ESPECIES DE CLOSTRIDIUM

Los clostridum son bacilos anaerobios grandes, grampositivos, y con motilidad. muchos
degradan las protenas o forman toxinas y algunos hacen ambas ccosas. Su habitad
natural es el suelo o el conducto intestinal de animales y humanos, sonde viven como
saprofitos. Entre los patgenos se encuentran los microorganismos causantes del
BOTULISMO, TETANOS, GANGRENA GASEOSA y de la COLITIA
PSEUDOMENBRANOSA.
MORFOLOGIA E IDENTIFICACION
A. Microorganismos tpicos
Las esporas del clostridium generalmente son ms anchas que el dimetro de los
bacilos en los cuales se forman. En las diferentes especies la espora es central,
subterminal o terminal. La mayor parte de las especies de clostridium est dotada de
motilidad y tiene flagelos pertricos.
B. Cultivo
Los clostridium son microorganismos anaerbicos y, por ende, crecen bajo condiciones
anaerobias; algunas especies toleran el aire y tambin crecen en el aire ambiental.
Estas condiciones establecen a travs de los medios siguientes.
Se colocan placas de agar o tubos de cultivo en un recipiente hermtico se
retira el aire y se sustituye por nitrgeno con 10% de CO2.
Se coloca medio liquido en tubos largos que contienen tejido fresco de animal o
0.1% de agar y un agente reducotr, como tioglicolato. Estos tubos pueden
manejarse como medios anaeroibios, y el crecimiento ocurre desde la oparte
inferios hasta antes de 15mm de la superficie expuesta al aire.

C. Formacin de colonias
Algunos microorganismos producen colonias grandes prominentes con bordes
regulares, otros, colonias ms pequeas extendidas en forma de red de filamentos
finos. Sobre agar de sangre muchos clostridium forman una zona de hemolisis. El C.
perfringens tpicamente produce mltiples colonias de hemlisis alrededor de las
colonias.
D. Caractersticas del crecimiento
La caracterstica notable de los microorganismos anaerbicos es su incapacidad para
utilizar oxigeno como aceptor final de hidrogeno. Carecen de citrocromo y del
citocromo oxidasa, y no pueden desdoblar el perxido de hidrogeno debido a la
ausencia de catalasa y peroxidasa. Por tanto, en presencia de oxigeno tienden
acumular en H2O2 hasta que alcance a concentraciones toxicas. Los clostridium y otros
anaerobios obligados tal vez tambin carecen de superoxido dismutasa, y en
consecuencia, permite la acumulacin de un radical libre toxico, el anin superoxido.
Estos anaerobios pueden efectuar sus reacciones metablicas solo con un potencial de
xido-reduccin negativo, es decir, en un ambiente fuertemente reductor.
Los clostridiun pueden fermentar varios azucares muchos pueden digerir protenas.
Algunos acidifican la leche y otros la digieren y con un tercer grupo sufre
fermentacin grumosa (esto es, los gases de la fermentacin rompen el coagulo).
Diferentes especies producen varias enzimas.
E. Caractersticas antgenas
Los clostridiun comparten algunos antgenos, pero tambin tienen antgenos solubles
especficos que permiten agrpalos segn el resultado de las pruebas de precipitina.

CLOSTRIDIUM BOTULINUN
El clostridium botulinun es el causante del BOTULISMO, y se distribuye en todo el
mundo, se encuentra en el suelo y a vces en las heces de los animales.
Los tipos del C. botulinun se distinguen por el tipo antgeno de la toxina que producen.
Las esporas de los microrganismos son muy resistentes al calor a unos 100c al menos
durante 3 a 5 horas. La resistencia al calor disminuye su pH acido o en una
concentracin de sal. Adems, son resistentes a las radiaciones y pueden sobrevivir a
temperaturas de -190C. El grado de resistencia a los diversos factores fsicos y
qumicos dependen de la cepa y del tipo serolgico especficos del microorganismo. El
tipo A es ms resistente que los tipos B, C y D; el tipo E es el menos resistente al calor.
TOXINA
Durante el desarrollo del C. botulinun y la autolisis de la bacteria se libera toxina al
ambiente. Se conocen siete variedades antgenas de toxina (A a G). Los tipos A, B y E (y
en ocasiones F) son la causa principal de la enfermedad humana. Los tipos A y B se
relacionan con varios alimentos, y el tipo E predomina en productos de pesca. El tipo C
produce el el cuello blando en aves, el tipo D, botulismo en mamferos. La toxina
botulnica se absorbe en el intestino y se fija a receptores localizados en las
membranas presinpticas de las neuronas motoras del sistema nervioso perifrico y
nervios craneales, bloqueando la liberacin de acetilcolina. Puesto que la transmisin
del impulso nervioso al musculo se realiza mediante la accin de la acetilcolina, se
inhibe la contraccin muscular dando lugar a una parlisis flcida.
