Unam (BH)

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA
DE MXICO
FACULTAD DE CIENCIAS
IMPORTANCIA DE LA BIOMETRA HEMTICA
EN LA PRCTICA MDICA
REPORTE DE TRABAJO PROFESIONAL

QUE PARA OBTENER EL TTULO DE:
B I L O G A
P R E S E N T A :
ANABELLA QUINTANA NIETO
DIRECTOR DE TESIS: Q.F.B. DULCE MARIA ROBLES DENETRO
FACULTAD DE CIENCIAS
2008
UNAM
Hoja de Datos del Jurado
1. Datos del alumno
Quintana
Nieto
Anabella
56 31 62 27
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Facultad de Ciencias
Biologa
082383259
2. Datos del tutor
Q.F.B.
Dulce Mara
Robles
Denetro
3. Datos del sinodal 1
Dra.
Elvira
Estrada
Flores
Dra.
Patricia
Rivas
Manzano
Dra.
Rosario
Ortiz
Hernndez
M. en C.
Mara Sotera
Chvez
Jacal
7. Datos del trabajo escrito
Importancia de la Biometra Hemtica en la prctica mdica
88 pp.
2008
DEDICATORIAS
A TODAS LAS PERSONAS QUE ME HAN INSPIRADO A ALCANZAR MIS METAS:
FINALIZAR ESTE TRABAJO ME PRODUCE UNA GRAN SATISFACCIN EN MUCHOS

MBITOS, SIEMPRE CRE QUE ERA UN SUEO INALCANZABLE PERO NUNCA RENUNCIE
AL SUEO Y EN EL INTENTO DE REALIZARLO (A ESTAS ALTURAS DE MI VIDA) APRENDI
MUCHAS COSAS DE M, REDESCUBRI OTRAS QUE CRE QUE HABA PERDIDO Y RECOBRE
LA CONFIANZA EN M MISMA ME PUDE DAR CUENTA QUE:
PARA TODO HAY UN TIEMPO OPORTUNO (ECLESIASTES 3:1)
PUES EL SEOR ES QUIEN DA LA SABIDURA; LA CIENCIA Y EL CONOCIMIENTO BROTAN

DE SUS LABIOS (PROVERBIOS 2:6)
Y AHORA S
S QUE LAS VENTANAS SE PUEDEN

ABRIR,
CAMBIAR EL AIRE DEPENDE DE TI,
TE AYUDAR, VALE LA PENA UNA VEZ
MS.
SABER QUE SE PUEDE, QUERER QUE SE
PUEDA,
QUITARSE LOS MIEDOS, SACARLOS
AFUERA,
PINTARSE LA CARA COLOR ESPERANZA,
TENTAR AL FUTURO CON EL CORAZN.
ES MEJOR PERDERSE QUE NUNCA
EMBARCAR,
MEJOR TENTARSE A DEJAR DE INTENTAR,
AUNQUE YA VES QUE NO ES TAN FCIL
EMPEZAR,
S QUE LO IMPOSIBLE SE PUEDE
LOGRAR,
QUE LA TRISTEZA ALGN DA SE IR
Y AS SER, LA VIDA CAMBIA Y
CAMBIAR.
SENTIRAS QUE EL ALMA VUELA
POR CANTAR UNA VEZ MS.
VALE MS PODER BRILLARA QUE SLO
BUSCAR VER EL SOL.
DIEGO TORRES
DEDICATORIAS
A MIS PADRES
A LA MEMORIA DE VICTOR MANUEL QUINTANA S.
PAP LAMENTO MUCHO QUE NO HAYAS
DISFRUTADO DE ESTE XITO DEL QUE TU FORMASTE PARTE
FUNDAMENTAL, DONDE ESTS SE QUE ESTARS
ORGULLOSO DE TU LOGRO.
A CATALINA NIETO VALLES
MAM ERES UNA PERSONA EXCEPCIONAL, UNA GRAN AMIGA, LA MEJOR
TE ADMIRO MUCHO POR TU ENTUSIASMO, TU ALEGRA, TU ENORME FORTALEZA DE
SUPERACIN Y DE LUCHA Y ESE ENORME DON DE ESTAR SIEMPRE
DISPUESTA A DAR APOYO, TU EJEMPLO ME HA INSPIRADO EN TODA MI VIDA
MIL GRACIAS PORQUE LO QUE SOY TE LO DEBO A TI.
A MI HERMANO
NELSON EN TU APARTADO Y SOLITARIO MUNDO TIENES UN LUGAR MUY ESPECIAL
EN MI VIDA, TE ASEGURO QUE AUNQUE A VECES PAREZCA TODO LO CONTRARIO, MI
VIDA NO SERA IGUAL SI NO ESTUVIERAS AQU. MIL GRACIAS POR TU APOYO
PORQUE SIN HACER MUCHO RUIDO SE QUE SIEMPRE ESTAS AH, TENGO LA SEGURIDAD
QUE NUNCA ESTARE SOLA. TE QUIERO MUCHO.

