PROPAGACION DE PLANTAS

INDICE

Pág.

RESUMEN………………………………………………………………………2

CAPITULO l

Introducción….......................................................................................... 4

CAPITULO ll

Revisión de literatura………………………………………………………. 5

CAPITULO lll

Materiales y métodos………………………………………………………… 9

CAPITULO lV

Resultados y discusión…………………………………………………………10

CAPITULO V

Conclusiones y recomendaciones…………………………………………….17

CAPITULO Vl

Bibliografía…………….………………………………………………………… 18

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RESUMEN

En este informe se reporta métodos y técnicas utilizadas de propagación de

frambuesa (Rubus idaeus L.) por el Instituto Nacional de Investigación Agraria
(INIA), que desarrollan un protocolo de micropropagación in vitro, a través del
cultivo de meristemos apicales de plantas madre de frambuesa importadas,
obteniendo implantes viables de tejido meristemático diferenciado, con capacidad
de crecimiento y desarrollo. Así como el la propagación de plantas por brote
etiolado.

Para este efecto, se partió de la importación de plántulas in vitro, de las

variedades Heritage y Meeker. Luego, se desarrolló un protocolo para el
prendimiento y viabilidad de aclimatación en invernadero, utilizando diferentes
niveles de sustratos para incrementar la supervivencia y vigor de las plántulas
para su posterior siembra en campo definitivo.

Palabras clave: frambuesa, micropropagación, tejido meristemático, brote

etiolado.

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SUMMARY

This report reports methods and techniques used for propagation of raspberry
(Rubus idaeus L.) by the National Institute of Agricultural Research (INIA), which
develop an in vitro micropropagation protocol, through the cultivation of apical
meristems of mother plants of Raspberry, obtaining viable implants of differentiated
meristematic tissue, with capacity of growth and development. As well as the
propagation of plants by etiolated outbreak.

For this purpose, we started with the importation of in vitro seedlings of the
Heritage and Meeker varieties. Then, a protocol was developed for the fixation and
viability of acclimatization in greenhouse, using different levels of substrates to
increase the survival and vigor of the seedlings for their subsequent planting in the
final field.

Key words: raspberry, micropropagation, meristematic tissue, etiolated bud.

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CAPITULO l

INTRODUCCION

La frambuesa pertenece a la familia de las Rosáceas, género Rubus. Es un

arbusto que forma parte del grupo de los "berries" o frutales menores. Es uno de
los frutos de clima templado de mayor precio unitario en el mercado como
producto fresco, siendo de interés, además, para la agroindustria (Corfo, 1982;
Ciravegna et al, 2004).

La propagación de la frambuesa se realiza tradicionalmente de forma vegetativa

por separación de corona o brote etiolado, sin embargo en vista de la demanda
masiva de material sano y vigoroso, se ha generado un interés por el uso de la
técnica de cultivo de tejidos para su propagación (Mendel, 1989).

La micropropagación permite reproducir in vitro cientos de clones de una misma

especie (Kyte & Kleyn 1996). Tiene un gran potencial comercial debido a la
velocidad con la que se realiza la propagación, aunado a esto las plántulas
obtenidas, son de alta calidad, presentan buena vigorosidad y se encuentra libres
de enfermedades (Amhed et al, 2001).

Objetivos:

 Determinar las forma de propagación del cultivo de frambuesa

desarrolladas en el (INIA).
 Determinar ventajas y desventajas de propagación in vitro (cultivo de
meristemos) y por brote etiolado.
 Determinar las condiciones adecuadas para el almacenamiento del grano
de maíz.

