B Pract Reacciones Proteínas Único Inf

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
Facultad de Ciencias Químicas

Laboratorio de Bioquímica I
Nombre: José Eduardo López Fecha: 14 – 12 – 16.

Carrera: Química Farmacéutica Tema: Reacciones coloreadas de las proteínas.
Objetivo
Identificar proteínas y aminoácidos mediante reacciones especificas comprendiendo su
mecanismo.
Reacciones
Reacción de Biuret
Esta reacción permite la identificación de proteínas mediante la destrucción de su enlace
peptídico (-CO-NH-). Cuando la proteína se pone en contacto con una base concentrada se forma
una sustancia compleja denominada “Biuret”.
Fig.1 Biuret más sencilla. Formada Fig.2 Coloración violeta Vs

a partir de dos ureas. Coloración CuSO4
En términos químicos, la reacción se produce entre el compuesto de Biuret producto de la
reacción entre el enlace peptídico de la proteína y el hidróxido de sodio concentrado y la
solución de sulfato de cobre como se muestra en la siguiente grafica estructural, formando un
complejo de coloración con el cobre de colación violeta:
Azul-Celeste
Biuret
a
Violeta
Fig.3 Reacción de Biuret
Esta reacción da positiva en todos los compuestos que tengan dos o más enlaces peptídicos
consecutivos en sus moléculas. Quedando en el fondo del tubo una tonalidad azul cielo reacción
positiva. Precipitando a u una coloración amarilla la reacción nos torna negativa al no haber
presencia de proteínas.
Para el caso de la reacción con urea se produce una reacción similar, al producirse el Biuret.
Urea Biuret
Fig.4 Reacción de calcinación de la urea
Fig.5 Coloración de
la reacción
Conclusión: El enlace peptídico de la proteína en presencia de base forma el compuesto Biuret
el cual al reaccionar con cobre forma un complejo coloreado de color violeta.
Reacción con Ninhidrina
La Ninhidirna es una agente oxidante de los grupos alfa-amino, liberando amoniaco, CO2 y el
correspondiente aldehído, así como la forma reducida de la Ninhidrina. Una coloración violeta
determina positiva la prueba y para este caso también un color vino tinto la determinara como
positiva.
Fig.7 Coloración violeta

intensa
Fig.6 Reacción entre un aminoácido y la Ninhidrina
Conclusión: La ninhidrina reacciona con el aminoácido, reduciéndose a ninhidrina-

dicetohidrindeno de color violeta.
Reacción con Ácido Pícrico
Los ácidos, pícrico es un reactivo común de los alcaloides que precipita a las proteínas en
solución. Cuando está en solución acida, la proteína como zwiterion se ioniza como carga
positiva. Por lo tanto, reaccionara con el ácido pícrico.
NaOH
Aminoácido A. Picrámico
A. Pícrico
Rojizo
Conclusión: Se produce una reacción de precipitación entre la proteína con carga positiva y el
ácido pícrico, cambiando a ácido picrámico de coloración rojiza.
Reacciones de reconocimiento de aminoácidos
Reacción Xantoproteica (Fenilalanina-Tirosina-Triptófano)
Es una reacción que reconoce los aminoácidos que poseen el grupo bencénico. Las proteínas
que tienen en su composición estos aminoácidos también darán la reacción. La positividad se
reconoce por la aparición de un color amarillo o verde debido a la formación de
nitrocompuestos. Los compuestos que presentan bencenos sustituidos (con grupos unidos al
anillo bencénico), al reaccionar con el ácido nítrico concentrado forman compuestos nitrados
de color amarillo, el cual se intensifica en medio alcalino debido a la formación de sales.
Conclusión: Se produce una nitración del anillo bencenido de los aminoacidos dando lugar a la
formación de compuestos de color amarilla.
Reacción con Reactivo de Millon (Tirosina)
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH

ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas
que la contienen. En esta prueba los compuestos mercúricos en medio fuertemente ácido (ácido
nítrico del reactivo) se condensan con el grupo fenólico formando un compuesto de color rojo
ladrillo o rojizo.
Tirosina
Complejo de Mercurio (Rojo ladrillo)
Conclusión: Se produce un complejo coloreado de color rojo ladrillo entre el grupo fenólico de
la tirosina y mercurio.
Reacción de Hopkins-Cole (Triptófano)
Los derivados del indol dan productos de condensación cuando se tratan con aldehídos
aromáticos como los furfurales, producidos entre la sacarosa y el ácido sulfúrico. El aminoácido
triptófano contiene un grupo indol, por lo que esta reacción es específica para este. Esta
reacción forma un anillo de color violeta en la interfase de los líquidos.
Conclusión: Se produce reacción entre el indol del triptófano y los furfurales formando un
anillo de alfa-iminoglioaxil-beta-indolpropíonico de color violeta.
Reacción de aminoácidos azufrados (cisteína, cistina y metionina)
Esta reacción se basa en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual,
al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. Se pone de
manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo.
Conclusión: Se separa el azufre de los aminoácidos mediante una base, el cual reacciona con el
plomo formando sulfuro de plomo II de color negro.
Reacción de reconocimiento de glutatión (Acido glutámico, cisteína, glicina)
En esta reacción los aminoácidos que presentan grupos sulfhidrilos libres como en la cisteína
los cuales reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de un hidroxido de amonio
concentrado produciendo una reacción con coloración rojiza.
Conclusión: Se forma un complejo de coordinación coloreado carmesí, formado por el hierro

del nitroprusiato.
Reacción con sales Diazo (tirosina, triptófano, histidina)
La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los

aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de Sodio
por formación de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la
presencia de histidina libres o formando péptidos y proteínas. El resultado positivo de esta
prueba se puede evidenciar con un color rojo o vino tinto
Conclusión: Los anillos aromáticos fenólicos forman sales de diazonio de color rojo o vino tinto
en presencia de nitrito de sodio.

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Nombre: José Eduardo López Fecha: 14 – 12 – 16.

Fig.1 Biuret más sencilla. Formada Fig.2 Coloración violeta Vs

Fig.3 Reacción de Biuret

Fig.7 Coloración violeta

Fig.6 Reacción entre un aminoácido y la Ninhidrina

Conclusión: La ninhidrina reacciona con el aminoácido, reduciéndose a ninhidrina-

Reacciones de reconocimiento de aminoácidos

Reacción Xantoproteica (Fenilalanina-Tirosina-Triptófano)

Reacción con Reactivo de Millon (Tirosina)

El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH

Complejo de Mercurio (Rojo ladrillo)

Reacción de Hopkins-Cole (Triptófano)

Reacción de aminoácidos azufrados (cisteína, cistina y metionina)

Conclusión: Se forma un complejo de coordinación coloreado carmesí, formado por el hierro

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La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los

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