DEDICATORIAS
A MIS PEQUEOS GRANDES TESOROS
LO NICO QUE DESEO ES SER UN BUEN EJEMPLO PARA USTEDES
SON UNA FUENTE DE INSPIRACIN Y UNA GRAN BEDICIN EN LA VIDA
GUILLERMO
MI QUERIDO GRILLO LA VIDA CONTIGO ES UN RETO CADA DA
QUE ESPERO AYUDARTE A LOGRAR SUPERAR PARA QUE SALGA EL VERDADERO
CHICO GRANDIOSO Y MARAVILLOSO QUE ERES. ADMIRO TU GRAN NOBLEZA
TE AMO
LEONARDO
MI GRAN LEON ESPERO QUE ESE CARCTER TAN FUERTE QUE TIENES
TE SIRVA PARA TU BIEN Y LLEGAR MUY LEJOS, ERES GENIAL ME ENCANTA
TU CHISPA Y TU MODO DE VER LA VIDA, ERES NICO Y MARAVILLOSO
TE AMO
A LA NICA, INIGUALABLE Y GIGANTESCA FAMILIA NIETO
A TODOS Y CADA UNO SIN EXCEPCIN ALGUNA, DESDE DON VENANCIO Y DOA
ZENAIDA HASTA EL LTIMO INTEGRANTE:
HAN SIDO UN PILAR MUY IMPORTANTE EN MI FORMACIN, SON UNO DE MIS GRANDES
ORGULLOS; OJAL MS GENTE TUVIERA LA FORTUNA DE CONTAR Y FORMAR PARTE DE
UNA FAMILIA TAN MARAVILLOSA. LOS QUIERO MUCHO.

DEDICATORIAS
HAY UNA PERSONA MUY ESPECIAL QUE MERECE UN RECONOCIMIENTO
MUY ESPECIAL QUE FUE QUIEN SUFRI, PADECI Y VIVI TODO EL
PROCESO HASTA HOY A TI QUE NO ME DEJASTE CLAUDICAR CUANDO EL
MIEDO ME PARALIZABA Y ME ALENTABAS Y ME ANIMABAS CADA DA
A MARCO ANTONIO DELGADO LOPEZ EL PIBE
EL GRAN AMOR Y MOTOR DE MI VIDA.
NUNCA DEJAR DE DAR GRACIAS POR LA ENORME OPORTUNIDAD DE
TENER JUNTO A M A LA PERSONA MS MARAVILLOSA QUE HE
CONOCIDO, ERES LO MEJOR QUE ME HA PASADO EN LA VIDA, DE MIS
MEJORES BENDICIONES ERES MI MEJOR AMIGO, COMPAERO Y SOCIO
EN UNA FORMIDABLE EMPRESA TE ADMIRO DE LA A a la Z.
GRACIAS POR TU PACIENCIA, TUS PALABRAS DE ALIENTO, TU APOYO
INCONDICIONAL ERES LO QUE SIEMPRE SO, LLENAS MI VIDA, SIN TI
MI MUNDO NO SERA LO QUE ES.
TE AMO.
AGRADECIMIENTOS
DOY GRACIAS A DIOS POR ESTA OPORTUNIDAD DE CONCLUIR UN CICLO EN MI VIDA,
POR TODAS LAS BENDICIONES QUE TENGO COMO MI FAMILIA, MI TRABAJO, MIS
AMISTADES Y MI VIDA.
A LA Q.F.B. DULCE MA. ROBLES D. JEFA, GRACIAS POR TU APOYO, TUS ENSEANZAS, TU
AMISTAD, POR BRINDARME UNA OPORTUNIDAD AUNQUE FUERA BIOLOGA Y POR
HABERTE INVOLUCRADO EN ESTA AVENTURA CONMIGO. TE ADMIRO MUCHO, CUANDO
CREZCA QUIERO SER COMO TU.
CON MI ADMIRACIN Y RESPETO AGRADEZCO A LA DRA. ELVIRA ESTADA F. POR HABER
ACEPTADO PARTICIPAR EN LA REVISIN DE ESTE TRABAJO. SI HUBIERAMOS MS
PERSONAS COMO ELLA, TAN COMPROMETIDA CON SU TRABAJO, CON SU DISPOSICIN Y
ENTREGA; ESTE PAS SERA OTRO.
A LA DRA. PATRICIA RIVAS M. POR HABERME DADO SU VOTO DE CONFIANZA Y FORMAR
PARTE DE ESTE PROYECTO.
A LA DRA. ROSARIO ORTIZ H. POR CONFIAR EN MI, ACEPATAR REVISAR MI TRABAJO Y
POR SUS ATINADOS COMENTARIOS.
A LA M. en C. MARA S. CHVEZ J. (MARY) POR TODO LO QUE HAS APORTADO EN MI
VIDA, POR TU CORAZN SIEMPRE DISPUESTO Y POR COMPARTIR CONMIGO TUS DONES
TAN ESPECIALES Y LA REALIZACIN DE ESTE PROYECTO.
A LA UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MXICO PORQUE SER UNIVERSITARIA
FUE LO MEJOR QUE ME PUDO PASAR EN LA VIDA, PORQUE ME MARCO Y ME DIO
EXPERIENCIAS, OPRTUNIDADES Y AMISTADES IRREPETIBLES.
A LA FACULTAD DE CIENCIAS Y TODOS SUS PROFESORES POR LA FORMACIN QUE ME
DIERON, CAMBIARON MI MODO DE PENSAR Y DE VER LA VIDA.

