Sistemas Críticos Feum 12 Edición

SISTEMAS CRÍTICOS 635
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AGUA PARA USO FARMACÉUTICO variaciones en las características de calidad del Agua potable
durante las distintas estaciones del año, el proceso de A
INTRODUCCIÓN producción de agua para uso farmacéutico debe diseñarse de
El agua es la sustancia más utilizada en la industria acuerdo a dichas circunstancias.
farmacéutica, ya sea como disolvente o ingrediente para los
preparados farmacéuticos, en el lavado de envases o en las Agua purificada nivel 1. El agua purificada nivel 1 debe
operaciones de limpieza de áreas y equipos durante los
SISTEMAS CRÍTICOS
cumplir con las especificaciones establecidas en la monografía
procesos de fabricación. respectiva. Se usa como ingrediente en la fabricación de
Existen diferentes tipos de agua para uso farmacéutico (véase productos farmacéuticos no inyectables, en la limpieza de
tabla 1), cuyas características se detallan en las monografías algunos equipos y en las fases finales de síntesis de algunos
correspondientes que forman parte de este mismo capítulo. principios activos. Los sistemas de purificación, circulación y
La práctica usual es utilizar Agua potable como punto de almacenamiento del agua purificada deben considerar
partida para la obtención de cualquiera de los tipos elementos protectores que eviten la proliferación microbiana.
mencionados. Esta Agua potable debe cumplir con los Estos sistemas también requieren de un programa frecuente de
requisitos de la versión vigente de la Norma Oficial Mexicana sanitización y monitoreo microbiológico que garantice la
NOM-127-SSA1-1994, Salud Ambiental. Agua para uso y adecuada calidad microbiológica en los puntos de uso. El agua
consumo humano. Límites permisibles de calidad y purificada nivel 1 se prepara a partir de Agua potable,
tratamientos a que debe someterse el agua para su sometiéndola a procesos combinados de desionización,
potabilización. Debido a que esta norma incluye más de 40 ablandamiento, descloración, y/o filtración.
parámetros, el monitoreo sistemático de la calidad contempla
llevar a cabo las pruebas que se consideran esenciales, a saber: La destilación o el proceso de ósmosis inversa en la etapa
1) Las propiedades organolépticas (color, olor y sabor). final, también son adecuados para la producción de agua
2) Turbiedad. purificada nivel 1.
3) Cloro residual libre.
4) Dureza total. Agua purificada nivel 2. El agua purificada nivel 2 debe
5) pH. cumplir con las especificaciones establecidas en la monografía
6) Organismos coliformes totales. respectiva. Se usa como ingrediente en la fabricación de
7) E. coli o coliformes fecales u organismos termotolerantes. productos farmacéuticos no inyectables que requieren de una
alta pureza química y microbiológica. Los sistemas de
Y de manera complementaria se recomienda la siguiente purificación, circulación y almacenamiento del agua purificada
prueba: nivel 2 deben considerar elementos protectores que eviten la
8) Sílice. proliferación microbiana. Estos sistemas también requieren de
un programa frecuente de sanitización y monitoreo
El control de la calidad microbiológica de cualquier tipo de microbiológico que garantice la adecuada calidad
agua, es de primordial importancia dada la ubicua presencia de microbiológica en los puntos de uso. El agua purificada nivel 2
los microorganismos y la facilidad y rapidez con la que se se prepara a partir de Agua potable con los pretratamientos
reproducen. Debe tenerse precaución durante el manejo y necesarios que pueden incluir desionización, osmosis inversa
almacenamiento del agua para evitar la contaminación y/o el y/o ultrafiltración.
crecimiento de la carga microbiana. Los microorganismos y
los productos de su metabolismo presentes en el agua, pueden La destilación en la etapa final, también son adecuados para la
con frecuencia causar efectos adversos en los seres humanos. producción de agua purificada nivel 2.
Agua para la fabricación de inyectables. Se prepara a partir

de Agua potable a la que se le dan los tratamientos adecuados
TIPOS DE AGUA seguidos de un proceso terminal de destilación u otra
Agua potable. La Farmacopea mexicana no incluye una tecnología equivalente o superior que demuestre la eliminación
monografía relativa al Agua potable, pero ésta debe cumplir de sustancias químicas, microorganismos y endotoxinas y que
con las especificaciones de calidad establecidos en la versión no contiene sustancias adicionadas. El agua purificada también
vigente de la Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA1-1994. puede ser utilizada como punto de partida, sometiéndola de
El agua puede provenir de diferentes fuentes, lo que incluye igual manera a un proceso de destilación. Este tipo de agua se
servicios públicos de distribución de agua, o el abastecimiento utiliza como vehículo o solvente en la fabricación de productos
de fuentes privadas (pozos concesionados). También puede ser farmacéuticos inyectables, fabricación de principios activos de
una combinación de ellas. El Agua potable puede emplearse en uso parenteral, también se usa en los últimos pasos de la
las etapas iniciales de la síntesis química de las sustancias limpieza de equipos, tuberías y recipientes involucrados en
activas farmacéuticas así como en la limpieza de los equipos estos procesos. El sistema usado para la producción,
empleados para su producción. El Agua potable es la fuente de almacenamiento y dispensado o distribución de Agua para la
agua prescrita para la producción de agua para uso fabricación de inyectables, debe estar diseñado para prevenir la
farmacéutico. Es responsabilidad del fabricante verificar la contaminación microbiana, la formación de endotoxinas
potabilidad del agua y en su caso tomar las medidas necesarias bacterianas y debe estar validado. Debe cumplir con las
para que cumpla con esta calidad. Dado que puede haber especificaciones establecidas en la monografía respectiva.
AGUA PARA USO FARMACÉUTICO

636 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, duodécima edición.
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Agua estéril para uso inyectable. Es agua para fabricación de SISTEMAS DE AGUA
S inyectables envasada en recipientes adecuados de plástico o
FARMACÉUTICOS
vidrio tipo I o II con volumen máximo de un litro y esterilizada
terminalmente por un método validado. Generalmente es usada Los atributos de calidad del agua para una aplicación
como diluyente de preparaciones parenterales. Debe cumplir con farmacéutica están dictados por los requisitos de su uso.
las especificaciones establecidas en la monografía respectiva. La secuencia de los pasos de proceso que se utilizan para el
tratamiento de agua para distintos propósitos farmacéuticos se
SISTEMAS CRÍTICOS
Agua bacteriostática estéril para uso inyectable. Es agua muestra en la tabla 1. Un proceso típico de evaluación para
para fabricación de inyectables esterilizada, que contiene uno o seleccionar una calidad adecuada para un proceso farmacéutico
varios agentes antimicrobianos. Se emplea como diluyente de particular se muestra en el árbol de decisión en la figura 1. Se
preparaciones parenterales y generalmente está empacada en pueden usar estos diagramas para ayudar en la definición de
envases de dosis individuales de 1 a 30 mL. Debe cumplir con requisitos para usos específicos de agua en la selección de
las especificaciones establecidas en la monografía respectiva. operaciones unitarias.
Agua estéril para irrigación. Es agua para fabricación de SISTEMAS DE AGUA PURIFICADA Y AGUA PARA
inyectables esterilizada y suministrada en envases de más de un FABRICACIÓN DE INYECTABLES
litro de capacidad y con diseño especial para vaciado rápido El diseño, la instalación y la operación de sistemas para
durante su uso. Debe cumplir con las especificaciones producir Agua purificada y Agua para fabricación de
establecidas en la monografía respectiva.
producir Agua purificada y Agua para fabricación de
inyectables incluyen componentes, técnicas de control y
Agua estéril para inhalación. Es agua para fabricación de procedimientos similares. Los atributos de calidad de ambas
inyectables esterilizada y envasada en recipientes adecuados. solamente difieren en la presencia del requisito de endotoxina
Se usa en inhaladores o para preparar soluciones para bacteriana en el Agua para fabricación de Inyectables y en sus
inhalación. Debe cumplir con las especificaciones establecidas métodos de preparación, al menos en la última etapa de
en la monografía respectiva. preparación. Las similitudes en los atributos de calidad
Tabla 1. Agua para uso farmacéutico
SISTEMAS DE AGUA FARMACÉUTICOS

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proporcionan suficientes bases comunes en el diseño de abastecimiento de agua y protegen los componentes
sistemas de agua para cumplir ambos requisitos. La diferencia posteriores del sistema de la contaminación que puede inhibir S
crítica es el grado de control del sistema y los pasos finales de el desempeño del equipo y acortar su ciclo de vida. Los puntos
purificación necesarios para asegurar la eliminación de en cuestión de diseño y operacionales que pudieran impactar el
endotoxinas bacterianas. desempeño de los filtros de profundidad incluyen la
La producción de agua para uso farmacéutico emplea canalización del medio filtrante, el bloqueo por sedimentación,
SISTEMAS CRÍTICOS
operaciones unitarias secuenciales (pasos de proceso) que dan el crecimiento microbiano y la pérdida de medio filtrante. Las
por resultado los atributos específicos de calidad del agua y medidas de control incluyen monitoreo de la presión y del
protegen la operación de los pasos de proceso subsecuentes. La flujo, el retrolavado, la sanitización y el reemplazo del medio
operación unitaria final usada para producir Agua para filtrante. Un punto importante en el diseño es la determinación
fabricación de inyectables se ha limitado a destilación. La
cuestión de diseño y operacionales que pudieran impactar el
destilación tiene una larga historia de desempeño confiable y
desempeño de los filtros de profundidad incluyen la
puede validarse como una operación unitaria para la producción
canalización del medio filtrante, el bloqueo por sedimentación,
de Agua para fabricación de inyectables. Otras tecnologías
el crecimiento microbiano y la pérdida de medio filtrante. Las
tales como la ultrafiltración pudieran ser adecuadas en la
medidas de control incluyen monitoreo de la presión y del flujo,
producción de Agua para fabricación de inyectables, pero la
experiencia actual con este proceso no está difundida. El plan el retrolavado, la sanitización y el reemplazo del medio filtrante. Un
de validación deberá diseñarse para establecer la aptitud del punto importante en el diseño es la determinación del tamaño
sistema y para proporcionar un entendimiento completo de los del filtro para prevenir la canalización o pérdida de medio como
mecanismos de purificación, las condiciones de los intervalos resultado de las velocidades inapropiadas de flujo de agua.
de operación, el pretratamiento requerido, y el modo de falla
común. También es necesario demostrar la efectividad del Los lechos de carbón activado adsorben material orgánico de
esquema de monitoreo y establecer los requisitos para el bajo peso molecular y aditivos oxidantes, tales como
mantenimiento de la validación. compuestos clorados. Estos son usados para alcanzar ciertos
Pueden ser útiles las pruebas llevadas a cabo en una instalación atributos de calidad y para proteger de reacciones con las
piloto para definir los parámetros de operación, la calidad de agua superficies de acero inoxidable, las resinas o membranas. Las
esperada y la identificación de los modos de falla. Sin embargo, principales preocupaciones relativas a los lechos de carbón
la calificación de la operación unitaria específica sólo puede activado incluyen que éstos son propensos a soportar
llevarse a cabo como parte del sistema operacional instalado. crecimiento bacteriano, la canalización hidráulica potencial, la
La selección de las operaciones unitarias específicas y las inhabilidad de regeneración in situ, y la proliferación de
características de diseño para un sistema de agua deberán bacterias, generación de endotoxinas, químicos orgánicos y
considerar la calidad del agua de alimentación, la tecnología partículas muy finas de carbón. Las medidas de control
escogida para los subsecuentes pasos de proceso, la magnitud y incluyen altas velocidades de flujo, la sanitización con agua
complejidad del sistema de distribución y los requisitos caliente o vapor limpio, el retrolavado, las pruebas para
compendiales correspondientes. Por ejemplo, en el diseño de un capacidad de adsorción y el reemplazo frecuente del lecho de
sistema de Agua para Inyección, el proceso final carbón. Pueden usarse tecnologías alternativas tales como los
(destilación) deberá tener una capacidad efectiva de remoción aditivos químicos y los dispositivos de eliminación de
de endotoxina bacteriana y deberá ser validada. orgánicos regenerables en lugar de los lechos de carbón activado.
Los párrafos siguientes son una breve descripción de
Los aditivos químicos son usados en los sistemas de agua
operaciones unitarias seleccionadas y los puntos de validación
para controlar microorganismos mediante el uso de
asociados con ellos. Esta revisión no es amplia en el sentido de
compuestos clorados y de ozono, para provocar la eliminación
que no todas las operaciones unitarias son discutidas, ni se
de sólidos suspendidos mediante el uso de agentes floculantes,
abordan todos los problemas potenciales. El propósito es
para eliminar los compuestos clorados, para ajustar pH, y para
marcar los puntos a enfocar en el diseño, la instalación, el
eliminar carbonatos. Son necesarios pasos subsecuentes de
mantenimiento y los parámetros de monitoreo que faciliten la
proceso para eliminar las sustancias químicas añadidas.
validación de sistemas de agua.
Deberán incluirse en el diseño el control de aditivos y su
La tecnología de filtración juega un papel importante en los monitoreo posterior para asegurar la eliminación de éstos y de
sistemas de agua, y las unidades de filtración están disponibles cualquiera de sus productos de reacción.
en un amplio intervalo de diseños y para varias aplicaciones.
Las eficiencias de remoción difieren significativamente desde Los dispositivos para la eliminación de sustancias
filtros rústicos, tales como antracita granular, cuarzo o arena orgánicas usan resinas de intercambio aniónico macro
para grandes sistemas de agua y los cartuchos de profundidad reticulares capaces de eliminar el material orgánico y las
para sistemas de agua pequeños, a filtros de membrana para endotoxinas del agua. Estas pueden ser regeneradas con
control de partículas muy pequeñas. Las configuraciones soluciones biocidas cáusticas apropiadas. Durante la operación
unitarias y de sistemas varían grandemente en el tipo de medio debe vigilarse la capacidad de eliminación y el
de filtración y su ubicación en el proceso. (El uso de filtros de desprendimiento defragmentos de resina. Las medidas de
membrana se discute en un párrafo posterior). control incluyen la prueba de efluentes, el desempeño del
Los filtros granulares o de cartucho son usados para monitoreo y el uso de filtros en el flujo para eliminar los finos
prefiltración. Estos eliminan contaminantes sólidos del de resina.

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S
SISTEMAS CRÍTICOS
Figura 1. Selección de Agua para uso farmacéutico.
Los suavizantes de agua eliminan los cationes tales como control microbiano. El sistema puede estar diseñado de tal
calcio y magnesio que interfieren con el desempeño del equipo manera que las resinas catiónica y aniónica estén separadas o
de procesamiento posterior tales como las membranas de que formen un lecho mixto. Para este propósito también
ósmosis inversa, las columnas de desionización, y las unidades pueden emplearse cilindros con resina recargables.
de destilación. Las columnas de resina para suavizado son
regeneradas con solución de cloruro de sodio (salmuera). En Los sistemas de electrodesionización (EDI) usan una
esta etapa preocupa la proliferación de microorganismos, la combinación de resinas mezcladas, membranas permeables
canalización debida a velocidades inapropiadas de flujo de selectivas, y una carga eléctrica para proporcionar un flujo
agua, la contaminación orgánica de la resina, la fractura de los continuo (producto y desperdicio concentrado) y regeneración
lechos de resina y la contaminación de la solución de salmuera continua. El agua entra a la sección de resina y a la sección de
usada para la regeneración. Las medidas de control incluyen la desperdicio (concentrado). Como ésta (el agua) pasa a través
recirculación de agua durante los periodos de uso de agua de la resina, se desioniza para convertirse en agua producto. La
limitados, la sanitización periódica de la resina y del sistema resina actúa como un conductor permitiendo al potencial
de salmuera, el uso de dispositivos de control microbiano (por eléctrico que maneje los cationes y aniones capturados a través
ejemplo, luz ultravioleta y cloro), la frecuencia apropiada de de la resina y con membranas apropiadas para la concentración
regeneración, el monitoreo del efluente (dureza) y la filtración y eliminación en el flujo de agua de desperdicio.
posterior para eliminar los finos de resina.
El potencial eléctrico también separa el agua en la sección de
La desionización (DI), la electrodesionización (EDI) y la la resina (producto) en iones hidrógeno e hidroxilo.
electrodiálisis (EDR) son métodos efectivos para mejorar los
atributos de calidad química del agua para eliminar cationes y Esto permite la regeneración continua de la resina sin la
aniones. necesidad de aditivos regenerantes.
La electrodiálisis (EDR) es un proceso similar a la
Los sistemas de desionización (DI) tienen resinas cargadas que electrodesionización que usa únicamente electricidad y
requieren regeneración periódica con ácidos y bases. membranas permeables selectivas para separar, concentrar y
Típicamente, las resinas catiónicas son regeneradas con ácido eliminar los iones descartados. Sin embargo, es menos
clorhídrico o sulfúrico, que remplazan a los iones positivos eficiente que a electrodesionización debido a que no contiene
capturados con iones hidrógeno. Las resinas aniónicas son resinas para provocar la eliminación de iones y el flujo
regeneradas con hidróxido de sodio o potasio, que remplazan corriente. La tecnología de electrodiálisis requiere de un
los iones negativos capturados con iones hidróxilo. Ambos cambio de la polaridad y de purgas para mantener el
regenerantes químicos son biocidas y ofrecen una medida de desempeño operativo.

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Para todas las formas de desionización es importante el control impurezas macromoleculares y microbiológicas tales como las
microbiano y de endotoxinas, el impacto de los aditivos endotoxinas. Esta tecnología puede ser apropiada como un S
químicos sobre las resinas y membranas, y la pérdida, paso de purificación intermedio o final. Similar a la OI, el
degradación, y contaminación de las resinas. Los cuidados desempeño satisfactorio depende de otras operaciones unitarias
específicos para éstas incluyen la frecuencia de regeneración, del sistema y de su configuración.
la canalización, la separación completa de resinas en la
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regeneración de los lechos mixtos y la contaminación del aire Las precauciones con esta tecnología incluyen la
para mezclado (lecho mixto). Las medidas de control varían compatibilidad del material de la membrana con los agentes
pero típicamente incluyen circuitos de recirculación, control sanitizantes, la integridad de las membranas, la contaminación
microbiológico por luz ultravioleta, monitoreo de la por partículas y microorganismos, la retención de
conductividad, análisis de las resinas, la filtración del aire para contaminantes por el cartucho y la integridad del sello. Las
mezclado, el monitoreo microbiológico, la regeneración medidas de control incluyen la sanitización, y los diseños
frecuente para minimizar y controlar el crecimiento capaces de enjuagar la superficie de la membrana, desafíos de
microbiano, la determinación del tamaño del equipo para el integridad, cambios regulares de cartuchos, temperatura
flujo adecuado de agua, y el uso de temperaturas elevadas. Las elevada del agua de alimentación y el monitoreo del carbono
tuberías de regeneración para las unidades de lecho mixto orgánico total y de la presión diferencial. En la operación es
deberán configurarse para garantizar que los químicos posible una flexibilidad adicional, basándose en la manera en
regenerantes entran en contacto con todas las superficies que se configuran las unidades, esto es, configuraciones en
internas y con las resinas. Los cilindros recargables pueden ser serie o en paralelo. Se deberá tener cuidado para evitar
la fuente de contaminación y deberán ser monitoreados condiciones de estancamiento de agua que podrían promover
cuidadosamente. Los factores críticos que aseguran el el crecimiento de microorganismos en las unidades de respaldo
desempeño adecuado de las unidades son: el uso previo de la o de soporte.
resina, el tiempo de almacenaje mínimo entre regeneración y
uso y los procedimientos de sanitización apropiados. Los filtros para retención microbiana (filtros de membrana)
previenen el paso de microorganismos y de partículas muy
Las unidades de ósmosis inversa (OI) emplean una pequeñas. Estos son empleados en los venteos de gases inertes
membrana semipermeable y una presión diferencial y para filtración de aire comprimido usado en la regeneración
substancial para impulsar el agua a través de la membrana para de las unidades pulidoras de lechos mixtos de desionización.
alcanzar la mejora de los atributos de calidad química, Debe vigilarse el bloqueo de los venteos del tanque por vapor
microbiológica y de endotoxinas. El flujo de proceso consiste de agua condensado, que puede causar un daño mecánico al
en el abastecimiento de agua, el agua producto (permeado) y el tanque, y la concentración de microorganismos en la superficie
rechazo de agua (desperdicio). Pueden ser necesarias del filtro de membrana, creando el potencial para la
variaciones de configuración de pretratamiento y del sistema contaminación del tanque o del contenido de los
dependiendo de la fuente de agua, el desempeño deseado y su desionizadores. Las medidas de control incluyen el uso de
confiabilidad. Los cuidados asociados con el diseño y filtros hidrofóbicos y carcasas de filtros de venteo con
operación de las unidades de OI incluyen la sensibilidad del chaqueta de calentamiento para prevenir la condensación de
material de las membranas a las bacterias y a los agentes vapor. Son también recomendados como métodos de control la
sanitizantes, la contaminación de las membranas, la integridad esterilización de la unidad previa a su uso inicial y
de las membranas, la integridad de los sellos y el volumen del periódicamente, así como el cambio regular de filtros.
agua de rechazo. Las fallas de membranas o de los sellos
pueden dar por resultado la contaminación del agua producto. Los filtros de retención microbiana son incorporados algunas
Los métodos de control consisten de un pretratamiento veces en el sistema de purificación o en la tubería de
adecuado del agua, la selección apropiada de las membranas, distribución. Esta aplicación debe ser cuidadosamente
las pruebas de integridad, diseños de las membranas tales controlada debido a que, como se explicó anteriormente, estas
como espirales para promover la acción de purga, sanitización unidades pueden convertirse en una fuente de contaminación
periódica, monitoreo de presiones diferenciales, conductividad, microbiana. Existe el potencial para la liberación de
niveles de microorganismos, y carbono orgánico total. La microorganismos debido a una ruptura del filtro de membrana
configuración de las unidades de OI ofrece oportunidades de o como resultado del crecimiento microbiano.
control mediante la expansión de un esquema simple a una
etapa paralela, la etapa de rechazo, dos pasos y diseños Pueden emplearse otros medios para controlar a los
combinados. Un ejemplo podría ser el uso de un diseño de dos microorganismos en lugar de los filtros de membrana en las
pasos para mejorar la confiabilidad, la calidad y la eficiencia. secciones de purificación y distribución de los sistemas de
Las unidades de OI pueden usarse solas o en combinación con agua. Los filtros que pretendan ser de retención microbiana
unidades de desionización y electro-desionización para deberán ser sanitizados y hacerles una prueba de integridad
mejoras operacionales y de calidad. antes de su uso inicial y probarlos posteriormente a intervalos
apropiados.
La ultrafiltración es otra tecnología que usa una membrana
permeable, pero a diferencia de la OI ésta trabaja por Los medios filtrantes cargados positivamente reducen los
separación mecánica en lugar de ósmosis. Debido a la niveles de endotoxina mediante la atracción electrostática y la
capacidad de filtración de la membrana se reducen las adsorción. Su aplicación puede consistir en una operación

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unitaria o relacionada al sistema de distribución dependiendo Sistema de distribución. La configuración de distribución

S de los requisitos de control microbiano. Los medios filtrantes debe permitir el flujo continuo de agua en la tubería por medio
que retienen microorganismos requieren los mismos cuidados de recirculación o deberá permitir una purga periódica del
y controles indicados en el párrafo anterior, estos incluyen la sistema. La experiencia ha demostrado que los sistemas con
velocidad de flujo, la integridad y sello de la membrana y la recirculación son más fáciles de mantener.
capacidad de retención, que puede ser afectada por el
desarrollo de una potencial carga finita sobre el filtro. Las Las bombas deben estar diseñadas para proporcionar
SISTEMAS CRÍTICOS
medidas de control incluyen el monitoreo de la presión condiciones de flujo turbulento total para retrasar el desarrollo
diferencial y los niveles de endotoxina, la determinación del de biocapas.
tamaño adecuado, las pruebas de integridad, y la configuración
de las unidades para controlar las posibles rupturas. Los componentes y líneas de distribución deben tener
pendiente y estar acoplados con puntos de drenado de manera
Las unidades de destilación llevan a cabo la purificación tal que el sistema pueda drenarse completamente. En el
química y microbiológica a través de la vaporización térmica y sistema de distribución, cuando el agua se circula a alta
su condensación. Están disponibles una variedad de diseños temperatura, deberán evitarse las zonas de estancamiento y las
incluyendo las de simple efecto, múltiple efecto, y de zonas de flujo lento, y en los puntos de ensamble de las
compresión de vapor. Las últimas dos configuraciones válvulas deberá existir una relación de longitud a diámetro de
normalmente son usadas en sistemas grandes debido a su 6 o menor.
capacidad de generación y eficiencia.
En los sistemas de distribución a temperatura ambiente, deberá
ejercerse un cuidado particular para evitar áreas con cavidades
Los sistemas de agua destilada pueden requerir de controles
y proveer un drenado completo. El agua que haya salido del
menos rigurosos de calidad de agua de alimentación que los
circuito no deberá regresar al sistema. El diseño del sistema
sistemas de membrana. Las precauciones con esta tecnología
deberá incluir la colocación de válvulas de muestreo en el
incluyen el arrastre de impurezas, la inundación del
tanque de almacenamiento y en otros sitios tales como la línea
evaporador, el agua estancada, los diseños de sello de la
de retorno del sistema de recirculación de agua. Los sitios
bomba y el compresor, y la variación de conductividad
primarios de muestreo de agua deberán ser las válvulas que
(calidad) durante el arranque y la operación. Los métodos de
entregan agua al punto de uso. Las conexiones directas a los
control consisten en: la eliminación confiable de vapor de
procesos o equipo auxiliar deberán estar diseñadas para
agua, indicativos visuales o automáticos de niveles altos de
prevenir un contraflujo al sistema de agua controlado. El
agua, el uso de bombas y compresores sanitarios, drenaje
sistema de distribución deberá permitir la sanitización para
adecuado, control de la purga y el uso de un sensor de
control de microorganismos.
conductividad en línea con controles para la desviación
automática de agua de calidad inaceptable al drenaje de
El sistema deberá operarse continuamente en condiciones de
desperdicio.
autosanitización o sanitizarlo periódicamente.
Los tanques de almacenamiento están incluidos en los
sistemas de distribución para optimizar la capacidad del equipo INSTALACIÓN, MATERIALES DE CONSTRUCCIÓN Y
de procesamiento. El almacenamiento permite que se lleve a SELECCIÓN DE COMPONENTES
cabo el mantenimiento de rutina de los equipos sin afectar el
abastecimiento para cumplir las necesidades de producción. Se Las técnicas de instalación son importantes debido a que
requiere de consideraciones en el diseño para prevenir el pueden afectar la integridad mecánica, corrosiva y sanitaria del
desarrollo de biocapas, para minimizar la corrosión, para sistema. La posición de instalación de las válvulas debe
ayudar en el uso de la sanitización química de los tanques y promover el drenaje por gravedad. Los soportes de la tubería
para salvaguardar la integridad mecánica. Estas deberán proporcionar las pendientes apropiadas para el drenaje
consideraciones podrían incluir el uso de tanques cerrados con y deberán estar diseñadas para soportar la tubería en las
superficies lisas y la habilidad de rociar la parte superior del condiciones térmicas de la peor situación. Los métodos para
conectar los componentes del sistema incluyendo las unidades
tanque. Esto minimiza la corrosión y el desarrollo de biocapas
de operación, los tanques, y la tubería de distribución requieren
y ayuda en la sanitización térmica o química.
de atención cuidadosa para evitar problemas potenciales. Las
soldaduras de acero inoxidable deberán proporcionar uniones
Los tanques de almacenamiento requieren de venteo para
confiables que internamente sean lisas y libres de corrosión. El
compensar la dinámica de cambiar niveles de agua. Esto se acero inoxidable de bajo contenido de carbón, el relleno
puede lograr con un filtro de membrana de retención compatible y en donde sea necesario gas inerte y máquinas de
microbiana acoplado a una conexión para venteo atmosférico, soldar automáticas e inspecciones regulares y documentación
puede utilizarse alternativamente un sistema de presurización y de ayuda para asegurar una calidad aceptable de las soldaduras.
venteo automático de gas comprimido filtrado. El seguimiento a los procesos de limpieza y pasivación es
importante para asegurar la eliminación de la contaminación,
Los discos de ruptura equipados con un dispositivo de alarma los productos de corrosión y el restablecimiento de la superficie
de ruptura sirven como una protección adicional de la pasiva resistente a la corrosión. En algunos casos los materiales
integridad mecánica del tanque. plásticos pueden

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fundirse (soldarse) y también requieren de superficies internas Las bombas deben ser de diseño sanitario con sellos que
uniformes y lisas. Los adhesivos deberán evitarse debido al prevengan la contaminación del agua. S
potencial de huecos y de reacciones químicas.
Las válvulas deben tener superficies internas lisas con asientos
Los métodos mecánicos de ensamble, tales como el ajuste con y dispositivos de cierre expuestos a la acción del flujo del
pestaña requieren cuidado para evitar la creación de vástagos, agua, tal como ocurre en las válvulas de diafragma.
SISTEMAS CRÍTICOS
hendiduras, penetraciones y huecos.
Se deberá evitar el uso de válvulas con huecos o dispositivos
Las medidas de control incluyen un buen alineamiento, la de cierre que se mueven dentro y fuera del área de flujo (por
determinación del tamaño adecuado de empaques, los espacios ejemplo, bola, tapón, esclusa, globo).
apropiados, una fuerza de sellado uniforme y el evitar
conexiones roscadas. SANITIZACIÓN
Los materiales de construcción se deberán seleccionar para ser El control microbiológico en un sistema de agua se alcanza
compatibles con las medidas de control tales como la principalmente a través de prácticas de sanitización. Los
sanitización, la limpieza y la pasivación. Las temperaturas de sistemas pueden ser sanitizados usando medios térmicos o
operación son un factor crítico al escoger los materiales químicos. También puede utilizarse luz ultravioleta en línea a
apropiados debido a que las superficies pueden requerir el una longitud de onda de 254 nm para “sanitizar”
manejo de temperaturas de operación y sanitización elevadas. continuamente el agua en el sistema.
Cuando se utilicen sustancias químicas o aditivos para limpiar,
controlar, o sanitizar el sistema, deberán utilizarse materiales El enfoque térmico a la sanitización del sistema incluye la
resistentes a estos químicos o aditivos. circulación periódica o continua de agua caliente y la
utilización de vapor. Estas técnicas están limitadas a sistemas
Los materiales deben ser capaces de manejar flujo turbulento y que son compatibles con la alta temperatura necesaria para
velocidades elevadas sin desgaste sobre la barrera de impacto alcanzar la sanitización tales como acero inoxidable y algunas
corrosiva, tales como la superficie de óxido de cromo del acero formulaciones de polímeros. Aún cuando los métodos térmicos
inoxidable relacionada a la pasivación. El acabado sobre controlan el desarrollo de biocapas, estos no son efectivos para
materiales metálicos tales como el acero inoxidable, ya sea si eliminar biocapas establecidas.
se trata de un acabado de taller, de un pulido de arena
específico, o de un tratamiento con electropulido debe Los métodos químicos, cuando son compatibles, pueden ser
complementar el diseño del sistema y proveer resistencia a la usados sobre una amplia variedad de materiales de
corrosión y a la actividad microbiana satisfactoria. El equipo construcción. Estos métodos emplean típicamente agentes
auxiliar y los ensambles que requieran sellos, empaques, oxidantes tales como compuestos halogenados, peróxido de
diafragmas, medios filtrantes, y membranas no deberán utilizar hidrógeno, ozono, o ácido peracético.
materiales que permitan la posibilidad de extractables,
desprendimiento y actividad microbiana. Los compuestos halogenados son sanitizantes efectivos pero
son difíciles de enjuagar del sistema y tienden a dejar la
Los materiales de aislamiento expuestos a superficies de acero biocapa intacta. Los compuestos tales como peróxido de
inoxidable deben ser libres de cloruros para evitar el fenómeno hidrógeno, ozono y ácido peracético, oxidan a la bacteria y a la
de corrosión por cuarteadura tensionante que puede provocar biocapa formando peróxidos reactivos y radicales libres
la contaminación del sistema y la destrucción de tanques y (notablemente radicales hidroxilo). La corta vida media de
componentes críticos del sistema. estos compuestos, particularmente el ozono, pueden requerir
que deba añadirse continuamente durante el proceso de
Las especificaciones son importantes para asegurar la sanitización. El peróxido de hidrógeno y el ozono se degradan
selección adecuada de los materiales y sirven como una rápidamente en agua y oxígeno, el ácido peracético se degrada
referencia para la calificación y mantenimiento del sistema. a ácido acético en la presencia de luz ultravioleta.
Información tal como el número de colada del acero
inoxidable, y los informes de composición, clasificación y las La luz ultravioleta impacta en el desarrollo de biocapas
capacidades de manejo de materiales para sustancias no mediante la reducción de la velocidad de colonización de
metálicas deberá ser revisada para verificar su aptitud y microbios nuevos en el sistema; sin embargo, es sólo
retenida para referencia. parcialmente efectivo contra microorganismos planctónicos.
Sola, la luz ultravioleta no es una herramienta efectiva debido
La selección de componentes (equipo auxiliar) deberá hacerse a que no elimina las biocapas existentes. Sin embargo, cuando
con la seguridad de que no representen una fuente de se acopla con las tecnologías de sanitización térmica o química
contaminación. Los intercambiadores de calor deben ser de convencionales puede prolongar los intervalos entre
diseño de doble tubo o de tubo concéntrico. Estos deberán sanitizaciones del sistema.
incluir un monitoreo de la presión diferencial o utilizar un
medio de transferencia de calor de igual o mejor calidad para El uso de luz ultravioleta también facilita la degradación del
evitar los problemas que las fugas puedan causar. peróxido de hidrógeno y del ozono.

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Los pasos de sanitización requieren de validación para Las tecnologías para sanitización fueron descritas
S demostrar la capacidad de reducción y para mantener la anteriormente.
contaminación microbiológica a niveles aceptables. La
validación de los métodos térmicos deberá incluir un estudio Mantenimiento preventivo. Deberá existir un programa de
de distribución de calor para demostrar que se ha alcanzado la mantenimiento preventivo. Éste, establecerá el mantenimiento
temperatura de sanitización en todo el sistema. La utilización preventivo que debe realizarse, la frecuencia del trabajo de
de métodos químicos requiere una demostración de que las mantenimiento y cómo deberá documentarse el trabajo.
SISTEMAS CRÍTICOS
concentraciones de sustancias químicas a lo largo del sistema

son adecuadas. Además debe demostrarse que al término del Control de cambios. La configuración mecánica y las
proceso de sanitización, se realiza una remoción efectiva de los condiciones de operación deberán estar controladas. Los
residuos químicos. Este proceso debe ser validado. cambios propuestos deberán ser evaluados para su impacto en
el sistema completo. Deberá ser determinada la necesidad de
La frecuencia de sanitización generalmente esta dictada por los recalificar el sistema después de hacer cambios. Cuando se
resultados del monitoreo del sistema. Las conclusiones requiera modificar un sistema de agua, deberán revisarse y
derivadas del análisis de tendencias de los datos corregirse los diagramas afectados, los manuales y los
microbiológicos deberán ser utilizadas como el mecanismo de procedimientos.
alerta para el mantenimiento del sistema. Deberá ser
establecida la frecuencia de sanitización de manera tal que el CONSIDERACIONES DE MUESTREO
sistema opere en un estado de control microbiológico y no
exceda los niveles de alerta.
Los sistemas de agua deberán ser monitoreados a una
frecuencia que sea suficiente para asegurar que el sistema está
OPERACIÓN, MANTENIMIENTO Y CONTROL
bajo control y continúa produciendo agua de calidad aceptable.
Las muestras deben ser tomadas de puntos representativos
Deberá establecerse un programa de mantenimiento preventivo
dentro de los sistemas de procesamiento y distribución. El
para asegurar que el sistema de agua permanece en un estado
de control. El programa deberá incluir: establecimiento de la frecuencia de muestreo debe estar basado
en los datos de validación y deberá cubrir áreas críticas. Los
1. Los procedimientos para operar el sistema, puntos de las operaciones unitarias podrán ser muestreados con
2. Los programas de monitoreo para los atributos críticos menos frecuencia que los puntos de uso.
de calidad y las condiciones de operación incluyendo la El plan de muestreo deberá tomar en consideración las
calibración de los instrumentos críticos, especificaciones del agua que está siendo muestreada. Por
3. El programa de sanitización periódica, ejemplo, en los sistemas de agua para inyección, debido a sus
4. El mantenimiento preventivo de componentes, y mayores requisitos microbiológicos, deberá requerir una
5. El control de cambios al sistema mecánico y a las frecuencia de muestreo más rigurosa. Cuando se muestreen
condiciones de operación. sistemas de agua deberá tenerse especial cuidado para
asegurarse que la muestra es representativa. Los puertos de
Procedimientos de operación. Deberán estar por escrito los muestreo deberán ser drenados adecuadamente antes de tomar
procedimientos para la operación del sistema de agua, el la muestra. Las muestras que contengan agentes sanitizantes
desempeño de la rutina de mantenimiento y las acciones químicos requieren de neutralización antes del análisis
correctivas; también definirán el punto cuando se requiere una microbiológico. Las muestras para análisis microbiológico
acción. Los procedimientos deberán estar bien documentados, deberán analizarse inmediatamente o protegerse
detallar las funciones de cada trabajo, asignar quién es el apropiadamente para preservar la muestra hasta que pueda
responsable para llevarlas cabo y describir como se debe comenzar el análisis. Las muestras del agua cruda son
realizar el trabajo. solamente indicativas de la concentración de microorganismos
planctónicos (flotación libre) presentes en el sistema. Los
Programa de monitoreo. Las variables críticas de calidad y microorganismos bénticos (adheridos), presentes como
los parámetros de operación deberán ser documentados y
biocapas, se encuentran generalmente en un número mayor y
monitoreados. El programa deberá incluir una combinación de
constituyen una fuente importante de la población planctónica.
sensores en línea o registradores (por ejemplo, un medidor de
Los microorganismos en las biocapas representan una fuente
conductividad y su registro) y de documentación manual de los
continua de contaminación y son difíciles de muestrear y
parámetros operacionales (tales como la caída de presión del
cuantificar. Consecuentemente, la población planctónica es
filtro de carbón) y las pruebas de laboratorio (por ejemplo,
cuenta microbiológica total). Deberá incluirse la frecuencia de usada como un indicador del nivel de contaminación del
muestreo, el requisito de evaluar los resultados de prueba y la sistema y es la base para los niveles de alerta del sistema. La
necesidad de iniciar una acción correctiva. aparición consistente de niveles elevados de microorganismos
planctónicos es generalmente un indicador de un desarrollo de
Sanitización. Es necesario establecer el método y la biocapas avanzadas que necesitan una acción correctiva. El
periodicidad de la sanitización dependiendo del diseño del control del sistema y la sanitización son claves para mantener
sistema y de las unidades de operación seleccionadas, para bajo control la formación de biocapas y de la consecuente
mantener el sistema en un estado de control microbiológico. población planctónica.

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CALIFICACIÓN DE UN SISTEMA DE drenaje, deberán cumplir con las especificaciones y
AGUA PARA USO FARMACÉUTICO

planos de instalación. C
4. Inspección de las válvulas de los puntos de uso y de
La calificación de un sistema de agua para uso farmacéutico es muestreo, deberán estar de acuerdo a las
la demostración de la consistencia de la producción de agua especificaciones y planos correspondientes aprobados.
que cumple con la calidad especificada, bajo las condiciones 5. Inspección de los accesorios de soporte y fijación de la
SISTEMAS CRÍTICOS
establecidas y siguiendo los procedimientos aprobados. tubería de las líneas de conducción, deberán estar firme-
Para poder cumplir con la calificación satisfactoria del sistema mente instaladas de acuerdo a los planos y aisladas
deberán tomarse en cuenta los siguientes conceptos: eléctricamente, cuando se trate de tuberías de acero
inoxidable.
a. Cada componente del sistema deberá estar construido e 6. Inspección del desarrollo de los procedimientos de
instalado de acuerdo con los planos y especificaciones limpieza y pasivación de los módulos de
aprobadas, debiendo ser inspeccionado, probado y almacenamiento y distribución del sistema, deberán
documentado por personal con los conocimientos y incluir los informes de inspección en campo, resultados
experiencia suficiente. de pruebas y registro de las actividades ejecutadas bajo
b. Deberá generarse la información relativa al diseño, el procedimiento aprobado.
fabricación, construcción, instalación, pruebas 7. Inspección de los instrumentos de medición de los
realizadas por el proveedor, inspección en campo y equipos y el sistema completo, deberán estar de
puesta en operación, para cada componente y del acuerdo a los manuales técnicos de los fabricantes de
sistema completo. los equipos y a los planos aprobados, así mismo
c. Esta documentación deberá ser planeada, estar deberán estar calibrados y funcionando correctamente,
organizada y autorizada, para que forme parte integral contando con los certificados correspondientes.
de la documentación soporte de la calificación del 8. Todos los materiales de construcción de los equipos,
sistema. tanques, tuberías, válvulas, instrumentos de medición y
d. Los criterios del diseño y los requerimientos de control y otros accesorios que estén en contacto con el
documentación deberán estar claramente definidos agua, a lo largo de sus distintas etapas de producción,
desde las fases tempranas del diseño, con el fin de almacenamiento y conducción de agua, deberán estar
asegurar que se satisfacen las necesidades y construidos con materiales sanitarios y compatibles con
expectativas de la empresa, permitiendo una adecuada el proceso.
planeación y organización que contribuya a una puesta 9. La comparación y análisis de la información recopilada
en marcha y validación oportunas. y resultados de verificaciones, comparados con los
e. Durante la construcción e instalación del sistema criterios de aceptación y especificaciones establecidos
deberá llevarse a cabo un seguimiento estrecho del como marco de referencia de la documentación del
cumplimiento de especificaciones y pruebas planeadas, diseño y la instalación del sistema.
documentándose de manera completa y oportuna todas 10. Las conclusiones y dictamen correspondiente,
las actividades y resultados. dependiente de la información recopilada y analizada.
CALIFICACIÓN DEL SISTEMA II. Calificación de operación
A continuación se presentan, de manera resumida, las Esta fase de la calificación deberá llevarse a cabo siguiendo las
actividades básicas que deberán incluirse en el plan de la indicaciones establecidas en un protocolo específico
calificación de un sistema de producción de agua para uso previamente aprobado.
farmacéutico.
Como mínimo deberá incluir los siguientes puntos:
I. Calificación de la instalación
1. Verificación de todas las funciones manuales y
automáticas con las que cuenten los equipos, de manera
Esta fase de la calificación deberá llevarse a cabo siguiendo las individual, y el sistema completo.
instrucciones establecidas en un protocolo específico 2. Verificación de los mecanismos de control de
previamente aprobado. parámetros de operación del sistema.
Como mínimo deberá incluir los siguientes puntos: 3. Verificación del funcionamiento correcto de los
instrumentos de medición y monitoreo del sistema.
1. Inspección de la localización e instalación de cada uno 4. Las especificaciones y criterios de aceptación bajo las
de los componentes del sistema, deberán estar de cuales el sistema deberá operar, así como los
acuerdo a los diagramas y planos aprobados. parámetros establecidos en las bases del diseño.
2. Inspección de la localización, calidad y codificación de 5. Verificación del funcionamiento correcto de alarmas y
las soldaduras o uniones, deberán estar de acuerdo a los otros accesorios incluidos en los mecanismos de
planos isométricos aprobados. seguridad del sistema.
3. Inspección de las elevaciones relativas, ángulo de 6. Informes y registros de todas las pruebas indicadas en
declive de las líneas de conducción y los puntos de el protocolo.
CALIFICACIÓN DE UN SISTEMA DE AGUA PARA USO FARMACÉUTICO

_________________________________________________________________
7. El análisis de los resultados y la comparación de los Segunda fase: el objetivo principal de esta fase es demostrar
C mismos con los criterios de aceptación y que el sistema continua operando consistentemente dentro de
especificaciones establecidos como marco de referencia los parámetros establecidos y que produce la cantidad
del funcionamiento de los equipos y el sistema requerida de agua para uso farmacéutico, cumpliendo todas las
completo. muestras con las especificaciones de calidad establecidas.
8. Las conclusiones y dictamen correspondiente, Deberá diseñarse un programa intensivo de muestreo para
dependiente de la información recopilada y analizada. pruebas fisicoquímicas y microbiológicas, que considere la
SISTEMAS CRÍTICOS
posibilidad de tener información de la calidad del agua todos

III. Calificación de desempeño del sistema los días y de todos los puntos de uso y de muestreo.
El cambio de fase estará dado por la demostración de la
Esta fase de la calificación del sistema toma un periodo de consistencia en la operación y calidad del agua generada y
tiempo largo, y está sujeta a los cambios en los factores que distribuida a lo largo de todo el sistema.
afectan directamente la operación del sistema y las variables La duración de esta etapa depende en gran medida de los
que influyen en la calidad del agua generada. resultados obtenidos, debe tomarse en cuenta que si se pierde
el control del sistema o la operación no es consistente deberá
Para esta fase de la calificación también deberá desarrollarse regresarse a la primera fase.
un protocolo específico, donde se indiquen las actividades,
pruebas y análisis que deberán llevarse a cabo. Tercera fase: tiene como propósito principal, demostrar, en un
período largo de tiempo, que el sistema genera y distribuye
El protocolo de calificación de desempeño deberá incluir, agua para uso farmacéutico cumpliendo consistentemente con
como mínimo, los siguientes puntos: la calidad y los parámetros de operación establecidos.
El muestreo y análisis debe programarse, tomando en
1. El sistema de monitoreo establecido para dar consideración que todas los puntos de uso deberán ser
seguimiento al control de la operación productiva del muestreados y analizados a lo largo de la semana y que
sistema. deberán tenerse resultados analíticos y de monitoreo todos los
2. Los procedimientos normalizados de operación y los días en que opere el sistema.
formatos de registro correspondientes. Si se presentan resultados fuera de especificaciones,
3. El programa de muestreos, indicando los puntos de automáticamente se deberá regresar a la segunda fase.
colección del agua, las cantidades, condiciones de la El período de pruebas para concluir esta fase deberá de ser de
toma de muestra y la frecuencia del muestreo. un año, de tal manera que se tenga la oportunidad de evaluar el
4. Los criterios de aceptación y especificaciones que sistema durante las diferentes estaciones y condiciones del año.
servirán como marco de referencia para evaluar el
desempeño del sistema.
5. Los resultados analíticos y de pruebas realizadas, así
CONSIDERACIONES
como los registros de las mediciones de las variables de
control del proceso de generación del agua. MICROBIOLÓGICAS
6. Las conclusiones y dictamen derivados de la revisión y La mayor fuente de contaminación externa es el agua de
análisis de la información recopilada. alimentación.
La calidad de ésta debe, por lo menos, cumplir con los
Dada la importancia de esta etapa de la calificación del sistema atributos de calidad para el agua potable, en la cual se regula el
se recomienda establecer el desarrollo del protocolo, cubriendo número de coliformes. Existe una amplia variedad de otro tipo
gradualmente tres fases, lo que permitirá conocer y controlar de microorganismos en el agua, mismos que pueden
mejor la operación y desempeño del sistema, generando la comprometer etapas subsecuentes de purificación.
evidencia documental correspondiente. Algunos ejemplos de otras posibles fuentes de contaminación
microbiana incluyen: filtros de venteo no protegidos, filtros de
Primera fase: el propósito de esta fase es el de establecer los aire no operativos, reflujo de sitios contaminados, resinas y
límites apropiados para la operación del sistema, así como carbón activado, etcétera. Es conveniente que se preste
generar la información para el establecimiento de los atención en el diseño y mantenimiento del sistema, para evitar
procedimientos de limpieza y sanitización. Los monitoreos, la contaminación microbiana por éstas vías.
control de parámetros de operación y el manejo de las Las operaciones unitarias (pasos de proceso) pueden ser una
variaciones presentadas desde el arranque del sistema forman fuente interna de contaminación microbiana. Los
la base de la experiencia y conocimiento en el nuevo sistema microorganismos presentes en al agua de alimentación pueden
de generación y distribución de agua para uso farmacéutico. adherirse a los lechos de carbón, resinas de los desionizadores,
Esta fase concluye cuando se tiene controlado el sistema y filtros de membranas, y otras superficies de las unidades de
muestra una operación consistente dentro de los parámetros operación iniciando la formación de una biocapa. Esta es una
establecidos en este período. El tiempo aproximado de respuesta de ciertos microorganismos para sobrevivir en
duración de esta fase es de dos a cuatro semanas, en ambientes bajos en nutrientes. Los microorganismos de una
condiciones normales. Es importante considerar que no se biocapa se encuentran protegidos contra la acción de un gran
deberá pasar a la segunda fase si los resultados del monitoreo y número de biocidas. La colonización puede darse cuando los
del control del sistema no son consistentes. microorganismos se desprenden y son trasladados a otras
CONSIDERACIONES MICROBIOLÓGICAS
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zonas del sistema de agua. Los microorganismos también CULTIVO TRADICIONAL

pueden adherirse a las partículas suspendidas (como finos de C
los lechos de carbón), siendo una fuente de contaminación para El uso de cultivos tradicionales para el monitoreo
el equipo de purificación y sistemas de distribución. microbiológico de agua incluye, sin estar limitado, al método
Otra fuente de contaminación microbiana interna es el sistema de vaciado en placa, placas de contacto, filtración por
de distribución del agua. Los microorganismos pueden membrana y prueba del número más probable (NMP). Estos
SISTEMAS CRÍTICOS
colonizar las superficies de los ductos, válvulas y otro tipo de métodos generalmente son fáciles de desarrollar, poco
áreas. Proliferan formando una biocapa, la cual es una fuente costosos, y dan excelentes resultados. La sensibilidad del
permanente de contaminación. método puede aumentar usando muestras de mayor tamaño.
Las endotoxinas son lipopolisacáridos y se encuentran en la Esta estrategia se usa en el método de filtración por membrana.
parte externa de la pared celular de las bacterias Gram El resultado de este tipo de cultivos está ampliamente definido
negativas. Éstas forman biocapas con gran facilidad, las cuales por el tipo de medio empleado, en combinación con el tiempo y
son una fuente de endotoxinas y pueden asociarse a temperatura de incubación. Esta combinación debe
microorganismos vivos, o a fragmentos de microorganismos seleccionarse de acuerdo a las necesidades de monitoreo que
muertos, pudiendo también encontrarse como moléculas libres,
presente cada sistema de agua, así como su habilidad para
estas pueden desprenderse de la superficie celular o de las
recuperar microorganismos que puedan tener efectos negativos
biocapas que colonizan el sistema de agua, o pueden entrar al
en el producto o proceso.
sistema de agua vía agua de alimentación. Los niveles de
Existen dos formas típicas de medios de cultivo disponibles
endotoxinas pueden reducirse controlando la introducción de
para el análisis microbiológico: altamente nutritivos, y pobres
microorganismos y la proliferación microbiana en el sistema.
en nutrientes. Los medios altamente nutritivos son usados
Esto puede lograrse mediante la exclusión normal o acción de
eliminación soportada por diversas unidades de operación como medios generales para el aislamiento y enumeración de
dentro de las etapas de tratamiento del sistema, así como bacterias heterotróficas. Los medios pobres en nutrientes son
mediante su sanitización. Otros métodos de control incluyen el adecuados para el aislamiento de bacterias de lento
uso de ultra filtros o filtros con carga modificada, ya sea en crecimiento, y bacterias que han sido dañadas por haber estado
línea o en el sitio de uso. La presencia de endotoxinas puede expuestas a desinfectantes y sanitizantes como el cloro. Estos
monitorearse en la forma que se describe en el MGA 0316, medios pueden compararse con los altamente nutritivos,
Determinación de endotoxinas bacterianas. principalmente durante la validación de un sistema de agua,
para estar en posibilidad de determinar si se encuentra presente
CONSIDERACIONES METODOLÓGICAS un número adicional de bacterias (en número y/o tipo), y poder
evaluar su impacto en el producto final. La eficacia de los
El objetivo de un programa de monitoreo microbiológico para sistemas de control y sanitización en las bacterias de lento
un sistema de agua, es el de proporcionar información crecimiento o en bacterias dañadas, también puede ser
suficiente para controlar la calidad microbiológica del agua evaluada.
producida. Los requerimientos de calidad del producto deberán El tiempo y temperatura de incubación son también aspectos
indicar el grado de calidad del agua. Es posible mantener un críticos en un método de prueba microbiológica. Las
nivel adecuado de control empleando técnicas de tendencias de
metodologías clásicas en las que se usan medios altamente
datos, y limitando microorganismos específicos
nutritivos requieren de temperaturas de incubación de 30 a 35 °
contraindicados. Con ello, no será siempre necesario detectar
C durante 48 a 72 h. En algunos sistemas de agua, el incubar a
todos los microorganismos existentes. El programa de
monitoreo y la metodología deberán indicar condiciones temperaturas menores (20 a 25 °C) durante períodos de tiempo
adversas y detectar microorganismos potencialmente dañinos más largos (5 a 7 días) puede arrojar cuentas más altas, si los
para el producto terminado y/o el consumidor. datos se comparan con la metodología clásica.
La elección final de las variables del método deberá basarse en Si un sistema en particular debe o no ser monitoreado
los requerimientos individuales del sistema que está siendo empleando temperaturas más bajas de incubación o períodos
monitoreado. Debe reconocerse que no hay un método único prolongados de incubación, es algo que debe determinarse
capaz de detectar todos los contaminantes microbianos en un durante la validación del sistema.
sistema de agua. Aquellos que sean elegidos deberán ser La decisión de emplear períodos de incubación mayores deberá
capaces de aislar números y tipos de organismos que se tomarse después de considerar las necesidades de información
consideran importantes para el control del sistema, y que tienen inmediata, y el tipo de acciones correctivas requeridas cuando
impacto en éste. se sobrepasa un nivel de alerta o acción. La ventaja de incubar
Es necesario considerar varios criterios al elegir un método
por períodos largos es que los microorganismos dañados, de
para monitorear el contenido microbiano de un sistema de agua
lento crecimiento, o microorganismos fastidiosos, alcancen a
de uso farmacéutico. Estos incluyen: sensibilidad del método,
tipo de organismos recuperados, muestreo, período de recuperarse. Esto deberá evaluarse frente a la necesidad de
incubación, costo y complejidad técnica. Una consideración obtener información inmediata para estar en posibilidad de
adicional es el uso del “cultivo tradicional” frente al uso de tomar acciones correctivas, considerando la habilidad de estos
instrumentos sofisticados. microorganismos para alterar los productos o procesos.
_________________________________________________________________
USO DE INSTRUMENTOS A menudo se recupera un grupo muy limitado de

C microorganismos en un sistema de agua. Después de varias
Algunos ejemplos incluyen el uso de técnicas microscópicas caracterizaciones, un microbiólogo experto puede
de conteo directo (epifluorescencia e inmunofluorescencia), y identificarlos con base en la morfología de la colonia y las
metodologías radiométricas, impedométricas y basadas en características de tinción. Este nivel de caracterización es
métodos bioquímicos. Todas ellas tienen una gran variedad de adecuado en la mayoría de los casos.
ventajas y desventajas.
SISTEMAS CRÍTICOS
Una ventaja es su precisión y exactitud. En general, el uso de NIVELES DE ALERTA Y ACCIÓN

instrumentos favorece la obtención de resultados en períodos
Las monografías individuales para Agua purificada y Agua
cortos de tiempo, lo cual facilita el control del sistema. Esta
para fabricación de inyectables no incluyen límites
ventaja, sin embargo, es frecuentemente opacada por
microbianos específicos. Estos fueron omitidos debido a que la
limitaciones en el procesamiento de muestras o del
mayoría de las técnicas microbiológicas actualmente
instrumento. Además, los resultados obtenidos requieren que
disponibles requieren de un mínimo de 48 h para la obtención
los microorganismos aislados sean caracterizados, por lo que el
de resultados. Para entonces, el agua de la cual fue tomada la
cultivo tradicional sigue siendo el de elección ya que ofrece un
muestra ya ha sido empleada en el proceso de producción. El
balance adecuado en los atributos de cada prueba, y una amplia
no cumplir con una especificación demanda el rechazo del lote
gama de análisis post prueba.
del producto involucrado, y ésta no es la intención de una Guía
de Alerta o Acción. El establecimiento de Guías
METODOLOGÍAS RECOMENDADAS
microbiológicas cuantitativas para agua de uso farmacéutico es
recomendable, ya que éstas establecerán los procedimientos a
Los métodos generales obtenidos de los Standard Methods for
implementar en caso de que se presente algún incumplimiento.
Examination of Water and Wastewater, 20th Edition, American
Los sistemas de agua deberán ser microbiológicamente
Public Health Association, Washington, 1998; se consideran
monitoreados para confirmar que continúan funcionando
adecuados para establecer estadísticas en el número de
dentro de especificaciones y que producen agua de calidad
unidades formadoras de colonias observadas en el monitoreo
aceptable. Los datos del monitoreo pueden compararse para
microbiológico rutinario del agua usada como ingrediente. Se
establecer parámetros del proceso y especificaciones para
reconoce, sin embargo, que otras combinaciones de medios,
productos, estos permiten el establecimiento de Niveles de
tiempos y temperaturas de incubación, pueden, ocasional o
Alerta y Acción, que determinan el desempeño del proceso.
constantemente, dar como resultado un número mayor de
Los Niveles de Alerta y Acción difieren de los parámetros del
UFC, las cuentas elevadas observadas no necesariamente
proceso y de las especificaciones del proceso en que se usan para
tendrán una mayor utilidad en la detección de alguna
monitoreo y control, no para aceptar o rechazar decisiones.
anormalidad o de una tendencia.
Las metodologías recomendadas como satisfactorias para el
monitoreo de sistemas de agua de uso farmacéutico son: Los Niveles de Alerta son niveles que, al ser excedidos,
indican que el proceso puede haberse desviado de sus
Agua potable: condiciones normales de operación, son una alarma y no
Método de filtración por membrana o NMP [1]. necesariamente requieren de una acción correctiva. Éstos
Muestra mínima: 100 mL. deben ser establecidos por el fabricante.
Agua purificada niveles 1 y 2: Los Niveles de Acción son niveles que, al ser excedidos,
Método de filtración por membrana. indican que el proceso se ha desviado de sus condiciones
Muestra mínima: 100 mL. normales de operación. El rebasarlo implica tomar una acción
48 a 72 h de incubación, de 30 a 35 °C. correctiva para que el proceso regrese a sus condiciones
normales de operación.
Agua para fabricación de inyectables:
Método de filtración por membrana. Los Niveles de Alerta y Acción se establecen dentro de los
Muestra mínima: 100 mL. límites de tolerancia de las especificaciones del proceso y del
48 a 72 h de incubación, de 30 a 35 °C. producto, y se basan en una combinación de consideraciones
técnicas y aspectos inherentes al producto. En consecuencia, el
rebasar cualquiera de ellos, no necesariamente implica que la
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
calidad del producto esté comprometida.
La identificación de microorganismos aislados en los métodos Las consideraciones técnicas empleadas para establecer Niveles
de monitoreo de agua puede ser importante con base en la de Alerta y Acción deben incluir la revisión de las
determinación de sí los microorganismos específicos del agua especificaciones de diseño del equipo, para garantizar que éste
pueden o no ser nocivos al proceso o productos en los cuales es capaz de producir agua con el nivel de pureza requerido.
ésta es empleada. La información relativa a los Además, las muestras deben ser colectadas y analizadas durante
microorganismos puede ser de gran utilidad al identificar la un cierto período de tiempo para poder establecer una base de
fuente de contaminación microbiana en un producto y/o datos que muestre la tendencia normal de la calidad del agua.
proceso. Es posible establecer un histórico usando los datos
_________________________________________________________________
mencionados. Los niveles determinados de esta forma miden el DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
desempeño del proceso y son independientes de los aspectos A
inherentes al producto. pH. MGA 0701. Entre 5.0 y 7.0 en una solución que contenga
0.3 mL de solución saturada de cloruro de potasio por 100 mL
Los Niveles de Alerta y Acción relacionados con el producto de muestra.
deberán representar tanto aspectos de calidad, como la
SISTEMAS CRÍTICOS
habilidad de manejar eficientemente los procesos de CONDUCTIVIDAD. MGA 0196. Determinar la
purificación. Estos niveles generalmente se basan en la conductividad en línea o fuera de línea.
revisión de los datos del proceso y en el aseguramiento de la
sensibilidad del producto a la contaminación química y Especificaciones del instrumento y parámetros
microbiana. El aseguramiento de la susceptibilidad del operativos. Las indicadas en el MGA 0196.
producto puede incluir: eficacia del preservativo, actividad del Procedimiento. Determinar la temperatura y conductividad
agua, pH, etc. Los niveles establecidos deben ser tales que, al del agua utilizando un conductímetro con lecturas no
ser superados, no comprometan la calidad del producto. compensadas por temperatura.
El agua a examinar satisface los requisitos si la conductividad
Los datos del monitoreo deben analizarse frecuentemente para medida a la temperatura registrada no es mayor que el valor
garantizar que éste continúa desempeñándose dentro de límites indicado en la tabla 1.
aceptables. Un análisis de datos es frecuentemente usado para
evaluar el desempeño del proceso. Esta información puede Tabla 1. Temperatura y requisitos de conductividad.
usarse para predecir desviaciones a los parámetros
establecidos, señalando la necesidad de un mantenimiento Temperatura Conductividad
preventivo adecuado. ( ºC) ( µS/ cm)
0 2.4
Debe reconocerse que los Niveles Microbianos de Alerta y 10 3.6
Acción establecidos para cualquier sistema farmacéutico de 20 4.3
agua, necesariamente están relacionados al método de 25 5.1
monitoreo elegido. Al usar las metodologías recomendadas, 30 5.4
considerar como niveles adecuados de Acción: 500 UFC por 40 6.5
mililitro en Agua potable, 100 UFC por mililitro para Agua 50 7.1
purificada nivel 1, y 10 UFC por 100 mL para Agua para 60 8.1
fabricación de inyectables y Agua purificada nivel 2. 70 9.1
75 9.7
Debe hacerse notar que las Guías de acción mencionadas 80 9.7
anteriormente no pretenden incluir a todas las situaciones en 90 9.7
que se emplee agua como ingrediente. Por ejemplo, los 100 10.2
microorganismos Gram negativos no se excluyen del agua
usada como ingrediente, y su presencia tampoco esta prohibida En aquellos casos en los que la temperatura medida no esté
en el Agua potable dentro de las regulaciones federales. indicada en la tabla 1, calcular la conductividad máxima
permitida por interpolación entre los valores inmediatamente
La razón es que estos microorganismos son comunes en inferior y superior de la tabla 1.
ambientes acuosos, y su exclusión demandaría un proceso de El agua purificada nivel 1 se conserva y distribuye en
esterilización que no sería adecuado o factible en muchas condiciones diseñadas para impedir el crecimiento de
plantas de producción. Sin embargo, en algunas situaciones microorganismos y evitar cualquier otra contaminación.
éstos no son tolerados: productos tópicos y algunos
medicamentos de uso oral. Es por lo tanto responsabilidad del SUSTANCIAS OXIDABLES. A 100 mL de la muestra
fabricante el implementar las normas generales de acción para adicionar 10 mL de SR de ácido sulfúrico diluidoy 0.1 mL de
que cumplan con cada uno de los procesos de fabricación. solución de permanganato de potasio 0.02 M y calentar a
ebullición durante 5 min. El color rosa que se forma no
[1]
Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA1-1994. desaparece completamente.
Esta prueba podrá ser sustituida por la relativa a COT, con
límite de 0.5 ppm.
AGUA PURIFICADA NIVEL 1 LÍMITES MICROBIANOS. Refiérase a los conceptos de

establecimiento de los niveles de alerta y acción en los
El agua purificada nivel 1 puede ser obtenida a partir de agua sistemas de purificación y distribución de agua para uso
potable por un proceso de destilación, ósmosis inversa, farmacéutico.
tratamiento por intercambio iónico u otro método apropiado, y
no contiene sustancias adicionales. Se utiliza como aditivo en METALES PESADOS. No más de 0.1 ppm.
la fabricación de preparados farmacéuticos pero no debe Preparación de referencia. Disolver en agua una cantidad de
emplearse como aditivo para la fabricación de inyectables. nitrato de plomo equivalente a 0.400 g de Pb(NO3)2 y diluir
AGUA PURIFICADA NIVEL 1

_________________________________________________________________
hasta 250.0 mL con agua, de esta preparación tomar un

A mililitro y diluir a 10 mL con agua; de esta nueva preparación
tomar un mililitro y diluir a 10 mL con agua, finalmente de la
última preparación tomar 1 mL y diluir a 10 mL con agua. A
los 10 mL de la última preparación adicionar 0.075 mL de SV
de ácido nítrico 0.1 M y 2 mL del agua purificada a examinar.
Preparación de la muestra. A 200 mL de la muestra
SISTEMAS CRÍTICOS
adicionar 0.15 mL de SV de ácido nítrico 0.1 M y calentar en

una cápsula de vidrio sobre un baño de agua hasta que el
volumen se reduzca a 20 mL. 12 mL de la solución
concentrada satisfacen el método.
Preparación del blanco. A 10 mL de agua adicionar
0.075 mL de SV de ácido nítrico 0.1 M y 2 mL del agua
purificada a examinar.
Procedimiento. A cada solución añadir 2 mL de SA de acetato
de amonio-ácido clorhídrico pH 3.5. Mezclar. Añadir 1.2 mL
de SR de tioacetamida-glicerina. Mezclar inmediatamente.
Examinar la solución después de 2 min. El ensayo no es válido
si la preparación de referencia no presenta un ligero color
pardo en comparación con la preparación del blanco. El agua a
examinar satisface el ensayo si el color pardo de la preparación
de la muestra no es más intenso que el de la preparación de
referencia.
Figura 1. Aparato para el ensayo de metales pesados.
Si es difícil de evaluar el resultado del ensayo, filtrar las
Dimensiones en milímetros.
soluciones por una membrana (tamaño de poro 0.45 µm; véase
la figura 1, sin prefiltro). Efectuar la filtración lenta y
uniformemente, aplicando al émbolo una presión moderada y
constante. Comparar las manchas de los filtros obtenidas con
las diferentes soluciones.
El agua purificada nivel 2 se destina a la preparación de
NITRATOS. No más de 0.2 ppm. medicamentos en donde se requiere alta calidad biológica,
Preparación de referencia. Disolver en agua 0.815 g de excepto cuando se requiere agua para fabricación de
nitrato de potasio y diluir hasta 500 mL con agua. Diluir 1 a 10 inyectables.
con agua inmediatamente antes de su uso. Posteriormente El agua purificada nivel 2 se prepara a partir de agua potable,
diluir la preparación anterior 1 a 10 con agua, y por último
sometiéndola a procesos combinados por ejemplo: ósmosis
diluir un volumen de la solución anterior a cinco de agua.
inversa sencilla o de doble paso acoplada a otras técnicas
Procedimiento. Sumergir en un baño de hielo, un tubo de
adecuadas, tales como ultrafiltración, desionización y
ensayo conteniendo 5 mL de la muestra, adicionar 0.4 mL de
electrodesionización.
solución al 10 % m/v de cloruro de potasio, 0.1 mL de SR1 de
difenilaminay gota a gota con agitación, 5 mL de SR de ácido
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
sulfúrico exento de nitrógeno. Transferir el tubo a un baño de
agua a 50 °C y dejarlo reposar durante 15 min. Cualquier color
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método 1. Cumple los
azul producido en la solución no es más intenso que el
requisitos.
obtenido en una solución preparada simultáneamente y en las
mismas condiciones empleando una mezcla de 4.5 mL de agua
CARBONO ORGÁNICO TOTAL. MGA 0146. No más de
libre de nitratos y 0.5 mL de la preparación de referencia.
0.5 ppm.
MARBETE. Debe indicar el método de preparación.
NITRATOS. No más de 0.2 ppm.
CONSERVACIÓN. En envases herméticos que conserven sus Preparación de referencia. Disolver en agua 0.815 g de nitrato
propiedades de pureza química y microbiológica. de potasio y diluir hasta 500 mL con agua. Diluir 1 a 10 con
Nota: En caso de que cumplan la conductividad para agua para agua inmediatamente antes de su uso. Posteriormente diluir la
fabricación de inyectables, no será necesario llevar a cabo las preparación anterior 1 a 10 con agua, y por último diluir un
pruebas de nitratos y metales pesados. volumen de la solución anterior a cinco de agua.

