LDL Colesterol

C monofase AA
Para la determinacin de LDL colesterol en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA en el rtulo. Cerrar el vial y dejar 5 minutos. Luego disolver el conte-
Las lipoprotenas plasmticas son partculas esfricas que nido del vial por agitacin suave evitando la formacin de espuma.
contienen cantidades variables de colesterol, triglicridos,
fosfolpidos y protenas. Estas partculas solubilizan y trans- PRECAUCIONES
portan el colesterol en el torrente sanguneo. - Los Reactivos son para uso diagnstico "in vitro".
La proporcin relativa de protena y lpido determina la - No pipetear con la boca.
densidad de estas lipoprotenas y provee las bases sobre - El Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y anticuer-
las cuales establecer una clasificacin. Estas clases son: po contra HIV 1/2, encontrndose no Reactivo. No obstante
quilomicrones, lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL debe procesarse como si se tratara de material infectivo.
- Very Low Density Lipoproteins), lipoprotenas de baja den- - Utilizar los Reactivos guardando las precauciones habitua-
sidad (LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoprotenas de les de trabajo en el laboratorio de qumica clnica.
alta densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos - Todos los Reactivos y las muestras deben descartarse de
estudios clnicos han demostrado que las diferentes clases acuerdo a la normativa local vigente.
de lipoprotenas tienen distintos y variados efectos en el
riesgo de enfermedad coronaria. Estos estudios sealan al ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
LDL colesterol como el factor clave en la patognesis de la ALMACENAMIENTO
ateroesclerosis y la enfermedad cardaca coronaria (ECC), Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC)
mientras que el HDL colesterol es considerado como factor hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
protectivo. Puede ocurrir un aumento en el LDL colesterol, Una vez abierto los Reactivos son estables durante 4 sema-
an con concentraciones normales de colesterol, asociado nas en refrigerador (2-10oC).
a un incremento en el riesgo de ECC. Calibrador: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
de vencimiento indicada en la caja. Una vez reconstituido
FUNDAMENTOS DEL METODO es estable 2 semanas en refrigerador (2-10 oC). Puede
El presente mtodo es un ensayo homogneo sin precipita- fraccionarse en alcuotas debiendo ser conservado a -80oC.
cin, en dos pasos. En el primero, se agrega un tensioactivo
(Reactivo A) que solubiliza las partculas lipoproteicas no- MUESTRA
LDL. El colesterol liberado es consumido por la colesterol es- Suero o plasma
terasa y la colesterol oxidasa en una reaccin sin desarrollo a) Recoleccin: obtener la muestra de la manera usual.
de color. Un segundo tensioactivo (Reactivo B) solubiliza las b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma
partculas de LDL formndose, por la presencia de enzimas y usar EDTA o heparina como anticoagulantes.
un Reactivo cromognico, un color proporcional a la cantidad c) Sustancias interferentes conocidas: no se encuentran
de LDL colesterol presente en la muestra. interferencias por cido ascrbico hasta 50 mg/dl, hemoglo-
bina hasta 500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl y -globulina
REACTIVOS PROVISTOS hasta 50 g/l. En caso de muestras con concentraciones
A. Reactivo A: solucin conteniendo colesterol esterasa superiores de interferentes, debern diluirse con solucin
1000 U/l, colesterol oxidasa 1200 U/l, peroxidasa 1250 U/l, fisiolgica antes de proceder a su ensayo, multiplicando el
ascorbato oxidasa 3000 U/l, 4-aminoantipirina 1 g/l y tensio- resultado obtenido por la dilucin efectuada.
activo 7 g/l en buffer MES 50 mM. Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de las
B. Reactivo B: solucin conteniendo N,N-bis-(4-sulfobutil)- drogas en el presente mtodo.
m-toluidina disdica (DSBmT) 0,4 g/l y tensioactivo 10 g/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
en buffer MES 50 mM. centrifugar y separar el suero del cogulo dentro de las 3
Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo lipopro- horas posteriores a la extraccin. De no procesar las mues-
tenas de diversos tipos incluyendo LDL. La concentracin tras inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas
es variable lote a lote (ver ttulo en el rtulo). durante 5 das en refrigerador (2-10oC).

