Extraccion e Identificacion de Lipidos PDF

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EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

Lisday Andrea Viracacha Murcia​1


Natalia Mora Fernández​2
1​ 1-2​
Código: 20162180129. Estudiantes en Formación de Ingeniería
Email: ​[email protected] Ambiental. Universidad Distrital Francisco
José de Caldas (UD), Facultad de Medio
2​
Código: 20162180133. Ambiente y Recursos Naturales, Bogotá
Email: ​[email protected] D.C., Colombia, (2018).

INFO ARTÍCULO Resumen

Entregado: En esta práctica de laboratorio se realiza una


10 de Marzo de 2018 extracción e identificación de lípidos. Los
Lípidos son sustancias naturales, que se
solubilizan en disolventes grasos no polares
Palabras Clave: Aceite Vegetal, Aceite Animal, pero, no en agua. Éstos, realizan un conjunto
Colesterol, Fosfolípidos, Miscibilidad, extraordinario de funciones en los seres vivos.
Saponificación. El objetivo principal de la práctica, es
demostrar dicha solubilidad (tanto en aceites
vegetales, como animales) e identificar
algunos lípidos importantes, como el
colesterol y los fosfolípidos. Por medio del
uso de distintos solventes orgánicos, se
determina que los aceites vegetales son
miscibles en acetona, cloroformo y éter, y, los
animales, son miscibles en cloroformo.
Además, gracias al uso de etanol, y
posteriormente acetona y agua destilada, se
logran observar las lecitinas en la yema de
huevo, formando mayor turbidez con el agua
que, con acetona. Por último, se evidencia la
presencia de colesterol en el cerebro, gracias a
los reactivos de Schiff, Salkovsky y
Liebermann-Burchard.
Introducción 1. Ácidos grasos: Los ácidos grasos son
ácidos monocarboxílicos que contienen en
Los lípidos son un grupo heterogéneo de general cadenas hidrocarbonadas de
biomoléculas. Se consideran lípidos longitudes variables.
moléculas como los fosfolípidos, los Los ácidos grasos son componentes
esteroides, los carotenoides, las grasas y importantes de cuantiosas clases de
los aceites, que se diferencian mucho en moléculas lipídicas. Se encuentran en
cuanto a estructura y función. A causa de primera instancia en los triacilgliceroles y
su diversidad, el término lípido tiene una en numerosas clases de moléculas lipídicas
definición más operativa que estructural. unidas a las membranas. La mayor parte
Los lípidos se definen como aquellas de los ácidos grasos naturales posee un
sustancias de los seres vivos que se número par de átomos de carbono que
disuelven en solventes no polares, como el forman una cadena sin ramificaciones. [1]
éter, el cloroformo y la acetona, y que no
lo hacen de manera perceptible en el agua. 2. Triacilgliceroles: Los triacilgliceroles
son ésteres de glicerol con tres moléculas
Las funciones de los lípidos también son de ácidos grasos. Los glicéridos con uno o
variadas. Diversas clases de moléculas dos grupos ácido graso, que se denominan
lipídicas (por ejemplo, los fosfolípidos y monoacilglicerol es y diacilgliceroles,
los esfingolípidos) son componentes respectivamente, son intermediarios
estructurales importantes de las metabólicos. Se encuentran presentes en
membranas celulares. Otro tipo, las grasas general en cantidades pequeñas.
y los aceites (ambos son triacilgliceroles), La mayoría de las moléculas de
almacenan energía de modo eficaz. Otras triacilgliceroles contienen ácidos grasos de
clases de moléculas lipídicas son señales diversas longitudes, que pueden ser
químicas, vitaminas o pigmentos. Por insaturados, saturados o una combinación
último, algunas moléculas lipídicas que se de ambos. Dependiendo de sus
encuentran en las cubiertas externas de composiciones de ácidos grasos, las
varios organismos tienen funciones mezclas de triacilgliceroles se denominan
protectoras o impermeabilizantes. [1] grasas o aceites. Las grasas, que son
sólidas a temperatura ambiente, contienen
Clases De Lípidos una gran proporción de ácidos grasos
saturados. Los aceites son líquidos a
Los lípidos pueden clasificarse de muchas temperatura ambiente debido a su
formas diferentes. En esta exposición, los contenido relativamente elevado de ácidos
lípidos pueden subdividirse en las grasos insaturados. [1]
siguientes clases:
3. Ésteres de ceras: Las ceras son mezclas
-​Lípidos Saponificables
complejas de lípidos no polares. Son
Son aquellos que reaccionan con álcalis cubiertas protectoras de las hojas, de los
formando jabones. tallos y de las frutas de los vegetales y de
la piel de los animales.