_________________________________________________________________
Procedimiento. Sumergir en un baño de hielo, un tubo de AGUA BACTERIOSTÁTICA ESTÉRIL

ensayo conteniendo 5 mL de la muestra, adicionar 0.4 mL de A
solución al 10 por ciento m/v de cloruro de potasio, 0.1 mL de PARA USO INYECTABLE
SR1 de difenilamina y gota a gota con agitación, 5 mL de SR
de ácido sulfúrico exento de nitrógeno. Transferir el tubo a un El agua bacteriostática estéril para uso inyectable es producida
baño de agua a 50 °C y dejarlo reposar por 15 min. Cualquier a partir de agua para la fabricación de inyectables y que ha
SISTEMAS CRÍTICOS
color azul producido en la solución no es más intenso que el sido esterilizada y adecuadamente envasada. Contiene agentes
obtenido en una solución preparada simultáneamente y en las antimicrobianos.
mismas condiciones empleando una mezcla de 4.5 mL de agua Nota: emplear el agua bacteriostática estéril para uso
libre de nitratos y 0.5 mL de la preparación de referencia. inyectable considerando la compatibilidad entre el o los
agentes antimicrobianos que ésta contenga y los fármacos que
LÍMITES MICROBIANOS. Refiérase a los conceptos de serán disueltos o diluidos en ella.
sistemas de purificación y distribución de agua para uso DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
farmacéutico.
AMONÍACO. Para envases que contengan un volumen de
MARBETE. Debe indicar el método de preparación. llenado menor a 50 mL de agua bacteriostática estéril para uso
inyectable, diluir 50 mL del producto con 50 mL de agua de
CONSERVACIÓN. En envases herméticos que conserven sus alta pureza y emplear esta dilución como la preparación de la
propiedades de pureza química y microbiológica. muestra. Cuando se trate de volúmenes de llenado de 50 mL o
mayores, emplear 100 mL del producto como la preparación
de la muestra. A 100 mL de la preparación de la muestra
adicionar 2 mL de SR de reactivo de Nessler, el color amarillo
que se produce de inmediato no es más intenso que el de una
AGUA PARA LA FABRICACIÓN DE solución control que contenga 30 µg de amoníaco (ésta se
obtiene por la adición de 1.76 mL de hidróxido de amonio
INYECTABLES 1.0 N) adicionados en 100 mL de agua de alta pureza. Esto
El agua para la fabricación de inyectables es agua producida a corresponde a un límite de 0.6 mg/L para envases que tienen
partir de agua potable que se purifica en su etapa final por un volumen de llenado menor a 50 y 0.3 mg/L cuando el
destilación u otra tecnología equivalente o superior que volumen de llenado es de 50 mL o más.
demuestre la eliminación de sustancias químicas,
microorganismos y endotoxinas y que no contiene sustancias CALCIO. A 100 mL de muestra adicionar 2 mL de SR de
adicionadas. oxalato de amonio. No debe producirse turbiedad.
Nota: el agua para la fabricación de inyectables se utiliza para
la preparación de soluciones parenterales. Cuando las DIÓXIDO DE CARBONO. A 25 mL de muestra adicionar
soluciones parenterales estén sujetas a esterilización terminal,
25 mL de SR de hidróxido de calcio. La mezcla debe
emplear los procedimientos adecuados para minimizar el
permanecer transparente.
crecimiento microbiano o en su defecto, emplear agua para la
fabricación de inyectables estéril y después protegerla de la
CLORUROS. Colocar 20 mL de muestra en un tubo Nessler,
contaminación microbiana.
La prueba de COT y Conductividad aplica a este tipo de agua adicionar cinco gotas de ácido nítrico y 1 mL de SR de nitrato
producida in situ para su uso en manufactura. de plata, agitar suavemente. Cualquier turbiedad formada en
un lapso de 10 min no debe ser mayor que la de un control
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro. tratado de manera similar y preparado con 20 mL de agua de
alta pureza, que contenga 10 µg de cloruros (0.5 mg/L). La
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método 1. Cumple los inspección de los tubos deberá hacerse desde su parte superior,
requisitos. empleando un fondo oscuro y permitiendo que la luz penetre
lateralmente a los tubos.
CARBONO ORGÁNICO TOTAL. MGA 0146. No más de
0.5 ppm. SULFATOS. A 100 mL de muestra adicionar 1 mL de SR de
cloruro de bario. No debe producir turbiedad.
ENDOTOXINAS BACTERIANAS. MGA 0316. Menos de
SUSTANCIAS OXIDABLES. A 100 mL de muestra
0.25 UE/mL.
adicionar 10 mL de solución de ácido sulfúrico 2 N y calentar
hasta ebullición. Para agua bacteriostática estéril para uso
LÍMITES MICROBIANOS. Refiérase a los conceptos de
inyectable envasada en volúmenes menores a 50 mL, agregar
0.4 mL de solución de permanganato de potasio 0.1 N y
sistemas de purificación y distribución de agua para uso calentar a ebullición durante 5 min; para el caso de volúmenes
farmacéutico. de 50 mL o mayores, agregar 0.2 mL de solución de
permanganato de potasio 0.1 N y calentar a ebullición durante 5
CONSERVACIÓN. Emplear inmediatamente después de su min. Si se forma un precipitado, enfriarlo en baño de hielo a
preparación o bien, almacenar en envases de material y temperatura ambiente, filtrarlo a través de un filtro de vidrio
capacidad apropiada y en condiciones que no alteren sus sinterizado. El color rosa que se forma no desaparece
propiedades de pureza química y microbiológica. completamente.
AGUA PARA LA FABRICACIÓN DE INYECTABLES

_________________________________________________________________
pH. MGA 0701. Entre 4.5 y 7.0, en una solución preparada ENDOTOXINAS BACTERIANAS. MGA 0316. No más de
A agregando 0.3 mL de solución saturada de cloruro de potasio 0.25 UE/mL.
por cada 100 mL de muestra.
ESTERILIDAD. MGA 0381. Cumple los requisitos.
MATERIAL PARTICULADO. MGA 0651. Cumple los
requisitos.
MARBETE. Debe indicar que no contiene agentes
SISTEMAS CRÍTICOS
antimicrobianos o alguna otra sustancia adicionada. Las

PRESERVATIVOS ANTIMICROBIANOS. MGA 0305.
leyendas “Sólo para Irrigación” y “No utilizarse para la
Cumple los requisitos. Asimismo, la potencia del agente
preparación de inyectables” deben aparecer claramente
antimicrobiano corresponde con la indicada en la etiqueta y
visibles.
debe ser determinada de acuerdo con lo establecido en las
pruebas correspondientes (MGA 0061, 0151, 0421, 0591, 0631
CONSERVACIÓN. En envases de dosis única, de vidrio tipo
y 0931).
I o tipo II, o de un material plástico que satisfaga los requisitos
establecidos en el capítulo de Envases primarios, y que no
alteren sus propiedades de pureza química y microbiológica. El
0.5 UE/mL.
volumen del envase puede ser mayor a un litro y puede estar
diseñado para vaciarse rápidamente.
ESTERILIDAD. MGA 0381. Cumple los requisitos.
MARBETE. Debe indicar el nombre y la proporción del

agente antimicrobiano que contiene. También incluir la
leyenda “No usar en recién nacidos” inmediatamente abajo del
AGUA ESTÉRIL PARA USO
nombre oficial, en color contrastante, preferentemente en rojo INYECTABLE
y con letras mayúsculas. El agua estéril para uso inyectable es producida a partir de
agua para la fabricación de inyectables y que ha sido
CONSERVACIÓN. En envases de dosis única o dosis esterilizada y envasada apropiadamente. No contiene agentes
múltiple de capacidad no mayor a 30 mL de vidrio Tipo I o antimicrobianos o alguna otra sustancia adicionada.
Tipo II, o de un material plástico que satisfaga los requisitos
establecidos en el capítulo de Envases primarios y que no DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
alteren sus propiedades de pureza química y microbiológica.
hasta ebullición. Para agua estéril para uso inyectable envasada
en volúmenes menores a 50 mL, agregar 0.4 mL de solución
AGUA ESTÉRIL PARA IRRIGACIÓN de permanganato de potasio 0.1 N y calentar a ebullición
durante 5 min; para el caso de volúmenes de 50 mL o mayores,
El agua estéril para irrigación es producida a partir de agua
agregar 0.2 mL de solución de permanganato de potasio 0.1 N
para la fabricación de inyectables y que ha sido esterilizada y
y calentar a ebullición durante 5 min. Si se forma un
apropiadamente envasada. No contiene agentes
precipitado, enfriarlo en baño de hielo a temperatura ambiente,
antimicrobianos o alguna otra sustancia adicionada.
filtrarlo a través de un filtro de vidrio sinterizado. El color rosa
que se forma no desaparece completamente.
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método 2. Cumple los
requisitos.
hasta ebullición. Para agua estéril para irrigación envasada en MATERIAL PARTICULADO. MGA 0651. Cumple los
volúmenes menores a 50 mL, agregar 0.4 mL de solución de requisitos.
permanganato de potasio 0.1 N y calentar a ebullición durante
5 min; para el caso de volúmenes de 50 mL o mayores, agregar ENDOTOXINAS BACTERIANAS. MGA 0316. Menos de
0.2 mL de solución de permanganato de potasio 0.1 N y 0.25 UE/mL.
calentar a ebullición durante 5 min. Si se forma un precipitado,
enfriarlo en baño de hielo a temperatura ambiente, filtrarlo a ESTERILIDAD. MGA 0381. Cumple los requisitos.
través de un filtro de vidrio sinterizado. El color rosa que se
forma no desaparece completamente. MARBETE. Debe indicar que no contiene agentes
antimicrobianos o alguna otra sustancia adicionada y que no
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método 2. Cumple los deberá usarse para administración intravascular a menos que se
requisitos. adicione algún soluto apropiado para conferir la isotonicidad.
AGUA ESTÉRIL PARA IRRIGACIÓN

_________________________________________________________________
CONSERVACIÓN. En envases de dosis única, de capacidad AGUA PARA HEMODIÁLISIS

no mayor a un litro, que hayan sido fabricados de vidrio tipo I
Cuando se requiera agua para hemodiálisis, deberá cumplir con
A
o tipo II, o de un material plástico que satisfaga los requisitos
los límites establecidos en el Apéndice Normativo A de la
establecidos en el capítulo de Envases primarios y que no
NOM-003-SSA3-2010, Para la práctica de la hemodiálisis.
alteren sus propiedades de pureza química y microbiológica.
SISTEMAS CRÍTICOS
AGUA PARA USO ANALÍTICO
AGUA ESTÉRIL PARA INHALACIÓN A menos que otra cosa se especifique en la monografía
individual, cuando la farmacopea cite “agua” sin ninguna
El agua estéril para inhalación es producida a partir de agua especificación para uso analítico, se refiere a las
para la fabricación de inyectables y que ha sido esterilizada y especificaciones químicas del agua purificada nivel 1.
envasada apropiadamente. No debe contener agentes
antimicrobianos, excepto cuando se usa en humidificadores o Cuando se requiera Agua libre de dióxido de carbono,
en materiales equivalentes y cuando potencialmente se pueda utilizar agua purificada nivel 1 previamente hervida durante al
contaminar durante el período de uso, o cuando tenga alguna menos 5 min y enfriada evitando que absorba dióxido de
otra sustancia. carbono del medio ambiente.
Nota: no usar agua estéril para inhalación en preparaciones
farmacéuticas para uso parenteral o en algún otro preparado Cuando se requiera Agua sin presencia de gases disueltos,
por ejemplo para pruebas de disolución, utilizar agua
farmacéutico estéril.
purificada nivel 1 hervida por al menos 5 min o sometida a
vibración ultrasónica, o calentar el medio mientras se agita
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro. suavemente, aproximadamente a 45 ºC, inmediatamente filtrar
usando vacío con una porosidad de 0.45 µm o menos, y
continuar agitando con vacío por aproximadamente 5 min.
SUSTANCIAS OXIDABLES. A 100 mL de muestra Puede usarse otra técnica validada para eliminarlosgases
adicionar 10 mL de solución de ácido sulfúrico 2 N y calentar disueltos.
hasta ebullición. Para agua estéril para inhalación envasada en
volúmenes menores a 50 mL, agregar 0.4 mL de solución de Cuando se requiera Agua recientemente destilada, debe
permanganato de potasio 0.1 N y calentar a ebullición durante obtenerse por destilación después de drenar el sistema, y debe
5 min; para el caso de volúmenes de 50 mL o mayores, agregar tener una conductividad no mayor a 0.15 µS/cm.
0.2 mL de solución de permanganato de potasio 0.1 N y
calentar a ebullición durante 5 min. Si se forma un precipitado, Cuando se requiera Agua libre de nitratos, preparar de la
enfriarlo en baño de hielo a temperatura ambiente, filtrarlo a siguiente manera: adicionar aproximadamente 5 mg de
través de un filtro de vidrio sinterizado. El color rosa que se permanganato de potasio y 5 mg de hidróxido de bario a
forma no desaparece completamente. 100 mL de agua purificada nivel 1, destilarla usando el aparato
descrito para la determinación del rango de destilación
(MGA 0281). Descartar los primeros 10 mL y colectar los
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método 2. Cumple los siguientes 50 mL.
requisitos.

AGUA DE ALTA PUREZA
0.5 UE/mL.
(REACTIVO)
Cuando se requiera agua de alta pureza, se deberá preparar
ESTERILIDAD. MGA 0381. Cumple los requisitos. pasando agua destilada a través de un cartucho desionizador
con una cama mixta de resina grado nuclear y posteriormente
MARBETE. Debe indicar que su uso es exclusivo para terapia
debe ser filtrada a través de una membrana de éster de celulosa
de inhalación y no para uso parenteral.
que no exceda en porosidad a 0.45 µm (no usar tubería de
cobre). Esta agua debe tener una conductividad a 25 ºC no
CONSERVACIÓN. En envases de vidrio tipo I o tipo II, o de mayor de 0.15 µS medida en una celda en línea. Para efectuar
un material plástico que satisfaga los requisitos establecidos es estas pruebas, desechar los primeros mililitros de filtrado y si
el capítulo de Envases primarios y que no alteren sus la conductividad no cumple con esta especificación,
propiedades de pureza química y microbiológica. reemplazar el cartucho desionizador.
AGUA ESTÉRIL PARA INHALACIÓN
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_________________________________________________________________
SISTEMA DE VENTILACIÓN, Partícula. Objeto sólido o líquido que, para propósitos de

S CALEFACCIÓN Y
clasificación de la limpieza del aire, se enmarca dentro de una
distribución acumulativa que se basa con un tamaño de umbral
ACONDICIONAMIENTO DE AIRE
(límite inferior) en el rango de 0.1 a 5 µm.
1. Introducción
Tamaño de partícula. Diámetro de una esfera que produce una
Para la Industria Farmacéutica y de Insumos para la Salud es
SISTEMAS CRÍTICOS
respuesta, dada por un instrumento de conteo de partícula, que

de relevante importancia el aire ambiental que se suministra a
es equivalente a la respuesta producida por la partícula siendo
las áreas de fabricación, así como la clasificación y el
medida.
cumplimiento a cada una de ellas. La función esencial del
Nota: para instrumentos de conteo de partículas discretas,
Sistema de Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de
dispersión de luz, se utiliza el diámetro óptico equivalente.
aire (HVAC), es contribuir al aseguramiento de calidad y
pureza del producto, así como favorecer las actividades del Concentración de partículas. El número de partículas
personal que las lleva a cabo. individuales por unidad de volumen de aire.
Las áreas de fabricación en las que los medicamentos o
insumos para la salud están expuestos requieren de un Distribución de tamaño de partícula. Distribución acumulativa
ambiente controlado, el cual se logra a través de medidas de de la concentración de partículas en función del tamaño de
segregación y control del aire que es suministrado, permitiendo partícula.
control de partículas no viables y microorganismos.
Estados de ocupación. La limpieza de partículas de aire en un
Las áreas clasificadas deben estar diseñadas apropiadamente
cuarto limpio o zona limpia se define en uno o más de los tres
para el uso previsto, ya que un área que es empleada para la
estados de ocupación, “nueva”, “estática” y “dinámica”.
fabricación de productos no estériles requiere condiciones
Condición en la que el cuarto limpio o zona limpia esta recién
distintas a las que requiere cumplir un área empleada para la
terminada o recién modificada, la instalación se ha completado
fabricación de productos estériles sean estos fabricados
con todos los servicios conectado y funcionando, pero sin el
mediante procesamiento aséptico o mediante método de
equipo de producción, materiales o personal presente.
esterilización terminal.
Los mecanismos para la remoción y control de los Estática. Condición en la que la instalación se ha completado
contaminantes y condiciones del aire se realiza durante varias con el equipo instalado y operando de manera correcta y
etapas, continuas e integradas en un proceso que debe ser acordada entre el instalador y el usuario, pero sin personal
controlado, cuidando cada variable de acuerdo a los presente.
parámetros establecidos en su diseño, el cual tiene como basé
el análisis de riesgo del proceso y producto para la salud que se Dinámica. Condición en la que la instalación está funcionando
fabricará. de manera específica, con el número especificado de personal
Los contaminantes principales en el aire ambiental son presentes y trabajando de la manera adecuada.
clasificados en partículas viables o microorganismos y
partículas totales, presencia de vapor de agua o de otras 2. Tipos de aire y tipos de ambiente de proceso
sustancias extrañas. El aire de proceso se va a clasificar, principalmente, de
acuerdo al grado de limpieza que tenga, y se mide en por el
Términos y definiciones contenido de partículas no viables por unidad de volumen y
Cuarto limpio. Habitación en la que se controla la partículas viables por unidad de volumen o por placa.
concentración de partículas en el aire, y que es construido y La pureza del aire estará en relación directa con el uso y
utilizado en una manera para minimizar la introducción, aplicación que se le dará al producto para la salud que se
generación y retención de partículas dentro de la habitación y fabrica en cada tipo de área de proceso de las instalaciones.
en las que se controlan otros parámetros relevantes, por En la tabla 1 se presenta la clasificación de áreas y
ejemplo temperatura, humedad relativa y presión diferencial, especificaciones del aire.
de ser necesario.
3. Esquema general del Sistema
Zona limpia. Espacio dedicado en el cual se controla la
concentración de partículas en el aire y que es construido y Debido a lo anterior el sistema HVAC es uno de los elementos
utilizado en una manera para minimizar la introducción, principales para el control ambiental ya que mediante caudales
generación y retención de partículas dentro de la zona y en de aire y diferenciales de presión es posible establecer una
otros parámetros relevantes, por ejemplo temperatura, barrera física a la contaminación por partículas,
humedad relativa y presión diferencial, son controlados según microorganismos y evitar la contaminación cruzada, a la vez
sea necesario. que permite condiciones de confort al personal lo cual cobra
Nota: esta zona puede ser abierta o cerrada y puede o no ser relevancia en áreas donde el control de microorganismos es
situado en un cuarto limpio. esencial como las áreas donde se efectúan procesos asépticos.
SISTEMA DE VENTILACIÓN, CALEFACCIÓN Y ACONDICIONAMIENTO DE AIRE

_________________________________________________________________
Tabla 1. Clasificación de áreas y especificaciones del aire.

S
Partículas
Partículas totales
viables Humedad
Presión diferencial y Cambios de Temp.
Clasificación Condiciones Relativa
flujo de aire aire por hora ( ºC)
estáticas/dinámicas UFC ( % HR)
SISTEMAS CRÍTICOS
≥ 0.5 µm ≥ 5 µm
Clase A 3 520 / 3 520 20 / 20 < 1/m3 y > 15 Pa flujo en cascada n.a. 18 a 25 30 a 65
(ISO-Clase 5) < 1/placa y
< 1/guante
Clase B 35 20 / 352 000 29 / 2 900 < 10/m3 y > 15 Pa flujo en cascada 20 a 50 18 a 25 30 a 65
< 5/placa y
< 5/guante
Clase C 352 000 / 2 900 / 29 000 < 100/m3 y > 10 Pa flujo en cascada 20 a 50 18 a 25 30 a 65
(ISO-Clase 7) 3 520 000 < 50/placa
Clase D 3 520 000 / n.a. 29 000 / n.a. < 200/m3 y > 5 Pa Presión negativa 10 a 20 18 a 25 30 a 65
(ISO-Clase 8) < 100/placa o positiva dependiendo
del diseño del área o
esclusa
ISO-Clase 9 35 200 000 / 293 000 / n.a. n.a. Presión negativa con n.a. 18 a 25 n.a.
n.a. respecto a áreas
controladas y presión
positiva con respecto a
áreas no clasificadas.
Un sistema de aire convencional está integrado por elementos eficiencia (HEPA) son sometidos a pruebas de integridad una
básicos entre ellos manejadoras de aire, sistema de ductos de vez instalados, en un intervalo recomendado de cada 6 meses
distribución de aire ambiental, sistemas de filtración, pero no superior a 12 meses. El propósito de la ejecución de la
condensadores, serpentines, sistema de extractores, sistemas de prueba de integridad es asegurar que el medio filtrante, marco
deshumidificación, etc. del filtro y el sello del filtro están libres de fugas. La sustancia
Sin embargo para el diseño, la instalación y la operación de seleccionada para las pruebas de integridad de los filtros
sistemas de aire ambiental es importante efectuar la gestión de HEPA no debe promover el crecimiento microbiano y el
los riesgos relacionados al producto y proceso del que se trate aerosol generado debe estar integrado por un número
ya que con base en esto se establecerán requerimientos de suficiente de partículas de tamaño controlado, debe medirse la
cumplimiento para los sistemas HVAC como son velocidad de concentración del aerosol antes del filtro y después del mismo.
flujo de aire, diferenciales de presión, número de cambios de Las áreas correspondientes a clase A (ISO 5), B y C (ISO 7)
aire, conteo de partículas, temperatura, humedad relativa, deben contar como mínimo con filtros terminales HEPA de
planes de monitoreo, etc. 99.97 % de eficiencia referidos a partículas de 0.3 µm. En el
Los párrafos siguientes son una breve descripción de los caso de clase D (ISO 8) deben contar como mínimo con filtros
componentes esenciales del sistema y los puntos de de eficiencia de 95 % y para ISO clase 9 deben contar como
calificación asociados con ellos. El propósito es marcar los mínimo con filtros de eficiencia de 85 %.
puntos a enfocar en el diseño, la instalación, el mantenimiento Condensadores y serpentines: componentes que permitan el
y los parámetros de monitoreo que faciliten su calificación y control de la temperatura y humedad requerida en las áreas
las medidas de control para el mantenimiento del estado productivas ya sea para el enfriamiento o calentamiento del
calificado. aire. Debe considerarse la posibilidad de usar humidificación
para climas fríos o áridos o por el contrario deshumidificación
Componentes mayores para el control en áreas de baja humedad (producción de
Unidades manejadoras de aire (UMA) juega un papel efervescentes).
importante en los sistemas de aire ambiental ya que permite Ventiladores: la selección de los ventiladores es crítica para
tratar el aire a fin de controlar sus condiciones de acuerdo a las mover la cantidad adecuada de aire controlado ya sea en la
especificaciones para que sea suministrado a las áreas de inyección, retorno o extracción y lograr la diferencial de
producción. presión requerida. Deben considerar los requerimientos y
Las unidades manejadoras de aire (UMA) están integradas, diseños necesarios para efectuar la selección de los
como mínimo, de los siguientes elementos: ventiladores de tipo tapón/de pleno o ventiladores centrífugos
Banco o sección de filtros los cuales van desde rejillas, o de otro tipo.
prefiltros, filtros de baja, mediana y alta eficiencia (HEPA). Turbina/motores: es necesario controlar el volumen de aire
Para el caso de productos de alto riesgo en donde la entregado a las áreas de producción, la selección del motor se
autocontención es un requisito deben considerarse equipos que efectuara de acuerdo al caudal de aire requerido considerando
cumplan con la función de contención. Los filtros de alta el volumen del área a la que da servicio, así mismo debe

_________________________________________________________________
instalarse un sistema de conexión aterrizado. generación de vapor de agua derivada de procesos específicos
S Sistemas de extracción: sistemas que regulan la salida del presentes en el área de trabajo, de tal manera que resulta
volumen de aire. El sistema toma el aire de retorno, de las fundamental medir la calidad del aire y las condiciones
áreas, por medio de rejillas conectadas a ductos especiales. Las ambientales del aire para poder controlar el sistema de HVAC
rejillas se instalan en cantidad suficiente, ubicándose y se hagan los ajustes de manera inmediata para poder asegurar
preferentemente en las partes bajas de las áreas y en sentido la calidad del producto que está en proceso de fabricación, así
contrario a los difusores de inyección de aire, con el propósito mismo se deberán tener los procedimientos necesarios para
SISTEMAS CRÍTICOS
de cumplir con los patrones de flujo de aire diseñados, tomar las acciones de protección al producto o al personal en
permitiendo la homogenización de la calidad del aire y la caso de que la calidad de aire o las condiciones ambientales
ventilación adecuada. puedan ser adversas.
Los sistemas de aire pueden recircular una parte importante del El control de un sistema de aire, es muy diverso, ya que puede
volumen del aire ya acondicionado o desechar totalmente el ser manual o automatizado en diferente grado.
aire, con el módulo de extracción e inyectar aire nuevo al Actualmente se está requiriendo un mayor control en este tipo
100 %, dependiendo del producto y tipo de proceso que se de sistemas, el cual incluye el monitoreo de temperatura,
encuentre en las áreas a las que da servicio. humedad relativa, presión diferencial, flujo de aire y otras
El aire puede ser recirculado hasta en una proporción del 80 % variables como conteo de partículas totales y monitoreo
en las instalaciones donde se producen productos líquidos, microbiológico.
semisólidos y en áreas asépticas. Hay sistemas de control que monitorean la presión diferencial,
En las áreas donde se realizan procesos o se manejan en donde se está indicando sí se tiene algún problema para
productos que representan un riesgo de contaminación el aire poder tomar acciones.
debe ser suministrado nuevo al 100 %. Es muy conveniente que en los parámetros, se definan los
En los casos de productos de alta potencia o de alto riesgo los límites de alerta para que aún se tenga tiempo suficiente para
sistemas de ventilación, calefacción y acondicionamiento de poder tomar medidas de seguridad y no en el momento en que
aire (HVAC) deben ser independientes y dedicados. los parámetros ya están fuera de especificaciones.
En las áreas donde se llevan a cabo procesos que incluyen También se han incluido sistemas de alarma para alertar de
manipulación de microorganismos o líneas celulares usadas en inmediato cuando hay una situación fuera de especificaciones.
la producción de biológicos, por encima del nivel BSL2, no se El módulo de control de un sistema HVAC presenta los
puede efectuar recirculación de aire y los sistemas deben ser siguientes componentes principales:
independientes y dedicados
1. Centro de control de motores
Sistema de distribución. La configuración de distribución de a. Interruptores eléctricos
los ductos debe permitir la ubicación y cantidad adecuada de b. Variadores de frecuencia para motores
los puntos de inyección de aire ambiental. c. Red eléctrica
Ductería: existen aspectos a considerar para el diseño e 2. Control de electroválvulas
instalación de la ductería de distribución tales como la a. Electroválvulas
integridad de los ductos ante la presión y volumen de aire en b. Componentes electrónicos
operación ya que es necesario garantizar la hermeticidad a fin c. Red eléctrica
de poder cumplir con parámetros tales como volumen de aire 3. Tablero de control
inyectado, número de cambios de aire por hora. Otros aspectos a. Instrumentos de medición asociados
a considerar son el tipo de material del que deben ser b. Interruptores y controles
fabricados. 4. PLC o Sistema computarizado
Difusores y extractores de aire: estos dispositivos son a. Hardware
importantes para la distribución de aire en las áreas de b. Programas
producción. La ubicación adecuada de dichos puntos es vital 5. Sistemas de alarma
para suministrar el aire adecuadamente, la ubicación deficiente a. Alarmas
puede provocar zonas muertas con aumento en las partículas b. Cableado
totales o un flujo de aire excesivo con turbulencia, no deseada. c. Lógica o ingeniería del Sistema de alarmas
La elección de materiales de estos debe ser compatible con los
materiales de construcción requeridos en el área de 4. Diseño del sistema
producción.
En el diseño de un sistema HVAC para la industria de
Sistema de monitoreo y control productos para la salud juegan un papel muy importante los
Es importante enfatizar que el proceso de purificación y conceptos y lineamientos de las buenas prácticas de
acondicionamiento de aire es continuo y que puede ser influido fabricación y las buenas prácticas de ingeniería. La
por factores externos como el clima y la calidad del aire participación de un equipo multidisciplinario de profesionales
ambiental, así como por factores internos, como la presencia es esencial para atender los diferentes temas y enfoques que
de diferentes cantidades de personal, operación de motores de requiere este tipo de proyectos.
equipos, generación de calor debido al proceso mismo y sus En el proceso de diseño es muy importante no perder de vista
distintas etapas, la utilización de combustión de gases, la que el propósito del sistema HVAC es proveer aire limpio a las
presencia de gases criogénicos requeridos para el proceso o la áreas controladas de fabricación satisfaciendo las necesidades

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de los productos y procesos, cumpliendo al mismo tiempo los Los aspectos de volumen de producción, tiempos de procesos,
requisitos de las buenas prácticas de ingeniería, las normas tipo de maquinaria que será utilizada, cantidad de personas que S
industriales que apliquen, los requerímientos de la empresa y participaran en el proceso, los materiales que serán utilizados y
fundamentalmente los requerimientos regulatorios y las buenas las diferentes etapas del proceso mismo deben ser analizados
prácticas de fabricación. generando un documento de ingeniería con toda la información
Es esencial analizar la distribución de las áreas de las y sus referencias.
SISTEMAS CRÍTICOS
instalaciones de fabricación y su relación con el proceso desde De manera paralela se deben plantear todas las precauciones
el punto de vista de la prevención de la contaminación que necesarias para el cuidado y protección del personal que
pudiera darse en las áreas críticas del proceso. participara en cada etapa o paso del proceso.
El trabajo de diseño se desarrolla en varios pasos secuenciales, Es importante considerar también el manejo seguro de los
donde cada uno de ellos genera documentos que pueden ser desechos que se generen a lo largo de todo el proceso,
considerados como “entregables”. incluyendo las formas de minimizar, controlar, captar y
contener los diferentes tipos de desecho.
Etapa Documentos entregables Requerimientos técnicos

Requerimientos del Cuadro de requerimientos del sistema Los requerimientos técnicos se refieren a los servicios
usuario, técnicos y ancilares o auxiliares e instalaciones arquitectónicas que
regulatorios necesita cada uno de los componentes mayores del sistema y
Diseño conceptual Descripción, planos BPF, especificaciones sus accesorios principales.
de los tipos de aire, características de las Basamentos y construcciones especiales, mecanismos de
áreas. soporte y sujeción, localización ya sea en interior y protegido o
Diseño básico, Planos del sistema y sus componentes colocado directamente en el exterior del edificio.
estructural y mayores, planos BPI de las áreas, esquema Si los equipos o componentes mayores necesitan un tipo de
funcional del módulo de monitoreo, control y energía eléctrica especial, alimentación de sistemas hidráulicos
alarmas. o neumáticos con sus correspondientes especificaciones del
Diseño de detalle Descripción detallada del sistema, servicio y su consumo estimado.
colección completa de planos detallados, También es importante identificar la localización de los
fichas técnicas de los equipos mayores y módulos de control, sus especificaciones y servicios necesarios
accesorios, catálogo de conceptos. para su funcionamiento correcto.
Documentos y Plan de construcción e instalación por Las necesidades de espacio y su localización son planteadas en
respaldo de etapas, programa de actividades, el cuadro de requerimientos técnicos del sistema. Este espacio
construcción especificaciones intermedias y control de está dado por las dimensiones de los equipos, sus tuberías,
calidad de los trabajos, pruebas y retos. conexiones y los espacios necesarios para que los operadores o
Bitácoras y registros. usuarios puedan operarlos y darles mantenimiento.
Requerimientos regulatorios
Requerimientos del sistema HVAC Los requerimientos regulatorios están definidos por las normas
El concepto de requerimiento corresponde a los puntos y/o y reglamentos que deben ser cumplidos, especialmente cuando
condiciones que se deben cumplir para satisfacer las el sistema esté operando y se esté realizando el proceso y la
especificaciones y requisitos que definen la calidad del sistema fabricación de producto, es decir temas de buenas prácticas de
que está siendo diseñado. fabricación, sin embargo se deben tomar en cuenta también la
Los requerimientos se han dividido en tres tipos para normatividad asociada a la construcción, instalación y manejo
identificar su origen y el aspecto de la calidad del sistema que del sistema desde el punto de vista industrial, ecológico y de
están señalando. Los requerimientos del usuario, los seguridad del personal.
requerimientos técnicos y requerimientos regulatorios. Será importante también considerar el mercado en el cual serán
comercializados los productos y las normas de la región o país
Requerimiento del usuario a los que serán enviados.
Estos requerimientos tienen como base el tipo de productos
que se van a fabricar y los procesos que se utilizaran para Diseño conceptual
obtenerlos. En esta primera etapa del Diseño se integra la información
De los productos se debe tomar en cuenta la forma generada en el análisis de los requerimientos y se plantean las
farmacéutica, sus especificaciones, especialmente las soluciones con el enfoque de satisfacer los requisitos
relacionadas con los aspectos de contenido microbiológico, de planteados en ellos.
partículas, humedad relativa y riesgos de contaminación Basándose en la información del proceso y sus elementos se
química. plantean alternativas de la distribución de áreas y sus
Del proceso es importante señalar las etapas en las que se dimensiones, se establecen las condiciones ambientales para
desarrolla, los pasos críticos en los cuales el producto en cada cuarto, se revisa la interrelación entre ellos y se describe
proceso puede sufrir modificaciones no deseables, así como el la información en las fichas técnicas de las áreas.
grado de control que debe establecerse para generar productos A partir de este esquema se realizan los cálculos iniciales y se
que cumplan sus especificaciones de manera segura y define la estructura del sistema HVAC, el número y tamaño de
consistente. las unidades manejadoras de aire, unidades de extracción, el

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recorrido de los ductos, la colocación de los difusores rejillas esta etapa del proyecto. Se utilizan herramientas de planeación
S de plafón, rejillas bajas y filtros terminales, si se requieren, así como programas, rutas críticas, listas de actividades
como los subsistemas que le dan soporte. interrelacionadas, de tal manera que sirva para coordinar, dar
En los planos arquitectónicos y de colocación de equipos se seguimiento y ejecutar de manera precisa todas y cada una de
presenta la información de la cascada de presiones, flujo de las acciones que darán como resultado el lugar adecuado donde
aire y presiones diferenciales. será colocado, instalado y posteriormente puesto en marcha el
Se resume en tablas la clasificación de las áreas y se representa sistema HVAC.
SISTEMAS CRÍTICOS
en planos. El plan de instalación está enfocado principalmente a los

Los documentos que se generan son principalmente, la componentes del sistema de ventilación y acondicionamiento
descripción de las instalaciones, planos arquitectónicos, de de aire. La responsabilidad mayor recae en la empresa
localización de los equipos, unifilares, los de flujos de especialista seleccionada para ejecutar todos los aspectos
personal, materias primas y materiales, productos y desechos, establecidos en ingeniería de detalle aprobado.
las características de las áreas desde el punto de vista Tanto el plan de construcción como el de instalación deben
constructivo y con respecto al sistema de aire acondicionado, estructurarse por etapas, en las cuales se definen los puntos
las especificaciones de los tipos de aire, la fichas técnicas y el clave y la forma en que deben ser documentados y evaluados
esquema general del sistema de monitoreo, control y alarmas. para asegurar el éxito del proyecto.
Las especificaciones intermedias, el control de calidad de los
Diseño básico, estructural y funcional trabajos, el planteamiento de las pruebas que deberán
A partir de la información del Diseño Conceptual se desarrolla realizarse para confirmar el avance satisfactorio de cada etapa
la siguiente etapa en la que se hacen los cálculos de generación del proyecto, así como la documentación correspondiente, que
de aire, consumos de energías, dimensionamiento de los evidencia el apego al proyecto original, forman la parte
equipos mayores y accesorios básicos. esencial del paquete documentario que será entregado antes de
Se define y describe el funcionamiento de cada componente y iniciar las pruebas funcionales y puesta en marcha del sistema.
del sistema completo. Se plantean los mecanismos de balanceo
y control. 5. Calificación del diseño
Se desarrolla la lógica del sistema de monitoreo, control y
alarmas, se seleccionan sus componentes y su tecnología. Es conveniente asegurar que no habrá cambios durante la
Esta información se documenta en las fichas técnicas de los construcción e instalación del sistema HVAC o después,
equipos que constituyen el Sistema HVAC, los planos de cuando ya vaya a entrar en pruebas y operación. Esto se logra
distribución y conducción de aire, la ingeniería del módulo de llevando a cabo la Calificación del Sistema.
monitoreo, control y alarmas. Este trabajo se realiza revisando el diseño desde su etapa
Conceptual, hasta que se encuentra en su estado de emisión
Diseño de detalle “Para construcción”.
En esta etapa se complementa la información de las diferentes La Calificación del diseño busca cubrir los siguientes
disciplinas o ingenierías que participan en el diseño, objetivos, entre otros:
construcción e instalación de cada uno de los componentes y el
sistema entero. 1. Asegurar que el diseño prevea los requerimientos de
La información técnica de todos los elementos del sistema es soporte de los servicios que debe proveer la
detallada, retada y documentada. infraestructura de la planta.
El funcionamiento ha sido revisado y comprobado 2. Asegurar que el diseño minimice el riesgo para la
técnicamente. calidad y seguridad de los pacientes.
La documentación que contiene este nivel de información está 3. Asegurar que el diseño sea sólido y tenga un
integrada por la descripción completa del sistema, la colección rendimiento confiable.
de los planos detallados de cada ingeniería, las fichas técnicas 4. Asegurar que la construcción y el funcionamiento sean
de los equipos mayores y accesorios, el catálogo de conceptos factibles y se hayan tomado en cuenta los costos
y la información necesaria para la construcción e instalación. operativos, el ciclo de vida útil del sistema y los riesgos
de su operación.
Documentos y respaldo de construcción 5. Asegurar que los conceptos propuestos cumplan con
Con la información de la ingeniería de detalle se puede los requisitos del usuario y los regulatorios que
proceder a la organización de la construcción e instalación del apliquen (especificaciones del sistema, capacidades de
sistema HVAC. cada uno de los componentes mayores del sistema, lista
El grupo interdisciplinario responsable de la construcción, de componentes e instrumentos de medición calibrados,
instalación de todos los equipos mayores, accesorios y los condiciones de operación: temperatura, humedad
servicios ancilares que darán soporte al sistema HVAC deberá relativa, etc. Características del control, requerimientos
desarrollar el plan detallado para realizar de manera física lo de planos y calidad de materiales).
planteado en el diseño teórico aprobado.
El plan de construcción abarca los aspectos arquitectónicos y La revisión del diseño debe cubrir, los requerimientos técnicos:
de las diferentes ingenierías de soporte y en él se describe el
proyecto traducido en actividades, fechas, responsabilidades de 1. Planos arquitectónicos con localización del sistema.
los distintos grupos que van a participar en la realización de 2. Plano de clasificación de áreas.

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3. Zonificación de equipos y/o sistemas. El proveedor debe entregar al usuario los siguientes
4. Dimensionamiento de áreas. documentos: S
5. Plano de trayectoria de ductos de inyección, retorno,
extracción y colección de polvos. 1. Planos Arquitectónicos y de Ingenierías tal como
6. Plano de identificación de difusores, rejillas, tomas de fueron construidos (As built).
colección de polvos o filtros terminales. 2. Diagramas de instalación tal como fueron construidos
SISTEMAS CRÍTICOS
7. Plano de trayectorias de tuberías de agua helada, agua (As built).
caliente, vapor y líneas de condensados. 3. Manuales técnicos del sistema y sus componentes
8. Plano de presiones diferenciales, ubicación de tableros mayores.
y direcciones de flujo. 4. Catálogo de conceptos.
9. Plano de diagramas de flujo. 5. Catálogos técnicos.
10. Plano del cuarto de máquinas. 6. Fichas técnicas.
11. Plano del cuadro de especificaciones de equipos. 7. Especificaciones.
12. Plano y diagrama eléctrico. 8. Certificados de materiales de construcción y
13. Diagramas de tubería e instrumentación (DTI). componentes.
14. Plano de detalles de instalación del sistema de HVAC. 9. Certificados de calibración de los instrumentos de
15. Certificado de materiales de construcción. medición.
16. Lista de instrumentos y certificados de calibración 10. Resultados de pruebas, realizadas durante las etapas de
(instrumentos críticos). construcción e instalación del sistema (pruebas de FAT
17. Lista de servicios que requiere el sistema de aire y SAT).
Acondicionado. 11. Resultados de las pruebas de arranque.
18. Configuración y lista de filtros con sus certificados de 12. Constancias de la capacitación y del entrenamiento del
calidad. personal de mantenimiento, de ingeniería y el usuario
19. Listado de equipos y componentes mayores. del sistema.
La revisión del diseño debe cubrir los requerimientos Instalación y entrega del sistema
regulatorios: En algunos casos los componentes mayores del sistema,
pueden ser probados en las instalaciones del proveedor (FAT)
1. Marco regulatorio con el que se quiere cumplir. en presencia de representantes del usuario, sin embargo, estas
2. Normas técnicas. pruebas deberán repetirse en las instalaciones definitivas en
3. Guías industriales. donde operarán, para demostrar el funcionamiento correcto en
su sitio definitivo (SAT).
Cumplir con los requerimientos de buenas prácticas de La construcción e instalación de las unidades manejadoras de
ingeniería, como los de calidad y Buenas Prácticas de aire, ductos y otros componentes que están en contacto directo
Fabricación. con el aire que va a generar el sistema, deben ser manejados en
El resultado de ésta calificación es la aceptación del diseño los ambientes más limpios posibles, dada la dificultad para
como apto para el uso previsto y su liberación para ser obtener posteriormente el grado de limpieza necesario para el
implementado. funcionamiento del sistema y la calidad de aire producto que
es requerida.
Entrega y puesta en marcha del sistema (Comisionamiento) Debe cuidarse de manera especial la contaminación potencial
Esta etapa del ciclo de vida de los sistemas de HVAC se puede que pudiera generarse durante los trabajos de ensamble de
definir como, la entrega-recepción y puesta en marcha de los ductos, secciones de las UMA, colocación
equipos y componentes mayores, servicios de soporte o de serpentines, instrumentos de medición y otros componentes
auxiliares e instalaciones y cuando aplica la automatización menores y accesorios del sistema.
involucrada, bajo un enfoque de Ingeniería planeado, El manejo y transportación de componentes mayores debe
documentado y administrado, con el propósito de que el quedar documentado y haber sido supervisado todo el tiempo,
usuario final reciba a plena satisfacción el sistema HVAC e cualquier situación que pudiera implicar maltrato, golpe o
instalaciones, funcionando correctamente en un ambiente de contacto con productos generadores de corrosión deberá ser
seguridad que cumpla con los requerimientos de diseño documentada y explicada.
establecidos y las expectativas de los usuarios. Ya instalados los equipos del sistema y antes de iniciar las
Estas actividades forman parte de las Buenas Prácticas de pruebas de funcionamiento, debe verificarse el ajuste de los
Ingeniería y dan el soporte para una calificación completa y sujetadores, pernos, tornillos, cojinetes, puertas, filtros,
satisfactoria en una etapa posterior. prefiltros, etc.
Paquete documental de ingeniería Inspección técnica

Todos los documentos generados en la etapa de Ingeniería de Al término de la instalación, se realiza una inspección técnica
Detalle deben estar disponibles para verificar la detallada, siguiendo listas de comprobación con el propósito de
correspondencia con el paquete de documentos entregables que asegurar todos los puntos indicados en la secuencia de
se recibirá durante la conclusión y entrega del sistema HVAC construcción e instalación generada previamente por el
por parte del fabricante e instalador al usuario. proveedor.

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Esta inspección se realiza conjuntamente con el proveedor y funcionamiento pueden manejarse a través del sistema
S con el representante del usuario, especialmente del área de de control, para establecer los parámetros bajo los
ingeniería y mantenimiento. cuales el sistema operará.
11. Es durante la entrega-recepción y la puesta en marcha
Pruebas de funcionamiento del HVAC que el proveedor del sistema, capacita y
Una vez concluida la inspección técnica de una manera entrena a los futuros usuarios de los departamentos de
satisfactoria, se inicia la etapa de pruebas de funcionamiento, ingeniería y mantenimiento principalmente.
SISTEMAS CRÍTICOS
las cuales se enlistan a continuación (lista enunciativa, más no 12. El personal capacitado y entrenado deberá ser evaluado
limitativa): para confirmar que la transferencia de información ha
sido efectiva y se documentada.
1. Presurización para detectar fugas.
2. Prueba de drenaje correcto de charolas y trampas de 6.Calificación de instalación
drenaje de condensados.
3. Pruebas de ventiladores, incluyendo alineación de los La Calificación de instalación se ha definido como la etapa
ejes y del motor, verificación de bandas y su ajuste y de validación en la que se demuestra que la construcción e
tensión, correcta vibración de cojinetes, la rotación de instalación del Sistema de Ventilación, Calefacción y
las aspas del ventilador y pruebas de vibración. Acondicionamiento de aire (HVAC) se ha realizado de
4. Pruebas de serpentines para el enfriamiento y acuerdo a las especificaciones de diseño previamente
calefacción, incluyendo hermeticidad, flujo libre de establecidas y se cuenta con las evidencias documentadas
fluidos que conducen a aislamientos térmicos donde que soportan esta demostración.
aplique. Para desarrollar las actividades de la calificación de instalación
5. Pruebas de humidificadores de vapor, verificación del de una manera sistemática y ordenada se genera un protocolo
flujo de aire uniforme para lograr la absorción de específico, el cual después de haber sido revisado y aprobado
vapor, pruebas a los sensores, pruebas a las válvulas se usara como base para emitir el reporte que incluye los
de vapor. resultados y las evidencias de la realización de actividades
6. Pruebas a deshumidificadores, verificación de y el dictamen.
funcionamiento de componentes móviles, verificación La calificación de instalación se divide en dos partes
de la temperatura en los sistemas, verificación de la principales, la parte de verificación del paquete de
reactivación de los componentes químicos. documentación de ingeniería y BPF y la parte correspondiente
7. Pruebas de filtros de aire, verificación de presión a la verificación física de los componentes del sistema.
diferencial en las diferentes etapas de filtración, Las referencias principales para establecer los criterios de
comprobación de ausencia de fugas, pruebas de aceptación son los requerimientos del usuario, técnicos y
integridad de filtros HEPA. regulatorios, así como las especificaciones, cálculos, planos y
8. Red de ductos. Las pruebas de presión en la red de diagramas que forman parte del diseño aprobado del sistema.
ductos se realizan antes de colocar el aislamiento
térmico, ya que en caso de fuga no sería posible Documentación de ingeniería
detectarlos en su posición de origen. Hay dos criterios
fundamentales para decidir sí la prueba es satisfactoria 1. Requerimientos del usuario, técnicos y regulatorios.
o no, en el caso de ductos que pueden conducir 2. Manual de Instalación y Operación del Sistema de
sustancias, cuyo escape pudiera considerarse Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de aire
perjudicial en diferentes áreas de la planta, el criterio (HVAC).
de aceptación es de 0 %, en el caso de los ductos que 3. Planos de clasificación de áreas.
no están en esa situación el criterio de aceptación es no 4. Planos de localización del Sistema de Ventilación,
más del 1 %. Las pruebas de fugas en los ductos deben Calefacción y Acondicionamiento de aire (HVAC) tal
realizarse con instrumentos de medición calibrados y como fueron construidos (As built).
con equipo diseñado específicamente para este tipo de 5. Planos de recorridos de ductos tal como fueron construidos
pruebas. Este tipo de pruebas se realiza en la etapa de (As built).
entrega y puesta en marcha del sistema 6. Planos de difusores y rejillas.
(Comisionamiento), cuya documentación se integrará 7. Planos de localización de manómetros de presión
al paquete de documentación de la calificación del diferencial.
sistema. 8. Planos o diagramas de zonificación de UMA (a que área
9. Difusores y rejillas. Durante las pruebas de abastece cada UMA).
funcionamiento se debe comprobar que no presentan 9. Planos de presión diferencial y dirección de flujo de aire.
fugas en los puntos de unión con los ductos y que los 10. Diagramas de tuberías e instrumentación (DTI).
orientadores funcionan correctamente y no deben 11. Tablas de condiciones de las áreas (temperatura, humedad
presentarse desviaciones de la corriente de aire de relativa, niveles de partículas, presión diferencial, cambios
forma no controlada o diferente al patrón establecido de aire).
durante el diseño del sistema. 12. Descripción del sistema de control.
10. Sistemas de control. Las pruebas de funcionamiento 13. Descripción del sistema de alarmas.
son esenciales para comprobar que las variables del 14. Lista de instrumentos de medición críticos.

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Documentación relacionada con BPF 7. Calificación de operación

1. Certificados de calibración de los instrumentos de
S
La Calificación de operación se ha definido como la etapa de
medición.
validación en la que se documenta la demostración de que el
2. Certificados de calidad de filtros HEPA.
Sistema de Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de
3. PNO de Operación del Sistema de Aire Acondicionado.
aire (HVAC) funciona de acuerdo al diseño aprobado de
4. PNO, Limpieza del Sistema de Aire Acondicionado.
SISTEMAS CRÍTICOS
manera consistente.
5. PNO de Mantenimiento Preventivo.
En esta calificación se realizan pruebas correspondientes a la
6. PNO para el manejo de Desviaciones.
operación del HVAC, estas pruebas son específicas y
7. PNO de control de cambios.
dependen del tipo y características del sistema y sus
8. Programa de mantenimiento.
componentes, para confirmar que funcionan adecuadamente.
9. Programa de calibración de los instrumentos del
Las referencias principales para establecer los criterios de
Sistema de Ventilación, Calefacción y
aceptación son las especificaciones e indicaciones señaladas en
Acondicionamiento de aire (HVAC).
el manual técnico del fabricante del sistema.
10. Evidencia de Capacitación en Buenas Prácticas
Para desarrollar las actividades de la calificación de operación
de Fabricación.
de una manera sistemática y ordenada se genera un protocolo
11. Evidencia de Capacitación en Operación del Sistema
específico, el cual después de haber sido revisado y aprobado
de Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de
se usara como base para emitir el reporte de calificación de
aire (HVAC).
operación que incluye los resultados y las evidencias de la
12. Evidencia de Capacitación en Limpieza del Sistema
realización de actividades, así como el dictamen.
Como parte del protocolo se diseñan listas de comprobación
aire (HVAC).
donde se detallan las pruebas que serán realizadas, su
13. Evidencia de Capacitación en Mantenimiento del equipo.
metodología, equipo de medición necesario, instrucciones
14. Bitácora de Registro de condiciones del Sistema
especiales, especificaciones y límites para las diferentes
variables que son medidas y reportadas.
aire (HVAC).
Durante las actividades de verificación se generan las
15. Evidencia del cumplimiento del programa de
evidencias que servirán de soporte para aceptar el sistema y
mantenimiento.
continuar con la etapa de calificación de desempeño o para
16. Lista del personal calificado en el manejo del sistema.
reportar desviaciones o incumplimiento con respecto al
Verificación de componentes mayores de acuerdo a los funcionamiento y sus especificaciones.
manuales técnicos La siguiente es una lista enunciativa, de las verificaciones que
Esta parte de la calificación de instalación del sistema HVAC se llevan a cabo como parte de las actividades de la
tiene como propósito verificar la instalación correcta y de calificación de operación.
acuerdo a la documentación técnica aprobada de cada uno de
los componentes mayores, componentes menores y accesorios 1. Verificación de Funcionamiento del Sistema de control.
del sistema. 2. Verificación de la unidad manejadora de aire (UMA).
Durante la verificación se generan las evidencias que servirán 3. Verificación del Sistema de calentamiento de aire.
de soporte para aceptar el sistema y continuar con la etapa de
calificación de operación o para reportar desviaciones o 4. Verificación del Sistema de enfriamiento de aire.
incumplimiento con respecto al diseño y sus especificaciones. 5. Verificación del Sistema de Humidificación.
Con la información técnica que describe la estructura del 6. Verificación del Sistema de deshumidificación.
Sistema de Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de 7. Verificación de alarmas y seguridad.
aire (HVAC) se construye una lista de verificación que incluye 8. Prueba de integridad de filtros HEPA.
la descripción de cada uno de los componente mayor, 9. Verificación de la operación de los instrumentos de
componentes menores y accesorios, los puntos que se medición.
verifican, el método de verificación, los valores numéricos de 10. Verificación del funcionamiento de los sistemas y
medidas y variables físicas que apliquen así como la servicios que alimentan al HVAC.
especificación que deben de cumplir. 11. Pruebas de arranque y paro.
Cada sistema HVAC es diferente, de tal manera que esta parte 12. Inspección general del sistema operando.
del protocolo tiene que ser desarrollada de manera especial en
cada empresa y en cada sistema que vaya a ser calificado. 8. Calificación de desempeño: calificación de áreas
Se puede utilizar la lista de componentes colocada en el
capítulo 3 Esquema general del Sistema como una guía para La Calificación de desempeño se ha definido como la etapa de
preparar la lista de verificación del sistema que va a ser validación en que se genera la evidencia documentada de que
calificado. el Sistema de Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento
Es importante mencionar que tanto en la calificación de de aire (HVAC) se desempeña de acuerdo a los requerimientos
instalación como la calificación de operación será muy útil la del usuario y al diseño aprobado, de manera consistente.
documentación generada en la etapa de entrega y puesta en En esta calificación se corren pruebas para demostrar que el
marcha del sistema (Comisionamiento). sistema genera el ambiente de trabajo en las áreas de proceso y

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auxiliares, de acuerdo a las especificaciones y criterios de Se deben realizar mediciones por triplicado y tanto en
S aceptación aprobados. condiciones estáticas como dinámicas. El número de puntos a
A este tipo de estudios también se le ha denominado muestrear se define calculando la raíz cuadrada de la superficie
Calificación de las áreas y consiste, fundamentalmente en la del área.
realización de pruebas que miden y demuestran el La calificación inicial o posterior a un cambio debe realizarse
cumplimiento de las especificaciones y criterios de aceptación en tres momentos o días consecutivos, en el caso de monitoreo
establecidos en el diseño para el satisfacer los requerimientos de seguimiento o verificaciones un muestreo es suficiente,
SISTEMAS CRÍTICOS
del usuario, los técnicos y los regulatorios. siempre y cuando se compruebe que las prácticas del
Para desarrollar las actividades de la calificación de mantenimiento del estado validado han sido seguidas.
desempeño de una manera sistemática y ordenada se genera un El conteo de partículas se realiza a nivel de los filtros
protocolo específico, el cual después de haber sido revisado y terminales y difusores y posteriormente a nivel del área
aprobado se usara como base para emitir el reporte de de trabajo.
calificación de desempeño que incluye los resultados y las En los filtros terminales se monitorea lentamente la periferia
evidencias de la realización de actividades, así como el interna del filtro y la unión con el marco con el propósito de
dictamen. detectar cualquier fuga de aire no filtrado, la matriz del filtro
Como parte del protocolo se diseñan cuadros de resultados se monitorea lentamente dividiendo la superficie en cuadrantes
donde se documentan los resultados de las pruebas que se para tener datos que permitan identificar variaciones
realizan, su metodología, equipo de medición necesario, significativas o presencia de fuga. La distancia del tubo de
instrucciones especiales, especificaciones y límites para las muestreo al filtro debe ser de 2 a 3 cm.
diferentes variables que son medidas y reportadas. Los datos generados se reportan directamente y se calcula el
Durante las actividades de monitoreo y medición se generan promedio de cada punto muestreado.
las evidencias que servirán de soporte para aceptar el sistema o El promedio debe cumplir las especificaciones señaladas en la
para reportar desviaciones o incumplimiento con respecto al tabla. Si se encuentran valores individuales fuera de estos
desempeño y sus especificaciones. límites debe confirmarse que no corresponden a una fuga y si
Estas pruebas están orientadas a evaluar la calidad del aire, por es así pueden incorporarse al cálculo del promedio. En caso de
un lado, y a retar el funcionamiento y recuperación de los presencia de fugas de aire no filtrado el filtro debe ser
parámetros establecidos, bajo condiciones especiales y poner remplazado.
en evidenciar la robustez del sistema.
Clasificación No. máximo permitido de partículas
La siguiente lista corresponde a las pruebas que forman parte totales/m3
de la calificación de desempeño. En reposo En operación
= 0.5 µm = 5.0 µm = 0.5 µm = 0.5 µm
1. Conteo de partículas no viables. Clase A 3 520 29 3 520 29
2. Conteo de partículas viables. (ISO-Clase 5)
3. Flujo de aire. Clase B 3 520 293 352 000 293
4. Velocidad de aire. Clase C 352 000 2 930 3 520 000 29 300
5. Cálculo de cambios de aire. (ISO-Clase 7)
6. Presión diferencial. Clase D 3 520 000 29 300 n.a. n.a.
7. Cascada de presión. (ISO-Clase 8)
8. Integridad de filtros HEPA. ISO-Clase 9 35 200 000 293 0000 n.a. n.a.
9. Temperatura.
10. Humedad relativa. Conteo de partículas viables: Consiste en realizar muestreos
11. Retos y pruebas de recuperación de condiciones. microbiológicos para evaluar la presencia de bacterias y
hongos en la atmosfera generada por el sistema de aire.
A continuación se describen las pruebas, sus especificaciones y Se pueden realizar el monitoreo utilizando equipo de muestreo
criterios de aceptación. dinámica, que mide la cantidad de aire que será evaluado o por
medio de exposición de placas con medios de cultivo
Conteo de partículas totales: Consiste en evaluar la cantidad específicos para bacterias y para hongos, en este caso el tiempo
de partículas > 0.5 y > 5.0 µm presentes en el ambiente de las de exposición deberá ser controlado y reportado, no siendo
áreas y zonas controladas y compararlas con las menor de 30 min ni mayor de 4 h.
especificaciones establecidas de acuerdo a la clasificación de Las placas de exposición deberán tener un tamaño
las áreas o zonas limpias. Se utiliza un contador de partículas estándarizado, procurando que sean de 9 cm de diámetro.
con registro o impresión directa de datos, calibrado. Para la Las placas de exposición y los dispositivos con medio de
clasificación de áreas se deben emplear contadores de cultivo de los equipos de muestreo cinético se incuban en agar
partículas portátiles con tubo de muestreo de corta longitud, de soya tripticaseína de 30 a 35 °C por 72 h cuando sólo se
debido que la velocidad de precipitación de partículas ≥ 5.0 emplee para bacterias o de 30 a 35 °C por 48 h cuando lo
µm es relativamente alta, por lo que en un sistema remoto de emplee tanto para bacterias como para hongos seguido de 20 a
muestreo con longitudes largas de tubería estas podrían no 25 °C por 72 h y se reportan los resultados.
cuantificarse. En sistemas de flujo de aire unidireccionales Los datos generados se reportan directamente y se calcula el
deben emplearse probetas isocinéticas. promedio de cada punto muestreado.

