Inorme 10 de Proteinas

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN


MARCOS
UNIVERSIDAD DEL PERÚ, DECANA DE AMÉRICA

FACULTAD DE QUÍMICA E ING. QUÍMICA


E.A.P. ING. QUÍMICA 07.2
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA ORGÁNICA
PRÁCTICA N°10
BIOMOLÉCULAS: PROTEÍNAS

Horario de grupo: lunes de 9 am. a 13 pm.


Profesora: Quim. Melissa Barrera Tomas

 Fecha de realización: 11/06/2018


 Fecha de entrega: 18/06/2018
Integrantes:
 Arias Ortiz, David Arturo………………..17070084
 Rivera Núñez, Jhamer Clinton…………17070123
 Mendoza Quispe, James……………….17070029

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

PAGINA

1. INTRODUCCION……………………………………………………………………………………………..3

2. RESUMEN……………………………………………………………………………………………………….4

3. MARCO TEORICO…………………………………………………………………………………………….5

4. PARTE EXPERIMENTAL…………………………………………………………………………………….8

5. DISCUSION DE RESULTADOS………………………………………………………………………….10

6. REACCIONES ………………………………………………………………………………………………….11

7. CONCLUSIONES………………………………………………………………………………………………12

8. RECOMENDACIONES………………………………………………………………………………………12

9. BIBLIOGRAFIA………………………………………………………………………………………………..13

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

INTRODUCCIÓN

Las proteínas son las moléculas orgánicas más abundantes en los animales que
desempeñan funciones importantes tanto en estructura como en la función de
las células. Las proteínas son biopolímeros de los α-aminoácidos llamados así
debido a que el grupo amino está enlazado al átomo de carbono α adyacente al
grupo carbonilo. Las propiedades físicas y químicas de una proteína están
determinadas por los aminoácidos que la constituyen. Las subunidades
individuales de los aminoácidos se unen por medio de enlaces de amida
llamados enlaces peptídicos

En el presente tema abordaremos aspectos generales sobre estas estructuras y


sus funciones, así como de los medios de laboratorio para identificar a los
mismos. Por la importancia y el papel que desempeña las proteínas, hemos
realizado la siguiente experiencia de forma que podamos reconocer la presencia
de las proteínas en la clara de huevo.

RESUMEN

En esta práctica realizamos distintas reacciones de reconocimiento de proteínas


(aminoácidos) tanto por su forma coloidal debido a la precipitación, como por la
coloración que adoptan. Las reacciones de coloración utilizadas en esta práctica
fueron:

 Reacción de Biuret: donde obtuvimos una solución de color púrpura –


violeta.
 Reacción de Xantoproteica: en esta reacción obtuvimos una solución de
color anaranjado.
 Reacción de la Nihidrina: en esta reacción obtuvimos una solución de
color púrpura.

En la reacción de precipitación utilizada en práctica fueron:

 Acción de los agentes físicos y químicos: En esta parte experimental


utilizamos clara de huevo en cinco tubos de ensayo calentando al primero,
al segundo agregándole etanol, al tercero le agregamos acetato de plomo,
al cuarto agregamos a los dos tubos de ensayo restantes ácido pícrico y
ácido fosfomolibdico con la finalidad de observar las diferentes formas de
coagulación.

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

MARCO TEÓRICO

Las proteínas son las macromoléculas biológicas más importantes. Hay gran
variedad de proteínas y cumplen gran variedad de funciones en los organismos.
Expresan la información genética en los seres vivos: componen las estructuras
celulares y hacen posible las reacciones químicas del metabolismo celular.
Químicamente son polímeros de aminoácidos, que se unen formando un enlace
amida entre un grupo carboxilo y un grupo amino. Este enlace recibe el nombre
de enlace peptídico (-CO-NH-) y están dispuestos de forma lineal,
denominándose péptidos los compuestos resultantes. Las células producen
proteínas con propiedades muy diferentes a partir de 20 aminoácidos. Los
aminoácidos son moléculas orgánicas de bajo peso molecular que contienen un
grupo carboxilo (COOH) y un grupo amino (NH2). El grupo carboxilo es ácido
débil, mientras que el grupo amino es básico débil. Además del carbono, el
hidrogeno y el oxígeno, los aminoácidos contienen nitrógeno en su grupo amino.
Aparte de su contribución a la estructura y función de los aminoácidos, este
nitrógeno es la fuente de todos los grupos nitrogenados del resto de moléculas
biológicas en el organismo humano.