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CAPITULO ll

REVISION BIBLIOGRAFICA

1. Descripción Botánica

La frambuesa pertenece a la subclase Arquiclamidia, Familia de las Rosaceas,

orden de los Rosales y al género Rubus. Existen decenas de especies e híbridos
de interés comercial, entre los más destacados se encuentran la mora
(R.contrictus), la zarzamora (R.ulmifolius), la mora inerme (R.canadiensis), la mora
espinosa (R.argutus), la frambuesa púrpura (R.neglectus), la frambuesa negra (R.
Occidentales), la frambuesa amarilla (R.ellipticus) y la frambuesa puramente roja
(R.idaeus)(CORFO, 1982).

Planta de frambuesa var. Meeker (Rubus idaeus L.).

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La frambuesa roja es una dicotiledónea, estolonífera de tallo erecto cubierto de

espinas curvas vigorosas y pequeñas, El sistema radicular se extiende a poca
profundidad, es perenne, fasciculado, de desarrollo horizontal con abundantes
ramificaciones y posee tanto raíces primarias como secundarias leñosas.Las hojas
son sencillas, alternas, compuestas y estipuladas, formadas por 5 a 7 foliolos
ovalados y doblemente aserradas, de color verde tenue en la cara inferior e
intenso en la superior. Presentan vellosidad de textura algodonosa Sus flores son
terminales y axilares, las yemas florales y los pecíolos están cubiertos por un fino
vello no glandular y espinas. Los frutos corresponden a polidrupas de color rojo de
forma esférica (PROEXANT, 2004).

2. Características del Cultivo

Tradicionalmente la propagación de la frambuesa se realiza por multiplicación de

hijuelos o por raíces. El uso de hijuelos es el método más empleado debido a que
estos se extraen fácilmente y se plantan directamente, en tanto que al utilizar
raíces se requiere la inducción de brotes, por lo que el cuidado debe ser mayor,
sin embargo permite obtener más cantidad de plantas (Ciravegna et al,2004).

El cultivo de la frambuesa necesita de un clima templado, con veranos frescos y

húmedos, ya que tanto la brotación como la pérdida de hojas están ligados al
cambio de temperatura y el fotoperíodo. La alta humedad relativa es necesaria
para el buen crecimiento de los frutos, debido a que contribuye a la proliferación
foliar alrededor de las flores tempranas, asegurando un amplio y mejor desarrollo
(CORFO, 1982).
La frambuesa demanda suelos ricos en materia orgánica de textura media,
frescos, prácticamente libres de calcio activo (Ciravegna et al, 2004). No son
recomendables suelos en los que se hayan cultivado con anterioridad solanácea.
Además la composición química del suelo debe ser ajustada a los requerimientos
de las plantas pues estas son muy sensibles a las deficiencias de bases como
potasio y magnesio (Mendel, 1989). Un pH ideal para el cultivo es de alrededor de
6,5 (Ciravegna et al, 2004).

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3. Establecimiento in vitro

El establecimiento o introducción, consiste en la selección adecuada del explante

y su desinfección para evitar la contaminación por patógenos (bacterias, hongos y
levaduras).Estos afectan el crecimiento y desarrollo del explante (Fontúrbel, 2001),
compiten con él por los nutrientes del medio, deteriorándolo hasta provocar su
muerte.

Los explantes pueden ser de distintos tipos desde porciones de tejido hasta
células sueltas, granos de polen, semillas, protoplastos, entre otros. Este
dependerá de la especie de interés y los objetivos de su propagación. Para
obtener clones de la planta madre o mantener características particulares, se
prefiere utilizar tejidos con alta estabilidad genética como meristemos apicales y
yemas axilares (Fossard, 1999, citado por Fontúrbel, 2002).

Una vez seleccionado el explante, se procede a la desinfección. Se utilizan

distintos desinfectantes, por lo general de acción superficial, como bactericidas y
fungidas de contacto, hipoclorito de sodio o calcio, en disoluciones (Fossard, 1999,
citado por Fontúrbel, 2002). La reacción de los ácidos hipoclorosos y el cloro
residual con el agua producen la oxidación de los grupos –SH, grupos aminos,
hidroxifenol de la tirosina y grupos índoles, lo cual destruye las proteínas y ácidos
nucleicos de los microorganismos, sin embargo puede provocar la oxidación de los
tejidos vegetales (Aucccasi, 2003; Salisbury & Ross, 1992), por lo que estos se
aplican en bajas concentraciones y con tiempos de exposición específicos, según
las características del tejido y el grado de contaminación.