AGRADECIMIENTOS
AL INSTITUTO NACIONAL DE CANCEROLOGA POR LA OPORTUNIDAD QUE ME BRINDO Y
HABERLE DADO UN GIRO A MI VIDA DE 360.
A TODAS LAS PERSONAS QUE VOLUNTARIA E INVOLUNTARIAMENTE SE INVOLUCRARON
EN ESTE PROYECTO.
A MIS AMIGAS DEL INCAN A LA BIOLOGA (GUADALUPE CERVANTES) LUPITA MIL
GRACIAS POR ESTAR SIEMPRE AH, A (MARIA EUGENIA RUIZ DEL VALLE), MARUCA POR
TU AYUDA INCONDICIONAL, A LA BIOLOGA (BLANCA E. SANTINELLI), BLANQUITA MIL
GRACIAS POR TU APOYO, POR LA OPORTUNIDAD QUE ME BRINDASTE, POR LAS
APORTACIONES Y LA REVISIN A ESTE PROYECTO, A LA DRA. (LAURA PEREZ) LAURITA
MUCHAS GRACIAS POR TU APOYO Y AMISTAD Y MUY EN ESPECIAL A LA Q.F.B. (MIRIAM
VILLANUEVA) MIRI MUCHAS GRACIAS POR HABERME DADO UNA OPORTUNIDAD Y HABER
CREIDO EN M, A PESAR DE SER BIOLOGA, POR TU AMISTAD Y TU GRAN APOYO SIEMPRE,
A LA GENIAL Y DRAMTICA CHELITA (GRACIELA MANZANO) SIN TUS DRAMAS Y TUS
PORRAS NO SERA LO MISMO Y A DON TOO (DR. ANTONIO LPEZ) POR SU TIEMPO Y
COOPERACIN.
PARA MIS AMIGAS DE SIEMPRE POR SU COMPAA Y SU AGUANTE DESPUES DE TANTOS
AOS
A NINEL GARCA T. NINELA POR TODAS NUESTRAS VIVENCIAS Y LARGAS PLATICAS POR
TU PACIENCIA CON MIS ARRANQUES Y POR ACEPTARME COMO SOY, AUNQUE LAS
CIRCUNSTANCIAS DE LA VIDA NOS HAYA PUESTO UNA PRUEBA QUE ESPERO PRONTO
SUPEREMOS (NO SABES CUANTA FALTA ME HICISTE). CON UNA MENCIN MUY
ESPECIAL Y COMO UN PEQUEO HOMENAJE A ESOS 25 SI, VEINTICINCO AOS JUNTAS
A XOCHITL OTRA DE MIS BENDICIONES, PORQUE OCUPAS UN LUGAR MUY ESPECIAL EN
MI VIDA, ERES UNA PERSONA MARAVILLOSA, POR TODO LO QUE HEMOS VIVIDO Y
APRENDIDO ERES UN ALICIENTE PARA MI Y UN GRAN EJEMPLO DE SUPERACIN, TE
QUIERO.
AGRADECIMIENTOS
A TODOS LOS QUE APORTARON UN GRANITO DE ARENA EN ESTE PROYECTO, PARA MI
FUE COMO UNA TONELADA; (ELENA GARCA) ELENITA TU EXPERIENCIA FUE BSICA Y
TU AMISTAD MS, AIDE (ADE CCERES) GRACIAS POR TU APOYO INCONDICIONAL, TU
TIEMPO, SUGERENCIAS Y PORRAS. A ROSY (ROSALA VILLA) GRACIAS POR SER TAN
ACCESIBLE, COMPARTIDA Y ATENDERME CADA QUE LO NECESIT,
A TODOS MI AGRADECIMIENTO ETERNO