En las células, los aminoácidos se suelen presentar ionizados. En disolución, un


aminoácido puede actuar como ácido o base. Se pueden identificar los
aminoácidos de manera experimental por diversas reacciones. Entre ellas
podemos tener:

Reacción de Biuret

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos
ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (-CO-NH-) que se destruye
al liberarse los aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de cobre (ll) y
sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces
peptídicos formando un complejo de color violeta.

Reacción de Xantoproteica

Con esta reacción podemos identificar la presencia de aminoácidos aromáticos


(tirosina, triptófano).

La reacción se basa en la nitración del anillo bencénico con ácido nítrico,


produciendo derivados del nitro benceno de color amarillo. Estos derivados
amarillos se tornan anaranjados a la alcalinidad de la solución con NH 4OH o
NaOH. En las condiciones de la reacción de la fenilalanina es difícil de nitrar por
cuanto se requiere la presencia de un catalizador.

Reacción de Nihidrina

Esta es una reacción general para cualquier aminoácido y es debido a la


presencia del grupo amino (NH2), de manera de que todos los alfa aminoácidos
y por supuesto las proteínas dan positiva a esta reacción. No obstante, cualquier
sustancia proteica que contenga un grupo alfa-NH2 también de positiva a esta
reacción.

Azul Violeta

DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

La función de las proteínas depende de la


conformación que tienen y viene determinada por la
secuencia de aminoácidos.

Al organizarse una proteína se manifiesta de formas


diferentes que presentan disposiciones
características en determinadas condiciones
fisiológicas, pero al cambiar el entorno fisiológico como temperatura,
acidez, alcalinidad, presencia de alcohol o urea; pierden el tipo de conformación
original, sus funciones óptimas y sus propiedades físicas y químicas, las
consecuencias inmediatas que ocurren son la disminución drástica de la
solubilidad de la proteína, acompañada frecuentemente de precipitación; la
pérdida de todas sus funciones biológicas y la alteración de sus propiedades
hidrodinámicas. Ejemplo de ello es al cocinar un huevo o al hervir la leche y
dejarla enfriar cuando se forma la nata en ella.

El cambio de pH produce cambios en las interacciones electrostáticas entre las


cargas de los radicales de los aminoácidos. La modificación de la temperatura
puede romper puentes de Hidrógeno o facilitar su formación.

Cuando el cambio de estructura llega a ser reversible, el proceso se


llama desnaturalización. Un ejemplo de ello se puede observar en el tratamiento
denominado hemodiálisis donde la sangre del paciente se pasa a través de una
maquinaria externa (circuito de diálisis), a una membrana semipermeable de la
máquina, con el fin de separar sales que el organismo enfermo ya no puede
hacerlo, la máquina extrae cierta cantidad de sangre que debe cambiarse por el
líquido de reposición, la máquina limpia entonces la sangre y ya limpia regresa
al cuerpo vía el circuito. Al dializar el exceso de sales, las subunidades
separadas de la hemoglobina se han reasociado y la proteína se ha
desnaturalizado volviendo a ser plenamente activa para seguir trabajando en el
organismo.

PARTE EXPERIMENTAL
PREPARACION DE LA SOLUCIÓN DE ALBUMINA

Se separa la clara de la yema de un huevo; la clara se mide en un vaso de


precipitado y se añade igual cantidad de agua destilada. Se bate hasta que
este algo espumosa, luego se filtra a través de una gasa o algodón.

REACCION DE BIURET

Técnica:

 En un tubo de ensayo se coloca 2mL de solución de albumina y 3 mL


de NaOH al 10%

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

 Agregar gota a gota la solución de Sulfato de Cobre al 0,5% hasta


obtener un color purpura violeta

Resultados y discusión:

Se precipito una coloración violeta; esto indicaría una reacción positiva por
tener en su molecula al grupo –CONH(enlace peptídico)

REACCÓN XANTOPROTEICA

Técnica:

 En un tubo de ensayo colocar 3 mL de una solución de albúmina,


luego 1mL de ácido nítrico concentrado
 Luego someterlo a temperatura suave, la reacción se evidencia por la
presencia de un precipitado que se torna amarillo. El cual luego se
disuelve
 Se enfría exteriormente y se añade gota a gota Hidróxido de Amonio.

Resultados y discusion:

Se determinó la presencia de proteínas solubles en una solución, donde se


neutralizo con un álcali tornándose de precipitado amarillo ha precipitado
anaranjado. Tipo de reacción cualitativa.

Imagen de la izquierda Precipitación de color amarillo

Imagen de la derecha Precipitación de color ananjado

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REACCION DE LA NINHIDRINA

Técnica:

 Coloque en un tubo de ensayo 5mL de solución de albumina y 0,5mL de


solución de ninhidrina al 0,1%
 Llevar a baño maría y se desarrolla un color purpura.