Los ésteres formados por ácidos grasos de 5. Esfingolípidos: Los esfingolípidos son
cadena larga y alcoholes de cadena larga componentes importantes de las
son constituyentes destacados de la membranas animales y de las vegetales.
mayoría de las ceras. Las ceras contienen Todas las moléculas de esfingolípidos
también hidrocarburos, alcoholes, ácidos contienen un aminoalcohol de cadena
grasos, aldehídos y esteroles (alcoholes larga. En los animales, este alcohol es
esteroides). [1] principalmente la esfingosina. La
fitoesfingosina se encuentra en los
4. Fosfolípidos: Los fosfolípidos esfingolípidos de los vegetales. El núcleo
desempeñan múltiples funciones en los de cada clase de esfingolípido es una
seres vivos. Son los primeros y más ceramida, un derivado amida de ácido
importantes componentes estructurales de graso de la esfingosina. [1]
las membranas. Además, cuantiosos
fosfolípidos son agentes emulsionantes y 6. Lípidos Insaponificables:
agentes superficiales activos.
Son aquellos que no tienen ácidos grasos y
Los fosfolípidos son muy adecuados para no reaccionan con álcalis, ni forman
estas funciones debido a que, al ser sales jabones.
de ácidos grasos, son moléculas
anfipáticas. El dominio hidrófobo está - Isoprenoides: Los isoprenoides son un
formado en gran parte por las cadenas gran grupo de biomoléculas que contienen
hidrocarbonadas de los ácidos grasos; el unidades estructurales de cinco carbonos
dominio hidrófilo, que se denomina grupo que se repiten y que se denominan
de cabeza polar, contiene fosfato y otros unidades de isopreno. Los isoprenoides no
grupos cargados o polares. [1] se sintetizan a partir del isopreno
(metilbutadieno), sino que todas sus vías
Uno de los fosfolípidos más de biosíntesis comienzan con la formación
representativos, son las ​lecitinas​. La de isopentenilpirofosfato a partir de
fosfatidilcolina o polienilfosfatidilcolina acetil-CoA. Los isoprenoides están
(también llamada lecitina) es un formados por terpenos y por esteroides. [1]
fosfolípido que, junto con las sales
biliares, ayuda a la solubilización de los - ​Los terpenos son un grupo enorme de
ácidos biliares en la bilis. moléculas que se encuentran en gran
medida en los aceites esenciales de las
Es el componente más abundante de la plantas. Los terpenos, son lípidos
fracción fosfatídica que puede extraerse insaponificables, formados por dos o más
tanto de ​yema de huevo​, como de granos unidades de isopreno. [3]
de soja mediante extracción mecánica, o
química usando hexano. La fosfatidilcolina - Los esteroides son derivados del sistema
es uno de los principales constituyentes de de anillos hidrocarbonados del colesterol.
las bicapas lipídicas de las membranas Son otro tipo de lípidos no saponificables,
celulares. [2] que poseen un núcleo común formado por
cuatro anillos condensados, tres de los fluidos corporales, entre ellos los fluidos
cuales poseen seis átomos de carbono y el menstruales y seminales.
cuarto únicamente cinco. Todas las prostaglandinas son derivados
Aunque los distintos tipos de esteroides se hipotéticos de la ciclación de ácidos grasos
diferencian en la naturaleza y la posición insaturados de 20 carbonos. [3]
de los sustituyentes.
Solubilidad
La mayoría de los esteroides se generan
(en los seres vivos) a partir de la ciclación Los grupos principales de lípidos tienen
del escualeno (un triterpeno lineal); así, el características de solubilidad diferentes y
primer esteroide formado en este proceso esta propiedad se usa en su extracción y
es el lanosterol que posteriormente se purificación a partir de materiales
transforma en otros muchos esteroides de biológicos.
interés. Uno de ellos es el ​colesterol. [​3]
Pueden ser separados fácilmente de otras
El colesterol es el esteroide mejor biomoléculas por extracción con solventes
conocido y más abundante en el cuerpo orgánicos y por técnicas experimentales
humano. Forma parte de las membranas como la cromatografía de adsorción,
biológicas y es precursor de ácidos cromatografía de placa fina y
biliares, de las hormonas esteroides y de la cromatografía de fase reversa. [4]
Vitamina D.
Una característica común de los lípidos y
Es también muy abundante en que lo distingue de los demás grupos, es
lipoproteínas del plasma sanguíneo, entre que son moléculas no polares, sin carga
ellas la LDL, en las que alrededor del 70% eléctrica. Por esta razón son insolubles en
se encuentra esterificado con ácidos grasos agua (polar) y solubles en disolventes
de cadena larga. [3] orgánicos y en otros lípidos. [5]