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En los requisitos de usuario deberán considerarse el y obtener directamente del equipo los datos, sin modificación,
cumplimiento de lo establecido en la ISO 14644 para la para que quede documentada la información generada. S
calificación de desempeño y las pruebas de monitoreo En el caso de los filtros HEPA terminales las mediciones se
indicadas en el Apéndice normativo A de la hacen definiendo cuadrantes y monitoreando puntos fijos de
NOM-059-SSA1-2015. cada uno, las mediciones se hacen por triplicado en cada punto
El promedio debe cumplir las especificaciones señaladas en la y se promedian.
SISTEMAS CRÍTICOS
tabla. Si se encuentran valores individuales fuera de estos Es importante que si se detecta algún punto con valores
límites debe confirmarse que no corresponden a una fuga o atípicos, se repitan mediciones y se inspeccione el filtro
presencia de fuentes de contaminación microbiológica, si es así comprobando que no corresponden a puntos de fuga o zonas de
pueden incorporarse al cálculo del promedio. baja filtración.
En caso de presencia de microorganismos fuera de límites se En el caso de los difusores de inyección aire se mide la
debe realizar una sanitización especial en el área contaminada velocidad del aire, dividiendo el difusor en zonas y tomando
y muestreos complementarios para confirmar que el nivel de puntos que representen un muestreo completo, las mediciones
contaminación ha sido controlado. se hacen por triplicado en cada punto y se promedian.
La distancia del tubo del sensor al filtro HEPA terminal o a la
Clase UFC/m3 UFC/placa superficie del difusor debe ser entre 2 o 3 cm para tener
Clase A < 1/m3 < 1/placa resultados consistentes.
(ISO-Clase 5) La velocidad del aire unidireccional debe encontrarse en el
Clase B < 10/m3 < 5/placa rango de 0.45 m/s ± 20 %, en el caso de los filtro HEPA
Clase C < 100/m3 < 50/placa terminales.
(ISO-Clase 7)
Clase D < 200/m3 < 100/placa Cálculo de cambios de aire: con los datos de la velocidad del
(ISO-Clase 8) aire y la superficie de los filtros HEPA terminales y/o de los
ISO-Clase 9 n.a. n.a. difusores de inyección de aire se puede calcular la cantidad de
aire que ingresa al área por unidad de tiempo, es decir se puede
Flujo de aire:Dado que los patrones de flujo pueden influir en tener el dato de metros cúbicos de aire por segundo (m3 de
los niveles de contaminación de partículas ambientales de aire/s) si relacionamos este dato con el volumen del área que se
manera significativa se deben realizar una serie de pruebas que está estudiando, es decir largo por ancho por alto del cuarto,
ayuden a conocer dichos patrones y demostrar que están bajo obtendremos la relación del número de veces que el volumen
control. del cuarto se llena con el aire inyectado por unidad de tiempo.
En flujo de aire puede ser unidireccional, vertical u horizontal, El resultado de este cálculo se reporta en número de cambios
o no unidireccional o turbulento, es muy importante probar y de aire por hora y debe cumplir con los valores establecido en
conocer estos patrones, demostrarlos asegurando que están la siguiente tabla. En caso de que alguna área este fuera de la
controlados de acuerdo al diseño. especificación establecida deberá realizarse el balanceo del
El flujo unidireccional de genera, principalmente, de manera sistema de aire y corregirlo.
directa de los filtros HEPA terminales o de dispositivos que Los cambios de aire por hora deben encontrarse dentro de los
direccionan el aire de manera especial. siguientes valores:
El método que demuestra la dirección del flujo de aire es
utilizando un generador de humo o niebla y observando la Clase Cambios de aire por hora
trayectoria que le da la corriente de aire filtrado, esta prueba Clase A n.a.
debe ser filmada con video para obtener la evidencia que (ISO-Clase 5)
documenta tanto la trayectoria como la distancia que recorre el Clase B 20 a 50
aire en una sola dirección. Clase C 20 a 50
Se pueden utilizar otros métodos instrumentales que se basan (ISO-Clase 7)
en las características físicas de las corrientes de aire para Clase D 10 a 20
visualizar y demostrar el patrón de flujo del aire. (ISO-Clase 8)
En el caso del flujo turbulento o no-unidireccional se utiliza el ISO-Clase 9 n.a.
mismo método, siendo el propósito de la prueba mostrar el
patrón de flujo del aire, con la ayuda de humo y generar la Presión diferencial: El propósito de la prueba de presión
evidencia fílmica que demuestra que este patrón es el diseñado diferencial es verificar la capacidad del sistema de cuartos
y que no evidencia movimiento inadecuado del aire o riesgos limpios para mantener el diferencial de presión especificado
de contaminación. entre las instalaciones limpias y sus áreas relacionadas. La
El flujo de aire unidireccional debe recorrer el espacio prueba de presión diferencial se debe realizar después de que
suficiente para proteger el producto y proceso que se encuentra la instalación ha cumplido con los criterios de aceptación para
en su trayectoria, ya sea vertical u horizontal. la velocidad de flujo de aire o el volumen, la uniformidad del
El flujo turbulento debe seguir el patrón establecido en su flujo de aire y otras pruebas aplicables.
diseño y no presentar corrientes que muevan agentes La prueba se aplica en cada uno de los tres estados de las
potenciales de contaminación. instalaciones (nueva, estática y dinámica) y debe ser repetida
Velocidad del aire: La prueba consiste en realizar mediciones en tiempos regulares como parte del programa de monitoreo
con el equipo adecuado cuyo anemómetro debe estar calibrado de la planta. De hecho es recomendable que existan manómetros

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de presión diferencial instalados de manera permanente en las La especificación de presión diferencial de las esclusas debe
S áreas que requieren esta prueba. Si la instalación esta estar definida desde el diseño y ser verificada como un punto
subdividida en más de un cuarto limpio la presión diferencial crítico en la calificación de desempeño de la instalación.
entre el cuarto más interno y el siguiente adyacente debe ser La cascada de presión debe cumplir con el esquema aprobado
en el diseño de la instalación.
medida. Las mediciones deben continuar hasta que la presión
diferencial del último cuarto controlado y el medio ambiente de
Integridad de filtros HEPA: Esta prueba se realiza para
SISTEMAS CRÍTICOS
servicio, considerado como externo sea medido. Es muy

confirmar que el sistema de filtración, que incluyan filtros
importante realizar estas pruebas, asegurándose que todas las HEPA, está instalado correctamente y no se presentan fugas de
puertas se encuentran cerradas, entre el área limpia y las áreas aire y partículas durante su uso.
que forman su ambiente de proceso periférico. Los datos deben La prueba verifica la ausencia de fugas relevantes para el
ser medidos y registrados directamente por instrumentos de desempeño de la limpieza de la instalación y se realiza
medición, los cuales deben estar calibrados. Los reportes deben introduciendo un aerosol de reto en el espacio anterior de los
incluir como mínimo la siguiente información: filtros, en operación, muestreando después de los filtros la
presencia de los componentes del aerosol.
Tipo de prueba y condiciones de medición. Esta prueba deberá ser aplicada en las áreas limpias que se
Código o designación de cada instrumento de medición encuentran en el estado de “Nueva” o en condiciones
usado y su estatus de calibración. “estáticas” y se debe realizar cuando se esté llevando a cabo la
Clase de limpieza de los cuartos. entrega y puesta en marcha (comisionamiento) o cuando las
Punto de localización de la medición. instalaciones existentes necesiten ser probadas nuevamente o
Estado de ocupación de las instalaciones. después de que los filtros HEPA han sido remplazados.
El equipo que se utiliza es un generador neumático o térmico
La presión diferencial debe cumplir con la especificación de la de aerosol, producido a partir de una solución oleosa de
siguiente tabla: substancias aprobadas, que no permiten el desarrollo
microbiológico y un fotómetro calibrado o un contador de
partículas especial (DPC Discrete particle counter) calibrado.
Clase Presión diferencial
La prueba consiste en hacer un barrido por toda la superficie
Clase A > 15 Pa con respecto a cuartos
del filtro (escaneo) con la sonda del fotómetro o del contador
(ISO-Clase 5) adyacentes
de partículas, muestreando la corriente de aire para detectar la
Clase B > 15 Pa con respecto a áreas no asépticas
presencia de las partículas del aerosol de la solución de reto.
Clase C > 10 Pa
Debe muestrearse de manera especial las partes de unión del
(ISO-Clase 7)
material filtrante con el marco del filtro de la estructura de
Clase D > 5 Pa Presión negativa donde se
soporte del mismo.
(ISO-Clase 8) generan polvos con respecto a los
Durante la prueba, cualquier indicación de fuga, igual o mayor
cuartos adyacentes y positiva con
que la especificación establecida, deberá ser localizada e
respecto a donde no se generan polvos
identificada en el punto del filtro, la sonda del fotómetro o del
ISO-Clase 9 Presión positiva con respecto a áreas no
contador de partículas deberá detenerse para confirmar su
clasificadas.
presencia.
Se considera que una fuga es cuestionable cuando presenta una
Cascada de presión: Esta prueba tiene como propósito lectura superior a 10-4 (0.01 %) de la concentración original del
demostrar y documentar que el aire fluye desde el área más aerosol inyectado en el espacio previo al filtro.
limpia y presión más alta hacia la de presión más baja y menor Las fugas detectadas pueden ser reparadas usando materiales
clasificación de limpieza, pasando por esclusas y cuartos de compatibles con el filtro. La prueba de integridad deberá ser
diferente clasificación y presión diferencial. repetida en el punto de reparación y el resto de la superficie del
El rol principal de las esclusas de aire es proporcionar un filtro. Si la reparación no es segura o el resultado no es
mecanismo efectivo para evitar la contaminación por partículas aceptable el filtro deberá ser remplazado.
ambientales y mantener el grado de presión diferencial entre
cuartos de diferente clasificación. Temperatura: el propósito de esta prueba es demostrar la
Las esclusas de aire pueden evitar que la presión diferencial entre los capacidad del sistema de manejo de aire (HVAC) para
cuartos baje a cero cuando se abran las puertas entre las áreas con mantener la temperatura del aire controlada, dentro de los
diferente clasificación de limpieza. Son comunes tres tipos límites establecidos o dependiendo de los requerimientos del
principales de arreglos de presión de esclusas de aire: producto y proceso.
Cascada: el aire fluye desde el área de presión más alta por la La temperatura debe medirse en cada una de las zonas de las
esclusa de aire hasta el área de presión más baja. áreas controladas. Los sensores deben ser colocados en el
Burbuja: la esclusa de aire está a la presión más alta: el aire punto de monitoreo designado a la altura del nivel de trabajo y
fluye desde la esclusa hacia el área limpia y el corredor o debe medirse suficiente tiempo para permitir la estabalización
cuarto contiguo. del sensor y poder tener lecturas de la temperatura real de cada
Pozo: la esclusa de aire está a la presión más baja; el aire fluye punto.
desde el área limpia y del corredor, o cuarto contiguo, hacia Todas la lecturas de temperatura deben ser registradas de
la esclusa. manera directa por el equipo de monitoreo, siendo el periodo

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del monitoreo de por lo menos una hora y la frecuencia de El tiempo de recuperación de la limpieza de las áreas
lecturas cada minuto. controladas es un parámetro importante. S
Las áreas de trabajo deben dividirse de acuerdo al proceso y Esta prueba se debe realizar en sistemas de aire no
seleccionar aquellas que tengan impacto en el mismo, para que unidireccional o turbulento, ya que la recuperación de las
se pueda registrar el perfil térmico a lo largo de los periodos de condiciones de limpieza del aire ambiental es el resultado
producción. directo de la función de ventilación y se obtiene a partir de la
SISTEMAS CRÍTICOS
Es importante seleccionar el punto donde se colocara el sensor relación de recirculación de aire, la geometría de flujo de aire
de temperatura evitando colocarlo cerca de partes de equipos de entrada-salida, las condiciones térmicas y las características
que generen calor y nunca colocarlos a nivel de piso. de distribución del aire dentro de la zona controlada. En los
La temperatura debe cumplir con la especificación de la sistemas de flujo de aire uni-direccional, la contaminación es
siguiente tabla: desplazada por el flujo de aire controlado, de manera directa y
el tiempo de recuperación es una función del volumen de la
Clase Temperatura zona controlada y la distancia, bajo las condiciones de una
Clase A 18 a 25 °C clase A (ISO-5) el tiempo de recuperación es mínimo, por lo
(ISO-Clase 5) que no requiere ser probada.
Clase B 18 a 25 °C La prueba de recuperación de condiciones debe llevarse a cabo
Clase C 18 a 25 °C en las áreas clase B o C (ISO-7) y no aplica en las clases D
(ISO-Clase 7) (ISO-8) e ISO-9. Es recomendable no utilizar un aerosol
Clase D 18 a 25 °C artificial para generar la contaminación de residuos que
(ISO-Clase 8) deberán ser removidos por el sistema de aire, dado el riesgo
ISO-Clase 9 18 a 25 °C que implica el uso de elementos extraños a las instalaciones y
al proceso. La prueba de recuperación de condiciones se
Humedad relativa: el propósito de esta prueba es demostrar la realiza en las áreas en estado de operación “estático”, siendo
capacidad del sistema de manejo de aire (HVAC) para muy importante conocer el patrón de flujo de aire de las áreas
mantener la humedad relativa del aire controlada, dentro de los controladas en estudio, ya que deben elegirse puntos de
límites establecidos. muestreo, previamente identificados, que sean homogéneos o
La humedad relativa debe medirse en cada una de las zonas de representativos del grado de limpieza. Es importante también
las áreas controladas. Los sensores deben ser colocados en el contar con información del número de cambios de aire por
punto de monitoreo designado a la altura del nivel de trabajo y hora calculados para los cuartos en estudio así como los
debe medirse durante suficiente tiempo para permitir la valores de temperatura y humedad relativa ya que servirán de
estabilización del sensor y poder tener lecturas de la humedad base para interpretar los resultados de la prueba de
real de cada punto. recuperación de condiciones. Otro parámetro importante,
Las lecturas de humedad relativa deben ser registradas de relacionado con esta prueba, es el tiempo de recuperación, el
manera directa por el equipo de monitoreo, siendo el periodo cual se define como, el periodo de tiempo necesario para pasar
del mismo de por lo menos una hora y la frecuencia de lecturas de una condición de contaminación por partículas totales, fuera
cada minuto. de especificaciones, a una condición controlada dentro de los
Las áreas de trabajo deben dividirse de acuerdo al proceso y parámetros aprobados, de acuerdo a su clasificación. Para
seleccionar aquellas que tengan impacto en el mismo, para que llevar a cabo la prueba deberán colocarse contadores de
se pueda registrar el perfil de humedad relativa a lo largo de partículas en los puntos identificados para el monitoreo de
los periodos de producción. partículas de 0.5 y de 5.0 µ. Mediante la aplicación de un
Es importante seleccionar el punto donde se colocara el sensor aerosol con tamaño de partícula menor a 1 µ se deben alcanzar
de humedad relativa evitando colocarlo cerca de partes de niveles de partículas totales equivalentes a 100 veces más la
equipos que generen calor y nunca colocarlos a nivel de piso. concentración de partículas de acuerdo a la clasificación del
La humedad debe cumplir con la especificación de la siguiente área. Una vez alcanzada la condición, se activan los contadores
tabla: de partículas que fueron programados para realizar mediciones
cada minuto hasta regresar a la clasificación establecida. Se
Clase Humedad relativa observan los resultados y se registra el tiempo necesario. Con
Clase A 30 a 65 % los datos obtenidos se reporta el tiempo de recuperación, se
(ISO-Clase 5) grafica la curva de concentración de partículas de cada
Clase B 30 a 65 % magnitud y se calcula el índice de recuperación. El tiempo de
Clase C 30 a 65 % recuperación de condiciones es aceptable si se encuentra
(ISO-Clase 7) dentro del rango de 15 a 20 min.
Clase D 30 a 65 %
(ISO-Clase 8) 9. Mantenimiento del estado validado
ISO-Clase 9 18 a 25 %
Para considerar confiable un Sistema de Ventilación,
Recuperación de condiciones: Esta prueba se realiza para Calefacción y Acondicionamiento de aire (HVAC), debe,
determinar la capacidad del sistema de aire (HVAC) para primero, haber sido diseñado correctamente, construido e
eliminar partículas del aire, después de haber tenido una instalado de acuerdo al diseño aprobado, entregado y
situación fuera de las condiciones normales de operación. verificado de manera completa y oportuna, haber sido

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calificado antes de iniciar su utilización en procesos y sobre la inspección periódica del sistema y de estos elementos de
S todo, haber desarrollado la infraestructura técnica, de manera especial.
administración y de documentación que permita mantener y Cuando se realicen reemplazos de elementos importantes del
evidenciar el funcionamiento del sistema de manera sistema, como filtros HEPA, partes del ventilador u otros
permanente y confiable de tal manera que se asegure su aptitud componentes mecánicos o del sistema de control, procede
para el uso previsto continuamente. realizar las pruebas correspondientes que demuestren que la
Contar con un sistema de mantenimiento, significa que se condición de “calificado” se conserva.
SISTEMAS CRÍTICOS
conservan las condiciones físicas y funcionales de cada Cuando se planean modificaciones al diseño, estructura o
componente del sistema de Ventilación, Calefacción y modelo de los componentes mayores, procede organizar y
Acondicionamiento de aire (HVAC) de manera permanente, documentar el proyecto a través del sistema de control de
apegándose de manera sistemática a planes y programas cambios de la empresa, de tal manera que el ciclo de vida del
organizados, teniendo como base las especificaciones técnicas sistema de Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de
de todos los componentes y accesorios, los manuales del aire (HVAC) se inicia nuevamente.
fabricante e instalador del sistema, procedimientos, El sistema de CAPA de la empresa debe ser aplicado cuando se
instructivos, registros y la participación de personal capacitado lleguen a presentar fallas o desviaciones que impacten la
y calificado para ejecutar todas las actividades incluidas en operación o desempeño del sistema. La documentación relativa
dichos planes y programas. a las fallas o desviaciones, las acciones correctivas y los planes
La calificación del personal es un factor muy importante en la de prevención deben de estar disponibles y completos para dar
operación y conservación del sistema de aire (HVAC), por lo apoyo y soporte al mantenimiento del estado validado del
que es necesario que esté organizada bajo un programa de sistema.
capacitación, entrenamiento y evaluaciones periódicas del La evaluación periódica que se realiza con las auditorias
personal relacionado, directa o indirectamente con este técnicas internas, permite tener un diagnóstico oportuno del
sistema. Esto asegura, junto con la supervisión continua, que el estado que guarda la estructura técnica, operativa y
sistema es operado, monitoreado y mantenido solo por administrativa del sistema, a partir del cual se toman las
personal experto en el tema. acciones correspondientes para conservar el sistema de
Teniendo el sistema controlado y con el estatus de calificado el Ventilación, Calefacción y Acondicionamiento de aire
monitoreo de sus parámetros operativos, de desempeño y de su (HVAC) bajo control.
utilización se vuelve esencial. Este monitoreo depende en gran
medida de los datos que generan los instrumentos de medición, Referencias
los cuales deberán de ser calibrados bajo un programa estricto. ISO 14644-1: 1999 (E), Cleanrooms and associated controlled
Los datos que generan las pruebas de laboratorio que miden el environments- Part 1: Classification of air cleanliness.
desempeño del sistema y los datos de los usuarios de las áreas ISO 14644-2: 2000 (E), Cleanrooms and associated controlled
de proceso, relacionados con las condiciones ambientales de environments- Part 2: specifications for testing and monitoring
las áreas a las que da servicio el sistema de aire también son to prove continued compliance with ISO 14644-1.
parte fundamental del monitoreo. En áreas clase A (ISO-5) y ISO 14644-3: 2005 (E), Cleanrooms and associated controlled
B, el monitoreo del conteo de la concentración partículas ≥ environments- Part 3: Test methods.
5.0 µm tiene un significado particular como una herramienta ISO 14644-4: 2001 (E), Cleanrooms and associated controlled
de diagnóstico para detectar fallas de manera temprana. La environments- Part 1: Design, construction and start-up.
indicación ocasional de conteo de partículas ≥ 5.0 µm pueden ISPE, Guía de Buenas Prácticas: Calefacción, Ventilación y
ser conteos falsos debidos a ruido electrónico, interferencia aire acondicionado, International Society for Pharmaceutical
luminosa (luz perdida), coincidencia, etc. Sin embargo, el Engineering (ISPE), www.ispe.org.
conteo consecutivo o regular de bajos niveles es un indicador ISPE, Sterile Product Manufacturing Facilities, Volume 3,
de un evento de posible contaminación y debe ser investigado. International Society for Pharmaceutical Engineering (ISPE),
Tales eventos podrían indicar una falla temprana del sistema www.ispe.org.
HVAC, falla del equipo de llenado o también ser diagnóstico European commission: Good Manufacturing Practice
de prácticas inadecuadas durante el montaje del equipo y Medicinal Products for Human and Veterinary Use, Volume 4,
operaciones rutinarias. Brussels, February 2008.
Los elementos considerados consumibles del sistema, como The United States Pharmacopeia August 2012.
filtros, pre-filtros, así como las partes móviles que se Emilio Moia, Foster Wheeler: The design criteria of a
deterioran con el uso continuo, como bandas y empaques, pharmaceutical clean room. Industria farmacéutica,
tienen que ser reemplazados periódicamente basándose en marzo/abril 2000.

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AIRE COMPRIMIDO Dependiendo del proceso del producto y del nivel de pureza
requerida, se deben controlar las siguientes variables. A
Introducción
Contenido de agua
El aire comprimido es otro servicio (sistema) utilizado en la Es importante remarcar que el Aire Comprimido se clasifica
industria farmacéutica y de los insumos para la salud, para principalmente de acuerdo a su contenido de agua, ya sea en
diferentes fines, ya sea para el funcionamiento del sistema forma gaseosa o líquida.
SISTEMAS CRÍTICOS
neumático de equipos de fabricación, para presurizar cámaras A continuación se presenta una tabla en la que se resumen los
o en alguna etapa del proceso de fabricación, siendo este valores permitidos de agua.
último de relevante importancia ya que influye en el
aseguramiento de calidad y pureza del producto. ISO 8573-1 clase Agua
El aire comprimido se genera a partir de aire ambiental, el cual Punto de rocío
presenta, normalmente, una serie de contaminantes que pueden 1 ≤-70 °C
representar factores negativos para la calidad de los productos 2 ≤-40 °C
y para el desempeño del trabajo que se realiza con él. Es por 3 ≤-20 °C
ello que este sistema debe estar diseñado apropiadamente para 4 ≤+3 °C
el uso previsto, ya que si este es empleado en la fabricación de 5 ≤+7 °C
productos no estériles requiere condiciones distintas a las que 6 ≤+10 °C
requiere cumplir aquel es empleado en la fabricación de 7 Líquida g/m3
productos estériles. La presente monografía se refiere al ≤ 0.5
sistema de aire comprimido que se encuentra en contacto 8 0.5 - 5
directo o indirecto con el producto. 9 5 - 10
Los mecanismos para la remoción y control de los X > 10
contaminantes y condiciones del aire se realiza durante varias
etapas, continuas e integradas en un proceso que debe ser Partículas totales y viables
validado, cuidando cada variable de acuerdo a los parámetros Si el aire comprimido tiene el potencial de impactar el
establecidos en su diseño, el cual tiene como base la gestión de ambiente donde este se emplea, su contenido de partículas
riesgo del proceso e insumo para la salud que se fabricará. debe cumplir los mismos requisitos del aire correspondiente a
Los contaminantes principales en el aire comprimido son la clasificación del área.
clasificados en partículas totales y viables, presencia de vapor
de agua, aceite, entre otros; en adelante se establecerán los Aceite
componentes mínimos a considerar a fin de controlar y dar A continuación se presenta una tabla en la que se resumen los
cumplimiento con los requerimientos de cada uno de ellos. valores permitidos de aceite.
Términos y definiciones ISO clase Aceite o HC

1 ≤ 0,01
a. Punto de rocío: Temperatura a la cual el vapor de agua 2 ≤ 0,1
se empieza a condensar. 3 ≤1
b. Gases de proceso: Gases empleados en el proceso que 4 ≤5
pueden afectar la calidad del producto. X >5
c. Unidad formadora de colonia (UFC): Unidad por la
que se expresa el número de microorganismos Cuando derivado de la gestión de riesgo sea necesario
cultivables. monitorear la presencia de otros contaminantes, como otros
d. Aerosol: Suspensión en un medio gaseoso de partículas gases, estos deben indicarse incluyendo las concentraciones
sólidas, líquidas o sólidas y líquidas que tienen una específicas permitidas o determinadas dentro del suministro de
velocidad de caída o sedimentación despreciable. aire comprimido. Veáse ISO 8573.
e. Aceite: Mezcla de hidrocarburos que consiste
principalmente de hidrógeno y carbono. Esquema general del sistema
f. Partícula: Masa pequeña discreta de material sólido o El entendimiento del proceso y el producto, en los que se
líquido. utilice el aire comprimido, así como el gestionamiento de sus
g. Partícula viable: Cualquier partícula que bajo riesgos, deberán tener bases científicas y tecnológicas sólidas
condiciones ambientales apropiadas puede que permitan diseñar el sistema más adecuado de acuerdo a los
reproducirse. requerimientos identificados.
Los sistemas de aire comprimido de proceso comprenden dos
Tipos de aire comprimido secciones principales: la de generación del aire comprimido y
Si el aire comprimido entra en contacto directo o indirecto con la de almacenamiento y distribución.
el producto, su fuente de generación, almacenamiento y La sección de generación incluye los compresores y los
distribución, se consideran críticos. Si no es así pero se utiliza equipos de tratamiento de aire.
en la operación de la planta únicamente se considera un A continuación se enuncian algunas de las características más
sistema de soporte o servicio. importantes de estos componentes:
AIRE COMPRIMIDO
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Compresores Equipos de tratamiento de aire

A Existen varios tipos de compresores, a continuación se Estos equipos tienen el propósito de remover los
mencionan brevemente: contaminantes tales como, partículas totales, partículas viables,
hidrocarburos y agua. Dentro de este grupo de componentes
Los reciprocantes o de pistón. En estos equipos el encontramos los siguientes:
elemento principal de compresión es un pistón que se
mueve alternativamente dentro de un cilindro, Enfriadores de aire y separadores de humedad. Son
SISTEMAS CRÍTICOS
lográndose así la reducción del volumen del aire a intercambiadores de calor diseñados para remover el
comprimir. Los compresores de pistón pueden ser calor generado por la compresión y así mejorar la
simples o de doble efecto, ya que una o las dos caras eficiencia de los sistemas. Generalmente están
del pistón realizan la compresión del aire. Los integrados al paquete del compresor, así como a los
compresores reciprocantes pueden ser lubricados o no separadores de humedad, que eliminan los líquidos que
lubricados; estos últimos tienen anillos de poli- vienen con el aire.
tetrafluoretileno (PTFE) auto-lubricados. Es importante Secadores. Una vez que el aire sale del separador de
enfatizar que este tipo de compresores solo son útiles humedad, su humedad fue reducida de manera
cuando se garantice que son libres de aceite. significativa, sin embargo, puede aún estar saturado. La
Los helicoidales, libres de aceite. Son máquinas donde temperatura a la cual la humedad se condensa es
los rotores helicoidales engranados entre si y ubicados llamada punto de rocío. El punto de rocío puede ser
dentro de una carcasa, comprimen y desplazan el aire medido en la línea presurizada o a presión atmosférica.
hacia la salida. Estos funcionan gracias a un par de Los secadores son generalmente clasificados de
rotores de tipo helicoidales, que se acoplan a dos acuerdo al punto de rocío. Hay diferentes tipos de
tornillos. Uno de los rotores cumple una tarea muy secadores de aire.
similar a la del pistón. Secadores regenerativos con desecante. Este
Los de tornillo o paletas lubricados. Poseen una tipo de secadores utilizan sustancias desecantes
protección de forma cilíndrica, donde se coloca un porosas que adsorben la humedad y pueden
rotor justo en el centro y las paletas casi rozan las incluir sílica gel, alúmina activada o mallas
paredes del cilindro. El aire entra al compresor cuando moleculares. Normalmente estos equipos
el volumen entre dos paletas es máximo; luego a contienen dos torres gemelas. El aire que será
medida que el rotor gira, el volumen decrece por efecto secado pasa a través de una torre que tiene el
de la excentricidad. El aire se comprime a medida que desecante activo, mientras que en la otra torre el
es desplazado hasta la salida. Actualmente existen desecante utilizado está siendo regenerado
compresores de paletas exentos de aceite, con aletas de usando aire comprimido caliente.
poli-tetrafluoretileno (PTFE), carbón o baquelita. Secadores de calor por compresión. Estos
Los de tornillos no lubricados. Utilizan engranes de equipos tienen desecantes regenerativos que
sincronización externos para los rotores. Al no tener utilizan el calor durante la compresión para
contacto los rotores ni estos con la carcasa, no se alcanzar la regeneración del desecante. Estos
requiere agentes lubricantes dentro de la cámara de equipos pueden ser de una o dos torres.
compresión. El aire suministrado es libre de aceite. Secadores refrigerados. Utilizan un sistema de
Los de diafragma. Estos son fabricados de manera muy refrigeración para enfriar el aire. El efecto del
sencilla. Poseen una biela montada a la cual se le enfriamiento causa la condensación del agua del
adiciona una membrana, sobre un motor. Se genera un aire comprimido, esta humedad es removida y
movimiento donde la membrana vibra y el aire puede drenada por un separador que conduce a un drenaje.
ser comprimido gracias a determinadas válvulas que lo Filtros. Los filtros que se colocan después del sistema
contienen. Una ventaja de estos es que el aire obtenido de secado son requeridos para remover los
es muy puro, ya que el mismo no se encuentra en contaminantes y cumplir con los requerimientos del
contacto con el mecanismo. proceso y del producto (requerimientos de usuario).
Los centrífugos. Estos equipos están constituidos por Hay diferentes tipos de filtros disponibles.
una o más ruedas horizontales y difusores, en donde el Filtros de partículas. Generalmente utilizados
fluido es desacelerado. El principio del funcionamiento para remover polvo, escamas de la tubería
de estos compresores es el siguiente: El aire a ser óxidos metálicos y partículas del desecante.
comprimido entra por el centro de una rueda giratoria Filtros Coalescentes. Tienen el propósito de
provista con aspas radiales (rueda o impulsor) los eliminar aerosoles y pequeñas gotas de líquidos.
cuales lanzan el aire hacia la periferia mediante la Filtros terminales. Filtros de cartucho de 0.2 µm
fuerza centrífuga. Antes de ser guiado el aire hacia el pueden ser usados como un filtro terminal para
centro del siguiente impulsor, se le hace pasar por un obtener aire comprimido “estéril”. Estos filtros
difusor que transforma la energía cinética en presión. son de tipo sanitario y está formados por
La relación de compresión por etapas se determina en membranas hidrofóbicas como medio filtrante,
función de los cambios de velocidad y densidad para eliminar el riesgo de que el aire lo
experimentados por el aire. atraviese.
AIRE COMPRIMIDO
_________________________________________________________________
Sección de almacenamiento y distribución instrumentos de medición. Debe estar instalado

Está formada por los equipos de almacenaje, distribución, de tal manera que permita hacer verificaciones A
conexión y puntos de uso. anuales de fugas.
Receptores de aire (Pulmones). Estos equipos son Sistemas de control

usados para minimizar los cambios de presión en los El control de la operación y desempeño de estos sistemas es
periodos de demanda y sus picos. Los receptores muy importante, ya que en ellos recae de manera fundamental
SISTEMAS CRÍTICOS
mejoran la confiabilidad y eficiencia del sistema, ya el cumplimiento de los parámetros de proceso y las
que se usan para manejar las variaciones de presión en especificaciones de calidad del Aire Comprimido como “fluido-
la sección de distribución. producto”.
La sección de distribución debe cumplir con las Se encuentras disponibles diferentes tipos de control, estos van
siguientes características: de los más sencillos, prácticamente manuales hasta los que se
Debe ser un sistema de un solo sentido, para basan en la aplicación de sistemas computarizados.
alimentar cada punto de uso. Los sistemas de control deberán ser calificados de acuerdo al
Debe incluir los puntos de uso de alta demanda. grado de complejidad en que este basada su tecnología.
Estos deben estar separados o lejos del punto de Los sistemas de control, generalmente están ligados a métodos
generación o distribución inicial de aire de monitoreo automáticos o semiautomáticos, en línea o que
comprimido para garantizar el abasto de los permiten muestreos para pruebas en laboratorio. Todos los
puntos de uso de menor consumo. En caso de instrumentos y dispositivos ligados a la realización de
ser necesario estos puntos de uso deben contar mediciones sobre el proceso de la generación de aire o las
con receptores de aire comprimido intermedios características físicas durante su distribución, deberán estar
o especiales. calibrados.
Debe tener un anillo de distribución principal. Las variables que se monitorean de manera más frecuente son:
Construido con tubería de cobre, aluminio o Presión, flujo, temperatura y humedad medida como punto de
acero inoxidable. Es el sistema de alimentación rocío.
más robusto comparado con el de un solo
sentido, este anillo debe tener una capacidad de Diseño del sistema
distribución suficiente para alimentar los En el diseño de un sistema de Aire Comprimido para la
diferentes puntos de uso aún con la variabilidad industria de productos para la salud juegan un papel muy
de demanda, reduciendo la necesidad de tener importante los conceptos y lineamientos de las buenas
receptores intermedios para atenuar esta prácticas de fabricación y las buenas prácticas de ingeniería.
variación. Este anillo permite la conexión a La participación de un equipo multidisciplinario de
varios compresores. profesionales es esencial para atender los diferentes temas y
Debe tener las tuberías secundarias de enfoques que requiere este tipo de proyectos
alimentación para los diferentes puntos de uso, En el proceso de diseño es muy importante no perder de vista
también construidas con cobre, aluminio o que el propósito del sistema de Aire Comprimido es proveer
acero inoxidable. Debe de cumplir con todas las aire limpio, con el flujo y presión especificados y aprobados a
condiciones de buenas prácticas de fabricación los productos o procesos de fabricación, cumpliendo al mismo
y de ingeniería, calificación, documentación, tiempo los requisitos de las buenas prácticas de ingeniería, las
mantenimiento, calibración de sus instrumentos normas industriales que apliquen, los requerimientos de la
de medición, monitoreo de la calidad del aire, etc. empresa y fundamentalmente los requerimientos regulatorios y
Debe tener válvulas de no retorno, también las buenas prácticas de fabricación.
construidas con cobre, aluminio o acero Es esencial analizar las instalaciones del sistema y su relación
inoxidable, para que aire utilizado en sistemas con el proceso desde el punto de vista de la prevención de la
neumáticos o no críticos no retorne o tenga un contaminación que pudiera darse en las áreas críticas del
retroflujo, y de esta manera asegurar que no proceso.
regrese al receptor principal y lo pueda El trabajo de diseño se desarrolla en varios pasos secuenciales,
contaminar. donde cada uno de ellos genera documentos que pueden ser
La línea de distribución debe ser dimensionada considerados como “entregables”.
de acuerdo a la demanda. El tamaño de la
tubería debe ser calculada de acuerdo al número Requerimientos del sistema de Aire Comprimido
de puntos de uso, el gasto estimado en cada uno El concepto de requerimiento corresponde a los puntos y/o
y tomando en cuenta los picos probables de condiciones que se deben cumplir para satisfacer las
demanda a lo largo de las jornadas laborales especificaciones y requisitos que definen la calidad del sistema
normales. La cantidad obtenida debe ser que está siendo diseñado.
multiplicada por un factor de seguridad para Los requerimientos se han dividido en tres tipos para
cubrir alguna demanda extraordinaria. identificar su origen y el aspecto de la calidad del sistema que
La instalación de las tuberías deberá permitir la están señalando. Los requerimientos del usuario, los
inspección regular y el servicio a las válvulas e requerimientos técnicos y requerimientos regulatorios.
AIRE COMPRIMIDO
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Requerimiento del usuario Gestión de riesgos de la calidad

A Estos requerimientos tienen como base el tipo de productos Siendo el sistema de aire comprimido de proceso un sistema
que se van a fabricar y los procesos que se utilizaran para crítico, es fundamental llevar a cabo el estudio completo de
obtenerlos. gestión de riesgos para asegurar que se tomen las provisiones
De los productos se debe tomar en cuenta la forma necesarias para prevenir fallas de calidad o de suministro que
farmacéutica, sus especificaciones, especialmente las pongan en riesgo la calidad del producto, del proceso y la
relacionadas con los aspectos de contenido microbiológico, de integridad o seguridad del personal.
SISTEMAS CRÍTICOS
partículas, humedad relativa y riesgos de contaminación El gestionamiento de los riesgos debe llevarse a cabo , tanto a
química. a nivel general, es decir, viendo el sistema como una entidad
Del proceso es importante señalar las etapas en las que se completa, como también realizando los estudios detallados por
desarrolla, los pasos críticos en los cuales el producto en cada lcción de generación y el módulo de almacenaje y
proceso puede sufrir modificaciones no deseables, así como el distribución, tomando en cuenta todos los elementos que
grado de control que debe establecerse para generar productos conforman el sistema.
que cumplan sus especificaciones de manera segura y
consistente. Calificación
Los aspectos de volumen de producción, tiempos de procesos, Es conveniente asegurar que no habrá cambios durante la
tipo de maquinaria que será utilizada, cantidad de personas que construcción e instalación del sistema de Aire Comprimido o
participaran en el proceso, los materiales que serán utilizados y después, cuando se inicien las pruebas y operación. Esto se
las diferentes etapas del proceso mismo deben ser analizados logra llevando a cabo la Calificación del Sistema.
generando un documento de ingeniería con toda la información Este trabajo se realiza revisando el diseño desde su etapa
y sus referencias. Conceptual, hasta que se encuentra en su estado de emisión
De manera paralela se deben plantear todas las precauciones “Para construcción”.
necesarias para el cuidado y protección del personal que 1. La Calificación del diseño busca cubrir los siguientes
participara en cada etapa o paso del proceso. objetivos, entre otros:
Asegurar que el diseño contemple los requerimientos
Requerimientos técnicos de soporte de los servicios que debe proveer la
Los requerimientos técnicos se refieren a los servicios infraestructura de la planta.
ancilares o auxiliares e instalaciones arquitectónicas que Asegurar que el diseño minimice el riesgo para la
necesita cada uno de los componentes mayores del sistema y calidad y seguridad de los pacientes.
sus accesorios principales. Asegurar que el diseño sea sólido y tenga un
Basamentos y construcciones especiales, mecanismos de rendimiento confiable.
soporte y sujeción, localización ya sea en interior y protegido o Asegurar que la construcción y el funcionamiento sean
colocado directamente en el exterior del edificio. factibles y se hayan tomado en cuenta los costos
Si los equipos o componentes mayores necesitan un tipo de operativos, el ciclo de vida útil del sistema y los riesgos
energía eléctrica especial, alimentación de sistemas hidráulicos de su operación.
o neumáticos con sus correspondientes especificaciones del Asegurar que los conceptos propuestos cumplan con
servicio y su consumo estimado. los requisitos del usuario y los regulatorios que
También es importante identificar la localización de los apliquen (especificaciones del sistema, capacidades de
módulos de control, sus especificaciones y servicios necesarios cada uno de los componentes del sistema, lista de
para su funcionamiento correcto. componentes e instrumentos de medición calibrados,
Las necesidades de espacio y su localización son planteadas en condiciones de operación: temperatura, humedad
el cuadro de requerimientos técnicos del sistema. Este espacio relativa, etc., características del control, requerimientos
está dado por las dimensiones de los equipos, sus tuberías, de planos y calidad de materiales).
conexiones y los espacios necesarios para que los operadores o La revisión del diseño debe cubrir, los requerimientos técnicos:
usuarios puedan operarlos y darles mantenimiento.
1. Planos arquitectónicos con localización del sistema.
2. Plano de clasificación de áreas.
Requerimientos regulatorios
3. Zonificación de equipos y/o sistemas.
Los requerimientos regulatorios están definidos por las normas
4. Plano de trayectoria de tuberías de distribución.
y reglamentos que deben ser cumplidos, especialmente cuando
5. Plano de identificación de puntos de uso.
el sistema esté operando y se esté realizando el proceso y la 6. Plano del cuarto de máquinas.
fabricación de producto, es decir temas de buenas prácticas de 7. Plano del cuadro de especificaciones de equipos.
fabricación, sin embargo se deben tomar en cuenta también la 8. Plano y diagrama eléctrico.
normatividad asociada a la construcción, instalación y manejo 9. Diagramas de tubería e instrumentación (DTI).
del sistema desde el punto de vista industrial, ecológico y de 10. Plano de detalles de instalación del sistema de Aire
seguridad del personal. Comprimido
Será importante también considerar el mercado en el cual serán 11. Certificado de materiales de construcción.
comercializados los productos y las normas de la región o país 12. Lista de instrumentos y certificados de calibración
a los que serán enviados. (instrumentos críticos).
AIRE COMPRIMIDO
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13. Lista de servicios que requiere el sistema de Aire 11. Resultados de las pruebas de arranque.
Comprimido. 12. Constancias de la capacitación y del entrenamiento del A
14. Configuración y lista de filtros con sus certificados de personal de mantenimiento, de ingeniería y el usuario
calidad. del sistema.
15. Listado de equipos y componentes.
Instalación y entrega del sistema
La revisión del diseño debe cubrir los requerimientos En algunos casos los componentes del sistema, pueden ser
SISTEMAS CRÍTICOS
regulatorios: probados en las instalaciones del proveedor (FAT) en
presencia de representantes del usuario, sin embargo, estas
1. Marco regulatorio con el que se debe cumplir. pruebas deberán repetirse en las instalaciones definitivas en
2. Normas técnicas. donde operarán, para demostrar el funcionamiento correcto en
3. Guías industriales. su sitio definitivo (SAT).
La construcción e instalación de los componentes del sistema
Cumplir con los requerimientos de Buenas Prácticas de de Aire Comprimido, las tuberías y otros componentes que
Ingeniería, Buenas Prácticas de Fabricación y de Calidad. están en contacto directo con el Aire Comprimido que va a
El resultado de ésta calificación es la aceptación del diseño generar el sistema, deben ser manejados en los ambientes más
como apto para el uso previsto y su liberación para ser limpios posibles, dada la dificultad para obtener posteriormente
implementado. el grado de limpieza necesario para el funcionamiento del
sistema y la calidad de aire-producto que es requerida.
Entrega y puesta en marcha del sistema (Comisionamiento) Debe cuidarse de manera especial la contaminación potencial
Esta etapa del ciclo de vida de los sistemas de Aire que pudiera generarse durante los trabajos de instalación de
Comprimido se puede definir como, la entrega-recepción y tuberías, instrumentos de medición y otros componentes y
puesta en marcha de los equipos y componentes, servicios de accesorios del sistema.
soporte o auxiliares e instalaciones y cuando aplica la El manejo y transportación de componentes debe quedar
automatización involucrada, bajo un enfoque de Ingeniería documentado y haber sido supervisado todo el tiempo,
planeado, documentado y administrado, con el propósito de cualquier situación que pudiera implicar maltrato, golpe o
que el usuario final reciba a plena satisfacción el sistema de contacto con productos generadores de corrosión deberá ser
Aire Comprimido e instalaciones, funcionando correctamente documentada y explicada.
en un ambiente de seguridad que cumpla con los Ya instalados los equipos del sistema y antes de iniciar las
requerimientos de diseño establecidos y las expectativas de los pruebas de funcionamiento, debe verificarse el ajuste de los
usuarios. sujetadores, tornillos, filtros, etc.
Estas actividades forman parte de las Buenas Prácticas de
Ingeniería y dan el soporte para una calificación completa y Inspección técnica
satisfactoria en una etapa posterior. Al término de la instalación, se realiza una inspección técnica
detallada, siguiendo listas de comprobación con el propósito de
Paquete documental de ingeniería asegurar todos los puntos indicados en la secuencia de
Todos los documentos generados en la etapa de Ingeniería de construcción e instalación generada previamente por el
Detalle deben estar disponibles para verificar la proveedor.
correspondencia con el paquete de documentos entregables que Esta inspección se realiza conjuntamente con el proveedor y
se recibirá durante la conclusión y entrega del sistema de Aire con el representante del usuario, especialmente del área de
Comprimido por parte del fabricante e instalador al usuario. ingeniería y mantenimiento.
El proveedor debe entregar al usuario los siguientes Pruebas de funcionamiento

documentos:
1. Una vez concluida la inspección técnica de una manera
1. Planos Arquitectónicos y de Ingenierías tal como fueron satisfactoria, se inicia la etapa de pruebas de
construidos (As built). funcionamiento, las cuales se enlistan a continuación
2. Diagramas de instalación tal como fueron construidos (As (lista enunciativa, más no limitativa):
built). 2. Presurización para detectar fugas.
3. Manuales técnicos del sistema y sus componentes. 3. Pruebas a deshumidificadores, verificación de
4. Catálogo de conceptos. funcionamiento de componentes móviles, verificación
5. Catálogos técnicos. de la temperatura en los sistemas, verificación de la
6. Fichas técnicas. reactivación de los componentes químicos.
7. Especificaciones. 4. Pruebas de filtros de aire, verificación de presión,
8. Certificados de materiales de construcción y componentes. comprobación de ausencia de fugas, pruebas de
9. Certificados de calibración de los instrumentos de integridad de filtros.
medición. 5. Red de tuberías. Las pruebas de presión en la red de
10. Resultados de pruebas, realizadas durante las etapas de tuberías se realizan antes de colocar el aislamiento
construcción e instalación del sistema (pruebas de FAT térmico, en caso de que lleve, ya que en caso de fuga
y SAT). no sería posible detectarlos en su posición de origen.
AIRE COMPRIMIDO
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6. Sistemas de control. Las pruebas de funcionamiento 4. PNO, Limpieza del Sistema de Aire Comprimido.
A son esenciales para comprobar que las variables del 5. PNO de Mantenimiento Preventivo.
funcionamiento pueden manejarse a través del sistema 6. PNO para el manejo de Desviaciones.
de control, para establecer los parámetros bajo los 7. PNO de control de cambios.
cuales el sistema operará. 8. Programa de mantenimiento.
7. Es durante la entrega-recepción y la puesta en marcha 9. Programa de calibración de los instrumentos del
del sistema de Aire Comprimido que el proveedor del Sistema de Aire Comprimido.
SISTEMAS CRÍTICOS
sistema, capacita y entrena a los futuros usuarios de los 10. Evidencia de Capacitación en Buenas Prácticas de
departamentos de ingeniería y mantenimiento Fabricación.
principalmente. 11. Evidencia de Capacitación en Operación del Sistema de
8. El personal capacitado y entrenado deberá ser evaluado Aire Comprimido.
para confirmar que la transferencia de información ha 12. Evidencia de Capacitación en Limpieza del Sistema de
sido efectiva y se documentada. Aire Comprimido.
13. Evidencia de Capacitación en Mantenimiento del
Calificación de instalación equipo.
La Calificación de instalación se ha definido como la etapa de 14. Bitácora de Registro de condiciones del Sistema de
validación en la que se demuestra que la construcción e Aire Comprimido.
instalación del Sistema de Aire Comprimido se ha realizado de 15. Evidencia del cumplimiento del programa de
acuerdo a las especificaciones de diseño previamente mantenimiento.
establecidas y se cuenta con las evidencias documentadas que 16. Lista del personal calificado en el manejo del sistema.
soportan esta demostración.
Para desarrollar las actividades de la calificación de instalación Verificación de componentes de acuerdo a los manuales
de una manera sistemática y ordenada se genera un protocolo técnicos
específico, el cual después de haber sido revisado y aprobado Esta parte de la calificación de instalación del sistema de Aire
se usara como base para emitir el reporte que incluye los Comprimido tiene como propósito verificar la instalación
resultados y las evidencias de la realización de actividades y el correcta y de acuerdo a la documentación técnica aprobada de
dictamen. cada uno de los componentes y accesorios del sistema.
La calificación de instalación se divide en dos partes Durante la verificación se generan las evidencias que servirán
principales, la parte de verificación del paquete de de soporte para aceptar el sistema y continuar con la etapa de
documentación de ingeniería y BPF y la parte correspondiente calificación de operación o para reportar desviaciones o
a la verificación física de los componentes del sistema. incumplimiento con respecto al diseño y sus especificaciones.
Las referencias principales para establecer los criterios de Con la información técnica que describe la estructura del
aceptación son los requerimientos del usuario, técnicos y Sistema de Aire Comprimido se construye una lista de
regulatorios, así como las especificaciones, cálculos, planos y verificación que incluye la descripción de cada uno de los
diagramas que forman parte del diseño aprobado del sistema. componentes y accesorios, los puntos que se verifican, el
método de verificación, los valores numéricos de medidas y
Documentación de ingeniería variables físicas que apliquen así como la especificación que
deben de cumplir.
1. Requerimientos del usuario, técnicos y regulatorios. Cada sistema Aire Comprimido es diferente, de tal manera que
2. Manual de Instalación y Operación del Sistema de Aire esta parte del protocolo tiene que ser desarrollada de manera
Comprimido especial en cada empresa y en cada sistema que vaya a ser
3. Planos de clasificación de áreas. calificado.
4. Planos de localización del Sistema de Aire Es importante mencionar que tanto en la calificación de
Comprimido (As built). instalación como la calificación de operación será muy útil la
5. Planos de recorridos de tuberías tal como fueron documentación generada en la etapa de entrega y puesta en
construidos (As built). marcha del sistema (Comisionamiento).
6. Planos de puntos de uso.
7. Planos de localización de manómetros. Calificación de operación
8. Diagramas de tuberías e instrumentación (DTI). La Calificación de operación se ha definido como la etapa de
9. Descripción del sistema de control. validación en la que se documenta la demostración de que el
10. Descripción del sistema de alarmas. Sistema de Aire Comprimido funciona de acuerdo al diseño
11. Lista de instrumentos de medición críticos. aprobado de manera consistente.
En esta calificación se realizan pruebas correspondientes a la
Documentación relacionada con BPF operación del sistema de Aire Comprimido, estas pruebas son
específicas y dependen del tipo y características del sistema y
1. Certificados de calibración de los instrumentos de sus componentes, para confirmar que funcionan adecuadamente.
medición. Las referencias principales para establecer los criterios de
2. Certificados de calidad de filtros. aceptación son las especificaciones e indicaciones señaladas en
3. PNO de Operación del Sistema de Aire Comprimido. el manual técnico del fabricante del sistema.
AIRE COMPRIMIDO
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Para desarrollar las actividades de la calificación de operación para reportar desviaciones o incumplimiento con respecto al
de una manera sistemática y ordenada se genera un protocolo desempeño y sus especificaciones. A
específico, el cual después de haber sido revisado y aprobado Estas pruebas están orientadas a evaluar la calidad del Aire
se usara como base para emitir el reporte de calificación de Comprimido y demostrar la consistencia en el funcionamiento
operación que incluye los resultados y las evidencias de la de los componentes y del sistema completo.
realización de actividades, así como el dictamen. La siguiente lista corresponde a las pruebas que forman parte
Como parte del protocolo se diseñan listas de comprobación de la calificación de desempeño:
SISTEMAS CRÍTICOS
donde se detallan las pruebas que serán realizadas, su
metodología, equipo de medición necesario, instrucciones 1. Conteo de partículas totales.
especiales, especificaciones y límites para las diferentes 2. Conteo de partículas viables.
variables que son medidas y reportadas. 3. Presión de aire.
Durante las actividades de verificación se generan las 4. Punto de rocío.
evidencias que servirán de soporte para aceptar el sistema y 5. Hidrocarburos (aceite).
continuar con la etapa de calificación de desempeño o para 6. Gases contaminantes, los cuales serán definidos
reportar desviaciones o incumplimiento con respecto al basándose en el análisis del propósito y uso del Aire
funcionamiento y sus especificaciones. Comprimido, tipo de proceso y tipo de producto en que
La siguiente es una lista enunciativa, de las verificaciones que se aplique el Aire Comprimido.
se llevan a cabo como parte de las actividades de la
calificación de operación. De manera general los criterios de aceptación para las pruebas
correspondientes a la calificación de desempeño, se encuentran
1. Verificación de Funcionamiento del Sistema de control. en las tablas específicas de cada parámetro. Las pruebas deben
2. Verificación del compresor. realizarse por triplicado y durante tres días consecutivos,
3. Verificación del Sistema de deshumidificación y obteniéndose resultados satisfactorios. La frecuencia de la
secado. calificación de desempeño debe de ser al menos cada seis
4. Verificación del Sistema de enfriamiento de aire. meses, dependiendo del análisis de riesgo correspondiente
5. Verificación de alarmas y seguridad. relacionado con el tipo de proceso y producto al que da
6. Prueba de integridad de filtros. servicio.
7. Verificación de la operación de los instrumentos de
medición. A continuación se describen las pruebas, sus especificaciones y
8. Verificación del funcionamiento de los sistemas y criterios de aceptación.
servicios que alimentan al sistema de Aire
Comprimido. Conteo de partículas totales: consiste en evaluar la cantidad de
9. Pruebas de arranque y paro. partículas > 0.5 y > 5.0 µm presentes en el Aire Comprimido y
10. Inspección general del sistema operando. compararlas con las especificaciones establecidas de acuerdo a
la clasificación de las áreas o zonas limpias, en las que se
Calificación de desempeño encuentran los puntos de uso. Se utiliza un contador de
La Calificación de desempeño se ha definido como la etapa de partículas con registro o impresión directa de datos, calibrado.
validación en que se genera la evidencia documentada de que Se deben realizar mediciones por triplicado y en tres días
el Sistema de Aire Comprimido se desempeña de acuerdo a los consecutivos. Con resultados satisfactorios.
requerimientos del usuario y al diseño aprobado, de manera El promedio debe cumplir las especificaciones señaladas en la
consistente. tabla. Si se encuentran valores individuales fuera de estos
En esta calificación se corren pruebas para demostrar que el límites debe de investigarse y encontrar la causa.
sistema genera Aire Comprimido y lo distribuye cumpliendo
con las especificaciones y criterios de aceptación establecidos Conteo de partículas viables: consiste en realizar muestreos
en el diseño para el satisfacer los requerimientos del usuario, microbiológicos para evaluar la presencia de bacterias y hongos
los técnicos y los regulatorios. en la atmosfera generada por el sistema de aire comprimido,
Para desarrollar las actividades de la calificación de después de haber sido atenuado su flujo y presión de salida.
desempeño de una manera sistemática y ordenada se genera un Se pueden realizar el monitoreo utilizando equipo de muestreo
protocolo específico, el cual después de haber sido revisado y dinámico, que mide la cantidad de aire que será evaluado o por
aprobado se usara como base para emitir el reporte de medio de exposición de placas con medios de cultivo
calificación de desempeño que incluye los resultados y las específicos para bacterias y para hongos y dispositivos
evidencias de la realización de actividades, así como el rotatorios de muestreo.
dictamen. Las placas de exposición y los dispositivos con medio de
Como parte del protocolo se diseñan cuadros de resultados cultivo de los equipos de muestreo cinético se incuban en agar
donde se documentan los resultados de las pruebas que se de soya tripticaseína de 30 a 35 °C por 72 h cuando sólo se
realizan, su metodología, equipo de medición necesario, emplee para bacterias o de 30 a 35 °C por 48 h cuando lo
instrucciones especiales, especificaciones y límites para las emplee tanto para bacterias como para hongos seguido de 20 a
diferentes variables que son medidas y reportadas. 25 °C por 72 h y se reportan los resultados.
Durante las actividades de monitoreo y medición se generan Los datos generados se reportan directamente y se calcula el
las evidencias que servirán de soporte para aceptar el sistema o promedio de cada punto muestreado.
AIRE COMPRIMIDO
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En los requisitos de usuario deberán considerarse el Contar con un sistema de mantenimiento, significa que se
A cumplimiento de lo establecido en la serie de normas ISO 8573. conservan las condiciones físicas y funcionales de cada
El promedio debe cumplir las especificaciones señaladas en la componente del sistema de Aire Comprimido de manera
tabla. Si se encuentran valores individuales fuera de estos permanente, apegándose de manera sistemática a planes y
límites debe confirmarse que no corresponden a una fuga o programas organizados, teniendo como base las
presencia de fuentes de contaminación microbiológica, si es así especificaciones técnicas de todos los componentes y
pueden incorporarse al cálculo del promedio. accesorios, los manuales del fabricante e instalador del sistema,
SISTEMAS CRÍTICOS
En caso de presencia de microorganismos fuera de límites se procedimientos, instructivos, registros y la participación de

debe realizar una sanitización especial en el área contaminada, personal capacitado y calificado para ejecutar todas las
así como de los puntos de uso, sus válvulas, cambiar los filtros actividades incluidas en dichos planes y programas. La
terminales y realizar muestreos complementarios para calificación del personal es un factor muy importante en la
confirmar que el nivel de contaminación ha sido controlado. operación y conservación del sistema de aire comprimido, por
lo que es necesario que esté organizada bajo un programa de
Presión de aire. Esta prueba es considerada en línea y de capacitación, entrenamiento y evaluaciones periódicas del
monitoreo continuo. Se toman los valores expresado por los personal relacionado, directa o indirectamente con este sistema.
manómetros calibrados, que se encuentran en los diferentes Esto asegura, junto con la supervisión continua, que el sistema
puntos del sistema y su línea de distribución. Los valores se es operado, monitoreado y mantenido solo por personal experto
registran en los documentos correspondientes y se comprueban en el tema.
que cumplan con los valores especificados y aprobados del Teniendo el sistema controlado y con el estatus de calificado el
sistema, de acuerdo a los requerimientos del usuario. monitoreo de sus parámetros operativos, de desempeño y de su
utilización se vuelve esencial. Este monitoreo depende en gran
Punto de rocío. Para llevar a cabo esta prueba se utilizan medida de los datos que generan los instrumentos de medición,
termohigrómetros calibrados, corriéndose monitorios por los cuales deberán de ser calibrados bajo un programa estricto.
triplicado en tres días consecutivos, comprobándose que se Los datos que generan las pruebas de laboratorio que miden el
cumplen los valores indicados en la tabla. En caso de no desempeño del sistema y los datos de los usuarios de las áreas
cumplir estos criterios deberá hacerse la investigación de proceso, de las áreas a las que da servicio el sistema de Aire
correspondiente y tomar las medidas correctivas que lleven al Comprimido, también son parte fundamental del monitoreo.
sistema a cumplir nuevamente con la especificación. Los elementos considerados consumibles del sistema, como
filtros, pre-filtros, así como las partes móviles que se
Hidrocarburos (aceite). Se corren dos pruebas, la de deterioran con el uso continuo, como bandas y empaques,
hidrocarburos totales y la de hidrocarburos volátiles. La de tienen que ser reemplazados periódicamente basándose en la
hidrocarburos totales se corre utilizando tubos indicadores, la inspección periódica del sistema y de estos elementos de
prueba de hidrocarburos volátiles se corre utilizando manera especial.
cromatografía de gases con detector de ionización de flama. Cuando se planean modificaciones al diseño, estructura o
modelo de los componentes mayores, procede organizar y
Gases contaminantes. Se pueden correr pruebas para detectar documentar el proyecto a través del sistema de control de
gases extraños considerados contaminantes como, CO, COr, cambios de la empresa, de tal manera que el ciclo de vida del
SO2 y NOx. Todos estos pueden ser monitoreados con tubos sistema Aire Comprimido se inicia nuevamente.
detectores de gases. El sistema de CAPA de la empresa debe ser aplicado cuando
se lleguen a presentar fallas o desviaciones que impacten la
Mantenimiento del estado validado operación o desempeño del sistema. La documentación relativa
Para considerar confiable un Sistema de Aire Comprimido a las fallas o desviaciones, las acciones correctivas y los planes
debe primero, haber sido diseñado correctamente, construido e de prevención deben de estar disponibles y completos para dar
instalado de acuerdo al diseño aprobado, entregado y apoyo y soporte al mantenimiento del estado validado del
verificado de manera completa y oportuna, haber sido sistema.
calificado antes de iniciar su utilización en procesos y sobre La evaluación periódica que se realiza con las auditorias
todo, haber desarrollado la infraestructura técnica, de técnicas internas, permite tener un diagnóstico oportuno del
administración y de documentación que permita mantener y estado que guarda la estructura técnica, operativa y
evidenciar el funcionamiento del sistema de manera administrativa del sistema, a partir del cual se toman las
permanente y confiable de tal manera que se asegure su aptitud acciones correspondientes para conservar el sistema de aire
para el uso previsto continuamente. comprimido.
AIRE COMPRIMIDO