PATOGENIA
La toxina botulnica acta bloqueando la liberacin de acetilcolina, causando de esta
manera una parlisis flccida de los msculos esquelticos y un fallo parasimptico. En
la intoxicacin alimentaria se ingiere la toxina preformada que es absorbida por
endocitosis a travs del tracto gastrointestinal. En el lactante las esporas ingeridas
germinan a nivel del colon, ya que no existe flora inhibidora, y producen la toxina que
es luego absorbida. Luego de ser absorbida desde el tracto gastrointestinal o desde la
herida, la toxina es llevada por va linftica o sangunea hasta sus sitios de accin: las
terminaciones nerviosas colinrgicas. Como no atraviesa la barrera hematoenceflica,
solo acta sobre el sistema nervioso perifrico, especialmente a nivel de la placa o
unin neuromuscular, y en el sistema nervioso autnomo. En el botulismo de heridas
se produce la toxina a nivel de la herida siempre y cuando el germen haya encontrado
las condiciones adecuadas para germinar. Los distintos tipos de toxina difieren en su
afinidad por el tejido nervioso, siendo la de tipo A la que posee mayor afinidad.
DATOS CLINICOS
Los sntomas aparecen 18 a 24 horas despus de inger el alimento toxico, estos
comprenden trastornos visuales (falta de coordinacin de msculos oculares, visin
doble) incapacidad para deglutir y dificultas para hablar, los signos de parlisis bulbar
son progresivos y la muerte ocurre por para respiratorio o cardiaco. En general los
sntomas gastrointestinales no son notables, no hay fiebre. El paciente permanece
totalmente consiente hasta apoco antes de su muerte, la tasa de mortalidad es alta.
los pacientes que se recuperan desarrollan antitoxina en la sangre.
PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE LABORATORIO
Con frecuencia se puede demostrar la toxina en el suero del paciente y detectarla en
residuos de alimento. Los ratones inyectados por va intraperitoneal con la toxina
mueren rpido. En los ratones, el tipo antignico de la toxina se identifica mediante
neutralizacin con la antoxina especifica. el C. botulismo pude desarrollarse a partir de
residuos de alimentos y someterse a pruebas para produccin de toxina, pero esta rara
vez se practica y es discutible su significado.
TRATAMIENTO
En animales se han preparado potentes antitoxinas de los tres tipos de toxina botulina.
como regulante se desconoce el tipo causante de un caso individual, debe
administrase de inmediato antitoxina trivalente (A, B, E) por va intravenosa, con las
precauciones pertinentes. Si es necesario tener adecua ventilacin adecuada mediante
respirador mecnico. Estas medidas reducen la tasa de mortalidad de 65% a menos de
25%.
EPIDEMIOLOGIA, PREVENCIO Y CONTROL
Como las esporas del botulinun se distribuyen ampliamente en el suelo, con frecuencia
contaminan vegetales, frutas y otros materiales. Se debe descartar las latas
abombadas, no dejar las conservas caseras por lapsos largos y cocer bien la carne
CLOSTRIDUIUM TETANI
Es el agente causal del ttanos. La naturaleza anaerobia del C. tetani fue responsable
en parte de la demora de en su descubrimiento y aislamiento, lo que fue logrado por
Kitasato en 1889.El reconocimiento de que una pequea infeccin local producida por
este microorganismo poda dar como resultado una marcada toxemia con
manifestaciones neuromusculares llevo al descubrimiento de la toxina tetnica y a la
deteccin poco tiempo despus de la antitoxina especifica. Esta antitoxina es bastante
eficaz como profilaxis, pero tiene una menor eficacia cuando se emplea de forma
teraputica.
Poco despus con el descubrimiento, de que la toxina puede ser convertida en toxoide,
mejor la manera de prevenir a las personas del ttanos.