INSTRUCCIONES PARA SU USO MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

Reactivos A y B: listos para usar. - Material volumtrico para medir los volmenes indicados.
Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada indicado - Analizador automtico.

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 Mtodo LDL Colesterol Referencia
PROCEDIMIENTO
monofase AA
(analizadores automticos)
A continuacin se detalla un procedimiento general N de muestras 54 54
para LDL Colesterol monofase AA en un analizador promedio (mg/dl) 122,5 125,1
automtico. Cuando se implemente la tcnica para desvo standard (mg/dl) 30,7 30,9
un analizador en particular seguir las instrucciones de coeficiente de correlacin: 0,96
trabajo del mismo.
Muestra o Calibrador 3 ul Mtodo LDL Colesterol Mtodo
monofase AA directo
Reactivo A 300 ul
N de muestras 92 92
Incubacin durante 5 minutos a 37oC. Lectura de absor- promedio (mg/dl) 120,0 122,8
bancia a 660/546 nm (Blanco de Muestra). desvo standard (mg/dl) 30,5 31,6
Reactivo B 100 ul coeficiente de correlacin: 0,97
Incubacin durante 5 minutos a 37oC. Lectura del resul-
b) Precisin: procesando simultneamente 20 muestras en
tado a 660/546 nm (concentracin de LDL-colesterol).
el mismo da se obtuvo la siguiente variacin intraensayo:
Nivel D.S. C.V.
CALIBRACION 98,1 mg/dl 0,72 mg/dl 0,73 %
El Calibrador debe procesarse junto con las muestras y en la 146,5 mg/dl 0,96 mg/dl 0,66 %
misma forma que stas. Las concentraciones del Calibrador 209,8 mg/dl 1,31 mg/dl 0,62 %
se encuentran alrededor de los niveles de decisin mdica
y son variables lote a lote (ver ttulo en el rtulo). Ingresar c) Lmite de deteccin: 0,278 mg/dl.
el valor de concentracin del calibrador cada vez que se
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
cambie de lote.
Para las instrucciones de programacin consulte el manual
del usuario del analizador en uso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
LDL colesterol (mmol/l) = LDL colesterol (mg/dl) x 0,02586
PRESENTACION
- 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), con Calibrador (Cd. 1220220)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cd. 1009283)
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cd. 1009348)
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
- 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), con Calibrador (Cd. 1009627)
de LDL colesterol, con cada determinacin.
BIBLIOGRAFIA
VALORES DE REFERENCIA
- Crouse, J.R. et al. - J- Lipid Res. 26: 566, 1985.
El panel de expertos del National Cholesterol Education
- Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
Program (NCEP) provee los siguientes valores de LDL 1951.
colesterol en relacin al riesgo de contraer enfermedad - William, P. Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
cardaca coronaria (ECC): - Kannel, W.B.; et al. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL - Bachorik, P.S.; et al. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
colesterol menores de 129 mg/dl. - Grundy, S.M. et al. - JAMA 269/23:3015, 1993.
- Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
de contraer ECC): valores entre 130 y 189 mg/dl. AACC Press, 4th ed., 2001.
- Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer - Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
ECC): valores de LDL colesterol 190 mg/dl. - Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
No obstante, es recomendable que cada laboratorio esta- JAMA 285/19:2486 (2001).
blezca sus propios valores de referencia.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.

PERFORMANCE
a) Exactitud: la exactitud del mtodo descripto se verific
por comparacin con los valores obtenidos por el mtodo
de referencia de ultracentrifugacin y anlisis del colesterol
y con el mtodo directo de inmunoseparacin de LDL.
Los resultados de la comparacin fueron los siguientes:

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Smbolos
Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnstico "in vitro"
M Elaborado por:

P
Xn

Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnstico "in vitro"

Corrosivo / Castico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Lmite de temperatura (conservar a)

No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Nmero de lote h Nmero de catlogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Wiener lab.
Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Tc.: Viviana E. Ctola
Bioqumica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. N: 3135/99 2000 Rosario - Argentina
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