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    Identificación de colorantes artificiales en determinados alimentos por medio de la técnica de cromatografía

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    cromatografia

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    1.

    Tema: Identificación de colorantes artificiales en determinados alimentos por


    medio de la técnica de cromatografía

    1.1. Objeto de investigación: Identificación de colorantes artificiales


    1.2. Variable dependiente: Alimentos determinados
    1.3. Variable independiente: Técnica de la cromatografía

    2. Problema

    Deficiencia en el conocimiento de la, identificación de colorantes artificiales en


    determinados alimentos por medio de la técnica de cromatografía, con fines
    prácticos y educativos en la química de alimentos, en relación con el consumo
    diario de alimentos con colorantes.

    3. Objetivo general

    Identificar colorantes artificiales de determinados alimentos, con la técnica de


    la cromatografía, además del dominio de teorías y metodologías biológicas,
    con el propósito de integrarlos a la formación de profesionales químicos de
    alimentos.

    4. Objetivos específicos: tareas a ejecutar

    4.1. Recopilar teorías sobre la metodología de la investigación en relación con los


    colorantes artificiales, las técnicas: por cromatografía con fines orientadores a
    la determinación de colorantes específicos para un mejor análisis de productos.

    4.2. Aplicar las técnicas de observación y experimentación de los diferentes


    colorantes artificiales, para el aprendizaje y la utilización de la cromatografía
    en papel y capa fina y de esta manera poder distinguirlos unos de otros, por
    medio de sus características propias.

    4.3. Elaborar el informe correspondiente según normas y lineamientos académicos-


    didácticos, presentando la solución parcial al problema planteado de relación
    con la química de alimentos.

    5. Justificación

    El tema planteado es factible, necesario y actual; es parte de la programación


    curricular “básica” por competencias de la asignatura de “biología celular-
    molecular”, cuyos objetivos específicos implican la presentación de
    antecedentes sucedidos, descubiertos e innovados, marco teórico, técnicas
    observacionales-experimentales y una propuesta alternativa de solución a la
    problemática planteada, cuyos beneficiarios directos somos estudiantes de la
    carrera profesional “química de alimentos”.

    6. Marco teórico

    6.1. Cromatografía

    La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen como finalidad la


    separación de mezclas basándose en la diferente capacidad de interacción de cada
    componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase móvil (una
    muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el disolvente)
    a través de una fase estacionaria fija sólida. La fase estacionaria retrasa el paso de los
    componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan a diferentes
    velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla
    presenta un tiempo característico de paso por el sistema, denominado tiempo de
    retención. Cuando el tiempo de retención del compuesto deseado difiere del de los otros
    componentes de la mezcla, éste se puede separar mediante la separación cromatográfica.

    La separación de los diferentes componentes de una mezcla que se encuentran en un


    líquido o gas es el resultado de las diferentes interacciones de los solutos a medida que
    se desplazan alrededor o sobre una sustancia líquida o sólida (la fase estacionaria). Las
    diversas técnicas para la separación de mezclas complejas se fundamentan en la
    diversidad de afinidades de las substancias por un medio móvil gas o líquido y un medio
    absorbente estacionario (papel, gelatina, alúmina o sílice) a través del cual circulan.

    6.2. Cromatografía en capa fina (CCF)

    2
    En la cromatografía en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una capa
    delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de sílice, alúmina o celulosa)
    depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o una lámina de aluminio o
    de plástico.

    La CCF es una técnica analítica y tiene como objetivo el análisis de una mezcla de
    componentes.

    El proceso es similar a la cromatografía de papel con la ventaja de que se desarrolla más


    rápidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir entre diferentes
    adsorbentes. La CCF es una técnica estándar en el laboratorio de química orgánica.
    Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a menudo para monitorizar las
    reacciones químicas y también para el análisis cualitativo de los productos de una
    reacción, puesto que permite conocer de manera rápida y sencilla cuántos componentes
    hay en una mezcla.