BIBLIOGRAFA
6. BIBLIOGRAFA
A. Malagn y Martinez B. 2005. Hemovigilancia en Hematologa actualizacin. 2 Edicin
Abbott D. 2002. Atlas de Hematologa. Abbott Diagnsticos
Almaguer G.C. 2003. Interpretacin clnica de la Biometra Hemtica. Medicina Universitaria.

5(18):35-40
Barrera F.J.L. y Mohar B.A. 2005. Manual de Procedimientos mdicos del Instituto Nacional
de Cancerologa
Chvez, J.M.S. 2006. Determinacin de la induccin de aberraciones cromosmicas por el

factor estimulante de colonias de Granulocitos (G-CSF) sobre linfocitos T y clulas
progenitoras hematopoyticas (CPH) de donadores. Tesis de Maestra Facultad de Ciencias,
UNAM. Mxico. 56 pp.
Difiore, M. 1986. Diagnstico Histolgico. 9 Edicin.El Ateneo
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Fischbach F. T. 1997. Manual de Pruebas Diagnosticas. 5 Edicin. McGraw Hill

Interamericana
Geneser F. 2000. Histologa. 3 Edicin. Panamericana
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L. Florensa, M.T. y S. Woessner. 1995. Hematopoyesis. Morfologa de los elementos formes

de la sangre y rganos hematopoyeticos en Hematologa Clnica. Hearcourt
86
BIBLIOGRAFA
Lesson S. T. 1990 Textlo/ Atlas de Histologa. McGraw Hill Interamericana
Lpez T.A. y M. Saucedo. 2001. La licenciatura de Biologa en la ENEP Iztacala de la

UNAM.
Manual de Procedimientos del Sistema Colulter Gen-s. 2002. Beckman Coulter
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Marini J. J. 2006. CRITICAL CARE MEDICINE The Essentials. 3a Edicin. Lippincott

Williams y Wilkins
Mckenzie B. S. 2000. Hematologa Clnica. 2 Edicin. Ed. Manual Moderno
Memorias 1946-2006 Instituto Nacional de Cancerologa
Memorias 1982-1992 Instituto Nacional de Cancerologa
Rapaport I. S. 2002. Introduccin a la Hematologa. 2 Edicin. MDM Mxico
Rodak F. B. 2005 Hematologa Fundamentos y Aplicaciones Clnicas. 2a Edicin.

Panamericana
Ross M.; Kaye G.; y Paulina W. 2004. Histologa Texto y Atlas Color con Biologa Celular y
Molecular. 4a Edicin
Ross M; Romrell L.y Kaye G. 1999. Histologa Texto y Atlas. Color 3a Edicin Panamericana
Vives L. 1995. Introduccin al estudio de la patologa eritrocitaria. Bases bioqumicas y

fisiolgicas en Hematologa Clnica. Hearcourt
87
BIBLIOGRAFA
WEB BLIOGRAFA
http://www.beckmancoulter.com
http://www.citometriadeflujo.com
88
NDICE
NDICE
PERFIL Y ESTRUCTURA DE LA INSTITUCIN. 13
JUSTIFICACIN. 17
1.- INTRODUCCIN. 18
1.1 BIOMETRA HEMTICA 21
1.2 LEUCOCITOS 22
1.3 ERITROCITOS.. 38
1.4 PLAQUETAS.. 50
2.- DESARROLLO EN EL REA DE TRABAJO.. 54

