PATOLOGÍA CLÍNICA

INFORME DE LABORATORIO
LEUCOGRAMA CANINO

DANIELA BERRÍO SABOYÁ - 14151199

LAURA ORTIZ GARZÓN - 14161039

DOCENTE
Dra. NATHALIA MÉNDEZ CORREA

UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA

MARZO 2019

INFORME DE LABORATORIO
LEUCOGRAMA
 Introducción

Un leucograma se refiere al recuento total y diferencial de los leucocitos en un paciente, este

también incluye un estudio morfológico de los mismos. Su resultado es indispensable para
determinar una posible leucocitosis o leucopenia, esta condición, relacionada con el cuadro
clínico, raza y edad del paciente, orienta al médico veterinario para determinar procesos
virales, bacterianos, inflamatorios o sépticos por los que el paciente pueda o no estar
cursando. Es importante realizar la interpretación siempre en función del valor absoluto; la
lectura de este nos permite valorar la gravedad y el pronóstico de una enfermedad. Todos los
glóbulos blancos se originan de la médula ósea, a partir de una célula madre pluripotencial la
cual se denomina célula madre granulo-monocítica. El número total de leucocitos oscila entre
6000 y 17000 µl en perros, estos valores son más elevados en cachorros. Para su estudio
morfológico se realiza un frotis sanguíneo con su respectiva tinción, en el cual se observan
las diferentes tipos de células (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos y linfocitos), y su
conteo en la cámara de neubauer con el reactivo de turk el cual es utilizado para lisar los
glóbulos rojos.

Abstract

A leukogram refers to the total and differential count of leukocytes in a patient, this also
includes a morphological study of them. Its result is essential to determine a possible
leukocytosis or leukopenia, this condition, related to the clinical picture, race and age of the
patient, directs the veterinarian to determine viral, bacterial, inflammatory or septic processes
by which the patient may or may not be studying It is important to perform the interpretation
always according to the absolute value; Reading this allows us to assess the severity and
prognosis of a disease. All white blood cells originate from the bone marrow, from a pluripotent
stem cell which is called the granulo-monocytic stem cell. The total number of leukocytes
ranges from 6000 to 17000 μl in dogs, these values are higher in puppies. For its
morphological study a blood smear is performed with its respective staining, in which the
different types of cells (neutrophils, eosinophils, basophils, monocytes and lymphocytes) are
observed, and their counting in the neubauer chamber with the turk reactive which is used to
lyse red blood cells.

Objetivos

● Objetivo general
Comprender e interpretar el leucograma canino mediante sangre contenida en un tubo
tapa lila, realizando frotis sanguíneo para observación de la línea blanca.

● Objetivos específicos:
- Realizar frotis sanguíneo y su posterior tinción.
- Identificar y clasificar las células pertenecientes a la línea blanca según su
morfología.
- Realizar el conteo de leucocitos absolutos mediante la cámara de neubauer.
 - Relacionar los resultados encontrados en el laboratorio con los resultados
comunes en el leucograma canino.

Marco teórico

Los leucocitos son las células encargadas de la defensa frente a agresiones externas,
mediante mecanismos de fagocitosis (neutrófilos, monocitos) o en la respuesta inmune celular
o humoral (linfocitos, células plasmáticas, monocitos y eosinófilos) (Huerta J. & Cela de Julián
E., 2018). Todos ellos participan en mecanismos de defensa del organismo, pero son
cinética, morfológica y funcionalmente diferentes (Rudolph, y Col. 2002).

● MORFOLOGÍA CELULAR

➔ Neutrófilos: Se caracteriza por tener un tamaño 12 a 15 μ en diámetro, posee un

núcleo lobulado o parcialmente segmentado con cromatina densa, posee una
coloración purpura oscura, el citoplasma se observa rosa pálido o azul claro finamente
granular o fino. Cuando se encuentran con un aspecto dentado pero sin segmentación
se conoce como células en banda que son células más jóvenes o inmaduras.
(Cerquera, et al,. 2009).

➔ Eosinófilos: Su tamaño es de 12 a 20 μ de diámetro, tiene un núcleo lobulado o

parcialmente segmentado con la cromatina densa, posee una coloración purpura
oscuro; el citoplasma lo encontramos con gránulos naranja-rojizos que son variables
en tamaño y numero. (Cerquera, et al,. 2009).