    6.3. Procedimiento

    Una placa de CCF es una lámina de vidrio, metal o plástico recubierta con una capa
    delgada de un sólido adsorbente (gel de sílice o alúmina). Se deposita una pequeña
    cantidad de la muestra problema en disolución en un punto en la parte inferior de la
    placa. Entonces la placa se introduce en una cubeta cromatográfica, de forma que sólo la
    parte inferior de la placa queda sumergida en el líquido. Este líquido o eluyente es la
    fase móvil y asciende por la placa de CCF por capilaridad.

    A medida que el eluyente pasa por el lugar donde está la mancha de la mezcla problema
    se establece un equilibrio entre las moléculas de cada uno de los componentes en la
    mezcla que son adsorbidas y las que se encuentran en disolución.

    En principio, los componentes se diferenciarán en solubilidad y en la fuerza de su


    adsorción, de forma que unos componentes se desplazarán más que otros. Cuando el

    3
    eluyente llega a la parte superior de la placa, esta se saca de la cubeta, se seca, y los
    componentes separados de la mezcla se visualizan.

    6.4. Visualización de las manchas

    Si los compuestos son coloreados se pueden observar las manchas a simple vista. Si no
    es así, hay varios métodos para visualizar las manchas correspondientes a cada
    componente de la mezcla.

    1. Utilizar luz ultravioleta (UV254) para observar la placa. Normalmente se


    adiciona un colorante fluorescente al adsorbente, de forma que la placa sea
    fluorescente en todas partes excepto donde haya una mancha correspondiente a
    un compuesto orgánico.
    2. Utilizar reveladores, por ejemplo, vapores de yodo que es un reactivo
    inespecífico.
    3. Emplear reactivos específicos para desarrollar coloración en las manchas. Esto
    se puede hacer sumergiendo la placa de CCF en una disolución que los contenga
    o en forma de spray

    6.5. Cálculo del factor de retención Rf

    Cuando son visibles, se puede determinar para cada una de las manchas el valor
    de Rf (factor de retención), o la distancia que cada compuesto se desplaza en la placa.
    Cada compuesto tiene un Rf característico que depende del disolvente empleado y del
    tipo de placa de CCF utilizada, pero es independiente del recorrido del disolvente. De
    esta manera se puede ayudar a identificar un compuesto en una mezcla al comparar
    su Rf con el de un compuesto conocido (preferiblemente cuando se hacen eluir en la
    misma placa de CCF).

    4
    6.6. Cromatografía en papel

    La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar


    análisis cualitativos ya es sencilla de implementar y no requiere de equipamiento
    sofisticado. En esta técnica la fase estacionaria está constituida simplemente por una tira
    o circulo de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas
    gotas de una solución de la muestra y evaporando el disolvente luego de cada
    aplicación. Luego el disolvente o mezcla de disolventes empleada como fase móvil
    (eluente o eluyente) se hace ascender por capilaridad. Para esto se coloca una porción
    del papel en contacto con la fase móvil dentro de un recipiente que la contiene (cámara
    de desarrollo). Después de unos minutos, cuando el disolvente deja de ascender o ha
    llegado al borde extremo del papel, se retira el papel y seca. Es importante que la
    cámara de desarrollo permanezca bien tapada durante el proceso de ascenso capilar de
    la fase móvil (desarrollo cromatográfico), pues de lo contrario no se alcanza el
    equilibrio necesario entre el líquido (fase móvil) y el vapor del líquido. Si el disolvente
    elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se deberán ver manchas de
    distinto color separadas a lo largo del papel. Cuando los componentes no tienen color
    propio el papel se somete a procesos de revelado.

    6. Metodología

    6.1. Tipo y diseño de investigación


    Este tema es una investigación analítica, experimental y biblionetgráfica

    6.2. Hipótesis (objeto o unidad de análisis, variables, conectores lógicos)

    La Identificación de colorantes artificiales en determinados alimentos por


    medio de la cromatografía de papel y capa fina para determinar la presencia de
    los colorantes mencionados en las etiquetas de los productos.

