Optimizar el proceso para lograr máxima productividad,

1nínimo costo de proceso y uso 1nínimo de materia pruna.
CONTROL DEL PROCESO DE FER1\1ENTACION EN

SUSTRATO SOLIDO (SSF).-
Objetivo.-
1\:fostrar la relación entre las vaii.ables o los pai·ámetros de control
inherentes a una fermentación SSF, así como la estructura de un
programa simple de control semiautomático pai·a este proceso.
Esquema.-
Se trata de establecer los bloques o esttucturas de control que,
mediante un sistema auto1natizado en una estación de trabajo, logre
el mantenimiento de condiciones adecuadas y constantes en el
proceso de bioreacción o fermentación en sustrato sólido. Para ello
se requiere un programa de control adecuado.
1\.1encionemos en p1i.ncipio algunas condiciones o consideraciones

prev1.as:
64
El reactor y las líneas de proceso tienen mecarusmos de

accionamiento y control ya instalados (salidas digitales / DO).
Estos se describen más adelante.
Se fijan algunos puntos de toma de muestra (entrada de datos
mediante insttumentos de control).
Se fija una entrada inicial a la estación de trabajo (engineering
workstation) a partir de un transmisor de flujo ya instalado en el
sistema.
Algunos datos sobre la unidad terminal remota (RTU -interface

analógico/digital)
l\:1odelo Hewlett-Packard : HP 48060 lVIeasurement and Control

Unit.
Esta es una unidad te1minal remota (RTlJ) de relativa flexibilidad
para el científico. Se opera con un control digital directo (DDC), y
algo de programación, lo que la ase1neja a un PLC también.
No. de entradas analógicas disponibles: 4

No. " " digitales ,. : 8
No. " ., pulsantes " :3
No. ., salidas analógicas ,. :o
No '" ., digitales " :4
Total: 19 CANALES de IiO disponibles.

65
De estos canales de L/0, no todos son independientes. En algunos

casos un canal contiene una dirección que puede ser tomada como I
o bien como O, por lo que se debe decidir por sólo 1 de ellos.
En nuestro caso particular, las salidas digitales (DO) tienen
preponderancia sobre las entradas digitales (DI), no empleando
ninguna de estas últimas, pues, no se emplean instJ.umentos de
medición digital.
1) l\1edición de datos de entrada (input).-
1v1ediante instrumentos de contt·ol se realiza la toma de datos cada

cierto tie1npo en 5 puntos de la línea de proceso.
Nútnero de inputs: 5 4 inputs analógicos

1 input pulsante
El número de inputs se ha fijado en consideración a la capacidad

que ofrece la interface de trabajo.
ENTRADAS ANALOGICAS (ANA.LOG INPUTS)
1/H�i!l�tJ? f!lf!@fl�MMl1J�(i:!Jlftvi�t�fii/?H?WH:H/$MSO.ttff li/)\//$EN$M\HHt?/I\\

O Temperatura de aire T1 Termocupla K
1 Temperatura (superior) T2 Termocupla K
2 Temperatura (inferior) T3 Termocupla K
3 Humedad relativa de sustrato H1 Higrómetro
ó6
El humidificador en la línea cumple además la función de

autoclave. La función de autoclave la realiza en la etapa inicial de
esterilización, previa al proceso de reación.
2) Activación de valores de salida (output).-
SALIDAS DIGITALES (DIGITAL OUTPUTS)
o Flijo de aire seco Válvula solenoide V1

1 Flujo de agua por aspersión Válvulas solenoides V2 /V3
2 Agitación a medio Motor de eje M1
3 Temperatura de aire húmedo Resistencia eléctrica R1
Programa de control.-
Se hizo un programa de control sencillo, con los bloques ó

secciones fundamentales necesarios para este tipo de operaciones
- Inicialización/ Fijación de vaii.ables.

- Ciclo o lazo de fijación y control de tiempo (reloj).
- Ciclo de control p1i.ncipal.
- Sector de subrutinas de control (subprogramas).
Calibración de higrómetro: se puede calibrar con soluciones

saturadas de K2 S04 y CaS04 (Ryoo, 1990).
67
Consideraciones
Para un control adecuado del sistema conv1.ene tener un

mecanismo de adaptación de los valores experimentales con los
de los reales (on-line). Se deja de lado por ahora una
comparación numérica de estos valores por faltar datos de
medición.
Para un control adecuado de temperatura, y en la transferencia
de calor, donde el tiempo es factor esencial, es conveniente un
sistema de control proporcional-integral-derivativo (PID), debido
a que permite fijar ganancias (Kc) altas para obtener respuesta
rápida frente a variaciones sin detrimento de la estabilidad del
sistema. Para el control de hwnedad se ha optado también por
un lazo PID (pues, se trata de mantener una concentración
determinada de agua).
Como ya se vio en cálculos anteriores, se ha fijado lazos de
control PID parn hwnedad y temperatura dentro del esquema
general de control adaptativo. Los valores de estabilización
simulados para el control de ambos factores (gráficas de
simulación) muestran que este lazo de control es el más
conveniente, permitiendo gran flexibilidad sin pe:r:_iudicar la
estabilidad del sistema.
Adquisición de data: los microprocesadores de la interface de

conversión ND y D/A envían la salida (output) de modo digital. El
volumen de control incluye válvulas solenoides para control, lo que
no es lo 1nás adecuado a mediana o gran escala, mas puede ser
aplicado con relativa eficiencia en la escala semipiloto con la que
hemos laborado.
68
El controlador almacena valores de entrada11ectura -tanto on line

como de sitnulación- en memoria de base de datos (database). A
ellos se accesa y ellos se fijan en programas de control (BASIC)
mediante inst:tucciones de direccionamiento, como por ejemplo:
GETDB(l29-,0,0,2,0) Lectura de valores en este punto.

PUTDB 128,0,0, 1,0,40 Fijación de valores en un punto.
Pruebas de fermentación SSF .-
Pat:t·ón de medición de sustrato :
Peso de pajilla seca 2g
Volumen de sales de Reese/1v1andels = 1,2 ml

(de modo que haya una concent:t·ación de 60 ml/100 g pajilla)
Volumen de medio de inóculo (1vll) = (aprox.) 4 ml
(generalmente, hay una concentración de O,O 1 g micelio secoíml :rvII

luego de 3-5 días de crecimiento. La dosis adecuada en la mezcla es
2 g micelio secoilOO g pajilla; luego, para 2 g pajilla se requiere 0,04
g micelio seco).
Peso de harina de soya = 1,654 g

(concentración de harina de soya = 0,827 gig pajilla. Relación C:N =
10).
69
A mayor escala (reactor de 20 l)
Se conoce: YQ/X = 2500 cal/g biomasa

l\,fo...Xo : La cantidad de biomasa inicial debe ser tal que haya:
Xo = 2 g micelio (seco) O, 02 g microorganismos

100 g pajilla seca g materia seca
Tornando la concentración protnedio : O, O 1 g micelio seco

1 ml medio de inóculo
Y tomando una densidad promedio para el medio de inóculo (l'vll):

, 3,
dMI 1 g:cm =
entonces, para : !'viso 3000 g pajilla seca (inicial)
debe haber (rvLX)0 = 60 g micelio (seco).
Esto significa VM10 = 6000 ml (medio de inóculo)
luego, ]\,fMio = 6000 g
(tnasa de suspensión líquida, de densidad 1 glcc)
Entonces,
!vi agua a añadir para lograr 70 ° b humedad

1 1000 g = 11
(siempre para una masa total inicial de 10 Kg = 10000 g)

70
Valores y coeficientes necesarios . -
Algunos se dan de forma temporal (simulados), asumiendo un

valor acorde a datos de otros sistemas similares, a condiciones
snnilai·es, o bien en función a ecuaciones de estado. Así, p. ejm., la
humedad se calcula en función de la ecuación de Antoine (la
medición exacta on-line la da naturalmente el sensor, y es este valor
el que se toma en el cálculo real de control).
Presión de vapor de agua
Ec. Antoine : In Pv A - ____]::}

T+C
donde Pv (mm Hg)

T ( ºK)
Para el agua: A = 18,8036

B = 3816,44
e= -46,13
Asunción: Ten reactor = 37 ºC (constante)

71
Tomando T1 = Trn = 33 ºC
T4 =Tour = 35-37 ºC
■ Para remover el exceso de calor metabólico, se puede usru· ait-e a

3-4 ºC menos que la temperatura TsP de fermentación (37 ºC), para
transferencia por convección.
■ Ade1nás, se aswne que a la salida, T aumenta 3-4ºC.
■ HA3 corresponderla aprox. a la humedad de aire saturado a la
temperatura de salida.
HR �Y- HA = 18 HR
676,2 - Pv 29
T oUT = 37 ºC Pv = 54,75
HR = 8,81 �.-ó
HA = 0,055
TIN = 33 ºC Pv = 31,38
HR = 4,87 �'o
HA = 0,030
Luego: HA1 = 0,030 g agua/g aire seco

HA3 = 0,055
72
Caída de presión en el reactor.-

Hay una caída de presión a lo largo del lecho del reactor, la cual es
función de la velocidad lineal del aire en él.
Sea e = porosidad del lecho
e = volwnen de hueco/volumen total
De cálculos (ensayo) con pajilla de caña de azúcar, con diámetro

de partícula DP = [0,5-2] mm. y humedad de 70 �-ó, se obtiene:
e0 = 0,7 (aprox.)
La porosidad es variable en el tiempo:
g = oO - (N!X)o emt
VT d:MX
Pl,.ix = 0,001 g/cm3
Calor específico : CpAGUA(VJ Cpv = 0,45 cal/g-ºC

½AIRE 0,24 cal/g-ºC
En reactor:
Sea Cp = calor específico de :tvIASA TOTAL en reactor
El material de fermentación en reactor es una combinación de

biomaterial y agua (biomaterial = biomasa seca+ pajilla seca).
�.\sunción : Cp biomasa » Cp pajilla seca de caña de azúcar

73
Cp PAJILLA1BIOMASA = 0,4 calig-ºC
Entonces : C p = C p PROM Cp PAJILLA/BIOMASA +XCp AGUA

l+ x
donde x = contenido de agua g agua/g materia seca
Notamos que x puede ser variable, por lo que Cp puede también

ser variable. Pero, como lo que se trata es precisamente de mantener
la humedad constante, se asume que Cp no varia apreciablemente
(así, p. ejm., para una humedad de 75 o/o, Cp = 0,85). De haber una
variación instantánea de humedad, ésta setia corregida también
inmediatamente. Luego, como la variación de temperatura es
relativamente pequeña, se considera Cp constante.
To�ando un 70 °/ó aprox. de humedad absoluta en el sólido,

entonces ésto equivale a x = 2,333.
Luego : C p = 0,82 calig-ºC (sujeto a variación, aunque

despreciable, en el control)
Entalpía.-
Por unidad de masa
Hvi Cpv TIN = 140,85 caL'g (T en ºK)

Hv4 Cpv ToUT = 136,35
H.-u CpA TIN = 75,12

74
H A4 CpA TouT 72,12
lVIasa y volumen de control en reactor.-
D= 34 cm
L = 40 cm
Sustrato : h » 2/3 L , luego h= 25 cm
dsusTRATo » 0,414 gíml (humedad= 70� 0) 0
Volumen de sustrato : V susTRATo= r2 o h = 22, 7 l
Entonces: \Vs = 9,4 Kg

Si h = 30 cm, entonces \Vs= 11,3 Kg.
Luego, se acuerda un peso \Vs= J\.f.- = 10 Kg

Humedad= 70 �-ó
Por lo tanto, \VsoLmo = peso de sólido= 3 Kg

\VAGUA = peso de agua = 7 Kg
I\'h = 10 Kg
En línea (2), asumiendo agua (l) saturada y a 100 ºC, entonces
Hw2 = 40 caVg (de tablas termodinámicas)
75
Coeficiente de transferencia calorífica total y calor perdido por

la superficie del reactor.-
El coeficiente de transferencia calorifica (h0 ) se puede obtener a
partir de la conductividad ténnica en la superficie del reactor:
Acero inox. 304 12440

Bronce 22350
Lana de vidrio (chaqueta aislante) 44,7
Plástico acrílico 167,2
Asunciones :
■ Distribución ho1nogénea de temperatura en el sustrato sólido

(reahnente, la distribución de temperatura en SSF llega a ser algo
heterogénea, lo que se compensaria con la eficiencia de la agitación).
■ Resistencia de las películas inte1na y externa despreciables.
Por lo tanto T1 ::::::: T1
h1
~·~ o
Ts ~-· To
ho ··~
~ o
Valores:
r1 17 cm
r2 17,04 c1n
76
r3 17,675 cm
r4 17,875 cm
r.s 17,925 cm
L 40
kA - (no es necesario conocer este valor, pues, se asume
resistencia de película interna despreciable).
kB 8,35
kc = 15
ko 0,03
kE = 15
Entonces, con las asunciones anteriores
Q T -T o
ln(rz,:'r1) + ln(rJr6) + ln(r:'!/r�) + ln(r�/r1)
2pkBL 2pkcL 2pknL 2pkEL
Tomando To = T o PROM 25 ºC
T1 equivale a la temperatura promedio del sustrato
entonces T1 = 37 ºC (temp. de SET POINT, el cual DEBE

mantenerse constante)
77
Pero T1 en realidad oscila alrededor de este valor, por lo que

se indica como variable.
Se sabe que
Q UA (T1 -To)
donde U hT
hT y A pueden tomarse con respecto a las superficie interna o

externa ( es indistinto). En este caso, se ha tomado la superficie
exte1na como referencia.
A1 907,9 cm2
Entonces, con los valores numéricos anteriores, obtenemos
Q1 9895,52 (T1 - 25) caVh
(calor perdido por la superficie lateral del reactor)
U 1 A1 = 9895,52 cal/h-ºK
Sección superior:
r = 17,925 cm
78
Se puede considerar las secciones superior e inferior como

superficies planas circulares.
En la superficie superior:
Plástico piroxilina e = 1 mm k = 111,614cal/h-m-ºC
Bronce e = 4mm k = 22322,7
Area : A = nr2 = 0,10lm 2
Entonces : Tr - 25
_L 0,001 + 0,004
0,101 111,614 22322,7
= 11045,484 (T1 - 25) ca]Jh
U2A 2 = 11045,484cal/h-ºK
Sección inferior : Análogamente al caso de la sección superior:
Capas:.
Bronce s = 2 mm k = 22322,7 cal/h-m-ºK
La.fil.a de fieltro s = 2 mm 44,645
�- .,_ '·. . ·:-·· -
s = 0,5 mm 22322,7
-�
�-1-
..:A� = A3 = 0,101m 2
L •, •
-�;-. ·
79
=
_L 0.002 + 0,002 + 0.0005
o, 101 22322,7 44,645 22322,7
= 2247,66 (T1 - 25) cal!h

Luego: lJ3A3 = 2247,66 cal/h-ºK
Entonces: QToTAL = 23188,66 (T1 - 25) cal/h
Además, asumiendo que:
35544,35 cal/h-m2-ºK
23188,66 cal/h-ºK
386,478 calímin-ºC
LINEA (CURVA) DE l\1EDICION DE TE1\1PERA.TURA vs

FUERZA ELECTROMOTRIZ.-
Termocupla tipo K
Chromel-P y Alumel
(Ni-lOCr y Ni-31\:1n-2Al-1Si)
Las termocuplas de tipo Chromel-A.lumel no siempre pueden ser

calibradas y usadas con tanta precisión y repetibilidad como otras
termocuplas, aun cuando son a menudo claramente superiores en
80
otros aspectos, cuando los errores ligeramente mayores son

aceptables (Roeser & \Vensel, 1941).
Centramos el análisis de la tennocupla en su comportamiento para

el rango de trabajo en cuestión. Como se 1nencionó, se trata de
realizar una bioreacción a unos 3 7 ºC, por lo que
Se toma : Rango = [20 - 60] ºC = [68 - 140] ºF
Sabemos que la relación entre enú (ó V, fuerza electromotriz) y

temperatura (T) en una termocupla está dada por las ecuaciones
generales:
emf = V = a+ bT+ cT2 , o
emf = V = aT + bT2 + cT3
El empleo de una ú otra ecuación depende del tipo de tennocupla.