- ​Prostaglandinas: ​Las prostaglandinas - Reacción Liebermann - Burchard:


son lípidos insaponificables que poseen
una gran variedad de actividades Es un reactivo colorimétrico utilizado para
biológicas de naturaleza hormonal y la determinación de colesterol, lo que da
reguladora, así median en: la respuesta un color verde intenso. Este color
antiinflamatoria, la producción de dolor y comienza con un color rosa violáceo y
fiebre, la regulación de la presión progresa a través de un verde claro y luego
sanguínea, la inducción de la coagulación un color verde muy oscuro. El color es
de la sangre, la inducción al parto, la debido al grupo hidroxilo (-OH) del
regulación del ciclo sueño/vigilia. colesterol reacciona con los reactivos lo
que genera una aumento en la conjugación
La prostaglandinas, se encuentran en de la instauración del anillo fusiona
cantidades muy pequeñas en tejidos y adyacente.
La reacción consiste en que el colesterol - La prueba de Salkowski:
sufre una oxidación gradual, formándose
una molécula de colestapolieno que posee La reacción de colesterol con este reactivo
un doble enlace adicional al colesterol, la produce una condensación de biesteroides.
etapa inicial consiste en la protonación del La formación de un anillos de color indica
oh del colesterol, desprendiéndose agua, la presencia de colesterol. Su fundamento
obteniéndose el ion carbonio es la formación de derivados de los
3,5-colestadieno que constituye el primer esteroides, cuando se tratan con ácidos. La
paso de la reacción de color. coloración roja o vino tinto característica,
se forma en la capa del disolvente graso no
La oxidación del ion carbonio por el so2 polar, es decir, en el cloroformo.
produce un ácido colesta-hexano-sulfónico
cromóforo, produciendo la tonalidad Justificación
verdosa. Se utilizan reactivos específicos
para la coloración de los derivados del El estudio de los lípidos se hace necesario
colesterol. se usa un ácido fuerte para que e importante debido a que cumplen
el colesterol actúe como un alcohol y así diversas funciones fundamentales en la
pueda ocurrir la deshidratación con la naturaleza y sobretodo en los seres vivos.
formación de un conjugado pi. El medio
debe ser anhídrido al fin de evitar que las Algunos lípidos son reservas energéticas
moléculas de agua no interfieran en la vitales, almacenan dicha energía que el
reacción de colesterol a colesterileno. [6] organismo puede disponer fácilmente si la
necesita (​Los lípidos aportan 3 veces la
- ​Tinción de PAS (ácido peryódico-de energía que aportan los glúcidos)​. Otros
Schiff): Método de PAS modificado son los componentes estructurales
primarios de las membranas biológicas,
Los grupos aminos son convertidos a forman las membranas celulares
carbonilos (​para incrementar el número de conjuntamente con proteínas y
éstos, ya sea, aldehído o cetona) mediante polisacáridos.
la cloramina T. Luego, el ácido
perfórmico, oxida las uniones lípido Así mismo, otras moléculas lipídicas
etileno a aldehídos. Posteriormente hay un actúan como hormonas (progesterona,
bloqueo con dinitrofenil-hidrazina, junto estradiol, testosterona, hidrocortisona,
con los aldehídos existentes. Así, la aldosterona), antioxidantes, pigmentos
Reacción de PAS se usa para teñir (que están formados algunos por terpenos)
hexosas; los tejidos son incubados en o factores de crecimiento vitales y
ácido peryódico para oxidar las hexosas vitaminas (constituyen algunas de las
(1,2 glicol) a aldehídos, y estos son vitaminas A1, E y K son terpenos).
finalmente revelados por condensación
con el reactivo de Schiff. Los resultados se Cuando se ingiere más alimento del
comparan con una sección delipidizada necesario el exceso se transforma en
(glicolípidos-hexosas no lipidas). [7]
grasas que se deposita en el tejido adiposo Metodología
distribuido en todo el cuerpo.
Protegen diferentes partes del cuerpo de ➔ Solubilidad de lípidos
los seres vivos, el tejido adiposo protege
del frío por ser un buen aislante. Las ceras Para iniciar, se utilizaron 5 tubos de
recubren algunos órganos vegetales como ensayo, que previamente fueron rotulados
las hojas, evitando las pérdida de agua. del 1 al 5. Con ayuda de una pipeta, se le