Finalizado este proceso, los explantes son trasladados a una cámara de flujo
laminar (con aire filtrado, libre de microorganismos) donde se realiza la
transferencia a un medio de cultivo apropiado (Kyte & Kleyn 1996) al tipo de
especie.

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4. Micropropagación

La micropropagación como técnica consiste en la producción de un número

determinado de plantas idénticas a partir de un mismo explante. Permite optimizar
la obtención de clones con características deseables como resistencia, producción
elevada o alta calidad, en un menor tiempo. Además al realizar este proceso en
laboratorios e invernaderos donde se dispone de condiciones controladas, es
posible producir plantas durante todo el año independientemente de las
condiciones climáticas. También se facilita el manejo de plantas libres de
enfermedades fungosas, bacterianas y virales (Fossard, 1999, citado por
Fontúrbel, 2002).
Medio semisólido

La técnica tradicional de cultivo de tejidos in vitro utiliza medio semisólido. En este

sistema cada brote se mantiene en frascos individuales, los cuales se transfieren
manualmente cada veinte o treinta días para evitar la alteración de las
concentraciones de los nutrientes y el crecimiento excesivo de los brotes.

Existen cientos de plantas propagadas mediante este método, dentro de las

cuales Rubus constituye una de las especies arbustivas de mayor investigación,
sus distintas variedades han sido ampliamente investigadas para desarrollar un
sistema de micropropagación que permita maximizar la obtención de cientos de
plantas a partir de un mismo explante. Existen variados medios y protocolos
dependiendo de la planta que se trabaje. Por lo general el medio utilizado debe
complementarse con reguladores de crecimiento para obtener brotación de los
explantes (Almeira y Contreras, 2004).

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CAPITULO lll
MATERIALES Y METODOS

La Estación Experimental INIA Baños del Inca – Cajamarca, se encuentra ubicada

en el valle del Río Chonta, entre el paralelo 7°9'56" de latitud sur y el meridiano
78°27'07" de longitud oeste; pertenece al distrito Baños del Inca, provincia y
departamento de Cajamarca, siendo su extensión de 6.13 ha, tiene como vía de
acceso la carretera Cajamarca - Celendín km 7.

Se ubica a una altitud de 2,667 msnm, correspondiéndole la Zona IV Sierra

Tropical, grupo ecológico bosque seco - Montano Bajo Tropical. La humedad
relativa promedio es de 74%, la temperatura máxima promedio es de 21ºC y la
mínima promedio es de 7°C, se presentan heladas descendiendo la temperatura a
menos de 0 ºC en los meses de diciembre, junio y julio.

Su topografía es de relieve plano, con paisaje característico propio de la zona baja

y sus suelos cubiertos por cultivos agrícolas y experimentos de las diferentes
áreas de investigación.

Materiales a utilizar:

 Cuadernos de apuntes

Metodología

 Toda la práctica se realizó en las instalaciones del Instituto Nacional de

Investigación Agraria con asesoramiento de técnicos y el docente del curso
de propagación de plantas.

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CAPITULO Vl
RESULTADOS Y DISCUSIÓN

 La expresión cultivo in vitro de plantas, significa cultivar plantas dentro de

un frasco de vidrio en un ambiente artificial. Esta forma de cultivar las
plantas tiene dos características fundamentales: la asepsia (ausencia de
gérmenes, etc), y el control de los factores que afectan el crecimiento.