Así, p. ej., la termocupla tipo T cumple una ecuación de tipo
cuadrática. Así, pues, introducimos este conocimiento heurístico en
nuestra base de data.
Para una termocupla tipo K, tenemos (Nachtigal, 1990):
Output promedio = 2,20 mV / 100 ºF

Temperatura máxima = _1260 ºC
Atmósfera permisible: oxidante
Precisión general: 4 F º (0,75 %)
Con todo. se ha reportado (Roeser & Wensel, 1941) que no ha

habido éxito en cuadrar estas ecuaciones a la curva de calibración en
el intervalo [O - 300] ºC para la termocupla tipo K.
81
Por ello, se tomó un rango de temperatura más pequeño y aceptable

en el proceso de fermentación SSF, con el cual se pueda asumir una
relación lineal:
emf= V= a+ bT
Pai·a el rango mencionado de [20 - 60] ºC, se comprueba que
a -0,753014
b 0,022753
r 0,999993
Luego, se cumple con gran aproximación la ecuación lineal sgte.
emf= V= -0,753014+ 0,022753 T
(cambiar límite superior de 60 a 130 ºC, para incluir el proceso

de esterilización)
De este modo
T 24,416349 emf + 0,608067 (Ten ºC)
T 43,949428 emf + 33,094521 (Ten ºF)
Entonces, se establece la función lineal anterior. El error absoluto

máximo en grados Celsius es menor que O, 1 ºC.
82
Apéndice F.- Alternativas de solución

l.\:1ejorainiento: inmovilización de células microbianas. Como
proyecto de investigación poste1ior se ha estado haciendo pruebas
con inmovilización de las cepas de Trichoderma reesei UC4 en malla
de polietileno, esto en cultivo líquido. Ya se ha repo1tado resultados
(Sachse et al., 1990) de ptuebas de este tipo en malla de acero
inoxidable en un reactor de disco rotatorio, para una rentable
producción de celulasa. La producción de enzima fue mantenida por
3 ciclos sucesivos de lotes (ca. 30 días), y la actividad de la enzima
fue mayor que la producida en un reactor tanque agitado, pues, el
bajo esfuerzo c011ante no dañó a la enzima (Sachse et al. 1990).
Habrá así un menor costo por las operaciones y procesos de
pu1ificación (downstream).
La celulasa es una proteína enztma hidrolítica que podría ser
rentablemente producida por un sistema de microorganismos
inmovilizados. Ha habido una gran investigación en este proceso.
La producción de celulasa fue investigada en un sistema de cultivo en
lote repetido empleando mutantes irunovilizados de Trichoderma
reesei.
H.- Conceptos complementarios. Planteamiento de la solución

Lapso adecuado de apertura de válvula de agua (solenoide) pai·a
cuando la humedad decrezca. Pai·a la escala relativamente
pequeña de trabajo, puede resultar la válvula solenoide instalada
todavía más rentable que una válvula de control
(electropneumática).
83
1,
Una válvula de control darla con todo siempre un control más

adecuado, asegurando una estabilidad en el control. .
I .- Control de desarrollo de las etapas de trabajo

Pruebas de determinación de población microbiana
(Trichoderma reesei) en medio sólido: resultados no
concluyentes a escala de laboratorio (tubos de fermentación).
Solución: probar directamente a escala semipiloto en el
bioreactor de 60 l, teniendo el esquema de control establecido y
operativo.
Automatización: calibración correcta de higrómetro y colocación
de un adecuado elemento de activación :final.
Flujo óptimo pai·a purificación final de productos: downstream
processmg.
J.- Determinación de la performance

Se ha establecido un mecanismo útil de control para un sistema
:rvJil\110, con poco retraso en el tiempo de respuesta. Esto es una
parte del costo involucrado en el proceso total.
K .- Evaluación económica final

Para ello, se considera lo mencionado en F. Como se mencionó en
las alternativas de solución, estando c01nprobada la eficiencia de la
cepa de Trichoderma obtenida en el LJ.vIB, con materia prima libre,
un consumo bajo de energía (mantención de temperatura a 37 ºC,
agitación intermitente). Queda por afinar el sistema de control,
analizando su estabilidad en las pruebas en el bioreactor.
Por lo tanto, contando con una .adecuada eficiencia de producción
de biomasa y de enzima a un bajo costo, quedará por segwr
84
analizando los pasos siguientes de purificación de producto

( downstream processing).
L .- Conclusiones y resultados finales

La participación conjunta de la biología, la ingeniería química í
bioquímica con la ingeniería electrónica se comprueba vital en el
campo de la biotecnología. Ello hace obtener óptimos resultados en
corto tiempo.
El SSC es una forma rentable de producir nuevas sustancias con el
e1npleo de la biotecnología en países en desatTollo.
La automatización de siste1nas en biotecnología se orienta hacia el
empleo de sistemas inteligentes, dada la complejidad de los
mecnismos bioquímicos. Controles adicionales con lógica difusa
ayudarán a mejorar eventualmente la estabilidad en el sistema.
85
II. - SINTESIS Q[T/JlfICA S.4
Generalidades / descripción del sistema / trabajo técnico y de

ingeniería realizado.-
En pnnc1p10, nos siutamos en la clasificación de los productos

manufacturados en SINTESIS QUilvIICA SA: metabolitos
secundat·ios (antibiótica).
Entre los productos microbianos tenemos los metabolitos.
Los metabolitos son compuestos producidos por microorganismos
en el proceso de metabolismo, 1nediante el cual los elementos vitales
(_organógenos y biogenésicos) son movilizados desde los nutrientes
hacia la célula.
Los metabolitos pueden ser:
■ Primarios. Necesarios para el desarrollo del orgamsmo.
Alcoholes, ácidos orgánicos, aminoácidos, vitaminas.
■ Secundarios. Compuestos secundarios producidos por algunos
1nicroorganismos. Son productos laterales, mas no indispensables
para la vida del 1nicroorganismo. Antibióticos, exotoxinas.
SINTESIS QlJilv1ICA SA produce metabolitos secundaiios
aplicados en la terapéutica.
Los metabolitos secundarios pueden explicarse en el mundo de los
1nicroorganismos como productos de desecho, subproductos de un
metabolis1no imperfecto. Así, pues, ellos representan 'apéndices
bioquímicos' que han perdido una importante función en una
temprana etapa de la evolución. Son productos de mecanismos de
detoxificación y que actualmente no tienen un uso particular pai·a el
1nicroorganismo generador. Un antibiótico a bajas concentraciones
inhibe el crecimiento.
86
Desde una perspectiva comercial y clínica. los antibióticos

constiruyen la clase más impo1tante de fármacos que se obtiene de
los microorganismos.
Actualmente, la mayoría de antibióticos producidos en el mundo
son compuestos 8-lactámicos, principahnente penicilinas y
cefalosporinas, las cuales son obtenidas en su mayor parte de
cultivos de hongos (60-650,."<>). El porcentaje restante de antibióticos
(30-40�'<>) proviene mayo1mente de bacte1ias.
Actualmente se aplica unos 150 antibióticos en el mundo.
Síntesis Química SA produce compuestos del grupo de los
metabolitos secundarios, compuestos antibióticos, y particularmente
B-lactamatos. El anillo B-lactámico está compuesto por 3 átomos de
carbono y 1 de nitrógeno. Los B-lactamatos son probablemente los
menos tóxicos de todos los grupos ptincipales de antibióticos. A
pesar de que todavía no se ha esclarecido totalmente los mecanismos
por los cuales los antibióticos B-lactámicos ejercen su acc1on
destructora sobre las bacterias, parece bastante claro que
interrumpen la formación de la pared celular. De manera específica,
obstruyen la síntesis y ern;amblaje de peptidoglucano, principal
corn;tituyente de la pared; actúan uniéndose al menos a 3 enzimas -
trarn;peptidasa, carboxipeptidasa y endopeptinasa-, que catalizanla
polimerización e inserción del peptidoglucano en la pared. La
interrupción de este último proceso trae consigo la disolución y
1nuerte de la célula. A la ubicuidad del peptidoglucano en la pared
celular y a su ausencia en organis1nos supetiores se debe la alta
toxicidad selectiva de los antibióticos B-lactámicos ( Aharonowitz &
Cohen, 1981).
87
Técnicas de producción en biotecnología en medio liquido:
En medio líquido, una bioreacción puede set· operada por:

■ J'vficroorganismos inmersos en el bioreactor.
■ Microorganismos inmovilizados en esferillas de gel ó en
superficies de gel ó de algún material orgánico adsorbente.
■ La enzima de los microorganismos (el compuesto activo,
responsable de la formación de los metabolitos) inmovilizada,
como en el caso anterior.
En SINTESIS QUilvfICA SA se emplea esta última técnica, con

enzima inmovilizada en esferillas de gel de poliacrilamida.
La penicilina es materia prima en el proceso. Esta se emplea como

una sal de potasio, sólido en polvo. La penicilina de tipo sal alcalina,
como la que es empleada en este caso, y la de tipo alcalina-térrea es
soluble en agua, mas casi insoluble en compuestos orgánicos. Esta
propiedad es aprovechada para la ionización de la penicilina G ó V
en agua, a un pH regulado de 8,0: medio básico. A este valor de pH
se logra una buena disolución e ionización de la penicilina. Sin
embargo, un pH más elevado rompería el anillo pentagonal de la
molécula en la unión del átomo de azufre.
La reacción de conversión a 6-APA se produce e T = 28 ºC, P = 1
atm (presión atmosférica), y a un pH de 8,O_ en un reactor de 3000 1
(que · será en lo sucesivo etiquetado como R2), agitado mediante 2
juegos de paletas de agitador de tipo Intermig (ver Figura 13), un
tipo de agitador que produce bajo vortex y de alta eficiencia,
adecuado para la suspensión de sólidos en el sistema al convertir
gran parte de la energía mecánica en flujo vertical (MacNeil &
Harvey, 1993; Fasano et al., 1994; Corpstein et al., 1994). El
88
catalizador de la reacción es la enzima penicilinacilasa ó la enzima

penicilinamidasa, las cuales están libres de otras enzimas que
puedan producir reacciones secundarias indeseables, como por
ejemplo la lactamasa, la que rompe el anillo B-lactámico, lo cual no
es deseado. La enzima está inmovilizada en gel de poliacrilamida, en
esferas pequeñas de más ó menos 1 mm de diámetro.
La enzima PGA ha sido previamente obtenida desde cepas
recombinantes adecuadas del microorganismo Escherichia coli. Para
la producción de proteínas farmacéuticas mediante técnicas de
rDNA, las cepas de E. coli son las más ampliamente usadas debido a
que sus propiedades genéticas son bien conocidas.
Se trabaja con 2 tipos de penicilina, que tienen una ligera
diferencia entre sí.
La estructura química y la función de las penicilinas y las
cefalosporinas (estas últimas también eran producidas anteriormente)
se basan en el anillo B-lactámico de 4 miembros (ver las figuras más
abajo). De ahí que las drogas se llamen antibióticos .B-lactámicos. El
anillo de este principio activo es esencial para la misión de estos
compuestos: detener el levantamiento de la pared celular de la
bacteria. Si se añaden grupos laterales al anillo, aumentará la
potencia del antibiótico y se llevarán a cabo_ así sus propiedades
farmacológicas. En el caso de las penicilinas, varía sólo un grupo
lateral. En el proceso de producción comercial, la penicilina G sirve
de estructura central parra la adición de nuevas cadenas laterales,
una vez eliminado el grupo bencilo.
La ampicilina se muestra eficaz contra las bacterias gram
negativas, lo que hace que su demanda sea alta en el mercado de
productos medicinales.
La Figura 15 nos muestra la estructura molecular de la penicilina
potásica empleada.
89
En la Figura 14 podemos ver un ejemplo del progreso en la

capacidad reactiva de un compuesto proveniente de cepas
modificadas de un parental inicial, así como en los últimos años de
ADN recombinante (ptincipalmente en Escherichia coli):
La reacción enzimática, así como la ya casi no empleada reacción

química, son mostradas en la Figura 15.
Como podemos ver, la penicilina V posee un radical adicional -0-

en su molécula. La penicilina G es más usada que la V para la
producción de penicilinas (derivados penicilánicos) de semisíntesis
en SQSA, y en general, en todo el mundo. Ello es debido a que es la
penicilina más estable y comercialmente rentable (bajo costo de
producción): un 80% de la penicilina producida en el mundo es del
tipo G. J\.1ás de un 40o/ó de esta penicilina es empleada para la
producción de der-ivados penicilánicos semisintéticos, cerca del
40�-i> lo es para aplicación directa en medicina humana, y un 1 O�·ó lo
es en medicina vetetinaria (Queener & Swartz, 1979).
Esta anterior diferencia no influye en el proceso de producción del

6-APA. La diferencia entre el empleo de la penicilina V o de la G se
presenta en el subproducto formado: Fenilacetato o bien
fenoxiacetato. Estos subproductos deben ser recuperados es, para
90
Figura 14
30000
Actividad
(UI/ mi ) 25000
20000
15000
10000
5000
o
1937 1940 1955 1965 1969 1973
Año
Progreso en la actividad de la penicilina G producida
a partir de una cepa parental de Penicillium notat11m
durante las décadas de los 30s a los 70s
Penicilina G Acido 6-
aminopenicilánico
t
Penicilinacilasa
(hidrólisis)
o o
1
t
(CH 3 h SiCl2 + (-40 ºC)
PCl H, O (O ºC)
.s
Butanol
(-40 º C)
Producción de 6-i\.PA: conversión microbiológica (síntesis

enzimática) vs conversión (síntesis) química
Figura 15
91
(reciclados), pues, pueden ser reutilizados en la producción de la

misma penicilina G ó V (se añade ácido fenil ó fenoxiacético al
reactor en el proceso de fabricación de penicilina como inductor
para elevar su porcentaje de rendimiento), y también se puede
emplear sobre otros B-lactamatos como el ácido 7-
aminocefalosporánico para producir cefalosporina N.
Además, el reciclaje forma parte del compromiso de la empresa
para cumplir con las normas ambientales, evitando la contaminación
de las aguas mediante el tratamiento de los efluentes y corrientes de
residuos.
Producción de antibióticos.-
La ingenieria ó tecnologia genética interactúa con la biotecnología,
y una de estas aplicaciones de interacción es la mejora ó el
reemplazo de procesos biotecnológicos clásicos.
Una de las primeras aplicaciones de la tecnología genética en el
área de la biotecnologia fue el desatTollo de cepas de Eschericl,ia
coli recom binante como superproductores de penicilinacilasa
(l\:1ayer et al., 1979). La penicilina tipo G y la tipo V, producidas a
bajo costo, son muy sensibles a la degradación por .B-lactamasas
bacterianas, por lo que necesitan altas concentraciones de suero, lo
que conduce a la formación de complejos con proteínas de la sangre
y a alergia a la penicilina.
Con todo, un problema de contaminación sigue siendo el flujo de
una alta concentración de butilacetato como efluente. 1\-Iás adelante
se indicai·á algo sobre su posible tratamiento.
La mayoría de penicilinas l"> comerciales modernas son, por lo
tanto, derivados semisintéticos producidos a partir de ácido 6-
aminopenicilánico (6-APA). SINTESIS QUII\IIICA SA se creó
92
precisamente con el objetivo de producir <le1ivados penicilánicos, y

en el que la penicilina ( G ó V) fuera una materia prima para la
manufactura de compuestos en los que no hubiera problemas de
degradación por B-lactamasas.
s1._ 11:lt º:,.'l.'il] 1, ll:;G' s·.._ · ll.ll S1... 'I\.¿

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º
.11H ) .11H ./\ (~1 .ll R 't' /-'11. JJ2., . . .JI
Rl Dilución
PR():t)l.JCCt ():'.\/ :t)L 6--AP,\. R2 Reacción
-l----r-.1------
-. R3 E:x"tracción
R4 Pa·ecipitación
✓ .--..➔...
, 1 C Centrifugación
1 1 S Secado: vapor/ aire
: T1 Generación de agua C
Penicilina 1 1
:
: l !�
1
■
��
1
1
:
1
1 1
1 1
1 _ �RELAY} 1 - -,
�PANEL J -1
1
1 1
1 1 Agua caliente
p=::::::;a4;..._-t,_·
1
--�·•,--- r-�-----�!!!!!!!)
1 (a serpentín en R2)
1 1
- 6--APA __.
Figura 16
<"> AJ mencionar la palabra penicilinas, en plural, nos referimos a

los derivados penicilánicos, además de la propia penicilina.
93
Ahora bien, la penicilinacilasa ó la penicilinamidasa

provenientes del E. coli e irunU\,ilizadas en gel de poliacrilamida han
sido liberadas totahnente de lactamasa, de modo que la eficiencia de
reacción de conversión a 6-APA sea óptima.
Cualquiera de las 2 enzimas mencionadas (penicilin-G-acilasa ó

penicilin-V-amidasa), e importadas por SINTESIS QUil\,IlCA SA
de Alemania e Italia, rompen la molécula de penicilina por el sector
del radical -CO-R, produciendo ácido fenil (fenoxi) acético y 6-
APA.
La secuencia establecida en SINTESIS QUilvfICA SA para el

proceso de producción del 6-APA se desc1ibe así:
Disolución de la penicilina .- En el reactor R 1 .-

Formamos una solución al 8°./ó aproximadamente. La disolución
para esta concentración es rápida.
Carga: Se coloca 700 1 de agua deionizada en Rl < 1i. Se disuelve
luego 3 Kg de H3PO4 para lograr una solución buffer (tampón), la
que a su vez es regulada a un pH = 7,8-8,0 con ayuda de NI-LOH.
Como la penicilina es bastante lábil, la disolución de ésta debe ser
lo más rápida posible.
La concentración será la adecuada para tener una concentración
inicial de un 12 °/ó en R2.
< 1> Estrictamente, las normas de la FDA y de las G1VIP (Buenas

