Biorreacciones Batch (intermitentes o por lotes)

La mayora de las biorreacciones son por lotes. La primera fase de biorreaccin

discontinua es comnmente esterilizacin, despus de lo cual el medio de cultivo estril
se inocula con microorganismos que se han cultivado para conseguir un resultado
especfico. Durante este perodo dinmico de reaccin, las clulas, los sustratos
(incluidas las sales nutritivas y las vitaminas) y las concentraciones de los productos
varan con el tiempo. La mezcla adecuada mantiene las diferencias en la composicin y
la temperatura en niveles aceptables.

Para promover el cultivo aerbico, el medio es aireado para proporcionar un flujo

continuo de oxgeno. Subproductos gaseosos formados, tales como CO2, y los procesos
de aireacin y de liberacin de gas tienen lugar de manera semicontinua.

A continuacin, se aade un cido o un lcali si el pH necesita ser controlado. Para

mantener la formacin de espuma en niveles aceptables, se pueden aadir agentes
antiespumantes cuando se indica mediante un sensor de espuma

En general, los sistemas de biorreaccin por lotes proporcionan una serie de ventajas,
incluyendo:

Reduccin del riesgo de contaminacin o mutacin celular, debido a un perodo

de crecimiento relativamente breve.
Menor inversin de capital en comparacin con procesos continuos para el mismo
volumen de biorreactores.
Mayor flexibilidad con diferentes sistemas de productos / biolgicos.
Mayores niveles de conversin de materias primas, resultantes de un perodo de
crecimiento controlado.
Las desventajas incluyen:

Bajos niveles de productividad debido al tiempo de llenado, calentamiento,

esterilizacin, enfriamiento, vaciado y limpieza del reactor.
Mayor concentracin en la instrumentacin debido a la esterilizacin frecuente.
Mayor gasto en la preparacin de varias subculturas para la inoculacin.
Costos ms altos de mano de obra y / o control de procesos para este proceso
no estacionario.
Riesgos de higiene industrial mayores debido al posible contacto con
microorganismos patgenos o toxinas.
Las aplicaciones comunes para biorreactores por lotes incluyen:

Productos que se deben producir con un riesgo mnimo de

Contaminacin o mutacin del organismo.
 Operaciones en las que slo pequeas cantidades de producto
son producidos.
Procesos utilizando un reactor para fabricar diversos productos.
Procesos en los que el producto discontinuo o semicontinuo, la separacin es
adecuada.
Biorreacciones continuas

La caracterstica definitoria de la biorreaccin continua es un proceso de alimentacin

perpetua. Un medio de cultivo que es estril o compuesto de microorganismos se
alimenta continuamente en el biorreactor para mantener el estado estacionario. Por
supuesto, el producto tambin se extrae continuamente del reactor. Las variables de
reaccin y los parmetros de control permanecen constantes, estableciendo un estado
de tiempo constante dentro del reactor. El resultado es productividad y produccin
continuas. Estos sistemas proporcionan una serie de ventajas, incluyendo

Mayor potencial para automatizar el proceso.

Reduccin del gasto de mano de obra, debido a la automatizacin.
Tiempo menos productivo en el vaciado, llenado y esterilizacin del reactor.
Calidad de producto consistente debido a parmetros operativos invariables.
Disminucin de los riesgos de toxicidad para el personal, debido a la
automatizacin.
Menor tensin en los instrumentos debido a la esterilizacin.
Las desventajas de los biorreactores continuos incluyen:

Flexibilidad mnima, ya que slo son posibles pequeas variaciones en el proceso

(rendimiento, composicin del medio, concentracin de oxgeno y temperatura).
La uniformidad obligatoria de la calidad de la materia prima es necesaria para
asegurar que el proceso contine.
Mayores costos de inversin en equipos de control y automatizacin, y mayores
gastos para la esterilizacin continua del medio.
Mayores costes de elaboracin con reposicin continua de sustratos slidos no
solubles como la paja.
Mayor riesgo de contaminacin y mutacin celular, debido al perodo de cultivo
relativamente breve.