    5
    6.3. Unidad de estudio

    Esta investigación se la realizó en el laboratorio 03 de biología celular del


    Centro de Biología de la Dirección General de Investigación y Posgrado de la
    Universidad Central del Ecuador.

    6.4. Población y muestra

    Población: Tang y agua


    Muestra: Tang disuelto en agua.

    6.5. Materiales, equipos y reactivos

    Materiales Reactivos Equipos


    - Papel - Agua
    - Gradilla - Placa de silica gel
    - Tubos de ensayo (SiO2)
    - Capilares - Alcohol cetona
    - Regla -
    - Lápiz
    - Vaso de precipitación
    - Matraz erlenmeyer
    - Pizeta

    6.6. Procedimiento

    7.6.1. Con la ayuda de una regla y un lápiz trazar una línea de un centímetro en
    la parte superior e inferior de la placa de silica gel

    6
    7.6.2. Diluir el tang en agua y tomar una pequeña muestra con la ayuda del
    capilar

    7.6.3. Colocar la muestra del capilar en el centro de la línea inferior de la placa


    de silica gel hasta obtener un punto de color concentrado

    7.6.4. Llenar medio centímetro el vaso de precipitación con la solución de agua


    y cetona

    7
    7.6.5. Colocar la placa de silica gel en el vaso de precipitación y taparlo

    7.6.6. Esperar que el colorante suba hasta la línea marcada en la parte superior
    de la placa de silicagel

    7.6.7. Trazar un centímetro en el trozo de papel en la parte superior e inferior


    7.6.8. Con un capilar tomar una muestra de extracto vegetal
    7.6.9. Colocar la muestra en el centro de la línea de la parte inferior del papel
    hasta obtener un punto de color concentrado

    8
    7.6.10. En un tubo de ensayo añadir una pequeña cantidad de solución de agua
    y cetona
    7.6.11. Colocar el papel dentro del tubo de ensayo y taparlo
    7.6.12. Esperar hasta que el eluyente suba hasta la línea superior del papel

    6.7. Resultados e interpretación

    7. Conclusiones y discusión

    8. Autoevaluación

    9. Biblionetgrafía y Anexos

    - ANDER-EGG, EZEQUIEL. / AGUILAR, MARÍA JOSÉ. (2005). “Cómo elaborar un


    proyecto”. 18ª. Edición. Buenos Aires: Editorial Lumen Humanitas. 127 pp.

    - BARKER, ALAN. / MANJI, FIROZE. (2007). “Escribir para el cambio en


    Metodología de la Investigación”. Compilación de Franklin Gavilánez
    Elizalde.

    - BERNAL, CÉSAR. (2006). “Metodología de la Investigación” 2ª Edición.


    Naucalpan: Pearson Educación de México, SA de CV. 286 pp.

    - CALDERÓN GAMA, HÉCTOR Y COL. (2003). “Lecturas básicas de metodología


    de la investigación”. México DF.: Editorial McGraw-Hill Interamericana /
    Universidad de León. 227 pp.

    - GAVILÁNEZ ELIZALDE, FRANKLIN. (2006). “Investigación Científica”. Quito:


    Universidad Central del Ecuador. SE.

    - HERNÁNDEZ, ROBERTO., Y COL. (2006). “Metodología de la investigación”


    4ª. Edición. México DF.: Editorial McGraw-Hill Interamericana. 850 pp.

    - AUDESIRK, TERESA / AUDERESIK, GERALD. (2003). 6ª Ed. “Biología. La vida


    en la tierra”. México D.F.: Pearson Educación. Prentice-Hall S.A. 980 pp.

    - CURTIS, HELENA / N. SUE BARNES (2001). “Biología” 6a. Ed. En: Capitulo 04:
    Las células: Introducción. México D.F.: Editorial Panamericana; pp. 99-125.

    9
    - STARR, CECIE / TAGGART, RALPH (2008) “Biología la unidad y la diversidad
    de la vida”. 11ª. Ed. México D.F.: Thomson Editores, S.A., de CV. En:
    Capítulo 1 una invitación al estudio de la biología. Pp. 4.

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