Prácticas de I'vlanufactura) exigen agua esterilizada, pero los
costos de tratamiento para este sistema ( que ideahnente, como
sistema biotecnológico, debe1ia tener flujos de entrada asépticos),
junto con la comprobación estadística de que la actividad de la
94
enzima in.,novilizada no decrece de modo apreciable, aun sm

esterilización de por medio, han hecho que se opte por la no
esterilización y por el uso de agua deionizada.
Una f01ma de reacción en biotecnología es la convers10n de
compuestos con la ayuda de enzunas producidas por
microorganismos. Ahora, bien, esto implica formas variadas de
presencia de la enzima en el bioreactor, siendo actualmente las
formas más itnportantes:
■ Enzima inmovilizada en bolillas de gel inerte

■ I\11icroorganismos en el lecho del reactor
■ Enzima diluida en el medio de reacción
■ iv1icroorganismos inmovilizados en bolillas de gel, agitados en
suspensión en el medio del reactor.
10 ----------,----------,----------- ----------r----------r----------
:
9 �
Volumen
NH 3
(1)
4 �
2
: -----------------�---------·--------�- �-----
fl 30 60 90 120 JSIJ Jl!O
t (min)
Figura 17
95
La técnica de la inmovilización es conveniente porque se evita

p6rdidas que se dan cuando la enzima ó los microorganismos no
están irunm,ilizados, y se evita procesos de tratamiento para
recuperación, los que implican consumo de energía y un alto costo.
Reacción de hidrólisis de la penicilina.-

En el reactor Rz.. mediante la acción de la enZÍlna penicilinamidasa
(ó penicilinacilasa) inmovilizada. Esta reacción produce ácido 6-
aminopenicilánico (penicilanato de potasio) en solución. La agitación
continua se efectúa mediante un agitador de tipo Intermig, el cual
produce bajo v01iex y es de alta eficiencia, adecuado para la
suspensión de sólidos en el sistema al convertit· gran parte de la
energía 1necánica en flujo ve11ical. La Figura 44 (p.130) nos ilustra
el esquema del agitador.
La reacción se da por lotes (batch), y dw·ante ella se debe

controlar el mantenimiento de los siguientes parámetros:
P..ws = 1 atm
T = 28 ºC
pH= 8,00
Agitación constante
t=2 h
Se produce una reacción de _acidificación, por lo que el pH

decrece espontáneamente en la reacción. El control del pH es
96
constante, y se logra mediante la adición de un ácido ó de una base

según sea el caso. De hecho, al ser una reacción de acidificación, el
medio tiende a volverse ácido, por lo que el pH tiende a disminuir de
8. Ahora bien, se debe tratar de mantener la reacción a pH = 8,00
todo el tiempo de reacción debido a lo siguiente:
■ Se ha c01nprobado experimentalmente que a este pH se logra el
mayor porcentaje de conversión, independientemente de los otros
factores de reacción.
■ Se debe evitar que se alcance el equilibrio químico dinámico tan
rápidamente, pues, al disminuir el pH no habria conversión adicional
de penicilina a 6-APA. El porcentaje de conversión seria demasiado
bajo, por lo cual se hace que la reacción se desplace hacia la derecha
en cada instante, controlando la adición de amoniaco como
desacidificador (alcalinizador ).
Por lo tanto, el reservorio principal para restabilización de pH es

un tanque con solución alcalina (hidi·óxido); en este caso se tiene
�OH diluido al 8% aproximadamente.
Control automático: De pH, mediante un control de

retroalimentación, con controladores (tarjetas. de control) Philips
KC-840, en el modo de control PID, el cual es el modo adecuado
para control de temperatura. Dos indicadores de pH: los sensores
son electrodos de pH en solución de AgCl /. AgNO3, insertados en
un armazón 1netálico de segu1idad dentro del reactor, para evitar
ruptura. La Figura 18 ilustra el esquema del pHmetro.
Uno de ellos trabaja en coordinación con el controlador, en el
sistema de control de retroalimentación en lazo cerrado (ver Figura
19), y el otro se emplea como referencia.
97
Figu.-a 18
Electrodo de pH con su protección de ace.-o y cable de
conexión a transmisor
Figura 19
Posición de los 2 electrodos de pH (principal de medición y
control y referencial) en R2
98
Influencia de la viscosidad: En el proceso en SINTESIS QUilv.lICA

SA, la viscosidad casi no vaiia (valor aproxitnado: 1,3
cpo, un tanto mayor que la viscosidad del agua). En Rl y en R2 se
tnantiene el fluido como fluido viscoso no newtoniano (l\1cNeil &
Harvey, 1993 ).
Transferencia de la solución a extractor R3 líquido-líquido.

[ agitador con 1 impulsor tipo turbina]
La extracción es un pnmer paso en los procedimientos de
purificación del 6-APA. La extracción es el cuello de botella en
nuestro procedimiento. Es realizada en el reactor R3 , un recipiente
de 4000 1 con agitador tipo turbina. El proceditniento es el siguiente:
la fina suspensión coloidal (casi una solución) de 6-APA es
mezclada mediante potente agitación con butilacetato en R3. Este
cotnpuesto orgánico coge al radical fenil ó fenoxi que proviene de la
molécula de penicilina inicial.
Para realizar esta operación con éxito, las condiciones óptimas de
operación son:
Baja te1nperatura: 0-2 ºC es un rango adecuado.

Rápida acidificación de las 2 fases en agitación (suspensión de 6-
APA y butilacetato).
Estabilidad del 6-APA .-

La molécula de 6-APA es estable en un rango de pH ácido, y
hasta un pH básico de 9. A un pH superior a 9 (es decir, en un
medio el.u-amente alcalino), la molécula de 6-AP A se desdobla,
abriéndose por el enlace de azufre covalente. Por lo tanto, es muy
importante tratar de no sobrepasar el nivel de 8 en ningún momento.
99
Podemos asumrr la siguiente data para pH y temperatura

adecuados para la enzima y para el 6-APA:
; ;�;;;;; ;¡;;; ;�;; ; ; ; ; ; ; :;'.;:;:;:;g¡ªif;:;:':':;:':':':;:':''.':''.;'.;'.'.'.''.. '.'.'. '. '. '.'.'.'.'.P�::MMQ-.�tJL; :;jt;:;:��ihtetl:;:;

enzima en almacenamiento . 7,0 2,0 - 4,0
enzima en reacción 8,0 28,0 - 29,0
6-APA en reacción 8,0 28,0 - 9,0
6-APA antes de extracción 7,0 - 8,0 0,0 - 2,0
6-APA luego de extracción 1,8 - 2,0 4,0 - 5,0
6-APA purificado (sólido) 3,3 - 3,6 <= 25,0
El 6-APA tiene un punto isoléctrico a un pH = 4,0. Esto quiere

decir que a este pH el 6-APA en la fina suspensión (semisolución:
mencionar tamaño de partícula) cti.staliza.
En el proceso de extracción líquido-líquido, le objetivo es el
siguiente: Separai· el 6-APA del ácido fenilacético ó ácido
fenoxiacético (según se haya trabajado con penicilina G ó con
penicilina P, respectivamente), que también está en solución.
La extracción liquido-liquido es realizada del siguiente modo: Se
transvasa el 6-APA con el ácido fenil- ó fenoxiacético en solución al
recipiente R3, en el cual se mezcla con aprox. 1000 l de
butilacetato, el cual actúa cotno solvente orgánico.
Aquí existen 2 fases liquidas:
Fase acuosa: Suspensión de 6-APA al 8 % aproximadamente.
Fase orgánica: Butil acetato
Se mantiene una agitación constante durante el proceso, lo cual se

logra con 2 agitadores de tipo turbina coa."tiales (en un mismo eje).
100
Este es un sistema adecuado para obtener una fina dispersión de las

2 fases inmiscibles (Fasano et al., 1994).
Se disminuye la temperatw·a de 28 ºC hasta aprox. 0-1 ºC, y a
continuación se añade ácido sulfúrico (concentración = 70<?t-ó), el cual
acidifica al medio, bajando el pH rápidamente de 7-8 hasta
aproximadamente 2. La reacción con ácido sulfúrico es notoriamente
exotérmica, y ello es la razón para que antes de la extracción se
disminuya la temperatura. Luego de la acidificación con H2 SO4, la
te1nperatura queda en aproximadamente 4-5 ºC.
Se mencionó que el proceso de acidificación debía ser veloz, pues,
la disminución del pH de 8 a 2 implica el paso del pH por el punto
isoeléctrico del 6-APA. Por lo tanto, se debe evitar lo siguiente:
■ Adición demasiado lenta: no se supera el punto isoeléctrico con

suficiente rapidez, por lo cual precipitará algo de 6-APA en este
punto, no logrando la purificación deseada.
■ Concentración demasiado baja de ácido: la variación de pH es
también lenta, y ade1nás puede llegar a un pH > 2 al final de la
adición.
■ Agitación de1nasiado pobre: al pasar por el punto isoeléctrico en
estas condiciones, y bajando hasta llegar al pH 2, habrá
cristalización de 6-APA localizada.
Naturalmente, no se desea que el 6-APA cristalice al pasar por el

punto isoeléctrico, pues, el fin es una separación de fases líquidas
para purificación del 6-APA. La precipitación de cierta cantidad de
6-APA sólo ocasionará problemas adicionales de impurezas
presentes en esta etapa.
Es importante mencionar la imp?rtancia de la agitación:
101
EnR2 :
D = 1,3 m
H de reactor 2,3 m
H de medio 1,0 m
V de medio 13001
V de reactor = 30001
N = 1 s·1
Como fue mencionado, R2 contiene un lecho de enzrrna

inmovilizada, la cual descansa sobre una malla de 250 micras. Esta
malla permite el transvase de la solución acuosa, pero retiene la
enzima inmovilizada, quedando ésta en el reactor como un lecho
permanente.
Luego de la acidificación se detiene la agitación, formándose las 2
fases, y se da unos 8-1 O min para una separación aceptablemente
eficiente en el recipiente de extracción R3.
En cifras, podemos resumir la fabricación de 6-AP A por lotes en

la planta industrial del siguiente modo:
Peso de penicilina (G ó P) inicial 120 Kg

Volumen de agua deionizada en reactor 1300 l
Concentración óptima de penicilina inicial· 110 g/1
Tiempo de reacción 2h
Peso de 6-APA producido en 1 lote aprox. 60 Kg
pH=8
T=28 ºC
102
La eficiencia es de 84 °,o en promedio, la que está de acuerdo con

la eficiencia teórica.
Producción Kg de 6-APA producidos por día

Productividad: Kg de 6-APA producidos
Kg de penicilina por día
Eficiencia Kg de 6-APA producidos
Kg de 6-APA producidos idealmente
Estos 3 factores son los indicadores de la buena ó mala marcha del

proceso. El control de la acth-i.dad enzimática es esencial para
predecir el comportamiento de la producción en los siguientes lotes.
Agitación:
Comentaretnos sobre el sistema de agitación en los reactores:
En Rl: agitador tipo ancla
En R2: agitador tipo Intermig. Para fluidos muy viscosos, este tipo
de agitador presenta problemas de excesiva ,,i.bración. Pero ello no
se da en el proceso en R2, debido a que la viscosidad del medio no
es mucho mayor que la del agua.
El agitador Intermig es un agitador de alta eficiencia, adecuado
para lograr una distribución homogénea de las partículas sólidas. En
R2, hay 2 fases: una fase liquida, de viscosidad un poco mayor que
la del agua, mas no muy alta; y una fase sólida, fonnada por
pequeñas partículas de gel ( de diámetro medio = O, 5 mm) dentro de
las cuales está la enzima inmovilizada.
El objetivo es tener una disttibución homogénea de las partículas del
gel (es decir, de la enz.itna) en el medio de la solución de penicilina,
103
para lograr la má'illtla conversión a 6-APA en la reacción· de

hidrólisis.
Sabemos que un agitador de alta eficiencia, ya sea del tipo de 3
paletas con doblez angular antivortex, ó bien del tipo Intermig
(Figura Apéndice) son recomendados para suspensión de sólidos y
para transferencia homogénea de calor. Por ello es preferido frente
al agitador de tipo turbina Rushton. Esta última es adecuada para
reacciones de lote (batch) rápidas, lo cual no es nuestro caso, pues,
en promedio la reacción de hidrólisis en R2 toma unas 2 h, o a veces
una media hora más.
F . - Alternativas de solución
Actividad enzimática y rendimiento de los lotes.-
Se ha determinado que las razones potenciales, y que de hecho han
sido la causa de problemas en el rendimiento en la formación de 6-
AP A, se pueden agrupar en:
l. Condiciones de reacción subóptimas
1.1 Actividad inicial no adecuada de la enzima PGA.
Eficiencia --�• v0 en R,
v0 en reactor de lab
donde. v0 es la tasa inicial de reacción (UI de PGA i g de penicilina G

de potasio).
Para el diseño del reactor R2, se ha establecido la velocidad
adecuada de agitación con el agitador Intermig de la empresa Ekato.
Ahora bien, una actividad inicial baja de la enzima obliga a
aumentar el tie1npo de reacción. La actividad óptima de la enzima se
104
obtiene a T = 28 ºC y a pH = 8,00. Por lo tanto, es muy impm1ante

lo siguiente:
Ivfantener la temperatura y el pH en los valores anteriores,
cuidando de ello sobre todo al inicio de la reacción. El sistema de
control es semiautomático, con un control automático de la
temperatura (control de retroalimentación PID). Sin embargo,
durante los primeros minutos de la reacción, particularmente
durante los primeros 30 minutos, el control depende en un buen
porcentaje de la acción de control humana.
Acortar en lo posible los tiempos de retraso ocasionados por los
transvases de un recipiente a otro. La penicilina es lábil (se
degrada con relativa facilidad), por lo que tiende a
desc01nponerse con relativa facilidad, aún estando sólo en un
medio acuoso.
Ahora bie� durante el tiempo en el que la enzima inmo,.i.lizada no

es usada (tiempos mue110s, detención temporal de la producción), se
debe cuidar de mantener esta enzima a condiciones adecuadas para
evitar su descomposición. La enzima debe ser lavada con agua
deionizada, y luego:
■ Si el tiempo no es muy largo (<= 0,5 h): mantener la en21tna
suspendida en una solución buffer a pH = 7,0.
■ Si el tiempo es > O, 5 h: suspender la enzima en solución buffer a
pH = 7,0 y a T = 3-4 ºC.
■ Si el tiempo es > 2 días: luego del lavado, retirar la enzitna del
1nedio acuoso y colocarla en recipientes para su refrigeración a T
= 3-4 ºC.
105
1.2 Razón enzima/ penicilina inicial (sustrato) no adecuada

La actividad de la enzima está limitada por el tiempo. Una
actividad inicial demasiado baja del PGA disminuye la
productividad. Y una actividad demasiado alta del PGA disminuye el
tiempo de reacción y awnenta la demanda por el catalizador con la
posibilidad de un uso inefectivo de él. Por ello, se debe controlar la
adición correcta de enzima a R2 para una adecuada actividad. Esta
tarea es hecha con un promedio de adición de 1 Kg de enzuna
inmovilizada (peso bruto, incluyendo al gel inmovilizante) cada 3
meses.
1.3 Estabilidad decreciente de la enzima durante la producción

Las oscilaciones en la estabilidad son producidas por una
oscilación muy remarcada en el pH ó en la temperatura. La reacción
de hidrólisis de la penicilina es una reacción ligeramente exotérmica,
y es conveniente para la enzima no sobrepasar los 29-30 ºC. Por lo
tanto, se debe disponer de un sistema de control de enfriamiento -
calentamiento adecuado. Un serpentín de enfriamiento, como del
que dispone el reactor R2 (ver figura) es un sistema adecuado para
una buena transferencia de calor.
1.3.1 Inadecuada velocidad de agitación

Una mezcla ineficiente aumenta el tiempo de reacción y disminuye la
actividad, pues, la frecuencia de contacto enzima - penicilina
disminuye. El movimiento y el vórtice pueden ser visualizados en la
Figura
1.3.2 Defectos y tolerancias en el control de pH y temperatura

Las desviaciones de los valores n01ninales de estos 2 parámetros
pueden dañar a la enzima.
106
1.3.3 Adición subóptima de amoniaco

El amoniaco demasiado concentrado, al provocar un elevado pH
local (puntual) al ser añadido por apertura de una válvula solenoide e
inyección de Nl-LOH a presión, puede dañar a la enzilna.
2. Calidad subóptima de la penicilina usada