Resultados y discusión:

Se forma un complejo azul-violeta; esto indicaría que la prueba es positiva al


reaccionar el grupo –NH2 libre de proteínas y aminoácidos con ninhidrina

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN

Tomamos 5 tubos y a cada uno agregamos 2 a 3 ml de albumina.

 Al primer tubo sometemos a calor


 Al segundo añadimos alcohol etílico
 Al tercer tubo añadimos acetato de plomo
 Al cuarto tubo el ácido pícrico
 Al quinto tubo el ácido fosfomolibdico

Albumina +ácido fosfomolibdico

Albumina +acido pícrico

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

 REACCION XANTOPROTEICA

Esta reacción se usa para detectar la presencia de proteínas solubles en una solución.

Los anillos fenilo que contengan un grupo activante pueden ser nitrados produciendo
un compuesto amarillo. Generalmente, se forma primero un precipitado blanco que
cambia a amarillo al calentarlo. El color se empieza a tornarse anaranjado cuando la
solución se vuelve básica.

La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de


grupos bencénicos, tirosina, fenilalanina y triptófano, obteniéndose nitrocompuestos
de color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio fuertemente alcalino
(formación del ácido pirámico o trinitrofenol

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

ElEl resultado
resultado nos
nos indica que hay
indica que hay presencia,
presencia, en
en lalaproteína
proteína(Albúmina
(Albúminadedehuevo),
huevo),dede
aminoácidos portadores de anillos aromáticos.
aminoácidos portadores de anillos aromáticos.
 REACCION DE LA NINHIDRINA

La ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno), un agente oxidante poderoso, muy sensible


que reacciona con todos los α-aminoácidos a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto
de color púrpura. Cuando la ninhidrina reacciona con un aminoácido, la cadena
lateral se pierde en forma de aldehído, produciendo un tinte color violeta-púrpura, entre
más intenso sea el color mayor es la concentración de aminoácidos.

La prueba de ninhidrina se utiliza para detectar y cuantificar la cantidad de aminoácidos


libres.
 PRECIPITACIÓN DE REACTIVOS ALCALOIDES

El ácido pícrico, es un poderoso agente precipitante de proteína. Puede afectar tanto a


los puentes salinos como a los de hidrógeno. Estos ácidos disminuyen el pH del medio
cuando las proteínas tienen cargas positivas netas. Estos cationes proteicos forman
complejos con iones cargados negativamente para formar proteína-picrato, y de esto se
forma un precipitado floculento espeso.

REACCIONES

 REACCION XANTOPROTEICA

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

 REACCION DE LA NINHIDRINA

CONCLUSIONES

 Se logró reconocer a los aminoácidos conformantes de la proteína de albúmina


mediante diversas reacciones de coloración y precipitación.

 Cuando las proteínas se tratan por ácido nítrico concentrado dan una coloración
amarilla que pasa a naranja por adicción de amoniaco. Se debe a los núcleos
aromáticos que se nitran formando ácidos pícrico y después de amonio por el
amoniaco.

 Las manchas amarillas en la piel se causan por el ácido nítrico son el resultado de
una reacción xantoproteica.

 Debido a su carácter anfótero, las proteínas reaccionan con los ácidos y con las
bases. Los ácidos proteicos y álcali proteicos son insolubles en agua y en solución
de sales neutras y se disocian en los ácidos y en las bases diluidas, pero precipitan
en medio neutro.

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INFORME DE QUIMICA ORGANICA-PROTEINAS

 A diferencia de los aminos y ácidos carboxílicos, los aminoácidos son sólidos


cristalinos no volátiles que se funden con descomposición a temperaturas
relativamente elevadas.

 Son insolubles en disolventes no polares, como éter de petróleo, benceno o éter.

RECOMENDACIONES

 En el ensayo con la ninhidrina, sino cambia la coloración a púrpura cuando se


somete al calor, se añade una mínima cantidad de ninhidrina sólido al tubo de
ensayo para observar la respectiva coloración.

BIBLIOGRAFÍA

 L.G.Wade. Jr. Química orgánica. Volumen 2.novena edición pag.1222-


1258
 http://webdelprofesor.ula.ve/farmacia/gmendez/manuales/PDF/EXPERI
MENTO
 http://www.uv.es/tunon/pdf_doc/trabajo_matilde.pdf
 http://www.uco.es/master_nutricion/nb/Mataix/proteinas.pdf
 http://centros.edu.xunta.es/iesdequiroga/inicio/depart/bioloxia/materialbio
/labbio2bac/prot.pdf

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