RECUENTO

E. coli ISO 16649-1/2/3 Inoculacin

NMERO MAS PROBABLE Mediante una pipeta, transferir a placas petri

vacas y estriles 1 mL de la muestra (si es
Enriquecimiento lquida) o 1 mL de la dilucin inicial (10-1) en el
caso de otros productos.
Aadir 10 mL de la muestra (si es lquida) o 10 mL de Inocular dos placas por dilucin.
la suspensin inicial (en el caso de otros productos)
Aadir a cada placa petri, 15 mL (aprox.) de
A cada
d uno d de ttres ttubos
b con 10 mL
L de
d ddoble
bl medio TBX previamente enfriado en bao de
concentracin del Medio de Enriquecimiento Selectivo: agua a 42 47C

BO0541E Minerals Modified Glutamate. Concentracin CM0945 A TBX Agar (500g)

sencilla (Con tubo Durham) ( 24 x 10 mL). BO0194M TBX Agar (10 x 100 mL, en frascos
de 125 mL)
1,hojaVA25213.

BO0542E Minerals Modified Glutamate. Doble

concentracin (Con tubo Durham) ( 24 x 10 mL). Incubar las placas a 44C durante 18 24 h

Recuento
Inscritael31octubreede2012,enelRegistroMercantildeVallaadolid,tomo1429,folio218,inscripcin1

Adems:
Aadir 1 mL de la muestra (si es lquida) o 1 mL de la
suspensin inicial (en el caso de otros productos) a Contar las ufc de las colonias tpicas de E. coli -
cada uno de tres tubos con 10 mL de concentracin glucuronidasa positivas, en aquellas placas con <
sencilla del Medio de Enriquecimiento Selectivo de 150 colonias tpicas.

Adems: FILTRACIN CON MEMBRANA

De cada una de las dems diluciones 10-1, 10-2
Resucitacin
Aadir 1 mL de la muestra a cada uno de tres tubos
con 10 mL de concentracin sencilla del Medio de Colocar las membranas sobre la superficie de
Enriquecimiento Selectivo dos placas de MMGM base (CM0607G):
Incubar los tubos a 37C durante 24 h 2 h
CM0607G Minerals Modified Glutamate Medium
Base (500 g) + Sodium Glutamate (300 g)
Subcultivo
Aadir 1 mL de la suspensin inicial de la muestra
De cada tubo con coloracin amarilla (presencia de al centro de cada membrana y extender.
cido), subcultivar -con asa de siembra- en placas de Repetir este paso con las siguientes diluciones
TBX para obtener colonias individuales.
Dejar las placas a T ambiente durante 15 minutos
CM0945 A TBX Agar(500g) y despus incubar a 37C durante 4 1 h
PO5109A TBX Agar (20 placas)
Incubar las placas a 44C durante 20 24 h
Transferencia al medio selectivo
E
Examen d llas placas:
de l Mediante pinzas, transferir las membranas desde
el MMGM base a placas de TBX Agar
Buscar colonias con coloracin tipica azul (o azul- PO5109A TBX Agar (20 placas)
verdosa).
Incubar las placas a 44C durante 18 24 h
Considerar como positivos aquellos tubos de
concentracin doble, o sencilla que tras su incubacin y Contar las ufc de las colonias tpicas de E. coli -
resiembra producen colonias azules en las placas del glucuronidasa positivas, en aquellas placas con <
medio selectivo.
selectivo de 150 colonias tpicas.
tpicas

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21122012