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ESTERILIZACIÓN 2. La identificación de parámetros del proceso de

esterilización que conservan las propiedades inherentes E
INTRODUCCIÓN de los materiales y que aun así inactivan o eliminan
microorganismos.
Este capítulo aplica a los procesos que podrán emplearse, sin 3. La demostración de que el proceso y el equipo de
ser limitativo, en la obtención de materiales, componentes, esterilización son capaces de operar dentro de los
materias primas, dispositivos médicos y productos
SISTEMAS CRÍTICOS
parámetros descritos y que se corresponden con
farmacéuticos que requieran ser estériles, incluyendo los mediciones independientes de los parámetros críticos.
artículos necesarios para llevar a cabo las pruebas analíticas. 4. El desempeño de estudios repetidos que son
Así mismo, se presentarán las operaciones unitarias para representativos del intervalo de operación del equipo y
obtener productos que deban ser estériles. Los procesos de que emplean productos reales o simulados. Siempre
fabricación deberán seguir las Buenas Prácticas de Fabricación que sea posible, se recomienda utilizar indicadores
vigentes en nuestro país. biológicos para la correlación entre los parámetros
Entendemos por esterilidad la ausencia de todo organismo físicos medidos y la letalidad esperada.
viable (bacterias, levaduras y hongos filamentosos). Esta es 5. El mantenimiento y monitoreo del proceso validado
una condición absoluta. Sin embargo la esterilidad no puede durante la operación de rutina.
ser demostrada con respecto a los insumos para la salud y a 6. La garantía de que la biocarga (número y tipo) de los
otros artículos debido a las limitaciones inherentes de la prueba materiales es aceptable y que se mantiene dentro de los
que se utiliza (véase MGA 0381, Esterilidad). Por lo tanto, la límites predeterminados durante la operación de rutina.
esterilidad se define en términos probabilísticos que establecen
un nivel aceptable de riesgo. Cuando hablamos de la Este capítulo contiene información general que proporciona
probabilidad estadística de ser estéril cada unidad de un lote una visión de los conceptos y principios que conlleva la
de producto, entonces hablamos del Nivel de Aseguramiento esterilización (mediante varias modalidades), de insumos que
de la Esterilidad (NAE) del proceso. deben ser estériles. Asimismo, incluye información sobre
Actualmente, los productos estériles pueden obtenerse a través procesos de esterilización de respaldo que se utilizan en la
de dos metodologías básicas: Esterilización Terminal (ET) y preparación de dichos insumos.
Procesamiento Aséptico (PA). Cada una de estas dos
metodologías tiene sus procedimientos para llegar al objetivo
común que es la obtención de un producto libre de
contaminantes viables.
La esterilidad se puede lograr únicamente mediante el uso de TÉRMINOS Y DEFINICIONES
un proceso de esterilización validado de conformidad con las
Agua sobrecalentada: Agua en estado líquido a una
buenas prácticas de fabricación vigentes, y no se puede
temperatura mayor a su temperatura de ebullición, la cual
demostrar basándose únicamente en análisis de esterilidad. Es
requiere de sobrepresión para mantener tal estado.
indispensable investigar a fondo el efecto del método de
esterilización seleccionado sobre el producto, incluyendo su
Biocarga: Número recuperado de unidades formadoras de
envase primario, para asegurar su efectividad, así como la
colonias (UFC) por unidad.
integridad del producto. El procedimiento de esterilización
deberá validarse antes de ser implementado para la producción
Calor húmedo: Vapor, mezclas de aire-vapor, y agua
comercial. La ET deberá ser el método de elección en aquellos
sobrecalentada empleados para esterilización.
casos en los que el producto involucrado lo resista. El proceso
de ET que deberá estar validado y mantenido bajo control, nos
Cámara: Componente primario de un esterilizador que
permite alcanzar el NAE que sea requerido con base en un
contiene los artículos que serán esterilizados. La cámara es un
análisis de riesgo.
recipiente tasado por presión.
El PA requiere que cada una de las operaciones unitarias
involucradas sean validadas independientemente y esta
Carga de artículos duros/porosos (AD/P): Consiste de
validación deberá confirmarse en conjunto. Solamente deberá
artículos en los cuales la carga biológica es inactivada por el
ser aplicado a aquellos productos que no resistan la ET. El
contacto directo con el vapor saturado. Ejemplos de estas
NAE proporcionado por el PA depende principalmente de dos
cargas son aquellas que contiene los siguientes tipos de
factores: la tecnología empleada y del personal calificado que
artículos: Filtros, tapones, tuberías (mangueras), trapeadores,
lleva a cabo el proceso.
uniformes, equipo de limpieza o piezas de cambio en las
Los principios básicos para el control de los procesos de
máquinas.
esterilización, entre los que se incluyen el desarrollo, la
validación y la garantía continua de cada método, son los
Carga líquida: Una carga consistente en contenedores
siguientes:
cerrados de líquidos acuosos. La esterilización del contenido
1. El desarrollo del proceso de esterilización que incluye del contenedor se alcanza mediante la transferencia de energía
la evaluación de la estabilidad y compatibilidad de a través del contenedor hacia el líquido acuoso.
materiales, la integridad del envase, la biocarga
esperada previa a la esterilización, los parámetros de Carga máxima: Cantidad o masa máxima de artículos
control del método del equipo, entre otros. permitida en una carga del esterilizador.
ESTERILIZACIÓN
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Carga mínima: Cantidad o masa mínima de artículos tiempo. La razón letal es calculada para una temperatura de
T permitida en una carga del esterilizador. referencia (Tref) y el valor z usado en la ecuación:
Carga mixta: Carga que contiene distintos tipos de artículos

que representan varios retos de esterilización. Por ejemplo, Fase de calentamiento: Fase de un ciclo de esterilización que
algunos artículos en la carga pueden presentar retos con ocurre inmediatamente antes de la fase de exposición. Los
respecto a la eliminación del aire, en tanto que otros presentan parámetros del proceso se desarrollan para esta fase de modo
SISTEMAS CRÍTICOS
un reto debido a su masa. tal que cumplan los requisitos de usuario aplicables para el
acondicionamiento de la carga (por ejemplo, remoción de aire
Ciclo de esterilización: Secuencia de parámetros de operación y precalentamiento).
definidos (por ejemplo, tiempo, temperatura y presión) y las
condiciones requeridas para dar por resultado un artículo Fase de enfriamiento: Fase de un ciclo de esterilización que
estéril. ocurre después de completada la fase de exposición. Los
parámetros de la fase de enfriamiento se definen típicamente a
Corrida de esterilización: Ejecución de un ciclo de modo de cumplir los requisitos del usuario aplicables para el
esterilización. enfriamiento y secado de la carga.
Curva de supervivencia: Representación gráfica de la Fase de exposición: Fase del ciclo de esterilización a lo largo
inactivación de una población de microorganismos con una de la cual la cual se mantienen los parámetros de operación
exposición creciente a un agente microbicida bajo condiciones dentro de los rangos definidos durante el tiempo (tiempo de
establecidas. exposición o periodo de residencia) y temperatura
determinados como los necesarios para alcanzar la letalidad
Detector de aire: Instrumento que detecta la presencia de aire deseada.
en la cámara y que puede estar acoplado a un esterilizador.
Fracción de sequedad: Medida absoluta del calor latente
Distribución de temperatura: Medición de la temperatura del actual de una muestra de vapor relativa al calor latente teórico
medio de calentamiento a través de toda la zona de carga del del vapor saturado.
esterilizador.
Indicador biológico: Microorganismo viable de una cepa pura
Esterilización terminal: Proceso en el que el producto y específica inoculado sobre un soporte y contenido dentro de
esterilizado una vez que se encuentra en su sistema de barrera un empaque primario, listo para su uso, con una resistencia
estéril. conocida a un proceso de esterilización específico, bajo
condiciones definidas.
Esterilización: Proceso empleado para dar por resultado un
producto libre de organismos viables, con un NAE Indicador químico: Sistema de prueba que revela cambio en
especificado. una o más variables predefinidas del proceso, basándose en un
cambio químico o físico resultante de la exposición a un
Evaluaciones de la aplicabilidad del sistema: Evaluaciones proceso.
físicas (por ejemplo, integridad de la cámara o eliminación del
aire) las cuales se llevan a cabo con una secuencia programada Integrador químico: Artefacto diseñado para reaccionar de
a fin de demostrar el control continuo del sistema de un manera cuantitativa a múltiples variables de esterilización
esterilizador. (típicamente, tiempo y temperatura, y en algunos casos,
humedad).
F Biológico: Término utilizado para describir la letalidad
propuesta medida en términos de la muerte real de los Liberación paramétrica: Sistema de liberación de la
microorganismos sobre un sistema de reto de indicadores esterilidad basado en el control, monitoreo, documentación,
biológicos. El valor de F Biológico es calculado como: revisión de los registros de los lotes efectivos de un ciclo de
proceso de esterilización validado en lugar de procedimientos
de liberación basados en la prueba de esterilidad sobre el
producto final.
Donde:
DT = El valor del sistema de indicadores biológicos a la Métodos de fracción negativa: Métodos de fracción negativa
temperatura de referencia (T). emplean la población inicial de un indicador biológico (N0), y
RL = La reducción logarítmica real (log N0 - log NF) de la los datos del rango cuantal para trazar una línea de dos puntos
población de indicadores biológica durante el ciclo. a partir de la cual se puede determinar el valor DT. El rango
cuantal es el periodo de exposición a lo largo del cual un
FFísico: Término utilizado para describir la letalidad conjunto de unidades de prueba duplicadas muestran una
proporcionada calculada en los parámetros físicos del ciclo. El respuesta dicótoma algunas positivas para crecimiento, y el
FFísico es el valor de la integración de la razón letal (L) sobre el resto negativas para crecimiento.
TÉRMINOS Y DEFINICIONES
_________________________________________________________________
Microorganismos termorresistentes: Aquellos Proceso de desplazamiento por gravedad: Proceso de

microorganismos cuyas formas esporuladas presentan una esterilización basado en el principio de que el aire frío dentro T
resistencia mayor a los efectos térmicos. de una cámara es más pesado que el vapor que entra a esta y
por consiguiente se desplazará hacia la parte baja de la cámara.
NAE: Número que expresa la probabilidad de ocurrencia de Conforme el vapor va entrando a la cámara, el aire es
una unidad no estéril una vez que esta ha sido expuesta al expulsado por este a través del drenaje inferior y sale, junto
SISTEMAS CRÍTICOS
proceso de esterilización. En la industria farmacéutica, se con el condensado, a través de una trampa de vapor.
espera un punto final del diseño mejor que o igual a la
probabilidad de una unidad no estéril en un millón de Proceso de esterilización con aire a sobrepresión: Proceso
unidades, esto es, NAE ≤ 10-6. (Sinónimo: PUNE). El término de esterilización por calor húmedo que opera a una presión
PUNE o NAE es cuantitativo, pero su valor es inversamente controlada mayor a la del vapor saturado y que, típicamente,
proporcional al aseguramiento de la esterilidad que usa aire comprimido para llevar la cámara a la presión deseada.
proporciona, por ejemplo, 10-6 proporciona un mayor
aseguramiento de la esterilidad que 10-3. Proceso de mezcla vapor-aire (MVA): Proceso de
esterilización en el cual el medio de calentamiento es una
Parámetros de operación: Valores (por ejemplo tiempo, mezcla de aire y vapor, el cual se emplea típicamente para
temperatura, presión) que se controlan y/o miden, los cuales cargas de líquidos. La adición del aire da por resultado una
definen colectivamente cada fase de un ciclo de esterilización condición de sobrepresión.
(por ejemplo calentamiento, exposición, enfriamiento).
Proceso de preevacuación: Proceso de esterilización en el
cual el aire se elimina de la cámara mediante el empleo de una
Parámetros críticos: Valores que se controlan y/o se miden, y bomba de vacío u otro sistema mecánico antes del inicio de la
están ligados a la seguridad y eficacia de un producto. El fase de exposición. Este método es particularmente adecuado
incumplimiento en un parámetro crítico debe dar por resultado para aquellos artículos en la carga que pueden atrapar aire tales
el rechazo de la carga afectada. como mangueras, filtros y ensamblajes de máquinas
llenadoras.
Parámetros clave: Valores que se controlan y/o se miden, y se
usan para asegurar el continuo “estado de control” de las Proceso de vapor saturado: Proceso de esterilización
corridas de esterilización. El incumplimiento debe resultar en típicamente empleado para cargas AD/P en las que el medio
una investigación con un razonamiento documentado al esterilizante es vapor saturado.
respecto de la disposición de la carga afectada
Prueba de eliminación de aire: Prueba empleada para evaluar
Partículas totales: Es el número de partículas viables y no la eliminación del aire y la penetración del vapor en un
viables dado por unidad de volumen y/o superficie esterilizador vacío empleado para esterilizar cargas de artículos
muestreados. porosos o duros (por ejemplo, la prueba de Bowie-Dick,
DART, Cubo de Lantor, Prueba de Brown).
Penetración del calor: La prueba de penetración del calor es
una medición de temperatura que se usa para evaluar la Prueba de fugas de la cámara: Prueba realizada para evaluar
cantidad de energía que ha sido transferida a los materiales que la posible entada de aire a la cámara cuando esta se encuentra a
se esterilizarán en la carga. Para las mediciones de penetración vacío. [Sinónimo: Prueba de fuga a vacío]
del calor, los sensores deben colocarse sobre o dentro de los
Punto frío de la cámara: El o los lugares dentro de la zona de
artículos de la carga que se están evaluando.
carga en los que se obtiene la menor letalidad del proceso (F0)
y/o las menores temperaturas de distribución durante el
Probabilidad de unidad no estéril (PUNE): Número que
proceso de esterilización.
expresa la probabilidad de ocurrencia de una unidad no estéril
una vez que esta ha sido expuesta al proceso de esterilización. Punto frío del contenedor: Lugar dentro de un contenedor de
En la industria farmacéutica, se espera un punto final del líquido sellado en el que se obtiene la letalidad (F0) más baja
diseño mejor que o igual a la probabilidad de una unidad no- durante un proceso de esterilización.
estéril en un millón de unidades, esto es, PUNE ≤ 10-6.
(Sinónimo: Nivel de Aseguramiento de la Esterilidad, NAE). Razón de fuga: Es la cantidad de aire que entra a la cámara de
esterilización con respecto al tiempo obtenido al realizar una
Proceso de agua sobrecalentada: Proceso de esterilización en prueba de fugas de la cámara. La razón de fuga no debe
el cual el medio de calentamiento es agua sobrecalentada, la exceder un nivel que inhiba el proceso de esterilización
cual se recircula continuamente bajo sobrepresión con aire. durante las etapas de remoción del aire o de secado al vacío.
Este proceso requiere la sobrepresión con aire para mantener el
agua en estado líquido. (Sinónimos: cascada de agua, proceso Resistómetro: Equipo de prueba diseñado para proporcionar
de aspersión de agua, proceso de inmersión en agua, proceso combinaciones definidas de las variables físicas y/o químicas
de sumersión en agua, proceso de lluvia de agua, proceso de de un proceso de esterilización. A los resistómetros se les
vapor-aire-agua). llamó formalmente “cámaras resistométricas de evaluación
TÉRMINOS Y DEFINICIONES
_________________________________________________________________
de indicadores biológicos” (REIB). El resistómetro se usa

E primordialmente en el laboratorio para la determinación de los
valores D y z. F0: Término empleado cuando para el cálculo de la
letalidad equivalente se usan las condiciones
Sistema de reto indicador biológico (IB): Sistema de prueba específicas de referencia de Tref = 121.1 °C y z= 10 °C.
que contiene microorganismos viables de una cepa pura, Por ejemplo, cuando el valor z de un IB es 10 °C, un
especificada, que presenta una resistencia definida a un ciclo con un F(T=121.1 °C, z=10 °C), es decir, F0, es igual a
SISTEMAS CRÍTICOS
proceso específico de esterilización. [Sinónimos: Sistema IB 8 min, este es equivalente (en términos de la letalidad
de reto, Reto microbiano, Sistema de Reto Microbiológico] entregada) a un ciclo de onda cuadrada de 8 min a
121.1 °C. Un ciclo de onda cuadrada que tenga una
Sonda de penetración: Sonda colocada en contacto con el exposición de 25.9 min a 116 °C también entregaría un
artículo de la carga o dentro de un contenedor de líquido para F0 de 8 min.
medir la temperatura del artículo o líquido de la carga. Nota: La temperatura de referencia para el cálculo del
F0 es 121.1 °C, lo cual es el equivalente matemático
Tiempo de calentamiento de la cámara: Tiempo transcurrido aproximado de 250 °F. Para fines prácticos se empleará
medido desde la entrada del vapor en la fase de calentamiento la temperatura de 121 °C en el resto de este capítulo.
(inicio del vapor), hasta el punto en el que la temperatura del FBiológico: Término empleado para describir la letalidad
medio de calentamiento dentro de la cámara alcanza la real entregada con base en la muerte real de los
temperatura prefijada del ciclo. microorganismos en o dentro de un sistema de reto IB.
El valor FBiológico se calcula como DT × RL, donde DT es el
Tiempo de equilibrio: Periodo de tiempo que transcurre entre valor D del sistema IB a la temperatura de referencia (T),
el alcance de la temperatura mínima de exposición en el punto y RL es la reducción real logarítmica (Log N0 - Log NF)
de referencia de la cámara (típicamente el drenaje) y la de la población del IB obtenida durante el ciclo.
obtención de esa temperatura en todos los puntos dentro de la
carga. Este periodo es un indicativo de la capacidad de Valor z: Número de grados de cambio de temperatura
eliminar el aire y calentar las unidades de producto necesario para cambiar el valor D en un factor de 10. El valor z
adecuadamente; como consecuencia, este solo es evaluado permite la integración de los efectos letales del calor conforme
correctamente mediante la colocación de sensores en cargas de cambia la temperatura durante las fases de calentamiento y
materiales porosos/duros. enfriamiento en un ciclo de esterilización.
Valor de sequedad: Cantidad adimensional de prueba Vapor puro: Vapor cuyo condesado cumple con la
desarrollada para estimar la fracción de sequedad. especificación farmacopeica del Agua para la fabricación de
inyectables.
Valor D: Tiempo en minutos requerido para lograr la
reducción de un logaritmo o un 90 % de la población Vapor saturado: Vapor cuya presión y temperatura
microbiana específica empleada como indicador biológico a corresponden a la curva de vaporización del agua. Se
una condición letal específica de temperatura. encuentra en estado de equilibrio entre las fases gaseosa y
líquida, sin acarreo de agua líquida (Sinónimo: Vapor saturado
Valor DT: Tiempo en minutos requerido para obtener una seco).
reducción del 90 %, o un logaritmo, de la población de
microorganismos usados como indicador biológico bajo Vapor sobrecalentado: Vapor, cuya temperatura a una
condiciones letales especificadas. Para esterilización por presión dada, es mayor a la indicada por la curva de equilibrio
vapor, el valor D debe estar siempre especificado con una de la vaporización del agua.
temperatura de referencia, DT.
Por ejemplo, un IB con un D121 °C = 1.4 min requiere 1.4 min Zona de carga: Área dentro de la cámara de esterilización en
de exposición a 121 °C para reducir su población en un la cual se pueden colocar los materiales a esterilizarse.
logaritmo.
Valor F (factor de letalidad): Medida de la efectividad de la

esterilización. FTref,z es la letalidad equivalente calculada ESTERILIZACIÓN DE INSUMOS
(empleando un valor z específico), en término de minutos a
una temperatura de referencia (Tref) entregada a una unidad PARA LA SALUD
de producto por un ciclo de esterilización. ANTECEDENTES Y ALCANCE
F Físico: Término empleado para describir la letalidad I. Esterilizacion Terminal (ET)

entregada calculada sobre los parámetros físicos del Consiste en someter un producto que ya se encuentra en su
ciclo. El valor F Físico es la integración de la razón letal envase primario, y que se ha llenado en un ambiente
(L) con respecto al tiempo. La razón letal se calcula controlado a fin de disminuir la biocarga y partículas, a un
para una temperatura y un valor z de referencia proceso de esterilización, el cual puede llevarse a cabo
mediante la ecuación: mediante la exposición a:
ESTERILIZACIÓN DE INSUMOS PARA LA SALUD

_________________________________________________________________
Calor húmedo. I. ESTERILIZACIÓN TERMINAL

Radiación ionizante. I
Gases esterilizantes. ANTECEDENTES Y ALCANCE
Esta sección contiene capítulos específicos para cada proceso
Para estos tres procesos, los factores más importantes son los de esterilización estableciendo recomendaciones para cada
siguientes: modalidad de esterilización:
SISTEMAS CRÍTICOS
1. Control de la biocarga en el producto que ingresa al 1. Esterilización con vapor de agua por contacto directo
proceso de ET. Incluye también la demostración de la 2. Esterilización con calor húmedo de líquidos acuosos
ausencia de microorganismos resistentes en la flora 3. Esterilización de líquidos por filtración
propia del proceso de fabricación hasta el envase 4. Esterilización con fase líquida
primario; y para el caso de las preparaciones 5. Esterilización con gases
parenterales, la ausencia de endotoxinas bacterianas, 6. Esterilización con calor seco
así como de las bacterias que las producen. 7. Esterilización con radiación
2. Desarrollo de los ciclos de ET adecuados para la 8. Esterilización en fase gaseosa
obtención del producto estéril, y su correspondiente 9. Esterilización de gases por filtración.
validación, de acuerdo a los criterios que se presentarán 10. Nuevos métodos de esterilización.
más adelante en la sección correspondiente a cada 11. Métodos de esterilización In situ.
proceso de ET.
ESTABLECIMIENTO Y JUSTIFICACIÓN DE PROCESOS
Estos procesos deben ser capaces de proporcionar un DE ESTERILIZACIÓN QUE SE BASAN EN
NAE ≥ 1 × 10-6, valores menores a éste deberán ser INACTIVACIÓN MICROBIOLÓGICA
justificados; además, no producir ningún daño al producto, ya
sea en su envase primario o en cualquiera de sus características Los artículos destinados a ser estériles deben alcanzar una
de calidad, incluida la estabilidad del mismo. probabilidad de una unidad no estéril de ≤ 10-6, es decir, una
probabilidad menor o igual a uno en un millón de que se encuentre
II. Proceso Aséptico (PA) presente una biocarga de microorganismos viables. (Nota: esto
La ET es el procedimiento de elección para el logro de la también se conoce como Nivel de Aseguramiento de Esterilidad.
El término Probabilidad de una unidad no estéril se usa a lo largo
esterilidad de los productos que deben ser estériles, pero no
de este capítulo debido a que es descriptiva y sustancialmente fácil
todos ellos resisten las condiciones de ésta. Debido a esta
de entender). Esta probabilidad de una unidad no estéril se puede
situación se ha desarrollado el Procesamiento Aséptico, cuya conseguir equilibrando el efecto del método sobre los materiales
finalidad es lograr y mantener la esterilidad de este grupo de con la destrucción de la biocarga (véase la figura 1). En la
productos. Éste implica una cantidad mucho mayor de actualidad se utilizan tres métodos: sobremuerte (overkill),
variables que deben ser controladas, a fin de asegurar su indicador biológico/biocarga y métodos basados en la biocarga.
efectividad, razón por la cual, también lleva implícita una Estos métodos se describen en mayor detalle más adelante.
mayor cantidad de riesgos, por lo que se requiere un control de Independientemente del método seleccionado, el objetivo es una
proceso mucho más estricto aún que la ET. El PA solo puede Probabilidad de Una Unidad No Estéril máxima para la biocarga
aplicarse a productos que no resistan la ET. Este se compone de ≤10-6. El método de sobremuerte es el método más simple de
de varias etapas que deben llevarse a cabo bajo condiciones establecer, pero el de mayor impacto sobre los materiales. El
asépticas, las cuales aseguren que la posible contaminación método basado en la biocarga es el que requiere un mayor control
sobre el método, pero somete a los materiales a las condiciones de
microbiana y/o de partículas no viables que pudiera ingresar al
menor estrés. La confianza en la letalidad del proceso es la misma,
producto y/o sus componentes, incluyendo su envase primario,
independientemente del método usado.
estén bajo estricto control y, por consiguiente impidan su
ingreso por cualquier vía.
Desde el diseño del PA, deben aplicarse los principios de
gestión de riesgos, con la finalidad de asegurar que se ha
conseguido un NAE aceptable.
Las pruebas de esterilidad aplicadas a los productos fabricados
con la tecnología actual de PA no pueden proporcionar una
evaluación suficiente. El método de monitoreo de unidades
individuales usado actualmente para las simulaciones de
proceso no ha mostrado una correlación directa con productos
terminados contaminados. Las pruebas destructivas de
esterilidad para producto terminado se pueden aplicar
solamente al examen de un porcentaje muy pequeño de un lote
y, por tanto, sólo son capaces de detectar lotes con un número Figura 1. Comparación básica de varios métodos
muy alto de unidades contaminadas. de validación.
I. ESTERILIZACIÓN TERMINAL
_________________________________________________________________
Para artículos que no se ven esencialmente afectados por el (condensación) tales como H2O2, plasma de H2O2 y ácido
I proceso de esterilización, se prefiere el método de sobremuerte peracético, debido a la naturaleza bifásica de los materiales. La
debido a su simplicidad. La esterilización por sobremuerte se esterilización con radiación y por filtración se validan usando
puede definir como un método en el que la destrucción de una métodos únicos. Estos procesos se validan a través de métodos
concentración de un microorganismo resistente sustenta la que difieren de los presentados en este capítulo introductorio.]
destrucción de biocarga presente en el procesamiento de rutina
razonablemente prevista. Dicho objetivo se puede demostrar
SISTEMAS CRÍTICOS
consiguiendo una letalidad mínima definida; una serie de

condiciones del método definidas; o una confirmación de
reducción logarítmica mínima de un indicador biológico
resistente. Cuando exista la posibilidad de que los artículos se
dañen debido a la exposición prolongada al proceso de
esterilización, no sería factible el uso de un método de
sobremuerte. En estos casos, la demostración de la efectividad
del ciclo de esterilización requiere no sólo de información
sobre las condiciones propias del método, sino también
conocimiento sobre la resistencia y el control de la población
de la biocarga del material. Este método se usa ampliamente
para la esterilización terminal de soluciones termolábiles y
medios de laboratorio. Esta estrategia de esterilización recibe
el nombre alternativo de método de indicador
biológico/biocarga o método combinado en el que se puede
usar la destrucción incompleta (o destrucción de una población Figura 2. Representación gráfica del valor D.
modesta) de un indicador biológico resistente para demostrar
la capacidad del método para destruir la biocarga presente de El valor D no es un atributo inherente solamente de los
manera confiable. Esto se logra usando conocimientos microorganismos, por lo que se debe tomar en cuenta la
detallados de la biocarga y de las poblaciones del indicador influencia de otros factores, tales como sustratos, matriz,
biológico y su resistencia relativa. medios de recuperación y metodología de prueba, al
El método basado en la biocarga se usa cuando la estabilidad determinar el valor D. La resistencia de un indicador biológico
del material es limitada o cuando no se encuentran se define para el indicador como un sistema. La evaluación y
microorganismos indicadores biológicos adecuados comparación exacta entre valores D requiere la estandarización
disponibles para su uso con el proceso de esterilización. Por lo de métodos de prueba. Para evaluar adecuadamente la
general, la esterilización por radiación se valida usando el efectividad de un proceso de esterilización, el analista debe
método basado en la biocarga. El método basado en la evaluar la resistencia de la biocarga por la vía experimental o
biocarga se puede definir como el método en el que se evalúan mediante investigación en la literatura disponible.
muestras de biocarga del material de manera rutinaria para La curva de muerte para microorganismos sometidos a un
determinar su resistencia al proceso de esterilización y que se proceso de esterilización está compuesta por tres regiones
puede utilizar para demostrar la efectividad del proceso. El distintas (véase la figura 3):
monitoreo de rutina de la población de la biocarga y su
resistencia al proceso de esterilización es obligatorio. 1. Región de curva de supervivencia. En esta región se
La esterilización de líquidos y gases por filtración difiere de pueden recuperar y contar microorganismos viables
otras modalidades de esterilización puesto que se basa en la para determinar la pendiente de la curva de muerte. La
eliminación de microorganismos del fluido más que en la primera sección de la curva de muerte se puede trazar
inactivación por medios químicos o físicos. usando recuentos de microorganismos sobrevivientes
en periodos cortos de exposición hasta el punto donde
Valor D y resistencia microbiana la población sea de aproximadamente 10 UFC.
El valor D es el tiempo (por lo regular en minutos) o dosis de 2. Región de fracción negativa. En esta región se usan
radiación (por lo general en kGy) requeridos para reducir la estudios repetidos con múltiples indicadores biológicos
población microbiana en un 90 % o un ciclo de 1 log10 (es para estimar la pendiente. Esto puede extender la
decir, a una fracción de supervivencia de 1/10) y se debe porción demostrable de la curva de muerte hasta
asociar con las condiciones letales específicas en las que se aproximadamente 10-2 a 10-3.
determinó (véase la figura 2). Para vapor de agua y calor seco, 3. Región estimada. En esta región, la curva de velocidad
el valor D es una función de la temperatura. En esterilización de muerte establecida por el método de curva de
con gas (óxido de etileno, ClO2 o O3), los valores D son una supervivencia o de fracción negativa se extrapola a la
función de la concentración química, de la humedad relativa y Probabilidad de Una Unidad No Estéril deseada. Por
de la temperatura. De manera similar, para la esterilización con debajo de 10-3 se asume que la curva de muerte es
químicos líquidos, el valor D es una función de la temperatura lineal y se ilustra en la figura 3 con la línea discontinua
y de la concentración del esterilizante. [Nota: resulta complejo más allá del punto que asume que la muerte de
determinar el valor D para sistemas de vapores químicos microorganismos continúa a la misma velocidad.
I. ESTERILIZACIÓN TERMINAL
_________________________________________________________________
Los analistas deben conocer la resistencia que presenta el

indicador biológico al proceso para asegurar un entendimiento M
apropiado de la respuesta del organismo al proceso. Resulta
igualmente importante contar con conocimientos sobre la
biocarga presente durante el uso rutinario del proceso de
esterilización y su posible resistencia al proceso seleccionado.
SISTEMAS CRÍTICOS
Datos biológicos y físicos
El indicador biológico, cuando se utiliza, representa un medio
conveniente para simplificar el esfuerzo que conlleva validar la
esterilización. Los indicadores biológicos por lo general son
esporas bacterianas que han desarrollado resistencia al proceso
de esterilización que se está evaluando. Cuando se suministran
en forma de esporas (sobre un sustrato o como una suspensión)
con una población inicial y resistencia conocidas, su respuesta
al método se puede correlacionar con las condiciones físicas
medidas. Se prefieren las esporas como indicadores biológicos
debido a que su resistencia y población son predecibles y
Figura 3. Curva de muerte que presenta las diversas regiones. estables cuando se manipulan, almacenan y usan conforme a lo
recomendado.
Conforme a lo indicado anteriormente, el objetivo del proceso Las esporas se pueden colocar en la carga de esterilización en
de esterilización es la inactivación de la biocarga sin afectar de lugares en los que no sea posible obtener fácilmente
manera adversa los atributos de calidad del producto. La mediciones de parámetros físicos tales como temperatura o
demostración de la letalidad de un proceso de esterilización en concentración de gas (por ejemplo, dentro de lúmenes de
una operación de rutina se basa en diferencias en la resistencia agujas, jeringas y ampollas) o en los que la medición pudiera
y la población relativas de la biocarga con respecto al alterar las condiciones entregadas (por ejemplo, muestreo del
indicador biológico (véase la figura 4). Cuando se emplea el gas letal). El indicador biológico ofrece un medio para evaluar
método de sobremuerte, los controles de biocarga pueden ser directamente el efecto esterilizante del método de una manera
menos rigurosos. que no sería posible conseguir por mediciones físicas. Debe
existir una correlación razonable entre la medición física
basada en letalidad y los datos de inactivación biológica de un
proceso de esterilización. Cuando no exista correlación, se
deberá considerar llevar a cabo una investigación.
MONITOREO DE LA BIOCARGA
INTRODUCCIÓN
El monitoreo de la biocarga de los componentes y productos

farmacéuticos durante el proceso es un elemento esencial del
programa general de control de contaminación para un
apropiado control del proceso de esterilización. El monitoreo
de la biocarga debe estar diseñado para recuperar un amplio
rango de microorganismos cuya presencia en el material en
proceso sea factible. Los procesos de esterilización se
implementan con objeto de eliminar la biocarga en los
materiales y los productos, asegurando un control de proceso
Figura 4. Resistencia y población relativas de una biocarga de adecuado y la seguridad del usuario final.
microorganismos y un indicador biológico típicos. La biocarga constituye un riesgo potencial para el paciente, no
sólo debido a que el proceso de esterilización podría no ser
La validación de los procesos de esterilización vincula completamente efectivo, sino también después del
mediciones físicas con el desempeño del indicador biológico procesamiento, dada la posible presencia de materiales
para establecer la letalidad del método. (Nota: en la residuales tales como alérgenos, endotoxinas y exotoxinas.
esterilización con radiación, la respuesta de la biocarga se Asimismo, puede tener un impacto adverso en la calidad y
vincula con mediciones de dosis de irradiación física). El estabilidad del producto. Por lo tanto, aunque la biocarga
conocimiento de la efectividad del método junto con los puede abatirse de manera confiable mediante procesos de
controles de la biocarga en los materiales que se procesan, y la esterilización destructiva o eliminarse mediante procesos
información sobre la resistencia de la biocarga permiten retentivos (filtración), según se resume en las secciones
determinar la probabilidad de una unidad no estéril. siguientes, se debe evitar su proliferación antes de la
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esterilización. Los programas de control y limpieza, capacidad de eliminar la biocarga depende del tamaño y del
M sanitización y desinfección del proceso proveen medios activos número de los microorganismos de la biocarga, de la
para el control de la población de la biocarga y sustentan el distribución de tamaño de poro del filtro, de las propiedades de
muestreo, enumeración y caracterización de la biocarga la solución que se está filtrando y de los parámetros del
necesarios para asegurar la eficacia de los procesos de proceso de filtración.
esterilización.
MONITOREO Y MUESTREO
SISTEMAS CRÍTICOS
Procesos destructivos
Los procesos de esterilización destructivos, tales como Las limitaciones estadísticas y analíticas complican la
esterilización con calor seco y húmedo, se desarrollan y evaluación de la biocarga a partir de materiales líquidos y
validan para matar microorganismos. Entender cabalmente la sólidos. Muchos productos son inherentemente
biocarga tiene una importancia crítica para los aspectos de antimicrobianos, mientras que algunas formulaciones
control de calidad del programa de esterilización. Los contienen conservantes antimicrobianos; ambos aspectos
microorganismos que son más resistentes a los procesos pueden limitar la recuperación de la biocarga. Los productos
destructivos de uso más amplio son las esporas de ciertas que se encuentran fuera del intervalo de pH de
bacterias Gram positivas (cabe destacar que las esporas de aproximadamente de 4 a 9, que son fuertemente hipertónicos o
hongos filamentosos son menos resistentes a estos procesos fuertemente hipotónicos, o que tienen una baja actividad de
destructivos que las esporas bacterianas). Dadas las agua, pueden reducir el nivel de microorganismos
propiedades de resistencia de estos organismos, algunas recuperables.
especies se usan comúnmente como indicadores biológicos La recolección de múltiples muestras del mismo material a
para evaluar el desempeño de los procesos de esterilización. granel a menudo provee resultados variables debido a las
En su estado vegetativo, los microorganismos que forman diferencias temporales y espaciales en la distribución
esporas no presentan una resistencia extraordinaria a los microbiana. Las muestras a partir de componentes variados y
procesos de esterilización. de diferentes formulaciones proveerán diferentes resultados
Los procesos que se basan en la radiación ionizante son una debido a los diferentes requisitos nutricionales y de cultivo, a
excepción a los perfiles típicos de resistencia, puesto que la tensión ambiental a la que se exponen los microorganismos,
algunos microorganismos que no forman esporas presentan a los métodos de muestreo, al tamaño de la muestra, al patrón
una mayor resistencia que los formadores de esporas. La de muestreo, a la heterogeneidad de las especies y al
biocarga dentro de los materiales y productos sujetos a los desplazamiento de las poblaciones microbianas. Debido a los
procesos de radiación se evalúa como parte de las actividades desafíos técnicos relacionados con el análisis de la biocarga,
para el establecimiento de dosis y se explica más adelante en la los resultados dependerán de las variables específicas de la
sección Radiación. muestra y específicas del método al intentar recuperar, cultivar
El proceso de esterilización, el desarrollo de un entendimiento o enumerar organismos. La frecuencia del muestreo y el
cabal del proceso y su impacto microbiológico, representan tiempo de retraso máximo entre el muestreo y el análisis deben
elementos principales para poder confirmar el establecimiento establecerse basándose en datos previos.
de un nivel aceptable de garantía de esterilidad. Comprender la El análisis de la biocarga previa a la esterilización debe
cinética de inactivación de la biocarga típica, así como de otros llevarse a cabo en muestras que sean representativas de los
microorganismos de la biocarga potenciales, es crítico para una materiales producidos durante la preparación y el
implementación exitosa. El nuevo proceso debe contar con una procesamiento de rutina. La frecuencia del muestreo debe
evaluación documentada de riesgos que detalle los aspectos de establecerse basándose en los datos previos, la variabilidad
monitoreo y control. El establecimiento de un nuevo proceso conocida, el tamaño de partida, el material, el proceso y las
de esterilización requiere la evaluación de la resistencia del influencias ambientales. La biocarga debe recuperarse y
indicador biológico sugerido. enumerarse a partir de muestras que sean representativas del
material del proceso. Cuando el material se almacene en
Procesos de retención envases separados, los analistas deben considerar el análisis de
Los microorganismos que presentan una menor probabilidad muestras múltiples o compuestas. La evaluación de la biocarga
de ser retenidos mediante un proceso de esterilización por debe enfocarse en microorganismos que representen una
filtración son aquéllos con un tamaño potencialmente menor mayor preocupación para el proceso de esterilización. Los
que los poros más pequeños de la matriz del filtro. Aunque la métodos de recuento total deben considerar las propiedades del
exclusión por tamaño es un factor importante, los filtros no producto que se está evaluando y las características del proceso
retienen microorganismos únicamente mediante retención por que pudieran afectar la recuperación. Los métodos de cultivo,
tamizado. La adsorción, que retiene los microorganismos los diluyentes y la selección de medios deben basarse en
dentro de la matriz del filtro mediante fuerzas de atrapamiento experiencias previas con el proceso de fabricación y el material
o electrostáticas, también es un mecanismo de retención de prueba. Los métodos listados en el MGA 0381, Esterilidad,
importante. El control de la biocarga previa a la filtración es un pueden ser apropiados para la evaluación de la biocarga,
factor importante para la mitigación de riesgo, y resulta aunque pueden requerir la modificación de los métodos y las
particularmente cierto cuando la adsorción puede ser un calificaciones para cumplir con los requisitos de los materiales
mecanismo de retención significativo. Por lo tanto, la de prueba específicos.
_________________________________________________________________
SISTEMAS CRÍTICOS
Figura 6. Programa típico de evaluación preliminar de la biocarga.
Evaluación preliminar de la biocarga predefinidos para muchos procesos de esterilización comunes.

Los materiales y productos que se van a esterilizar deben Los analistas deben evaluar las bacterias formadoras de esporas
examinarse para determinar el nivel de la biocarga en el aisladas para determinar su valor D de resistencia a procesos de
artículo. Determinar el nivel de la población microbiana es un esterilización letales específicos y asegurar así la validez del
elemento esencial para asegurar la eficacia del proceso. Para método de esterilización. Los datos disponibles describen que
procesos letales distintos a la radiación, la presencia de bacterias, hongos filamentosos y especies de levaduras aislados
formadores de esporas Gram positivas presentan el mayor médica y ambientalmente carecen de resistencia a los métodos de
potencial de supervivencia. esterilización usados más comunes, por lo que repetir dichos
La resistencia potencial de la biocarga al proceso de estudios de resistencia podría tener únicamente un valor limitado
esterilización específico es un aspecto importante a considerar para los analistas.
y se puede evaluar mediante un proceso de selección. Los
microorganismos aislados que se identifican como bacilos
Radiación
Gram negativos tienen el potencial de ocasionar altos niveles
La esterilización mediante procesos de radiación se basa en la
de endotoxinas. La figura 6 ilustra un posible programa de
biocarga del material preesterilizado. Los analistas
evaluación preliminar de la biocarga.
comúnmente emplean procesos de esterilización basados en la
Procesos destructivos (excepto radiación) biocarga conforme a lo descrito en la norma AAMI/ISO
Los microorganismos se pueden recuperar después de la 11137. Para asegurar una constante garantía de esterilidad, se
exposición a la selección por calor o a un golpe a 100 °C, con lo debe controlar la variabilidad de la biocarga entre lotes. Se
que se elimina las células vegetativas y se activa el proceso de deben recolectar y analizar datos para materias primas,
germinación en las bacterias formadoras de esporas. El tratamiento productos intermedios y/o productos, a fin de asegurar el
por choque térmico es un medio efectivo para reducir la cantidad control del proceso. La norma AAMI/ISO 11137 provee
de microorganismos de la biocarga que se van a evaluar debido a información detallada sobre las prácticas de esterilización
que los formadores de esporas son los más resistentes a todos los con radiación, lo cual incluye el desarrollo del ciclo, los
procesos letales distintos a la radiación. La selección por calor métodos de validación y las metodologías para auditar la
elimina células vegetativas que carecen de resistencia a la dosis de radiación que incluyen expectativas para la evaluación
esterilización y promueve la germinación, facilitando así el inicial y periódica de la biocarga. La norma AAMI/ISO
aislamiento de formadores de esporas. 11737 provee pautas para establecer métodos para estimar
Los informes publicados comparan la resistencia de los los niveles de la biocarga en dispositivos médicos antes de
microorganismos recuperados con la de los indicadores biológicos la irradiación.
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Esterilización por filtración INDICADORES E INTEGRADORES

I La selección de la biocarga para los procesos de esterilización
QUÍMICOS Y FISICOQUÍMICOS
por filtración que aún no han sido sometidos a validación
formal se puede llevar a cabo pasando el material a través INTRODUCCIÓN
de un filtro con un tamaño de poro de 0.45 µm y examinando
el filtrado para detectar microorganismos viables. El interés se La realización de los procesos de esterilización se puede
centra únicamente en aquellos microorganismos que pasan por respaldar con indicadores e integradores físicos y químicos que
SISTEMAS CRÍTICOS
el filtro de 0.45 µm puesto que representan el mayor desafío indiquen la culminación del procesamiento. Éstos se
potencial para el proceso de esterilización por filtración. Se encuentran disponibles en una gran variedad de formas para su
deben evaluar contra la biocarga previa a la filtración. La uso en conjunción con muchos procesos comunes de
biocarga que representa la mayor preocupación incluye esterilización.
Pseudomonas, Brevundimonas, Ralstonia y Micoplasmas. La presencia de este capítulo en la FEUM no significa que los
indicadores e integradores químicos sean requisitos primarios
Identificación de liberación para productos de liberación paramétrica. Las
Aunque puede ser útil en algunas investigaciones, no es mediciones registradas y documentadas de sistemas
necesario identificar todos los microorganismos aislados al establecidos de medición termométrica y controladores de
nivel de especies para los propósitos de evaluación de la proceso asociados (que han sido calibrados y usados tanto
biocarga previa a la esterilización. Los analistas deben realizar durante estudios de validación inicial y periódica y en
todos los trabajos de evaluación con cultivos puros, y deben producción de rutina) pueden ser consideradas sistemas
aplicar los procedimientos normales del laboratorio de primarios de liberación de producto para la liberación
microbiología para la selección y mantenimiento de cultivos paramétrica.
puros.
FUNCIONAMIENTO
Control de la biocarga
Un programa de control de la biocarga típico incluye revisar y
Los estándares de funcionamiento, dentro de lotes y entre
analizar las fuentes potenciales de contaminación, además de
lotes, de indicadores o integradores fisicoquímicos de un
un diseño del proceso adecuado y medidas preventivas y de
fabricante dado deben ser uniformes. No deben interactuar
monitoreo. El programa de control de contaminación
física o químicamente con ningún envase o producto cuando se
microbiológica debe desarrollarse con objeto de identificar y
los coloca junto al producto a esterilizar en la carga de
controlar la biocarga y para evaluar el riesgo para el producto,
esterilización, y no deben alterar la concentración, calidad, ni
basándose en una evaluación formal de modalidades de riesgo.
pureza del artículo esterilizado. Debe evaluarse la seguridad
La evaluación de riesgo de la biocarga debe resultar en el
del personal que maneja los indicadores o integradores
establecimiento de puntos de control críticos y debe tomar en
fisicoquímicos y, si es necesario, deben tomarse las
cuenta los siguientes elementos:
precauciones adecuadas.
Los atributos microbiológicos de los materiales antes de
la esterilización y el proceso de fabricación usado para los INDICADORES FISICOQUÍMICOS
materiales (si es aplicable).
Las propiedades antimicrobianas inherentes de los Los datos registrados de la ingeniería del proceso pueden ser
materiales. suplementados por la presencia de un indicador fisicoquímico
Los límites de tiempo para la ejecución del proceso. La en cada partida esterilizada. Un indicador fisicoquímico se
actividad de agua del material. define como un dispositivo que responde en forma mensurable
Las condiciones ambientales dentro de la instalación. El a uno o más parámetros críticos de esterilización.
diseño y limpieza del equipo. Se han desarrollado varias clases diferentes de indicadores,
Los procesos de sanitización, descontaminación y demás dependientes de medios químicos y fisicoquímicos, para
procesos activos de control microbiano (tales como supervisar los ciclos de esterilización. Algunos productos se
prefiltración, temperatura, pH, osmolaridad, etc.). emplean en un aparato de esterilización para controlar si el
contenido se expuso a un factor seleccionado (p. ej.
El control de la biocarga de los materiales y productos que se temperatura) del ciclo dado de esterilización, pero es posible
van a esterilizar asegurará el cumplimiento con los niveles que no muestren la duración o intensidad de dicha exposición.
requeridos por la validación del proceso de esterilización. Los indicadores químicos y fisicoquímicos se usan para
Asimismo, el control de los niveles de la biocarga de los supervisar un parámetro físico de un aparato de esterilización y
artículos que se van a esterilizar asegura que los productos pueden colocarse en la parte exterior de los envases de los
residuales (por ejemplo, alérgenos, endotoxinas y exotoxinas) artículos a esterilizar, o pueden ser distribuidos dentro de la
derivados de tal población también estén bajo control, lo cual carga de esterilización. En este último caso, se puede evaluar
es importante debido a que la detección directa de dichos hasta cierto punto el efecto del material de empaque y la
materiales representa un desafío. configuración de la carga en el parámetro seleccionado.
INDICADORES E INTEGRADORES QUÍMICOS Y FISICOQUÍMICOS

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INTEGRADORES FISICOQUÍMICOS Dado que un indicador sólo refleja la interacción de los

parámetros físicos de esterilización, no cambia con ninguno de I
Un integrador fisicoquímico se define como un dispositivo que los factores que puedan influenciar la resistencia de la carga
responde a un parámetro crítico del proceso de esterilización, microbiana en los productos a esterilizar (p. ej. resistencia de la
produciéndose un valor mensurable o cuantificable que puede progenie, población de esporas, sustrato del inoculo, aceite,
relacionarse a alguna pauta de letalidad microbiana. Los sales, proteínas, o residuos o configuraciones), todos los cuales
SISTEMAS CRÍTICOS
integradores fisicoquímicos han sido diseñados para coincidir pueden proteger un área contaminada de la penetración del
generalmente con la inactivación predecible de aquellas agente esterilizante. De ahí que estos dispositivos sean
preparaciones de esporas en indicadores biológicos que tienen inadecuados para desarrollar un ciclo. Existen, sin embargo,
alta y definida resistencia al agente esterilizador. otros factores que pueden afectar un indicador biológico, que
Los fabricantes de integradores fisicoquímicos deben podrían también afectar un integrador fisicoquímico (p. ej.
proporcionar datos para demostrar que se cumplen las pruebas configuración que interfiere en el conjunto donde se colocó el
de características de funcionamiento de los integradores integrador, variaciones en el cronometraje o en el control de
etiquetadas. Los usuarios de integradores fisicoquímicos deben temperatura, o falla del aparato para alcanzar la temperatura
verificar que los valores de medición específicos están establecida o cumplir otros requisitos).
directamente relacionados con la muerte microbiana en un Los defectos de funcionamiento del aparato de esterilización se
ciclo de esterilización validado. pueden determinar mediante indicadores y de registros de
Un integrador fisicoquímico indica si la combinación crítica de temperatura, presión, tiempo de exposición, y concentración de
parámetros físicos de un ciclo de esterilización validado se ha gas, según corresponda. El integrador sólo puede indicar
cumplido o excedido. El integrador generalmente no se emplea exposición inadecuada, adecuada, o excesiva, a una
como sustituto de un indicador biológico en el desarrollo y la combinación de parámetros críticos de esterilización. Cuando
validación de ciclos de esterilización. Si un integrador un integrador muestra exposición inadecuada a los parámetros
fisicoquímico muestra que ha logrado la combinación crítica de esterilización, es necesario comprobar si los indicadores y
de parámetros físicos de un ciclo de esterilización establecido, los registros reflejan exactamente las condiciones de
esto no debe considerarse equivalente a la inactivación de esterilización dentro de la cámara de esterilización. Las
esporas de una variedad de indicadores biológicos. Sin variaciones entre recipientes de esterilización, que podrían
embargo, el integrador fisicoquímico puede detectar si el afectar la eficiencia de un ciclo de esterilización seleccionado,
proceso de esterilización fue demasiado prolongado, si fueron se pueden detectar por exposición paralela de varios integradores
excesivas la temperatura o la concentración degas, o si hubo en distintas ubicaciones en cada carga de esterilización.
una sobreexposición a la radiación. Los integradores fisicoquímicos para esterilización por vapor
El lapso entre el tiempo mínimo y el tiempo máximo, o están diseñados para reaccionar de manera predecible ante una
cualquier otro conjunto de parámetros especificado, se asemeja combinación de parámetros físicos de esterilización:
a los límites de tiempo de supervivencia y tiempo de letalidad temperatura, presión de vapor y tiempo de exposición. Cierta
para un indicador biológico. Este lapso no debe ser más amplio desviación de uno o más de estos parámetros críticos, no
que el deseado para el parámetro especificado, pero puede ser compensada por modificación de otros parámetros, causa que el
menor si el fabricante puede lograr características de integrador indique falla para alcanzar los límites prefijados de
funcionamiento reproducibles con un intervalo menor. Incluso integración.
cuando se utiliza un aparato de esterilización con un Los integradores fisicoquímicos para esterilización por óxido
rendimiento uniforme, pueden ocurrir casos donde las de etileno siguen los mismos principios generales de diseño que
características de funcionamiento del integrador difieren de las los integradores para esterilización por vapor, pero con el fin de
declaradas en la etiqueta. Esto podría representar una reaccionar predeciblemente a cada combinación de parámetros
diferencia entre las características de funcionamiento del físicos de esterilización: humedad, temperatura, concentración
aparato del usuario y las del aparato que el fabricante utiliza del gas esterilizante y tiempo de exposición. La desviación
para verificar las declaraciones de la etiqueta. También se hasta cierto punto de uno o más de estos parámetros críticos, no
puede mostrar una mayor conformidad con las declaraciones compensada por modificación de otros parámetros, causa que el
de las etiquetas con cualquier aparato altamente desarrollado, integrador indique falla para alcanzar los límites prefijados de
como por ejemplo, el recipiente BIER. Por lo tanto el integración.
integrador exige sus propias precauciones de uso y tiene sus Los integradores fisicoquímicos se han diseñados para coincidir
propios criterios de interpretación dentro de las características en general con la inactivación predecible de preparaciones de
de funcionamiento. Las pruebas para características de esporas que tienen alta y definida resistencia al agente
funcionamiento de integradores fisicoquímicos incluyen la esterilizante. Para la esterilización por vapor, se emplea una
determinación, en condiciones definidas de (a) un tiempo cepa de Bacillus stearothermophilus (véase Indicador
máximo de exposición en el cual ninguna de las muestras biológico para esterilización por vapor, papel transportador),
indica que ha ocurrido una exposición adecuada al ciclo, y (b) y para la esterilización por óxido de etileno, se emplea una cepa
un tiempo mínimo de exposición en el cual todas las muestras de Bacillus subtilis, subespecie niger,
indican que ha ocurrido una exposición adecuada al ciclo. Un (véase Indicador biológico para esterilización con óxido de
tiempo de exposición intermedio, en donde cerca de la mitad etileno, papel transportador). Como no hay preparaciones
de las muestras presentan exposición adecuada, podría indicar estándar para estas cepas, las características de funcionamiento
una aproximación al punto final de exposición del integrador de estos integradores fisicoquímicos deben interpretarse en
fisicoquímico. relación a un ciclo específico de esterilización validado.
INDICADORES E INTEGRADORES QUÍMICOS Y FISICOQUÍMICOS

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Los estándares de funcionamiento, dentro de lotes y entre tienen una alta y definida resistencia a la esterilización por
I lotes, de integradores fisicoquímicos de un fabricante dado óxido de etileno. La inactivación de esporas de una cepa de
deben ser uniformes. Los integradores no deben interactuar Bacillus subtilis, subespecie niger, puede usarse como modelo,
física o químicamente con envases o productos cuando se los aunque también pueden emplearse otras esporas de
coloca junto al producto a esterilizar en la carga de microorganismos relevantes. Los elementos críticos de los
esterilización, y no deben alterar la concentración, calidad, o integradores fisicoquímicos para la esterilización por óxido de
pureza del artículo esterilizado al punto de no cumplir los etileno son una base con un compuesto orgánico a lo largo de
SISTEMAS CRÍTICOS
requisitos oficiales. Los usuarios deberían preguntar a los una tira lineal de indicador sensible a la combinación de
fabricantes del integrador si la esterilización en presencia de temperatura, humedad y concentración del gas esterilizante.
integradores fisicoquímicos puede afectar a ciertos artículos a Cuando el compuesto orgánico se expone a una mezcla de gas
esterilizar. Asimismo, la seguridad en el empleo de estos
esterilizante a temperatura y humedad específicas, una reacción
integradores debe ser verificada.
química hace aparecer un color a lo largo de la barra indicadora
Esterilización por calor húmedo lineal. Esto es función predecible del tiempo de exposición en
El empleo de integradores fisicoquímicos de esterilización por las condiciones de esterilización por óxido de etileno. Si la
vapor para complementar la información obtenida por barra indicadora no se destiñe ni cambia de color durante un
valoración física de los parámetros críticos de operación período establecido después de haberse completado el ciclo de
debería formar parte de la liberación paramétrica de los esterilización, se confirma la humidificación adecuada en el
productos esterilizados por calor húmedo. Estos deben estar ciclo. El integrador debe ser capaz de detectar desviaciones de
diseñados para asegurar que la descarga de letalidad los parámetros prescritos de temperatura, concentración del gas
especificada para el proceso se ha cumplido o se ha excedido. esterilizante, humedad y tiempo de exposición que puedan
La estabilidad del funcionamiento de los integradores afectar la esterilización. No muestra las reacciones requeridas si
fisicoquímicos para la esterilización por calor húmedo debe se expone a menor concentración del gas, temperatura y
asegurarse mediante las pruebas de características de humedad, aun cuando se exponga durante periodos
funcionamiento que incluyen probar el funcionamiento del prolongados.
sistema indicador o integrador en diversas condiciones Otros tipos de integradores fisicoquímicos para la esterilización
prefijadas del proceso de calor húmedo. por óxido de etileno basados en diferentes principios o
Los elementos críticos de este tipo de integradores
mecanismos de integración de parámetros críticos de
físicoquímicos incluyen un compuesto orgánico sensible a la
esterilización podrían emplearse si también se calibran contra
combinación de temperatura y vapor, un material polimérico
un ciclo especificado y validado de esterilización por óxido de
penetrable por vapor saturado y un dispositivo de mecha
etileno. La estabilidad del funcionamiento de los integradores
adsorbente bajo el material polimérico que está en contacto
fisicoquímicos para la esterilización por óxido de etileno tiene
con el compuesto orgánico. A medida que el vapor atraviesa el
material polimérico, el compuesto orgánico se funde que asegurarse mediante pruebas de características de
predeciblemente en pasos que dependen de la temperatura del funcionamiento a varios tiempos preseleccionados para un ciclo
vapor durante el ciclo. El material licuado se desplaza a lo dado de esterilización por óxido de etileno.
largo de la mecha y recorre una distancia que se puede medir
en una escala. Este compuesto orgánico tiene un intervalo de
temperatura de fusión establecido. Algunos integradores, por
ejemplo, tienen intervalos de fusión de 132.2 a 134.5 °C o de INDICADORES E INTEGRADORES
137.0 a 142.0 °C. Otros intervalos de fusión se pueden DE ESTERILIZACIÓN
especificar para indicar los parámetros de esterilización
correspondientes a la exposición real. La combinación de Los indicadores de esterilización responden a los parámetros
parámetros de esterilización, aplicada para el tiempo de del proceso de esterilización de una manera no cuantitativa; es
aposición requerido para un ciclo de esterilización por calor decir, presentan resultados de aprobación o falla. Asimismo,
húmedo establecido, está indicada en el frente del artículo por resultan útiles en un ambiente operativo como medio para
el acorrido lineal de la fusión. identificar si un artículo se ha expuesto a un proceso de
Estos tipos de integradores fisicoquímicos también pueden esterilización. Su uso es mínimo con respecto al
emplearse para los llamados ciclos de esterilización por calor establecimiento directo de la eficacia del proceso. Los
húmedo donde los pasos sucesivos del proceso de integradores de esterilización son dispositivos más sofisticados
esterilización logran la letalidad requerida para el proceso
que reaccionan cuantitativamente en respuesta a uno o más
validado. Pueden utilizarse otros tipos de integradores
parámetros críticos de esterilización y generan un resultado que
fisicoquímicos para esterilización por calor húmedo si también
se los calibra contra un ciclo especificado y validado de se puede relacionar con la letalidad. Los integradores más
esterilización por calor húmedo. sofisticados son los dosímetros de radiación, los cuales son tan
exactos y robustos que su uso ha desplazado al de los
Esterilización por óxido de etileno indicadores biológicos para la validación de la esterilización
Los integradores fisicoquímicos para esterilización por óxido con radiación. La sección de Indicadores e integradores
de etileno deben estar diseñados para coincidir en general con químicos y fisicoquímicos ofrece detalles adicionales sobre
la inactivación predecible de preparaciones de esporas que indicadores e integradores.
INDICADORES E INTEGRADORES DE ESTERILIZACIÓN