➔ Basófilos: Se caracteriza por poseer un tamaño de 12 a 20 μ de diámetro, posee un

núcleo lobulado y segmentado, el citoplasma tiene una colocación purpura gris con
unos pocos gránulos oscuros. (Cerquera, et al,. 2009).

➔ Monocitos: Tienen un tamaño de 15 a 20 μ de diámetro, abundante citoplasma que

puede tener una coloración de gris a azul grisáceo y ligeramente granular, tiene un
solo núcleo de forma irregular y con cromatina ligeramente reticulada. (Cerquera, et
al,. 2009).

➔ Linfocitos: Posee un tamaño de 9 a 12 μ, tiene un núcleo grande, redondo y excéntrico,

con cromatina agregada que se tiñe densamente y oscuro; el citoplasma es escaso y
en forma de anillo delgado de color azul pálido. (Cerquera, et al,. 2009).

El leucograma nos informa sobre el número total de leucocitos y el valor absoluto y porcentual
de cada tipo (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos). (Sanz N., 2017). El
leucograma también ofrece información sobre la distribución y morfología de los leucocitos
circulantes de un animal. Para su ejecución se requiere de una muestra de sangre de 1 a 5
mL con anticoagulante EDTA (Romero A. & Guzmán, C.J.,2005). El leucograma nos ofrece
información cuantitativa sobre:
 - Recuento total de leucocitos: número por unidad de volumen, generalmente µl. Su
número es aproximadamente de 5.000 a 20.000 µl, variando por especie, siendo
menor en bovinos y más elevado en cerdos (Davidson y Lumsden, 2000). Para su
determinación se emplea el método del recuento en cámara cuenta glóbulos o de
Neubauer, método que tiene como limitante su baja precisión (CV ± 15%). Los
analizadores hematológicos determinan mediante citometría el número de leucocitos
en la muestra de sangre (Romero A. & Guzmán, C.J.,2005).

- Fórmula leucocitaria: porcentaje y valor absoluto de cada célula por µl.

- Desviación a la izquierda de la fórmula leucocitaria: Existe si hay >3-5% de formas

inmaduras o jóvenes del neutrófilo (cayados, metamielocitos, mielocitos), lo que
puede observarse en infecciones graves, síndromes mieloproliferativos o invasión de
la médula ósea. Está asociado a neutrofilia (Huerta J. & Cela de Julián E., 2018).

- Large unstained cells (LUC). Linfocitos grandes hiperactivos (normal ≤4%), incluyen
todas las células patológicas grandes sin actividad peroxidasa, como pueden ser los
blastos o los linfocitos activados (Huerta J. & Cela de Julián E., 2018).

Tabla 1. Análisis de un leucograma. (Witter, 2006).

● LEUCOCITOSIS

Aumento del número total de leucocitos por encima de los valores de referencia fisiológicos
para la especie (Sanz N., 2017).

➔ Neutrofilia: Aumento del número de neutrófilos por encima de los valores de referencia
fisiológicos para la especie (Sanz N., 2017). Causas:
- Por liberación de epinefrina (excitación, miedo, estrés, ejercicio, extracciones
de san-gre en la consulta). Duración transitoria de 20-30 minutos.
- Niveles elevados de corticoides (estrés cró-nico por enfermedad, síndrome de
Cushing o administración exógena).
- Neutrofilia de estrés (asociada a monocitosis, linfopenia y eosinopenia).
- Neutrofilia inflamatoria: secundaria a infec-ciones, tumores, procesos
inmunomediados, físico-químicos, etc (Sanz N., 2017).
➔ Eosinofilia: Aumento del número de eosinófilos por encima de los valores de referencia
fisiológicos para la especie (Sanz N., 2017). Causas:
- Hipersensibilidad
- Enfermedades parasitarias
 - Dermatitis crónicas
➔ Basofilia: Es rara. Puede verse en hipersensibilidad y parasitosis junto con la
eosinofilia o bien en leucemias basofílicas (más infrecuente) (Sanz N., 2017).
➔ Monocitosis: En general la podemos ver asociada a cualquier inflamación o bien como
parte del leucograma de estrés. Recuentos muy elevados pueden sugerir leucemias;
se debe evaluar bien el frotis para descartar o confirmar la presencia de célu-las
blásticas (las células inmaduras de la médula ósea) (Sanz N., 2017).
➔ Linfocitosis: Aumento del número de linfocitos por encima de los valores de referencia
fisiológicos para la especie (Sanz N., 2017). Causas:
- Fisiológica en animales jóvenes (sobre todo en gatos).
- Inducida por liberación de epinefrina.
- Estimulación antigénica prolongada (posva-cunal, infecciones/inflamaciones
crónicas).
- Ehrlichiosis.
- Enfermedades linfoproliferativas