A veces hay exceso de impurezas perjudiciales para la enzima, que
causan su contaminación.
3. Calidad de la enzima debajo del standard aceptable
Aspectos de ingeniería:
Agitación
La agitación de un medio liquido para mantener partículas sólidas

en suspensión es una de las más c01nunes aplicaciones de la
tecnología de la mezcla en operaciones quúnicas. Como sabemos,
los aparatos de flujo axial, tales cotno impulsores de alta eficiencia y
turbinas de paletas inclinadas, son los más apropiados para proveer
los patrones de flujo necesario en un tanque para mantener los
sólidos en suspensión.
El reactor cristalizador R4 contiene una turbina de paletas
inclinadas, 1nas para una óptnna cristalización, con formación
1náxima de cristales agtupamiento desde el inicio, un impulsor de
alta eficiencia podria ser conveniente. El NILOH añadido para la
cristalización a pH 4 cae en forma de un delgado chorro, por lo que
es necesario que los cristales microscópicos de 6-AP A que se van
formando desde el cotnienzo puedan quedar suspendidos hasta la
mayor altura posible.
107
El sistema de Intennig en el reactor central R2, y el sistema de

doble turbina en el extractor R3 son adecuados para las funciones
que éstos tienen (Kipke, 1984; Kipke, 1985; Rehm, 1980). En R4
podría optimiza.rse la eficiencia, pues, un impulsor de alta eficiencia
instalado puede proveer el mismo nivel de sólidos en suspensión a
costos de capital y operativos reducidos.
El Ekato - Interprop es un desarrollo adicional del impulsor de
tipo propuL"or, con 2 aletas en lugar del clásico Intermig de 3. De
acuerdo a infotmación de la compañía, este sistema provee una
1nayor transferencia de calor y de masa, alta dispersión de gotas y
burbujas, distribución homogénea de partículas sólidas, así como
bajo costo de inversión. Se esperaría, si se decide por esta
renovación, una disminución de los esfuerzos de corte (cizalla)
existentes, y que tienden a dañar un sistema con microorganismos o
de enzima inmovilizada. Aun no hay aplicaciones en condiciones
prácticas.
Optimización en el control del proceso

Se necesita dotar de sensores a algunos puntos en la linea de
producción: pHmetro con mantenimiento constante en R4.
Programación del horario de lotes (batch scheduling): se puede
reprogratnar el horario de procesamiento de los lotes para un óptimo
dimensionamiento del proceso, en los casos de variación (aumento)
de la producción, y para optimizar el diseño de la planta, la que ha
estado un tanto sobredimensionada para la producción que se ha
hecho hasta 1995.
Para una solución razonable, determinamos un conjunto de bases
de diseño, el que incluye:
108
Filosofía de operación de la planta: 24 h i día, 7 días i semana,

en 3 tumos de producción por día. i\,1anteniniemto preventivo a
implementar.
Escalamiento de operación.
Tiempo requerido para reacondicionamiento de equipo entre
lotes (batches): carga, preparación y almacenamiento de materia
prima y de soluciones bu:ffer pai·a su carga, recalibración de
instrumentos y sensores (recarga de solución electrolítica para
electrodos de pH), etc.
Contaminación ambiental y calidad total

La empresa tiene la obligación de cumplil- con las Nonnas de
Buenas Prácticas en :tvlanufactura (Giv1P), (Harshberger et al.,
1995), así como con las normas ambientales internacionales. Por
ello, la empresa ha hecho semmanos para los trabajadores al
respecto (e.g. Seminario: Las BPivi en SINQUISA y los
Requerimientos FDA, 1995 -ver Apéndice E) y se hace estudios
para una eficiente y rentable recuperación del ácido fenilacético ó del
ácido fenoxiacético.
El procedimiento, con pruebas aun a escala de laboratorio, para la

recuperación de fenoxiacetato (subproducto obtenible de la
semisíntesis de 6-APA) es: Se trata al ácido disuelto en agua con
NaOH concentrado, y se realiza luego una filtración en vacío de los
cristales de fenoxiacetato de sodio.
109
Aprovechamiento de la capacidad instalada

R2: Volumen de trabajo = 1300 l. Volumen de reactor = 3000 l.
Una :fracción adecuada de ocupación en un reactor es 2/3 (66 o/o) a
/4 (75 °/o), por lo que se podria aprovechar el reactor hasta con 2000
3
l de volumen de trabajo, sin que haya mayores problemas en la

eficiencia de agitación. El costo adicional para una mayor potencia
de agitación es muy pequeño (Fasano et al., 1994).
En R4: dos impulsores de paleta inclinada a 45 °:

Sea
Z = nivel de líquido en el reactor (m)
T = diámetro del reactor (m)
D = Dn.,IPULSOR
Z = 0,8 m
V reactor = 4000 l
V empleado = 2700 1 (cada 2 cargas, cada una de 1300 l, se hace
una extracción)
T = 1,5 m
D = 1,1 m
H reactor = 2,3 m
N = 1,3 s· 1
El valor Z/T actual es O, 8 / 1, 5 = O,53; por lo que estamos a

buena· distancia del límite máximo recomendado para un Re en el
rango de trabajo en cuestión.
Ahora, bien, en los cálculos de ingenieria para mezcla, la variable
U: porcentaje de uniformidad de la mezcla, es una función de una
constante de mezclado, km , donde U es inversamente proporcional
akm.
110
Sea N la velocidad angular del agitador. Entonces, la constante

adimensional kin / N es, en tanques standard con bafles c01no R4,
una función de Re y de la geometría del reactor. Cuando Re >
10000, km es sólo una función de la geometria, y es independiente de
Re. Para condiciones totalmente turbulentas, km puede ser
determinado experitnentalmente a partir de N, D, T y Z con la
siguiente relación:
km = a N ( -
D ", b (-
T \ o.s
1
1
\ T) �z)
Los cuellos de botella para un mayor volumen de trabajo son una

confiable agitación en R3 para una ex-tracción óptima del 6-APA, así
como la capacidad actual de la centrifuga: vibración excesiva a gran
1nasa centrifugada. En el diseño 01iginal, no se proyectó una
producción muy grande. De hecho, el 1itmo de producción actual de
380 Kg de 6-APA/día es más que suficiente para cubrir con el
1nercado de clientes.
H.- Conceptos complementarios. Planteamiento de la solución

Debemos tener en cuenta que los Intermigs causan severas
dificultades por vibración en fluidos altamente viscosos; con todo, se
ha comprobado eficiente en el sistema líquido no muy viscoso
presente en R2, obteniéndose urna dispersión eficiente de la enzima
inmovilizada.
Ampliando el panora1na, en relación específica a la producción de
biomada filamentosa (de hongos microorganismos), la opinión
general es que el reactor tanque agitado (STR) convencional
111
equipado con la usual turbina Rushton tiene severas limitaciones.

Aun así, el STR es todavía uno de los tipos de reactor más
comúnmente hallados, pues, se necesitarla una fuerte inversión de
capital para adquiti.r nuevas y aun no probadas tecnologías de
reactor, comparado con el largo tiempo de experiencia que se tiene
en la tecnología de fe1mentación operando con STRs, y la inherente
flexibilidad de este tipo de reactor.
Como muestra de avance, se ha sugerido algunas modificaciones
menores al S TR básico para mejorar ciertos aspectos de su
performance. Así tenemos e.g. los análisis (Nienow, 1990) de
eficiencia en fennentaciones de micelio. En la Figura 40 podemos
ver tipos comunes de agitador empleados actualmente en reactores !f
tanque agitado.
El agitador helicoidal se ha comprobado eficiente no sólo para el
SSF, como se mencionó en la labor en el LivIB, sino también en
fermentación en medio líquido viscoso como el de pululano
(Choplin et al., 1987). Este agitador ayuda a eliminar zonas
estancadas. (ver arriba).

Validación: el propósito de las cGivIP (BP:tvf) en la e1npresa es
minimizar el 1iesgo de containinación en las personas que maniobran
con y emplean los productos faimacéuticos, y estipulai· los requisitos
mínim:os para asegurar la manufactura de productos de calidad. La
validación es un proceso continuo, que se debe dar pai·a cada
especificación que se desee establecer en la producción, y continúa
durante todo el tietnpo de vida de la planta de producción.
El propósito de los Requerimientos del GIVIP es:
112
a) asegw·ar que el producto tenga siempre la misma calida,

consistencia y seguridad.
b) Asegurar que el producto es manufacturado con
reproducibilidad, con la mínima posibilidad de error.
c) A.segurar completa y extensiva documentación.
Hasta los 1n01nentos previos a mi retiro de SINTESIS QUilvllCA

SA, se estaba coordinando un convenio de investigación y desarrollo
de enzuna penicilinacilasa irunovilizada en gel, con la Universidad
Católica de V alparaíso, lo que signillcará una costosa materia prima
que será ahorrada por la empresa. Ello también significará otro
proceso de validación con las GI\t1P.
En el caso de la producción actual, tanto el proceso de hidrólisis de
6-AP A como el proceso de semisíntesis de los derivados
antibióticos, implica un control específico del proceso en la
purificación ( downstream), mas, aunque parezca curioso, uno de los
procesos centrales, el cual es la reacción química de hidrólisis de la
penicilina en 6-APA, no necesita un control aséptico estricto. De
hecho, no hay una esterilización previa; la FDA no ha desaprobado
particularmente esta f01ma de operación.
Validación
El propósito de las cGl\.1Ps es rrurunuzar el nesgo de
contaminación a personas que empleen productos medicininales, y
estipular los mínimos requisitos para asegw·ar la manufactura de
productos de calidad. La validación rea.fuma con documentación que
el diseño de una planta cutnple con las normas de las cGI\t1Ps. Para
el ingeniero químico, ello significa que cualquier diseño que se
realice debe serrr validado según los requisitos de las cGtvIPs con las
113
especificaciones que se establecen en la planta. Es importante

recordar que la validación es un proceso continuo, y continúa a lo
largo de toda la vida de la planta.
Elementos de validación:
a) Documentación o desarrollo: protocolos, un plan maestro
(master plan) y métodos para colección y evaluación de data;
procedimientos operativos standard, archivos del equipo de
planta (biblioteca); procedimientos de higiene industtial;
procedimientos de mantenimiento preventivo; especificaciones
e.g., standards y limites de pureza de la materia prima y del
producto, y parámetros criticos de control.
b) Calibración de todos los instrumentos.
c) Ingenieria: diagramas de tuberias e instrumentación (P&IDs),
diagramas de equipo; instalación calificada con documentación
escrita (los equipos y los sistemas auxiliares deben estar
instalados de acuerdo al diseño y a las especificaciones), y
calificación operacional.
d) Calificación del proceso: documentación que establezca la
evidencia de la consistencia o la reproducibilidad de la operación
de un sistema.
e) Certificación de entrenamiento de personal: control continuo de
calidad y programas de aseguramiento de la calidad.
Las regulaciones de los Estados Unidos para las Buenas Prácticas en
Manufactura (GivfP), y aplicadas o por aplicar por norma de la FD A
en SINTESIS QUilvllCA SA son:
114
21 CFR 210 cGMP in Manufacturin Processin Packa in or

Holdin of Dru s: General
21 CFR 211 cGMP for Finished Pharmaceuticals
i 21 CFR 600-680 cGMP for Biolo ical Products
(") De concretarse un proceso de fabricación de enzima por la propia

empresa, la regulación 21 CFR 600-680 para productos
biológicos se aplicaría también.
CFR = Code of Federal Regulations
Es conveniente distinguir la diferencia entre la aplicación de las

normas para productos del grupo de medicamentos / drogas y los
productos biológicos. La producción en SINTESIS QUTI\í.lICA SA
está en el rubro de la primera columna: medicamentos/ ch-ogas:
Sustancia activa definida y aislada Bulk(masa) intermedia, a menudo no aislada
Disponible en grandes cantidades Disponible sólo en pequeñas cantidades
Procedimientos de ensayo sentitivos El ensayo puede depender de la actividad

es íficos bioló ica
Manufactura consistente (total Variabilidad _entr� lote y lote
etibilidad
Sin especificación codificada Especificaciones para bulks establecidos
en la Product License lication PLA
visión FDA empieza con la sustancia: Revisión FDA empieza con la producción
dicamento o d de materia rima
R: Centro para la Evaluación y la CBER: Centro de Evaluación e Investigación
,ación en Medicamentos/ D as de Productos Bioló icos
Algunas consideraciones de Gl\llP para medicamentos y productos biológicos

115
J .- Determinación de la performance
Rendimiento teórico de 6-APA: 85 °,-&
El rendimiento es calculado así:
peso molecular de 6-APA

peso de penicilina inicial
Con una carga de 120 Kg de penicilina G ó V inicial, se produce

unos 62 Kg de 6-APA. La performance química es aceptable,
estando el rendimiento cerca al valor de rendimiento teó1ico. La
performance de ingeniería podría mejorar optimizando la eficiencia
de la transferencia de calor y de masa. Para ello, más pruebas de
agitación son necesarias.
La performance en la investigación de recuperación de
fenoxi.acetato de sodio está en progreso.

SINTESIS QlJilvIICA SA sigue una línea de producción según
pedidos de los clientes, por lo que mantiene poco producto en
stock. Un sistema just-in-time gobierna la compra de mate1ia p1ima
-penicilina- y la venta de los productos de la compañía a sus
clientes.
Downstream processing: los procesos de puiificación del 6-AP A
y de los productos antibióticos de1ivados de éste -también
producidos en SINTESIS QUilvllCA SA-, contribuyen con más
de 75% de los costos de producción, lo que es de esperar para los
productos farmacéuticos, debido a la alta pureza requerida en ellos
(A.iba et al., 1965; Atkinson & Sainter, 1982; Rosen & Datar,
1983; Bjurstrom, 1985; Datar, 1986; Cliffe, 1988). Ello es una
marcada diferencia con respecto al SSC.
116

Vemos una proyección en la industtia <le antibiótica: el precio en el
mercado seria estable. Los B-lactamatos en general tienen
acepta1.;ión en la medicina. En general no tiene efecto adverso
secundario, o bien. éste se ha manifestado en minima proporción.
Producción y tecnología de optimización: a largo plazo se pod1ía
hablar de uso de microorganismos inmm,ilizados en la producción
de 6-APA en R2 (la versatilidad de manipulación del E. coli
recombinante lo hace apto para ello), teniendo a la enZ1111a
inmovilizada como un mecanismo auxiliar. Aun cuando unos 150
sustancias de antibiótica son producidas comercialmente hoy en
día, la mayoria de ellas es producida por procesos miuobianos
(Furusaki et al., 1992). En el caso de SINTESIS QUUvIJCA SA.
se puede hablar de una detivación de este proceso, pues, lo que se
emplea no es los microorganismos en sí, sino su enzima, la cual se
ha inmovilizado para un menos costoso proceso de dmvnstream.
· Sin embargo, es importante mencionar este punto, pues, la
penicilina materia p1ima no necesariamente debería ser adquitida
del mercado internacional, sino que con una proyección podría ser
fabticada en una empresa del Pení (actualmente se compra la
penicilina de Brasil y de China).
Uno de los más imp011antes temas relacionados a la producción
de antibióticos empleando células inmovilizadas (,-ivas) es una
continua y estable producción de metabolitos secundarios no
asociados con el crecimiento. Va1ias aplicaciones ya han sido
reportadas (Constantinides & ivlehta, 1991). Uno de los problemas
esenciales para una continua y estable producción de antibiótica
mediante microorganismos iruno\.ilizados es cómo regular la
concentración de sustratos limitantes del crecimiento tales como
oxígeno (Trueck et al., 1990), nitrógeno (Trueck er (i!., 1990),
117
fosfato (Constantinides & ivlehta, 1991; Trueck et al., 1990), y

amino ácido (Chun & Agathos, 1991) para mantener la actividad
biosintética de los antibióticos. Aparentemente, la alimentación
periódica de un sustrato limitante de crecimiento ( Constantinides &
ivlehta, 1991) es una buena estrategia operativa. De hecho, se ha
logrado demostrar (Keshavarz et al., 1990) la producción continua
de antibiótico con una baja tasa de crecimiento usando un mutante
del ciclo de división celular que es sensible a la temperatura.
En el caso actual, se podría hablar de una producción de enzima
(penicilinacilasa o penicilinamidasa) por SINTESIS QUilvIICA SA,
en una proyección análoga a futuro al caso del cultivo en sustrato
sólido en el Laboratorio de ivlicología y Biotecnología.
Futuros prospectos: en el caso de hidrólisis en medio líquido del
proceso en SINTESIS QUiivIICA SA, el sistema con
microorganismos inmovilizados tiene varias ventajas. No se tiene
que adquitir una enzima ya preparada a alto costo, y los efectos
fisiológicos causados por la inmovilización sobre el metabolismo de
los microorganismos aumentan las posibilidades de estabilizar la
proudcción de sustancias químicas útiles. Los efectos de
microambientes fisicos yío químicos sobre los microorganismos
inmovilizados en los sistemas metabólicos celulares serán
gradualmente investigados en fonna más precisa. Los estudios de
interacciones mutuas y relaciones simbióticas entre diferentes tipos
de células inmovilizadas puede ofecer algunas interesantes
aplicaciones.
En el interin, se ha desan·ollado nuevas actividades biocatalíticas
de varios tipos de células. Además, los biocatalizadores serán
producidos por biotecnología de punta, lo que incluye técnicas de
manipulación genética, técnicas de fusión de protoplastos, e
ingeniería de proteínas. Y esta inmovilización también devendrá en
118
nuevas fonnas de control en el campo de la ingeruena de