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DESARROLLO DEL CICLO DE con respecto a cambios en sus atributos físicos y químicos. Si
ESTERILIZACIÓN
se obtienen resultados en el límite de lo aceptable, se pueden D
reducir los parámetros que más afectan la letalidad y/o los
INTRODUCCIÓN materiales. Se deben llevar a cabo pruebas en condiciones
variables de letalidad del proceso que debería resultar en
El desarrollo y la implementación apropiados de un proceso de destrucción microbiológica. En esta etapa del desarrollo aún no
SISTEMAS CRÍTICOS
esterilización requieren varios pasos secuenciales importantes se habrán establecido las condiciones finales del proceso, por lo
que aseguren que un proceso de esterilización apropiado que es necesaria la flexibilidad en la evaluación preliminar. Se
resulta en materiales y productos que son microbiológicamente debe aplicar el sentido común al considerar alternativas al
seguros y adecuados para el uso previsto.1 Las tecnologías de proceso de esterilización. Por ejemplo, los tratamientos
esterilización que se basan en calor, radiación ionizante y térmicos son inapropiados para materiales refrigerados, los
químicos a menudo tienen el potencial para alterar las artículos no pueden calentarse a una temperatura cercana a su
propiedades fisicoquímicas de los materiales a los que se punto de fusión, los gases y líquidos esterilizantes no pueden
aplican. En algunos casos, la esterilización puede dejar penetrar envases sellados o materiales no porosos, además de
residuos tóxicos sobre los materiales esterilizados o generar que pueden presentarse otras restricciones obvias. Durante la
una liberación más fácil de impurezas (lixiviables) en los evaluación de artículos fabricados con muchos materiales (es
productos con los que entran en contacto. Por lo tanto, es decir, viales sellados, bolsas permeables, etcétera), se deben
necesario considerar la esterilización no solo como un medio tener en cuenta los efectos sobre todos los componentes de los
para eliminar microorganismos, sino también como un proceso materiales del artículo que se está esterilizando. Si se altera
que podría potencialmente cambiar los materiales de un modo uno o más componentes del artículo se puede obtener un
tal que se impacte su utilidad, seguridad, o ambas. Se debe resultado favorable. En muchos proyectos que implican la
establecer un balance entre la letalidad microbiana de un esterilización de un componente con diseño personalizado, la
proceso de esterilización y otros aspectos de la seguridad del evaluación del proceso de esterilización es un elemento
paciente. El objetivo deseado de las actividades de desarrollo esencial de los estudios de prueba de concepto. Ningún diseño
del ciclo es un proceso de esterilización robusto que satisfaga de proceso de fabricación y selección de componentes para un
ambos aspectos. material estéril puede considerarse completo hasta que se haya
identificado y evaluado por completo un proceso de esterilización
SELECCIÓN DEL PROCESO adecuado, el cual esterilice el material al mismo tiempo que
tenga efectos mínimos sobre sus atributos físicos y químicos.
Radiación
Los métodos para el establecimiento de la esterilización por Las siguientes condiciones son meramente ejemplos a
radiación se describen en detalle en la norma ISO 11137, y se considerar durante la evaluación de materiales con respecto a
recomienda el apego a la versión más reciente de dicha norma. su compatibilidad con los procesos de esterilización indicados:
Esterilización por filtración 1. Calor húmedo. En condiciones suficientes para matar

Los procesos de esterilización por filtración se basan en la de manera confiable la biocarga esperada (véase
exclusión de microorganismos y difiere significativamente de Esterilización con vapor de agua por contacto directo
aquellos procesos basados en la letalidad (véase Esterilización y Esterilización con calor húmedo de líquidos
de líquidos por filtración). El desarrollo del proceso de acuosos).
filtración debe considerar una gran cantidad de factores, tales 2. Calor seco. Verificar el punto de fusión más bajo de los
como los efectos adversos del fluido sobre el filtro (por materiales y procesar cuando menos a 25 °C por debajo
ejemplo, compatibilidad química) y del filtro sobre el fluido de la temperatura de fusión de los materiales
(por ejemplo, sustancias extraíbles y lixiviables), así como la involucrados (véase Esterilización con calor seco).
adsorción de componentes del fluido. Las interacciones físicas, 3. Líquidos, gases y vapores. En condiciones suficientes
tales como la presión diferencial, el golpe de ariete (o golpe para matar de manera confiable la biocarga esperada
hidráulico), la velocidad de flujo, la temperatura y la capacidad (véase Esterilización con fase líquida, Esterilización
de filtración también deben tenerse en cuenta. Véase el con gases y Esterilización en fase gaseosa).
capítulo Esterilización de líquidos por filtración para
información adicional. En esta evaluación preliminar se pueden emplear otras
condiciones y puede ser necesario explorar múltiples métodos.
Otros métodos de esterilización Usar información bibliográfica o provista por los proveedores
El primer paso en el desarrollo de un ciclo de esterilización es para facilitar este esfuerzo. Se deben cambiar los materiales si
exponer los materiales al proceso de esterilización y evaluar el se sospecha que los materiales iniciales son incompatibles con
impacto del proceso sobre estos. Inicialmente, esta un método que de otro modo sería aceptable. El método de
determinación puede ser un proceso de selección preliminar en esterilización seleccionado debe ser un proceso que tenga el
el que cambios muy evidentes en la apariencia pueden ser mínimo impacto sobre los atributos de calidad esenciales del
suficientes para confirmar la incompatibilidad. Cuando la material y que provea una letalidad suficiente para exceder la
apariencia permanezca inalterada, el material debe evaluarse mínima probabilidad deseada de obtener una unidad no estéril.
DESARROLLO DEL CICLO DE ESTERILIZACIÓN

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EVALUACIÓN DE LA BIOCARGA F = tiempo de residencia del proceso de esterilización en una

D En paralelo al proceso descrito anteriormente, se debe llevar a
condición definida expresado en minutos .
D = valor D estimado de la biocarga en minutos.
cabo una evaluación de la biocarga presente en o sobre los
N0 = población máxima estimada de la biocarga.
artículos que se van a esterilizar (véase Monitoreo de la
biocarga). La evaluación inicial debe incluir una estimación de El valor F calculado representa la duración mínima del tiempo
la población y la resistencia de la biocarga. Se debe instaurar de residencia del proceso para reducir la población microbiana
SISTEMAS CRÍTICOS
una estrategia de control para el monitoreo periódico de la inicial asumida a menos de la probabilidad de una unidad no
resistencia y la población de la biocarga independientemente estéril deseada. Se pueden agregar factores de seguridad al
de los resultados del estudio, inicial (véase Monitoreo de la valor D asumido de la biocarga, a la probabilidad de una
biocarga).2 Para los procesos de esterilización por radiación,
unidad estéril mínima deseada, y a la estimación de la
las expectativas para la evaluación de la biocarga se establecen
población de la biocarga. El uso de un factor de seguridad
en ISO 11137.
reduce el riesgo de contaminación al incrementar la duración
Resistencia de la biocarga del proceso aunque puede afectar de forma adversa a los
Para los procesos de esterilización remanentes, la ejecución de materiales que se están esterilizando con o sin factores de
una prueba de ebullición (100 °C durante 10 min) puede servir seguridad, la determinación de la duración estimada del
como una evaluación básica para microorganismos formadores proceso en condiciones esterilizantes es un prerrequisito para
de esporas (véase Esterilización con calor húmedo de líquidos las actividades subsiguientes.
acuosos). La ausencia de sobrevivientes en una prueba de Dependiendo del valor F (o del tiempo de residencia del
ebullición simplifica de gran manera el desarrollo del ciclo de proceso) seleccionado se puede decidir la estrategia de
esterilización dado que las condiciones de esterilización para validación para la esterilización. El método preferido, pero no
microorganismos que no forman esporas son menos estresantes requerido, es el uso de una estrategia de sobremuerte (véase
para los materiales de producción. Si se determina que los Esterilización de insumos para la salud) donde el valor F
microorganismos sobreviven a la prueba de ebullición, se debe permite la inactivación completa de un indicador biológico
establecer su resistencia al proceso de esterilización
resistente. Cuando las limitaciones de los materiales restringen
seleccionado. La prueba de ebullición permite estimar un valor
el uso de condiciones de esterilización de larga duración,
D para un proceso de calor húmedo. Para otros procesos, se
pueden resultar más apropiados los métodos de biocarga o de
requiere una referencia bibliográfica o un estudio de
indicador de biocarga/biológico (véase Esterilización de
laboratorio (Véase ISO 18472 Sterilization of Health Care
insumos para la salud).
Products - Biological and Chemical lndicators - Test
Equipment).
EVALUACIÓN FORMAL DE MATERIALES
Población de biocarga
Si no se recuperan microorganismos o solo se recuperan Una vez que se haya seleccionado el proceso de esterilización
microorganismos no formadores de esporas, se puede usar una apropiado, se deben reconfirmar los efectos de dicho proceso
estimación de la población de la biocarga para agilizar la sobre los materiales (Association for the Advancement of
selección de la duración apropiada del proceso. Debido a que Medical lnstrumentation -AAMI-. Compatibility of materials
las bacterias que forman esporas son ubicuas, se debe tener en subject to sterilization. Arlington, VA: MMI Technical Report
cuenta la presencia potencial de las esporas en la biocarga. No. 17; 2008). Los requisitos para esto pueden variar desde
exámenes físicos simples para materiales que se espera queden
ESTIMACIÓN DE LA DURACIÓN DEL PROCESO ampliamente exentos de efectos debidos al proceso de
La duración mínima del periodo de residencia de la esterilización, tales como el acero inoxidable o el vidrio
esterilización puede determinarse una vez que el método de tratados con vapor, hasta exámenes de estabilidad integrales
esterilización haya sido seleccionado y que se haya obtenido para productos formulados en su configuración final de
información sobre la biocarga (según se determine o asuma). contenedor-cierre. Los criterios para estos estudios deben ser
Esto se logra reordenando la siguiente fórmula, usada para objetivos siempre que sea posible. Es útil llevar a cabo una
estimar la probabilidad de una unidad no estéril (véase búsqueda en la bibliografía para materiales sobre los que se
Esterilización de insumos para la salud). tenga poca experiencia, además de buscar y discutir con los
proveedores los potenciales efectos sobre los materiales. La
preparación y esterilización de las unidades de prueba para
estos estudios formales pueden llevarse a cabo en un entorno
Del reordenamiento de la fórmula anterior y despeje de F de laboratorio y deben documentarse completamente.
resulta la siguiente fórmula. Al esterilizar usando agentes químicos, los materiales
esterilizados deben analizarse para determinar la presencia
de esterilizante residual y sus subproductos de degradación
Donde: conocidos. Podría requerirse aireación posterior al ciclo de
NU = probabilidad de una unidad no estéril asumida (no más de esterilización u otros tratamientos para reducir estos elementos
1 unidad positiva en 106 unidades). a niveles aceptables.
DESARROLLO DEL CICLO DE ESTERILIZACIÓN

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SELECCIÓN DEL INDICADOR BIOLÓGICO DESARROLLO DEL PROCESO DE

Se debe seleccionar un indicador biológico que sea apropiado ESTERILIZACIÓN D
para el proceso de esterilización elegido y su duración, así
como la estrategia de validación prevista (véase Indicadores Un aspecto importante a tomar en cuenta en cualquier actividad de
biológicos para esterilización). El indicador biológico esterilización es la selección de un proceso apropiado a partir de la
seleccionado provee un medio para medir la letalidad del gran cantidad de alternativas posibles: vapor de agua, calor seco,
SISTEMAS CRÍTICOS
proceso mediante la selección de la población y la resistencia gas, radiación, vapores químicos, proceso químico o filtración. La
del indicador biológico. La duración del proceso de selección del método apropiado para un artículo dado requiere
esterilización no debe adaptarse para acomodar las conocimiento del proceso de esterilización e información sobre los
particularidades de cualquier indicador biológico. efectos del proceso sobre el material que se está esterilizando. La
selección de un tratamiento de esterilización en particular y los
MAPEO DE LOS ENVASES Y DE LOS ARTÍCULOS detalles de su realización a menudo representan un compromiso
Se deben realizar estudios para determinar la ubicación dentro entre las condiciones requeridas para destruir o eliminar la
de los materiales que se van a esterilizar que sea menos biocarga al nivel deseado y el impacto del proceso de
propensa a alcanzar las condiciones de esterilización. El mapeo esterilización sobre los materiales que se están procesando. Los
puede realizarse usando termopares dosímetros, indicadores procesos de esterilización deben ser lo suficientemente robustos
biológicos y/o indicadores químicos colocados dentro de los para asegurar la inactivación microbiana y evitar al mismo tiempo
materiales. Los materiales que se van a esterilizar deben consecuencias adversas a los atributos de calidad del material.
envolverse o empacarse y orientarse según se pretende usar El método de sobremuerte emplea condiciones que son capaces de
rutinariamente en el proceso de esterilización. Se deben destruir una alta concentración de un indicador biológico resistente
controlar los métodos y materiales del envoltorio y del y, por lo tanto, representan un mayor desafío para la integridad y
empaque para asegurar la reproducibilidad. Al realizar estos estabilidad del material. La sobremuerte se emplea solamente
estudios es esencial que la introducción de los dispositivos de cuando los artículos que se están esterilizando pueden soportar la
medición se logre de tal manera que no altere (de manera exposición prolongada al proceso de esterilización y se usa con
positiva o negativa) la penetración del esterilizante a través de mayor regularidad para metales, vidrio y demás artículos que no se
cualquier envoltorio o empaque, o a través del material mismo. ven afectados por la exposición al proceso. Su uso es siempre
Si los materiales que se van a esterilizar tienen una geometría preferible cuando los materiales pueden tolerar el uso de
simple con un volumen interno mínimo, y se esterilizan con condiciones más agresivas.
otros artículos más complejos, se puede omitir el mapeo de los El método de validación del ciclo medio es un caso especial del
materiales más simples. Puede ser posible la interpolación del método de sobremuerte en el cual se duplica arbitrariamente un
volumen densidad dimensión y masa para reducir la extensión ciclo letal para el indicador biológico. Su uso expone
de los estudios requeridos. Los estudios de mapeo deben innecesariamente a los materiales a condiciones adversas por lo
documentarse para referencia futura. que debe evitarse.
Los métodos de indicador biológico/biocarga (o una combinación)
MAPEO DE CARGA son apropiados cuando el producto presenta cierta sensibilidad a
las condiciones de esterilización. Los analistas los emplean
El uso inicial de un proceso de esterilización debe incluir
comúnmente para parenterales de pequeño y gran volumen,
confirmación de que las condiciones de esterilización pueden
soluciones usadas en el proceso y medios de laboratorio cuyas
aplicarse a la totalidad de la carga. Se puede encontrar una
propiedades materiales se verían perjudicadas por una exposición
guía adicional sobre este tema, así como el aspecto
prolongada a las condiciones esterilizantes. El uso apropiado del
subsiguiente de validación y el control del proceso de
método requiere de control sobre los niveles de la biocarga previa
esterilización, en otros capítulos dentro de esta sección de
a la esterilización y la certeza de que la resistencia de la biocarga
Esterilización del capítulo de Sistemas críticos.
es tal que ésta será destruida durante el procesamiento. La
destrucción completa o el uso de una población alta de indicador
1
El término "materiales", como se usa en todo este capítulo, incluye biológico/biocarga no son necesarios para el uso de este método
fármacos, medicamentos, materiales en proceso, componentes, puesto que se basa en las diferencias en la resistencia y población
envases, cierres, medios de laboratorio, utensilios, materiales que
relativas del indicador biológico y los microorganismos de la
entran en contacto con el producto y otros artículos sujetos a
biocarga.
procesos de esterilización.
2
El método de biocarga basa la duración de la esterilización
La biocarga nativa debe analizarse de manera rutinaria y se deben
únicamente en la población y resistencia esperadas de la biocarga
generar tendencias con evaluaciones apropiadas para organismos
que pudieran exceder las condiciones más exigentes en términos de
en los materiales. Éste es el método preferido para toda
población y/o supervivencia. Si durante un procedimiento de esterilización con radiación. Se basa en el monitoreo periódico de
selección se ha aislado un organismo más resistente y/o a población la biocarga y en el análisis de la resistencia para establecer la
anormalmente alta, se debe determinar el impacto en el proceso de confianza en el método. El método de biocarga no requiere el uso
esterilización para lograr el nivel de garantía de esterilidad requerido. de un indicador biológico.
3
El valor F es equivalente a F0 para calor húmedo, FH para calor seco, La filtración se usa para líquidos y gases que no pueden soportar
o el tiempo de residencia del proceso L para otros procesos de los procesos de esterilización química, por calor o radiación, o
esterilización y por lo regular se expresa en minutos. cuya esterilización en línea resulta más conveniente.
DESARROLLO DEL PROCESO DE ESTERILIZACIÓN

_________________________________________________________________
VALIDACIÓN DE PROCESOS DE Mediciones físicas. Después de la culminación de cada ciclo

V ESTERILIZACIÓN
de esterilización, se deben verificar los datos informados por
los sensores del equipo y los registradores. Los registros
La validación de procesos de esterilización requiere de obtenidos del equipo de esterilización constituyen una parte
conocimientos sobre tecnologías de esterilización y el uso de esencial de la documentación.
instrumentos y equipos apropiados para controlar y verificar Integradores/indicadores físicos. Siempre que se utilizan, los
parámetros críticos del proceso de esterilización. Un aspecto integradores, y en menor medida los indicadores, proporcionan
SISTEMAS CRÍTICOS
importante del programa de validación de la esterilización una indicación inmediata de la ejecución del método y
implica el uso de indicadores biológicos siempre que resulte diferencian entre materiales procesados y sin procesar. Cuando
apropiado. Todos los procesos de esterilización deberán estos integradores proveen una indicación directa de la
mantenerse en un estado de validación que incluya la letalidad del método (por ejemplo, dosímetros de radiación), se
recalificación periódica. El programa de validación para cada pueden usar para la liberación de materiales.
tipo de esterilización comprende diversas etapas formalmente Liberación paramétrica. La liberación de productos
documentadas. terminados sin análisis de esterilidad se tratará próximamente
Los principios generales de los programas de validación son en una sección sobre Productos farmacéuticos con
aplicables a todos los procedimientos de esterilización. esterilización terminal-Liberación paramétrica.
Consideraciones adicionales. Dependiendo de las
La etapa de desarrollo del proceso sirve para investigar y características propias de cada proceso de esterilización en
establecer los parámetros operativos que definen los controles particular, pueden presentarse requisitos adicionales para
que se utilizarán en el proceso de esterilización. Algunas partes confirmar la eficacia del método, los cuales pueden incluir
del desarrollo del ciclo se pueden llevar a cabo en un entorno muestreo de la biocarga, determinación de la resistencia de la
de laboratorio. biocarga, determinación de la resistencia del indicador
biológico y auditorías a proveedores. Conforme resulte
La etapa de calificación de la instalación sirve para determinar aplicable, estas actividades deberían llevarse a cabo para
que los controles del equipo y demás instrumentos estén mantener el proceso de esterilización en estado validado.
instalados y calibrados conforme a las especificaciones. La Control de cambios. Para mantener el estado validado, resulta
documentación debe demostrar que los servicios requeridos, necesario monitorear los materiales, procedimientos y equipo
tales como vapor, agua y aire son aceptables. que influencian el proceso de esterilización para asegurar el
registro y la evaluación de todos los cambios con respecto a su
La etapa de calificación operativa sirve para confirmar que el impacto potencial. Para lograr esto, el analista debe establecer
equipo funciona dentro de los parámetros definidos de un sistema formalizado de control de cambios.
esterilización. Mantenimiento preventivo. El usuario debe establecer un
programa definido de mantenimiento preventivo para cada
La etapa de calificación de desempeño del programa de parte del equipo de esterilización de acuerdo con la
validación evalúa directamente la esterilización de los recomendación escrita del fabricante del equipo. El
materiales o artículos. Esta determinación requiere una mantenimiento preventivo representa una clase especial de
medición independiente de parámetros durante el proceso de cambios predefinidos que no tienen efectos adversos sobre la
esterilización, así como desafíos biológicos en configuraciones operación del sistema y que, por lo tanto, no requieren de
operativas. La correlación entre las mediciones físicas y la evaluación en el control de cambios.
letalidad microbiológica demostrada o la capacidad de Reevaluación periódica. Ante la ausencia de cambios en los
eliminación de los métodos de esterilización por filtración materiales, en el método o en el equipo, se debe reconfirmar la
respalda la efectividad del proceso de esterilización. efectividad de los procesos de esterilización de manera
periódica. Este sistema debe formalizarse y debe tratar el
La etapa de control rutinario del proceso de esterilización impacto potencial que ciertos cambios mínimos o cambios no
requiere una variedad de prácticas de respaldo y se detalla a detectados podrían tener sobre el sistema validado. Cuando no
continuación. se presentan cambios, la cantidad de información requerida
para sustentar un proceso de esterilización es menor que la
requerida para la aceptación inicial del proceso de
CONTROL RUTINARIO DEL esterilización.
PROCESO Capacitación. Los procesos de esterilización se basan
fundamentalmente en principios científicos para la destrucción
Después de haber validado inicialmente un proceso de efectiva de microorganismos. Los procesos para asegurar una
esterilización, se debe mantener en dicho estado para asegurar esterilización efectiva son desarrollados por científicos e
su operación continua aceptable. Esto se logra mediante una ingenieros con buen conocimiento de los principios de muerte
variedad de actividades relacionadas que son esenciales para el y eliminación microbiana. Las personas implicadas en el
uso continuo del método. desarrollo del proceso de esterilización requieren de
Calibración. Los instrumentos de medición se deben calibrar conocimientos en microbiología, física, química e ingeniería,
periódicamente contra un estándar rastreable. Esto incluye el además de que deben estar familiarizadas con los reglamentos
registro y control de instrumentos que regulan la operación y principios de las buenas prácticas de fabricación. La
del equipo. esterilización es una actividad interdisciplinaria la cual
VALIDACIÓN DE PROCESOS DE ESTERILIZACIÓN

_________________________________________________________________
generalmente requiere de los conocimientos combinados de un probabilidad de supervivencia microbiana en los

grupo de individuos para el establecimiento de un proceso procesos replicados terminados no es mayor que los E
confiable. Además del equipo que desarrolla el proceso de límites establecidos.
esterilización, las personas responsables de mantener y operar 4. Supervisar el proceso validado durante operaciones de
los procesos de esterilización deben estar adecuadamente rutina. Volver a evaluar y certificar el equipo
capacitadas para asegurar que sus acciones contribuyan al periódicamente según sea necesario.
SISTEMAS CRÍTICOS
éxito de los mismos. Estas personas a menudo son las primeras 5. Concluir los protocolos y documentar los pasos (1) a
en identificar contratiempos y cambios en el desempeño del (4) anteriores.
proceso debido a su conocimiento profundo del mismo. Se
deben establecer y documentar programas efectivos de Los principios y la implementación de un programa para
capacitación, los cuales deben hacer hincapié en principios de validar procedimientos de procesos asépticos son
esterilización, apego a los procesos y procedimientos sustancialmente más exhaustivos que la validación de un
establecidos y a la importancia de documentar desviaciones de proceso de esterilización. En un proceso aséptico, los
las operaciones normales. componentes de la forma farmacéutica final se esterilizan
por separado y el artículo terminado se ensambla de manera
aséptica.
Para validar adecuadamente el proceso de esterilización o el
ESTERILIZACIÓN Y proceso aséptico es necesario poseer un amplio conocimiento
ASEGURAMIENTO DE de la tecnología de esterilización y espacios limpios. Para
cumplir con los límites aceptables y alcanzables vigentes de
ESTERILIDAD DE INSUMOS PARA los parámetros de esterilización, es necesario emplear equipos
LA SALUD e instrumentos adecuados para controlar los parámetros
Este capítulo informativo proporciona una descripción general críticos como temperatura, tiempo, presión, humedad,
de los conceptos y principios que rigen el control de calidad de concentración del gas esterilizante, y/o radiación absorbida.
los artículos que deben ser estériles. Cualquier modificación o Un aspecto importante en el programa de validación de muchos
variación en los procedimientos para pruebas de esterilidad procedimientos de esterilización es el empleo de indicadores
respecto de los procedimientos contenidos en MGA 0381, biológicos (véase MGA 0501, Indicadores biológicos). Los
Esterilidad. Debe validarse en el contexto del programa total procesos validados y certificados deben revalidarse
de aseguramiento de esterilidad, y esos procedimientos no periódicamente pero el programa de revalidación no necesita
están diseñados como métodos alternativos a los descritos en ser tan extenso como el programa original.
dicho capítulo. El programa típico de validación descrito más adelante está
Según la definición más estricta de esterilidad, una muestra se diseñado para el autoclave a vapor pero algunos de estos
considera estéril solamente cuando en ella hay ausencia total principios pueden aplicarse a otros procedimientos de
de microorganismos viables. Sin embargo, esta definición esterilización descritos en este capítulo informativo. El
absoluta no se puede aplicar efectivamente a un lote entero de programa comprende varias etapas.
artículos farmacopeicos terminados debido a las limitaciones
para realizar pruebas. La esterilidad de un lote que se presenta La etapa de calificación de las instalaciones tiene el propósito
como estéril se define por lo tanto en términos estadísticos, en de determinar que los controles y otros instrumentos estén
donde la probabilidad de que una unidad o artículo esté diseñados y calibrados correctamente. La documentación que
contaminado es aceptablemente remota. Tal estado de demuestra la calidad de los servicios necesarios, tal como
aseguramiento de esterilidad se puede establecer solamente vapor, agua y aire debe estar archivada.
mediante procesos de esterilización validados o
procesamientos asépticos siguiendo las buenas prácticas de La etapa de calificación operativa tiene el propósito de
fabricación vigentes y no dependiendo exclusivamente de las confirmar que la cámara vacía funciona dentro de los
pruebas de esterilidad. Los principios básicos para la parámetros de temperatura en los lugares clave de la cámara
validación y certificación de los procesos de esterilización se establecidos en el protocolo. Generalmente es apropiado
describen del siguiente modo: elaborar perfiles de temperatura, es decir, de registros de
temperaturas simultáneas en la cámara mediante el empleo de
1. Establecer que el equipo utilizado en el proceso es indicadores múltiples de temperatura. Un intervalo típico y
capaz de funcionar dentro de los parámetros aceptable de temperatura en el interior de la cámara vacía es de
requeridos. ± 1 °C cuando la temperatura de la cámara no es menor de 121 °C.
2. Demostrar que el equipo y la instrumentación de
control críticos son capaces de funcionar de acuerdo La etapa confirmatoria del programa de validación es la
con los parámetros prescritos para el equipo del proceso. esterilización propiamente dicha de materiales o equipos. Para
3. Llevar a cabo ciclos repetidos representativos del esta determinación se necesitan sensores de temperatura
intervalo operativo requerido del equipo usando insertados en muestras de los artículos, así como en muestras
productos reales o simulados. Demostrar que los de los artículos a los que se les han agregado concentraciones
procesos se han llevado a cabo dentro de los límites adecuadas de microorganismos de prueba apropiados
prescritos en el protocolo y finalmente que la (indicadores biológicos) en configuraciones de autoclave a
ESTERILIZACIÓN Y ASEGURAMIENTO DE ESTERILIDAD DE INSUMOS PARA LA

SALUD
_________________________________________________________________
carga completa. La eficacia de la penetración del calor húmedo ejemplo anterior se considera adecuado un ciclo de 12 min
M en los artículos reales y el tiempo de exposición son dos para la esterilización si el producto tiene una carga microbiana
factores importantes que determinan la letalidad del proceso de de 102 microorganismos. Sin embargo, si el indicador tiene
esterilización. Para la etapa fina del programa de validación se originalmente un contenido de 106 microorganismos, se puede
exige documentar datos de apoyo durante la ejecución del esperar realmente una probabilidad de supervivencia de 10-2;
programa. es decir, que 1 de cada 100 indicadores biológicos podría
generar resultados positivos. Esta situación se puede evitar
SISTEMAS CRÍTICOS
Generalmente se acepta que los artículos inyectables con mediante la selección del indicador biológico adecuado.
esterilización terminal o los dispositivos críticos declarados Alternativamente, se puede utilizar un alto contenido de
como estériles, cuando se esterilizan, alcanzan una indicadores sobre la base de una dirección predeterminada y
probabilidad de supervivencia microbiana de 10-6, es decir, se aceptable de recuentos.
garantiza que la probabilidad de encontrar microorganismos en El valor D para la preparación de Geobacillus
el artículo esterilizado o en la forma farmacéutica es menor o stearothermophilus determinado o verificado para estas
igual a uno en un millón. Para artículos termoestables, se suele condiciones debe restablecerse cuando se cambia un programa
exceder el tiempo crítico necesario para lograr una de validación dado. La determinación de curvas de
probabilidad de supervivencia microbiana de 10-6 supervivencia (véase MGA 0501, Indicadores biológicos) o lo
(sobremuerte) de la biocarga previa a la esterilización que es que se conoce como enfoque de ciclo fraccionado, puede
considerablemente mayor en población (normalmente 106) y emplearse para determinar el valor D del indicador biológico
resistencia (normalmente DI 21 es igual o mayor a 1.0 min) preferido para cada procedimiento específico de esterilización.
que la biocarga natural previa a la esterilización. Sin embargo, El enfoque de ciclo fraccionado también puede usarse para
para algunos artículos en donde la exposición excesiva al calor evaluar la resistencia de la carga microbiana. Los ciclos
puede dañar el artículo, no será factible emplear un enfoque de fraccionados se estudian para la reducción del recuento
sobremuerte (overkill). En este último caso, el desarrollo del Microbiano o para lograr una fracción de crecimiento
ciclo de esterilización depende en gran medida del microbiano negativo. Estos valores pueden emplearse para
conocimiento de la población y resistencia de la carga determinar la letalidad del proceso en condiciones de
microbiana del producto, basándose en el examen, durante un producción. La información puede usarse en equipos de
periodo apropiado, de un número considerable de lotes del producción calificados para establecer los ciclos apropiados de
producto previamente esterilizado. esterilización. Durante la rutina de esterilización se puede
El valor D es el tiempo (en minutos) necesario para reducir la utilizar un indicador biológico apropiado como la preparación
población microbiana en un 90 % o 1 ciclo logarítmico (es de Geobacillus stearothermophilus. Cualquier proceso de
decir, a una fracción sobreviviente de 1/10), a una condición esterilización basado en la carga microbiana requiere una
letal específica tal como temperatura. Por lo tanto, cuando el vigilancia adecuada de la resistencia microbiana del artículo
valor D de una preparación de indicador biológico, por para detectar cualquier cambio, además de la vigilancia
ejemplo de esporas de Geobacillus stearothermophilus, es periódica de otros atributos.
1.5 min, bajo las condiciones de proceso definidas, por
ejemplo a 121 °C, si se trata durante 12 min bajo las mismas PRUEBAS DE ESTERILIDAD DE LOTES
condiciones, se puede afirmar que el valor de letalidad de Se debe reconocer que la prueba de esterilidad podría no
entrada es 8D. El efecto de aplicar este valor de entrada en el detectar la contaminación microbiana si sólo está presente en
producto depende de la carga microbiana inicial. Suponiendo un pequeño porcentaje de los artículos terminados del lote
que la resistencia a la esterilización equivale a la del indicador porque el número especificado de unidades a tomar impone
biológico, si la carga microbiana del producto en cuestión es una limitación estadística significativa al valor de los
de 102 microorganismos, un valor de letalidad de 2D da como resultados de la prueba. Esta limitación inherente, sin embargo,
resultado una carga microbiana de 1 (10° teórico), y un valor tiene que aceptarse porque el conocimiento actual no ofrece
adicional de 6D da como resultado una probabilidad de alternativas no destructivas para evaluar la calidad
supervivencia microbiana calculada de 10-6 (en las mismas microbiológica de cada artículo terminado del lote, e
condiciones, un valor de letalidad de entrada de 12D sería un incrementar significativamente el número de muestras no es
enfoque típico de "sobremuerte"). Por lo general, la una opción factible. Para información relacionada con la
probabilidad de supervivencia obtenida para el artículo realización de la prueba de esterilidad, referirse al MGA 0381,
sometido al ciclo validado de esterilización no se correlaciona Esterilidad.
completamente con lo que puede ocurrir con el indicador
biológico. Por lo tanto, para un uso válido, es esencial que la
resistencia del indicador biológico sea mayor que la de la carga MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN
microbiana natural del artículo esterilizado. Así resulta
apropiado formular una hipótesis del peor caso posible y tratar En este capítulo informativo se describen cinco métodos de
la carga microbiana como si su resistencia al calor fuera esterilización terminal, incluyendo la eliminación de
equivalente a la del indicador biológico, aunque no es probable microorganismos mediante filtración, así como las pautas para
que el microorganismo aislado más resistente de una carga procesos asépticos. Sin embargo, el desarrollo tecnológico
microbiana típica muestre una resistencia al calor de la moderno ha conducido al uso de procedimientos adicionales.
magnitud mostrada por esta especie, frecuentemente empleada Éstos incluyen el moldeo por soplado (a temperaturas
como indicador biológico en la esterilización por vapor. En el elevadas), las formas de calor húmedo diferentes al vapor
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN
_________________________________________________________________
saturado e irradiación UV, así como el llenado continuo en permanencia, el programa de calificación y validación debe
línea en los procesamientos asépticos. Para elegir un proceso establecer parámetros para la uniformidad de la temperatura y M
adecuado para una forma farmacéutica o un componente se particularmente para el tiempo de permanencia.
necesita un amplio conocimiento de las técnicas de Debido a que la despirogenización representa un desafío más
esterilización e información relacionada con los efectos del riguroso para los sistemas de procesamiento por calor seco que
proceso sobre el material que se esteriliza. la inactivación de un indicador biológico, por lo general no es
SISTEMAS CRÍTICOS
necesario incluir indicadores biológicos al validar procesos por
Esterilización por vapor calor seco si se demuestra la validación de la
El proceso de esterilización térmica que emplea vapor saturado despirogenización. Una reducción de tres unidades
a presión se lleva a cabo en una cámara llamada autoclave. logarítmicas o mayor es un criterio de aceptación adecuado
Probablemente éste es el proceso de esterilización más para la despirogenización y, cuando se demuestra con éxito,
empleado. El principio básico de operación consiste en que el asegurará no sólo la despirogenización adecuada de los
aire en el interior de la cámara de esterilización es desplazado insumos para la salud, sino también la esterilización. Las
por el vapor saturado mediante el uso de válvulas de escape o pruebas de despirogenización por lo regular se realizan usando
trampas. Para desplazar el aire de la cámara y del interior de artículos inoculados con estándar de referencia de endotoxina.
los artículos con mayor eficacia, el ciclo de esterilización Los artículos se evalúan después de la exposición para
puede incluir etapas de evacuación de aire y de vapor. El determinar los niveles residuales de endotoxina usando
diseño o elección de un ciclo para determinados productos o valoraciones basadas en lisado de Limulus. Para información
componentes depende de varios factores que incluyen la adicional sobre la valoración de endotoxinas, véase MGA
termolabilidad del material, conocimiento de la penetración del 0316, Determinación de endotoxinas bacterianas.
calor en los artículos y otros factores descritos en el programa
de validación (véase arriba). Aparte de esa descripción de los Esterilización por gases
parámetros del ciclo de esterilización, usando una temperatura La esterilización por gases es una alternativa a la esterilización
de 121 °C, puede ser apropiado el concepto de F0. El F0 a una por calor que se emplea cuando el material a esterilizar no
temperatura específica diferente a 121 °C, es el tiempo (en soporta las altas temperaturas alcanzadas en los procesos de
minutos) necesario para proporcionar la letalidad equivalente a esterilización por vapor o por calor seco. El método más
la proporcionada a 121 °C en un tiempo determinado. Los comúnmente usado de esterilización gaseosa es el óxido de
autoclaves modernos trabajan generalmente con un sistema de etileno. Entre las desventajas del óxido de etileno están su alta
control significativamente más sensible que la válvula de naturaleza inflamable, a menos que se mezcle con gases
reducción de vapor de las unidades más antiguas que han inertes; sus propiedades mutagénicas y la posibilidad de que
estado en servicio durante muchos años. Para que estas deje residuos tóxicos en los materiales tratados,
unidades antiguas logren la precisión y el nivel de control del particularmente los que contienen iones cloruro. El proceso de
ciclo mencionado en este capítulo, podría ser necesario esterilización se lleva a cabo generalmente en una cámara
actualizar o modificar el equipo y los instrumentos de control preparada para presión y vacío con un diseño similar al de la
de estas unidades. Esta modificación sólo se justifica si la autoclave pero con características adicionales (véase más
cámara y la camisa de vapor están intactas para uso seguro adelante) sólo presentes en los esterilizadores que emplean este
continuo y si los depósitos que interfieren con la distribución gas. Las unidades que emplean este agente esterilizante deben
de calor pueden eliminarse. estar diseñadas para permitir una desgasificación posterior a la
esterilización con el fin de determinar la supervivencia
Esterilización por calor seco/despirogenización microbiana y reducir al mínimo la exposición del personal al
El proceso de esterilización térmica de insumos para la salud gas potencialmente nocivo.
mediante calor seco se puede llevar a cabo mediante un La validación del proceso de esterilización que utiliza óxido de
proceso en partida en un horno diseñado expresamente para tal etileno se realiza según lo descrito anteriormente. Sin
propósito o en un túnel de calor seco en el cual los recipientes embargo, el programa es más extenso que para los otros
de vidrio se mueven continuamente a través del sistema. Un procedimientos de esterilización, ya que además del control de
sistema de esterilización/despirogenización por calor seco está temperatura también se requiere un control paramétrico
provistode aire calentado y filtrado por HEPA, distribuido apropiado para la humedad, la presión de vacío, la presión
uniformemente a través de la unidad por convección o positiva, y la concentración de óxido de etileno. Es importante
radiación y empleando un sistema de soplado con sensores y demostrar que todos los parámetros críticos del proceso en la
dispositivos de monitoreo y control de todos los parámetros cámara son adecuados durante el ciclo completo. Dado que los
críticos. Un intervalo de temperatura típico y aceptable en el parámetros de esterilización aplicados a los artículos de
interior de la cámara vacía es de ± 15 °C cuando la unidad esterilización son de importancia crítica, con frecuencia se
funciona a una temperatura, de no menos de 250 °C. recomienda acondicionar previamente la carga para obtener la
Además del proceso de esterilización por partidas descrito humedad necesaria, con el fin de reducir al mínimo el tiempo
anteriormente, el sistema de túnel continuo por lo general de exposición a la temperatura requerida antes de colocar la
requiere una temperatura mucho mayor que la mencionada carga en la cámara de óxido de etileno. La validación por lo
anteriormente para el proceso en partidas debido a un tiempo general se lleva a cabo empleando un producto inoculado con
de permanencia mucho menor. El proceso continuo también indicadores biológicos apropiados tales como las
necesita generalmente una etapa de enfriamiento rápido antes preparaciones de esporas de Bacillus atrophaeus. Para
de la etapa de llenado aséptico. En vista del tiempo corto de validación, estos indicadores pueden usarse en cargas
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completas de la cámara con producto real o con producto eficacia de un medio de filtración depende del tamaño de poro
M simulado. Para supervisar la concentración de humedad y de del material poroso, de la biocarga previa a la filtración, y
gas se necesitan instrumentos sofisticados que sólo las puede depender de la adsorción de bacterias sobre o dentro de
personas con conocimientos y experiencia pueden calibrar, la matriz del filtro o de un mecanismo de tamizado. Existe
operar y mantener las condiciones de funcionamiento. evidencia de que el tamizado es el componente más importante
También se pueden emplear indicadores biológicos en la de mecanismo. Aunque se debe evitar el uso de filtros que
supervisión de ciclos de rutina. desprendan fibras a menos que no sea posible utilizar otros
SISTEMAS CRÍTICOS
Según se indica en este capítulo, los indicadores biológicos procedimientos de filtración, se debe tomar en cuenta que está
pueden emplearse en una modalidad de fracción negativa para prohibido el uso de filtros que contengan asbestos. Cuando sea
establecer la probabilidad de supervivencia microbiológica necesario usar un filtro que desprenda fibras, es obligatorio
definitiva en el diseño de un ciclo de esterilización con óxido que el proceso incluya un filtro que no desprenda fibras
de etileno usando producto inoculado o producto simulado colocado después o secuencialmente con respecto al paso de
inoculado. Uno de los factores limitantes principales de este filtración inicial.
proceso de esterilización es la capacidad restringida del gas Clasificación de filtros. El tamaño de poro de las membranas
para difundirse a los lugares más internos del producto que de filtración se clasifica mediante una clasificación nominal
requieren esterilización. Por lo tanto, se debe determinar el que refleja la capacidad de la membrana de filtración para
diseño del empacado y los patrones de distribución de la carga retener microorganismos de tamaños representados por cepas
dentro de la cámara para permitir la penetración necesaria del específicas, y no mediante determinación de un tamaño
gas. Referirse a ISO 11135 para una descripción completa del promedio de poro ni informe de distribución de tamaños. Los
desarrollo del proceso, validación y control rutinario de los filtros de esterilización no se pueden definir estrechamente
procesos de esterilización por óxido de etileno. debido a que, dependiendo de la biocarga presente en la
corriente de fluido, diversos filtros pueden considerarse
Esterilización por radiación ionizante efectivos para la esterilización. En la actualidad, el filtro de
La rápida proliferación de dispositivos médicos incapaces de esterilización se puede definir como "un filtro que, cuando se
resistir la esterilización por calor y la preocupación por la valida apropiadamente, eliminará todos los microorganismos
seguridad del óxido de etileno han aumentado el uso de la de una corriente de fluido, produciendo un efluente estéril".
esterilización por radiación. Este método también puede Las clasificaciones nominales de los filtros de esterilización
aplicarse a principios farmacéuticos activos y a formas basadas en las propiedades de retención microbiana difieren
farmacéuticas finales. Entre las ventajas de la esterilización por cuando la clasificación se realiza por otros medios, p. ej.,
irradiación se encuentran la baja reactividad química, bajos mediante retención de esferas de látex de diversos diámetros.
residuos cuantificables y el hecho de que hay menos variables Es responsabilidad del usuario seleccionar un filtro con la
para controlar. De hecho, la esterilización por radiación es clasificación correcta para el propósito particular, dependiendo
única en el sentido de que la base del control es esencialmente de la naturaleza del producto (especialmente considerando su
la dosis de radiación absorbida, la cual se puede medir con biocarga potencial) que se va a filtrar. No es factible repetir las
precisión. Generalmente se usan procedimientos de pruebas de capacidad de filtración en las instalaciones del
establecimiento de dosis y de sustanciación de dosis para usuario. Las pruebas de desafío microbiano para cada lote de
validar la dosis de radiación requerida para lograr un nivel de membranas de filtración fabricadas se llevan a cabo de
garantía de esterilidad. preferencia en las condiciones del fabricante.
La irradiación causa solamente un aumento mínimo de El usuario debe determinar si los parámetros de filtración
temperatura pero puede afectar ciertos grados y tipos de empleados en la fabricación influyen significativamente en la
plásticos y vidrios. Los dos tipos de radiación ionizante que se eficiencia de la retención microbiana. Basado en una gestión
usan son la desintegración de isótopos (radiación gamma) y la de riesgos, la validación de los filtros esterilizantes debe
radiación de haz electrónico. En cualquier caso la dosis de efectuarse con el número suficiente de filtros determinando
radiación establecida para producir el grado requerido de como mínimo la prueba de reto microbiano y compatibilidad
aseguramiento de esterilidad debe ser tal que, dentro del del producto con el filtro, las cuales deben efectuarse con
intervalo de dosis mínima y máxima, las propiedades del producto. Otras cuestiones importantes en la validación del
artículo que se esteriliza sean aceptables. Referirse a ISO proceso de filtración incluyen la compatibilidad del producto,
11137-1, - 2 y -3 para una descripción completa de desarrollo la adsorción del fármaco, presencia de conservantes u otros
del proceso, validación y control rutinario de los procesos de aditivos, y el contenido de endotoxinas del efluente inicial.
radiación ionizante. Dado que la eficacia del proceso de filtración también está
influenciada por la carga microbiana de la solución a filtrar, un
Esterilización por filtración aspecto importante de la validación del proceso de filtración es
La esterilización de fluidos mediante filtración es un proceso determinar la calidad microbiológica de las soluciones antes de
separativo y difiere de otros métodos de esterilización que se la filtración, así como establecer los demás parámetros del
basan en mecanismos destructivos. La filtración a través de procedimiento de filtración, como las presiones, temperatura,
materiales que retienen microorganismos se emplea pH, velocidades de flujo y características de la unidad del
frecuentemente para esterilizar soluciones termolábiles filtro. Por lo tanto, otro método para describir la capacidad de
mediante la remoción física de los microorganismos presentes. retención de los filtros es el empleo del índice de reducción
El ensamblaje del sistema de filtración por lo general consta de logarítmica (LRV, por las siglas en inglés). Por ejemplo, un
una matriz porosa integrada o sujeta dentro de una carcasa. La filtro de 0.2 µm que puede retener 107 microorganismos de una
_________________________________________________________________
cepa especificada tendrá un LRV de no menos de 7 en las VAPOR DE AGUA SATURADO

condiciones establecidas. El vapor de agua saturado es una mezcla bifásica de H2O en 1
El usuario debe validar primero la compatibilidad e integridad fases gaseosa y líquida en equilibrio térmico. El vapor de agua
de los ensamblajes de los recipientes y filtros elegidos. Es saturado presenta una relación singular de temperatura-presión
posible combinar ensamblajes y membranas filtrantes en la que ambas fases se encuentran presentes y, a una
producidos por diferentes fabricantes pero antes se debe validar temperatura dada, sólo es posible una presión para la
SISTEMAS CRÍTICOS
la compatibilidad de estos ensamblajes híbridos. saturación. La importancia de usar vapor de agua saturado en la
La filtración con fines de esterilización generalmente se lleva esterilización se basa principalmente en dos atributos. Primero,
a cabo con unidades que tienen membranas cuya clasificación el vapor de agua saturado mata rápidamente microorganismos
por tamaño de poro nominal es de 0.2 µm o menos. La debido a la presencia de agua líquida. El vapor de agua
calentado a una temperatura superior a la de saturación,
integridad inicial de un ensamblaje de filtro de membrana se
también denominado vapor de agua sobrecalentado, carece de
debe probar antes de su uso, siempre que dicha prueba no
agua líquida y, aunque su temperatura es mayor que la del
afecte negativamente la seguridad, integridad y validez del vapor de agua saturado, es sustancialmente menos letal para los
sistema, y dichas unidades deben probarse después del proceso microbios. Segundo, cuando el vapor de agua cambia de fase
de filtración para demostrar que la integridad de la unidad se gaseosa a líquida, éste libera energía térmica (2 202 kJ/kg a
mantuvo durante todo el procedimiento de filtración. Las 121 °C) que se transfiere a los artículos de carga, lo que facilita
pruebas de punto de burbuja, flujo de aire difuso, presión la esterilización de sus superficies expuestas.
sostenida y flujo de salida hacia adelante son pruebas El objetivo inicial de la esterilización con vapor de agua
comúnmente efectuadas. Estas pruebas deben correlacionarse saturado es que el aire en la cámara de esterilización debe
con la retención de microorganismos. reemplazarse con vapor de agua saturado. El aire residual
dentro de la cámara esterilizadora y de los artículos de carga
actúa como aislante y al mismo tiempo obstaculiza la penetración
del vapor de agua a todas las superficies de los artículos de
1. ESTERILIZACIÓN CON VAPOR carga, por lo que su eliminación es esencial para una esterilización
DE AGUA POR CONTACTO DIRECTO efectiva. La presencia de aire residual en la cámara anula la
relación singular de temperatura-presión del vapor de agua
saturado. Ante la ausencia de saturación, cabe la posibilidad de
ANTECEDENTES Y ALCANCE
que las mediciones físicas no garanticen la letalidad.
La esterilización con vapor de agua es posiblemente el más CICLOS DE DESPLAZAMIENTO POR LA GRAVEDAD
común de los procesos de esterilización. Se emplea en
En los ciclos más simples de autoclave, la eliminación del aire
ambientes que van desde consultorios médicos hasta
se logra mediante el desplazamiento por la gravedad. Debido a
instalaciones de fabricación a gran escala. La diversidad de las
que el vapor de agua es más caliente y menos denso que el aire,
prácticas que emplean esterilización con vapor de agua se
éste se eleva a la parte superior de la autoclave, mientras que el
refleja en el intervalo y sofisticación del equipo usado. Este
aire más frío sale por la parte inferior de la cámara. El vapor de
capítulo de información general trata el tipo de esterilización
agua saturado que entra en la cámara se convierte en
en el que el vapor de agua saturado entra en contacto directo
condensado líquido a medida que entra en contacto con las
con los artículos de carga (con o sin envoltorio) y ofrece una
superficies más frías de la cámara de la autoclave y de los
visión general de los conceptos básicos de este tipo de
artículos de carga. La retención de condensado dentro de la
esterilización, incluyendo su validación. Los artículos de carga carga reduce la efectividad del ciclo puesto que es una barrera
en este proceso de esterilización se denominan de diversas para el contacto con el vapor de agua, además de que se
maneras tales como piezas, componentes, materiales durables, requiere más vapor de agua para mantener el vapor de agua
materiales envueltos o materiales porosos. Estos artículos saturado a la temperatura esterilizante. Los artículos de carga,
pueden ser de materiales metálicos, vidrio, cerámica, los materiales de envoltura y la disposición de la carga deben
elastoméricos o poliméricos con poca o nula sensibilidad a la diseñarse de manera que se facilite la eliminación del aire y el
degradación térmica a las temperaturas de esterilización. Para escurrimiento del condensado. En los ciclos de desplazamiento
la esterilización con vapor de agua por contacto directo, los por la gravedad, la carga alcanza lentamente la temperatura
artículos generalmente se esterilizan usando un método de esterilizante deseada debido a que la eliminación del aire es
sobremuerte. relativamente lenta en comparación con los ciclos en los que
La esterilización de envases llenos con líquido puede diferir dicha eliminación se facilita mecánicamente. Durante el
sustancialmente. La sección Esterilización con calor húmedo segmento de exposición del ciclo, una trampa termostática en
de líquidos acuosos de este capítulo provee información sobre la parte inferior de la cámara permite retirar el condensado (y
las aplicaciones en las que el vapor de agua es un medio de cualquier aire residual) del esterilizador y mantiene las
calentamiento, pero que no entra en contacto con el artículo condiciones esterilizantes. Al final del periodo de permanencia,
que se esteriliza: el líquido contenido en el envase. la presión en la cámara se restituye a presión atmosférica.
1. ESTERILIZACIÓN CON VAPOR DE AGUA POR CONTACTO DIRECTO

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CICLOS PREVIOS DE VACÍO temperatura o F0 debido a las consecuencias adversas mínimas

1 Para eliminar de manera más efectiva el aire de la cámara y de
para los materiales que se están esterilizando.
La letalidad total se puede calcular en el transcurso del
los artículos de carga, los esterilizadores pueden emplear
proceso. Para la temperatura de referencia específica de 121 °C
múltiples pulsos de evacuación/presión en los que el aire es
y un valor z de 10 °C, el F0 total acumulado se puede
reemplazado por vapor de agua. El número y la profundidad de
determinar mediante la siguiente ecuación:
estos pulsos pueden variar. Debido a que los pulsos que
SISTEMAS CRÍTICOS
alternan vacío y presión pueden tensar los materiales de

envoltura, estos últimos deben seleccionarse cuidadosamente.
La operación del esterilizador durante el segmento de
exposición es similar al del ciclo de desplazamiento por la
gravedad anteriormente descrito. El sistema de vacío se puede Donde:
usar al final del proceso para eliminar vapor de agua y t1 = Hora de comienzo.
condensado residuales de los artículos de carga. La selección t2 = Hora de finalización.
de un ciclo específico y sus parámetros asociados de T = Temperatura.
esterilización para un artículo dado depende de varios factores, La suma de las contribuciones de letalidad instantáneas
los cuales incluyen la termolabilidad del material, la durante todo el proceso de esterilización permite calcular la
penetración del calor en el artículo, la masa del artículo, las letalidad general del proceso o el F0 generado. El cálculo de
dificultades para la eliminación de aire/condensado, así como F0 debe comenzar a 100 °C y debe continuar hasta el final
otros factores descritos en el programa de validación. del periodo de permanencia siempre y cuando se mantengan
CONTROL DEL CICLO DE ESTERILIZACIÓN condiciones de vapor de agua saturado.
Los esterilizadores se controlan mediante sistemas VALIDACIÓN DE LA ESTERILIZACIÓN POR

computarizados/automatizados que manejan la ejecución CONTACTO DIRECTO
general del proceso y el informe de datos. Los sistemas de
esterilización con vapor de agua pueden estar controlados El enfoque predominante para la esterilización con vapor de
por sensores de temperatura y/o de presión calibrados en el agua por contacto directo es el método de sobremuerte
equipo. Durante las partes de exposición del ciclo, se requiere definido en la sección de Establecimiento y justificación del
un tiempo de permanencia mínimo a una temperatura proceso de esterilización que se basa en inactivación
previamente definida para asegurar el cumplimiento del microbiológica de este capítulo. La esterilización por
objetivo de letalidad del método (tiempo mínimo-temperatura o sobremuerte es un método en el que la destrucción de una alta
F0). La eficacia del ciclo de esterilización con vapor de agua a concentración de un microorganismo resistente se correlaciona
menudo se mide usando F0, que se define como el tiempo de con la destrucción de biocarga presente durante el
exposición equivalente a 121 °C. F0 es un medio para procesamiento de rutina razonablemente prevista. Dicho
cuantificar la efectividad de la esterilización con vapor de agua
objetivo se puede demostrar mediante la consecución de
determinando el tiempo de esterilización equivalente en
cualquiera de los siguientes parámetros: una letalidad mínima
minutos con respecto a una temperatura base de 121 °C y a un
definida (F0), un conjunto definido de condiciones físicas; o la
valor z de 10 °C; el valor z se define como el número de grados
confirmación de una reducción logarítmica mínima de un
de cambio de temperatura necesario para cambiar el valor D
indicador biológico resistente.
por un factor de 10. El método F0 se usa para evaluar los
Los requisitos de validación para el método de sobremuerte
procesos de esterilización que operan en condiciones variables
son menos complejos que los de otros métodos, como aquellos
de temperatura contra un solo estándar.
que se basan en biocarga o biocarga/indicadores biológicos.
Se puede calcular la letalidad del proceso a temperaturas
distintas a 121 °C para determinar la letalidad equivalente a la Cuando los artículos de carga pueden soportar un grado de
provista a 121 °C. La eficacia de los procesos de esterilización calor importante sin sufrir consecuencias adversas, se prefiere
por calor húmedo no está intrínsecamente vinculada con la el método de sobremuerte para esterilización con vapor de
temperatura específica de 121 °C, la cual es simplemente la agua debido a su fácil ejecución, sus consideraciones reducidas
conversión a grados Celsius de 250 °F, además se pueden usar para el control de biocarga y su simplicidad en general.
otras temperaturas. Los sistemas de control del esterilizador
para esterilización directa generalmente proveen un tiempo Calificación del equipo
mínimo a una temperatura de referencia definida después de la La calificación del equipo es un programa predefinido que
eliminación inicial de aire/condensado. Los esterilizadores de examina el equipo para confirmar que su instalación y
vapor de agua se controlan usando sensores localizados en la operación antes del proceso de esterilización sean conforme a
línea de drenaje antes de la trampa termostática, aunque se lo previsto. La calificación del equipo se puede separar en
pueden usar otros esquemas de control. Generalmente, la calificación de la instalación y calificación operativa, o se
temperatura en dicha ubicación se registra como parte de la puede considerar como una calificación conjunta de la
documentación permanente de las condiciones de instalación y la operación. El trabajo de la calificación provee
esterilización. En la esterilización por contacto directo, resulta una línea de base para el mantenimiento preventivo del
aceptable exceder los requisitos mínimos de tiempo- esterilizador, así como para el control de cambios.

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Distribución de la temperatura en la cámara vacía mejores prácticas incluyen colocar los artículos de mayor
Un procedimiento común para evaluar la operación del tamaño en los anaqueles inferiores, permitiendo que el 2
esterilizador de vapor de agua es la evaluación del desempeño condensado de estos artículos salga del esterilizador con el
de la cámara vacía. Cada método de eliminación de aire usado mínimo contacto con otros artículos de la carga.
en el esterilizador se evalúa midiendo la temperatura cerca de
las esquinas de la cámara del esterilizador, cerca de la sonda de Indicadores biológicos
El indicador biológico comúnmente usado para la
SISTEMAS CRÍTICOS
control y de otras partes, según corresponda. La distribución de
temperaturas en la cámara vacía se debe determinar únicamente esterilización con vapor de agua por contacto directo contiene
mediante sensores ubicados en la cámara, mientras que las esporas de Geobacillus stearothermophilus (ATCC 12980 o
temperaturas en el drenaje de la cámara o fuera de ésta no ATCC 7953), un microorganismo termofílico con una
tienen relevancia directa en esta actividad de validación. Se resistencia al calor húmedo sustancialmente mayor que la de la
pueden ignorar las diferencias en el periodo de permanencia del mayoría de los microorganismos vegetativos. El desafío de
ciclo debido a que sólo se debe evaluar el periodo de esporas puede colocarse en un sustrato dentro o sobre un
permanencia más corto para cada método de eliminación de artículo de carga, o el desafío puede consistir en un artículo de
aire. Los criterios de aceptación para esta prueba varían de carga inoculado con una suspensión de esporas. Cuando los
acuerdo con las capacidades y uso regular del esterilizador. No indicadores biológicos se usen de acuerdo con las instrucciones
se requieren indicadores biológicos para la evaluación de la del fabricante, se podrá usar la información de resistencia
distribución de la temperatura en la cámara vacía. proporcionada por el proveedor. Los usuarios finales deben
determinar la población y resistencia de los artículos
Mapeo de componentes inoculados que preparan.
Los artículos que se esterilizan con vapor de agua pueden ser Penetración del calor y desafío microbiológico
bastante complejos y pueden tener volúmenes muertos El objetivo de la actividad de validación es confirmar la
internos, superficies ocultas, grietas y superficies de contacto penetración aceptable de calor usando mediciones de
del producto difíciles de alcanzar, las cuales deben ser temperatura y desafío de indicadores biológicos. Por lo
esterilizadas. La capacidad del vapor de agua saturado para regular, este estudio se lleva a cabo en condiciones en las que
penetrar los envases o materiales de envoltura, así como para el tiempo y/o la temperatura de exposición son ligeramente
alcanzar las superficies, debe establecerse para cada artículo. menores que las referencias usadas rutinariamente. Los
Aunque es relativamente fácil para artículos individuales tales termopares e indicadores biológicos deben colocarse con los
como espátulas, vasos de precipitados y otras formas artículos de carga en aquéllos lugares más difíciles de calentar
geométricas simples, puede resultar sustancialmente más determinados durante el mapeo de componentes. Los
difícil para unidades de llenado, bastidores de filtros, tuberías y termopares deben estar en contacto con la superficie del
mangueras. Los analistas deben realizar estudios para artículo. Los analistas deben tener cuidado al insertar los
determinar los puntos fríos en los artículos mediante termopares e indicadores biológicos con el fin de no alterar la
termopares que están en contacto con la superficie del artículo, capacidad del vapor de agua de ingresar en los objetos que se
con el fin de asegurar la penetración de calor en todos los someten al desafío. Este inconveniente se puede resolver
artículos de carga. Estos estudios se pueden llevar a cabo en un mediante accesorios especiales para el ingreso de termopares o
laboratorio y no es necesario repetirlos cuando el mismo colocando sondas de temperatura en unidades ubicadas cerca
artículo se esteriliza en múltiples autoclaves. Durante esta de las unidades que contienen los indicadores biológicos. Para
evaluación, todos los artículos de carga deben envolverse y el segundo de los casos, los estudios repetidos proporcionan
acomodarse de manera tal que se facilite el ingreso de vapor de evidencia de la eficacia del ciclo cuando se da muerte a los
agua y la eliminación de aire y condensado. Asimismo, los indicadores biológicos y las mediciones físicas se
artículos deben envolverse y acomodarse de manera corresponden con los valores esperados de tiempo-temperatura
esencialmente idéntica para lograr una esterilización o F0. Si las mediciones microbianas y físicas no cumplen con
reproducible. los criterios de aceptación predefinidos, será necesario
investigar y aplicar acciones correctivas para rectificar la
Mapeo de la carga discrepancia.
La determinación de los patrones de carga es una práctica
esencial para la esterilización terminal de líquidos acuosos por Control rutinario del proceso
calor húmedo (véase la sección de Esterilización con calor Al igual que con todos los procesos de esterilización, después
húmedo de líquidos acuosos de este capítulo), aunque esta de la validación, la esterilización con vapor de agua debe
práctica no representa una preocupación crítica con respecto a someterse a controles formales que la mantengan en un estado
la esterilización directa de artículos debido a que las validado en todo momento. La sección Esterilización de
diferencias entre componentes desempeñan un papel mayor insumos para la salud de este capítulo describe los requisitos
que la ubicación dentro de la carga. Las cargas para generales para todos los procesos de esterilización, incluidas la
esterilización directa con vapor de agua se pueden validar capacitación, calibración, mediciones físicas, integradores o
usando una carga máxima y mínima, según se determine ya sea indicadores físicos, control continuo del método, control de
por el número de cada uno de los artículos o por su masa. Las cambios, mantenimiento preventivo y reevaluación periódica.