HABITAD
Se encuentra en el suelo frtil y coloniza de manera transitoria el aparato digestivo de
muchos animales, como el ser humano. Las formas vegetativas de C.tetani
son muy sensibles a la toxicidad del oxgeno, pero los microorganismos forman esporas
con facilidad y pueden sobrevivir en la naturaleza durante perodos prolongados, es
frecuente detectar sus esporas en la tierra y en el polvo domstico en las aguas
fangosas y estancadas, en las espinas, en los metales oxidados, en los instrumentos de
trabajo de campo, en las heces humanas y en especial las de animales herbvoros,
donde manifiestan considerable viabilidad. Las formas esporuladas se encuentran con
mayor frecuencia en las regiones tropicales y en terrenos abonados donde se realiza
actividad agropecuaria, y permanecen viables por aos. Se puede encontrar en el
estircol en condiciones anaerobias.
En muchos pases en desarrollo la mayor parte de los casos de ttanos son de lactantes
recin nacidos que contrajeron la enfermedad cuando se cort o vend el cordn
umbilical bajo condiciones no estriles.
MORFOLOGIA Y FISIOLOGIA
El bacilo del ttano es bastante largo y delgado cuando se lo comprar con otros
Clostridium patgenos. Mide de 2 a 5um de ancho y de 3 a 8um de longitud. Los
cultivos jvenes del microorganismo en general son Gram-positivos, pero en los
cultivos ms viejos y en los frotis del material de las heridas los microorganismos, con
frecuencia son Gram-negativos.
En condiciones de cultivo apropiado el microorganismo produce una espora que se
localiza en la posicin terminal y que tiene un dimetro considerablemente mayor, al
de la clula vegetativa, lo que le otorga un el aspecto caracterstico de palillo de
tambor o la forma de raqueta de tenis.
RESISTENCIA
Clostridium tetani es muy resistente a diversos desinfectantes y el calor; esta
resistencia es conferida por la espora.
La espora no se destruye por hervor durante 20 minutos

TOXINA
Las clulas vegetativas de C. tetani producen la toxina tetanospasmina que es proteica,
termolbil y protoplasmtica
La tetanoespasmina se produce durante la fase estacionaria de crecimiento, se libera
cuando la clula se lisa y es responsable de las manifestaciones clnicas del ttanos. La
tetanoespasmina (una toxina A-B) se sintetiza como un nico pptido de 150.000 Da y
se escinde en una subunidad ligera (cadena A) y en una subunidad pesada (cadena B)
por una proteasa endgena cuando la clula libera la neurotxica. Las dos cadenas
permanecen unidas por un enlace disulfuro y por fuerzas no covalentes. El dominio de
unin a hidratos de carbono de la cadena pesada (100.000 Da), la porcin carboxilo
terminal, se une a receptores especficos para el cido silico (polisialoganglisidos) y
otras glucoprotenas adyacentes en la superficie de las neuronas motoras En concreto,
la tetanoespasmina inhibe ciertas protenas que regulan la liberacin de los
neurotransmisores inhibidores glicina y cido gamma-aminobutrico (GABA). Ello
comporta una actividad sinptica excitatoria carente de regulacin en las neuronas
motoras que provoca una parlisis espstica.
PATOGENIA
El c. tetani no es un microorganismo invasor. La infeccin permanece estrictamente
localizada en el sitio del tejido desvitalizado (herida, quemadura, lesin, sutura
quirrgica) en la cual se han introducido las esporas. El volumen de tejido infectado es
pequeo y la enfermedad es una toxemia en su totalidad. La germinacin de esporas y
el desarrollo de microorganismos vegetativos productores de toxina se favorecen por:
tejido necrosado, sales de calcio e infecciones pigenas acompaantes como bacterias
contaminantes de tipo anaerobio facultativo pueden crear las condiciones de
anaerobiosis en una herida como un potencial de xido reduccin bajo. Todo esto
favorece a que germinen las semillas; a medida que los Clostridios se multiplican en el
tejido, algunos experimentan autolisis y liberan tetanospasmina.
DATOS CLINICOS
Hay tres formas clnicas del ttano diferente: local (poco comn), ceflica (rara) y
generalizada (la ms comn). El ttanos generalizado corresponde al 80% de todos los
casos de ttanos. El periodo de incubacin del ttanos va de 24 horas a 54 das. El
periodo promedio es de unos 8 das. Por lo general, cuanto ms alejado del Sistema
Nervioso Central, ms largo es el periodo de incubacin. Los periodos de incubacin y
la probabilidad de muerte por ttanos son inversamente proporcionales. Algunos de
los sntomas caractersticos del ttanos son: Rigidez de los msculos y espasmos
musculares (mandbula, cuya rigidez tambin se conoce como trismus, cara, abdomen,
miembros superiores e inferiores).