La biorreaccin continua se usa con frecuencia para procesos con produccin de gran
volumen; Para procesos que utilizan sustratos slidos solubles, lquidos o lquidos; Y
para procesos que implican microorganismos con alta estabilidad mutacional. Los
productos finales tpicos incluyen vinagre, levadura de panadera y aguas residuales
tratadas.
Continuo vs. Lote

Existen varias ventajas importantes en el uso de biorreacciones continuas en oposicin

al modo por lotes. En primer lugar, las reacciones continuas ofrecen mayores
oportunidades para la investigacin y el anlisis del sistema. Debido a que las variables
permanecen sin cambios, se puede determinar un punto de referencia para los
resultados del proceso y, a continuacin, se pueden evaluar los efectos incluso de
cambios menores en las variables fsicas o qumicas. Adems, al cambiar el nutriente
limitante del crecimiento, se pueden seguir los cambios en la composicin celular y en la
actividad metablica. La constancia de la biorreaccin continua tambin proporciona una
imagen ms precisa de las constantes cinticas, la energa de mantenimiento y los
rendimientos reales del crecimiento.

En segundo lugar, la biorreaccin continua proporciona un mayor grado de control que

el lote. Las tasas de crecimiento pueden ser reguladas y mantenidas por perodos
prolongados. Mediante la variacin de la velocidad de dilucin, la concentracin de
biomasa puede ser controlada. La produccin secundaria de metabolitos puede
sostenerse simultneamente junto con el crecimiento. En la biorreaccin continua en
estado estacionario, los cultivos mixtos pueden mantenerse usando cultivos de
quimiostatos, a diferencia de la biorreaccin discontinua, donde un organismo
generalmente supera a otro. Los quimiostatos son biorreactores de tanque de agitacin
de flujo continuo (CFSTR) en un estado estacionario idealizado, es decir, las
composiciones de flujo de alimentacin y salida y los flujos son constantes y se produce
una mezcla perfecta dentro del recipiente CFSTR. En los quimiostatos, la compo- sicin
de la corriente de salida se considera que es la misma que dentro del biorreactor. Los
biorreactores operados como quimiostatos pueden usarse para aumentar la selectividad
para termfilos, cepas osmotolerantes o organismos mutantes con altas tasas de
crecimiento. Adems, la composicin del medio puede optimizarse para la biomasa y la
formacin del producto, usando un mtodo de pulso y desplazamiento que inyecta
nutrientes directamente en el quimiostato. A medida que se obtienen los cambios, se
aade el nutriente al medio de suministro de suministro y se establece un nuevo estado
estacionario.

Una tercera ventaja es la calidad del producto. Debido al estado estacionario de

biorreaccin continua, los resultados son no slo ms fiables, sino tambin ms
fcilmente reproducibles. Este proceso tambin da lugar a una mayor productividad por
unidad de volumen, ya que no son necesarias tareas que consumen mucho tiempo, tales
como limpieza y esterilizacin. La capacidad de automatizar el proceso tambin lo hace
menos intensivo en mano de obra y, por lo tanto, ms rentable y menos sensible al
impacto del error humano.
Junto con las fuerzas de biorreaccin continua, hay desventajas inherentes que pueden
hacer que este procedimiento sea inadecuado para algunos tipos de biorreaccin. Por
ejemplo, uno de los desafos consiste en controlar la produccin de algunos productos
no relacionados con el crecimiento. Por esta razn, el proceso continuo a menudo
requiere un cultivo de alimentacin por lotes, y un suministro continuo de nutrientes. El
crecimiento de la pared y la agregacin de clulas tambin pueden causar lavado o
prevenir un crecimiento ptimo en estado estacionario.

Otro problema es que la cepa original del producto se puede perder con el tiempo, si es
superada por una de crecimiento ms rpido. La viscosidad y la naturaleza heterognea
de la mezcla tambin pueden dificultar el mantenimiento de los organismos filamentosos.
Los perodos de crecimiento prolongado no slo aumentan el riesgo de contaminacin,
sino que tambin exigen que el biorreactor sea extremadamente fiable y consistente,
incurriendo en un gasto potencialmente mayor en equipos de mayor calidad.