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2. ESTERILIZACIÓN CON CALOR Esterilización terminal de productos

2 HÚMEDO DE LÍQUIDOS ACUOSOS
La conservación de los atributos del producto puede requerir el
uso de condiciones de esterilización menos agresivas, así como
equipo, ciclos y métodos de validación de esterilización
INTRODUCCIÓN adaptados a tales circunstancias más restringidas. Las
variaciones sustanciales en los diseños del equipo y en los
La esterilización con vapor de agua de líquidos acuosos, también métodos de esterilización terminal nos permiten proveer una
SISTEMAS CRÍTICOS
conocida como esterilización de cargas no porosas, es el mejor descripción integral de un ciclo típico. Todos los
método para productos parenterales acuosos, líquidos acuosos del esterilizadores terminales calientan la carga, aunque lo logran
proceso, medios de laboratorio y materiales de desecho biológicos. de distintas maneras: vapor de agua saturado; mezclas de vapor
Este tipo de esterilización funciona principalmente con envases de agua-aire; mezclas de vapor de agua-aire-agua; y agua
cerrados. Durante la esterilización con vapor de agua por contacto sobrecalentada. Se puede usar sobrepresión de aire para
directo (también denominada esterilización con vapor de agua de mantener la integridad del envase y para enfriar los envases,
piezas, materiales durables o materiales porosos) el vapor de agua así como agua para calentar/enfriar la carga, dependiendo del
en la cámara entra en contacto directo con la superficie de los tamaño de la autoclave, de las expectativas de rendimiento y
artículos de carga para lograr la esterilización (véase la sección del envase en sí.
Esterilización con vapor de agua por contacto directo de este
capítulo). En contraste, la esterilización de líquidos en envases se Fluidos del proceso
logra aplicando calor al envase, calentando la pared del envase y, Los fluidos del proceso se usan para propósitos de ajuste del
en última instancia, calentando el volumen de líquido interno. Esto pH, dilución a un volumen especificado, lubricación, entre
se puede lograr usando vapor de agua, agua sobrecalentada y aire otros. En muchas instancias, estos líquidos se esterilizan en
en diversas combinaciones. Algunos líquidos acuosos son conjunto con artículos que se deben esterilizar mediante
susceptibles al sobreprocesamiento, lo que podría volverlos contacto directo con vapor de agua, por lo que el proceso de
inadecuados para su uso previsto. Los fabricantes deben tomar en esterilización debe asegurar que todos los artículos se
cuenta la influencia de estas diferencias al momento de establecer esterilicen adecuadamente.
un proceso adecuado.
Durante la esterilización de envases llenos de líquido, las presiones Medios de laboratorio
diferenciales entre el interior de los envases y la cámara de Los medios de laboratorio a menudo se esterilizan en
esterilización pueden tener un impacto potencial en la integridad autoclaves estándar de vapor de agua con adaptaciones
del envase. La sobrepresión del aire se usa para minimizar las menores. Proporcionar una salida de vapor lenta (para reducir
diferencias de presiones entre el envase y el esterilizador con la tensión sobre la integridad del envase y minimizar los
objeto de proteger la integridad del envase, especialmente las derrames) y enfriar la camisa puede ayudar a mejorar el diseño
jeringas prellenadas y los envases plásticos. Antes de esterilizar los y la operación del esterilizador básico de vapor de agua para
envases de los productos, los fabricantes deben considerar las ajustarse de mejor manera a los materiales. El proceso de
potenciales consecuencias adversas del exceso de calor sobre los esterilización puede ser específico para envases de medios o
materiales. Para poder asegurar la esterilidad y la funcionalidad, la para una combinación de envases llenos de líquidos y
definición del proceso y el método de validación usados se deben materiales durables. Este proceso puede ser similar a los
incorporar en las condiciones del proceso, límites de temperatura métodos usados para productos sometidos a esterilización
superior e inferior y límites de tiempo. terminal (véase la sección anterior). La esterilización de
Cuando la esterilización de envases sellados llenos de líquidos medios de laboratorio puede implicar el procesamiento de
permite el uso del método de sobremuerte, éste se considera el envases distintos que contengan diferentes materiales. Los
método preferido y se encuentra descrito en la sección de fabricantes deben estar al tanto de la posibilidad de
Esterilización con vapor de agua por contacto directo de este subprocesamiento o sobreprocesamiento en toda la carga y
capítulo. Ante la posibilidad de que los atributos de calidad del deben considerar el tamaño del envase, su contenido y su
producto se vean perjudicados por el calor excesivo, el proceso de ubicación. Cuando se combinen envases llenos de líquido con
esterilización deberá durar menos tiempo o utilizar una materiales durables en la misma carga, los fabricantes deberán
temperatura menor para minimizar los efectos adversos sobre los considerar los aspectos únicos de cada uno de éstos para
materiales. El tiempo-temperatura de esterilización o condiciones asegurar que todos los artículos se esterilicen de manera
F0 (F0 se define como el tiempo de esterilización equivalente con apropiada. Puesto que los medios de laboratorio se consideran
respecto a una temperatura base de 121 °C) incluye límites autoindicadores con respecto a la esterilidad, no se requiere el
inferiores (relacionados con la esterilidad) y superiores uso de indicadores biológicos durante la validación.
(relacionados con la estabilidad).1 Los fabricantes comúnmente
emplean los métodos de biocarga/indicador biológico (BB/BI, por Esterilización de desechos biológicos
sus siglas en inglés) o de biocarga cuando las limitaciones con La esterilización de desechos biológicos en envases sellados
respecto a la capacidad del material para soportar el proceso hacen derivados del uso en el laboratorio o en la producción es similar a
necesario el uso de condiciones menos agresivas. Este enfoque la esterilización de partes. El proceso debe definirse para asegurar
requiere controles apropiados sobre la biocarga previa a la un tiempo-temperatura de exposición mínimos o la consecución de
esterilización y/o los valores D relacionados con el producto en un valor F0 especificado en todos los artículos de la carga.
conjunto con indicadores biológicos con un recuento o resistencia Dependiendo de los contaminantes potencialmente presentes, el
menor de las esporas para asegurar la esterilización. diseño de la autoclave puede incorporar la
2. ESTERILIZACIÓN CON CALOR HÚMEDO DE LÍQUIDOS ACUOSOS

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recolección/esterilización de condensado o filtros de evacuación (PNSU, por sus siglas en inglés) aceptable se puede lograr
esterilizables para asegurar la contención adecuada de patógenos. usando mediciones físicas y la respuesta del indicador 2
Puesto que el objetivo de la esterilización de desechos biológicos biológico (los cuales definen la letalidad del proceso) en
es lograr que dichos materiales sean seguros para su eliminación y conjunto con los límites de procesamiento para la población y
contacto, se emplea el método de sobremuerte descrito en la resistencia de la biocarga (que definen el N0 y el valor D). El
sección Esterilización con vapor de agua por contacto directo de valor D es el tiempo (por lo general en minutos) requerido para
SISTEMAS CRÍTICOS
este capítulo. reducir la población microbiana en un 90 % o un ciclo de 1
log10 (es decir, a una fracción sobreviviente de 1/10) y debe
MÉTODO DE BIOCARGA/INDICADOR BIOLÓGICO asociarse con las condiciones letales específicas en las que se
La aplicación del método de biocarga/indicador biológico determinó. Por ejemplo, D121 es el valor D a 121 °C. Los
requiere un entendimiento cabal del tipo, población y artículos destinados para ser estériles deben lograr una
resistencia de la biocarga típicamente presente en el envase Probabilidad de Una Unidad No Estéril de <10-6, es decir, una
preesterilizado lleno del producto. El método se basa en las probabilidad menor o igual a 1 en 1 millón de que se encuentre
diferencias sustanciales entre la resistencia al calor húmedo y presente una biocarga de microorganismos viables. La
la población de la biocarga presente y del indicador biológico Probabilidad de Una Unidad No Estéril se puede determinar a
usado durante la validación (figura 5). partir de la ecuación 1.
[1]
Donde:
NU = PNSU.
D = Valor D de la biocarga natural.
F = Valor F0 del proceso (letalidad).
N0 = Población de biocarga por envase.
El siguiente ejemplo indica la Probabilidad de Una Unidad No

Estéril resultante en condiciones definidas de validación y
operación rutinaria (tabla 1).
La determinación de la resistencia de la biocarga se logra
mediante un proceso de selección por calor durante el cual un
cultivo puro (un cultivo de laboratorio que contenga especies
individuales de esporas de organismos con una cantidad
mínima de células vegetativas) se calienta a ebullición a
100 °C durante varios periodos. Si el microorganismo de la
biocarga es viable después de la exposición, su resistencia a
Figura 5. Resistencia y población relativas de una biocarga de
121 °C puede estimarse para su uso en el cálculo de la
microorganismos y un indicador biológico típicos.
probabilidad de una unidad no estéril (tabla 2).
El método de biocarga/indicador biológico es aquel en el que
la destrucción incompleta (o destrucción de una población Tabla 1. Ejemplos de cálculo de la probabilidad de una
modesta) de un indicador biológico resistente puede usarse unidad no estéril.
para demostrar la capacidad del proceso para destruir cualquier
biocarga de manera confiable. Esto se logra mediante Validación Uso rutinario
conocimientos detallados de las poblaciones de la biocarga y F0 = 8.0 min F0 = 8.0 min
del indicador biológico y su resistencia relativa. D121 de indicador D121 de biocarga = 0.005 min
Los microorganismos típicos de la biocarga sólo tienen una biológico = 0.5 min
resistencia mínima en comparación con los indicadores N0 del indicador N0 de biocarga = 100 (o 102)
biológicos, lo cual se puede confirmar mediante la selección biológico = 106
por calor de aislados de la biocarga. La población de la Probabilidad de una unidad Probabilidad de una unidad
biocarga se controla mediante etapas de filtración para el no estéril para el indicador no estéril para
fluido, límites de tiempo del proceso, controles ambientales, biológico = 10-10 biocarga = 10-1598
sistemas de crecimiento, entre otros. Los indicadores
biológicos convencionales para esterilización terminal usando
el método de biocarga/indicador biológico son Clostridium Tabla 2. Estimación de D121 a partir de los resultados de la
sporogenes ATCC 7955 y Badilas subtilis ATCC 5230, prueba de ebullición.
aunque se pueden usar otras cepas. El uso de Geobacillus
stearothermophilus para esterilización terminal es poco común Tiempo exposición Aproximado valor D121
con el método de biocarga/indicador biológico, dado que la 1 min 0.01 min
gran resistencia del organismo al calor húmedo lo vuelve poco 10 min 0.1 min
adecuado para esta aplicación. 20 min 0.2 min
La confirmación de una probabilidad de una unidad no estéril 100 min 1.0 min

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Método de biocarga por el calor húmedo en las condiciones de sobremuerte, resulta

2 En la mayoría de los puntos, el método de biocarga es similar más adecuado el método de biocarga/indicador biológico
al método de biocarga/indicador biológico. La diferencia yace puesto que utiliza menos calor y alcanza el mismo grado de
en el aislamiento y caracterización del microorganismo más eficacia del proceso, aunque con controles distintos. Conforme
resistente de la biocarga. El aislado en las condiciones más a lo explicado anteriormente, los procesos de esterilización
exigentes se usa como indicador biológico en la evaluación del terminal requieren una mayor consideración sobre los efectos
proceso, por lo que debe cultivarse para producir una que tendrá el tratamiento sobre las propiedades del material, lo
SISTEMAS CRÍTICOS
población de desafío adecuada. Cuando se usa este método, la cual tiene implicaciones para muchos de los elementos de los
biocarga de cada ciclo del proceso debe controlarse ejercicios de calificación y validación conforme a lo siguiente.
minuciosamente con aspecto a la población y su resistencia Los requisitos de validación para los métodos de
debe ser monitoreada. biocarga/indicador biológico y de biocarga son más rigurosos
que aquéllos relacionados con el método de sobremuerte.
Control del ciclo de esterilización Aunque el método de sobremuerte se puede usar de manera
El equipo de procesamiento para esterilización terminal a confiable sin necesidad de consideraciones detalladas sobre la
menudo se controla mediante sensores calibrados de presión biocarga previa a la esterilización, la aplicación de los métodos
ubicados dentro o sobre la cámara/equipo. Durante los de biocarga/indicador biológico y de biocarga requiere el
periodos de exposición del ciclo, para sustentar la letalidad del monitoreo y control continuos de la biocarga, específicamente
proceso se usa la consecución de un tiempo de permanencia de su población y resistencia. Lo anterior se puede lograr
mínimo a una temperatura predefinida. Por lo regular, la analizando envases llenos justo antes de la esterilización y
letalidad del ciclo de esterilización terminal se mide usando F0 contando el número de unidades formadoras de colonias por
que se define como un tiempo real de exposición a una envase, y confirmando la ausencia de aislados de biocarga
temperatura de proceso variable la cual es equivalente a una resistentes. Cuando se encuentran aislados de biocarga
exposición a 121 °C, basándose en un microorganismo ideal resistentes, se debe determinar su resistencia térmica en el
con un valor z de 10 °C. Esto puede incluir la letalidad fluido.
conseguida durante las fases de calentamiento y enfriamiento Efecto del proceso de esterilización. Durante el desarrollo del
del proceso de esterilización. El valor z se define como el producto, se debe llevar a cabo una determinación preliminar
número de grados de cambio de temperatura necesario para de la capacidad del líquido y del sistema de envase-cierre para
modificar el valor D por un factor de 10. El enfoque F0 se usa soportar las condiciones de esterilización esperadas. Esto se
para evaluar contra un solo estándar los procesos de puede lograr mediante esterilización en condiciones que
esterilización que operan en condiciones variables de excedan ligeramente el máximo esperado y evaluando el efecto
temperatura. Se puede calcular la letalidad del proceso a de éstas en el material. La evaluación debe abarcar los
temperaturas distintas a 121 °C para determinar una letalidad atributos esenciales de calidad centrando su atención en las
equivalente a la provista a 121 °C. Los sistemas de control del impurezas conocidas y en aquéllas potencialmente nuevas.
esterilizador para esterilización terminal generan condiciones Como parte de esta tarea, la apariencia y demás propiedades
dentro de un intervalo de tiempo-temperatura F0 previamente físicas también deben evaluarse.
definido para evitar el sobreprocesamiento. Calificación del equipo. La calificación del equipo es un
Se pueden usar cálculos matemáticos simples para calcular la programa predefinido que confirma que el equipo ha sido
letalidad total en el transcurso del proceso. En el caso de la instalado adecuadamente y que opera conforme a lo previsto.
temperatura de referencia específica de 121 °C y un valor z de La calificación del equipo de esterilización provee una línea de
10.0 °C, el cálculo de F0 se puede determinar mediante la base para el mantenimiento preventivo y el control de cambios
ecuación 2: en el esterilizador. El equipo de esterilización puede requerir la
calificación del aire, agua, servicios y demás sistemas que
tengan un impacto en el desempeño del equipo.
[2] Distribución de la temperatura en la cámara vacía. Las
consideraciones sobre esterilidad y estabilidad comúnmente
Donde: asociadas con la esterilización de líquidos requieren prestar el
t = Tiempo. mismo nivel de atención al subprocesamiento y
T = Temperatura. sobreprocesamiento de la carga. Por esta razón, puede ser
La suma de las contribuciones de letalidad instantáneas necesario controlar el gradiente de temperatura en todo el
durante todo el proceso de esterilización permite calcular la esterilizador de manera sustancialmente más estricta que aquél
letalidad general del proceso o el F0 generado en el transcurso esperado en la esterilización por contacto directo. El objetivo
de todo el proceso en condiciones variables. es minimizar las diferencias de tiempo-temperatura o F0 en
toda la carga a lo largo del proceso. No se requieren
Validación de la esterilización de envases llenos de líquido indicadores biológicos para la evaluación de la distribución de
Conforme a lo explicado anteriormente, el método preferido la temperatura en la cámara vacía.
para la esterilización con vapor de agua es el método de Indicadores biológicos. La selección de un indicador biológico
sobremuerte según se define en las secciones de Esterilización debe considerarse cuidadosamente debido al equilibrio que se
de insumos para la salud y de Esterilización con vapor de debe mantener entre lograr la esterilización y mantener los
agua por contacto directo de este capítulo. No obstante, atributos de calidad esenciales del material esterilizado. El
cuando los materiales procesados sean susceptibles de daños desafío biológico se inocula directamente en un envase lleno

_________________________________________________________________
de líquido o se introduce mediante unidades autocontenidas, Penetración del calor y desafío microbiológico. El centro de
siempre y cuando exista una correlación adecuada entre su la actividad de validación es confirmar la penetración 2
resistencia y la resistencia que se presentaría en el fluido del aceptable de calor a través de mediciones de temperatura e
proceso. El líquido puede ser el producto o un fluido sustituto. inactivación de desafíos microbianos. El número de sondas
Se debe conocer la resistencia del indicador en el producto (y para los estudios de penetración del calor y los indicadores
del fluido sustituto, cuando así se use). Las propiedades físicas biológicos debe ser mínimo de 10. Las sondas de temperatura
SISTEMAS CRÍTICOS
del sustituto deben ser cercanas a las del producto. Si se y los indicadores biológicos se colocan dentro de la carga en
presentan superficies dentro del envase que no hayan sido las peores ubicaciones (por ejemplo, las partes más frías de la
previamente esterilizadas, puede ser necesario someter dichas cámara cargada). La introducción de los termopares no debe
superficies al desafío biológico. alterar la integridad del envase. Los desafíos biológicos se
Determinación del valor D en líquidos. Resulta necesario colocan en envases adyacentes a los que contienen sondas
determinar la resistencia térmica (valor D y valor z) para el de penetración de calor (o la misma unidad con la medición
indicador biológico. Esto debe llevarse a cabo en un externa de temperatura). La evidencia sobre la eficacia del
Resistómetro para Evaluación de Indicadores Biológicos ciclo se obtiene mediante estudios repetidos en los cuales los
(BIER, por sus siglas en inglés) por duplicado. Asimismo, se indicadores biológicos tienen un desempeño conforme a lo
debe determinar la resistencia térmica de cada lote de esperado y las mediciones físicas corresponden a los valores
indicador biológico en el líquido. Cuando se utilice un líquido esperados de tiempo y temperatura o F0. Si las mediciones
sustituto ya sea por conveniencia (por ejemplo, en un enfoque microbianas y físicas no cumplen con los criterios de
de solución maestra) o debido a la inhibición microbiana del aceptación predefinidos, será necesario investigar y aplicar
indicador biológico por parte del líquido, se deberá determinar acciones correctivas para rectificar la discrepancia. Se utilizan
la resistencia térmica en el líquido sustituto. muestras de las regiones más calientes de la carga para la
Mapeo del envase. Se debe realizar un mapeo de los envases evaluación de la estabilidad y calidad del material.
llenos de líquido con volúmenes mayores o iguales a 100 mL Calidad del producto y evaluación de la estabilidad. Los
para determinar los puntos fríos internos. El mapeo debe fabricantes deben llevar a cabo evaluaciones continuas de la
realizarse orientando los envases de los productos de la misma capacidad del producto para soportar las condiciones de
manera que dentro de la carga. Las sondas de temperatura esterilización de rutina, las cuales deben abarcar los atributos
deben introducirse en los envases usando métodos que de calidad esenciales con especial atención en las impurezas
mantengan la integridad de los mismos. Puede ser necesario conocidas y potencialmente nuevas y en aquellos materiales
emplear soportes internos (de materiales con una que reciben mayor calor. Los fabricantes también deben
termoconductividad mínima) para asegurar la colocación evaluar la apariencia, otras propiedades físicas y la integridad
correcta de la sonda dentro del envase. Una vez determinadas, del envase-cierre como parte de esta evaluación. Para los
estas ubicaciones se usan como ubicaciones de monitoreo o se medios microbiológicos, es indispensable que tengan la
correlacionan con condiciones externas en el envase durante la capacidad de satisfacer la promoción de crecimiento y
validación y el procesamiento de rutina. Los envases de menor demás requisitos, tal como se indica en el MGA 0381.
tamaño (menos de 100 mL) tienen menos puntos fríos Esterilidad.
discernibles, cuya importancia es menor conforme se reduce el
tamaño del envase. Los envases de menor tamaño (menos de
100 mL) se pueden monitorear con sondas de temperatura Control rutinario del proceso
colocadas en su exterior. El "punto frío" debe considerarse
como una "región" y no como un solo punto en el envase. Todos los procesos de esterilización deben someterse a
Colocación y mapeo de la carga. Puede ser necesario prácticas formalizadas para mantenerlos en un estado
establecer una posición fija de la carga dentro del esterilizador controlado. Las prácticas descritas en la sección de
para una esterilización adecuada, con el fin de asegurar un Esterilización de insumos para la salud de este capítulo
calentamiento y enfriamiento uniformes en el uso rutinario. incluyen los requisitos generales apropiados para todos los
Una vez que se ha determinado la posición adecuada de la sistemas de esterilización. Esto se logra mediante una variedad
carga, el tamaño de ésta puede variar dentro de un intervalo de prácticas relacionadas que son esenciales para el uso
definido. Se deben llevar a cabo estudios de mapeo de la carga continuo del proceso durante un periodo prolongado. Las
debíendose quedar un mínimo de diez sondas funcionales, a fin prácticas incluyen: calibración, mediciones físicas,
de determinar los sitios más fríos y más calientes dentro de la integradores fisicoquímicos, indicadores para esterilización,
carga. Estos sitios podrían no ser envases individuales monitoreo de la biocarga, control continuo del proceso, control
específicos, sino regiones. Esto asegura que los envases no de cambios, mantenimiento preventivo, reevaluación periódica
sean subprocesados ni sobreprocesados en la operación de y capacitación.
rutina del esterilizador. La validación de patrones de carga de Asimismo, resulta común el uso de liberación paramétrica en
tamaño variable se logra usando un método de interpolación la esterilización terminal de envases de productos terminados.
cuyo éxito con cargas máximas y mínimas (evitando el Este tema se tratará próximamente en una sección sobre
sobreprocesamiento y el subprocesamiento) establece la Productos farmacéuticos con esterilización terminal-
aceptabilidad de las cargas de tamaño intermedio. No obstante, Liberación paramétrica.
la evaluación de tamaños de carga intermedios puede resultar
ventajosa. En la esterilización de productos, únicamente se 1
La cinética de degradación puede diferir con respecto a la de la
procesan envases de un solo tamaño junto con un solo lote muerte microbiana, además de que los valores de F0 pueden no
de producto. ser suficientes para evaluar completamente los "peores" efectos.

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3. ESTERILIZACIÓN DE LÍQUIDOS 4. La integridad del filtro. Los usuarios del filtro deben
3 POR FILTRACIÓN cerciorarse de que el filtrado se mantenga estéril
mediante el uso de procesos de esterilización validados
INTRODUCCIÓN para el ensamblaje de filtración y para todo el equipo
de fabricación usado en procesos posteriores, así como
En términos generales, los procesos de esterilización se en la manipulación aséptica eficaz de los materiales
dividen en dos categorías: destrucción de microorganismos y esterilizados. Los usuarios del filtro deben considerar
SISTEMAS CRÍTICOS
su separación física del material que se va a esterilizar. El cuidadosamente la colocación del filtro (por ejemplo,
proceso en autoclave es un ejemplo de la primera categoría, su proximidad a la línea de llenado o al tanque de
mientras que la esterilización por filtración es un ejemplo de la retención) para minimizar la posibilidad de
segunda. La separación física de microorganismos depende de contaminación posterior a la filtración.
la biocarga de la solución que se va a filtrar, de las propiedades
de la solución, de las condiciones de filtración y del filtro mismo. Filtros esterilizantes
La esterilización por filtración es un proceso que se puede Un filtro esterilizante es aquél que es capaz de retener un
validar para producir filtrados estériles de una manera mínimo de 1 × 107 UFC de B. diminuta (ATCC 19146) por
consistente, conforme a lo definido en la sección de centímetro cuadrado de área efectiva de filtro cuando se
Esterilización de insumos para la salud de este capítulo. analiza de conformidad con la ASTM F838-05 (2013), Método
de prueba estándar para determinar la retención bacteriana
Esta sección provee una visión general de:
de los filtros de membrana usados para la filtración de
1. Los diversos factores que afectan al proceso de líquidos.
filtración. La designación "esterilizante" implica una acción específica
2. La prueba de integridad del filtro y cuándo llevarla únicamente cuando se cumplen otras condiciones, incluyendo
a cabo. la especificación de la prueba de integridad establecida por el
3. El control de la biocarga previo a la filtración. fabricante del filtro y validada por el usuario (véase
4. Las responsabilidades del fabricante y del usuario del filtro. Validación, a continuación).
5. La resolución de problemas del proceso de filtración. Los filtros esterilizantes por lo regular son membranas
microporosas con valores nominales de tamaño de poro de
Diversos factores contribuyen a la efectividad de cualquier
aproximadamente 0.2 µm. Estas membranas se componen de
proceso de esterilización por filtración. Estos incluyen el tipo y
diversos materiales, tienen distribuciones de tamaño de poro
número de microorganismos, las propiedades del líquido, el
relativamente estrechas y se puede analizar su integridad. Los
diseño del filtro y el polímero de la membrana, y los
resultados de la prueba de integridad se pueden correlacionar
parámetros del proceso de filtración. Las propiedades del
con la retención microbiana. Los filtros de membrana que
líquido que influyen sobre la efectividad de la filtración
tienen un tamaño de poro nominal de 0.45 µm se pueden
incluyen su química, viscosidad, tensión superficial, pH,
validar para producir filtrados estériles bajo ciertas
osmolaridad, fuerza iónica y temperatura, así como la
condiciones; por ejemplo, algunos líquidos requieren alta
presencia de materiales insolubles. Los aspectos del filtro que
presión diferenciales para lograr velocidades de flujo útiles, y
afectan a la filtración incluyen el área efectiva del filtro, el
dichas presiones no son aptas para ser utilizadas con filtros de
tamaño de poro nominal, la distribución de tamaño de poro, el
tamaño de poro nominal de 0.2 µm. Cuando los fabricantes
espesor de la membrana, la porosidad, el polímero de la
usan filtros de 0.45 µm, deben asegurar un control
membrana, la densidad de pliegue del filtro, las capas de
particularmente estricto de la biocarga previa a la
soporte que no forman parte del entretejido, la carga
esterilización.
electrostática y la hidrofilicidad de la membrana del filtro. Los
parámetros del proceso de filtración que influyen sobre la
Mecanismos de retención
retención microbiana incluyen la temperatura, la velocidad de
Las membranas microporosas eliminan microorganismos del
flujo, el volumen, el tiempo de filtración, la presión diferencial
líquido a través de dos mecanismos primarios: retención por
y los pulsos de presión.
tamizado, la cual se basa en el bloqueo físico de partículas
Además, una esterilización por filtración efectiva depende de:
cuyo tamaño es mayor al de los poros de la membrana, y la
1. Los controles de producción y los sistemas de garantía adsorción, que es un fenómeno relacionado con la carga
de calidad usados por el fabricante del filtro para mediante el cual las partículas se unen a las superficies de la
asegurar la calidad y uniformidad de las membranas del membrana.
filtro y de los filtros entretejidos. Ambos mecanismos deben considerarse durante el desarrollo,
2. Los estudios de calificación y validación realizados o la calificación y la validación de los procesos de esterilización
comisionados por el usuario del filtro para demostrar por filtración. Por lo general, la retención por tamizado, es
que el proceso de esterilización por filtración independiente de las condiciones de filtración y del nivel de
seleccionado logra un filtrado estéril. desafío microbiano; sin embargo, en ciertas condiciones, la
3. Controles efectivos para asegurar que la biocarga retención por tamizado se puede ver afectada por la
previa a la filtración y los parámetros operativos se composición del líquido, la temperatura y las condiciones de
mantienen dentro de los intervalos validados. filtración. La adsorción es un fenómeno relacionado con la
3. ESTERILIZACIÓN DE LÍQUIDOS POR FILTRACIÓN

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carga que se ve influenciado por la composición de la progenitora se divide en dos células hijas más pequeñas las
membrana, las propiedades del líquido filtrado, las condiciones cuales sortean los pasajes del poro. Con el tiempo los 3
de filtración y el número y tipo de microorganismos presentes microorganismos pueden atravesar el filtro, debido a que el
en el líquido. número creciente de los mismos sobrepasa los pocos poros de
La retención se puede ver afectada por el número y tipo de mayor tamaño con los que se encuentran. No obstante, debido
microorganismos y demás partículas presentes en el material a los periodos limitados que generalmente se conllevan, a los
SISTEMAS CRÍTICOS
que se va a filtrar. La retención por tamizado implica que todos controles de la biocarga, y a la generalmente limitada
los microorganismos sean de mayor tamaño que el poro más disponibilidad de nutrientes, el pasaje debido a la
grande en el filtro. Los microorganismos y los poros del filtro multiplicación microbiana se considera un fenómeno raro en
no presentan tamaños uniformes, y algunos microorganismos los procesos farmacéuticos (véase la sección de Monitoreo de
pueden ser de menor tamaño que los poros más grandes. la biocarga de este capítulo).
Aunque un microorganismo sea más pequeño que el poro con
el que se encuentra, se lo puede retener por adsorción si se Composición y estructura de la matriz del filtro
encuentra un sitio disponible y las condiciones de filtración Diversos factores relacionados con la matriz del filtro que
son propicias para la adsorción. La probabilidad de retención pueden afectar la retención microbiana, los cuales incluyen el
se relaciona con el número de microorganismos en la biocarga material de fabricación del filtro, el tamaño de poro y la
en las etapas primarias. distribución de tamaño de poro, si la membrana es isotrópica o
anisotrópica (es decir, si la estructura de los poros de la
FACTORES QUE AFECTAN LA RETENCIÓN membrana es uniforme entre caras o se "estrecha" en una cara
con respecto a la otra), el espesor de la membrana y si el filtro
Naturaleza de los poros consta de una sola o múltiples capas.
Las membranas microporosas están constituidas por una matriz El material de la membrana es especialmente importante si la
polimérica penetrada por intersticios comúnmente adsorción es un mecanismo significativo en un esquema
denominados poros. En comparación con los de los filtros de particular de filtración. Por ejemplo, la poliamida exhibe una
profundidad, los poros en las membranas microporosas adsorción microbiana más fuerte que el éster de celulosa.
presentan una distribución de tamaño relativamente estrecha. Las membranas microporosas con una distribución de tamaño
El tamaño, el número y la forma de los poros determinan las de poro relativamente amplia son menos propensas a retener
capacidades de retención del filtro. Con excepción de los poros microorganismos, en particular a niveles de desafío altos, que
de la membranas de filtro con canales grabados (track etched), las membranas con valores de tamaño de poro comparables
los poros no son cilíndricos; los poros están compuestos por con distribuciones de tamaño de poro más estrechas. Esto se
una serie de estructuras seudopoliédricas con diámetros relaciona con la probabilidad de que un microorganismo se
internos diversos. encuentre con un poro cuyo tamaño sea mayor al del propio
El tamaño de poro, la distribución de tamaño de poro y la microorganismo.
porosidad de la membrana son una función del proceso de Las membranas más gruesas por lo general presentan una
fabricación. Es necesario diseñar y controlar cuidadosamente capacidad de retención mayor que las membranas más
al proceso para asegurar que la membrana resultante tenga la delgadas del mismo tipo y valor de tamaño de poro, debido a
valuación en la prueba de integridad, la capacidad de retención la mayor probabilidad de atrapamiento o adsorción dentro de la
microbiana y la uniformidad deseadas. estructura del poro debido al aumento en la distancia que la
bacteria debe recorrer en membranas más gruesas. Esta
Naturaleza de los microorganismos distancia favorece el atrapamiento, al igual que el aumento en
Los microorganismos se presentan en diversas formas y el tiempo de residencia dentro del poro, el cual favorece la
tamaños. Si el microorganismo se encuentra con un poro de la retención por adsorción.
membrana que tiene un tamaño menor que su diámetro más Los filtros de membrana de capas múltiples presentan una
pequeño, el microorganismo probablemente quedará capturado mayor probabilidad de retención que los filtros de membrana
por tamizado. No obstante, si el microorganismo es más de una sola capa del mismo espesor puesto que el pequeño
pequeño que el poro con el que se encuentra, puede quedar número de poros más grandes es el factor que afecta la
retenido por adsorción si el tiempo de residencia, la carga retención y la probabilidad de que un poro grande en una capa
electrostática, el pH, la química del fluido y el material de la se encuentre alineado con otro poro grande en la capa siguiente
membrana son propicias para la adsorción. de un filtro de doble capa no es significativa.
Algunos géneros de microorganismos son deformables, por lo
que, al aplicar presiones o velocidades de flujo diferenciales Composición de la solución filtrada
altas, un microorganismo puede ser forzado a través de un poro A menos que se detecte antes de seleccionar el filtro que se va
del filtro que es ligeramente más pequeño que el organismo. a usar, la composición de la solución filtrada puede afectar de
Los molicutes (micoplasmas) carecen de paredes celulares y, manera adversa el material de la membrana si existe una
por ende, son lo suficientemente pequeños y plegables para incompatibilidad, ocasionando daños a la membrana y
pasar a través de filtros de membrana en ciertas condiciones. afectando su retención e integridad física. Asimismo, si la
El pasaje como consecuencia de la multiplicación (atravesado adsorción es un mecanismo de retención significativo,
del filtro en función del tiempo) puede ser el resultado de una entonces se vuelven importantes las propiedades de la
o más de las siguientes situaciones. El microorganismo puede solución, tales como el pH y la presencia agentes tensoactivos.
atravesar el filtro a medida que se multiplica: una célula La carga superficial y la fuerza iónica son variables

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importantes. Las superficies bacterianas y de la membrana en determinar el efecto del líquido sobre el filtro y demostrar que
3 medios acuosos presentan cargas negativas, lo que genera el filtro puede producir de manera consistente soluciones
repulsión. La fuerza de repulsión se equilibra mediante fuerzas estériles en las condiciones de uso estipuladas. El líquido que
de atracción, las cuales incluyen fuerzas hidrofóbicas de se va a filtrar puede afectar la estructura del poro de la
superficie que actúan solo a corta distancia y los puentes de membrana, puede tener propiedades electrostáticas diferentes a
hidrógeno. A fuerzas iónicas elevadas las superficies se pueden las de la suspensión de desafío estándar usada para establecer
cerrar debido a una descarga mediada por el electrolito hasta la integridad de las especificaciones de prueba, y puede
SISTEMAS CRÍTICOS
un punto en que puede ocurrir una adsorción hidrofóbica. Por cambiar el tamaño y forma de los microorganismos de desafío.
otra parte, la alta fuerza iónica puede deshidratar a la célula, Los factores a considerar durante el desarrollo de un protocolo
reduciendo su tamaño, lo cual puede disminuir la probabilidad de validación de la esterilización por filtración incluyen la
de retención, dependiendo de la composición de la biocarga tensión superficial, el pH, la temperatura y la osmolaridad del
previa a la filtración. La tensión superficial y la presencia de líquido que se va a filtrar; la compatibilidad del material o los
agentes tensoactivos influyen sobre la retención. La adsorción componentes de la solución con el filtro mismo; las presiones,
de agentes tensoactivos por parte del filtro y el las velocidades de flujo y los golpes hidráulicos que
microorganismo generan repulsión, lo que conlleva a una probablemente se encontrarán; y el tiempo de filtración
reducción en la probabilidad de retención. Los agentes máximo y el volumen que se va a filtrar. Asimismo, se debe
tensoactivos en concentraciones tan bajas como 0.05 % han considerar el efecto que tiene la esterilización del filtro (por
demostrado inhibir la adsorción y reducir la retención de vapor, radiación o gas) sobre su capacidad de retención.
esferas de látex. El B. diminuta (ATCC 19146) se usa como organismo de
desafío a menos que no sea viable en el líquido que se va a
Condiciones de filtración filtrar. Los estudios de viabilidad deben usarse para confirmar
La presión diferencial, la velocidad de flujo y la temperatura se que el líquido no tenga efectos adversos sobre el organismo de
encuentran entre los factores que pueden afectar la retención desafío. Si éste último es viable en el líquido que se va a filtrar,
microbiana. Se deben evitar los golpes hidráulicos, no sólo el líquido debe inocularse para lograr un nivel de desafío de
debido a que afectan la presión diferencial y la velocidad de 1 × 107 UFC/cm2, y el filtrado debe evaluarse para determinar
flujo, sino porque también pueden dañar el filtro. La velocidad la presencia del organismo de desafío.
de flujo es proporcional a la presión diferencial, y velocidades Si el B. diminuta no es viable en el líquido, existen diversas
de flujo mayores reducen la adsorción debido a que se reduce opciones disponibles, y los analistas pueden:
el tiempo de contacto.
La retención microbiana puede disminuir a temperaturas más 1. Modificar el líquido para asegurar la viabilidad del
altas cuando éstas resultan en velocidades de flujo mayores organismo de desafío (por ejemplo, ajustar el pH o
debido a la reducción en la viscosidad de la solución. Los eliminar el componente bactericida).
efectos de la temperatura no son significativos en filtros en los 2. Reducir el tiempo de exposición para asegurar que el
que la retención por tamizado es el mecanismo primario de organismo de desafío se mantenga viable.
remoción. 3. Cambiar el organismo de desafío de B. diminuta a uno
que se haya aislado del líquido que se va a filtrar.
Eficacia del filtro: valor de reducción logarítmica
La eficacia de la filtración se puede definir en términos de un Estos estudios deben llevarse a cabo utilizando los valores de
valor de reducción logarítmica, que es el logaritmo del presiones diferenciales del proceso de producción o valores de
cociente producido al dividir la población de desafío previa por flujo de proceso, según corresponda.
la población recuperada posterior. Cuando sea posible, se debe usar el líquido que se va filtrar,
El valor de reducción logarítmica se ve influenciado por el puesto que en algunas instancias el organismo de desafío ha
número y el tamaño de los microorganismos de desafío, el conseguido atravesar el filtro en este líquido pero ha sido
diseño del filtro y el polímero de la membrana, los parámetros retenido por el mismo filtro cuando se inocula en un líquido
del proceso de filtración, y las propiedades de la solución. sustituto.
Para determinar el valor específico de reducción logarítmica de Se deben usar tres lotes diferentes de filtros de membrana para
un filtro, la prueba de desafío debe permitir el paso de algo del los estudios de retención microbiana. Las membranas deben
microorganismo de prueba a través del filtro para producir un tener valores de prueba de integridad previos a su uso que sean
denominador. Los filtros de membrana esterilizantes no deben cercanos a la especificación del fabricante para minimizar la
permitir el paso de los microorganismos de desafío posibilidad de que los filtros de producción no cumplan con el
especificados para ese valor de filtro. Por ende, el valor de valor de la prueba de integridad establecido durante la
reducción logarítmica de los filtros esterilizantes se describe validación. Los estudios exitosos de desafío microbiano
como igual o mayor que el logaritmo de la población de arrojan resultados de ausencia de microorganismos detectables
desafío. en el filtrado. El proceso de esterilización para el filtro, su
armazón y el equipo relacionado deben validarse. El filtro se
Validación debe esterilizar dentro de su sistema de ensamblaje en lugar de
Tal como se comentó, la retención microbiana en la confiar en el ensamblaje aséptico después de la esterilización
esterilización por filtración se basa en una combinación de de los componentes del sistema de filtración. El aparato de
retención por tamizado y adsorción. Por consiguiente, la filtración ensamblado se puede esterilizar con vapor en una
validación de la esterilización por filtración requiere autoclave, usando un ciclo de vacío, prestando particular

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atención a la orientación y el envoltorio del armazón, y toda la Un filtro que pasa exitosamente una prueba de integridad
tubuladura asociada para permitir el drenaje del condensado y basándose en las especificaciones desarrolladas durante un 3
la penetración del vapor. También se pueden usar ciclos de estudio de validación efectivo de la esterilización por filtración
esterilización con vapor in situ validados. es capaz de producir un filtrado estéril.
Los métodos y ciclos de esterilización deben ser Los métodos de prueba de integridad para filtros de membrana
cuidadosamente seleccionados y diseñados para evitar daños microporosa incluyen punto de burbuja, flujo difusivo y
SISTEMAS CRÍTICOS
en el filtro. Las pruebas de integridad previas y posteriores a la retención de la presión. El tipo y tamaño de la membrana y el
esterilización se pueden usar para confirmar que el proceso proceso de filtración particular influyen sobre la selección de
de esterilización no cambie el valor de la prueba de integridad un método de prueba de integridad apropiado. La sensibilidad
y para demostrar que el proceso de esterilización no daña de la prueba de punto de burbuja se reduce con un área de filtro
el filtro. creciente debido al incremento del flujo difusivo. Las pruebas
Finalmente, se debe considerar a qué escala se debe realizar la de integridad de punto de burbuja, de flujo difusivo y de
validación. Existen dos enfoques comunes. Uno emplea una retención de la presión se usan para filtros de membrana
pequeña sección del material de la membrana, generalmente un microporosos hidrofílicos. Tal como se muestra en la figura 7,
disco de 47 mm, para representar al filtro. Este enfoque valida el flujo difusivo se presenta a presiones por debajo del punto de
la capacidad de retención microbiana de la membrana. Un burbuja, y el flujo en masa se presenta por encima del punto de
segundo enfoque emplea la configuración prevista del filtro, burbuja. El punto de burbuja marca la transición entre el flujo
generalmente un cartucho de 10 pulgadas en su armazón. Este difusivo y el flujo en masa. El punto de burbuja exacto es
enfoque valida el desempeño del sistema de filtro además de la difícil de detectar en filtros con área superficial alta, debido a
capacidad de retención del material de la membrana. Los que el área superficial alta de la membrana genera una difusión
analistas deben considerar el volumen del líquido de prueba significativa. La prueba de integridad se puede llevar a cabo de
y las condiciones operativas al seleccionar el enfoque que forma manual o mediante equipo automatizado, diseñado
van a usar. específicamente para dicho propósito.
Principios y métodos de la prueba de integridad PUNTO DE BURBUJA

La prueba de integridad se puede usar para mostrar que un El punto de burbuja ocurre cuando un gas desplaza a un
filtro tiene la clasificación correcta de tamaño de poro, que está líquido humectante de los poros más grandes de la membrana,
instalado apropiadamente en su armazón y que no ha sufrido lo que resulta en un flujo en masa de gas a través de dichos
daños derivados del proceso usado para su esterilización. Estos poros. El flujo se manifiesta como una corriente continua de
métodos de prueba de integridad por lo general se basan en la burbujas a través de una columna de agua en la cara inferior de
detección del flujo de gas ocasionado por una presión la membrana.
diferencial a través de la membrana humedecida. La figura El punto de burbuja se relaciona con el tamaño de poro de la
7 muestra la relación entre el flujo de gas y la presión membrana y el ángulo de contacto que el líquido humectante
diferencial para membranas de área superficial alta y de área forma con la pared del poro. El punto de burbuja es
superficial baja (un disco de membrana de 47 mm se puede indirectamente proporcional al tamaño de poro de la
considerar un área superficial baja, mientras que un conjunto membrana y directamente proporcional a la tensión superficial
de cartuchos múltiples de filtros de cartucho de 10 pulgadas se del líquido humectante; es decir, los filtros con tamaños de
puede considerar un área superficial alta). poro menores tienen puntos de burbuja más altos que aquéllos
con poros grandes, y los líquidos que humectan fácilmente la
membrana presentan puntos de burbuja más altos que los que
no lo hacen. El punto de burbuja se define como:
Donde:
P = Presión para evacuar el poro.
γ = Tensión superficial.
θ = Ángulo de humectación.
D = Diámetro del poro.
La retención microbiana y el punto de burbuja están
correlacionados: numerosos estudios han demostrado que
cuando el cociente de reducción microbiana se gráfica en
función del punto de burbuja, resulta una línea de pendiente
constante.
El punto de burbuja verdadero es independiente del área
superficial de la membrana, pero el flujo difusivo a través de
Figura 7. Relación entre el flujo de gas y la presión diferencial los filtros de área superficial alta pueden enmascarar el punto
para membranas de alta área superficial y baja área superficial de burbuja real. La prueba del punto de burbuja es fácil de
(véaselas definiciones en la sección Principios y métodos de la realizar en filtros de escala pequeña a media, el tiempo de
prueba de integridad). prueba es corto y los efectos de la temperatura son mínimos.

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La prueba del punto de burbuja manual requiere manipular la tubuladura. La temperatura debe mantenerse constante debido
3 cara inferior del filtro y es subjetiva. a la relación entre esta y la presión definida por la ley de los
gases ideales.
FLUJO DIFUSIVO La conversión de los resultados de la prueba de caída de
En la prueba de flujo difusivo, un filtro humedecido provee presión a valores de flujo difusivo permite la correlación con la
una capa de líquido a través de la cual el gas puede fluir retención microbiana. Los analistas establecen la relación entre
mediante difusión. El flujo difusivo se mide directamente a la caída de presión y el flujo difusivo calculando el flujo
SISTEMAS CRÍTICOS
presión constante. difusivo con respecto a la caída de la presión por unidad de

El flujo difusivo es proporcional a la presión diferencial del tiempo, usando un volumen anterior conocido y una presión de
gas de prueba, la difusividad del gas de prueba en el líquido referencia. El flujo difusivo, se relaciona con la caída de la
humectante, el espesor (profundidad) del líquido humectante, presión, mediante la siguiente ecuación:
la porosidad (es decir, volumen muerto) de la membrana y el
área de filtración efectiva. El flujo difusivo se define mediante
la Ley de Difusión de Fick, que se expone de la siguiente
manera: Donde:
D = Difusión.
p1 = Presión inicial de la prueba.
V1 = Volumen anterior al sistema de filtro.
Donde: p0 = Presión atmosférica.
N = Velocidad de permeación (moles de gas por unidad de t = Tiempo de la prueba.
tiempo). p2 = Presión final de la prueba.
D = Difusividad del gas en el líquido. ∆p = p1 × p2.
H = Coeficiente de solubilidad del gas.
p1 - p2 = Diferencia de presión a través de la membrana Las ventajas y desventajas de la prueba de retención de la
(presión diferencial). presión son similares a las de la prueba de flujo difusivo. La
L = Espesor de líquido en la membrana. prueba de retención de la presión tiene las capacidades
ρ = Volumen muerto (porosidad) de la membrana. adicionales de revelar imperfecciones en el ensamblaje y sello
del armazón y colocación del filtro y de evitar la manipulación
A diferencia de la prueba del punto de burbuja, la prueba de posterior. Sus desventajas radican en que se ve fuertemente
flujo difusivo mide el flujo de gas a través de todos los poros influenciada por la temperatura y que requiere una medición
humedecidos y, por lo tanto, el flujo difusivo no se exacta del volumen anterior.
correlaciona directamente con la retención microbiana. No
obstante, las pruebas de desafío bacteriano con una serie de Cuándo se debe realizar la prueba de integridad
filtros que presentan velocidades de difusión decrecientes La decisión de no realizar una prueba de integridad previa al
muestran que existe una velocidad de difusión de gas por uso y a la esterilización debe basarse en una evaluación formal
debajo de la cual se obtienen filtrados estériles. de riesgos.
La prueba de flujo difusivo es altamente sensible, en especial La prueba de integridad realizada luego de la esterilización y
para membranas con áreas superficiales más altas. Se pueden previo al uso puede crear un riesgo innecesario de
detectar poros más grandes o imperfecciones mediante un contaminación microbiana para el filtro y las tubuladuras
adelgazamiento de la capa de líquido y velocidades de flujo asociadas, y equipamiento siguientes. La prueba de integridad
difusivo correspondientemente mayores. Las pruebas de flujo previa al uso y posterior a la esterilización es innecesaria
difusivo son útiles para membranas con tamaños de poro cuando se ha demostrado mediante estudios de validación que
pequeños (por ejemplo, 0.1 µm y menores) debido a que en el proceso para esterilizar el filtro no afecta el valor de la
estos casos se requieren presiones altas para la prueba del prueba de integridad del filtro. Se debe llevar a cabo la prueba
punto de burbuja. La prueba de flujo difusivo mide el flujo a de integridad posterior a la filtración para asegurar que el filtro
través del volumen total de los poros, lo que puede enmascarar no se haya dañado durante el proceso de filtración.
una imperfección, especialmente en configuraciones de
cartuchos múltiples con áreas superficiales alta. Esta prueba CONTROL DE LA BIOCARGA PREVIO A LA
también es altamente sensible a la temperatura. FILTRACIÓN
RETENCIÓN DE LA PRESIÓN La capacidad de remoción de la biocarga depende de la

La prueba de integridad por retención de la presión es una capacidad de retención del filtro disponible, la cual depende de
variación de la prueba de flujo difusivo. La membrana la carga de biocarga inherente, presente en el volumen
humedecida provee una capa de líquido a través de la cual el completo del líquido que se va a filtrar y el área superficial
gas puede fluir mediante difusión. El flujo de gas es efectiva del filtro. Se ha demostrado mediante estudios que la
proporcional a la presión diferencial y se mide mediante la retención microbiana en la esterilización por filtración es una
caída de la presión en la cara anterior de la membrana. función de la biocarga previa. Asimismo, la capacidad de
La velocidad de la caída de la presión se ve influenciada por el retención del filtro se puede ver influenciada por las partículas
volumen anterior para la combinación de armazón-filtro, en no viables que pudieran estar presentes en la solución. Por lo
particular, la colocación de la válvula y el volumen de la tanto, se debe minimizar y controlar los niveles previos de la

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biocarga y de partículas antes del paso final de esterilización estudios de material extraíble y lixiviables para asegurarse de
por filtración. que el filtro no libere niveles cuestionables de estos materiales 4
Se pueden usar diversas configuraciones de filtro y diversos en los sistemas de disolventes comúnmente empleados en la
procesos para controlar la biocarga y los niveles de partículas fabricación de productos farmacéuticos. El fabricante del filtro
no viables que se confrontan finalmente al filtro esterilizante. realiza pruebas de limpieza para asegurarse de que el filtro no
Una configuración consiste en un arreglo de múltiples filtros afecte de manera adversa los requisitos de partículas de la DSP
SISTEMAS CRÍTICOS
que consta de dos filtros esterilizantes (o un filtro de reducción para el producto. Finalmente, el fabricante del filtro provee
de biocarga seguido de un filtro esterilizante) conectados en asistencia técnica y asesoría sobre resolución de problemas a
serie (figura 8). los usuarios del filtro.
Usuario del filtro

El usuario del filtro tiene la responsabilidad de establecer una
retención microbiana acorde al valor validado de la prueba de
integridad, de establecer una retención microbiana en el
líquido que se va a filtrar, y de validar el uso y esterilización
del filtro y su ensamble. El usuario del filtro es responsable de
determinar que el filtro no afecte adversamente la composición
Figura 8. Configuración multifiltro para controlar la biocarga del líquido filtrado mediante adición o extracción.
y las partículas no viables.
RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS
Otra configuración apropiada para el control de biocarga
previo a la filtración utiliza dos etapas de filtración separadas El incumplimiento de un filtro con la prueba de integridad
en el tiempo: el líquido se esteriliza por filtración en un tanque puede significar que el filtro está dañado, que el ensamble no
esterilizado en el cual se conserva antes de realizar una está adecuadamente sellado, que no está humedecido por
esterilización por filtración final (figura 9). completo o que no está íntegro. También puede significar que
el filtro se ha etiquetado incorrectamente (por ejemplo, tiene el
tamaño de poro incorrecto) o que el aparato de la prueba de
integridad no ha sido configurado o calibrado de manera
apropiada.
La causa de incumplimiento con una prueba de integridad se
puede determinar evaluando la configuración de la prueba, los
parámetros de prueba, el fluido humectante y el procedimiento
de humectación; asegurándose de que el sistema esté exento de
pérdidas y que la temperatura sea constante; y asegurándose de
Figura 9. Control de biocarga usando dos etapas de filtración. que el equipo de prueba se haya calibrado apropiadamente.
Cuando no sea posible determinar la causa del incumplimiento,
En cada uno de estos escenarios, la biocarga y los niveles de los analistas pueden volver a humedecer el filtro y repetir la
partículas que se confrontan finalmente al filtro esterilizante prueba de integridad, incrementando así el tiempo de purga, el
son bajos y se controlan mediante prefiltración. volumen de purga y la presión diferencial. Puede resultar
Cuando el proceso resulta en una biocarga previa a la filtración beneficioso usar un fluido de referencia con una tensión
consistentemente baja y controlada, resulta apropiado el uso de superficial menor (por ejemplo, alcohol isopropílico al 70 %).
un solo filtro esterilizante. Sin importar la estrategia empleada, Cuando el filtro no cumpla con la prueba de integridad usando
los estudios de validación deben demostrar la capacidad para el líquido de referencia, se deberá considerar como falto de
obtener de manera consistente los niveles requeridos de integridad. Además, el filtro puede devolverse al fabricante
biocarga previa a la filtración, así como la reducción y control para un análisis completo para dilucidar con mayor detalle la
del nivel de partículas. causa del incumplimiento con la prueba de integridad.
RESPONSABILIDADES
Fabricante del filtro

4. ESTERILIZACIÓN CON FASE
El fabricante del filtro es responsable de asegurar que el LÍQUIDA
proceso de producción del filtro haya sido validado y esté bien INTRODUCCIÓN
controlado, y de que los filtros esterilizantes cumplan con los
requisitos de la norma ASTM F838-05 (201.3). Asimismo, el Los microorganismos están sujetos a destrucción mediante una
fabricante del filtro determina la especificación de la prueba de variedad de métodos. Además de los métodos clásicos por
integridad para los filtros, y generalmente agrega un factor de vapor, calor seco y radiación, la esterilización destructiva
riesgo para asegurarse de que cada filtro cumplirá con dicha puede ocurrir también por inmersión en una solución química.
especificación. El fabricante del filtro también lleva a cabo Esto se denomina esterilización en fase líquida. Un número de
4. ESTERILIZACIÓN CON FASE LÍQUIDA

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agentes químicos, tales como los aldehídos, los ácidos, las VALIDACIÓN DE LA ESTERILIZACIÓN POR
4 bases y los oxidantes fuertes en solución, bajo las condiciones LÍQUIDOS
adecuadas, son capaces de destruir las bacterias y hongos,
incluyendo tanto a las células vegetativas y las esporas de La evidencia experimental de la validación de esterilización
manera cuantitativa. Los objetos a ser esterilizados se por líquidos ha demostrado que utilizar el concepto de cinética
sumergen en la solución del agente químico, tras lo cual el de primer orden es adecuado para la destrucción microbiana, lo
agente debe eliminarse de manera tal de que se conserve al que hace de la validación un ejercicio sencillo. La validación
SISTEMAS CRÍTICOS
objeto esterilizado de una recontaminación. La eliminación del de la esterilización por líquidos puede lograrse mediante el
agente químico esterilizante de las superficies expuestas que enfoque de medio ciclo o por el método de interpolación
han sido esterilizados debe realizarse manera tal de mantener la (selección de extremos).
esterilidad del artículo después de la recontaminación cae fuera
del ámbito de la consideración habitual para los procesos de Enfoque de medio ciclo
esterilización. Sin embargo, en la esterilización química líquida El enfoque de medio ciclo que se describe a continuación es
es costumbre que se incluya la eliminación del agente (si esto una modificación del método descrito en la sección de
se logra por medios físicos o químicos) en el proceso general, Esterilización gaseosa de este capítulo (véase la figura 10). Es
junto con las medidas adicionales necesarias para evitar su un método que requiere la destrucción de un microorganismo
recontaminación. resistente a condiciones de letalidad definidas. En la operación
Un número considerable de líquidos en solución acuosa son de rutina, el período de permanencia en el proceso se duplica
capaces de esterilizar artículos durante la inmersión. Algunos arbitrariamente y soporta una reducción teórica del indicador
ejemplos son los siguientes: biológico (y por lo tanto la carga microbiana) a una
probabilidad de una unidad no estéril de por lo menos 10-6 para
Aldehídos: glutaraldehído, formaldehído. un ciclo completo.
Ácidos: ácido peracético, ácido nítrico, ácido sulfúrico.
Bases: hidróxido de sodio, hidróxido de potasio.
Compuestos oxigenantes: el peróxido de hidrógeno,
ozono, dióxido de cloro.
Haluros: hipoclorito de sodio, cloro.
Como en el caso de la esterilización con gas, la efectividad de

los químicos esterilizantes varía con la concentración y la
temperatura. Otros factores que afectan la actividad
antimicrobiana incluyen el pH, el grado de mezcla (si está
presente) y la presencia de restos celulares u otros desechos.
Debido al número limitado de variables, el control de proceso
para la esterilización por líquidos es relativamente simple.
Debido a que no hay indicadores biológicos ampliamente
aceptados para la esterilización por líquidos, el uso de un
mesófilo formador de esporas tal como Bacillus atrophaeus o
B. subtilis es común porque son los aislamientos de biocarga
en el peor de los casos probables. Figura 10. Validación de medio ciclo de esterilización.
Los agentes utilizados para la esterilización por líquidos varían
con respecto a la estabilidad del agente esterilizante, el rango El método de esterilización de medio ciclo se utilizó
de pH efectivo, la concentración, la temperatura, el tiempo de originalmente para óxido de etileno cuando la relación entre
contacto requerido y la interacción potencial con los los microorganismos y los parámetros de proceso
materiales. Cuando se selecciona el agente esterilizante más proporcionados eran menos seguros.
apropiado, los fabricantes deben considerar su efecto sobre los
materiales, componentes de empaque y los equipos, como es el Enfoque por el método de interpolación
caso de los otros procesos de esterilización. La variedad de En este método (véase figura 11), los analistas evalúan las
agentes, la diversidad de procesos y las aplicaciones condiciones de concentración y temperatura que indiquen y
potenciales imposibilita una revisión por el material de estos soporten la condición de proceso definido tanto para el
agentes en este capítulo. Los fabricantes deben tener en cuenta sobretratamiento como para el subtratamiento de los materiales
que estos agentes son altamente tóxicos, y deben ser y la carga microbiana, respectivamente. Los usuarios pueden
practicadas en todo momento medidas de seguridad apropiadas establecer la tasa de mortalidad de la población microbiana
durante el desarrollo del ciclo, la validación y la operación de para cada una de las condiciones que estén establecidas en el
rutina. proceso rutinario.
4. ESTERILIZACIÓN CON FASE LÍQUIDA

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Proceso de confirmación/desafío microbiológico

El núcleo de la actividad de validación es la confirmación de 5
los parámetros aceptables y la inactivación del reto
microbiano. El usuario final debe esperar una curva de muerte
lineal para el desafío de esporas y requieren la muerte total del
desafío. El usuario final puede considerar ajustes en la
SISTEMAS CRÍTICOS
concentración del agente químico esterilizante, el tiempo de
proceso, la agitación y otros factores. La prueba de la eficacia
del ciclo es proporcionada mediante la repetición de los
estudios en los que los indicadores biológicos mueren y las
mediciones físicas se documentan.
Neutralización/eliminación del agente esterilizante

Después de la exposición al agente esterilizante, este debe ser
eliminado de los artículos o neutralizados adecuadamente antes
de proseguir. Este segmento del proceso utiliza la neutralización
química o la eliminación física y debe ser ejecutado de una
manera que preserve la esterilidad de los artículos. Debe
realizarse un procesamiento aséptico con demostración de la
Figura 11. Método de interpolación. capacidad adecuada. La simulación de proceso comienza con la
terminación de la esterilización a través de la colocación de los
Independientemente del enfoque utilizado, para completar los artículos en un recipiente estéril cerrado. Véase la sección de
ciclos de desarrollo y validación los fabricantes deben Esterilización y garantía de esterilidad de insumos para la
identificar un método de neutralización rápida que inactive el salud para obtener información adicional.
agente químico para permitir la cuantificación microbiana
después de la exposición fraccional de muerte. Los periodos de Control rutinario de proceso
exposición necesitan ser breves porque muchos de estos Esterilización de fase líquida debe someterse a controles que
agentes tienen tasas de muerte rápida. mantienen el estado validado. Las prácticas se describen en la
sección de Esterilización de insumos para la salud de este
Calificación de equipo capítulo que menciona los requisitos generales para todos los
La calificación de equipo es un programa predefinido que sistemas de esterilización. La esterilización se logra por medio
examina al equipo para confirmar que ha sido instalado de una serie de prácticas relacionadas que son esenciales para
correctamente y funciona según lo previsto antes de llevar a el uso continuo del proceso durante un período prolongado de
cabo el proceso de esterilización. Esta actividad para la tiempo, incluyendo la calibración, las mediciones químicas y
esterilización mediante productos químicos líquidos es simple, físicas, el control continuo de proceso, el control de cambios,
porque el equipo utilizado es rara vez complejo. Los controles el mantenimiento preventivo, la reevaluación periódica y el
de temperatura y de la velocidad de agitación/recirculación son entrenamiento.
consideras esenciales.
Definición de componente y carga 5. ESTERILIZACIÓN CON GASES

La esterilización por líquidos es un fenómeno superficial, y
todas las superficies de los materiales deben estar inmersas en INTRODUCCIÓN
el agente esterilizante. La Uniformidad del tratamiento puede
El uso de gases esterilizantes para la preparación de materiales
ser asegurada por recirculación o mezcla del agente
y equipo es común para artículos que son susceptibles a daños
esterilizante durante el proceso. Debe confirmarse la
por procesos de calor o radiación. Las superficies de muchos
penetración del agente esterilizante en agujas de diámetro
materiales poliméricos, en especial los dispositivos médicos, se
interno pequeñas, en piezas ajustadas estrechamente y en
esterilizan usando este método, pues se trata de un proceso
materiales porosos. El uso de una carga máxima por recipiente
exento de presión. La esterilización de polvos secos usando
o envase definido representa el peor de los casos porque este
gases resulta inapropiada debido a la incapacidad de los gases
proporciona el área superficial máxima a ser esterilizada.
para penetrar materiales sólidos. La mayoría de los procesos de
esterilización con gases emplean óxido de etileno (OE), y los
Indicadores biológicos procedimientos para usar con otros gases por lo general se
Los organismos indicadores comunes para esterilización delinean siguiendo las prácticas para OE. El ozono, los óxidos
química son B. atrophaeus ATCC 9372 o B. subtilis ATCC de nitrógeno mezclados y el dióxido de cloro son algunos de
6633. El desafío de esporas se inocula directamente en los los otros gases esterilizantes usados. [Los sistemas que pueden
artículos. Los usuarios finales deben determinar las existir en fase líquida y gaseosa a las temperaturas operativas
poblaciones de artículos inoculados. Los fabricantes deben (por ejemplo, peróxido de hidrógeno, ácido peracético y
poner indicadores dentro de las cargas en las localizaciones paraformaldehído) no se consideran en esta sección]. La
que se consideran más difíciles de alcanzar para el agente capacidad del OE para penetrar a través de polímeros,
esterilizante, en base a un examen visual. materiales celulósicos, y otros materiales, permite su uso para
5. ESTERILIZACIÓN CON GASES

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la esterilización terminal de dispositivos médicos en su incluyendo el OE, se deben reducir a niveles seguros antes de
5 empaque final. Los otros gases esterilizantes pueden ser que los artículos puedan ser usados por pacientes. El
adecuados para aplicaciones similares. procesamiento con OE requiere de una estricta seguridad del
El control de procesos para el equipo de esterilización con trabajador así como estrictos controles ambientales debido a
gases se logra controlando la concentración del gas que se relaciona con carcinogenicidad, mutagenicidad y
esterilizante, la humedad relativa, la temperatura y la presión neurotoxicidad. Asimismo, el OE es explosivo en
del sistema. Además, puede resultar beneficioso mezclar el gas concentraciones de más de 2.6 % por volumen en el aire; por
SISTEMAS CRÍTICOS
en la cámara de esterilización. Se podrá usar la liberación lo tanto, a menudo se usan gases inertes para minimizar la
paramétrica que próximamente estará descrita en Productos inflamabilidad. La cepa de indicador biológico (IB)
farmacéuticos con esterilización terminal — Liberación comúnmente aceptada es Bacillus atrophaeus (anteriormente
paramétrica para la esterilización con OE. B. subtilis var. niger).
La esterilización con gases difiere significativamente de
aquellos procesos en los que el agente usado se puede OZONO
condensar durante la operación. Los procesos de esterilización
con vapor se discuten por separado en la sección de El ozono es un potente agente oxidante producido mediante el
paso de una corriente de oxígeno o aire a través de un
Esterilización con fase de vapor.
campoeléctrico de alto voltaje. El ozono es un agente biocida
Conforme a lo descrito en la sección de Esterilización de
efectivo para el tratamiento de suministros de agua y ha
insumos para la salud de este capítulo, los analistas deben
demostrado letalidad a concentraciones de 2 a 10 % en el aire.
tener cuidado de asegurar la esterilidad y demostrar que los
La destrucción microbiana óptima se logra cuando la humedad
atributos de calidad esenciales de los materiales no se ven
relativa está por encima del 80 % a temperatura ambiente. El
afectados de manera adversa por el proceso. Con respecto a los
ozono se degrada a oxígeno en presencia de humedad y
procesos con gases, las consideraciones clave incluyen los
metales y, por lo tanto, regularmente se genera in situ. El
efectos inmediatos del gas esterilizante sobre los materiales o
ozono no penetra materiales porosos al mismo grado que el
el equipo que se está esterilizando, el esterilizante residual, los
OE. La simplicidad de los sistemas de procesamiento que usan
subproductos del esterilizante y las reacciones químicas
ozono para esterilización con gas representa una ventaja. Su
potenciales. Los procesos comunes con gas difieren un poco
generación y destrucción (usando un convertidor catalítico) se
con respecto a la ejecución del proceso y a los asuntos de los
logran sin partes móviles o consumibles además del oxígeno
materiales, por lo que se describen de manera individual.
provisto. El proceso de esterilización usa una secuencia de
humidificación, inyección, exposición y ventilación para
ÓXIDO DE ETILENO
eliminar el ozono de la cámara al final del ciclo. Los IB
comunes identificados para ozono son Geobacillus
El OE es un poderoso agente alquilante que destruye
stearothermophilus y Bacillus atrophaeus.
microorganismos mediante una reacción química,
principalmente con el ADN celular. El mecanismo destructivo
DIÓXIDO DE CLORO
sigue en gran medida una cinética de primer orden y depende
de la concentración, la humedad y la temperatura. El uso de El dióxido de cloro es un gas esterilizante efectivo. El dióxido
OE para esterilizar dispositivos médicos en sus envases finales de cloro puro es metaestable y, por ende, se genera a medida
impacta en gran medida el diseño de otras aplicaciones de los que es requerido. El dióxido de cloro no es carcinogénico ni
procesos de esterilización con OE (y, en menor medida, toda la inflamable y resulta efectivo a temperatura ambiente. Su
esterilización con gas). El proceso con OE común sigue una capacidad para penetrar materiales puede ser menor que la del
secuencia de prehumidificación, eliminación del aire, OE. Un proceso de esterilización típico con dióxido de cloro
rehumidificación en la cámara, exposición al gas, eliminación usa una secuencia de preacondicionamiento, periodo de
del gas de la cámara y aeración posterior a la exposición. Las residencia para acondicionamiento, carga y exposición seguida
etapas previas a la exposición aseguran la presencia de la de aeración. El IB de uso más común es el Bacillus
humedad adecuada sobre y dentro de los artículos que se están atrophaeus.
esterilizando. Las etapas posteriores a la exposición proveen
tiempo para la difusión del OE y sus subproductos fuera de los DIÓXIDO DE NITRÓGENO
materiales y del envase. Cuando el OE se usa para equipos no
porosos, el proceso se puede simplificar, lo cual elimina El dióxido de nitrógeno es un gas esterilizante efectivo a
muchas de las etapas previas y posteriores a la exposición temperatura ambiente. Asimismo, el dióxido de nitrógeno
puesto que sólo se necesita la esterilización superficial. líquido se convierte en gas al introducirlo en la cámara de
Durante la esterilización con OE, el gas es introducido al esterilización, además de que no es explosivo y sus residuos no
inicio, y sólo se necesitan adiciones mínimas posteriores para son carcinogénicos, citotóxicos ni teratogénicos. Presenta una
mantener la presión a medida que el gas se absorbe en la carga capacidad limitada para penetrar materiales poliméricos en
de material/esterilización dentro del contenedor. Asimismo, comparación con el OE, lo que acelera la aeración posterior al
puede ser necesario ajustar la humedad durante el proceso. En ciclo. Es incompatible con materiales celulósicos tales como
algunos casos, el OE reacciona con materiales en la carga para papel y cartón. Los IB sugeridos para dióxido de nitrógeno son
formar etilenclorohidrina y etilenglicol. Estos compuestos, C. stearothermophilus y B. atrophaeus.