DIAGNOSTICO
El diagnostico se basa en el cuadro clnico y el antecedente de alguna lesin, aunque
solo 50% de los pacientes son ttanos presentan alguna lesin que amerita atencin
mdica. El diagnstico diferencial del ttano s establece principalmente con el
envenenamiento con estricnina. El cultivo anaerbico de los tejidos procedentes de
herida contaminadas puede producir C.tetani, pero nunca debe esperarse el resultado
de la prueba para iniciar la administracin de la antitoxina con fines preventivos o
teraputicos. Adems de aislar el C.tetani, se debe verificar la produccin de la toxina y
su neutralizacin con una toxina especifica.
PREVENCION Y TRATAMIENTO
Los resultados del tratamiento del ttano no siempre son satisfactorios, por tanto, es
ms importante la prevencin, la cual depende de:
inmunizacin activa con toxoide
atencin apropiada de heridas contaminadas de tierra, etc
empleo profilctico de la antitoxina y
la administracin de penicilina.
A loa pacientes con sntomas de tetanos se les debe administrar relajantes musculares,
sedantes y proporcionar ayuda ventilatoria.
CONTROL
El ttano es una enfermedad prevenible. La inmunizacin universal activa con toxoide
tetnico debe ser obligatoria. Este se produce por detoxificacion de la toxina con
formalina y luego concentracin de la misma. Se emplean toxoides absorbidos en sales
de aluminio. El ciclo inicial de inmunizacin incluye tres inyecciones, seguidas por otra
dosis casi un ao despus. La inmunizacin inicial debe debe efectuarse en todos los
nios durante el primer ao de vida. Al entrar a la escuela se administra una inyeccin
de toxoide como refuerzo. A partir de entonces, los refuerzos se pueden aplicar con
intervalos de 10 aos para mantener concentraciones sricas mayores 0.01 unidades
de antitoxina por mililitro.
CLOSTRIDIOS QUE PRODUCEN INFECCIONES INVASORAS (clostridium perfrigens y
clostridium relacionados)
Diferentes clostridios productores de toxina pueden causar infeccin invasora (incluso
mionecrosis y grangrena gaseosa) si se producen en los tejidos daados. Alrededor de
30 especies de clostridios puedes producir este efecto, pero el ms comn es las
enfermedades es el CLOSTRIDIUM PERFRINGENS (90%). Una enterotoxina del C.
perfringens es causa comn de envenenamiento alimentario.
TOXINAS
Los clostridios invasores producen gran variedad de toxinas y enzimas que favorecen la
propagacin de la infeccin. Muchas de estas toxinas tienen propiedades mortales,
necrosantres y hemolticas. En algunos casos son propiedades diferentes de una sola
sustancia, entre otros se deben a diferentes entidades qumicas. La toxina tipo A es
una lectinasa y su accin mortal proporcional a la tasa a la cual desdobla la lectina
(elemento importante de las membranas celulares) para convertirla en fosforilcolina y
disgliceridos.
Algunas cepas producen una potente enterotoxina, en especial cuando crecen los
platillos de carne. La enterotoxina es distinta a las dems, esta induce a la diarrea
intensa en 6 a 18 horas. La accin de la enterotoxina incluye perdida de fluidos y
electrolitos en la diarrea. Sntomas muchos menos frecuentes son las nuseas, vmito
y fiebre.
PATOGENIA
En las infecciones clostridiales invasoras esporas de los clostridios alcanzan los tejidos
por contaminacin de las regiones traumatizadas (heces, suelo) o desde el intestino.
Las esporas germinan en ambiente con potencial de xido-reduccin bajo, las clulas
vegetativas se multiplican, fermentan los carbohidratos presentes en el tejido y
producen gas. La distensin titular e interferencia con el riesgo sanguneo, junto con la
secrecin de toxina necrosante y de hialuronidasa, favorece la propagacin de la
infeccin. La necrosis tisular se extiende y da oportunidad a las bacterias de crecer aun
mas, causa anemia hemoltica y en ultimo termino, toxemia grave y muerte.
En la gangrena gaseosa, la regla es una infeccin mixta. Adems de los clostridios
toxgenos tambin suelen encontrarse clostridios proteolticos, varios cocos y
microorganismos gramnegativos.
DATOS CLINICOS
En 1 a 3 das la infeccin se propaga desde una herida contaminada y produce
crepitacin en el tejido subcutneo y msculos, secrecin detida, necrosis
rpidamente evolutiva, fiebre, hemlisis, toxemia, choque y muerte. El tratamiento se
basa en la interpretacin quirrgica temprana y la administracin de antitoxina. Antes
del desarrollo de la teraputica especifica el nico tratamiento era la amputacin
temprana. A veces, la infeccin solo produce fascitis o celulitis anaerobia.