Bioreacciones semicontinuas

Este hbrido de operaciones discontinuas y continuas se encuentra en muchos tipos de

procesos. Una de las ms utilizadas es iniciar la biorreaccin en el modo discontinuo,
hasta que se haya consumido el substrato limitador del crecimiento. A continuacin, el
sustrato se alimenta al reactor como se especifica (lote) o se mantiene por un perodo de
cultivo prolongado (continuo). Para la produccin de metabolitos secundarios, en los que
el crecimiento celular y la formacin del producto ocurren a menudo en fases separadas,
el subestrato se aade tpicamente a una velocidad especificada. Como reactores
discontinuos, los reactores semicontinuos son no estacionarios. Estos sistemas
proporcionan una serie de ventajas, incluyendo:

Mayor rendimiento, resultante de un perodo de cultivo bien definido durante el

cual no se aaden ni se eliminan clulas.
Mayor oportunidad para optimizar las condiciones ambientales de los
microorganismos con respecto a la fase de crecimiento o produccin y edad del
cultivo.
Operacin casi estacionaria, importante con microorganismos ligeramente
mutantes y aquellos en riesgo de contaminacin.
Las desventajas incluyen:

Bajos niveles de productividad debido a los largos pro- cedimientos de llenado,

calefaccin, esterilizacin, enfriamiento, vaciado y limpieza del reactor.
Mayor gasto en procesos laborales y / o procesos dinmicos para el proceso.

Los biorreactores semicontinuos se usan tpicamente cuando no son factibles mtodos

continuos, por ejemplo, aquellos en los que se produce una ligera mutacin o
contaminacin del microorganismo. Tales biorreactores se usan tambin cuando los
mtodos discontinuos no ofrecen los niveles de productividad deseados.
Biorreactores sumergidos - tanque agitado
El tipo ms comn de biorreactor aerobio en uso hoy en da es el reactor de tanque
agitado, que puede presentar una configuracin interna especfica diseada para
proporcionar un patrn de circulacin especfico. Ideal para aplicaciones industriales,
esta unidad ofrece a los fabricantes bajos costos de capital y de operacin. Para los
experimentos de laboratorio con volmenes ms pequeos, el recipiente de mezcla est
hecho tpicamente de vidrio. La construccin de tanques de acero inoxidable es el
estndar para aplicaciones industriales en volmenes mayores. La relacin altura-
dimetro del recipiente puede variar, dependiendo de los requisitos de eliminacin de
calor.

Los principios de funcionamiento del biorreactor de tanque agitado son relativamente

simples. Como se muestra en la Figura 3, el medio estril y el inculo se introducen en
un tanque esterilizado, y el aire comprimido tpicamente entra en el fondo. Para una
mezcla ptima, el tanque no slo cuenta con un sistema de agitador, sino tambin con
deflectores, que ayudan a evitar un efecto de hidromasaje que podra impedir una mezcla
adecuada. En las primeras etapas del proceso, el agua caliente puede circular a travs
de los deflectores para calentar el sistema; Despus, se puede hacer circular agua fra
dentro de ellos para evitar que el proceso se sobrecaliente. El nmero de deflectores
vara tpicamente de cuatro a ocho.

A medida que avanza la biorreaccin, las burbujas producidas por el suministro de aire
se rompen por el agitador a medida que viajan hacia arriba. En la actualidad se utilizan
muchos tipos de agitadores, siendo el ms comn la turbina de disco de cuatro palas.
Tambin se ha demostrado que los diseos ms recientes con 12 o 18 hojas, o cncavos,
mejoran la hidrodinmica. En la parte superior del tanque, el gas de escape es
descargado y el producto fluye hacia abajo, donde es drenado del tanque.
En un reactor de tanque agitado de flujo continuo, el sustrato es alimentado
continuamente al sistema y el producto es continuamente extrado y separado, con el
organismo productor reciclado de nuevo al tanque para su reutilizacin. Como con los
reactores qumicos convencionales, los biorreactores se pueden colocar en serie o en
paralelo con corrientes de recirculacin controladas.
Sistemas de reactor de transporte areo

Tambin conocido como reactor de torre, un biorreactor de puente areo se puede

describir como una columna de burbujas que contiene un tubo de aspiracin.

Hoy en da se utilizan actualmente muchos tipos de biorreactores de transporte areo.