2.1 RECOLECCIN DE LA MUESTRA 54
2.2 MANTENIMIENTO Y CONTROL DE CALIDAD 58
2.3 PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO. 63
3.- RESULTADOS 74
3.1 VALORES CRTICOS. 77
4.- EVALUACIN.. 78
4.1 LA BIOLOGA EN LA ACTUALIDAD 78
4.2 APLICACIN DE LA BIOLOGA 80
5.- CONCLUSIONES.. 82
6.- BIBLIOGRAFA 86
PERFIL DE LA INSTITUCIN Y ESTRUCTURA
PERFIL DE LA INSTITUCIN Y ESTRUCTURA.
En 1946 el Presidente de la Repblica General Manuel vila Camacho, cre por decreto
Presidencial el Instituto Nacional de Cancerologa, con los objetivos de impartir atencin
mdica a enfermos cancerosos preferentemente a los de bajos recursos econmicos
brindndoles tratamiento, ayuda social, reeducacin y rehabilitacin; realizar investigaciones
clnica y experimental de cncer; impartir enseanza y hacer difusin del conocimiento
oncolgico.
El Instituto Nacional de Cancerologa (INCan) de Mxico es un organismo descentralizado

de tercer nivel dependiente de la Secretaria de Salud.
Es una Institucin rectora en el diagnstico y tratamiento de neoplasias malignas.
Su actividad asistencial consiste en atender pacientes no derechohabientes de la seguridad
social, provenientes de todo el pas con estndares de la ms alta eficiencia, calidad y calidez
con enfoque multidisciplinario en proceso diagnstico, tratamiento, rehabilitacin y
seguimiento; hacer estudios protocolizados y formar onclogos altamente calificados, que al
concluir su formacin desarrollen su prctica clnica en Mxico o en su pas de origen
fundamentalmente en Latinoamrica (Memorias INCan, 2006).
METAS
Ser un centro de excelencia en Investigacin, Docencia y Asistencia Mdica en Oncologa.
Su finalidad es ser un centro de excelencia en cncer con reconocimiento Internacional
OBJETIVOS
Estas actividades establecern las mejores prcticas en prevencin, diagnstico y tratamiento
del cncer en Mxico.
Atender a todos los pacientes con la mxima calidad, dignidad y tica.
13
MISIN
Ser un centro de excelencia en Investigacin, Docencia y Asistencia Mdica en Oncologa.

Nuestra prioridad es atender a todos nuestros pacientes con la mxima calidad, dignidad y
tica. Estas actividades establecern las mejores prcticas en prevencin, diagnstico y
tratamiento del cncer en Mxico.
VISIN
Ser un centro de Excelencia en cncer con reconocimiento Internacional
Para realizar sus trabajos, objetivos e investigaciones el Instituto cuenta con diferentes comits
que le permiten evaluar, ejecutar y finalizar sus metas como por ejemplo: un Comit
Cientfico de Investigacin, el cual proporciona asesora a los titulares o responsables del
Instituto en la decisin de autorizar el desarrollo de Investigaciones.
Auxilia a los investigadores en la planeacin, presentacin y ejecucin de sus

proyectos.
Evala la calidad tcnica y el mrito cientfico de la investigacin propuesta,

formulando la opinin correspondiente.
Solicita a los investigadores principales la informacin adicional que se juzgue

necesaria, para emitir el dictamen sobre la investigacin propuesta.
Propone al investigador principal modificaciones y adiciones al proyecto o a los

informes de investigacin, cuando sea necesario.
Evala el Curriculum Vitae del investigador principal responsable de la conduccin del

estudio.
14
Evala los informes tcnicos elaborados por los investigadores al trmino de la

ejecucin de la investigacin.

Apoya a otras instituciones que se vean imposibilitadas para integrar sus propias
comisiones, en la evaluacin de sus proyectos de investigacin.
Todo el personal ser el ms capacitado, motivado, comprometido y reconocido.
ESTRUCTURA ORGNICA
La Direccin del Instituto esta a cargo del Doctor Alejandro Mohar Betancourt, esta direccin
tiene a su cargo cuatro direcciones que son: la Direccin de Administracin, Direccin de
Docencia, Direccin de Investigacin y Direccin General Adjunta Mdica que a su vez tiene
a su cargo cuatro subdirecciones mdicas: Subdireccin de Medicina Interna, Subdireccin de
Ciruga, Subdireccin de Radioterapia y la Subdireccin de Servicios Auxiliares de
Diagnstico y Tratamiento (FIGURA 1).
En la Subdireccin de Servicios Auxiliares de Diagnstico y Tratamiento se encuentran

albergadas las reas de Medicina Nuclear, Tomografa axial computarizada, Radiodiagnstico
(Rayos X), Ultrasonografa, Banco de Sangre y Laboratorio Clnico que a su vez cuenta con
las reas de Marcadores Tumorales, Qumica Sangunea, Citogentica, Citometra de flujo,
Bacteriologa (parasitologa y urianlisis) y Hematologa.
15
DIRECCIN MDICA
Direccin general
Adjunta Mdica
Direccin Direccin Direccin rgano
de de de Interno de
Investigacin Docencia Administracin Control
Subdireccin Subdireccin Subdireccin