bioprocesos (Luyben, 1994 ).
Otros aspectos que es importante detallar son la logística y la
cartera de clientes. El saludable signo del aumento del capital social
de SINTESIS QUTh-HCA SA en 1995-1996 es una muestra de la
orientación hacia la calidad para el cliente, lo que ha estado
expandiendo el mercado de la empresa a países en Asia.
119
111. - SOCTTHER.i\l PERl! LTD.: PL4 1.VTA DE LIX I SX / EW
Veamos un diagrama de flujo generalizado de las operaciones y procesos

unitarios en la planta de LIX / SX / E\V:
En los botaderos de sulfuros minerales en Toquepala se realiza lo siguiente:

lixiviación con solución acidulada, llamada raffinate o raff simplemente, a pH = 2,
con riego en aspersión sobre la superficie de los botaderos, cargados con chalcocita
120
Y algo de chalcopirita. Flujo continuo durante 2 meses, luego de los cuales se

procede a un periodo de reposo de 6 meses para promover la actividad y la fase de
crecimiento y reproductiva de los microorgani<;;mos del ecosistema, promoviendo
así la oxidación y la difusión (transferencia de masa y calor).
El ciclo de lixiviación-descanso es repetido indefinidamente en tanto quede aun
una cantidad económicamente atractiva de cobre adicional que pueda ser
recuperada desde una particular sección de un botadero. Para mantener este ciclo y
asegurar al mismo tietnpo un continuo flujo de solución cargada de cobre hacia las
etapas de extracción, aproximadamente un cua110 del área disponible en los
botaderos está en lixiviación en un instante particular, y 3 cuartos están en reposo.
Se espera con la biolixiviación recuperar un 37 - 38 �& del cobre total en los
botaderos en un periodo de 12 años.
El raffinate es bombeado a los 6 botaderos a una tasa nominal de 14000 ga1/min.
Cada uno de los 6 botaderos tiene una o más secciones, llainadas bloques, y cada
una con una línea de tubería troncal y varias subtroncales. Este entramado de
tubería lleva al raff a las tuberías y aspersores a una tasa de 10 gal/día-fr.
Luego de los 2 ·meses de cada tercera lixiviación, se hace un acondicionamiento
('golpe') de ácido; una solución concentrada de ácido es añadido pai·a disolver el
sulfato ferroso (FeSO4 ), azufre elemental (S) y otras sales minerales, los que
forman una capa sobre la superficie de los minerales de cobre. Este 'golpe' de
ácido es necesario periódicamente, pues, de lo contrario las reacciones de
oxidación-reducción de la biolixiviación se detendtian. El lapso de
acondicionamiento es de 2 semanas.
Como se mencionó, a medida que el raff percola hacia abajo por entre los
intersticios en los botaderos, disuelve algo de cobre, fonnando un PLS con una
concentración de cobre de 3, 5-4 gíl. Se estima que un 16 °/o de la solución en los
botaderos se pierde por evaporación y por retención dentro de los botaderos, por lo
que aproximadamente 12000 galímin fluyen a la ex"i:racción por solventes.
121
El PLS es colectado en la base de los botaderos y es bombeado uniéndose con el

PLS de Cuajone, que contribuye con un 14 <% del cobre total que es producido
luego de la electrodeposición.
Hay 3 bloques de extracción-reextracción en cada uno de 3 series en el sector
SX. En los 2 primeros mezcladores - sedimentadores en serie (2 etapas de
extracción), cobre es transferido ( extraido) de la fase acuosa a la fase orgánica. Esta
fase orgánica está conformada por un extractante orgánico especial y un diluyente
derivado del kerosene. La fase resultante pobre en cobre -es decir, la fase acuosa
luego de la extracción de cobre- es acidificada un tanto más con un pequeño flujo
de electrolito de bleeding y es recirculada a los botaderos.
La fase orgánica, cai·gada, es entonces transferida a una etapa de reextracción en
un mezclador - sedimentador, donde el cobre es reextraido de la fase orgánica a la
fase acuosa de elecn·olito. Esta última fase, co1no electrolito "rico', es acidificada
según sea necesaii.o para una buena eficiencia en reextracción. Ello es hecho con
una constante adición de H2S04.
Veamos un resumen de la situación actual en la planta:
RESERVAS DE iVlINERA.L LIXIVIABLlf,:

• En botaderos de sulfuros de baja ley de cobre en Toquepala (0,2 <%): 500
millones de Ton
• Ivlasa de sulfuros por llevai· a botaderos: 150 millones de Ton (0,25 �-ó de Cu)
• Oxidos de alta ley de Cuajone: 15 millones de Ton
BRE\-'"'E DifSCRlPCION DEL PROCESO DE LIXIVIACION (LLX)

TOQlJEPALA:
• Biolixiviación en los botaderos de sulfuros .
• Flujo de solución acuosa para irrigación a botaderos: 14000 galimin
122
i
• Flujo de solución impregnada de cobre (PLS): 12000 gal min. Concentración
de cobre = 4 g,:1
• Cobre de alta pw·eza (99,999o/ó) producido= 115 Tonidía
BREVE DESCRIPCION D�:::L PROCESO DE LIXIVL:\.CION tLLX)

CFA.JONE:
• Trituración, aglomeración y cw·ado de óxidos de cobre.
• Lixiviación en pilas: pads de lixiviación.
• Flujo de solución acuosa acidulada de inigación= 350 gal/min.
+
• Flujo de solución impregnada de cobre = 300 galimin: [Cuz ] = 7 g1 l
+ =
• Flujo másico diario de Cu2 15 Ton/día
BREVE DESCRIPCION DEL PROCESO DE EXTRACCJON POR

SOLVENTES (SX)-TOQl.TE.PALA:
• Alimentación a SX: 12000 gaL'min de PLS.
• El sector SX es un conjunto de 3 trenes iguales y paralelos, cada uno
compuesto de: 2 bloques o etapas de extracción con solución orgaruca
extractante (en contraconiente) y 1 etapa de reextracción (stiipping).
• Recuperación de cobre luego de la extracción-reextracción: 90 °10.
DESCRIPCION DEL PROCESO DE ELECTRODEPOSICION (EW)

TOQl.JEPALA:
• Placas madre cátodos de acero inoxidable (1\-1ount ISA).
• Número de celdas: 122, con 62 cátodos por celda.
• Periodo de formación de placa de cobre: 7 días. Out: 115 Ton de Cuidía.
• Calidad de cobre: excede el Grado A L1\.:1E (Bolsa del 1\.:lercado de 1\.:letales de
London: London Metal Exchange).
123
COSTOS:
• Costos de operación: 50 �,�de los costos de operación promedio en el resto de
la empresa.
• Costos de producción de Cu por lixiviación: $ 0,24 / lb en promedio.
• Comparación: mediante concentración de minerales y fundición el costo es
aprox. $ 0,62 / lb.
• Precio actual de Cu en el mercado mundial de metales: $ O, 77 / lb.
BENEFICIOS DE LA LIXIVIACION:
• Costos notoriamente menores a los de fundición.
• Ausencia de emisión de SOx. En general, un mejor equilibrio con el medio
ambiente.
Al'IALISIS DE LA RENTABILIDAD DE UN PROCESO DE

LLXIVIACION:
• La bioli"avi.ación es un proceso que toma años hasta la degradación de un
botadero. Las pruebas de rigor en columnas deben ser realizadas, de modo que
se concluya que un botadero pueda producir un PLS con buena extracción,
manteniendo al mismo tiempo un consumo relativamente bajo de H2 S04 • Estos
aspectos son los más importantes en el análisis de la rentabilidad económica de
un botadero.
:·:·:·:-r.·:·:···:·:·:·········:············r··r•:-:-:-:-:-:-.-:-:-.-:-:•.•··•t()$tii:Stid�tó$'�M'OXhiiAtltóiif''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''''.'''
Costos de ooeración: reoresentan un 50 % de los costos de coeración en a resto de la empresa
Costo de producción de OJ: $ 0,24 / lb en pranedio
Ccmparación: el costo de producciá'l mediante caicentración v fundición/ refinación: $ 0,56 / lb
Precio actual da ccore en a mercado munctial: $ O, 76/ lb
124
F'U.ERZ.r\ LABORAL:
• Toquepala: 58 personas.
• Cuajone: 11 personas (*l_
• Operadores multidisciplinarios (Técnicos Polifuncionales)
• Organización basada en equipo
• Entrenamiento en skills técnicos
(*> planta de trituración11i-xiviación ácida en Cuajone
Algunos valores comunes en el proceso de obtención de Cu por bioli"Xivi.ación son:

++
PLS con 1 - 5 g/rnl de Cu2
2++
Electrolito rico con 50 g,íml de Cu
++
Electrolito pobre con 3 5 gíml de Cu2
Cobre final con< 20 ppm de impurezas
Algunos aspectos de la quúnica y la 1nicrobiología del proceso de

biolixiviación en los botaderos
Las reacciones pueden proceder sin acción bacteriana, mas éstas son aceleradas
grandemente por enzimas (biocatalizadores) producidas por las bacterias (Torma,
1991). Esta acción catalítica es atribuida al Thiobacillus thiooxidans y al
Thiobacillusferrooxidans, entre otros (Twidwell, 1984).
La mayoria dé aguas minerales de sulfuros contienen bacteria activa. El uso de
esta agua para la lixiviación de soluciones (con ayuda de H2S04 diluido y a un pH
ácido estabilizado) automáticamente provee los cultivos iniciales de bacteria para
lixiviación. Para una óptima acción bacteriana, la lixiviación debe ser llevada a cabo
bajo condiciones a las cuales la bacteria se desarrolla, a saber:
125
pH: 2- 3,5
T: 25 - 60 ºC (estas temperaturas son naturalmente generadas en
las pilas y en los botaderos de sulfuros por reacción exotémrica
de oxidación-reducción -Cathles & Iv1urr, 1980).
Un adecuado suministro de oxígeno: ayudado por el rociamiento
y durante el reposo (Twidwell, 1984).
Iv1ecanismos directo, indirecto y electroquímico:

Los minerales no sulfurados (e.g. óxidos de baja ley en Cuajone) son lixiviados
directamente por una solución acuosa de H2 S04 , en reacciones rápidas ácido -
base:
La lixiviación de minerales sulfuros requiere, sin embargo, un oxidante adetnás

+
del H2 S04 • El más· importante y fuerte oxidante aquí es el Fe3 , el cual es generado
por reacciones bacterianas con 02 del aire:
Los microorganistnos continuan con la oxidación del Fe2+ f01mado
Ahora bien, el Fe3+ f01mado, por ser un fuerte oxidante, oxida al S en la

chalcocita _(Cu2 S), que confonna más del 80 o,,-ó de la composición en el mineral
sulfuro en Toquepala y Cuajone:
126
Vemos que esta reacción produce Fez+ , al reducit-se el Fe y oxidarse el S. Este

Fe2+ es nuevamente oxidado por reacción microbiológica redox, cerrándose así el
ciclo. Hay además un equilibrio entre el H2 SO4 extra formado por las reacciones de
aniba Y el que se pierde por neutralización ácido-base de otros minerales presentes
en el sistema, como e.g. calcita.
El ión férrico es un poderoso agente oxidante, como ya se vió. Por ello, su
presencia en una pequeña proporción es ya suficiente como para generar un
potencial de 400 mV a más, con lo que puede proceder las reacciones redox
microbiológicas para el ataque necesaro a los sulfuros metálicos, y para la
generación del ATP necesario para el metabolismo del microorganismo (éste opera
a condición óptima a Eh de 0,6 V).
El empleo de cloruro férrico (FeCh) como solución acidulada no es
probablemente lo 1nás conveniente, aunque se ha hecho en algunos procesos de
biolixiviación en el mundo. Además de ser corrosivo, se ha comprobado que el
crecimiento de microorganismos como Thibacillus ferrooxidans es inhibido
inicialmente en un medio conteniendo una alta razón de cloruro fénico a sulfato
ferroso. Esta inhibición se debe al reque1imiento de una alta proporción relativa de
iones sulfato para la oxidación correspondiente del hierro. Con todo, se produce
siempre una adaptación por mutación espontánea selectiva en el ecosistema del
volumen de control (Lazaroff, 1963).Sobre los microorganismos del ecosistema
acondicionado en los botaderos de sulfuros (dumps): El típico habitat del T.
ferrooxidans de pH 1,5 - 3,5 no es uno que se desan·olle espontáneamente. Se cree
actualmente (Béchard, 1996) que estas condiciones son producidas por un
consorcio de bacteria actuando en sucesión, el que incluiría al T. thioparus a pH
neutro, dando paso al metallogenium a pH 3,5 - 4,5 (\Valsh & :tvfitchell, 1972), y
finalmente al T. jerrooxidans a pH bajo (ácido).
La actividad metabólica del T. ferrooxidans es dependiente de la temperatura,
con un pico a 30-35 ºC (Roman & Benner, 1973). Asimismo, se ha demostrado

(Leduc & Ferroni, 1994) que las cepas de T. ferrooxidans son sito específicas.
127
mbién presente en los botaderos en Toquepala, por la temperatura también presente

de 50-55 ºC. Este podría ser semianaeróbico.
Así, pues, el conocimiento preciso del comp011amiento de la bacteria es esencial
para entender el proceso del drenaje ácido de rocas (ARD). Y ello es
particularmente certero cuando se realiza ensayos de 'cinética' para predecir la tasa
de ARD en el campo. Sólo si las condiciones de los microorganismos en las
p1uebas (laboratorio) son idénticas a las del campo, puede hacerse una predicción
de campo con cie11o grado de confianza.
SOlTil-IERN PERlJ: PL-L.\Nl'A DE lJIX / SX / EW

L.AZOS DE :FLU"JOS :o:El, SIS�r�-.:1\IIA
--------'T.i!�-�
LJX[VI..t\.CION
BOTADER OS:
TOQUEPALA
.::-_::·
P ILA.: CUAJONE
(
■
SOLUCION
ACIDA Pl.ACAS
DE COBRE
Figura 20
128
Veamos una tabla con velocidades de lixiviación de minerales de Cu con solución

ácida de H2 SO4 :
. ,;; ;;;:;�; ; ; ; ; ;:;�; ;;; ; ;:;; ;:; ;:; ; ; ;;'; ;'.;;;;;'.;';�;';'.;Jiítr:n�r.�i:;::;;;:;;; ;:;;:;,; ;.;::;::,:,:.;.:,:.:.;,:,:.:• ••••;••·•·;,••,••• ••,••:J)�m®::ijrq,nr®��n�•ra�óo.•r�n�P..l•••··••••
carbonatos, sulfatos, tenorita, crisocola varias horas con agitación
cuprita, chalcocita, cobre nativo, bornita, covelita varios meses de lixi viación en pilas
chalcopirita varios años de lixiviación en botaderos
Los carbonatos, sulfatos y algunos óxidos disuelven completamente en H2SÜ4

diluido. Los sulfuros, por otro lado, forman compuestos intennedios y sulfuro
elemental -en el interin de las reacciones de oxidación-reducción. Estos compuestos
+
inhiben el movimiento de los iones Fe3 y del 02 hacia la supedicie aun no lixiviada
(Hiskey, 1986) y tienden a hacer más lentas a las reacciones.
La hipótesis (Hiskey, 1993) es que

a) el Fe del CuFeS 2 lixi\-i.a antes que el Cu, dejando una capa pasiva de CuS 2
metaestable. Por ello, en el repo11e de análisis metalúrgico, el parámetro de
potencial electroquímico es un valor importante a observar. Este debe
mantenerse en promedio en >= 600 mV (0,6 \l) para una buena actividad
microbiológica. Nos referimos a la Figura 35.
b) La lixi'\-i.ación subsiguiente de cobre del CuS 2 deja una capa de azufre
(ama1illenta) recubriendo a las rocas de mineral.
Algunos aspectos de la cinética y el equilibrio en la edracción / ree:1.'trncción