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VALIDACIÓN DE LA ESTERILIZACIÓN CON GASES materiales y la biocarga. El tiempo de residencia mínimo letal
del proceso (véase la descripción del medio ciclo anterior) 5
La validación de la esterilización con gases por lo general establece las condiciones más exigentes para la mortalidad
comienza con el establecimiento de un "tiempo de residencia microbiana. Los aumentos graduales del tiempo de residencia
mínimo letal del proceso" a través del uso de estudios de del proceso que rebasan el tiempo de residencia mínimo letal
exposición fraccional. Estos estudios fracciónales establecen del proceso se usan para establecer los periodos de rutina y de
SISTEMAS CRÍTICOS
dicho tiempo de exposición, en condiciones estándares de máxima exposición, teniendo éste último el mayor efecto sobre
procesamiento, cuando el indicador biológico está los materiales. Asimismo, los ajustes en la concentración de
completamente desactivado. Este tiempo de exposición agentes y la humedad relativa se utilizan para mejorar en mayor
mínimo se convierte entonces en el fundamento para la medida el método de interpolación. A través de este método, se
aplicación del método del medio ciclo para validar el ciclo de pueden establecer las condiciones de proceso de rutina entre las
esterilización. Ante la ausencia de información que relacione el condiciones mínimas y máximas del proceso para asegurar la
efecto de las variaciones en la concentración del gas, humedad mortalidad microbiana total, manteniendo al mismo tiempo la
y temperatura sobre los microorganismos, se asume en forma integridad de los materiales.
conservadora en la que la biocarga tiene una resistencia y
población iguales a las del indicador biológico. El método del
medio ciclo se puede definir del siguiente modo.
La validación por el método del medio ciclo requiere la
destrucción de una alta concentración (no menos de 106
esporas) de un microorganismo resistente en condiciones
mínimas definidas para lograr la mortalidad total. Esto
establece el tiempo de residencia mínimo letal del proceso. En
la operación de rutina, el tiempo de residencia del proceso se
duplica arbitrariamente y sustenta una reducción teórica del
indicador biológico (y por ende, de la biocarga) a una
probabilidad de una unidad no estéril (PNSU) de 10-6 (las
definiciones de los términos usados en este capítulo se
encuentran en la sección de Esterilización de insumos para la
salud de este capítulo.
El método del medio ciclo usado para esterilización con gases
se ilustra en la figura 12.
Figura 13. Método de interpolación.
Calificación del equipo

La calificación del equipo para esterilización con gases debe
incluir sistemas previos y posteriores al ciclo para confirmar
que el equipo se ha instalado apropiadamente y opera según lo
previsto.
Parámetro de distribución en la cámara vacía

Aunque se utilicen gases verdaderos, la evaluación del
parámetro de uniformidad a través de la cámara es una
actividad común. Esto asegura que los métodos de
introducción de gas y de humedad se mantengan uniformes en
toda la cámara y que puedan correlacionarse con las
ubicaciones de monitoreo de rutina, cuando se encuentren
presentes. Los indicadores biológicos no son necesarios en la
evaluación de la uniformidad de la cámara vacía.
Figura 12. Validación de la esterilización del medio ciclo.
Mapeo de componentes y de carga
Se encuentran disponibles enfoques alternativos para la El mapeo de componentes y carga usando muestreo invasivo
validación del ciclo. Gillis y Mosley desarrollaron un medio no forma parte de la esterilización con gases puesto que los
para la evaluación paramétrica de las condiciones de sistemas de muestreo colocados dentro de los artículos de carga
esterilización con OE que puede resultar en un mayor uso de alterarían la penetración de gas y humedad. La evaluación de
otros métodos de validación. Se ha usado un método de condiciones letales con artículos individuales y a través de patrones
interpolación (véase la figura 13) que sustenta de mejor de carga se logra de mejor manera mediante indicadores
manera los intervalos operativos del proceso para los biológicos o dispositivos de desafío del proceso, colocados
parámetros críticos con respecto al método del medio ciclo. dentro de los artículos de carga y distribuidos dentro de la
En el método de interpolación, se evalúan las condiciones que misma. Los indicadores o dispositivos de control del proceso se
agrupan la condición definida del proceso para establecer los colocan dentro de los artículos y la carga en sitios donde se
parámetros para los efectos mínimos y máximos sobre los considera más difícil la penetración de gas y humedad.

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Indicadores biológicos prolongados requieren que los artículos de carga no se afecten

6 El indicador biológico de elección para la esterilización con por el calor durante un largo periodo, además de que requieren
gases varía, tal como se indicó anteriormente. El B. el uso del método de sobremuerte para el desarrollo y la
atrophaeus (ATCC 9372) se usa con OE y dióxido de cloro, validación del ciclo.
mientras que la esterilización con ozono se monitorea con C. La esterilización con calor seco por lo regular se lleva a cabo
stearothermophilus (ATCC 12980 ó 7953). Los valores D para en el intervalo de 160 a 190 °C cuando el objetivo se centra en
el indicador biológico se pueden usar para establecer los esterilizar y no en despirogenizar. En la esterilización con calor
SISTEMAS CRÍTICOS
periodos de exposición para el proceso de esterilización, con el seco, el aire caliente entra en contacto directo con los artículos
fin de asegurar la eficacia del proceso adecuado. Al colocar los de carga (con o sin envoltorio) y transfiere algo de su energía
indicadores biológicos dentro de los artículos, es importante térmica. A diferencia de la esterilización con vapor, en la
asegurarse de que la colocación del IB no obstruya el paso del esterilización con calor seco el medio de calentamiento no
gas o interfiera de otra manera con la distribución/penetración experimenta un cambio de fase y, por ende, la transferencia de
del esterilizante dentro del artículo. calor es menos eficiente. Los artículos pueden ser de acero
inoxidable, vidrio, cerámica u otros materiales termoestables, y
Confirmación del proceso y desafío microbiológico pueden estar envueltos o cubiertos con papel aluminio para
La parte más importante de la actividad de validación es la protegerlos durante la manipulación previa y posterior al
confirmación de parámetros aceptables del proceso con la proceso. La esterilización con calor seco se usa comúnmente
medición física y química simultánea y el desafío microbiano. para materiales termoestables (por ejemplo, vaselina o polvos).
Los sensores se colocan en la cámara o se colocan indicadores Debido a que el aire tiene una capacidad de transferencia de
biológicos dentro de los artículos de carga. La prueba de la calor limitada, se requiere que los artículos en el horno se
eficacia del ciclo se obtiene en estudios repetidos en los que se coloquen en sitios que se hayan confirmado como aceptables
mata a los indicadores biológicos y las mediciones físicas durante la validación. Los fabricantes deben tener precaución
corresponden con los niveles esperados. con los tamaños variados de carga debido a que, en algunos
casos (como resultado del diseño del sistema y la colocación de
CONTROL RUTINARIO DEL PROCESO la sonda de control) los tamaños mínimos de carga pueden
representar las condiciones más exigentes.
La esterilización con gases se somete a controles formales que
mantienen un estado validado con el paso del tiempo. Las CONTROL DEL CICLO DE ESTERILIZACIÓN
prácticas descritas en la sección Esterilización de insumos
para la salud de este capítulo incluyen los requisitos generales El equipo para la esterilización con calor seco se controla
apropiados para todos los sistemas de esterilización. La mediante sensores de temperatura calibrados. Durante los
esterilización se logra mediante una variedad de prácticas periodos de exposición del ciclo, la consecución de un tiempo
relacionadas que son esenciales para el uso continuo del de residencia mínimo a una temperatura predefinida se usa
proceso durante un periodo extenso. Las prácticas esenciales para documentar la letalidad del proceso. La eficacia del ciclo
para mantener el estado validado incluyen la calibración, las para esterilización con calor seco por lo general se mide
mediciones físicas, el control continuo del proceso, el control usando FH que comúnmente se define como la cantidad de
de cambios, el mantenimiento preventivo, la reevaluación y tiempo durante el cual la carga recibe el equivalente a una
capacitación periódicas. Cuando no se ha establecido la exposición a 170 °C. Se usa para comparar procesos de
liberación paramétrica, los indicadores biológicos colocados esterilización que operan en condiciones de temperatura
dentro de la carga se usan para la liberación de rutina de cada variables con un solo estándar. Se puede calcular la letalidad
carga de esterilización, junto con una revisión de la del proceso a temperaturas diferentes de 170 °C para
documentación obtenida del sistema de control del determinar la letalidad equivalente a aquella provista a 170 °C.
esterilizador. Los sistemas de control del esterilizador deben generar las
condiciones para la relación FH de tiempo y temperatura dentro
de un intervalo definido. Se pueden usar matemáticas simples
para calcular la letalidad total durante el transcurso del
6. ESTERILIZACIÓN CON CALOR proceso. Para la temperatura de referencia específica de 170 °C
SECO y un valor z (las definiciones se encuentran en la sección de
Esterilización con vapor de agua por contacto directo de este
La esterilización con calor seco es un proceso utilizado para capítulo) de 20 °C, el cálculo FH se puede determinar usando la
artículos termoestables (vidrio, acero inoxidable, líquidos no siguiente ecuación:
acuosos, polvos, etc.) que no son adecuados para la
esterilización con vapor debido a la ausencia de agua (líquidos
no acuosos y polvos) o a los requisitos de sequedad absoluta
posterior al procesamiento (partes de contacto de los productos
para productos no acuosos). Debido a que el calor seco Donde:
depende del aire para la transferencia de calor hacia y desde FH = Letalidad acumulada.
los artículos de carga, el proceso toma más tiempo que un t2 = Tiempo final.
proceso con vapor para un artículo o carga de tamaño t1 = Tiempo inicial.
comparable. Los periodos de calentamiento y enfriamiento T = Temperatura.
6. ESTERILIZACIÓN CON CALOR SECO

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La acumulación de letalidad (FH) para el proceso de Mapeo de componentes

esterilización a través del ciclo completo (incluyendo los Los artículos de carga que son complejos y que presentan 6
segmentos de calentamiento y enfriamiento) incluye la volúmenes y superficies de contacto del producto inaccesibles
contribución de tales segmentos y permite definir el ciclo deben someterse al mapeo de componentes para determinar los
mediante una letalidad predeterminada en lugar de un tiempo a puntos fríos internos. Esto resulta de particular importancia en
la temperatura mínima definida. la esterilización de polvos. Para cada artículo de carga, los
SISTEMAS CRÍTICOS
fabricantes deben establecer la capacidad del calor para
VALIDACIÓN DE LA ESTERILIZACIÓN CON penetrar los artículos o envases y para llevarlos a la
CALOR SECO temperatura requerida. Estos estudios se pueden llevar a cabo
en un ambiente de laboratorio y no necesitan ser repetidos
Debido a que el aire tiene una capacidad de calor limitada y a cuando el mismo artículo se esterilice en otro equipo. Los
que las condiciones de calor seco son más variables que las termopares deben colocarse en contacto directo con los
encontradas con otros métodos de esterilización terminal, artículos que se están evaluando. Durante el mapeo de
los analistas validan de manera rutinaria sus procedimientos de componentes, los artículos de carga deben prepararse y
esterilización con calor seco usando el método de sobremuerte orientarse de una manera tal que sea congruente con la forma
conforme a lo definido en la sección de Esterilización de en que van a procesarse.
insumos para la salud de este capítulo.
La esterilización por sobremuerte se puede definir como un Mapeo de carga
método en el que la destrucción de una alta concentración de En hornos para partidas se prefieren los patrones de carga fijos
un microorganismo resistente sustenta la destrucción de una para esterilización con calor seco debido a que la capacidad de
biocarga razonablemente prevista que pudiera estar presente calor limitada del aire genera diferencias de temperatura
durante el procesamiento de rutina. Dicho objetivo se puede significativas en toda la carga. Puede ser posible validar las
demostrar al conseguir cualquiera de los siguientes puntos: una cargas máximas y mínimas conforme a lo determinado ya sea
letalidad mínima definida; una serie de condiciones del método por el número de artículos o su masa dentro del horno. La
definidas; o la confirmación de una reducción logarítmica carga en un proceso de túnel continuo se define típicamente
mínima de un indicador biológico resistente. por las limitaciones del sistema transportador en línea. El
Los requisitos de validación para el método de sobremuerte mapeo de la carga y de los componentes asegura que todos los
son menos onerosos que los de los otros enfoques de artículos de la carga alcancen la temperatura requerida. La
esterilización. Debido a que los artículos de carga pueden información obtenida del mapeo de carga se usa para ajustar el
resistir cantidades significativas de calor sin sufrir efectos tiempo del ciclo a fin de asegurar la letalidad apropiada. El
adversos, resulta claramente justificable la mayor letalidad control del sistema debe considerar la relación entre la
provista por el método de sobremuerte. posición de la carga y el tamaño con respecto a los sitios de
control de la temperatura.
Calificación del equipo
La calificación del equipo es un programa predefinido que se Indicadores biológicos
enfoca en el equipo de esterilización para confirmar que éste El indicador biológico (IB) para esterilización con calor seco
ha sido apropiadamente instalado y que opera conforme a lo es el Bacillus atrophaeus (ATCC 9372), un formador
planeado antes de la evaluación del proceso de esterilización. termofílico de esporas con una alta resistencia al calor seco. El
En algunas compañías, la calificación del equipo se separa en desafío de las esporas se coloca en un sustrato colocado dentro
calificación de la instalación y en calificación operativa, o se de la carga o sobre un artículo de la carga. Si las esporas se
agrupa usando una terminología de calificación de la usan conforme a lo previsto por el fabricante del IB, se puede
instalación/operativa conjunta. El uso principal de la usar la información sobre población y resistencia
calificación del equipo de esterilización es proveer una línea proporcionada por el proveedor. Los usuarios finales deben
base para mantenimiento preventivo y control de cambios, determinar la población y la resistencia de su indicador
asegurando la reproducibilidad de la operación con el paso del biológico usado al inocular sus propios artículos.
tiempo y garantizando que el proceso de esterilización se
realice de manera uniforme y con exactitud. Penetración del calor y desafío microbiológico
Lo más importante de la validación es confirmar que haya una
Distribución de la temperatura en la cámara vacía penetración de calor aceptable usando mediciones de
El equipo se debe evaluar para determinar la distribución de la temperatura y desafíos microbianos. Los termopares e IB se
temperatura en la cámara vacía. El horno o el túnel debe ser colocan dentro de los artículos de carga en los sitios
evaluado para determinar el intervalo de temperaturas dentro determinados durante el mapeo de los componentes y de la
del sistema, y los parámetros del ciclo deben determinarse para carga para representar las condiciones más exigentes. Los
asegurar una letalidad adecuada a través de la carga esperada. termopares deben colocarse en contacto directo con los
Los criterios de aceptación para cámaras vacías pueden variar artículos que se están monitoreando. La evidencia de la
con las capacidades del equipo y el uso común, pero por lo eficacia del ciclo se obtiene mediante estudios repetidos en los
general son menos uniformes que los observados en los que se mata a los IBy las mediciones físicas se corresponden
esterilizadores con vapor. Los indicadores biológicos no son con los valores esperados de tiempo-temperatura o FH. Si las
necesarios durante la evaluación de la distribución de la mediciones microbianas y físicas no están correlacionadas, los
temperatura en la cámara vacía. fabricantes deben llevar a cabo una investigación y deben
6. ESTERILIZACIÓN CON CALOR SECO

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tomar acciones correctivas para rectificar la discrepancia. Este seleccionada: método VDmaxSD. Estos métodos incluyen el
7 estudio por lo regular se realiza ligeramente por debajo de las método 1, el método 2A, el método 2B y el método VDmax, los
especificaciones mínimas de tiempo, temperatura y/o letalidad cuales difieren en su esquema específico de análisis y en el
acumulativa. número de artículos que se necesitan para analizar, además de
que se basan en ciertas hipótesis sobre la biocarga. El uso de un
CONTROL DEL PROCESO DE RUTINA indicador biológico resulta inapropiado durante la validación
de la esterilización con radiación debido a que (a) existen
SISTEMAS CRÍTICOS
Al igual que con todos los procesos de esterilización, después correlaciones exactas entre la medición de la dosis y la
de haber validado el proceso de esterilización, éste debe destrucción microbiana para un amplio rango de
someterse a controles formalizados que lo mantengan dentro microorganismos y (b) los métodos establecidos para el
del estado validado con el transcurso del tiempo. La sección de establecimiento de la dosis se basan en la biocarga del material
Esterilización de insumos para la salud de este capítulo detalla en su estado natural. Estas correlaciones han sido desarrolladas
las prácticas generales que son apropiadas para todos los por la industria de los dispositivos médicos y proveen una
sistemas de esterilización. Esto se logra mediante una variedad metodología directa para el control de procesos. La dosimetría
de prácticas relacionadas que son esenciales para el uso desempeña un papel central en la esterilización con radiación y
continuo del proceso durante un periodo prolongado. Las funciona como un medio directo para afirmar la letalidad del
prácticas esenciales para mantener el estado validado incluyen proceso. La dosis de radiación medida en kGy (anteriormente
la calibración, las mediciones físicas, los integradores e MRads) se relaciona directamente con los efectos letales de la
indicadores físicos, los controles continuos del proceso, el radiación sobre los microorganismos. La dosis medida tiene la
control de cambios, el mantenimiento preventivo y la misma utilidad que F0 en la esterilización con vapor. El control
reevaluación y capacitación periódicas. del proceso de rutina para la esterilización con radiación se
provee mediante uno o más dosímetros de referencia en el
exterior de los empaques (después de que los dosímetros han
sido correlacionados durante la validación con la medición de
7. ESTERILIZACIÓN CON la dosis dentro del empaque). La robustez y confiabilidad de la
dosis absorbida del artículo que se va a esterilizar podrá
RADIACIÓN sustentar la liberación paramétrica, que será tratada
INTRODUCCIÓN próximamente en la sección de Productos Farmacéuticos con
Esterilización Terminal-Liberación Paramétrica, para muchos
La esterilización con radiación emplea el efecto letal de artículos.
diversas formas de radiación como medio de destrucción
microbiana. La esterilización con radiación ionizante (gamma, ESTERILIZACIÓN GAMMA
rayos X o haces de electrones) se usa extensamente para la
esterilización de dispositivos médicos y para una variedad de La esterilización gamma implica el uso de una instalación
otros materiales y productos. Los métodos de esterilización no específicamente diseñada donde los artículos que se van a
ionizante tales como microondas, infrarrojo y luz ultravioleta esterilizar se exponen a una fuente de radiación de Co60 en una
pueden ser útiles, pero tienen aplicaciones más restringidas, manera que asegure la dosificación uniforme. Los fotones de
por lo que quedan fuera del alcance de este capítulo. Este alta penetración (rayos gamma) son emitidos a partir de Co60 a
capítulo provee una visión general de la esterilización con medida que éste decae a Ni60. La vida media para este isótopo
radiación ionizante y de su validación, incluyendo la es de 5.27 años, lo que significa que en el transcurso de cada
configuración de dosis, la compatibilidad de los materiales año la fuente pierde aproximadamente 12 % de su
y la verificación de la dosis. radioactividad. Esta reducción continua de radioactividad
Los efectos de la radiación sobre los materiales pueden ser requiere que los operadores del proceso ajusten sus controles
significativos y son una consideración mayor para los de proceso (por lo general el tiempo de exposición) para
fabricantes al seleccionar la radiación como método de mantener la dosis establecida requerida. De manera periódica,
procesamiento. Las ventajas de la esterilización por irradiación se requiere una cantidad adicional de Co60 para mantener el
incluyen la simplicidad, la ausencia de complejidad mecánica, rendimiento.
la reproducibilidad y la eficiencia en general. En efecto, la
esterilización con radiación es única debido a que el ESTERILIZACIÓN CON RAYOS X
fundamento del control es esencialmente la dosis de radiación
absorbida, la cual se puede medir con precisión. Los métodos Los esterilizadores de rayos X generan fotones altamente
usados para establecer las dosis de radiación apropiadas para penetrantes similares a los fotones gamma de los irradiadores
lograr el nivel de garantía de esterilidad deseada se definen en de Co60. Los fotones de rayos X se generan cuando los electrones
las normas ISO 11137-1 Esterilización de productos para el acelerados impactan un blanco tal como el tántalo. Estos
cuidado de la salud; ISO 11137-2 Esterilización de productos sistemas se basan en el barrido de materiales con fotones de
para el cuidado de la salud-Radiación-Parte 2: rayos X para esterilizarlos. Cuando se mantienen adecuadamente,
establecimiento de la dosis de esterilización; e ISO TS estos sistemas son capaces de proveer una dosis constante con
13004:2013 Esterilización de productos para el cuidado de la el paso del tiempo. No se requiere ninguna fuente radioactiva
salud-radiación-verificación de la dosis de esterilización localizada para los sistemas de esterilización de rayos X.
7. ESTERILIZACIÓN CON RADIACIÓN

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ESTERILIZACIÓN CON HAZ DE ELECTRONES resistencia estándar representa un desafío más severo que la
población microbiana natural sobre el material que se va a 7
Los sistemas de haces de electrones se basan en el barrido de esterilizar. Un estudio de verificación de la dosis debe confirmar
objetos con electrones enfocados para esterilizar los artículos la suposición de resistencia relativa. El método VDmax es
con un campo de radiación definido. Estos sistemas, cuando se similar al método 1 (requiere el análisis de la biocarga y de la
mantienen y controlan de manera adecuada, entregan una dosis verificación de la dosis) pero se basa en intervalos de biocarga
SISTEMAS CRÍTICOS
constante, por lo que no hay cambios en la dosis con respecto (por ejemplo, < 1 000 UFC por artículo para una dosis de
al tiempo. Las principales ventajas de la esterilización con haz esterilización de 25 kGy y, por ejemplo, 0.1 a 1.5 UFC por
de electrones son una dosis mucho mayor y la ausencia de una artículo para una dosis de esterilización de 15 kGy).
fuente radioactiva localizada. Estos sistemas pueden ser El método 2 es más complejo y no requiere enumerar la
instalados y operados por el usuario final. La penetración del población microbiana para el establecimiento de la dosis de
haz de electrones es sustancialmente menor que la obtenida esterilización (aunque esto es necesario para el monitoreo y
con los fotones y, por lo tanto, el mapeo de dosis resulta crítico control de rutina) pero utiliza una serie de exposiciones de
para asegurar que los artículos con densidades y complejidad incremento gradual de dosis para establecer una dosis en la que
variadas se esterilicen apropiadamente. Debido a las altas dosis aproximadamente 1 de cada 100 muestras irradiadas con dicha
usadas en la esterilización con haz de electrones, algunos dosis será no estéril. Esta no es la dosis de esterilización, pero
materiales pueden experimentar temperaturas provee el fundamento para determinar la dosis de esterilización
significativamente mayores que las que podrían experimentar mediante la extrapolación a partir de dicha información.
con la irradiación de Co60.
Compatibilidad de los materiales
VALIDACIÓN DE LA ESTERILIZACIÓN CON Una vez que se ha establecido el nivel de dosis requerido, se
RADIACIÓN debe establecer la dosis máxima. Los analistas por lo general
establecen la dosis máxima mediante la evaluación de la dosis
El desarrollo del ciclo para la radiación requiere la probable más alta que se podría observar durante el proceso de
identificación de una dosis de radiación apropiada para los esterilización, sumando un factor de seguridad y evaluando el
objetos, así como la confirmación de que la dosis no afecta de artículo para determinar los efectos inmediatos y a largo plazo
manera adversa los atributos de calidad esenciales de los de la exposición a la radiación. En un inicio, algunos
materiales. En otras palabras, los analistas deberían identificar materiales pueden parecer inalterados, y los efectos podrían
la dosis de esterilización mínima, así como la dosis máxima volverse evidentes sólo con el paso del tiempo. La evaluación
que el material puede tolerar sin sufrir efectos negativos. Con debe considerar todos los materiales expuestos al proceso
esta información, los analistas pueden establecer la dosis para de radiación, en especial el medicamento y su envase primario.
una aplicación específica de la esterilización con radiación. Resulta necesario confirmar la estabilidad, la seguridad y la
El establecimiento de la dosis a menudo se logra siguiendo uno funcionalidad del producto durante su periodo de uso previsto.
de los métodos ISO: El método 1, el método 2A, el método 2B
y el método VDmáx. La elección del método más apropiado Verificación de la dosis
depende principalmente del tamaño del lote de producción, Los métodos para el desarrollo del ciclo y el establecimiento
delconocimiento de la biocarga normal y de la sensibilidad del de la dosis se basan en una biocarga controlada. Los analistas
material a la radiación. El mapeo de dosis desempeña un papel emplean controles definidos de biocarga previa a la esterilización
importante durante el desarrollo del ciclo y el ejercicio de y la evaluación periódica de los efectos del proceso sobre la
establecimiento de la dosis. biocarga para mantener la eficacia del ciclo. El establecimiento
de la dosis requerida para la destrucción microbiana durante el
Establecimiento de la dosis desarrollo del ciclo emplea la resistencia natural de la biocarga;
El método 1 se basa en la designación y verificación de una posteriormente, los analistas extrapolan los algoritmos para
dosis de esterilización basada en una población microbiana. No establecer la dosis que es capaz de proveer una probabilidad de
se determina la resistencia de la población microbiana, y el una unidad no estéril (PNSU, por sus siglas en inglés; una
establecimiento de la dosis se basa en una resistencia a la medición estándar) de 1 × 10-6. Los resultados de los enfoques
radiación estándar asignada a la población microbiana, derivada para el establecimiento de la dosis para una biocarga inicial
de los datos obtenidos de los fabricantes del dispositivo médico con diferentes poblaciones y resistencias a la esterilización con
y de la literatura. Este análisis asume que la distribución de la radiación se ilustran en la figura 14.

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de rayos. Provee una línea base de desempeño que puede ser

7 útil con el paso del tiempo.
MAPEO DE DOSIS DE CARGA
El acomodo de los artículos en los contenedores, portadores o

plataformas (pallets) de irradiación es una parte esencial del
SISTEMAS CRÍTICOS
ejercicio de validación inicial. El objetivo del mapeo es definir

la distribución de una dosis a través de los artículos de carga y
establecer una configuración que minimize la variación de la
dosis entre materiales. Los artículos se mapean usando
múltiples dosímetros colocados interna y externamente. La
identificación de las ubicaciones de dosis máxima es
importante al momento de evaluar los efectos de la radiación
en los artículos de carga. La ubicación de la dosis mínima y
máxima se puede identificar a partir de los datos del mapeo
para el monitoreo en la esterilización de rutina de materiales.
INDICADORES BIOLÓGICOS
No está indicado el uso de indicadores biológicos para la

esterilización con radiación debido a que las mediciones físicas
y dosimétricas empleadas son más confiables, reproducibles y
robustas que los sistemas biológicos.
DOSIMETRÍA
El control del proceso para la esterilización con radiación se

basa principalmente en la dosimetría para el desarrollo inicial y
la verificación continua. Para pautas sobre la selección y uso
de un sistema de dosimetría para su aplicación en la
esterilización con radiación, consultar la norma ASTM E2628
Prácticas para dosimetría en el procesamiento con radiación.
Los dosímetros y sus instrumentos relacionados deben
Figura 14. Resultados del establecimiento de la dosis de calibrarse de acuerdo con la norma ISO/ ASTM 51261
radiación usando VDmax. (Parte superior) Una mayor población Prácticas para la calibración de sistemas de dosimetría de
de la biocarga tiene mayor resistencia a la esterilización con rutina para el procesamiento con radiación.
radiación. (Parte inferior) Una menor población de la biocarga
tiene menor resistencia a la esterilización con radiación. CONFIRMACIÓN DEL PROCESO
Actividades de validación La parte central de la actividad de validación es la

La confirmación de la aplicación de la dosis apropiada al usar confirmación de la letalidad aceptable usando dosímetros que
la dosis de esterilización requiere de diversas actividades de se colocan en diversos sitios del material a medida que se
apoyo. procesa a través del equipo de esterilización con radiación. La
prueba de la eficacia del ciclo de esterilización se obtiene
CALIFICACIÓN DEL EQUIPO mediante estudios repetidos en los que los resultados de los
dosímetros se corresponden con el valor mínimo requerido
El uso de esterilización con rayos gamma requiere la para la garantía de esterilidad y demuestran que no se ha
evaluación inicial y periódica de los controles y parámetros del excedido el valor máximo.
equipo necesarios para establecer la capacidad del sistema. Los
sistemas de esterilización que producen haces o rayos dirigidos Control rutinario del proceso
tienen controles para la velocidad de barrido, la intensidad de La esterilización con radiación se debe someter a controles
la fuente y los cronómetros del sistema. Los otros elementos formales que mantengan el estado validado. Las prácticas
del equipo de esterilización con radiación se relacionan en descritas en la sección de Esterilización de insumos para la
mayor medida con el transporte de materiales y se califican salud de este capítulo, proveen requisitos generales apropiados
con facilidad. Asimismo, se requiere la calificación de para todos los sistemas de esterilización. Esto se logra
controles, dispositivos y software de seguridad. mediante una variedad de prácticas relacionadas que son
esenciales para el uso continuo del proceso durante un periodo
MAPEO DE DOSIS EN LA CÁMARA VACÍA extenso. Las prácticas que se consideran esenciales para
mantener el estado validado para la radiación incluyen la
Este ejercicio opcional incluye el mapeo del área que se va a capacitación, la calibración, las mediciones físicas, el
esterilizar para la dosis de radiación en ausencia de una carga y monitoreo de la biocarga, el control de cambios, el
es un posible medio para evaluar un haz enfocado o un sistema mantenimiento preventivo y las auditorias de dosis periódicas.

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8. ESTERILIZACIÓN EN FASE intermitente o total en una sola etapa. Algunos sistemas
GASEOSA
emplean una etapa de evacuación o secado anterior a la 8
introducción de peróxido de hidrógeno (H2O2) para permitir
INTRODUCCION una concentración mayor sin exceso de condensación. Como
La esterilización se puede lograr usando agentes esporicidas alternativa, el peróxido de hidrógeno (H2O2) se puede
suspendidos en el aire (por ejemplo, vapor). Los agentes introducir en forma líquida, seguido por calentamiento dirigido
SISTEMAS CRÍTICOS
esterilizantes que operan de esta manera incluyen peróxido de para formar la fase gaseosa. Después del periodo de
hidrógeno (H2O2), ácido peracético (CH3CO3CH), exposición, el equipo o el objeto esterilizado se ventila hasta un
formaldehído (CH2O) y glutaraldehído [CH2(CH2CHO)2] en nivel aceptable para el procesamiento adicional de materiales
solución acuosa. A temperatura ambiente, son líquidos o y/o la exposición al personal (lo que resulte menor) antes de
sólidos que se pueden evaporar para introducirlos en un abrir y retirar el artículo esterilizado.
recipiente/contenedor, aisladores, etc. Se diferencian de los
gases y líquidos esterilizantes en que presentan múltiples fases ÁCIDO PERACÉTICO
de la cámara o espacio definido durante la esterilización. Los El ácido peracético (CH3CO3CH), solo o mezclado con
sistemas de esterilización en fase gaseosa son adecuados para peróxido de hidrógeno, es un agente esporicida de demostrada
materiales sensibles al calor y para la esterilización de efectividad. EI ácido peracético se introduce en forma líquida a
superficies; si bien es cierto que es un proceso también través de un atomizador, lo que resulta en la presencia de fases
empleado para sanitización, este capítulo aborda los líquida y de vapor dentro de la cámara. Después del periodo de
parámetros mínimos para considerar dicho proceso como residencia del proceso, se elimina mediante evaporación.
método de esterilización. Los artículos expuestos al proceso
deben tener sus superficies expuestas en la mayor; medida VALIDACIÓN DE LA ESTERILIZACIÓN EN FASE
posible. Los procesos de esterilización en fase gaseosa GASEOSA
requieren una concentración de esterilizante, temperatura y No se han definido condiciones estándar de esterilización
humedad relativa apropiadas, las cuales pueden variar durante debido a la naturaleza variable de fase y multifase del vapor
el periodo de exposición. Debido a que por lo regular el agente durante los procesos de esterilización. Y tal como ya se ha
se provee como solución acuosa, éste introduce humedad. Las mencionado, no existen indicadores biológicos estandarizados
consecuencias de la variación de estos parámetros pueden ser con valores D que puedan usarse para el análisis predictivo
diferencias localizadas en la humedad relativa, la convencional de la velocidad de muerte. Ante la falta de
concentración del agente y las velocidades de condensación en valores D de indicadores biológicos y debido a la variación en
las superficies a tratar, lo que resulta en variaciones en la los parámetros de los ciclos de esterilización en fase gaseosa,
letalidad del proceso. Los parámetros que deben establecerse se debe usar una estrategia empírica. Las velocidades de
incluyen la cantidad de gas esterilizante (que por lo general muerte en las fases gaseosa y líquida que constituyen el vapor
deriva de las cantidades de inyección), la humedad relativa y la pueden presentar diferencias significativas (las velocidades de
temperatura. No existe una correlación demostrada entre las muerte de la fase líquida se consideran mayores que las de la
condiciones de la fase gaseosa, las condiciones de la superficie fase gaseosa). La destrucción de la biocarga de los indicadores
y la muerte microbiana. Por esta razón, el monitoreo en línea biológicos distribuidos a lo largo del sistema o carga
de la concentración de la fase gaseosa no se utiliza demuestra letalidad independientemente de la fase que genere
ampliamente como un parámetro de control. Los esfuerzos la destrucción. Los parámetros del proceso de esterilización
para desarrollar un indicador biológico estandarizado para (por lo general, el tiempo) que no consigan la destrucción en
sistemas de esterilización en fase gaseosa se han visto los indicadores biológicos se podrán ajustar hasta conseguir
limitados por el carácter multifásico de estos esterilizantes. La una muerte completa. De esta forma se establecen las
selección del indicador biológico apropiado y la resistencia condiciones mínimas necesarias para una muerte completa. La
deberán basarse en experimentos dentro del sistema del esterilización en fase gaseosa se puede validar usando una
usuario. Únicamente en condiciones específicas bien definidas estrategia de medio ciclo, de selección de extremos o cualquier
(por ejemplo, concentración del agente, nivel de humedad, otra que sea adecuada según se definen en este capítulo y
temperatura, sustrato y fase) es posible establecer un valor D sección Esterilización por gases.
confiable (véase definición en Glosario). La validación del proceso de esterilización, cuando se efectúe
Es importante considerar para la selección de estos métodos por el método de medio ciclo requiere la destrucción de una
que algunos de estos agentes esterilizantes dejan residuos que concentración adecuada de un microorganismo resistente en
son cuestionables para la seguridad del personal y del condiciones mínimas definidas para una muerte completa.
producto, por lo tanto debe asegurarse su remoción. Posteriormente, en la operación de rutina, el periodo letal mínimo
Este capítulo revisará brevemente los sistemas de esterilización se duplica arbitrariamente, con lo que se sustenta una duplicación
de peróxido de hidrógeno y de ácido peracético, debido a que de la reducción logarítmica de esporas del indicador biológico
su uso es más amplio que el de otros agentes esterilizantes en y es más que suficiente para inactivar la biocarga.
fase gaseosa. Asimismo, se puede emplear una estrategia de selección de
extremos, la cual sustenta los intervalos operativos del proceso
PERÓXIDO DE HIDRÓGENO para los parámetros críticos de una mejor manera que el
La eficacia del peróxido de hidrógeno como esterilizante método de medio ciclo. En el método de selección de
líquido cuenta con amplio respaldo. Existen diversas extremos, se evalúan las condiciones que agrupan las
estrategias efectivas para la inyección de peróxido de condiciones definidas del proceso para establecer parámetros
hidrógeno (H2O2), incluyendo la inyección continua, para los efectos máximos y mínimos sobre los materiales y la
8. ESTERILIZACIÓN EN FASE GASEOSA

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biocarga. El tiempo de residencia letal mínimo del proceso prácticas esenciales requeridas para mantener el estado
9 establece las condiciones más exigentes para la muerte validado incluyen calibración, mediciones físicas, uso de
microbiana. El incremento gradual del tiempo de residencia del indicadores biológicos, integradores e indicadores físicos o
proceso que sobrepasa el periodo letal mínimo se usa para químicos, control continuo del proceso, control de cambios,
establecer los periodos máximos de exposición, los cuales mantenimiento preventivo, reevaluación periódica y
tienen el mayor efecto sobre los materiales. Además, se utilizan capacitación.
ajustes en la cantidad de agente introducido, en la temperatura
SISTEMAS CRÍTICOS
de operación y en la humedad relativa para mejorar aún más la

estrategia de selección de extremos. A través de este método, se
pueden establecer las condiciones de proceso rutinarias entre 9. ESTERILIZACIÓN DE GASES POR
las condiciones mínimas y máximas de proceso para asegurar FILTRACIÓN
una muerte microbiana completa, al tiempo que se mantiene la
integridad de los materiales. INTRODUCCIÓN
Las siguientes actividades se definen para un proceso por Los gases, tales como el aire comprimido, el nitrógeno y los
partidas y, por lo tanto, es necesario adaptarlas de manera gases atmosféricos, que entran en contacto con componentes,
apropiada al aplicarlas en procesos de esterilización envases y cierres, y superficies del equipo de procesamiento
intermitentes o continuos. estériles que entran en contacto con productos, tales como
tanques y tuberías, deben ser estériles para prevenir la
Calificación del equipo. La calificación del equipo para contaminación de productos farmacéuticos y biofarmacéuticos.
esterilización en fase gaseosa reproduce la de otros procesos de La esterilización de gases por lo regular se logra haciendo
esterilización para confirmar que el equipo se haya instalado pasar el gas a través de uno o más filtros de membrana de
de manera apropiada y opere conforme a lo previsto. grado de esterilización. El diseño del proceso de filtración
Distribución de parámetros en cámara vacía. Aunque es debe asegurar la esterilización del gas filtrado.
posible una medición de puntos múltiples, ésta carece de
correlación con la muerte microbiana en la superficie. Las DIFERENCIAS ENTRE LA ESTERILIZACIÓN DE
mediciones de humedad y temperatura, junto con los GASES Y DE LÍQUIDOS POR FILTRACIÓN
indicadores químicos, pueden proveer una indicación amplia
de la distribución del esterilizante. Los indicadores biológicos La sección de Esterilización de líquidos por filtración, de este
no son necesarios para la evaluación de la cámara vacía. capítulo de Esterilización, contiene información que es
Mapeo de componentes. Para la esterilización de superficies, aplicable a este capítulo, lo cual incluye, entre otros aspectos,
no es necesario el mapeo interno de los artículos de carga. filtros de grado de esterilización, mecanismos de retención y
Aunque los vapores se usan principalmente como esterilizantes factores que afectan la retención, la validación, los principios y
de superficies, cuando se usan para artículos envasados con los métodos de la prueba de integridad, y el control de la
superficies y volúmenes internos que necesitan ser biocarga previo a la filtración. Esta monografía tratará las
esterilizados, se debe realizar el mapeo interno, colocando los diferencias significativas entre la filtración de líquidos y de
indicadores biológicos en lugares difíciles de penetrar para gases.
confirmar la letalidad del proceso.
Mapeo de carga. Las mediciones de humedad y temperatura, MEMBRANAS PARA ESTERILIZACION DE GAS
junto con los indicadores químicos, pueden proveer una
indicación limitada de la distribución del esterilizante sobre las Por lo regular, los filtros usados para la esterilización de gases
superficies de los componentes. No se requieren indicadores son membranas hidrófobas, aunque se pueden emplear
biológicos. Se deben evaluar los efectos del tamaño y los membranas hidrófilas cuando la humectación de la membrana
patrones de la carga. durante el uso no represente un problema. La humectación
Indicadores biológicos. Se recomienda el uso de múltiples puede ser un factor para los filtros que se usan para la
indicadores biológicos en cada lugar de prueba para sustentar ventilación del autoclave y cuando se requieren filtros de
de manera más adecuada la letalidad del proceso. ventilación para mantener la esterilidad de la fase gaseosa del
Confirmación del proceso y desafío microbiológico. La parte tanque. Las membranas de filtro microporoso con una
central de la actividad de validación es la confirmación de los clasificación de tamaño de poro no mayor que 0.2 µm, son
parámetros aceptables del proceso y de la inactivación del adecuadas para la esterilización de gases; de hecho, estos
desafío microbiológico. La evidencia de la eficacia del ciclo se filtros tienen una retención considerablemente mayor para
provee en estudios repetidos en los que se matan indicadores gases que para líquidos (Liu BYH, Rubow KL, Pui DYH.
biológicos y se utilizan mediciones químicas o físicas. Performance of HEPA and ULPA filters. Proceedings, Annual
Technical Meeting – Institute of Environmental Sciences. 1985
CONTROL RUTINARIO DEL PROCESO Apr 29-May 2; Las Vegas, NV). Asimismo, los filtros deben
La esterilización en fase gaseosa está sujeta a controles que ser químicamente compatibles con el gas que se va a filtrar y
mantienen un estado validado con el paso del tiempo. Las físicamente compatibles con las condiciones de filtración (por
ejemplo, presiones diferenciales y velocidades de flujo).
9. ESTERILIZACIÓN DE GASES POR FILTRACIÓN

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MECANISMOS DE RETENCIÓN que emplean un líquido con tensión superficial baja para
humedecer completamente la estructura de los poros de la 1
Los mecanismos primarios de retención de los filtros de membrana del filtro. Además, la prueba de integridad puede
membrana usados en la esterilización de gases son la exclusión realizarse midiendo la resistencia de la membrana al
por tamaño, el impacto, la intercepción por difusión y la humedecerla con agua como una función de la presión. La
atracción electrostática. La exclusión por tamaño es efectiva prueba por intrusión de agua es un ejemplo de este tipo de
SISTEMAS CRÍTICOS
para partículas (microorganismos) que son demasiado grandes prueba de integridad.
para pasar a través de la estructura de poros del filtro de
membrana y es esencialmente independiente de la velocidad
del gas que fluye a través del filtro. Los mecanismos de
retención distintos a la exclusión por tamaño pueden ser 10. NUEVOS MÉTODOS DE
efectivos para partículas más pequeñas que los poros que ESTERILIZACIÓN
encuentran. La retención debida al impacto, la intercepción por
difusión y la atracción electrostática es dependiente del tamaño Los procesos de esterilización se desarrollan para la
de partícula, la velocidad de flujo y la humedad relativa. Por eliminación de microorganismos viables al mismo tiempo que
ejemplo, la eficiencia de retención de partículas debida al se preservan las propiedades físicas, químicas y biológicas
impacto es proporcional a la masa de la partícula; las partículas esenciales de los materiales sometidos a ellos. La esterilización
más pesadas tienen un impulso mayor que las más livianas y, puede ser posible empleando un método propuesto de uso poco
por lo tanto, tienen una probabilidad mayor de entrar en común. Cuando éste sea el caso, el usuario final tiene la
contacto con las paredes porosas y de ser posteriormente responsabilidad de demostrar que el nuevo método propuesto
retenidas por el filtro durante el flujo sinuoso. Por el contrario, puede usarse de forma segura y efectiva.
la eficiencia de captura de la intercepción por difusión es
inversamente proporcional al tamaño y la velocidad de la PUNTOS A CONSIDERAR PARA UN NUEVO
partícula. Las partículas más pequeñas, influenciadas por el MÉTODO DE ESTERILIZACIÓN
movimiento browniano, pueden salir de la línea de flujo, entrar Las principales etapas para la implementación de un nuevo
en contacto con la matriz del filtro y quedar retenidas, y una método de esterilización incluyen lo siguiente:
velocidad menor incrementa el tiempo de contacto potencial y
mejora la eficiencia de captura. La atracción electrostática de Eliminación de cualquier método establecido mediante
partículas se ve reducida por una humedad relativa alta en el gas evidencia experimental y/o una revisión bibliográfica
filtrado. La adsorción, que puede ser importante en la filtración cabal de todos los materiales usados.
de líquidos, no es un mecanismo de retención para los gases. Una revisión bibliográfica para identificar información
de apoyo sobre el método propuesto.
VALIDACIÓN La identificación y confirmación de letalidad
reproducible contra una amplia variedad de
En general, la validación de los procesos usados en la microorganismos, incluyendo formadores de esporas
esterilización de gases por filtración puede dividirse en dos bacterianas.
partes: esterilización del filtro y su armazón, así como la La identificación y definición de los parámetros críticos
capacidad del filtro de eliminar microorganismos del gas del proceso necesarios para asegurar una letalidad
filtrado. suficiente. Se debe explorar el intervalo efectivo de
La esterilización del filtro y de su armazón se ha tratado de estos parámetros para identificar las condiciones
manera específica en las secciones de Esterilización de necesarias para el proceso de esterilización propuesto.
líquidos por filtración y Esterilización in situ, y de manera Entre los parámetros que se deben considerar,
general en Esterilización de insumos para la salud, de este dependiendo de la naturaleza del proceso que se está
capítulo de Sistemas críticos. considerando, están el tiempo de residencia, la
Los filtros de membrana que cumplen con los requisitos de la temperatura, la concentración, la energía o potencia y
ASTM F838-15a son adecuados para la esterilización de gases la humedad relativa. Esta evaluación debe incluir
por filtración en términos de retención microbiana. La prueba controles positivos y negativos para asegurar que el
de desafío bacteriano de líquidos representa las condiciones método propuesto es, de hecho, responsable de la
más exigentes para los filtros de esterilización de gases, debido destrucción microbiana.
a que la eficiencia de retención en líquidos es menor que en La selección de un indicador biológico (por lo regular
gases (Parenteral Drug Association. Sterilizing filtration of un microorganismo formador de esporas) con
gases. Technical Report No. 40. PDA J Pharm Sci Technol. resistencia mejorada para el método de esterilización.
2005;58(1) Suppl TR40):7-44). La evaluación del método propuesto contra los
microorganismos de la biocarga anticipados y una
PRUEBA DE INTEGRIDAD comparación de la resistencia relativa del
microorganismo de la biocarga con la del indicador
Los requisitos y las técnicas de la prueba de integridad se biológico seleccionado.
tratan en la sección de Esterilización de líquidos por filtración. La identificación de mediciones durante el proceso y/o
Se puede analizar la integridad de los filtros hidrófobos posteriores al proceso y/o análisis que puedan
regularmente usados para la filtración de gases usando pruebas confirmar con certeza la efectividad del proceso de
de punto de burbuja, flujo difusivo y retención de la presión esterilización propuesto.
10. NUEVOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

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Cuando el nuevo método propuesto se use para materiales cuidado para preservar su integridad. Los fabricantes
1 destinados para uso humano y/o veterinario, se debe contactar de filtros pueden proveer guías sobre métodos y
a las autoridades reglamentarias pertinentes para asegurarse de parámetros de esterilización aceptables.
la aceptación del mismo antes de su uso clínico o en La ausencia de equipo específicamente diseñado en el
investigación. La validación del nuevo método propuesto debe que se lleva a cabo el proceso de esterilización coloca
ser completada antes de usarlo para fines comerciales. el grueso de la responsabilidad del diseño en el usuario.
Los sistemas de esterilización in situ por lo regular no
SISTEMAS CRÍTICOS
pueden comprarse directamente, a diferencia de las

autoclaves u hornos de calor seco, sino que el sistema,
11. MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN que fue diseñado para el proceso operativo, puede
IN SITU requerir modificaciones para acomodar el proceso de
esterilización in situ que se va a usar. El usuario debe
La esterilización in situ (SIP, por sus siglas en inglés) puede asumir el papel de diseñador del proceso, del equipo y
definirse como la esterilización en el lugar del sistema o parte del sistema de control.
del equipo de proceso. El propósito de ésta es eliminar o El diseño del sistema y los procedimientos operativos
reducir en gran medida la necesidad de la manipulación deben permitir una forma eficiente de introducción y
posterior a la esterilización, incluyendo lo necesario para eliminación del agente de esterilización. La eliminación
realizar conexiones asépticas. Una vez esterilizado de esta del agente de esterilización debe considerar los efectos
manera el equipo móvil de proceso (por ejemplo, tanques potenciales de esterilizante residual en los materiales
portátiles, recipientes de almacenamiento y otro equipo), puede que se van a procesar. El establecimiento de una
ser reubicado. El proceso de esterilización in situ puede secuencia de proceso confiable en una parte crítica de
llevarse a cabo usando cualquiera de los siguientes métodos la actividad de desarrollo del ciclo. El agente de
físicos: calor húmedo, calor seco, gas, líquido o vapor (descrito esterilización normalmente se introduce a través de un
a continuación). filtro en el sistema que también puede servir como
filtro de proceso, de gas de purga o de ventilación.
ELEMENTOS COMUNES DEL PROCESO DE Al final de la secuencia del proceso de esterilización y
ESTERILIZACIÓN IN SITU hasta el momento que esté listo para su uso, el sistema
debe presurizarse con un gas de purga (aire estéril o
Existe una variedad de consideraciones apropiadas para el
nitrógeno son los más comunes) para prevenir la
diseño y el uso de procedimientos in situ que aplican a todos
introducción de contaminantes en el sistema
los métodos de esterilización:
esterilizado.
Los sistemas cerrados y sus elementos del diseño Los parámetros críticos para el proceso de
normalmente se esterilizan in situ. esterilización in situ deben registrarse a medida que se
Para sistemas grandes, puede ser necesario esterilizar lleva a cabo el proceso. Los parámetros importantes
por partes. Los procesos individuales de esterilización pueden incluir temperatura, presión, concentración,
deben conjuntarse para asegurar el tratamiento de todas velocidad de flujo, humedad y tiempo, entre otros.
las superficies internas.
El enfoque del procedimiento de esterilización in situ SISTEMAS CERRADOS
es la esterilización de las superficies de contacto del
producto (el interior del sistema). La demostración de En las operaciones de fabricación farmacéutica incluyendo los
la letalidad del proceso se basa en mediciones físicas e insumos para la salud, los sistemas cerrados se usan para
indicadores biológicos. Dicha confirmación debe diversas aplicaciones, incluyendo el mantenimiento de la
extenderse hasta las "fronteras estériles" del sistema, esterilidad de grandes cantidades de materiales (líquidos o
incluida la cámara gaseosa superior de los recipientes, polvos); fabricación de ingredientes activos orgánicos
las conexiones a otros recipientes/equipo y demás biológicos y sintéticos (en especial cuando resulta esencial la
partes del sistema. Las superficies interiores del equipo ausencia de microorganismos); y la preparación de equipo de
de proceso independientemente de sus materiales de proceso para uso en la fabricación y llenado de medicamentos
construcción, deben exponerse a condiciones letales estériles. El uso de sistemas cerrados separa de mejor manera
suficientes para esterilizar el sistema y cuya letalidad se los materiales estériles del entorno circundante. Por lo general,
confirme mediante un desafío microbiológico los sistemas cerrados se mantienen bajo presión positiva en
apropiado. todo momento. Las características de un sistema cerrado que
La esterilización in situ se logra preferentemente establece su designación como "cerrado" incluyen lo siguiente:
usando el enfoque de sobremuerte (overkill). Los
componentes del equipo físico deben seleccionarse Mantiene la integridad durante todos los periodos
basándose en su capacidad para tolerar las condiciones operativos y en todas las condiciones. Se esteriliza
de esterilización que se van a usar. Los filtros en el in situ o se esteriliza mientras está cerrado antes
sistema de proceso, ya sean de membrana o de aire de del uso.
alta eficiencia para partículas (HEPA por sus siglas en Se puede adaptar para transferencia interna y/o
inglés), por lo regular son susceptibles a daños durante externa de materiales mientras se mantiene su estado
la esterilización in situ, por lo que se debe tener estéril.
11. MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN IN SITU

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Se puede conectar a otros sistemas cerrados mientras relacionadas que son esenciales para el uso continuo del
se mantiene la integridad de todos los sistemas. proceso durante un periodo extenso. Las prácticas esenciales I
Se somete a mantenimiento preventivo programado. para mantener un estado validado incluyen calibración,
Utiliza filtros de grado de esterilización para la mediciones físicas, integradores físicos o indicadores, control
esterilización de corrientes de líquidos o gases del continuo de procesos, control de cambios, mantenimiento
proceso. preventivo, reevaluación periódica y capacitación.
SISTEMAS CRÍTICOS
MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN IN SITU
Calor húmedo
El uso de vapor saturado es el método más prevalente para la II. PROCESO ASÉPTICO (PA)
esterilización in situ de sistemas grandes. La mayoría de las
instalaciones usan ciclos de desplazamiento por gravedad Esta sección proporciona una revisión de los principios que
adaptados de aquellos usados originalmente en autoclaves (el deben aplicarse para la producción de artículos procesados
tamaño y la complejidad de muchos sistemas impide el uso de asépticamente a fin de presentar un riesgo mínimo de
ciclos de vacío previo). Entre los aspectos importantes a contaminación microbiana en cada lote de producto terminado.
considerar se incluyen en la eliminación del aire, la descarga Los productos procesados asépticamente se fabrican partiendo
del condensado y la eliminación del vapor posterior al tiempo de componentes que han sido esterilizados mediante uno de los
de permanencia. Este método se usa comúnmente para procesos descritos anteriormente en este capítulo. Por ejemplo,
biorreactores, producción a granel estéril, tanque de contención el producto a granel, si es un líquido filtrable, puede haber sido
y líneas de suministro y otros sistemas grandes. esterilizado por filtración. Los envases primarios vacíos
probablemente estén esterilizados por calor o por gases, los
Agua sobrecalentada viales de vidrio por calor seco y los tapones de caucho por
Los sistemas usados para Agua para fabricación de inyectables calor húmedo.
y Agua purificada pueden esterilizarse usando agua Los requisitos de diseño, validación y mantenimiento
sobrecalentada (agua que se calienta por encima de su punto de adecuados para una instalación de PA tienen como objetivo
ebullición y se presuriza para mantenerla en estado líquido) que principal:
circule a través del sistema. Este método tiene la capacidad 1) la provisión de personal operativo calificado principalmente
para esterilizar recipientes, filtros y otros componentes en las técnicas de trabajo bajo condiciones asépticas, y con el
humedecidos al mismo tiempo. Se recomienda la eliminación equipo y ropa apropiados.
del agua residual posterior a la fase de esterilización. 2) un medio ambiente con aire adecuadamente controlado por
lo que respecta a partículas viables y no viables, temperatura y
Calor seco humedad relativa, diseñado adecuadamente y que permita,
El calor seco se ha usado para la esterilización in situ de además, el mantenimiento eficaz de las unidades de suministro
secadores por aspersión y sus sistemas de recolección de de aire.
materiales asociados. El suministro de aire para la esterilización El ambiente deseado se puede lograr gracias al alto nivel de
de estos sistemas se provee a través de filtros HEPA. tecnología de filtración de aire, lo que contribuye al aporte de
este elemento con la calidad microbiológica y de partículas
Gas requerida. Las instalaciones incluyen sistemas de barreras
La esterilización in situ con gas se ha usado para equipos de primarias (en las cercanías del artículo expuesto) y secundarias
proceso de baja presión o sin presión, tales como liofilizadores, en las que se lleva a cabo el procesamiento aséptico.
precongeladores, recipientes de proceso y otros equipos. Para el diseño adecuado de una instalación de procesamiento
aséptico se deben considerar características tales como
Líquido acabados sanitarios y servicios auxiliares ocultos; esclusas de
La esterilización química con líquidos es más adecuada para cambio de vestimenta con espacio suficiente para el personal y
sistemas que manipulan líquidos y pueden usarse únicamente almacenamiento de vestimenta estéril; separación adecuada
para superficies completamente húmedas. Este proceso es entre las áreas donde el personal se prepara, y las áreas de
similar a aquellos que usan agua sobrecalentada, excepto que procesamiento aséptico final, con disponibilidad, donde sea
la modalidad letal es química en lugar de térmica. necesario, de dispositivos tales como esclusas de aire y duchas
de aire, diferenciales de presión adecuadas entre salas con
Vapor
mayor presión positiva en los cuartos y zonas de
Los vapores esterilizantes se ha usado para esterilizar in situ
procesamiento aséptico; empleo de flujo de aire unidireccional
los mismos tipos de equipos de proceso que aquellos tratados
en las zonas en las que el producto o cualquiera de sus
con gases esterilizantes.
componentes se expongan al ambiente; cumpliendo con lo
establecido en la monografía de HVAC, y un programa
CONTROL DE PROCESO DE RUTINA
correctamente documentado de limpieza y sanitización. Se
Los procesos de esterilización in situ están sujetos a controles debe emprender el entrenamiento adecuado del personal en el
formales que mantienen un estado validado con el paso del manejo de técnicas asépticas, incluyendo el proceso de
tiempo. La esterilización se logra mediante diversas prácticas vestimenta para que, por ejemplo, los overoles, batas, guantes
II. PROCESO ASÉPTICO (PA)

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y otras protecciones para el cuerpo cubran sustancialmente Los volúmenes de llenado, incluyendo volúmenes
I todas las superficies de piel y mucosas expuestas. menores al normal, que pueden afectar la formación del
contenedor.
TECNOLOGÍAS ASÉPTICAS ACTUALES PARA PA El efecto en el medio de cultivo de la exposición al
Otras tecnologías adecuadamente operadas y validadas, las calor y tiempo de duración del contenedor abierto.
cuales han sido diseñadas para mitigar o eliminar la El efecto sobre la integridad del envase posterior al
intervención humana, principal factor de contaminación en el llenado al separar las unidades.
SISTEMAS CRÍTICOS
PA, tales como los Sistemas de Barreras de Acceso

Restringido (RABS), formado-llenado-sellado, soplado- AISLADORES
llenado-sellado, y la tecnología de aisladores pueden proveer Los aisladores eliminan el acceso directo del personal al ambiente
ambientes mejorados en los cuales el PA puede ser realizado. crítico mediante sistemas definidos mecánicos y de barrera.
El uso de aisladores y procesos altamente automatizados con Están diseñados para eliminar la contaminación transportada
intervenciones muy poco frecuentes durante el proceso, por el elemento humano hacia el medio aséptico en donde el
mitigan el riesgo de contaminación y permiten una mayor producto estéril, los contenedores, los cierres y el equipo
flexibilidad en el diseño de la Simulación del Procesamiento están expuestos. Los aisladores se descontaminan y el ingreso
Aséptico (SPA) por lo que respecta, por ejemplo, al número de del material se lleva a cabo mediante el empleo de sistemas
viales necesarios para la simulación del llenado, su duración, y de transporte validados. Debe considerarse la operación de
la representación para cambios múltiples de turnos, entre otros. estos sistemas al diseñar la simulación del llenado.
El riesgo relativo y los aspectos propios de estas tecnologías,
deben ser tomados en consideración cuando se evalúa el diseño OPERACIONES UNITARIAS IMPLICADAS EN EL PA
de los estudios de SPA. La validación de los “sistemas de Dado que el PA se compone de la integración de múltiples
barrera” o de los “sistemas abiertos de barrera de acceso elementos que, en su conjunto, tienen como finalidad mitigar o
restringido” no están considerados aquí y deben estar eliminar la posible contaminación que puede ingresar tanto al
validados, al igual que todo proceso, con base en la gestión de ambiente crítico, como al producto, cada una de las siguientes
los riesgos que presentan. operaciones debe estar previamente validada, antes de iniciar
el PA:
SISTEMAS DE BARRERA DE ACCESO RESTRINGIDO
(RABS) El área, incluyendo los acabados sanitarios, las
Estos sistemas limitan el acceso del personal y los materiales condiciones ambientales as-built, estática y dinámica
al ambiente crítico mediante sistemas mecánicos y de barrera. de la misma, los materiales de construcción, los
Estos tienen como finalidad principal reducir de manera recubrimientos, la colocación de la maquinaria dentro
sustancial la contaminación transportada por el elemento del área, sus materiales de construcción, las
humano al ambiente aséptico. Estos sistemas son sujetos de instalaciones, los servicios, etc.
una desinfección profunda antes de su uso. Los sistemas El Sistema HVAC, incluyendo los módulos de flujo
RABS cerrados a menudo pueden descontaminarse y operarse unidireccional cuya validación se describe en la sección
de manera esencialmente idéntica a los aisladores. correspondiente de este capítulo.
Los sistemas críticos involucrados en el PA (por
FORMADO-LLENADO-SELLADO (FFS) Y SOPLADO- ejemplo: agua, aire comprimido, nitrógeno).
LLENADO-SELLADO (BFS) La esterilización del producto y demás componentes,
El PA llevado a cabo en tecnologías FFS y BFS implica incluyendo el envase primario, procesos que deben
algunas condiciones únicas del proceso, las cuales deben validarse de acuerdo a la sección correspondiente en
considerarse para su validación. En estos casos, las este mismo capítulo. En el caso de esterilización
consideraciones para la simulación del PA deben incluir, llevada a cabo por terceros, la responsabilidad de su
al menos: validación es del fabricante del producto, así como de
la conservación de la misma durante el transporte de las
La posibilidad de detectar la contaminación en los instalaciones del tercero hasta el ingreso al ambiente
contenedores de plástico opacos o transparentes. crítico del fabricante.
Las intervenciones que impliquen manipulaciones La integridad del sistema contenedor-cierre para
manuales en las áreas de formado, cortado y asegurar la conservación de la esterilidad del producto
ajuste/remoción, área de exposición de las boquillas de una vez liberado.
llenado, conexiones asépticas, y manipulaciones La calificación de todo el personal que ingresa al área
posteriores a la filtración. crítica, incluyendo tanto al personal de base, como al
Afectación de la operación de eliminación de los personal que ingresa en forma eventual, como pueden
sobrantes del envase en la generación de fugas después ser los mecánicos, inspectores, microbiólogos, etc., en
del llenado. cuanto a su técnica de vestido, el comportamiento
Características de formación de espuma del medio de dentro del área, y el manejo aséptico de los materiales.
cultivo que podría afectar el sellado de los Este punto, por ser uno de los más importantes, se trata
contenedores. en la siguiente sección.