Intervienen en diversos procesos químicos agregó a cada uno, 2 ml de aceite vegetal
intracelulares. (aceite de oliva). Posterior a ello, se
agregaron 2 ml de agua destilada al primer
Es decir, los lípidos no son sólo grasas, tubo, 2 ml de acetona al tubo Nº 2, 2 ml de
como las personas del común piensan alcohol al tercer tubo, 2 ml de cloroformo
regularmente, sino que, por el contrario, al cuarto tubo, y 2 ml de éter al tubo
abarcan una gran cantidad de grupos que restante. Por último, se agitó
cumplen funciones muy diversas, vigorosamente cada tubo, y se esperó de ​2
fundamentales y trascendentales. a 3 minutos hasta obtener una solubilidad
positiva, en alguno de los tubos.
Es por ello, que en bioquímica se realiza el Éste procedimiento se repitió nuevamente,
estudio más a fondo de éstas biomoléculas. utilizando un aceite de origen animal; en
Además, como ingenieros ambientales, es éste caso, se trabajó con el aceite de
fundamental comprender el papel y las hígado de bacalao.
incidencias de los lípidos en nuestro
entorno, para solucionar problemáticas, ➔ Aislamiento de fosfolípidos
como el tratamiento de la acumulación de
grasas en fuentes hídricas o aguas Para empezar, se adicionaron 20 ml de
residuales y la quema de aceites. O, el alcohol en un Erlenmeyer, que luego se
metabolismo de estas moléculas en ciertos llevaron a calentar en una estufa eléctrica.
organismos, con fines de biorremediación. Pasados unos minutos, se depositó media
U otras aplicaciones que favorezcan el yema de huevo en un Beaker, junto con los
medio en que vivimos, que finalmente, es 20 ml de alcohol caliente; los cuales se
el objetivo que tenemos la mayoría. mezclaron con un agitador y
posteriormente se dejaron enfriar. La
En consecuencia, se realiza esta práctica mezcla obtenida fue filtrada en tres
de laboratorio, que nos permite diferenciar repeticiones; dos veces con ayuda de una
una gran cantidad de lípidos que pueden gasa, y una última vez, con papel filtro.
encontrarse en alimentos y productos
biológicos, y donde es necesario, efectuar A partir del filtrado obtenido, se realizaron
diversas pruebas, reacciones y análisis dos procedimientos. En el primero, se
físico-químicos. Para ello, es útil conocer mezclaron 0,5 ml del filtrado, junto con 5
los disolventes y reactivos que propicien ml de acetona; en un tubo de ensayo. En el
dichos estudios, y conceptuar sus segundo, se utilizaron 3 ml de la mezcla,
fundamentos.
junto con 1 ml de agua destilada en otro 2. Reacción de Salkowsky​, donde se
tubo de ensayo. tomó 1 ml del extracto, el cual, se
Finalmente, se esperaron unos minutos mezcló con 1 ml de ácido sulfúrico
hasta que el primer tubo presentara concentrado. La mezcla se dejó en
turbidez, y el segundo, obtuviera una reposo, hasta que se presentó la
emulsión estable. separación de la misma, en dos capas
(una superior de color rojo, y una capa
➔ Aislamiento de colesterol inferior de color amarillo). Finalmente
se procedió a separar la última capa, y
Como primer paso, se pesaron 3g de se le añadió 1 ml de ácido acético
cerebro y 10g de yeso, los cuales fueron glacial, apareciendo una coloración
mezclados y macerados en un mortero, rosada.
hasta que se obtuvo una masa espesa. Con
ayuda de una espátula, se depositó la masa 3. ​Reacción de Liebermann - Burchard​,
en una cápsula de porcelana, esparciéndola para la que se utilizó 2 ml del extracto
de forma muy fina. Luego, se llevó a de colesterol en un tubo de ensayo,
calentamiento en una estufa eléctrica, mezclado con 0,1 ml de ácido
hasta que la masa se secara totalmente. sulfúrico. Se esperó que el líquido
resultante, pasara por coloración roja,
Posteriormente, se dejó enfriar la masa, se luego violeta, después azul y
depositó en un mortero, y se maceró finalmente, color verde.
nuevamente hasta que quedó en polvo.
Éste último, se agregó en un Erlenmeyer, Resultados
al cual se le adicionaron 10 ml de
cloroformo. La boca del Erlenmeyer se PARTE A
tapó con el corcho, para poderlo agitar
➔ Solubilidad de los Lípidos:
cuidadosamente, durante 5 minutos. Luego
de ello, se filtró la mezcla con ayuda de ● Aceite Vegetal (Aceite de Oliva):
una gasa, obteniendo extracto de colesterol
en cloroformo.