 La micropropagación o propagación clonal, es una de las aplicaciones más

generalizadas del cultivo in vitro, a través de la micropropagación, a partir
de un fragmento (explante) de una planta madre, se obtiene una
descendencia uniforme, con plantas genéticamente idénticas, denominadas
clones.

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 El explante más usado para los procesos de propagación in vitro son las
yemas vegetativas de las plantas.
 Los frascos que contienen las plantas se ubican en estanterías con luz
artificial dentro de la cámara de crecimiento, donde se fija la temperatura en
valores que oscilan entre los 21 y 23°C, además de controlar la cantidad de
horas de luz.
 Por su parte, el medio de cultivo se compone de una mezcla de sales
minerales, vitaminas reguladores de crecimiento.
 Dentro del proceso de micropropagación diferenciamos varias fases o
etapas:
1. Selección y Preparación de la planta madre
2. Desinfección de las yemas de la planta y/o desinfección de semillas
3. Introducción del material seleccionado in vitro
4. Multiplicación de brotes
5. Enraizamiento
6. Aclimatación
 Esta secuencia de etapas abarca el ciclo completo de la multiplicación de
plantas in vitro; de plantas de frambuesa y arándano.

Sistema mejorado de propagación de frambueso partir de brotes etiolados.

 El sistema más recomendado de propagación de frambueso es la

producción de plantas a partir de brotes etiolados.
 Las principales ventajas de este sistema son la facilidad para eliminar
problemas sanitarios y el corto período de tiempo que se requiere para
obtener las nuevas plantas.
El sistema debe iniciarse a partir de plantas madres de buena calidad, ojalá
provenientes de cultivo in vitro, que nos asegure que están libres de virus.

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COSECHA DE RAICES Y SIEMBRA DE RAICES

Las raíces se deben cosechar a comienzos de invierno, lavarlas con suficiente

agua, y seleccionar las raíces sanas. Trozarlas para promover la emisión
uniforme de brotes. Desinfectarlas en una solución de cloro comercial al 5 % luego
se las pone en las camas para su posterior inicio de brotación.

En un invernadero debidamente adecuado con platabandas con arena, turba

musgo de jalca, poner las raíces densamente (1,5 kg/m2) y cubrir con 5 cm de la
misma mezcla. La emisión de los brotes empieza a los15-20 días desde la
siembra.

COSECHA DE BROTES

Los brotes se deben cosechar cuando tengan 3 a 4 hojas, con bisturí u hoja de
afeitar, haciendo el corte antes de la inserción en la raíz original, logrando un
espacio blanco (etiolado) de al menos 3 cm. Un rendimiento bueno son 2.000
brotes por kilo de raíces.

ENRAIZAMIENTO DE BROTES

Este enraizamiento de brotes se da en las camas de los invernaderos propiamente

adecuadas.
Desde el sector blanco del tallo, empiezan a aparecer raíces a los 10 días,
presentando un buen desarrollo a los 45 días.

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OBTENCIÓN DE PLANTAS DE BROTES ETIOLADOS

Las plantas pueden llevarse a terreno cuando tengan entre 10-15 cm de altura,

previo endurecimiento al aire libre. El proceso completo toma 3 meses

aproximadamente.

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Almacén de grano de maíz

El almacenamiento de los granos, se realiza con el fin de conservar la calidad de

los productos después de la cosecha, limpieza y secado. El deterioro y pérdida de
los granos depende de factores como el contenido de humedad, la temperatura
del grano, la presencia de insectos y microorganismos.

De la temperatura y el contenido de humedad depende el tiempo y la conservación

de la calidad de los granos, ya que entre más secos y fríos se mantenga los
granos, mayor será el tiempo que permanecerá en las mejores condiciones.

En este almacén se controla la humedad relativa con la deshumificadora, es un

aparato que reduce la humedad ambiental y ayuda a la circulación del aire por el
suelo.

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Invernadero con riego tecnificado por nebulización para el desarrollo y

enraizamiento de los plantines antes de ser llevados campo definitivo

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Plantas de frambuesa en campo definitivo variedad Meeker.