Como se mencionó, la extracción / ree:x.'tracción es parte de las operaciones
unitarias y procesos unitarios de pmificación (downstream).
En la planta, el e:x'tractante usado para el proceso es una mezcla de
salicilaldioxima con cetoxima, al 1O o,..ó aproximadamente, en una solución orgánica
129
diluyente fotmada por una mezcla de derivados de kerosene (con cadenas alifáticas
y aromáticas).
(a) Cargado
l\lolécula de nonil salicilaldioxima y

complejo de Cµ (Dalton et al, 1986).
Dos moléculas de salicilaldioxima se
acomplejan con un catión Cu2+ y
liberan 2 cationes H+
Figura 21
+
El extractante orgánico remueve al Cu2 del PLS mediante la reacción
Extracción
2 RH + cu 2 + + so/- ➔
+
R2 Cu + 2 H + so/-
130
La carga del extractante en la solución orgánica con Cu2+ es favorecida por una
+
baja concentración de iones H en la fase acuosa, y ello no se debe precisamente al
equilibrio químico. Tal parece que el extractante empieza a degradarse a
concentraciones altas de W, tanto en el PLS como sobre todo en el electrolito. El
control de la concentración de W en el electrolito aun pobre, previo a su
enriquecimiento por el contacto con la solución orgánica, es así un punto
itnportante. Como veremos más adelante con el conjunto de lazos de control
diseñados para el volumen de control bloques de SX / Tank Farm (sector de
volúmenes de los fluidos del sistema en tanques), esta concentración, sobre la cual
podemos tener hasta ahora análisis off-line (refiérase Ud. a la tabla de Análisis en el
Apéndice), tiene un control semiautomático. La lógica en este sector es en general:
manener un sistema estable en las concentraciones de electrolito en el sector de los
bloques de SX (electrolito pobre, electrolito rico y electrolito a celdas, 3 puntos que
guardan cierto equilibrio entJ:e sí) con a)'uda de la coordinación humana (sistema
basado en conocimiento); a partir de allí, un control de nivel puede ser realizado
automáticamente, manteniendo al sistema estable.
A.sí, pues, el contacto de la solución acuosa de PLS con el extractante orgánico
resulta en la ex-tracción de Cu desde la fase acuosa hacia la fase orgánica.
Luego de este paso, las fases orgánica y acuosa son separadas por gravedad. El
ra:ff (la solución acuosa ya pobre) es reciclado para lbciviación, en tanto la fase
orgánica cargada es 'desnudada' (stripped) por el electrolito pobre.
La reación de ree:\.'tracción es inversa a la de extracción:
Como se puede ver, la reacción es desplazada hacia la derecha con un aumento

de la concentración de W en el electrolito (el proceso de reextracción es ayudado
por una recirculación de electrolito en el bloque de stripping, S 1 ). Ivlas, recordemos
que no debe sobrepasarse una determinada concentración de equivalentes -ya fijada
por acuerdo según la experiencia en la operación- ácidos so pena de degradar al
extractante, y disminuir a la larga la eficiencia de este último.
131
En resumen, el extractante empleado cumple en general con:

una extracción eficiente de Cu.
Un eficiente 'stripping' al electrolito.
Una extracción selectiva, sobre todo frente a presencia de Fe.
Una aceptable cinética.
Una buena solubilidad en un diluyente kerosénico.
Una rápida transferencia de masa.
No absorber H2S04 •
Ser estable y no dañino (en grado sumamente riesgoso).
:t\ifencionemos reactivos adicionales empleados en la extracción-reextracción y en
la electrodeposición, además del compuesto orgánico diluyente y del extractante
(LIX 984):
Galactasol ("Guartec'): compuesto orgánico que protege a las
placas madre de contaminación y ayuda a una deposición de
cobre sin excesivos nódulos de potencial cortocircuito.
Sulfato de cobalto: inhibe el desgaste de los ánodos.
- -Cera: evita incrustación de cobre en el filete inferior de las
placas madre.
Arcilla: ayuda en la operac1on de filtración, adsorbiendo
impurezas semisólidas (crud).
El Fe es un contaminante cuya presencia debe ser siempre controlada en el

proceso. De hecho, una parte en masa de Fe por cada 1000 de Cu es transferida
(Kordosky et al., 1987). Por ello, hay un retomo de masa de Fe con una paite de
electrolito pobre hacia la solución de PLS. Esto mantiene una acidez más o menos
constante en el PLS para su postetior aplicación a los botaderos, e"\itando al mismo
tiempo la acumulación de Fe en el sistema de ex'tracción í reextracción y
electrodeposición.
.J
132
El mezclador-separador ('sedimentador') crea una dispersión y un subsiguiente

flujo tipo laminar deesta dispersión hacia delante, para una transferencia de masa
con ayuda de un tiempo de residencia� durante el cual
Se trata de evitar un entrampamiento de gotillas de una fase en otra. Una
agitación más o menos lenta ayuda a ello. Se ha visto adecuada la siguiente relación:
70
donde
(O rpm
DrMPELLER : diámetro (m)
Dirección / sentido de flujo
, ,;: ¡ :¡; ¡.;:,¡¡.m:: ,; ,·, :·, !.:!•·•,•.•·-· ,.......,...,.,.....

. ,.. . . ,. . . .. .J .t . t i JL .• . ... . .U! J tm ctt .,!/!:!/:! itt !!/! !:i: :·¡(•
!vlixer ·\,, . .,, . 8 1
Emulsión: perfil de separación
Figura 22
Corte de perfil transversal de flujo: settler
133
Con reductores de velocidad en los motores, se mantiene una agitación

regularmente lenta en los mixers en la planta (40 - 60 rpm).
Agitador tipo turbina modificada, de la empresa Lightnin

Tiempo de residencia en mixer: 1 min
Tiempo de residencia en settler: 1O min
(la sepai·ación de fases en el laboratorio se produce en 1 a 2 minutos -Kordosk")' et

al., 1987)
Operación en orgánico continuo:

En general, se opera en orgánico continuo (razón O/A>= 1). Recordemos que los
mezcladores sedimentadores pueden ser operados en acuoso continuo o en
orgánico continuo. No es deseable tener gotillas de orgánico en el líquido acuoso,
pues,
a) el orgánico en el raff tiende a quedarse en las pilas de lixh,i.ación;

b) el orgánico en el electrolito tiende a contaminar a los cátodos en la nave de
electrodeposición.
Por lo tanto, lo más conveniente es tratar de mantener la relación O / A lo más

cercana posible a 1, con un margen de seguridad de +0,15 como adecuado.
El extractante LIX 984 tiene la siguiente capacidad ex1:ractiva:
¼ Kg de cobre por m 3 de fase orgánica por cada 1 % de LIX 984 en el

orgánico
Actualmente se emplea un 11 % de porcentaje en volumen de e)..'1:factante en la

solución orgánica.
134
Algunos aspectos de la quimica de la electrólisis: electrodeposición

Los cátodos son placas 'madre' de acero inoxidable 316L. Recordemos la
reacción neta redox de electrodeposición:
Como vemos, aparte del producto adicional oxígeno, que va a la atmósfera, se

regenera H2SO4 en la solución de electrolito ya pobre, reciclándose en el circuito.
El potencial eléctrico necesario para la electrodeposición del cobre es
aproximadamente 2 V, comparado con 0,3 V para la electrorefinación.
Voltaje teórico para la reacción redox 0,9

Sobrevoltaje: deposición de 02 0,5
Sobrevoltaie: deposición de Cu O 05
Resistencia eléctrica a la densidad actual (200 A/m 2) 05
Al ser el voltaje directamente proporcional a la energía, la energía requerida para

la electrodeposición es también considerablemente mayor que la reque1i.da para
electrore:finación: unos 2000 K\V-h / Ton de cobre en el primer caso frente a 300-
400 K\V-h í Ton cobre en la electrorefinación.
Notemos también otra diferencia entre electrodeposición y electrorefinación,
además del voltaje: se emplea ánodos de aleación Pb-Sn-Ca, precisamente por ser
resistente al alto voltaje, y no doblarse fácilmente, además de f01mar una superficie
no propensa a desintegrarse, lo que evita la contaminación de los cátodos con
135
plomo. El doblez de un ánodo puede causar corto circuito por contacto con el
cátodo, con pérdida consecuente de energía.
l\1aximización de la pureza del cobre

Las 2 principales itnpurezas en la deposición de los cátodos son el Pb (de la
contaminación del ánodo) y el S ( del entrampamiento de electrolito y del PbS04
producto de corrosión). La pureza del cátodo es maximizada por:
a) cátodos rectos verticales equidistantes y ánodos sin contacto ánodo-cátodo;
b) ánodos inertes estables con productos de con-osión coherentes;
c) remoción frecuente de productos de cmTosión de la base de la celda;
d) electrolito libre de sólidos y de orgánico;
e) flujo continuo y tibio (46 ºC es buena temperatura) de electrolito puro a través
de todas las caras de los cátodos;
f) empleo de agentes aditivos (e.g. galactasol), que dan depósitos con una fina
superficie;
g) Lavado de los cátodos justo después de su cosecha.
En cuanto a los cátodos, actualmente se está prefiriendo el uso de acero

inoxidable en lugar de la delgada placa iniciadora de cobre de antes. El uso del
acero se justifica porque:
a) el cobre formado llega a ser más puro,
b) la labor manual es menor,
e) la productividad es mayor,
d) el requisito de energía es menor.
Con estos cátodos, los electrodos pueden ser colocados muy cerca unos de otros,
y la eficiencia de coniente llega a ser alta (en promedio, 93 �-�)- Así también, se
puede operar a una alta densidad de corriente.
136
Con todo, para el empleo del acero inoxidable se requiere una alta inversión
inicial que incluye una línea de deslaminado (línea de producción 1'v1ount ISA,
original de Australia, y que se ha probado eficiente y reductora de costos).
l\1ejoramiento de control en el sistema : hacia una planta virtual

Hay un esquema establecido de automatización progresiva en la planta. Ellos se
incluyen en los objetivos de cada año en la planta, y la acciones son coordinadas
con al Area de l'vlantenimiento. Un esquema óptimo de control puede ser
establecido, de modo que además del control clásico de retroalimentación, se pueda
establecer otros
Costos indirectos
28%
Costos directos
72%
En los últimos meses:

Costos directos $ 0,16 / lb
Costos indirectos $ 0,07
Costo total de producción $ 0,23 / lb
Precio actual del cobre en el mercado mundial = $ O, 75 / lb
Figura 23
Costos de producción: cobre por lixhiación
137
lazos más eficientes con la base de data acumulada desde su inicio de operación en
Setiembre 1995.
Veamos algunas acciones de control diseñadas para un sector específico, a
implementar en c0110 plazo, en coordinación con el Area de I\1antenimiento
(Inst:tumentación):
Acciones para el control en la concentracion del sistema y en el

nivel del TK-06 .-
El TK-06 es un almacenador de electrolito rico, tal como se puede ver en los
diagramas de flujo mostrados. No hay aun un control automático del nivel en este
reservorio. A continuación se puede ver algunas pautas para hacer este control de
modo efectivo.
Se señala los mecarusmos de acción final para un control óptimo. La

demost:t·ación es teórica, por cuanto queda aun pendiente la instalación final de unas
válvulas de control, reprogramado en el área de 1Vfantenimiento.
En los diagramas adjuntos se muestra las acciones a tomar sobre las válvulas
de control en el sistema (ver informes anteriores como referencia adicional).
Situaciones: Se puede producir 2 situaciones:

'.•'·
• Nosotros podemos variar el set point del flujo de bleed en el sistema. Ello
es una 'perturbación' que puede ocunir, y de hecho ocurre con cierta
frecuencia (es una operación manual normal que · 1 vez por día nosotros
variamos el bleed en +/- 1 gal/min en cada tren de SX por ejemplo). En este
caso, debemos tomar las acciones necesarias para mantener el equilibrio en el
balance luego de un tiempo ptudencial, manteniendo constantes las
concentraciones de ácido y cobre en el sistema (esto último se hace en forma
semiautomática: ver nuestro Reporte de Análisis Puntuales, en el Control
Room).
138
• Nosotros podemos variar el set point del porcentaje de nh-·el en TK-06

según nuestro deseo, y según los flujos presentes en nuestro sistema (un
porcentaje adecuado en un tanque de ahnacenamiento es, como sabemos, de
75o/ó; eventuahnente se irá aumentando el porcentaje de nivel SET POINT
según nuestra capacidad).En este caso, debemos alcanzar el nuevo nivel en un
tiempo prudencial y sin alterar mucho el equilibrio en el sistema.
Lo arriba mencionado se expresa en los diagramas adjuntos más adelante. El fin de
estos diagramas -lazos relativamente simples con sus respuestas dinámicas- es dar
una vedficación teórica de la eficiencia en estabilidad, robustez y tiempo de
respuesta de los mecanismos de control final llevados a cabo mediante los
algodtmos descdtos.
■ El control de nivel en TK-06 implica un sistema esclavo de regulación de flllios

en sector de SX, mas con la necesaria y siguiente restricción: mantención de
una concentración adecuada de cobre y de ácido en el sistema (en el ER, E \V y
EP).
■ No se hace por el momento un enlace vitiual de un bloque mayor, como lo
podria ser la concentración en linea automática con el nivel, pues, el control en
concentraciones es semiautomático, con análisis oflline, que no hacen factible
aun este enlace. Se mencionó antes el carácter semiautomático en el control de
las concentraciones en el sistema del electrolito. No hay por el momento una
forma adecuada on line de medición (y consiguiente control) de estos valores.
Un electrodo redox podria damos un valor de [Cu2+], mas no hay una relación
matemática directa con [I-(] -además hay vadación en la ley de PLS-, por lo
que es más conveniente gobe1nar entretanto al cobre mediante la IR de
electrodeposición. Actuahnente [Ir]ER = 140 g1l es un valor aceptable, para
42000 - 43000 A de intensidad actual de corriente en la nave. La densidad de
coniente es también un parámetro importante para medir la 'fuerza' que está
siendo aplicada sobre cada electrodo ánodo-cátodo:
lJ9
.Fig•u.ra 24 ·
'.;"': ·- -lw•'" · .,;. ·--�- ��--r
.....1�-· 'L • -·· ....
sou·THE·RN. PER(J: PLANTA DE L[X / sx / EW

ESQlJEMA DE FLU.JOS EN VOLlJMEN DE CONTROLr-----------,
ácido
A•. agua
AGUA ACIDO EVAPORACION
.. ..
.... ....... ........
� .. ..- Electrolito rico
ElectroUto pobre
···· ················ ••• •
..
•· SO con electrolito
•
· •••r••·••••••
•·• •••••·••··••••••·••··•
. • ··••••••·•• •·•••·
•·••••• ·••·••••• � •
•• .............. ..
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- ■■••••••·•••·······••·· ·•
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.. -
1¡¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡�¡ �¡�liiiiilili ii�¡ ¡�¡¡¡ ¡�¡�¡�¡�¡ �¡¡¡ ¡ �¡�1l�s.liik�jfü¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡¡¡¡ ¡ ¡¡¡¡1
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AA
c11: t1 1 1!/:l:1 1HHl1 uiH1:¡iwH:HmH11 1 1 11n:1!i:1:n
NETWORK ETHERNET:
A
SUPERINTENDENCIA/
COORDINACION DE
GUARDIA/
MANTENIMIENTO/
METALURGIA
16 PLCs
Figura 25
142
Condiciones / restricciones
Para cada una de las 122 celdas actuales en serie (por supuesto, la expansión
actual de celdas que está en pleno desa1Tollo no afecta el valor de I aplicado)
tenemos:
2
Densidad de corriente = .1_ = 42500 A = 337 A/m
2
A 63 placas/celda x 2 m /placa
■ Situación de retrolavado en filtros (backwash): nates de la electrodeposición se

realiza un retrolavado automático de los filtros de electrolito. Acción probable
de control: desactivar al sistema. Dirección de desactivación: a fijar. También se
podria variar el control no señalando limite superior máximo de nivel en TK-06,
lo que es menos aconsejable.
■ Situación de desborre: el desborre es la limpieza de lodos residuales del desgaste
de ánodos. En este caso, al suprimir la intensidad de corriente en 2 celdas, la
acción óptima sería desacti:var al sistema para evitar un mayor desequilib1io.
Regulamos el Fbleed SET POINT:
143
Estas ventanas operan siempre, ya sea que el sistema esté activado o desactivado.
I\-1aniobramos el fl�io de bleed en este último caso por 2 h para un desborre. A.niba
se colocó 1 O gabnin como un valor aceptable de set point para este tiempo. Luego
de 2 h se reactiva el sistema de control.
Algoritmos de control
■ Se hace el control en cada uno de los 3 trenes en igual forma. Los set points
maestros (de nivel en TK-06, de flujo de bleed / TA, flujo de bleed / TB y flujo
de bleed / TC) son de ingreso independiente.
■ Se regula el flujo de água y de ácido (slave) en cada tren, de modo que se
mantenga una concentración similar a la del electrolito rico ( es decir, para que la
concentración en el sistema no vade).
■ Se regula un segundo control esclavo en cascade, de flujo de recirculación, para
mantener el nivel adecuado en los trenes de SX.
DIRECCIONES ELECTRONICAS DE SEÑALES DE PLC ACTIVADAS

'ABIERTAS) PARA LECTURA.:
fli��tiíd(Ha!éifl!liHiiJi�Hi H}HHU{¡/!H/HllHr�iii��ñ:HH:W}H:H:l!tHn -:::HtJífül1mfü¡¡�füd;i1i/!iH
Acldo/TA N37:34 FIT3180
Agua/TA N21: 1 O FIT3190
Bleed/TA (falta address en PLC) FIT31100
Rec./TA N17:58 FIT3135
Acido/TB N37:35 FIT3280
Agua/ TB N21:4 FIT3290
Bleed/TB (falta address en PLC) FIT32100
Rec. /TB N18:58 FIT3235
A e Ido/TC N48:8 5 FIT3380
Agua/ TC N21 :8 FIT3390
Bleed / TC N48:94 FIT33100
Rec./TC N19:58 FIT3335
144
Estas direcciones son de entradas: la dirección en el flujo de ácido en TA indica

que la conexión está en la tarjeta (slot) 37, entrada analógica 34 de esta tarjeta.
Se emplea ta1jetas Allen-Bradley de entradas y salidas analógicas y digitales, en
modo de intensidad de corriente de 4 a 20 mA (rango Standard inte1nacional).
P&ID diagrama de tuberias e instrumentación.