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PERSONAL Si al efectuar la evaluación de técnica aséptica como

Como se ha mencionado anteriormente un elemento importante parte del estudio de llenado simulado existe falla I
para el éxito del procesamiento aséptico es el personal, por ser inherente a su desempeño.
una posible fuente de contaminación para el producto. De allí la Si llevan a cabo operaciones o trabajos que se
necesidad de establecer medidas de control específicas para consideren inaceptables en las áreas de PA.
este, las cuales van desde el establecimiento de indumentaria y Si falla en las pruebas de ejecución de técnicas de
SISTEMAS CRÍTICOS
equipos de protección específicos y el establecimiento de vestido y desvestido.
tiempos de permanencia en las áreas de procesamiento Si su tendencia de resultados microbiológicos es
aséptico, hasta la necesidad de que todo el personal involucrado ascendente.
esté capacitado, entrenado y calificado. El personal que labore
en las áreas de fabricación de PA debe recibir capacitación El personal que pierda el estado calificado no podrá ingresar
específica en los procedimientos que empleará en sus nuevamente a las áreas asépticas hasta ser reentrenado e
actividades, entrenamiento detallado para realizar sus funciones implementar las acciones correctivas necesarias para su
específicas y, posteriormente, ser calificado a fin de contar con reincorporación al PA.
evidencia documental que demuestre que es capaz de llevar a Todo el personal que labore en las áreas de PA, aun cuando ya
cabo sus funciones. esté calificado debe encontrarse bajo un programa integral de
Para las operaciones asépticas, la capacitación y entrenamiento capacitación y adiestramiento continuo, dichas actividades
debe incluir técnicas de vestido y desvestido, operaciones en deben encontrarse establecidas en procedimientos y deben
áreas limpias, entrenamiento básico en microbiología y incluir entre otros: conceptos básicos de microbiología,
operaciones específicas para las áreas limpias, capacitación técnicas de vestido, reglas de higiene y otros temas específicos
para las intervenciones en áreas limpias, Buenas Prácticas de a sus actividades.
Fabricación, procedimientos para el desempeño o Como parte del estudio de llenado simulado debe efectuarse
comportamiento dentro de las áreas de fabricación, técnicas monitoreo del personal de su uniforme y guantes en uso,
asépticas, así como las funciones específicas que realicen tales también podrán efectuarse monitoreos adicionales como parte
como filtración, armado y desarmado de maquinaria y equipo, de la calificación del personal, las particularidades de dicha
ajustes, reparaciones, mantenimiento, limpieza, sanitización, actividad son abordadas en la sección de monitoreo.
operación, manipulación aséptica de los componentes y del El personal que labora en áreas asépticas debe ser monitoreado
producto, la transferencia, el muestreo, el monitoreo y otras al menos cada seis meses para infecciones de piel y mucosas.
intervenciones inherentes al PA, incluidos los trabajos de Además, debe ser adiestrado para dar aviso cuando padece
mantenimiento correctivo y/o preventivo. alguna enfermedad de esta naturaleza y deberá ser retirado del
Para el entrenamiento inicial del personal, el ingreso a las áreas área aséptica en cuanto informe de su condición hasta que se
de fabricación debe ser estrechamente supervisado y siempre demuestre que se ha recuperado completamente del
deben estar acompañados de otra persona que tenga su padecimiento. Para este fin, el personal involucrado en el PA
calificación vigente, así mismo, se debe evitar que su ingreso se debe incluir en su entrenamiento el dar aviso a su supervisor de
efectúe durante las etapas críticas del PA. cualquier padecimiento en cuanto lo perciba o le sea detectado.
Una vez efectuada la capacitación y entrenamiento
satisfactoriamente debe efectuarse la calificación del personal. CONTROL AMBIENTAL
Los requisitos para la calificación del personal de las áreas Un programa de control ambiental debe ser capaz de detectar
asépticas deben estar escritos en un procedimiento y deben oportunamente una desviación adversa de las condiciones
contar con registros de los resultados que avalen la calificación microbiológicas de modo tal que permita tomar acciones
del mismo. correctivas significativas y eficaces. Es responsabilidad del
La calificación inicial del personal que labore en las áreas de fabricante desarrollar, iniciar, implementar y documentar tal
PA debe incluir pruebas para demostrar su dominio de la programa de control ambiental microbiológico.
técnica aséptica, vestido/desvestido que debe evidenciarse al Aunque se analizan las recomendaciones generales para
realizar con éxito una prueba de manipulación y movimientos programa de control ambiental, es imperativo ajustarlo a las
dentro de las áreas limpias, que por decisión del establecimiento instalaciones y condiciones específicas.
podrá ser grabada a fin de observar el comportamiento y El control de partículas totales en ambientes controlados, incluso
movimientos durante las operaciones. La demostración final del mediante el uso continuo de instrumentos electrónicos, no
éxito de la capacitación y el otorgamiento de la calificación al suministra información acerca del contenido microbiológico del
personal será el haber participado exitosamente en una SPA ambiente. La limitación básica de los contadores de partículas es
realizando la mismas funciones o actividades que van a que miden partículas de 0.5 micras o mayores. Si bien los
efectuar durante la producción real. microorganismos del aire no son células individuales o que
Partiendo de dicha premisa únicamente podrán ingresar y flotan libremente, con frecuencia se asocian a partículas de 10 a
laborar en áreas asépticas el personal que haya cumplido 20 micras. Los conteos de partículas así como los conteos
satisfactoriamente su calificación. El personal debe ser microbianos dentro de ambientes controlados varían según la
evaluado en técnicas asépticas por lo menos una vez al año, localización del muestreo y las actividades que se desarrollan
mediante su participación en un estudio de SPA. durante el muestreo. El control de partículas no viables y de
El estado calificado del personal se pierde si presenta uno o microorganismos en el ambiente es una función de control
más de los siguientes puntos: importante para satisfacer los requisitos de cuartos limpios.

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Los programas de control microbiano en ambientes Aire Revisar el nivel de actividad del personal.
I controlados deben evaluar la eficacia de las prácticas de Revisar el desempeño de patrones de flujo de
limpieza y desinfección realizadas por el personal que podrían aire y pruebas de humo, cambios de aire.
afectar la biocarga del ambiente controlado. El control Revisar las técnicas de asepsia del personal.
microbiano independientemente del diseño del sistema, no Revisar los requerimientos de vestimenta de
requiere forzosamente identificar y cuantificar todos los acuerdo al área.
microorganismos presentes en los ambientes controlados. Sin Inspeccionar los filtros de aire en búsqueda de
SISTEMAS CRÍTICOS
embargo, el control ambiental de rutina, debe proporcionar perforaciones y la presión diferencial a través
información suficiente para determinar que el ambiente del filtro.
controlado se encuentra dentro de control de acuerdo a Revisar los procesos de
especificaciones. El control microbiológico ambiental y el desinfección/sanitización, intervalos y eficacia
análisis de datos por parte del personal calificado, permite de desinfectantes.
mantener un estado de control en cuartos limpios y ambientes Verificar las presiones diferenciales
controlados. Debe realizarse un muestreo del ambiente durante particularmente respecto a la última
la operación normal para recopilar datos significativos. El sanitización.
monitoreo microbiológico debe realizarse cuando se encuentre Evaluar el equipo mecánico como posible
el personal operativo completo, los materiales estén en la zona fuente de contaminación.
de trabajo y se estén desarrollando las actividades de proceso. Evaluar la integridad de las superficies del
El control microbiológico de cuartos limpios y algunos otros cuarto (techo, paredes, piso).
ambientes controlados, cuando corresponda, debe incluir Revisión de método y técnica de muestreo.
monitoreo de: aire ambiental, aire comprimido que se emplea Superficies Investigar las superficies como posibles
en la zona crítica, superficies, equipos, recipientes de fuentes de contaminación.
desinfección, pisos, paredes y la vestimenta del personal (por Revisar los registros de limpieza para evaluar
ejemplo: guantes, overoles). El objetivo del programa de la sanitización/desinfección. Selección de
control ambiental es obtener estimaciones representativas de la agentes de limpieza, programa de sanitización.
biocarga del ambiente. Cuando se tengan los datos recopilados Revisar eventos inusuales durante la
y analizados, el personal capacitado debe evaluar las manufactura.
tendencias. Si bien es importante revisar los resultados Examine las áreas durante su uso.
ambientales con la frecuencia recomendada y especificada, Verifique la falta de algún control.
también hay que revisar los resultados durante periodos Determine la sensibilidad de los
prolongados para determinar tendencias. Las tendencias microorganismos aislados al desinfectante
pueden visualizarse mediante la construcción de gráficas de empleado.
control estadístico que incluyen niveles de alerta y de acción. Revise si detecta el microorganismo aislado en
El control microbiológico de ambientes controlados puede otras pruebas.
evaluarse en parte mediante estos datos de tendencias. Deben Revisión de método y técnica de muestreo.
emitirse informes o resúmenes periódicos para alertar al Personal Revise si detecta el microorganismo aislado en
gerente responsable. otras pruebas.
Cuando se exceda el nivel microbiano especificado de un Verifique el estado de salud del personal
ambiente controlado, debe revisarse la documentación y hacer involucrado en el proceso.
una investigación. Verifique el entrenamiento del personal.
Revisar capacitación adicional sobre prácticas
Definir el alcance del problema, causas y acciones de de uso de vestimenta.
acuerdo al sistema de calidad. Revisión de método y técnica de muestreo.
Recopilar la información de datos históricos. Revisión de las tendencias de todos los
Evaluar el impacto en el producto o impacto en control resultados de todas las revisiones mencionadas
ambiental. en esta tabla, los cuales deberán documentarse.
Evaluar necesidad de dejar el producto en cuarentena.
Evaluar la necesidad de muestreos adicionales y planes Después de la investigación, entre las acciones a tomar podrían
de acción. incluirse el refuerzo de capacitación del personal para enfatizar
Notificación al personal responsable. el control microbiano del ambiente; muestreos adicionales y
más frecuentes, desinfecciones adicionales, análisis adicionales
Los detalles de la investigación podrían ser distintos según el de los productos, identificación del contaminante microbiano y
tipo de producto y proceso. La investigación debe incluir una su probable origen y determinar la necesidad de reevaluar los
revisión de la documentación de mantenimiento de la zona, procedimientos normalizados de operación vigentes y si fuera
documentación de desinfección, parámetros físicos u necesario revalidarlos.
operativos inherentes tales como cambios de temperatura y La revisión de los resultados de la investigación y de las
humedad relativa y la capacitación del personal involucrado. pruebas permite determinar la importancia del nivel
Cuando se exceden los niveles de alerta debe realizarse una microbiano excedido y la aceptabilidad de las operaciones o
investigación dependiendo del sitio de muestreo que se productos procesados en tal condición. Las investigaciones y
encuentra fuera de especificación. las razones relacionadas al curso de acción se deben documentar

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e incluir como parte del sistema general de gestión de calidad. Monitoreo Tipo de medio Periodo de incubación
Debe existir un programa de monitoreo ambiental de aire, Para monitoreo de rutina I
superficies y personal descrito en un PNO, incluyendo: Superficies Agar de soya 30 a 35 °C por 3 días
Placas de tripticaseína cuando sólo se emplee para
Los métodos deben ser adecuados a los requisitos de la sedimentación bacterias o
clase a evaluar. Muestreo De 30 a 35 °C por 2 días
SISTEMAS CRÍTICOS
Procedimiento de muestreo por cada clase de área y cuantitativo de cuando lo emplee tanto para
tipo de muestreo (aire pasivo, aire activo, superficies, aire bacterias como para hongos
personal). Monitoreo de seguido 20 a 25 °C por 3
Frecuencia de muestreo (duración, turnos, etc.). manos días
Representación gráfica de los sitios de muestreo. Para monitoreo específico para hongos
Métodos de prueba: medios a emplear, equipo a usar. Monitoreo Agar dextrosa 20 a 25 °C por 5 días
Formatos de reporte. empleando Sabouraud,
Metodología para el análisis de tendencia. cualquier técnica Agar dextrosa
Debe realizarse un control gráfico para evaluar la Sabouraud
tendencia del monitoreo ambiental. modificado
Tipo de monitoreo dinámico o estático. Para monitoreo específico para anaerobios
Procedimiento de contingencia en caso de resultados Monitoreo Agar de soya 30 a 35 °C por 5 días bajo
fuera de nivel. empleando tripticaseína o condiciones de anaerobiosis
cualquier técnica cualquier otro en jarra o algún otro
Los sitios de muestreo deben ser seleccionados con una media método.
justificación basada en un análisis de riesgo, así como en los adecuado para
resultados de la calificación del sistema HVAC. anaerobios
Es esencial realizar pruebas adecuadas y optimizar las
características físicas del cuarto limpio o del ambiente Pueden emplearse otros medios de cultivo y diluyentes usados
controlado antes de completar la validación del programa de para muestreo o cuantificación de microorganismos:
control microbiológico. Asegurar que el ambiente controlado
funciona bien y según sus especificaciones de ingeniería ayuda a. Medios líquidos: solución salina triptonada, agua
a garantizar que la biocarga del ambiente cumple los requisitos peptonada, solución salina amortiguada, gelatina
para el procesamiento aséptico. Dichas pruebas deben repetirse amortiguada, gelatina amortiguada enriquecida,
durante la el control de rutina del cuarto limpio o del ambiente infusión cerebro corazón, caldo de soya tripticaseína.
controlado y siempre que se realicen cambios importantes en el b. Medios sólidos: agar nutritivo, agar extracto glucosado
funcionamiento, proceso, flujo de personal, operación, flujo de de triptona, agar lecitina, agar infusión cerebro
materiales, sistemas de manejo de aire o distribución de equipos. corazón, agar para placa de contacto.
FACTORES CRÍTICOS EN EL DISEÑO E En general, las pruebas para anaerobios estrictos no son de
IMPLEMENTACIÓN DE UN PROGRAMA DE rutina. Sin embargo, si las condiciones o investigación lo
CONTROL AMBIENTAL MICROBIOLÓGICO. justifican, como por ejemplo, la identificación de tales
El tipo de medio, líquido o sólido usado para el muestreo o con organismos en instalaciones de prueba de esterilidad
placas de microorganismos depende del procedimiento y justificaría realizar monitoreo frecuente para anaerobios.
equipos usados. Se debe evaluar la aptitud de todos los medios Debe evaluarse la capacidad de promover crecimiento de
utilizados según el propósito previsto. El medio de crecimiento cualquiera de los medios de cultivo para detectar y cuantificar
microbiológico solidos multipropósito más común es el agar los microorganismos que se desean encontrar. Además, para la
soya tripticaseína. prueba de promoción de crecimiento, puede emplearse la
Los medios de cultivo recomendados pueden ser adicionados microflora representativa aislada del ambiente o las cepas
con aditivos para reducir o minimizar los efectos de agentes ATCC preparadas a partir de esos aislamientos. Los medios
desinfectantes o de antibióticos o de cualquier otra sustancia deben ser capaces de promover el crecimiento con
que pueda inhibir el crecimiento al estar presente en los sitios inoculaciones de menos de 100 UFC de los microorganismos
de muestreo. de reto.

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Los procesos de esterilización de los medios de cultivo deben para esterilización terminal depende de la susceptibilidad de
I estar validados. supervivencia en el producto y del potencial de proliferación de
Un programa de control ambiental adecuado, debe incluir la contaminación microbiana. La identificación y el número
identificación y evaluación de lugares de muestreo y la estimado de microorganismos resistentes a la esterilización
validación de métodos para el muestreo microbiológico del posterior pueden ser más críticos que un monitoreo ambiental
ambiente. microbiológico de los ambientes de fabricación circundantes.
Los métodos usados para la identificación de microorganismos El usuario debe llevar a cabo un análisis de riesgos y
SISTEMAS CRÍTICOS
aislados deben verificarse usando microorganismos desarrollar una justificación para las ubicaciones y frecuencias
indicadores. de muestreo para cada ambiente controlado. La clasificación de
No se debe introducir contaminación a un cuarto limpio de un cuarto limpio ayuda a establecer niveles de control, pero no
fabricación como resultado del uso de medios o equipo de implica que todos los cuartos con la misma clasificación deban
muestreo contaminados. El uso de medios preparados tener los mismos niveles de control ni la misma frecuencia de
asépticamente representa una preocupación especial. Siempre monitoreo. El monitoreo debe reflejar los requisitos de control
que sea posible, se deben esterilizar terminalmente los medios microbiológico de las actividades de fabricación o
de muestreo y sus envolturas por calor húmedo, radiación u procesamiento.
otros medios adecuados. Las técnicas formales de evaluación de riesgos pueden
Cuando se deban usar medios preparados asépticamente, los conllevar a la formación de un programa de control de
analistas deberán llevar a cabo una preincubación e inspección contaminación científicamente válido.
visual de todos los medios de muestreo antes de introducirlos La siguiente tabla sugiere frecuencias de muestreo en orden
en el cuarto limpio. decreciente de frecuencia y según loa criticidad o el riesgo para
el producto del área muestreada. Esta tabla distingue entre el
ESTABLECIMIENTO DE PLANES Y SITIOS DE procesamiento aséptico en el que el personal está sujeto al uso
MUESTREO. aséptico de vestimentas y aquel en el que resulta apropiado un
Resulta necesario determinar ubicaciones específicas para el menor uso de vestimentas. Los planes de muestreo para
muestreo de aire y de superficies durante el inicio o la puesta monitoreo ambiental deben ser flexibles con respecto a las
en servicio de un cuarto limpio u otro ambiente controlado. frecuencias del monitoreo; asimismo, las ubicaciones del plan
Entre las ubicaciones consideradas se deben incluir aquellas en de muestreo se deben ajustar basándose en la tasa observada de
la proximidad del producto, envases, cierres y superficies de contaminación y en los análisis de riesgos continuos. Los
contacto expuestos. Durante el procesamiento aséptico, al área fabricantes, basándose en observaciones de largo plazo, pueden
en la que los envases cierres y producto están expuestos a incrementar o disminuir el muestreo en una ubicación dada o
menudo se le denomina zona crítica-la zona crítica siempre es liminar una ubicación de muestreo. El muestreo en exceso pude
un ambiente clase A (ISO-5). Para operaciones asépticas, toda ser perjudicial para el control de contaminación al igual que la
la zona crítica debe tratarse como un campo estéril. Ningún falta de muestreo, por lo que considerar cuidadosamente los
objeto no estéril, incluyendo las manos enguantadas del riesgos y las fuentes de contaminación pude ayudar a
personal del cuarto limpio o un guante para RABS/aislador, determinar la intensidad del muestreo.
debe entrar en contacto con un producto estéril, cierre de La siguiente tabla muestra la frecuencia de muestreo (los
envase, estación de llenado o equipo de transporte o durante operadores son vestidos asépticamente en estos ambientes con
operaciones de procesamiento aséptico. Los operadores y el excepción de ambiente adyacente a aisladores). Esta
personal de monitoreo ambiental nunca deben tocar partes recomendación no aplica a las áreas de producción de
estériles de transportadores, agujas de llenado, tolvas o productos no estériles u otros ambientes no clasificados en
cualquier otro equipo que este dentro de la ruta de descarga del cuales el vestido aséptico no se realiza):
producto. Esto significa que es mejor realizar el monitoreo de
estas superficies al final de las operaciones de producción. Área o punto de muestreo Frecuencia de monitoreo
La frecuencia del muestreo depende del proceso de fabricación Cuarto limpio/RABS
que se lleve a cabo dentro de un ambiente. Los ambientes Zona crítica (ISO 5 o mejor)
clasificados que se usan solo para proporcionar un nivel Monitoreo activo de aire Continuo/durante todo el
general de biocarga menor en las áreas de fabricación de tiempo que dure el proceso de
productos no estériles requieren monitoreo ambiental de menor llenado
frecuencia. Los ambientes clasificados en los que se llevan a Monitoreo de superficies Al final de la operación
cabo operaciones cerradas de fabricación, entre las que se Área aséptica adyacente a la zona crítica
incluyen fermentación, procesamiento estéril de un ingrediente Todos los puntos Cada turno operativo
farmacéutico activo y procesos químicos, requieren un número Otras áreas asépticas no adyacentes
menor de sitios de monitoreo, así como monitoreo menos Todos los muestreos Una vez por día
frecuente debido a que el riesgo de contaminación microbiana Aisladores
del entorno es comparativamente bajo. El monitoreo Zona crítica (ISO 5 o mejor)
microbiológico de ambientes en donde los productos se llenan Monitoreo activo de aire Una vez por día
antes de la esterilización terminal a menudo es menos crítico Monitoreo de superficies Al final de la campaña
que el monitoreo en las áreas de procesamiento aséptico. La Área aséptica adyacente al aislador
cantidad de monitoreo requerido en las operaciones de llenado Todos los puntos Mensualmente

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DE SITIOS DE MUESTREO DENTRO DE CUARTOS Sistema Sitio

LIMPIOS Y ÁREAS DE PROCESAMIENTO Aire ambiental Cerca de contenedores abiertos o llenos I
ASÉPTICO. (línea de llenado)
La norma ISO 14644 sugiere una metodología de cuadrícula Aire de cuarto Cerca al área de trabajo, cerca de
(grid approach) para la clasificación de partículas del aire extracción, donde hay mayor circulación
totales en cuartos limpios. Esta metodología es adecuada para del personal.
SISTEMAS CRÍTICOS
evaluar el desempeño de la calidad del aire en relación a las Superficies Manijas de puertas, paredes, cortinas
partículas totales en función del objetivo de su diseño. (instalación)
Asimismo, las cuadrículas pueden tener un gran valor para el Superficies (equipo) Línea de llenado, tableros de control,
análisis de riesgos por contaminación microbiana, aunque, en tapas, etc.
general las cuadriculas que no presentan actividad por parte del Áreas de Cerca de la fuente de vacío
personal propenden a bajos niveles de contaminación. La microbiología
contaminación microbiana está profundamente relacionada con (manifold)
el personal, por lo que el monitoreo microbiológico en Operadores de línea Impresión de dedos como mínimo, sobre
ambiente sin personal tiene un valor limitado. de llenado la vestimenta orientado a axilas, boca,
Para seleccionar de la mejor manera los sitios de muestreo se etc.
deben tomar en cuenta la actividad humana durante Flujos laminares Cerca de la zona de trabajo, donde existe
operaciones de fabricación. La observación y el mapeo mayor cantidad de movimientos, etc.
cuidadosos del cuarto limpio durante la fase de calificación
pueden proporcionar información útil relacionada con el PARÁMETROS DE CONTROL MICROBIOLÓGICO EN
movimiento y la ubicación del personal. Semejante CUARTOS LIMPIOS, AISLADORES Y RABS.
observación puede generar también información importante Desde principios de 1980, los fabricantes han establecido niveles
sobre las manipulaciones e intervenciones más frecuentes. de alerta y acción para monitoreo ambiental. En años recientes, se
La ubicación y movimiento de personal dentro del cuarto ha reducido en buena medida la diferencia entre los niveles de
limpio se correlacionan con el riesgo de contaminación para el alerta y acción, especialmente en ambientes clase A (ISO 5). El
ambiente y para los procesos que se llevan a cabo dentro de crecimiento y la recuperación en valoraciones microbiológicas
dicho ambiente. Los sitios de muestreo deben seleccionarse de presentan una variabilidad normal en el intervalo de + 0.5 log 10.
tal manera que evalúen el impacto del movimiento y el trabajo Los estudios sobre muestreadores de aire microbiológicos activos
del personal dentro del área, en particular las intervenciones y indican que es posible una variabilidad mayor a diez veces de los
manipulaciones dentro de la zona critica. dispositivos de muestreo comúnmente usados. Como resultado de
La vía más probable de contaminación es a través del aire, por esta variabilidad inherente y del error de muestreo indeterminado,
lo que las muestra más críticas para evaluación de riesgos son la supuesta diferencia entre, por ejemplo, un nivel de alerta de 1
aquellas relacionadas con la contaminación transmitida por el UFC y un nivel de acción de 3 UFC no son analíticamente
aire cerca de materiales estériles expuestos. Otras áreas de significativos. Desde el punto de vista científico, no es válido
preocupación son los puntos de ingreso donde los equipos y tratar las diferencias que se encuentran dentro de los intervalos
materiales se mueven desde áreas con clasificaciones más esperados, y por tanto normales, como numéricamente diferentes.
bajas hacia áreas con clasificaciones más altas. El esquema de Debido a la exactitud y precisión limitadas de los ensayos de
monitoreo debe incluir las áreas dentro y alrededor de las crecimiento y recuperación microbiana, los analistas pueden
puertas y esclusas de aire. Se acostumbra también muestrear considerar la frecuencia con la que se detecta contaminación en
paredes y pisos: de hecho, el muestreo en estas ubicaciones lugar de números absolutos de UFC detectadas en una sola muestra.
puede proveer información sobre la efectividad del programa Asimismo, una UFC no es una enumeración directa de
de sanitización. El muestreo de estas ubicaciones puede miroorganismos presentes, sino una medición de la contaminación
llevarse a cabo relativamente con poca frecuencia, debido a que pudiera haberse originado de un grupo de organismos.
que es poco probable que la contaminación afecte al producto. Se deben determinar las tasas de recuperación de contaminación
Los operadores nunca deben tocar los suelos ni paredes y, por promedio para cada ambiente de cuarto limpio, mientras que los
consiguiente, no debería presentarse la transmisión mecánica cambios en las tasas de recuperación de contaminación en un sitio
de contaminación de estas superficies a las áreas críticas donde determinado o dentro de un cuarto determinado pueden indicar la
se encuentra expuesto el producto. necesidad de acciones correctivas. Dentro de la zona clase A
Los fabricantes generalmente deben monitorear las superficies (ISO-5), los métodos actuales pueden permitir la consecución de
dentro de zonas críticas, aunque dicho control debe realizarse tasas de recuperación del aire y de superficies de 1 % o menores.
únicamente al final de las operaciones. Se deben evitar residuos Las tasas de recuperación de contaminación para RABS cerrados
de medios o diluyentes de hisopos húmedos sobre las y sistemas de aisladores deben ser significativamente menores y
superficies, debido a que pueden ocasionar la proliferación de se puede esperar que sean < 0.1 %, basándose en los resultados de
microorganismos. Además, la limpieza de superficies para monitoreo publicados.
eliminar diluyentes o medios requiere la intervención y La contaminación observada en múltiples sitios en un ambiente
movimientos de personal, lo que puede resultar en la liberación dentro de un solo periodo de muestreo puede indicar un aumento
de contaminación microbiana dentro de la zona crítica y en los riesgos para el producto y se debe evaluar cuidadosamente.
puede perturbar el flujo de aire. Ejemplos de selección de Asimismo, la aparición de contaminación casi de manera
sitios de muestreo: simultánea en múltiple sitios puede ser generada por una técnica

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de muestreo deficiente, por lo que se requiere una cuidadosa frecuencia posible. La ocurrencia de semejantes variaciones en
I revisión antes de formular conclusiones sobre la potencial pérdida clase A (ISO-5) puede ser indicativa de una pérdida importante
de control. Volver a muestrear un ambiente varios días después de control cuando éstas se presentan dentro de la zona crítica
de la contaminación ofrece poco valor, debido a que las clase A (ISO-5) con estrecha proximidad al producto y a los
condiciones durante un muestreo pueden ser difíciles de duplicar componentes. Por consiguiente, cualquier variación en
con exactitud durante otro muestreo. muestras clase A (ISO-5) >15 UFC requiere una investigación
Las muestras de superficies también se pueden tomar de cuidadosa y minuciosa.
SISTEMAS CRÍTICOS
vestimentas para cuartos limpios. Se debe enfatizar el muestreo Una consideración clave para un número anormalmente alto de
de personal durante la validación, el cual se debe llevar a cabo microrganismos recuperados radica en si el incidente es aislado
una vez terminado el trabajo de producción a fin de evitar la o si se correlaciona con otras recuperaciones. Se debe revisar la
contaminación adventicia de las vestimentas. En este caso, el tendencia de cuenta microbiana de al menos dos semanas
promedio también debe ser < 1 % para estos sitios de muestreo. previas al incidente de cuenta anormalmente alta, de modo que
Los guantes en RABS y aisladores cerrados deben cumplir con la se revise si existen cuentas que indiquen un patrón inusual.
expectativa más rigurosa para tasas de recuperación de Asimismo, se deben considerar todas las cuentas microbianas
contaminación de < 0.1 %. incluyendo aquellas que se encuentran en el intervalo común de
Debido a la variabilidad inherente de los métodos de muestreo 1-5 UFC. La identificación de los microorganismos
microbiano, las tasas de recuperación de contaminación encontrados es un factor importante para llevar a cabo esta
representan una medición más útil de los resultados de tendencias investigación.
que enfocarse en el número de colonias recuperadas de una En el caso de un solo valor atípico aislado, el establecimiento
muestra determinada. La siguiente tabla proporciona las tasas de de una causa definitiva probablemente no sea posible, por lo
recuperación recomendadas para ambientes de procesamiento que solo podrán considerarse medidas correctivas generales.
aséptico. La tasa de incidencia de 1 % significa que únicamente el Resulta inapropiado sugerir una causa raíz para la que no se
1 % de las muestras tomadas presentan contaminación, cuenta con una evidencia científica sólida. Además se debe ser
independientemente del número de colonias. En otras palabras, consciente de la variabilidad del análisis microbiológico. Desde
99 % de las muestras tomadas están completamente exentas de una perspectiva realista, no existen razones científicas para
contaminación. Las tasas de recuperación de contaminación que tratar una recuperación de 25 UFC como estadísticamente
son más altas que las recomendadas en la tabla siguiente pueden diferente de una recuperación de 15 UFC. Un valor de 15 UFC
ser aceptables en cuartos con clasificaciones similares que se usan no debe considerarse significativo en términos de control de
para actividades de bajo riesgo. Las acciones se vuelven proceso, debido a que en realidad, no existe diferencia entre
necesarias cuando la tasa de recuperación de contaminación una recuperación de 14 UFC y una de 15 UFC. Los
presenta tendencias superiores a estas recomendaciones durante microbiólogos deben usar un razonamiento científico práctico
un periodo significativo. en sus metodologías para evaluar desviaciones.
Clase Muestreo Sedimentación Placas Impresión METODOLOGÍA E INSTRUMENTAL PARA

de de en placa de de guantes MUESTREO MICROBIOLÓGICO DEL AIRE EN
cuarto aire activo (9 cm) contacto o
AMBIENTES CONTROLADOS.
(%) 4 h de o hisopo vestimenta
exposición (%) (%) Los científicos en general aceptan que los organismos
(%) transportados por el aire, en ambientes controlados, pueden
Aislador/RABS < 0.1 < 0.1 < 0.1 <1 influir sobre la calidad microbiológica de los productos
cerrado intermedios y terminados fabricados. También se acepta que la
(Clase A o mejor) estimación de esos instrumentos y procedimientos usados para
Clase A <1 <1 <1 <1 realizar estos análisis. Por lo tanto, cuando se usen otros
(ISO-Clase 5) métodos o equipos, debe determinarse la equivalencia general
Clase B <3 <3 <3 <3 de los resultados obtenidos. Se espera que los avances
Clase C <5 <5 <5 <5 tecnológicos brinden innovaciones que mejoren la precisión y
(ISO-Clase 7) sensibilidad con respecto a la metodología actual y que puedan
Clase D < 10 < 10 < 10 < 10 justificar un cambio en los números absolutos de organismos
(ISO-Clase 8) que se detectan.
En la actualidad, los muestreadores más usados en la industria
La frecuencia de detección se debe basar en datos de farmacéutica y de dispositivos médicos son los muestreadores
monitoreo reales y se debe basar en datos de monitoreo reales centrífugos y por impacto. Existen dos tipos de muestreo de
y se debe retabular mensualmente. Los niveles de acción deben aire: el semicuantitativo por sedimentación en placa y el
basarse en la capacidad empírica del proceso. Si las muestreo cuantitativo que requiere definir el volumen de
frecuencias de detección exceden las recomendaciones de la muestreo, algunos ejemplos de estos son: Sieve impactor,
tabla anterior o son mayores que la capacidad establecida del Slit-to agar Sampler, Gelatine Filter sample, Centrifugal
proceso, entonces deben tomarse acciones correctivas. sampler, entre otros. A continuación se detallan algunos
Las variaciones superiores a aproximadamente 15 UFC equipos disponibles en el mercado, sin embargo el usuario
recuperadas de una sola muestra clase A (ISO-5), derivadas del tiene la responsabilidad de determinar la selección,
aire, de superficies o del personal, deben ocurrir con la menor conveniencia e idoneidad de cada muestreador.

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Método/equipo Ventaja Desventaja

Sedimentación Este método se basa en la Método sencillo, económico, prácticamente Las cuentas microbianas no pueden ser I
exposición de placas de agar abiertas en el puede ser empleado cualquier medio de correlacionadas con un volumen de aire, la
ambiente a ser muestreado. Detecta la cultivo, pueden ser colocadas en cualquier disposición de las partículas es afectada por
contaminación por sedimentación por sitio, permite muestreo de largos periodos el tamaño de partículas, temperatura, y
gravedad. de tiempo con cambios de placas, no flujo/volumen de aire pasando a través de
SISTEMAS CRÍTICOS
requiere fuentes de poder. su superficie, el medio puede secarse en
largos periodos de tiempo. No cuantitativo
(por volumen de aire). El tiempo de
monitoreo es largo, 4 a 5 h. Se diseña con
posiciones fijas.
Muestreador centrífugo. En inglés Reuter Se puede muestrear desde 40, 100, 1 000 Un solo proveedor de tiras de cultivo, no es
centrifugal sampler La unidad consiste en litros de aire por minuto tiene opción de posible la calibración directa del volumen
una hélice o turbina que aspira un volumen equipo a prueba de explosión, con piezas de muestreo, hay riesgo de manipulación de
conocido de aire hacia el interior de la autoclaveables, conveniente, velocidad de las tiras al insertar y remover la tira de la
unidad y luego impulsa el aire al exterior muestreo, es portable, la fuente de poder es cabeza del muestreador, puede provocar
hacia una tira de agar nutritivo dispuesta por baterías, el flujo de aire puede ser disturbios del flujo laminar por turbulencia
tangencialmente sobre una base plástica calibrado. del aire de entrada y salida, el muestreo es
flexible. selectivo para partículas grandes por lo que
puede dar cuentas más altas.
Impactador de tamiz. En inglés Sieve Con orificios centrales que reducen el Requiere alto tiempo de muestreo, deben
impactor El aparato consiste en un escape de partículas viables, se limpia y evaluarse varios metros cúbicos de aire para
recipiente diseñado para alojar una placa de desinfecta, hay autoclaveables, puede ser lograr resultados de razonable exactitud y
Petri con agar nutritivo. La cubierta de la conectado a PC alcanza un volumen de precisión, lo cual no es práctico.
unidad tiene perforaciones de un tamaño muestreo de 25, 1 500, 5 000 L, pueden
predeterminado. Una bomba de vacío emplearse diferentes tamaños de placas y
extrae un volumen conocido de aire a través filtros. Adecuada velocidad de muestreo, es
de la cubierta y las partículas del aire que portable, la fuente de poder es por baterías,
contienen microorganismos chocan sobre el el flujo de aire puede ser calibrado.
medio de agar de la placa Petri. Algunos muestreadores están disponibles
con una serie de recipientes en cascada, con
perforaciones de tamaño decreciente. Estas
unidades permiten determinar la
distribución de tamaño de las partículas que
contienen microorganismos viables, basada
en el tamaño de las perforaciones que dejan
pasar las partículas a las placas de agar.
Filtración La unidad está formada por una Se pueden medir grandes volúmenes de La membrana del muestreo debe ser
bomba de vacío con una manguera de aire, se pueden escoger diferentes tipos de colocada en medio de cultivo para la
extensión que termina en un portafiltros quefiltros y tamaños de poro, el uso de cuantificación de microorganismos, el
puede ubicarse lejos, en el espacio crítico. membrana de gelatina es útil para evitar la equipo no es fácilmente portable. Se debe
El filtro está constituido por fibras de desecación de microorganismos, el sistema determinar si la tubería adicional altera el
gelatina dispuestas al azar, capaces de de filtración es esterilizable, es usado en recuento viable del aire. Este efecto debe
retener los microorganismos transportados aisladores, el flujo de aire puede ser eliminarse o, si no es posible debe
por el aire. Después de un tiempo de calibrado. introducirse un factor de corrección en el
exposición especificado, se retira informe de los resultados.
asépticamente el filtro y se disuelve en un
diluyente adecuado; luego se realiza la
siembra sobre un medio de agar adecuado
para estimar su contenido microbiano.
Muestreador de aire de ranura-agar. En Se pueden medir grandes volúmenes de El equipo no es portable, la tubería puede
inglés Slit to agar sample (STA) El aire, se tiene disponibilidad del tiempo- tener un efecto en la cuenta viable, algunos
instrumento está impulsado por una fuente concentración, se puede realizar muestreo equipos no son esterilizables, algunos equipos
acoplada de vacío controlable. La toma de remoto, puede emplearse para el muestreo requieren placas de 150 mm. Tienen
aire se hace a través de una ranura de gas comprimido. generalmente una capacidad de muestreo de
estandarizada debajo de la cual se coloca 80 L/min. Si se analiza un metro cúbico de
una placa de Petri que gira lentamente y aire, entonces se requiere un tiempo de
que contiene agar nutritivo. exposición de 15 min. Podría ser necesario
usar tiempos superiores a 15 min para obtener
una muestra representativa.

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Método/equipo Ventaja Desventaja

I Atrio microbiológico esterilizable La Con orificios centrales que reducen el Requiere alto tiempo de muestreo, deben
unidad es una variante del impactador de escape de partículas viables, se limpia y evaluarse varios metros cúbicos de aire
tamiz de una sola etapa. La cubierta de la desinfecta, hay autoclaveables, puede ser para lograr resultados de razonable
unidad contiene orificios uniformemente conectado a PC alcanza un volumende exactitud y precisión, lo cual no es práctico.
espaciados de un tamaño aproximadamente muestreo de 25, 1 500, 5 000 L, pueden
6.35 mm (o 0.25 pulgadas). La base de la emplearse diferentes tamaños de placas y
SISTEMAS CRÍTICOS
unidad aloja una placa Petri que contiene filtros. Adecuada velocidad de muestreo, es
agar nutritivo. Una bomba de vacío portable, la fuente de poder es por baterías,
controla el movimiento de aire a través de el flujo de aire puede ser calibrado.
la unidad y se encuentran disponibles un Algunos muestreadores están disponibles
centro de control de unidades múltiples y con una serie de recipientes en cascada, con
una sonda de muestreo remoto. perforaciones de tamaño decreciente. Estas
unidades permiten determinar la
distribución de tamaño de las partículas que
contienen microorganismos viables, basada
en el tamaño de las perforaciones que dejan
pasar las partículas a las placas de agar.
Muestreador por sistema de aire en Se pueden medir grandes volúmenes de El equipo no es portable, la tubería puede
superficie (Muestreador SAS por sus aire, se tiene disponibilidad del tiempo- tener un efecto en la cuenta viable, algunos
siglas en inglés) Esta unidad integrada está concentración, se puede realizar muestreo equipos no son esterilizables. Tienen
formada por una sección de ingreso que remoto, puede emplearse para el muestreo generalmente una capacidad de muestreo de
aloja una placa de contacto de agar. de gas comprimido. 80 L/min. Si se analiza un metro cúbico de
Inmediatamente detrás de la placa de aire, entonces se requiere un tiempo de
contacto hay un motor y una turbina que exposición de 15 min. Podría ser necesario
aspira aire a través de la cubierta perforada usar tiempos superiores a 15 min para
de la unidad hacia la placa de contacto de obtener una muestra representativa.
agar adecuada para estimar su contenido
microbiano.
METODOLOGÍA PARA MUESTREO pasa el hisopo se define con una plantilla estéril de
MICROBIOLÓGICO DE SUPERFICIES EN tamaño adecuado. En general es entre 24 y 30 cm2. El
AMBIENTES CONTROLADOS. resultado se reporta UFC por hisopo o superficie
Otro componente del programa de control microbiano en muestreada. La técnica de análisis y el muestreo puede
ambientes controlados es el muestreo de las superficies de afectar el resultado.
equipos, instalaciones e indumentaria personal usados en esos Enjuague: Empleado para muestreo de grandes
ambientes. La estandarización de métodos y procedimientos de superficies, como tanques, trenes, etc. El agua es
muestreo de superficies no se ha tratado en la industria generalmente la solución de enjuague, después es
farmacéutica tan ampliamente como la estandarización de los tratada.
procedimientos de muestreo de aire. Para minimizar los Placas de contacto/placa flexible: Generalmente se
trastornos en las operaciones críticas, el muestreo de superficie emplean placas de 55 mm de diámetro. Se presiona el
se realiza al finalizar las actividades. medio suavemente contra la superficie, se incuba
Muestreo de personal: se busca la detección de contaminantes directamente. Se tiene que remover residuos del medio
viables en guantes y ropa mediante impresión de los dedos con por ejemplo con hisopo impregnado de alcohol. Se
guante sobre la placa de agar, uso de placas de contacto en emplea solo en superficies planas. Puede usarse
antebrazo o al frente del cuerpo, se realiza durante validación y directamente agar selectivo para la cuantificación
entrenamiento así como en rutina, lo mejor es realizarlo específica de hongos, esporas, etc. La humedad del
cuando el personal va saliendo del área y debe estar definido medio puede provocar confluencia de colonias. Se
en el procedimiento. reporta UFC por placa de contacto o superficie
Muestreo de superficies, existen 3 tipos de muestreo: muestreada.
Hisopo: La muestra se toma con hisopos humedecidos El monitoreo de superficies se usa como una herramienta de
con agua estéril o solución salina o cualquier otro evaluación ambiental en todos los tipos de ambientes
diluyente adecuado. Es el mejor método para clasificados. En los ambientes clase A (ISO-5) para
superficies irregulares. Se dispersa en un diluyente para procesamiento aséptico, el monitoreo se lleva por lo general
realizar la cuenta. Los hisopos pueden ser de alginato cerca de áreas y superficies críticas. Las tolvas y rampas de
de calcio, algodón o dacron. Recomendable para alimentación que entran en contacto con superficies en cierres
superficies altamente contaminadas. La muestra puede y agujas de llenado pueden ser analizadas para detectar
ser filtrada o colocada en agar. El área por donde se contaminación microbiana. A menudo, en los cuartos limpios

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convencionales con personal, estas superficies de contacto con y estas unidades son incubadas bajo condiciones que
productos se esterilizan con vapor y se ensamblan promueven el crecimiento de microorganismos, en el caso de I
asépticamente. La capacidad de los operadores para realizar encontrarse estos presentes en cada unidad de producto.
manipulaciones asépticas se evalúa durante simulaciones del Las pruebas de llenado simulado normalmente incluyen
proceso o llenados de medios, aunque no es posible realizar de exposición del medio de cultivo microbiológico a las
esta manera una validación verdadera de la técnica del superficies de contacto del producto con el equipo, sistemas
SISTEMAS CRÍTICOS
operador. El monitoreo de superficies que se realiza en cierre contenedor, ambientes críticos y manipulaciones que
superficies que entran en contacto directo con partes o simulen lo más cercano posible las mismas condiciones de
productos estériles se debe llevar a cabo únicamente después exposición del producto real en la fabricación comercial. Los
de haber completado las operaciones de producción. El recipientes cerrados llenados con medio de cultivo son
muestreo de superficies no es una prueba de esterilidad y no incubados para detectar contaminación microbiológica.
debe considerarse un criterio para la liberación o rechazo de Después los resultados se evalúan e interpretan para
producto. Debido a que el personal debe tomar estas muestras determinar el riesgo potencial de que alguna unidad del
asépticamente, resulta difícil establecer con certeza si la producto fabricado se contamine durante el proceso de
contaminación recuperada está relacionada con el producto. fabricación normal del producto, como por ejemplo en:
adiciones de ingredientes, conexiones asépticas, llenado, cierre
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS DEL o taponado. Los datos de monitoreo ambiental durante el
PROGRAMA DE CONTROL AMBIENTAL. proceso de llenado simulado proveen información importante
El programa de control ambiental incluye una adecuada para la evaluación del proceso.
identificación de la flora obtenida del muestreo periódico y
mantenida en un cepario de manera adecuada. Si se conoce la SIMULACIÓN DEL PROCESAMIENTO ASÉPTICO (SPA)
flora habitual de los ambientes controlados, esto ayuda a
identificar la flora microbiana encontrada en la instalación que a) Diseño del estudio. Debe establecerse un programa de
se está controlando, y permite evaluar la eficacia de los pruebas de llenado simulado que deben incorporar los factores
procedimientos, métodos y agentes de limpieza y desinfección de riesgo de contaminación microbiológica que puedan ocurrir
así como los métodos de recuperación. La información reunida en la línea de fabricación.Las pruebas de llenado simulado
mediante un programa de identificación también puede resultar deben semejar el PA real lo mejor posible incorporando
útil para investigar la fuente de contaminación, especialmente actividades y condiciones del “peor caso” que sean retadoras
cuando se exceden los niveles de acción. para las operaciones asépticas.
La identificación de microorganismos aislados de las zonas b) Frecuencia y cantidad de corridas de llenado simulado. Para
críticas y lugares inmediatos a ellas debe tener prioridad sobre nuevas instalaciones o procesos de fabricación, las pruebas de
la identificación de microorganismos de zonas no críticas: simulación de procesos deben hacerse como parte de las
actividades de validación. Las pruebas iniciales de simulación
Áreas de procesos asépticos (puntos críticos): área de de procesos son llevadas a cabo después de completar las
llenado, filtración estéril, procesamiento aséptico siguientes actividades: calificación de equipo, calificación del
guantes y ropa: En general clase A (ISO 5), clase B. sistema de HVAC, calificación del sistema de agua, validación
Otras zonas controladas (seleccionadas para revelar del sistema de esterilización, implementación del sistema de
tendencias y organismos objetables). Aunque no monitoreo y control ambiental, calificación del personal que
necesariamente identificación, puede ser sólo incluya técnicas de vestido y comportamiento en áreas críticas,
morfología microscópica y colonial. y establecimiento de procedimientos normalizados de
Control en proceso, prefiltración muestras de biocarga. operación.
Cuando una línea de proceso se califica de manera inicial
Es necesario verificar los métodos de identificación y evaluar deberán hacerse corridas de llenado simulado las veces que
los equipos listos para usar según su propósito. sean necesarias hasta asegurar que los resultados satisfactorios
sean consistentes y significativos y se logre una operación en
Debe existir un PNO escrito para la caracterización e estado de control. Deberán hacerse un mínimo de tres 3
identificación de microorganismos incluyendo corridas consecutivas y separadas con resultados satisfactorios.
frecuencia de caracterización y métodos. Las corridas subsecuentes de rutina, en cantidad suficiente y
La caracterización puede incluir: morfología, gram, determinada con base en la valoración de riesgo inherente al
identificación manual o automatizada (Biomeriux vitek, proceso, deberán hacerse, al menos, cada 6 meses para cada
MIDI, Biolog PE Applied Biosystems, Qualicom, etc.). línea de proceso a fin de evaluar el estado de control del PA.
Debe diseñarse un programa en el cual deben incorporarse las
VALIDACIÓN DEL PA actividades e intervenciones representativas de cada turno.
La etapa final de la validación del PA se lleva a cabo mediante Todos los cambios de productos y de líneas de proceso deben
una serie de pruebas de Simulación del Procesamiento ser evaluados a través del sistema de control de cambios que
Aséptico (SPA) en cantidad suficiente, en las cuales el incluya un análisis de riesgos de calidad. Cualquier cambio o
producto se sustituye por un medio de cultivo, el cual detectará evento que pueda afectar la capacidad del PA para fabricar
la posible contaminación microbiológica que ingresa al producto estéril debe manejarse con las correspondientes
producto cuando las condiciones del PA no son las adecuadas, pruebas de llenado simulado.

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Por ejemplo, modificaciones de instalaciones, equipo, y líneas distintos tipos de procesos que se lleven a cabo en cada línea, y
I de proceso, cambios significativos en el personal, resultados teniendo en cuanta todas las variables que determinen la mayor
anómalos en resultados del control ambiental, cambios en el criticidad por lo que respecta al tiempo de duración.
sistema contenedor/cierre, paros de actividad prolongados, En el caso de operaciones de liofilización es necesario que los
resultados adversos de la prueba de esterilidad en producto recipientes no cerrados sean expuestos a la evacuación parcial
terminado que muestren contaminación microbiológica deberá de la cámara de manera que simule el proceso. Los viales no
hacerse un una investigación de la o las causas raíz de los deben ser congelados y deben tomarse precauciones para
SISTEMAS CRÍTICOS
problemas y pueden causar la revalidación del sistema de PA. asegurar que el medio de cultivo se mantenga en estado
c) Duración de las corridas. La duración y tamaño ideal de las aeróbico para evitar inhibición potencial del crecimiento de
corridas de llenado simulado son las mismas de la duración y probables microorganismos.
tamaño de la fabricación de un lote comercial, pues de esta d) Tamaño de las corridas. Los tamaños de las corridas de
manera se simulan mejor las operaciones normales de la llenado de proceso simulado se deben hacer de manera que se
fabricación. Como lo anterior no siempre es posible, la reproduzcan las condiciones y se determinen con exactitud la
duración de las corridas deberá definirse con base en una contaminación microbiológica potencial. Véase recomendación
valoración de los riesgos representados en cada uno de los en la tabla siguiente:
Lote de producción Tamaño mínimo del lote

de SPA (no. de Recomendaciones
Descripción Tamaño contenedores llenos con
medio de cultivo)
Pequeña escala ≤ 5 000 ≤ 5 000 El tamaño de lote para la SPA debe ser, al menos,
del mismo tamaño del lote de producción.
Escala media 5 000 a 10 000 unidades 5 000 a 10 000 unidades El tamaño del lote para SPA debe ser comparable al
del lote de producción. Para llenado de alta
velocidad o con lotes de producción de tamaño
máximo, es adecuado llenar más piezas a fin de dar
cabida a las manipulaciones asépticas,
intervenciones y una simulación realista del proceso.
Gran escala >10 000 unidades >10 000 unidades. Según Véase enfoques en esta sección.
se plantea, pueden
emplearse una variedad
de aproximaciones.
Llenado manual Cualquier cantidad Mismo tamaño del lote de El tamaño de lote para la SPA debe ser, al menos,
producción del mismo tamaño del lote de producción. La
operación completa de llenado manual representa
una intervención que debe ser capturada.
e) Velocidad de la línea. El programa de SPA debe considerar unidades de la prueba de promoción de crecimiento deben
el rango de velocidades usadas en la producción comercial. llevarse a cabo con estos mismos microorganismos.
Cada corrida de llenado simulado se debe evaluar una El proceso de fabricación debe ser simulado con exactitud
velocidad determinada de la línea y la velocidad debe ser usando medios de cultivo y condiciones que faciliten la
justificada. Por ejemplo una alta velocidad de la línea es detección de cualquier contaminación microbiológica. Cada
apropiada cuando se evalúa un proceso que se caracteriza por unidad debe ser llenada con una cantidad de y tipo de medio
intervenciones frecuentes. El uso de la prueba a baja velocidad de cultivo suficiente y, una vez llenadas, rodarlas para que el
es generalmente apropiado para evaluar procesos con medio de cultivo entre en contacto con toda la superficie
exposición prolongada de producto estéril y contenedores y/o interna del envase.
tapones en el área aséptica. La(s) velocidad(es) a evaluar deben h) Incubación y examen de todas las unidades llenadas con
determinarse con base en el análisis de los riesgos del PA. medio de cultivo. Todas las unidades llenadas con medio de
f) Condiciones ambientales. Las condiciones ambientales, cultivo deben ser incubadas bajo condiciones adecuadas para
tanto por lo que respecta a partículas totales, como a partículas detectar microorganismos que de otra forma pudiera ser difícil
viables, deben ser monitoreadas a lo largo de toda la SPA. Para su cultivo. Las condiciones de incubación deben establecerse
mayor detalle, referirse a la sección anterior de monitoreo bajo los siguientes guías generales:
ambiental. • La temperatura de incubación debe ser adecuada para
g) Medio de cultivo. Los medios de cultivo seleccionados para recuperar los aislamientos de la biocarga y del medio ambiente
las pruebas de llenado simulado deben demostrar la promoción y deben permanecer en el rango entre de 20 a 35 °C. La
del crecimiento de bacterias Gram positivas, bacterias Gram temperatura debe ser mantenida dentro de ± 2.5 °C de
negativas, hongos y levaduras, aerobios y anaerobios. Las la temperatura definida.

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• El tiempo de incubación no debe ser menor de 14 días. Si se Deben investigarse las posibles causas raíz de la
utilizan dos temperaturas de incubación de las unidades, éstas contaminación. I
deben ser incubadas por lo menos 7 días a cada temperatura, El criterio de aceptación para las pruebas de llenado simulado
comenzando por la temperatura más baja. son las siguientes:
• Cada unidad llenada con medio de cultivo debe ser
examinada por personal calificado con conocimientos, Llenado menor de 5 000 unidades: ninguna unidad
SISTEMAS CRÍTICOS
capacitación y experiencia en inspección de unidades con contaminada
medio de cultivo para detección de contaminación Una unidad contaminada:
microbiológica. Todas las unidades con sospecha de Investigación de causa raíz.
contaminación. Revalidación.
Llenado entre 5 000 y 10 000 unidades:
a. Interpretación de los resultados Una unidad contaminada:
La corrida de llenado simulado debe ser observada por Investigación de causa raíz.
Control de Calidad y las unidades contaminadas deben Dos unidades contaminadas:
reconciliarse con el tiempo aproximado y la actividad Investigación de causa raíz.
durante la corrida. La grabación en video de la corrida Revalidación.
de llenado simulado puede ser útil para lentificar las Llenado de más de 10 000 unidades:
prácticas del personal que pudieran afectar Una unidad contaminada:
negativamente el PA. Investigación de causa raíz.
Cualquier unidad contaminada debe considerarse Dos unidades contaminadas:
objetable y ser investigada. Los microorganismos Investigación de causa raíz.
deben ser investigados hasta la especie. Revalidación.

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SISTEMAS CRÍTICOS 635

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