Plantas de arándano en invernadero en aclimatación

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CAPITULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Micropropagación es el conjunto de técnicas y métodos de cultivo de tejidos

utilizados para multiplicar plantas asexualmente en forma rápida, eficiente y en
grandes cantidades

El cultivo in vitro, constituye un paso fundamental en la obtención y regeneración

de plantas genéticamente modificadas, o transgénicas, mediante técnicas de
ingeniería genética

Cultivo de meristemos. Técnica de cultivo que consiste en aislar asépticamente la

región meristemática con 1-3 de los primordios foliares más jóvenes e implantarla
en un medio de cultivo estéril, con el propósito de inducir la diferenciación de
células y tejidos en plantas completas, mediante la utilización de medios de
cultivos adecuados.

La propagación de la frambuesa se realiza tradicionalmente de forma vegetativa

por separación de corona o brote etiolado

La etiolación o etiolado es una técnica de modificación de los tejidos vegetales

verdes (con cloroplastos) en tejidos sin cloroplastos, blancos y muy semejantes a
las raíces.

Respecto a la variedad Heritage.se han logrado obtener 250 brotes por 100
gramos de raíces.

La emisión de brotes comienza a los 15 - 20 días, procediéndose a cosecharlos

cuando se han expandido 3- 4 hojitas. El corte se efectúa con una buena hoja de
afeitar en la unión del brote con la raíz, debiendo ser plantado a la brevedad para
evitar la deshidratación y oxidación de los tejidos

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Respecto al almacenamiento de grano de maíz en el INIA se lleva a cabo en la

cámara fría, donde los sacos se encuentran sobre maderas para la mejor
circulación del aire, la humedad relativa es manejada por la maquina
deshumificadora.

Heritage: variedad remontante predominante a nivel mundial, destinada a la

producción de frutos de cosecha otoñal. La cosecha es tardía, se extiende hasta
las primeras heladas, presentando un pico desplazado hacia abril-mayoLa
producción estival, es decir sobre cañas, es temprana y de carácter regular. La
planta es muy vigorosa y posee espinas muy marcadas. Ha demostrado un amplio
rango de adaptación y consistencia en el rendimiento. Los frutos son cónicos, muy
chicos, muy firmes en estado maduro, con sabor regular, se caracterizan por su
fácil liberación y la capacidad de permanecer en buenas condiciones incluso
cuando están sobre maduros. La fruta es buena para la elaboración de dulce
aunque regular para conservas al natural.

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CAPITULO Vl
BIBLIOGRAFIA

 Almeida, J., Contreras, I. 2004. “Propagación in vitro de Mora de Castilla

(Rubusglaucus) a partir de miniestacas”. Ecofisiología y Fisiología Vegetal.
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<http://www.botanica-alb.org/publicaciones/Otros/5 EcolFis.pdf> (14/06/05)

 Amhed, Z., Akhter, F., Haque, S., Banu, H., Rahman M., Faruquzzaman, M.
2001. “Novel Micropropagation System”. OnLine Journal of Biological
Sciences 1 (11): 1106-1111. Disponible en:
<http://www.ansinet.org/fulltext/jbs /jbs1111106-1111.pdf> (14/06/05)

 CORFO (Corporación de Fomento de la Producción). 1982. “Arbustos

Frutales”. Edición Única. Editorial Universidad Austral de Chile. Chile. 32p.

 Fontúrbel, F. 2002. “Micropropagación de un cultivo perenne”. Biología y

Ciencias de la Salud: 7. Disponible en:
<http://www.biologia.org/?pid=5001&id=47>
 Respuesta de dos clones de Pyrus calleryana a distintos medios de cultivo,
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 Ajuste de un sistema de multiplicación in vitro para la especie nativa Aloysia
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Pino G., Bonilla

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