El aire es tpicamente alimentado a travs de un anillo de rociado en el fondo de un tubo
de tiro central que controla la circulacin de aire y el medio (Figura 4). El aire fluye por el
tubo, formando burbujas, y el gas de escape se desacopla en la parte superior de la
columna. El lquido desgasificado fluye entonces hacia abajo y el producto es drenado
del tanque. El tubo se puede disear para servir como intercambiador de calor interno, o
se puede aadir un intercambiador de calor a un circuito de circulacin interno.
Los sistemas de transporte areo ofrecen algunas ventajas frente a los biorreactores ms
convencionales, como el fermentador estndar:

Diseo simple sin piezas mviles o juntas de eje de agitador, para menos
mantenimiento, menos riesgo de defectos y ms fcil esterilizacin.
Bajo ndice de cizallamiento, para una mayor flexibilidad - el sistema puede usarse
para el cultivo tanto de clulas vegetales como animales.
Desacoplamiento eficiente en fase gaseosa.
rea de contacto interfacial grande y especfico con bajo consumo de energa.
Flujo bien controlado y mezcla eficiente.
Tiempo de residencia bien definido para todas las fases.
Aumento de la transferencia de masa debido a la mayor solubilidad en oxgeno
alcanzada en grandes tanques con mayores presiones.
Tanques de gran volumen son posibles, aumentando la produccin.
Mayor remocin de calor frente a tanques agitados convencionales.
Las principales desventajas son:

Mayores inversiones iniciales de capital debido a procesos a gran escala.

Mayor caudal de aire y mayores presiones necesarias, particularmente para

operaciones a gran escala.
 Baja friccin con un dimetro hidrulico ptimo para el tubo ascendente y el tubo de
descenso.
Baja eficiencia de compresin de gas.
Inherentemente imposible mantener niveles consistentes de sustrato, nutrientes y
oxgeno con los organismos circulando a travs del biorreactor y cambiando las
condiciones.
Separacin de gas / lquido ineficiente cuando ocurre espumacin.
Sin embargo, estas desventajas pueden y deben ser minimizadas en el diseo de
sistemas de transporte areo. Por ejemplo, si slo una localizacin sirve como fuente de
alimentacin, el organismo experimentara ciclos continuos de alto crecimiento, seguidos
por la esterilizacin, dando como resultado la produccin de subproductos indeseables,
bajos rendimientos y altas tasas de mortalidad. Un diseo con mltiples puntos de
alimentacin elimina este riesgo, especialmente para las operaciones a gran escala. Los
mismos riesgos son inherentes a un nico punto de entrada de oxgeno, el cual debe ser
suministrado en varios lugares dentro del recipiente, con la mayor parte del aire entrando
en el fondo para hacer circular el fluido a travs del reactor.
Reactores de bucle externo de transporte areo
Otro tipo de sistema de transporte areo es el sistema de reactor de bucle externo de
puente areo (AELR, Figura 5), utilizado principalmente para el funcionamiento por lotes.
La figura 5 muestra una vista en corte, es decir, la cmara y el tubo de descenso son en
realidad ms altas que las mostradas para el dimetro particular dibujado. Una variacin
del sistema del puente areo, el AELR utiliza la circulacin inducida para dirigir el aire y
el lquido a travs del recipiente. Este sistema consiste en un tubo ascendente y un tubo
de descenso externo, que estn conectados en la parte inferior y la parte superior,
respectivamente. A medida que el aire inyectado en la parte inferior del tubo ascendente
crea burbujas de gas que comienzan a subir a travs del tanque principal, el gas de
escape se desacopla en la parte superior y la solucin ms pesada resultante desciende
a travs del tubo descendente.
El AELR tiene algunas ventajas sobre los elevadores areos estndar:
Transferencia de calor eficaz y control eficiente de la temperatura.
Baja friccin con un dimetro hidrulico ptimo tanto para el tubo ascendente como
para el tubo descendente.
Tiempo de residencia bien definido en la seccin individual de la AELR.
Mayor oportunidad para la medicin y el control en el tubo ascendente y el tubo
descendente.
Control independiente de la tasa de entrada de gas y de la velocidad del lquido
mediante un dispositivo de estrangulacin entre el tubo ascendente y el tubo
descendente.
Bioreacciones anaerbicas
Las biorreacciones anaerobias se utilizan en aplicaciones como la produccin de etanol,
elaboracin de vinos, elaboracin de cerveza y tratamiento de aguas residuales. Las
tecnologas estn bien establecidas en la produccin de vino, etanol y cerveza, con
mejoras resultantes de mejoras en el producto y reduccin de costos de fabricacin. Se
han comercializado biorreactores continuos para la cerveza, sin embargo, los
fermentadores discontinuos siguen recibiendo inversiones de capital. El tratamiento de
los desechos es un campo que en gran medida se considera que ha madurado con la
tecnologa plenamente funcional en su lugar, por lo tanto, no se ha prestado tanta
atencin al desarrollo de nuevos procesos de tratamiento de aguas residuales.
Tecnologas en desarrollo

