Infirme Azucares DNS

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
BERÁSTEGUI 24 DE JULIO DE 2018

DETERMINACIÒN DE AZÚCARES REDUCTORES EN UNA MUESTRA DE GASEOSA


DE LA MARCA POSTOBON UTILIZANDO LA TÉCNICA DNS

Jeiner Cuello 1, Tairo D. Rojas2


1
Estudiantes de Ingeniería de Alimentos, Universidad de Córdoba, Berástegui, Colombia.
Orientadora: PhD. Claudia Denise De Paula

RESUMEN

Se desarrolló un procedimiento para determinar la concentración de azúcares reductores totales


en una gaseosa 7 up de la marca postobon por la técnica del ácido 3,5 dinitrosalicílico (DNS).
Primeramente se elaboró una curva patrón de glucosa a diferentes concentraciones la cual ilustra
en la tabla No 1, y se determinó su absorbancia, posteriormente se obtuvo la gráfica de la curva
patrón con una R2 de 0,99 y una ecuación con la cual se determinó la concentración de azucares
reductores de la muestra problema, dando como resultado 0,0772g/ml de azucares reductores con
un porcentaje de (74,1%), el resto corresponde a 0,0269 g/ml con un porcentaje de (25.9%) de
azucares no reductores del total de azucares en la muestra de la gaseosa 7 up.

Palabras clave: azúcares reductores, jugo, ácido 3,5 dinitrosalicílico.

SUMMARY

A procedure was developed to determine the concentration of total reducing sugars in a gas
uptake of the postobon brand by the 3,5 dinitrosalicylic acid (DNS) technique. Firstly, a standard
curve of glucose was elaborated at different concentrations, which is illustrated in Table 1 and its
absorbance was determined. The graph of the standard curve was then obtained with an R2 of
0.99 and an equation with which it was determined the concentration of reducing sugars in the
test sample, resulting in 0.0772g / ml of reducing sugars with a percentage of (74.1%), the
remainder corresponding to 0.0269 g / ml with a percentage of (25.9%) of non-reducing sugars of
total sugars in the sample of the soda 7 up.

Key words: reducing sugars, juice, 3,5 dinitrosalicylic acid.


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INTRODUCCIÓN

Los carbohidratos son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y oxígeno. Todos los
carbohidratos son azucares pequeños, solubles en agua por ejemplo glucosa y fructosa, por o bien
cadenas, como el almidón y la celulosa, que se elaboran enlazando subunidades de azúcar

En la naturaleza los carbohidratos se presentan como monosacáridos, oligosacáridos y


polisacáridos. Los monosacáridos se clasifican en aldosas si tienen un grupo aldehído y cetosas si
tienen un grupo cetona. Todos los monosacáridos, aldosa o cetosas y la mayoría de los
disacáridos son azucares reductores (excepto la sacarosa) porque uno de sus dos carbonos
anoméricos no está formando enlace glucosídico.

El método DNS es una técnica colorimétrica que emplea 3,5-ácido dinitrosalicilico para la
hidrolisis de polisacáridos presentes en una muestra, seguido de la determinación
espectrofotométrica a 575nm de los azucares reductores. Esta técnica sirve para cuantificar los
azucares reductores producidos durante una fermentación o para cuantificar los productos de una
reacción enzimática.

En disolución alcalina el azúcar se hidroliza produciendo un compuesto que se reduce a un grupo


nitro del DNS, para dar el producto monoamino correspondiente. Esta reacción da un producto
colorido en solución alcalina. El original procedimiento de Dahlquist ha sido modificado en un
proceso automatizado para análisis de azucares totales producidos por la hidrólisis de
polisacáridos que no contengan almidón. Para este se requiere tener estándares similares a la
muestra. (Southgate, 1991)
El método del DNS no es recomendable utilizarlo para la determinación de azúcares reductores
en muestras intensamente coloreadas como mieles y caldos de fermentación que la contengan.
Estudios de Otero y colaboradores muestran dispersión en la determinación de azúcares
reductores en mieles por el método del DNS con la modificación de Miller.

El objetivo del presente trabajo consistió en desarrollar un procedimiento para la determinación


de azúcares reductores totales en una muestra de gaseosa de la marca postobon por la técnica del
ácido 3,5 dinitrosalicílico (DNS).
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METODOLOGÍA

Elaboración de la Curva Patrón

Se preparó una solución madre con una concentración de 1000 ppm, posteriormente se tomaron
seis tubos de ensayo tapa rosca, los cuales se rotularon con su respectiva concentración, a partir
de la solución madre se realizaron soluciones a diferentes concentraciones como se indica en la
tabla No 1 a cada tubo sele adiciono 1 ml del reactivo de DNS y se agito fuertemente en el
vortex, se colocaron a ebullición durante 5 minutos, se enfriaron rápidamente en recipiente con
hielo y se le adicionaron 8 ml de agua destilada. Utilizando un blanco una solución de agua
destilada con reactivo DNS se determinó la absorbancia a cada uno de los tubos a 575nm.