L a intoxicacin alimentaria por generalmente acontece despus de ingerir un gran
nmero de clostrifdios desarrollados en platillos de carne a temperatura. Las toxinas se
forman al esporular los microorganismos en el intestino, en general, la diarrea se inicia
sin vomito ni fiebre en 6 a 18 horas. La enfermedad solo dura 1 a 2 das.
PRUEBAS DIAGNOSTICOS DE LABORATORIO
Las muestras consisten en material procedente de heridas, pus, tejido. L a presencia de
bacilos grandes grampositivos y formadores de esporas en los frotis teidos con
tincin de Gram sugiere gangrena gaseosa por clostridios, regularmente no se
encuentran esporas.
El material se inocula en un medio con carne molida-glucosa y en medio con
tioglicolato, y sobre placas agar sangre incubadas en condiciones anaerobias. El
crecimiento de uno de los medios se transfiere la leche. Un coagulo disgregado por gas
en 24 horas sugiere. Una vez obtenidos cultivos puros por seleccin de colonias a
partir de placas de sangre incubadas en condiciones anaerobias, se pueden identificar
los clostridios por reacciones bioqumicas. hemolisis y formacin de colonias. La
actividad de lectinasa se evala por el precipitado formado alrededor de las colonias
sobre un medio con yema de huevo. La identificacin final se basa en la produccin y
neutralizacin de las toxinas por una antitoxina especifica.
TRATAMIENTO
El aspecto ms importante del tratamiento es el desbridamiento quirrgico oportuno y
amplio de la regin afectada, con escisin de todo el tejido desvitalizado en el que
puedan crecer los microorganismos. Al mismo tiempo debe iniciarse la administracin
de antimicrobianos, sobre todo penicilina. El oxgeno hiperbrico puede ser til en el
tratamiento mdico de la infeccin de tejidos por clostridio. Se dice que detoxifica
pronto a los pacientes.
Estas antitoxinas se administran a veces a personas con heridas contaminadas y con
mucho tejido contaminadas y con mucho tejido desvitalizado, pero no hay evidencia
de su eficacia. La intoxicacin alimentaria causada por la enterotoxina del C. perfrigens
solo requiere tratamiento sintomtico.
PREVENCION Y CONTROL
Las mejoras medidas preventivas disponibles son limpieza oportuna y adecuada de las
heridas, desbridamiento quirrgico y administrativo de antimicrobiano dirigidos contra
el clostridium. No se debe confiar exclusivamente en las antitoxinas. Aunque tambin
se han preparado toxoides para inmunizacin activa, aun no se emplean en la prctica.
CLOSTRIDIUM DIFFICILE Y ENFERMEDAD DIARREICA
COLITIS PSEUDOMENBRANOSA
La colitis pseudomenbranosa se diagnostica por la deteccin de una o ambas toxinas
del C. diffile en las heces y por observacin endoscpica de pseudomenbranas o
microabscesos en pacientes con diarrea y a quienes se les han administrado
antibiticas. Las placas y los microabscesos a veces se localizan en una sola regin del
intestino. La diarrea puede ser acuosa o sanguinolenta, y el paciente con frecuencia
presenta dolor abdominal tipo colico, leucocitosis y fiebre. Se ha implicado a muchos
antibiticos en la colitis pseudomenbranosa, pero la causa ms comn son ampicilina y
clindamicina. La enfermedad se trata interrumpiendo la administracin del antibitico
agresor y administrando metronidazol o vancomicina por va oral.
La administracin de antibiticos da lugar a la proliferacin del C. difficile resistente al
frmaco que produce dos toxinas. La toxina A, una potente enterotoxina con cierta
actividad citotoxina que se une al borde en cepillo de la membrana del enterocito
sobre sitios receptores. La toxina B es una potente citotoxina. Ambas toxinas se
encuentran en las heces de pacientes con colitis pseudomenbranas. No todas las cepas
del C. difficile producen toxinas, y los genes tox aparentemente no se transportan en
plasmidos ni en fagos.
DIARREA RELACIONADA CON ANTIBIOTICOS
Con frecuencia, la administracin de antibiticos produce una variante de la diarrea de
leve a moderada, denominada diarrea relacionada con antibiticos. Es general, esta
enfermedad es menos grave que la forma tpica de colitis pseudomenbranosa. Hasta
25% de los casos de este tipo de diarrea puede atribuirse al C. diffcile.