Con dicho extracto, se realizaron tres


pruebas de reacción:

1. Reacción de Schiff​: en la cual, se


utilizó 1 ml del extracto de colesterol,
agregado a un tubo de ensayo seco. Por
Figura 1. ​Miscibilidad del Aceite de Oliva.
las paredes del tubo, se adiciona
Fuente:​ Natalia Mora, 2018.
lentamente 1 ml de ácido sulfúrico
concentrado. Se esperó la observación Según los resultados obtenidos, se
de una interfase color rojo, que determina que, el aceite de Oliva es
indicara la presencia de colesterol. soluble en Acetona, Cloroformo y Éter.
Tabla 1. ​Resultados de la Solubilidad del PARTE B
Aceite Vegetal.
➔ Aislamiento de Fosfolípidos:

ACEITE DE OLIVA Las partículas blancas suspendidas que se


Disolventes Miscibilidad logran observar en la solución, son los
fosfolípidos conocidos como lecitinas,
Agua Destilada No Miscible presentes en la yema de huevo.
Además, se determina que presenta una
Acetona Miscible
mayor turbidez con el agua destilada que
Alcohol (Etanol) No Miscible con la acetona.

Cloroformo Miscible

Éter Miscible
Fuente: ​Autoras.

● Aceite de Origen Animal (Aceite


de Hígado de Bacalao):

En este caso, no obtuvimos fotografías,


pero, según los resultados obtenidos, se
logra determinar que, el aceite de Hígado
de Bacalao es soluble únicamente en
Cloroformo. (a) (b)
Figuras 2. ​Resultados del aislamiento de
Tabla 2. ​Resultados de la Solubilidad del Fosfolípidos (Lecitinas).
Aceite de Origen Animal. (a) Filtrado de Yema de huevo + Acetona.
(b) Filtrado de Yema de Huevo + Agua.
Fuente:​ Natalia Mora, 2018.
ACEITE DE HÍGADO DE BACALAO
➔ Aislamiento de Colesterol:
Disolventes Miscibilidad

Agua Destilada No Miscible ● Reacción de Schiff:

Acetona No Miscible
La reacción de Schiff tuvo un resultado
Alcohol (Etanol) Levemente Miscible positivo para la presencia de colesterol, en
el cerebro de una res. En la parte superior,
Cloroformo Miscible
se observa el color característico (rojo -
Éter No Miscible vino tinto) que se forma en la capa
Fuente: ​Autoras. clorofórmica; en la parte inferior, se
observa un rojo amarillento con
fluorescencia verde.
Pero, puede establecerse que ésta, tendía a
ser positiva, pues en el último momento de
observación, estaba empezando a tomar un
color rojo, que luego, se tornó violeta en la
parte inferior. Es decir, estaba pasando por
el proceso que indica la guía: ​“El líquido
resultante adquiere inicialmente un color
rojo, luego violeta, azul y por último
verde”.

Por lo tanto, se concluye que la prueba si


es positiva para colesterol, aunque la