SENSORES Flls FICsFLUJO
FLUJO FLUJO VALVULAS CONTROL
ACIDO:
ACIDO: ACIDO: FLUJO ACIDO:
FIC3180
FE 3180 Fil 3180 FV3180
FIC3280 FV 3280
FE3280 FIT3280 FIC O li''7 't 'tQO
FE3J80 Fil 3380
-,l!t .,.,.,'.: ,_
:. ! , ,, ,
" : ]lli
"
:; 1!'.:
FICs
!i:11 FICsFLUJO
VALVULAS
CONTROL FLUJO
::
RECIRCULACION RECIRCULACION
FLUJO (ELECTROLllO):
¡¡,:'.'.'
AGUA: (ELECTROLllO):
FIC3190
:
;111 FIC3135 FV 3135
FIC 3235 FV 3235
FIC3290 � li'lí' ·n\� li'V 1·n�
FIC 3390
FITs/FLUJO DE
SENSOR TK-06/ RECIRCULACION
NIVEL (ELECTROLITO):
NIVEL TK-06 CONTROL DE
REAL(%) FIT 3135
(presión NIVEL:
TK-06: FIT 3235
diferencial): LIC4000
PNt6 FIT 335
LE4000 (MASTER)
SENSORES/FLUJO
RECIRCULACION
(ELECTROLITO):
FE 3135
FE3235
li'l'i' '1'1'1�
146
Los siguientes gráficos ilustran las respuestas simuladas de control para la

instrumentación a añadir en el sector SX:
(a)
(b)
Figura 18
Simulación de
respuesta en sistema
de control TK-06
147
(d) Perturbación:
+1 gal/minen flltjo de bleeding
por tren
·Master: acción de V agua
(e)
/1 Oltjo de
agua en cada
váhrula
(gal/mio)
(f)
148
Varia�en
fl-.qo.de
recirculación en
cada válvula
(gal/min)
(g)
Perturbación:
+t �::: !��::: �:
b iling
1lrn1I:
== . • .
íHHliiH¡ Sfavp� �N"iñn dP. V rH"irrnfariñn
¡;¡¡r;c1;, m�mrmm�1r�· · 1f "J · · · ·... .::�) ..
t(min)
149
% apertura
adicional en cada
válvula de
recirculación(en
cada tren)
(j)
t(min)
tren
(gal/min )
(k)
t(min)
(1)
t(min)
150
Variación en
de recirculación
en cada tren
(gal/min)
(m)
t (min)
J.'ij
SISTEMA DE CONTROL
CLOSED LOOP: RESPUESTA DINA.MICA DE NfVEL EN TK-06
C' AJ\;ffiIO EN LOAD (FLUJO DE BLEED EN LOS TRENES): delta"'+ l gal:min en cada tren
\.\,1TH C ASCADE LOOP
Step Input:
load
delta=+ 1
(válvula de control)
RDwvalve Gpbleecl
Fbleecl(s)
PNt6sp(s)
,_,__�--,------�-:��:!----1------------------ PNt6(s¡
Step Input: 1 Sum2 Gcagua -- - - - ..-- s �
, Ul!L RDPNT6
servo Gfagua Gpagua ....
clelta=0
RDavalve
Facido�sp(s) -► [
-��-��:��a�ido(s) ....
- - - -
Gpacíclol Su . ,� ¡ RDFac1do
1 --► rnl Gcac1do Gfacido Gpactdo_ ¡
----------◄•-------------__j
Ftrsp(s) 111'
_ 1111111111
-I •--
Gmacido
RDrvalve
Fr(;) ...._ Fr(sJ
Gprl RDFr
Gpr2
----- 41 ----------------
Gcr Gfr
1 • - -- .,... 1
Gtm
Grnt6
Figura 26
152
SOLTHE.RN PE,RU: PLANTA. [JiE LIX ! SX / E\:V.

DIAGRAMA. DI lNSTRUM.ENTA.CION Y CONTROL: P&ID
CONT.R.OL DE r,;·1v1;;1, EN TK--06 Y CONCENTRACION
li!J¡� ¡ ¡ :¡�¡ ¡� ¡�ll�i�i � li� !I� !

1
1
1
ffic"-1 ----, ---------+�·�·��---------�----------+=��·��'-l

----------..,
� : ¡- - - -
1
rfiT\
1
1 1
1
1
�
�----,
1
1
1 1
rffi\
�
1
1
(FIT\ �
�
POBRE (RAFF)
Fi20ra 27
... -· -·. --- ·----· _ ..___ --�-· .... ---- --- •·· - ------<- -----�----·----:;---�·····,r-f•.---,.
.....�•,,.-.-..::--..,..--
153
Veamos la secuencia adecuada de los algoritmos del sistema ( en lenguaje simple,

traducible a instrucciones ladder):
// Activation / desactivation // Input false / O, ... to desacthrate: address

B... (to be defined)
// Recordar: Válvulas en OFF: normally CLOSED. Válvulas de control
LINEAL //
T = Step time = 5 // seconds //
// CONTROL DEL SISTE1\1A PARA UNA VARL\CION DE FLUJO DE

BLEED //
Read (address de bleed TA), (address de bleed TB), N48:94 // lectura

individual de Fbleed en Tren A, Tren B y Tren C //
Read F8:21 // Altura efectiva de TK-06 //
Read N21:10 // Flujo de agua Tren A //
%AV\VTA = 100*N21:10/52 // Porcentaje de apertura de VaguaTA //
Read N21:4 // Flujo de agua Tren B //
%A'\l\VTB = 100*N21:4/52 // Porcentaje de apertura de VaguaTB //
Read N:21:8 // Flujo de agua Tren C //
%A\T\VTC= 1-00 "' N21:8/52 // Porcentaje de apertura de VaguaTC //
Read N37:34 // Flujo de ácido Tren A //
%AYA.TA= 100*N37:34/15 // Porcentaje de apertura de VacidoTA //
Read N37:35 // Flujo de ácido Tren B //
%AVATB= 100*N37:35/15 // Porcentaje de apertura de VacidoTB //
Read N48:85 // Flujo de ácido Tren C //
%AVATC = 100*N48:85/15 // Porcentaje de apertura de VacidoTC //
Read N17:58 // Flujo de recirculación Tren A //
%AVRTA = 100*N17:58/6000 // Porcentaje de apertura de VrTA //
Read N18:58 // Flujo de recirculación Tren B //
%AVRTB = 100*N18:58/6000 // Porcentaje de apertura de VrTB //
Read N19:58 // Flujo de recirculación Tren C //
%A'\lRTC= 100"'N19:58/6000 // Porcentaje de apertura de VrTC //
i= time // (in seconds) //

If (FbleedsPt -Fbleedspt-5 > O) then j = O else
if (Fbleedspt -FbleedsPt,-5 < O) then j = 1 else
if (Fbleedspt -Fbleedspt-s = O) then return
k= abs(FbleedsPt -FbleedsPt-s)
begin
154
// Activación de válvula de agua 1/

For n=O to 24: t = nT: %AVWTAsp = (-1:Y *k*40*t+ %A \-'"\\'TA
%AVWTBsp = %AVWTAsp
%AVWTCsp = %A ·vwTAsp
For n=25 to 72: t = nT: %AV\\.TAsp = (-lY *k*(16*t+ 0,45)+
%AV\\lTA
%AV\VTBsp = %AV\VTAsp
%A '\l\VTCsp = %A V\VTAsp
For n= 73 to 120: t = nT: %AV\VTAsp = (-lY *k*(5*t+ 1,15)+
%AV\VTA
%A\l\VTBsp = %A '\l\VTi\.sp
%AV\VTCsp = %AV\VTAsp
For n= 121 to 192: t = nT: %AVWTAsp = (-1:Y *k*(0,8*t+ 1,55)+
%AV\VTA
%AV\VTBsp = %AV\VTAsp
%AV\\tTCsp = %AV\VTAsp
// Activación de váh,1da de ácido 1/

For n=0 to 48: t = nT: %AVATAsp = (-1)1 *k*9*t+ %AVATA
%AVATBsp = %AVATAsp
%AVATCsp = %AVATAsp
For n= 49 to 72: t = nT: %AVATAsp = (-lY *k*(4,5*t+ 0,15)+
%AVATA
%AVATBsp = %AVATAsp
%AVATCsp = %AVATAsp
For n= 73 to 120: t = nT: %AVATAsp = (-1)1 *k*(2*t+ 0,32)+ %AVATA
%AVATBsp = %AVATAsp
%AVATCsp = %AVATA.sp
For n=l21 to 192: t = nT: %AVATAsp = (-lY *k*(0,5*t+ 0,47)+
%AVATA
%AVATBsp = %AVATAsp
o/oAVATCsp = o/oAVATAsp
// Activación de válvula de recirculación 1/

For n=0 to 24: t = nT: o/oAVRTAsp = (-lY *k*0,38*t+ %A\''RTA
%AVRTBsp = %AVRTAsp
%AVRTCsp = %A\''RTAsp
For n=25 to 48: t = nT: %AVRTAsp = (-lj *k*(0,2*t+ 0,003)+
%AVRTA
%AVRTBsp = %AVRTAsp
%A\''RTCsp = %AVRTAsp
For n=49 to 72: t = nT: %A\''RTAsp = (-lj *k*(0,1*t+ 0,007)+
o/oAVRTA
%AVRTBsp = %AVRTAsp
155
%AVRTCsp = %AVRTAsp
For n= 73 to 120: t = nT: %AVRTAsp = (-1)1 *k*(O 04*t + O 011) +
' '
%AVRTA
%AVRTBsp = %AVRTAsp
%AVRTCsp = %AVRTAsp
For n= 121 to 192: t = nT: %AVRTAsp =(-1)1 *k"'(0,04*t + 0,0145) +
%AVRTA
%AVRTBsp = %AVRTAsp
%AVRTCsp = %A\-'RTAsp
// se repite el ciclo de barrido en lapsos de 5 segundos//
El siguiente recuadro resume una lista de instrumentos adicionales

por adquirir o ya comprados (compra directa): Requisición de
equipo; labor de logística: de almacén y por compra.
;·_·¡·¡·¡·¡·¡·¡·¡:¡:¡:¡:ó, ¡ ¡ ¡ .:.:. ._._:¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ i i i i i i i i in&tiiümeíi. ·.:.:.:_·_·_·_·_:_·_·_·_·_·_·_-_;_;_'._-_:_

Sensor ultrasónico de nivel Milltronics
Indicador/ transmisor de flujo Micro Motion (Elite)
Indicador/ transmisor de flujo Rosemount para línea de agua
Transductor electropneumático Fisher/ Rosemount 546S, para válvula de control
Flujómetro de masa Micro Motion (para línea de 1")
Válvula de control Fisher de 1"
Flujómetro magnético Deltaflux / Altometer - Sliedrecht, para lineas de 1" y de 2"
Válvula de control de flujo Masoneilan/ Camflex 11, de 1"
Flu"ómetro ma nético Foxboro, ara línea de 2"
156
Aspectos de ingeniería:
H .- Conceptos complementarios. Planteamiento de la solución

Estructura base impermeable para control ambiental en los
reservorios de solución orgánica (e:,,,,.1:ractante) y acidulada ( ácido,
PLS, electrolito ): superficies o liners de IIDPE son el material
principahnente empleado para mantener un control hennético de los
volúmenes líquidos contenidos en la planta. Bajo los botaderos de
sulfuro no hay una capa de liner, con todo, se recupera un 85�i) de
lo que ingresa, perdiéndose el 15�-'ó restante en evaporación y en
filtración fuera del volumen de control de interés. Un monitoreo
constante de los alrederores es hecho para determinar el impacto
ambiental.
La Figura 28 nos ilustra la estructura de recubrimiento típica en el
át·ea de trabajo.
Liner de HDPE + capa

geotextil
Material de empaque
Clase 1
Material de relleno estructural

compacto
Figura 28
Estructura básica de recubrimiento con liner (pozas de PLS)
157
Planteamiento de soluciones: reducción de costos / economía

Biolixiviación / microbiología
Cultivos en medio 9K han sido hechos. Se continuará con los
ensayos microbioógicos de fisiología, producción y morfología
(identificación) de microorganismos con medio Sulfolobus. En la
planta se puede hacer análisis químico, para lo cual se ha
diseñado procedimientos de operación para la determinación
confiable del contenido metálico en solución. También se puede
detenninar la densidad de población microbiana. Gracias al
contacto con. y a la buena disposición del Ll'vIB y del
Laboratorio de Virología del CIP, se puede continuar con el
análisis bioquímico (DNA polimerasa). Ello es de hecho un
objetivo: determinar los microorganismos plresentes en el
ecosistema de Toquepala y Cuajone, lo cual no se conoce a
ciencia cie11a aun.
Al parecer, habría también cepas de Su.ffolobus sp. o Suffobacillus
sp: Presentes en el sistema, debido a las temmperaturas de 55 ºC
registradas tan sólo a 15 cm de profundidad. Es casi seguro que haya
por lo tanto microorganismos mesofilicos y.to termofilicos.
Extracción - reertracción:
Se dispone de un diagrama :tvlcCabe-Thiele de desempeño del
extractante empleado actualmente. (la que nos ilustra el número
de etapas adecuadas para una óptima ex.'1racción de cobre desde
el PLS.)
Análisis de la tasa de evaporación de la solución orgánica: En

realidad, nos referimos aquí a la tasa de evaporación de la
solución orgánica diluyente, pues, el extractante. una cadena
polimérica larga, casi no se evapora en el rango de temperatura
158
de operación. Es importante determinar este valor con relativa

exactitud, pues, éste representa una pérdida en el volumen de
control que debe ser repuesta con un flujo adecuado constante,
de modo que se mantenga la concentración adecuada de
extractante en la mezcla (el extractante, una cadena polimérica
larga, casi no se evapora en el rango de temperatura de
operación) para una extracción eficiente. Recordemos que el
e:x-tractante está irunerso en la solución orgánica diluyente. Se ha
hecho pruebas para determinación de la tasa de evaporación de
la solución diluyente (pérdida hacia el medio ambiente en el
volumen de control)., en recipientes con superficie expuesta a
ambiente y con una leve agitación, que dé un patrón energético
de movimiento similar al del flujo laminar de la mezcla por los
mezcladores, en los bloques de sedimentación y en los
vertederos. Algunos resultados son:
T = 32 ºC (aproximadamente constante)
Pruebas de evaporación en recipiente
2575,2 O, 75 7,6 0,827 11,94 0,167

2567 1,67 15,8 0,827 11,97 0,156
2539,8 4,71 43 0,827 12,1 0,15
2527,3 6,58 55,5 0,827 12,16 0,139
2516,2 7,65 66,6 0,827 12,21 0,143
Flux promedio de pérdida - 0,151 gal/día-m 2
Este resultado parece ser confiable, habiendo además resultados de otras pruebas:
159
Flux promedio (a)= 0,14

Flux promedio (b) = O, 13
El extractante empleado se muestra óptimamente eficaz a 32 ºC. Además, a esta

temperatura, se logra un equilibrio adecuado con la temperatura del electrolito al
fluir hacia la nave de electrodeposición; el electrolito no debe estar sobresaturado
para la concentración de ácido, el que a su vez está en equilibrio con el cobre, pues,
de lo contrario habda cristalización no deseada en el electrolito.
Los bloques de ex'tracción / reestracción y los tanques donde hay solución
orgánica tienen un adecuado techo y recubrimiento en general, para e,,itar en lo
posible la transferencia de masa por evaporación y convección.
Por lo descrito, la pérdida actual de solución orgánica a la atmósfera es algo con
lo que contamos, mientras se estudia cadenas orgánicas más estables a las altas
temperaturas.
Se ha verificado además que el efecto de la adición de diluyente en tandas
intermitentes de gran volumen tiene un efecto oscilante que puede durar hasta 5
días, hasta que la concentración de extractante se equilibre en forma homogénea.
Por ello, es conveniente añadir diluyente en forma continua, y a una tasa de 0,1
gal/minen nuestro caso particular. Ello es lo que se hace precisamente.
No se conoce muy bien la cinética de reacción de la oxima LLX 984NC
empleada, de la empresa Henkel Corp. Esta es en realidad una mezcla de oxima
cetónica con salicilaldioxima a una razón tal que se combina la gran fuerza de
extracción de la salicilaldioxima con la capacidad de donación (stripping) de la
cetoxima. Con todo, se proyecta analizar más este aspecto de la eficiencia, para una
posible reducción de costos si se opta por comprar extractante a otro proveedor,
que puede ser de Perú.
160
Efectos del calor en el sistema de los botaderos de sulfuros.-