Subdireccin
de Patologa Subdireccin
de Medicina de de Admn. Y
Direccin
de
Educacin Desarrollo
Interna Investigacin
de Docencia
Mdica Personal
Bsica
Subdireccin re
Subdireccin Subdireccin Subdireccin
de Servicios de contabilidad y
de Ciruga
Paramdicos Investigacin Finanzas
Clnica
Subdireccin
de Recursos y
Materiales
Subdireccin Subdireccin
de Atencin
Radioterapia Hospitalaria
y Consulta
Externa Subdireccin
de Servicios
Generales
Subdireccin
de Servicios
Auxiliares de
Diagnostico Subdireccin
y de
Tratamiento Planeacin
FIGURA 1.- ESTRUCTURA ORGNICA DEL INSTITUTO NACIONAL DE CANCEROLOGA
16
JUSTIFICACIN
JUSTIFICACIN
El presente informe profesional se elabora para obtener el grado de Licenciatura en Biologa, y

deriva de la prestacin de servicios como encargada del rea de Hematologa en el turno
especial de Sbados, Domingos y Das Festivos en el Laboratorio Clnico de la Subdireccin
de Servicios Auxiliares de Diagnstico y Tratamiento, adscrita a la Direccin General Adjunta
Mdica del Instituto Nacional de Cancerologa de la Secretara de Salud.
17
INTRODUCCIN
1. INTRODUCCIN
El INCan cuenta con un Laboratorio de Anlisis Clnicos donde se realizan una variedad de
pruebas diagnsticas, esta formado por diversas reas entre las que se encuentra Hematologa,
donde son analizadas las biometras hemticas que determinan el nmero, variedad,
porcentaje, concentracin y calidad de las clulas sanguneas (Fischbach, 1997).
Se considera a la sangre como esencia de la vida, esto debido al papel fundamental que
desempea en las funciones vitales del organismo. La sangre se puede considerar un tejido
conectivo fluido, dado que esta constituido por clulas y una sustancia intercelular liquida,
el plasma sanguneo. La sangre fresca es un liquido viscoso rojo que tras un corto perodo de
reposo coagula por lo que adquiere una consistencia gelatinosa (Fischbach, 1997; Mckenzie,
2000; Geneser, 2000).
Un adulto normal tiene alrededor de cinco o seis litros de este lquido vital, el cual representa
de 7-8 % del peso corporal total. El suero constituye casi 55 % del volumen sanguneo,
mientras que 45 % esta compuesto de eritrocitos y 1 % se forma de leucocitos y plaquetas.
Con frecuencia, las variaciones en estos elementos sanguneos son el primer signo de
enfermedad que se presenta en tejidos corporales. Los cambios en el tejido enfermo logran
detectarse de manera frecuente mediante anlisis de laboratorio que identifican las alteraciones
sobre la base de valores normales en los diversos constituyentes de la sangre (Fischbach,
1997; Mckenzie, 2000; Geneser, 2000).
La sangre circula por todo el organismo por los vasos sanguneos por la actividad de bomba
del corazn y llega a todos los tejidos (Geneser, 2000). Cumple varias funciones, entre ellas :
transportar nutrientes y oxigeno a las clulas en forma directa o indirecta; transporta productos
de desecho y dixido de carbono desde las clulas; transporta hormonas y algunos agentes
reguladores; cumple una funcin homeosttica importante por su capacidad termorreguladora
y transporta agentes y clulas humorales que protegen al organismo de infecciones, las clulas
y protenas extraas y las transformadas, por ejemplo, las clulas cancerosas (Rosset al, 1999;
Ross et al, 2004).
18
INTRODUCCIN
ELEMENTOS FIGURADOS DE LA SANGRE
Las clulas eritrocitos, leucocitos y plaquetas se denominan en conjunto elementos figurados

de la sangre (Geneser, 2000). Cada uno de los tres elementos tiene funciones especficas. Los
eritrocitos clula sangunea roja es una de las clulas ms especializada del cuerpo que
contiene y transporta una protena vital, la hemoglobina. La hemoglobina se encarga del
transporte de oxgeno y bixido de carbono entre los pulmones y los tejidos corporales. Los
leucocitos (de los cuales existen 5 tipos) defienden al organismo contra antgenos extraos
como bacterias y virus. Intervienen en procesos inflamatorios y en el desarrollo de la respuesta
inmune (Mckenzie, 2000; Rodak, 2005). Las plaquetas son necesarias para mantener la
hemostasia.
En consecuencia la hematologa es el estudio de estos elementos figurados (Mckenzie, 2000).