misma, no haya terminado la reacción.

Figura 3. ​Resultado de la reacción de Schiff.


(Positiva)
Fuente: ​Natalia Mora, 2018.

● Reacción de Salkowsky:

Luego de realizar la prueba de Schiff, se


usa la misma solución que ya obtuvo
resultados positivos, y simplemente, se le
agrega el ácido acético glacial. En la nueva
solución resultante, se observan tres capas,
en la parte inferior, se encuentra la capa
Figura 4.​ Resultado (inicial) de la reacción de
amarillenta con fluorescencia verde, en el
Liebermann - Burchard (Levemente Positiva).
centro, un pequeña capa de color rosáceo,
Fuente:​ Natalia Mora, 2018.
y en la parte superior, la coloración
característica, es decir, el color rojo, que
Análisis de Resultados
arroja que la reacción es positiva para
colesterol.
➔ Solubilidad

(No se logran obtener fotografías de la


Se tuvo que el aceite vegetal se solubilizó
reacción).
únicamente en acetona, cloroformo y éter;
debido principalmente, a que los tres
● Reacción Liebermann-Burchard:
solventes son de carácter apolar, al igual
que el aceite de oliva. Al mismo tiempo,
La reacción no obtuvo resultados
los solventes como la acetona, poseen en
determinantes, debido a que, por falta de
su composición: Carbono, Hidrógeno, y
tiempo, no se completó totalmente la
Oxígeno, algunos de estos combinados con
reacción.
un grupo OH; y a su vez, presentan dobles una densidad distinta a la del aceite
enlaces entre un Carbono y un oxígeno. (Agua : 1g/cm 3 ; Etanol : 0, 789g/cm 3 ;
Dichas características (ilustradas en la Aceite : 0.918g/cm 3 ) , lo que generó
figura 5 y 6), son similares a la distinción en las fases, quedando el aceite
composición química que presenta el por encima del agua, y el etanol por debajo
aceite de oliva (​C​8​H​8​O​3​) (figura 7); por lo del aceite.
tanto, la fase en que se presentaron las
reacciones entre ambos compuestos Para el caso del aceite de hígado de
mezclados, fue la misma; lo que permitió, bacalao (compuesto por Omega 3), sólo se
la interacción facilitada entre las moléculas obtuvo una miscibilidad en el cloroformo;
del disolvente y el soluto (solvatación). pues éste tuvo la capacidad de polarizar
sus enlaces C - Cl, realizando una síntesis
orgánica con el compuesto del aceite; lo
cual arrojó que se obtuvieron los
resultados acordes, pues según García M.,
(2011): “El aceite de hígado de bacalao es
Figura 5. ​ Propanona ligeramente soluble en alcohol; y muy
(Acetona) soluble en cloroformo”.
Fuente:​ Imágenes Wikipedia
➔ Aislamiento de fosfolípidos