Tabla No 1
Tubo mL de s/n estándar mL de agua destilada Concentración en (ppm)
1 0 1 0
2 0,2 0,8 200
3 0,4 0,6 400
4 0,6 0,4 600
5 0,8 0,2 800
6 1 0 1000

Muestra problema.

A partir de la muestra problema de concentración desconocida se tomó 0,2ml de solución


problema y se depositó en un tubo que posteriormente se le adiciono 0,8 ml de agua destilada
para completar 1 ml seguido se le agrego 1 ml de reactivo DNS, se agito fuertemente, se
colocaron a ebullición durante 5 minutos, se enfriaron rápidamente en recipiente con hielo y se le
adicionaron 8 ml de agua destilada. Utilizando un blanco una solución de agua destilada con
reactivo DNS se determinó la absorbancia a cada uno de los tubos a 575nm
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RESULTADOS Y ANALISIS

Tabla No 3 Resultado de la absorbancia a diferentes concentraciones


Concentración en (ppm) Absorbancia(575nm)
0 0
200 0,0763
400 0,1878
600 0,3101
800 0,3781
1000 0,484
Curva Patrón elaborada en diferentes concentraciones con sus respectivas absorbancias.
Resultados de la concentración mg/L por el método de DNS. Cabe destacar que no se eliminaron
datos obtenidos en la curva, debido a que no mostraron dispersión de los mismos, y nos mostró
un R2 de 0,99.

Grafica No 1

Curva de calibracion
0.5

0.4
Adsorbancia a (575nm)

0.3

0.2 adsorbancia
y = 0.0005x - 0.0071 Linear (adsorbancia)
R² = 0.9951
0.1

0
0 200 400 600 800 1000 1200
-0.1
Concentacion en (ppm)
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Grafica No 1. Con la curva obtenida se realizó una gráfica de tendencia lineal que se ajusta a los
datos, el R2 obtenido para la ecuación de la recta es de 0.995 Teniendo en cuenta que el R2 es
mayor a 0.95 los datos no tienen mucha dispersión y por lo tanto son aceptables.

Muestra problema
Para la muestra a estudiar se tienen los datos de absorbancia mostrados en la Tabla No 4.
Tabla No 4
Muestra problema Concentración (ppm) Absorbancia (575nm)
1 Desconocida 0,0484

Utilizando la ecuación de la recta obtenida por la tendencia lineal de la curva de calibración


observada en la (Grafica No.1) y el valor promedio de las absorbancias que se encuentran en la
(Tabla No. 4) se obtiene:

Y = 0,0005x - 0,0071 Ec. 1

Despejando x de la ecuación. (1) calculamos las concentraciones para la muestra problema como
sigue:

Tubo 1

Y + 0,0071
X(ppm) =
0,0005

0,0484 + 0,0071
X(ppm) =
0,0005

X(ppm) = 111

Tabla No 5
Muestra problema Absorbancia (575nm) Concentración (ppm)
1 0,0484 111
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Hallamos el factor de dilución

0,2ml
Fd =
100ml

0,2ml
Fd =
0,8ml

Fd = 0,25

Inverso del factor de dilución = 4

X(ppm) = 111 ∗ 4

mg
X(ppm) = 444
L

Cantidad correspondiente a azucares reductores en la muestra en estudio es de 444 mg/L

CONCLUSIONES

En esta práctica se realizó un procedimiento para la determinación de azúcares reductores totales


en gaseosa 7 up de la marca postobon por el método del DNS.

Utilizando el procedimiento de la técnica DNS para calcular una curva patrón se observó que la
gráfica mostró una desviación pequeña al tener una R2= 0.99, la cual nos da más confiabilidad en
los resultados

En la gasosa 7 up se encuentran 0,0772 g/ml de azúcar reductor del total de azucares utilizados en
una porción de 240 ml, el cual correspondiente a 18,5 gramos de azúcar reductor de los 26
utilizados como edulcorante.

BIBLIOGRAFÍA
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NIELSEN S.; Food Analysis Second Edition; An Aspen Publication, Gaithersburg, Maryland.
1998.

SOUTHGATE, D.A.T.; Determination of Food Carbohydrates Second Edition; Elsevier Applied


Science, London and New York 1991.

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