● LEUCOPENIA

Disminución del número total de leucocitos por debajo de los valores de referencia fisiológicos
para la especie (Sanz N., 2017).

➔ Neutropenia: Disminución del número de neutrófilos por debajo de los valores de

referencia fisiológicos para la especie (Sanz N., 2017). Causas:
- Inflamación subaguda, sepsis, que suele ir asociada con desviación a la
izquierda degenerativa (el número de neutrófilos inma-duros es superior al de
neutrófilos maduros).
- Disminución de la producción en la médula ósea: infecciones, fármacos,
neoplasias, necrosis de la médula, hematopoyesis cíclica del Collie.
- Destrucción periférica (inmunomediada).
- Secuestro por shock endotóxico, anafiláctico, anestesia.
➔ Linfopenia: Disminución del número de linfocitos por debajo de los valores de
referencia fisiológicos para la especie (Sanz N., 2017). Causas:
- Niveles elevados de corticoides (leucograma de estrés).
- Enfermedades víricas.
- Pérdida de linfa rica en linfocitos (quilotórax).
- Inmunodepresión por radiación y quimiote-rápicos.
➔ Leucemias: Debemos confirmar si hay o no desviación a la izquierda (neutrófilos
inmaduros en banda por encima del valor de referencia) así como la presencia o no
de cambios tóxicos (cuerpos de Döhle, basofilia o vacuolización cito-plasmática,
núcleo en anillo, etc.). La desviación a la izquierda asociada a neutrofilia, neutropenia
y los cambios tóxicos son indicativos de inflamación (Sanz N., 2017).

Según Witter (2006) la información obtenida del leucograma debe ser usada en forma
ordenada y secuencial para obtener conclusiones válidas:
- Observar los valores y comparar con valores de referencia.
 - En general se recomienda utilizar los valores absolutos y no los relativos.
- Definir la magnitud del aumento o disminución.
- El cambio puede ser leve, moderado o severo como se observa en la Tabla 2.
- Considerar los diversos factores que pueden estar produciendo el cambio.
- Concluir si el cambio corresponde a una respuesta fisiológica o patológica y la
importancia que representa (Wittwer, 2006).

Tabla 2. Valoración en el leucograma (Witter, 2006).

Resultados

● Frotis sanguíneo
Se realizó el frotis sanguíneo con su respectiva tinción para realizar el conteo
diferencial de células de línea blanca.

Imágen 1. Frotis sanguineo

Imagen 2. Tinción
● Cámara de neubauer

Se utilizó el reactivo de turk en una dilución de 1/20 ( 1 de sangre y 19 solución salina

), ya que el volumen es muy pequeño este se multiplica por 50 para aumentarlo.
El acetil acético produce lisis de los eritrocitos sin alterar los leucocitos, por lo que en
el momento que se cuentan las células en la cámara de neubauer solo encontramos
leucocitos. Y estos se deben contar en los cuadros de 4x4 que se encontraban en
cada una de las esquinas de la cámara. (Imagen 4).

Imagen 3. Reactivo de turk

Imagen 4. Cuenta de leucocitos en los cuadros son una W

El conteo celular en la cámara de neubauer no se pudo realizar debido a que en tres

ocasiones esta no funcionó, pues al microscopio se veía muy borroso como en la
 Imágen 5. Sin embargo, los valores de referencia en caninos, se pueden apreciar en
la Tabla 3, el conteo de glóbulos rojos ha de ser entre 12 - 18 g/dl.