El aislamiento de las lecitinas presentes en


la yema del huevo, se dio de forma
correcta, pues en la muestra que se utilizó
la acetona, se observó el precipitado
Figura 6. ​Triclorometano
esperado de partículas blanquecinas. Esto
(Cloroformo)
se logró, debido a que la lecitina sólo es
Fuente:​ Imágenes Wikipedia
soluble en éter, etanol o cloroformo, pero
incapaz de solubilizarse en cetonas, por lo
tanto, en contacto con la acetona
(compuesto apolar), no generó enlaces
químicos; permitiendo la precipitación de
​ cido 4-hidroxifenilacético
Figura 7. Á éstas.
(Aceite de oliva)
Fuente:​ Imágenes Wikipedia Para el caso de la mezcla del filtrado con
agua, se obtuvo una emulsión mucho más
turbia y estable; ésto se debió, a que el
Esto también determinó, la razón por la
agua destilada no generó ninguna reacción
cual el aceite no fue miscible en agua, ni
específica, por lo cual, se tomó como
en etanol, debido a que ambos compuestos
muestra control para comparar el resultado
son de carácter apolar; y juntos, presentan
de la muestra mezclada con acetona.
➔ Aislamiento de colesterol desarrolla un color rojo característico en la
capa clorofórmica. Los componentes del
Prueba de Schiff reactivo se separan en dos capas, la de
cloroformo de color rojo y la de Ácido
El resultado para la prueba de Schiff fue sulfúrico de color blancuzco.
de color rojo (positivo), debido a la acción Esta coloración, fue el resultado de la
deshidratante del ácido sulfúrico, sobre el formación de dobles enlaces adicionales
colesterol presente en el cerebro de res; que se generaron, o bien, a partir de la
formó un doble enlace en la posición 3 condensación de 2 moléculas de colesterol
(como lo indica la figura 8). que posteriormente formaron biesfenoides.
Este resultado fue acertado, pues se
corroboró con teoría que enuncia que “El Prueba de Liebermann-Burchard
reactivo de schiff, permite reconocer
lípidos que contengan materiales con El color esperado al finalizar la reacción,
radicales -OH- contiguos, como es el caso tuvo que deberse a que el grupo hidroxilo
de los fosfatidilinositoles, (-OH) del colesterol, reaccionaría con los
fosfatidilglicéridos y ​cerebrósidos​.” reactivos, lo que generaría una aumento en
(Cuaran B., s.f) sabiendo que los la conjugación de la instauración del anillo
cerebrósidos, se encontraban en la muestra adyacente. (Sandoval, 2013)
de membrana celular del músculo La reacción consistió en que el colesterol
nervioso y las moléculas del sistema (presente en el cerebro de res) sufrió una
nervioso, del cerebro utilizado. oxidación gradual, formándose una
molécula de colestapolieno, presentando
un doble enlace adicional al colesterol. La
etapa inicial, consistió en la adición de un
protón del OH del colesterol, la cual, hizo
desprender agua, obteniéndose el ion
Figura 8. ​Reacción del colesterol carbonio 3,5-colestadieno que constituyó
Fuente: la primera reacción de color. La oxidación
https://profesoramaribelarnes.files.wordpress.com/ del ion carbonio por el SO2 produjo un
2009/11/lab-5-colesterol-tec-2010.pdf ácido colesta-hexano-sulfónico cromóforo,
el cual formó la tonalidad final verdosa.
Prueba de Salkowski
(Cruz, 2014)