Las diferencias fisiolgicas en la concentracin de los elementos figurados estn relacionadas
con raza, edad, sexo y ubicacin geogrfica; los cambios patolgicos en las concentraciones
de clulas sanguneas especficas son debido a enfermedades lesiones. Los rangos de
referencia de los valores hematolgicos deben identificarse en laboratorios individuales para
determinar diferencias fisiolgicas de grupos de individuos en un rea geogrfica especfica.
Los valores de referencia se determinan por clculos estadsticos paramtricos y no
paramtricos con lo cual se representa la media y la desviacin aceptables para personas sanas
de esa rea especfica. Este rango estadstico representa un valor normal para una
confiabilidad del 95 % de los individuos normales (Fischbach, 1997; Mckenzie, 2000).
Con el arribo del primer contador automtico simple de clulas sanguneas se sustituyeron los
conteos manuales de las clulas sanguneas en el hematocitmetro para eritrocitos y
leucocitos. En general, los contadores automatizados de clulas sanguneas proporcionan datos
con mayor precisin y exactitud que los mtodos manuales.
Con los mltiples avances de la instrumentacin en hematologa, la automatizacin cubre

actualmente las principales pruebas en el laboratorio de hematologa. En los casos tpicos estos
analizadores proporcionan los ocho parmetros hemticos estndar (hemograma completo
HC) ms un recuento diferencial de leucocitos de cinco componentes en menos de 1 minuto en
100 L de sangre entera (sin centrifugar y anticoagulada).
19
INTRODUCCIN
La automatizacin, es el uso de aparatos electrnicos automatizados, los cuales son usados

dentro del laboratorio de hematologa. Para estudiar las caractersticas de las clulas
hematopoyticas neoplsicas se desarrollaron modalidades diagnsticas auxiliares, como la
citometra de flujo con el objeto de clasificar de manera reproducible, diagnosticar y tratar
estos trastornos.
Un citmetro de flujo es un instrumento automatizado asistido por computadora que determina

las caractersticas fsicas de cada clula con una fuente de luz lser (Mckenzie, 2000; Rodak,
2005). La citometra de flujo (CMF) es una tcnica de anlisis celular multiparamtrico cuyo
fundamento se basa en hacer pasar una suspensin de partculas (generalmente clulas)
alineadas de una en una por delante de un haz de lser focalizado. El impacto de cada clula
con el rayo de luz produce seales que corresponden a diferentes parmetros de la clula y que
son recogidos por distintos detectores. Estos convierten dichas seales en seales electrnicas
que posteriormente sern digitalizadas para permitir la medida simultnea de varios
parmetros en una misma clula, estos son parmetros relacionados con caractersticas
intrnsecas de la clula, como su tamao y la complejidad del ncleo y citoplasma.
Por lo tanto la CMF es capaz de identificar una clula por medio de sus caractersticas
morfolgicas de tamao y complejidad (www.citometradeflujo.com).
El fundamento de la automatizacin en hematologa consta de los dos principios del conteo de

las clulas sanguneas, que son la impedancia y la dispersin ptica.
El principio de la impedancia en el conteo de las clulas sanguneas, se basa en el aumento de

la resistencia producida cuando una clula sangunea con baja conductividad pasa a travs de
un campo elctrico. El nmero de intermitencias indica la cifra de clulas sanguneas, y la
amplitud de cada intermitencia es proporcional al volumen de la clula.
El principio de la dispersin ptica de la luz en el conteo de las clulas sanguneas se basa en