Imagen 5. Cámara de Neubauer

Tabla 3. Valores de referencia de hemograma en caninos. (Contreras R., 2011)

● Morfología celular

A lo observado en el microscopio se vieron de manera clara los dos grupos de células

pertenecientes a la línea blanca:
- Mononucleares: Linfocitos con su característico núcleo redondo y escaso
citoplasma. Y monocitos, las células de mayor tamaño.
- Polimorfonucleares : Neutrófilos, basófilos (con intensa coloración basofílica)
y eosinófilos (con gran coloración eosinofílica) repletos de gránulos
intracitoplasmáticos.

Algunas alteraciones morfológicas que pudimos distinguir fueron: Un neutrófilo viejo

(Imagen 6), cuya apariencia es picnótica y se puede ver “como huellas de perro” en
forma redonda; células pigmentadas y agregados plaquetarios (Imagen 7).
En la imagen 8 se pueden observar algunos basófilos y un monocito en acción, justo
antes de realizar eritrofagocitosis. La identificación del monocito en acción fue posible
 gracias a su falta de gránulos, y a que da la apariencia de que este se sale del
citoplasma.

Imágenes 6 y 7. Células blancas o leucocitos

Imágen 8. Monocito en acción

Análisis

En general, se encontró poca cantidad de mononucleares con respecto a los

polimorfonucleares. Este podría ser un hallazgo importante, debido a que porcentualmente
los basófilos deben estar entre 0 y 1%, los eosinófilos entre 2-10% y los monocitos de 3- 10%,
mientras que los linfocitos de 13-15%.

Según las células encontradas en sangre periférica del canino y alteraciones morfológicas
podría especularse sobre un bajo número de monocitos. Aunque la “monocitopenia” no es un
hallazgo significativo, según lo planteado por Moraleda JM y varios autores se plantea que su
baja presencia está relacionada con períodos largos y crónicos de infección bacteriana y a
ciertas malignidades, y que aparece generalmente como consecuencia de infecciones
bacterianas crónicas.
Por su parte, los neutrófilos viejos se eliminan de la circulación por los macrófagos, estos
neutrófilos pueden tener hasta 7 lóbulos y se encuentran hipersegmentados.Sin embargo,
este hallazgo se considera normal.

Los agregados plaquetarios, definidos como la adhesión de las plaquetas entre sí, son una
formación de grumos que puede ser inducida por distintos agentes (por ej. trombina,
colágeno) y es parte del mecanismo que conduce a la formación de un trombo. Este suceso
puede ser producido in vitro e in vivo.

Discusión

Los desacuerdos entre los valores normales obtenidos por varios investigadores se refieren
principalmente a las diferencias en factores, que incluyen el número, origen, edad, sexo, raza,
salud y nutrición de los animales, así como el método de recogida de la sangre y las tecnicas
hematologicas empleadas. Variables fisiológicas como la excitación de los animales, la
actividad muscular, el tiempo de muestreo, la temperatura ambiente, el equilibrio del agua y
la altitud también pueden generar diferencias significativas (Merizalde M., 2011).

Gómez-Jiménez J. en su estudio refiere que la estimación del número de los linfocitos es un

paso primordial en el diagnóstico de deficiencias de la inmunidad celular, en situaciones de
urgencia se observan porcentajes bajos de linfopenias en relación con la presencia de
neutrofilia. Esta afirmación es totalmente compatible con lo visto en el laboratorio, teniendo
en cuenta los valores porcentuales de cada célula.

Por otro lado, según Willard et al., 2004, la leucopenia debería relacionarse con un resumen
de todos los leucocitos y la morfología de los glóbulos rojos ya que la descripción puede
indicar la presencia de una neutropenia intensa con mayor existencia de formas inmaduras
que maduras de neutrófilos y marcadas alteraciones tóxicas. La neutrofilia persistente está
relacionada con las infecciones por lo que no es extraño encontrar que durante los períodos
infecciosos los pacientes presenten un recuento de neutrófilos por encima de los parámetros
normales.

No se tenia ningún conocimiento del canino, así que con los resultados podemos concluir que
el animal no presentaba ningún cambio anormal o alguna enfermedad presente, aparte no se
realizó el recuento de leucocitos por lo que nos limita a saber los verdaderos rangos que
presentaba la muestra de sangre y no nos permite comparar los resultados obtenidos en el
frotis realizado.

Bibliografía

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