La prueba de Salkowski tuvo un resultado


positivo, pues se apreciaron las tonalidades
características, de un colesterol en el
medio. Según Casanova, (2011) esto se
debe a, que cuando a las soluciones
clorofórmicas de colesterol se les adiciona
un volumen igual de ácido sulfúrico
concentrado y se mezclan suavemente, se
Conclusiones
provenientes de hogares, industrias
1. Se logra entender que para llegar a etc.
generar mezclas que presenten una
misma fase, es decir, que se puedan
solubilizar, se requiere que ambas Referencias Bibliográficas
tengan el mismo carácter polar. En
caso de que la mezcla presente una 1. McKee T., McKee J., 2013.
fase heterogénea, se recurrirá a Biochemistry: The Molecular Basis
trabajar con una tercera sustancia of Life. ​Sexta Edición, Capítulo 11
‘Lípidos y Membranas’​, Pág. 371,
de carácter anfipático ( polar y
Editores: Oxford University Press
apolar), para obtener una asociado con Sapling Learning.
solubilización de los compuestos Obtenido de:
utilizados. http://biblio3.url.edu.gt/Publi/Libro
s/2013/Bioquimica/12-O.pdf
2. La solubilidad de los lípidos en
compuestos orgánicos, se puede 2. Sin autor, s.f. ​Fosfatidilcolina​,
UAZ, México. Obtenido de:
aprovechar de manera sencilla para
http://www.uaz.edu.mx/histo/Biolo
la extracción de los mismos; como
gia/Wiki/FosfatidilColina.pdf
en el caso de los lípidos extraídos
del cerebro de res. Se comprendió, 3. Sin autor, 2005. ​Tema 3. Lípidos,
que esto se puede llevar a cabo, Bioquímica. Obtenido de:
utilizando solventes que al http://www.uhu.es/08007/documen
calentarse reaccionen disolviendo tos%20de%20texto/apuntes/2005/p
el ácido graso, y luego de que se df/tema_03_lipidos.pdf
evapore el disolvente, podrá quedar
4. Vázquez E., 2003. ​Tipos de
el lípido requerido.
Lípidos​, Bioquímica y Biología
Molecular en Línea, Instituto de
3. Gracias a las propiedades físicas y Química, UNAM. Obtenido de:
químicas que presentaron las http://laguna.fmedic.unam.mx/~eva
biomoléculas trabajadas, se pudo zquez/0403/tipos%20lipidos.html
conocer los comportamientos y las
incidencias, que éstas tienen al 5. Sin autor, s.f. ​Lípidos:
Reconocimiento, Solubilidad y
juntarse con agua y otras
Reacciones, Recursos TIC,
sustancias. Esto es de suma
Educación. Obtenido de:
importancia, pues como Ingenieras http://recursostic.educacion.es/cien
Ambientales, adquirimos el cias/biosfera/web/profesor/practica
conocimiento de base para llegar a s/Lipidos.pdf
solucionar problemáticas de
acumulación de grasas en fuentes 6. Cruz Y.V., Suárez J.W. y Pan A.F.,
2014. ​Extracción de Lípidos del
hídricas, o buscar alternativas para
Cerebro, Academia Edu. Obtenido
los tratamiento de residuos grasos, de:​https://www.academia.edu/9479
404/EXTRACCI%C3%93N_DE_L
%C3%8DPIDOS_DE_CEREBRO
_BRAIN_LIPID_EXTRACTION

7. Sin autor, 2008. ​Identificación


Plasmalógenos​, T​ecnología médica
mención morfofisiopatología y
citodiagnóstico. Obtenido de:
http://morfoudec.blogspot.com.co/
2008/

8. García M., 2011.


Propuesta de un método de
incorporación de vitaminas
líquidas lipofílicas en polvos
absorbentes de alta porosidad y su
integración en cápsulas de gelatina
dura. Universidad de El Salvador.
Obtenido de:
http://ri.ues.edu.sv/503/1/10136859
.pdf

9. Casanova, 2011. ​Determinación


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colesterol. ​Obtenido de:
http://bioquimica.obolog.es/determ
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10. Sandoval, 2013. ​Reconocimiento
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11. Cuaran B. s.f. ​Reconocimiento de


lípidos modificados. ​Obtenido de:
https://es.scribd.com/doc/14314906
2/reconocimiento-lipidos-modifica
dos

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