Se estn desarrollando una serie de nuevos procesos. Una implica el uso de enzimas
aisladas en lugar de clulas enteras para llevar a cabo un cambio qumico. La ventaja es
que este proceso no requiere atender a las necesidades especiales de las clulas vivas.
Sin embargo, las enzimas tambin pueden sufrir cambios y, por lo tanto, requieren
determinar las condiciones ptimas para expresar su actividad cataltica. Un problema
adicional es que el uso de enzimas aisladas es con frecuencia un compromiso costoso
para una aplicacin de un solo uso.
En consecuencia, pueden ser necesarios tiempos de reaccin largos si los factores de
costo requieren que las enzimas caras se utilicen slo en bajas concentraciones. Existen
otras desventajas para su uso, tambin, tales como la necesidad de eliminar la enzima
del producto una vez que ha tenido lugar la bioreaccin deseada.
La tecnologa enzimtica inmovilizada est resolviendo con xito algunas de estas
dificultades. Con la enzima immovilizada en un lecho o tubo, la solucin de sustrato para
conversin se hace pasar a continuacin para conversin en producto. El producto se
recoge continuamente como efluente del biorreactor. El diseo y el funcionamiento de un
sistema inmovilizado es similar al de los procesos que emplean catlisis heterognea.
Los sistemas heterogneos permiten la recuperacin del producto a menores costes de
separacin que los correspondientes sistemas homogneos.
Los biorreactores de contacto gas-lquido-slido han sido investigados con una serie de
sistemas enzimticos inmovilizados. La inmovilizacin en zyme puede adoptar una
variedad de formas diferentes y se ha estudiado en una gama de soportes. El mtodo
utilizado en una aplicacin particular depende de las caractersticas de la enzima, su
sistema, el sustrato y el fluido bioreaccionador. Las enzimas pueden estar soportadas
sobre una estructura de tipo de malla o estructura de transferencia de masa
convencional, encapsulada en una pelcula, soportada por gel o sistemas derivados de
slice, sobre resinas macroporosas de intercambio inico, o sobre otros soportes
polimricos.
Un sistema que emplea actualmente esta tecnologa es el biorreactor de lecho de goteo
(Figura 6). A diferencia de ciertos tipos de biofiltros tradicionalmente utilizados para el
control de las emisiones, este sistema presenta una pantalla sobre la cual la enzima es
aderada e inmovilizada, ya travs de la cual se pasa la solucin de sustrato para la
conversin.
Se han ensayado membranas y fibras huecas para sistemas de biorreaccin
inmobilizados. Un ejemplo son las fibras huecas con enzimas incorporadas en sus
paredes. La difusin del substrato a travs de la pared del tubo permite el contacto con
la enzima gelificada y la conversin en producto. La difusin posterior del producto
proporciona la separacin necesaria para su recuperacin. Bajo la influencia de la
presin diferencial a travs de la pared del tubo, el producto fluye hacia el interior del
tubo, eventualmente para ser recogido en una cabecera multitube. La produccin de
etanol se ha logrado en el laboratorio con enzimas inmovilizadas en reactores de lecho
fijo y de membrana. Las enzimas ya han sido probadas con xito para la conversin de
azcar en etanol.
La isomerizacin de la glucosa a la fructosa es un proceso comercial bien establecido y
de alto volumen para la produccin de jarabe de maz de alta fructosa (HFCS). Continan
desarrollndose tecnologas que utilizan isomerasa de glucosa inmovilizada en lecho fijo
y biorreactor fluidizado.
Resumen
Los biorreactores sern parte integral del desarrollo de muchos nuevos productos de alto
valor y la sustitucin de los procesos de productos bsicos basados en productos
qumicos. La seleccin y el diseo adecuados del bioreactor determinarn el bioproceso
comercial ptimo y la inversin de capital correspondiente. El biorreactor no debe
considerarse como una unidad aislada, sino como parte de un funcionamiento unitario
integrado con operaciones unitarias tanto de aguas arriba (preparacin) como aguas
abajo (separaciones). CEP