Sabemos, además, que la ventaja de los microorganismos usados
en sistemas de biolixiviación frente a sistemas convencionales de
reacción química es que los microbios aplican la energía disponible
de modo más preciso donde se necesita, ya sea directamente sob1·e
el mineral de interés o catalizando eficientemente la producción.
El rol del balance de calor ha sido siempre importante en
sistemas de biolimi.ación. Y en ello, el análisis termodinámico
macroscópico -temperaturas de solución, condiciones climáticas
es muy importante para detetminar relaciones con el grado de
extracción de cobre.
Así, pues, se ha establecido algunos modelos que han sido
analizados por súnulación y comparados con el proceso en el
campo (Cathles & Schlitt, 1980). La función propuesta por Cathles
y Schlitt incluye la conservación de masa y el momentum (flujo de
aire) en un balance energético:
donde
3
Pm = densidad del aire (gícm )
Cp = calor específico del botadero (calíg-ºC)

º
T = temperatura en el sistema ( C)
T = tiempo (s)
Km = conductividad térmica del botadero (cal/cm-s-ºC)
V volumen de aire en el sistema -por los intersticios (cm3 )
q flux másico de aire (gícm2-s)

y pseudo calor específico del aire -incluye efectos de satw·ación
del vapor de agua (caL'g-ºC)
161
q1 flux másico de aire (gícm2 -s)
Como vemos, se tiene un avance en el modelamiento de

sistemas, del cual continuaremos para tener modelos predictivos
confiables de concentración de cobre, cobalto, etc. en el sistema
botaderos - planta de extracción por solventes-electrodeposición.
Celdas de electrodeposición:
Podtiamos analizar una posibilidad de aplicar un control inteligente de
lógica difusa (fuzzy) al sistema de generación de corriente por los
rectificadores: cada 2 días se detiene la electrodeposición en 2 celdas
para su litnpieza (conocida como desborre), la cual dura 4 horas; por lo
tanto, cada 2 días se c01ta y se restituye la corriente al inicio de la
limpieza y se vuelve a hacer lo mismo al final de ella. Todo lo
mencionado, finahnente, hace variai· el flujo y la concentración de ácido
en el sistema por 4 horas, debido a la menor deposición de cobre por las
2 celdas sin operar. Estos eventos hacen que se pueda tomar acciones en
base a valores condicionales.
Un bosquejo, a grosso modo aun, por analizar e implementar, tiene la
siguiente semántica:
If current intensity is low and , then bleed is low ancl...
Fijai· un flujo constante y definido de sulfato de cobalto.

.Actuahnente es de 350 g:Ton, mas podría disminuir. Lo más
adecuado para determinar el punto óptimo es continuar con una
disminución gradual en la planta, con monitoreo mensual, lo que se
está realizando. I\,,fenos costos y menor degradación del ecosistema,
162
pues, recordemos que el CoSO4 ingresa al sistema, mas no sale del

ciclo, acumulándose eventualmente en los botaderos.
Aumento de la capacidad de producción: + 50 °10. Ello implica no
sólo un aumento de celdas de electrodeposición, sino también un
au1nento gradual en la corriente suministrada, por lo que el tiempo de
siembra hasta la cosecha puede disminuir de 7 a 6 días. Esto signillca
una reprogramación del horario laboral o un aumento de la eficiencia
de cosecha de cobre: mayor velocidad o flq_io de cobre en placas de
salida a distribución. Recordemos que las grúas empleadas para la
cosecha tienen una resistencia de carga determinada, no siendo
recomendable sobrecargarlas con mayor peso, lo que habría de
1nantenerse un lapso de 7 días desde siembra hasta cosecha. Esta
posible variación es a mediano-largo plazo, pues, a corto -mediano
plazo está la expansión en el número de celdas, manteniendo
entretanto I más o menos constante, con un pequeño aumento dentt·o
del rango de seguridad de operación de las grúas en cuestión.

Sistemas de control
a) Operaciones: coordinación
b) Sistemas de control de procesos
Análisis del sistema: especificación de volúmenes de control
Definición del sistema de contt·ol adecuado. Simulación.
Coordinación con el A.rea de Instrumentación/ logística para
conseguir las paites faltantes necesaii.as.
c) Progreso en la microbiología del sistema
Identificación, morfología de las cepas de microorganismos
presentes.
163
A más largo plazo, ensayos de posible mejoramiento, por mutación

esencialmente.
Análisis de efecto de contaminantes como el cobalto sobre el
ecosistema.
Relacionado con el acápite anterior, se puede proyectar a largo plazo
un mayor control ambiental mediante el aprovechamiento del cobalto
que aun no es reciclado en el sistema, sino que, como se había
mencionado anteri01mente, se queda en el electrolito (ya estabilizado
con un valor de concentración constante) y en el PLS, el cual
desemboca finalmente en los botaderos, aumentando as1
continuamente la concentración de cobalto en el ecosistema. Esta
recuperación se podria llevar a cabo rentablemente por intercambio
iónico, en una columna de intercambio iónico de compartimento
múltiple (1VICLX). Recordemos que el cobalto es un metal estratégico
y ctitico. De reciclarse, esto se haria en la linea de bleeding
('sangrado') de electrolito, previo a su desembocadura en el raff
('refino') .
.J.- Determinación de la performance

La perfonnance del sistema con un control de retroalimentación se
comprueban aceptables y óptimos para el volumen de control
considerado. Como se mencionó antes, se seguirá conectando los
volúmenes de control, particularmente el sector de la nave de
electrodeposición, con el objetivo de virtualizai· un mayor volumen
con inteligencia atificial.

La producción de placas de alta pureza de cobre mediante la
biolixiviación. con la ayuda adicional de un 15�--ó de cobre para la
planta de LLX / SX / E \V en Toquepala proveniente de un flujo
164
constante de PLS proveniente de la lixiviación ácida en pads en

Cuajone, se realiza con un costo relativamente bajo: aprox. $ 0,24 í
lb de cobre.
Precio promedio actual en el mercado: $ O, 75 í lb de cobre

Se aplica un prograina de reducción de costos, por lo que se
tiene como objetivos para este año y los siguientes una expansión
en la capacidad de producción , aprovechando la econonúa de
escala beneficiosa para la empresa, continuación con una
automatización en el sistema (un objetivo es la integración virtual
del control en la planta), mayor control de las requisiciones de
material.
Estos objetivos están siendo llevados a cabo. En el caso particular
de la automatización, el control se efectúa con la consiguiente
instrumentación en el sistema. Queda por continuar con la labor en
microbiología, determinando tiempos de vida de los
1nicroorganismos, su aislamiento y su adaptación frente a
contaminantes como cobalto.
165
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174
APENDICE.-
ENSAYOS DE CRECll\UENTO DE Trichoder,na reesei:

FERl\-iENTACION DE SUSTRATO SOLIDO DE PAJILLA
DE CAÑA DE AZUCAR
En la prueba de crecimiento de micelio de T. reesei en los tubos

de fennentación, el punto de pattida o inicio de la fennentación es
con la adición (para t= 0) de micelio de la mezcla inoculante al tubo
de fe1mentación. Esto se hace pai·a evitar el tiempo que toma la fase
de latencia (lag time), que se produciría de introducir los
1nicroorganismos fermentantes en forma de esporas.
Pai·a un buen control de vaiiables en el proceso de fermentación
en sustrato sólido (SSF) se necesita conocer algunos parámetros o
coeficientes (constantes) del proceso.
Así, pues, en la fermentación SSF de la pajilla (bagacillo) de caña
de azúcar, tenemos el esquema sencillo mostrado en la Figura 1 del
flujo de este proceso en un reactor a escala de planta piloto
Recordemos que es necesario mantener un proceso constante y
óptimo para lograr resultados satisfact01ios en el producto final (es
decir, que el producto cumpla con los requisitos fijados). Luego, es
necesario tener relaciones entre las diversas características finales
mensurables y aquellas cuya medición es más dificil, o bien poco
conveniente (siendo el problema de contaminación aquí un factor de
desventaja, mas inhibido en gran medida por la diferencia de presión
positiva en el reactor).
Por ello, la medición de la generación de CO2 en el flujo de salida
del proceso nos puede dar un medio indirecto y sencillo de cálculo
del crecimiento del microorganismo empleado, a la vez que también
175
puede relacionarse con el conswno de 02 ( Sugama & Okazaki

1979).
El fin, pues, en las pruebas en tubos de incubación/fermentación
es obtener una razón (constante) de C02 generado a peso de micelio
formado, así como con respecto a 02 consumido.
Variables de entrada (medición) y variables a control.u.-

Tanto en los ensayos llevados a cabo en los tubos de incubación/
fermentación como en las mediciones en el sistema del reactor a
escala, las tomas de muestra son manuales, no automáticas. Esto se
hace presente en el programa de control, en el que se opera un aviso
previo para toma de muestra manual.
Volviendo al análisis de crecimiento de micelio, describimos al
proceso:
- Sustrato y mezcla inoculante.-

Parn una prueba inicial se tomó como base una masa de sustrato
seco pretratado de
(* )
m sustrato seco (p) 4 l::>
o
(*) masa inicial de sustrato seco en 1 tubo de incubación y

fermentación
Nota:
Las sales de Reese & ]\.fandels añadidas al medio de fermentación
SSF están preparadas sin contenido alguno de nitrógeno (esta
decisión se fijó ya por pruebas anteriores de crecimiento de micelio).
Debido a ello se hace la adición de harina de soya con fuente de
nitrógeno en la fase exponencial del crecimiento.
176
PREPARACION .-
(las cantidades se mencionan para 1 tubo de incubación y
fetmentación)
l'vlicroorganismos . -
Se emplea T. reesei UC4.
l'vledios y condiciones de cultivo .-

Como sustrato se emplea 4 g de pajilla de caña de azúcar seca
(bagacillo) pretratada. Para abreviar, se le menciona como sustrato
(p).
El medio de inóculo (:tvll) se ha preparado previamente. Este f\.-11
está compuesto por : Sales de Reese & ::rviandels (6, 1 � ó v/v), Tween
1
80 (O, 1 �i> vív), glicerol (O, 1 �-0 vív), peptona (0,2�/o w/v), sustrato (p)
(0,4°- ó w/v) y agua (restante para l00°-10).
1
El J\.fl ha desarrollado micelio en un medio liquido durante 3 días a

30 ºC, agitado a 200 rpm. Tras ello, se mide siempre el contenido de
micelio seco (g micelio seco / m1 iv1I).
El sustrato (p) es añadido a la mezcla inoculante (1vIEzn descrita
abajo, mezclado hasta homogeneidad y colocado para fermentación
en el tubo de incubación y fermentación.
El :tvIEZI está conformado por

- :rvn (2 g micelio seco / 100 g sustrato (p)).
- Sales de Reese & Iv1andels sN (60 m1 i 100 g sustrato (p)).
- Harina de soya (razón C:N = 10, lo que equivale a aprox. 0,827 g
harina í g sustrato (p)).
- Agua (para un total de 80°-'o humedad en la mezcla final).
177
Nota: sN= sin nitrógeno
Se mantiene la razón másica sgte.
J\:IEZI:sustrato (p) 4:1
Por lo tanto, la mezcla homogénea final formada contiene
JvIEZI 16 m1 » 16 g
Sustrato (p) 4g
Para asegurar ingreso de aire libre de CO2 se hace circular al aire

pritnero por un recipiente lavador con 100 m1 solución NaOH H)0,¿
(w/v), y por otro vohnnen con 20 ml solución NaOH 6,50,,0, antes de
pasar al tubo de incubación y fetmentación.
Se entrega un flujo constante e igual de aire a cada uno de los 5
tubos de fermentación colocados. El aire a un flujo aprox. de 100
ml!h para cada tubo (Sugama & Okazaki, 1979) se obtiene de una
pequeña bomba (peristáltica) y se distribuye en 5 flujos, hacia la
entrada inferior de los 5 tubos.
Determinación de CO2 . -
El flujo de salida es recolectado en un tubo con 20 m1 solución
NaOH 2<%, la cual absorbe el CO2 . El contenido para cada toma se
transfiere a un vaso beaker (100 ml) y se añade 1 O ml solución
BaCh 20'?t-ó. Finalmente se titula el volumen a pH = 9 con HCl O, 5
N.
La cantidad de CO2 generado es igual a
m co2 = 11 * (b - a)
178
donde a = vol. HCl añadido

b = vol. HCl añadido para un volumen igual de
solución NaOH sin CO2
Se toma muestras cada 24 h
"""
Contenido de micelio seco en :tvII = 0,0128 < >
(g micelio seco / ml l\.11)
(**) Generalmente el valor está cerca a O, O 1 g / ml l\:Il
Objetivos de investigación y desarrollo en biolixh,iación: planta de LIX / SX /

E\V .-
En la tabla siguiente se menciona algunos objetivos de trabajo fijados:
�lñ�i�rmmmm11 1 1 1mmmm11mm1111 imrn1mmmm�n�11�1J;�ltl��tjnilili�mmmimmrnmrnmrnmm1mmmmmiimimrn1

. .
1 - Análisis conjunto de lixiviación y del ecosistema en botaderos

- Continuación con semiaislamiento de microorganismos en B1, BT11 y
B3250 (viales numerados en Lab. Toquepala: en refrigeración)
2 - Control de Procesos: direccionamiento en PLC
- Instrumentación: elementos de control final
3 - Acciones sobre temperatura en nave de EW

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UNJVERSlDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERL4. QUIMICA Y !Jt.fANUFACTUR.ERA

PARA OPTAR EL TITULO PROFESIONAL DE:

JORGE LUlS WONG DAVILA

lJNI, MARZO DE 1999

11.- ACTIVIDAD PROFESIONAL 6

Ila.- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN EL LABORI\TORIO DE

Ilb.- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA E�·1PRESA SINTESIS

lle.- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA E�1PRESA SOUTHERN

F.- Alternativas de solución. Análisis técnico-económico 24

l.- LABOR4TORJO DE JfICOL067A Y BJOTEClVOLOGL4 (LHB)

H .- Conceptos complementarios. Soluciones planteadas 82

JI.- Sf.l\¡TESIS QUL'l,f/CA �"A

lll.- SOUTI-IERJ.V PERfJ L TD.

G .- Desan·ollo y sustentación 121

Referencias/ Bibliografia 164

INVESTIGACION Y APLICACION INDUSTRIAL DE PROCESOS DE

El mercado m11ndial de la biotecnología en

• Cuidado de 11111 Alimento

El mercado mundial de la biotecnología en

El siguiente breve tratado profesional se centra en la pat1e de los

El control de procesos es pa11e del desai-rollo de la inteligencia artificial, la

■ Se estudia los fenómenos de transferencia de masa y calor, y los mecanismos de

Ha .- ACTIVID..\D PROFESIONAJ_, EN EL LABORA TORIO DE

Sector al que pertenece:

La Figura 4 muestra el esquema del Cuarto minipiloto de

ASISTENTE DE ASISTENTE DE ASISTENTE DE ASISTENTE DE

B.- Relación profesional-empleador

C .- Trabajo profesional desarrollado

Tiempo de prestación de servicios en la actividad descrita:

D.- Funciones desempeñadas y la aplicación de técnicas profesionales

Formato de registro de actividades:

E .- Objetivos, alcances y características principales de la labor

Ilb .- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA El\1PRESA SINTESIS

Sector al que pertenece:

Compuestos B-lactámicos (penicilinas) ; productos medicinales

Estos productos son vendidos a clientes: Laboratorios en el Perú y

C .- Trabajo profesional desarrollado

D.- Funciones desempeñadas y la aplicación de técnicas

Formato de registro de acthidades:

E.- Objetivos, alcances y características

produce sustancias medicinales, de aplicación en la fatmacéutica.

La estructura básica de las penicilinas es el 6-APA, el que consiste

lle .- ACTIVIDAD PROFESIONAL EN LA ElVCPRESA SOUTHERN

Sector al que pertenece:

- De refineria (99,97<% de pureza en cobre)

Estos productos son vendidos a clientes en el Petú y también son

' 't '' '� 'f

Coordinación de Coordinación de Coordinación de Coordinación

PLS (RICO)/ RAFF (POBRE) SOLUCION ORGANICA RICA

"', , .,,, �fll�1i��i�I

C .- Trabajo profesional desarrollado

Tiempo de prestación de servicios:

D.- Funciones desempeñadas y la aplicación de técnicas

Formato de registro de actividades:

con data recopilada de la base de datos del sistema integrado Allen­

E.- Objetivos, alcances y características

F.- Alternativas de solución. Análisis técnico-económico

Generalidades / descripción del sistema / trabajo técnico y de

con data recopilada de la base de datos del sistema integrado Allen

MODELAl\flENTO lVLL\.TEl\·1ATICO EN REACTOR SSF.