las mediciones de la dispersin de la luz obtenidas de una sola clula sangunea que pasa a
travs de un haz de luz (lser). Las clulas sanguneas crean una dispersin hacia delante y una
lateral las cuales se detectan mediante fotodetectores (Mckenzie, 2000).
20
INTRODUCCIN
1.1 BIOMETRA HEMTICA
La palabra clula fue utilizada por primea vez por Roberto Hooke, mdico y bilogo del siglo
XVII. El trmino clula, por lo menos en cuanto se refera a tejido animal, se us
exclusivamente para los pequeos cuerpos gelatinosos (lat. cella, celda pequea, habitacin o
cmara). Con el tiempo se comprob que cada cuerpo gelatinoso contena una estructura
generalmente redondeada, con ndice de refraccin algo diferente del resto de la clula; y
recibi el nombre de ncleo ms tarde se comprob que contena un cuerpo menor,
relativamente denso, que se llam nuclolo; el resto de la clula se denomin citoplasma
(Ham, 1988; Geneser, 2000).
Cabe sealar que en el campo de la biologa general pueden reconocerse dos tipos de clulas:
las procariticas que son clulas que no poseen ncleo y las eucariticas, clulas con ncleo
(eu= bueno, carion= ncleo) lo que indica que este tipo de clulas posee material nuclear
rodeado por una cubierta nuclear. Las clulas eucariticas, son aquellas de las cuales estn
compuestos todos los animales, plantas y microorganismos, exceptuando bacterias y algas
verdes (Geneser, 2000).
El anlisis de clulas sanguneas humanas data desde hace 330 aos, cuando Leewenhoek
realiz la primera descripcin de clulas rojas usando un microscopio simple con un lente
biconvexo y fue capaz de medir su dimetro.
Wallace Coulter en 1956 desarrollo el primer analizador automatizado para el conteo y

medicin de clulas. Los analizadores de multiparmetros para el conteo de clulas sanguneas
fueron desarrollados durante los aos 60s, y durante los aos 70s las tecnologas para el
conteo diferencial de clulas blancas. A travs de los aos la capacidad y ejecucin de los
analizadores automatizados han mejorado (Beckman Coulter, 2001; Rodak, 2005).
Las cargas de trabajo han incrementado la necesidad de reducir el nmero de procedimientos

manuales sin sacrificar la calidad de los resultados. El estudio de la biometra hemtica o
citometra hemtica (citos = clula; metros = medida; haema = sangre) es uno de los estudios
ms solicitado en el Laboratorio Clnico (Almaguer, 2003).
21
INTRODUCCIN
1.2 LEUCOCITOS
La serie blanca de la sangre se denominan leucocitos o glbulos blancos (leucos = blanco),

aun cuando los recin obtenidos son incoloros; cuando estn agrupados se ven de color blanco
(Ham, 1988). Son clulas eucariticas en sentido estricto dado que contienen ncleo y son
clulas sanguneas en el sentido que usan la sangre como medio de transporte y solo se
encuentran en ella de forma transitoria. Es decir, utilizan la sangre como vehculo para su
transporte hacia sitios especficos dentro del organismo (Ham, 1988; Ross et al 1999; Geneser,
2000). Su principal funcin es luchar contra infecciones y defender al organismo a travs de
un proceso de fagocitosis, en el que el glbulo blanco encapsula a los microorganismos
extraos. Adems producen, transportan y distribuyen anticuerpos como parte de la respuesta
inmunolgica (Hamm, 1988; Fischbach, 1997; Ross et al, 1999; Mckenzie, 2000; Geneser,
2000; Ross et al, 2004 y Rodak 2005)
La vida media de los leucocitos vara de 13 - 20 das despus de los cuales son destruidos en el
sistema linftico; muchos de ellos son excretados a travs de la materia fecal (Fischbach,
1997).
En la sangre circulante, la cantidad de leucocitos es alrededor de 5- 10 000 por L (Geneser,

2000).
Los glbulos blancos o leucocitos se dividen en dos grupos principalmente: granuloctos los
que tienen grnulos visibles y se desarrollan slo en la mdula sea. Se subdividen de acuerdo
con su morfologa y pueden clasificarse en los que contienen grnulos especficos y se
visualizan con facilidad, y agranulocitos que contienen grnulos inespecficos, los de
citoplasma no granuloso (Ham, 1988; Fischbach, 1997; Ross et al, 1999; Mckenzie, 2000;
Geneser, 2000; Ross et al, 2004 y Rodak 2005).
Existen tres clases de leucocitos granulosos, llamados as porque se distinguen por el tamao y
en particular por las caractersticas tintoriales de sus grnulos citoplasmticos; los acidfilos
(con afinidad al cido) son los que tienen grnulos y se tien con avidez o afinidad a
colorantes cidos dando a los grnulos citoplasmticos un color naranja rosa como la eosina,
que es el colorante que suele utilizarse para darles color y suelen llamarse eosinfilos.
22
INTRODUCCIN
Los que tienen grnulos y se tien con avidez a colorantes bsicos (afinidad a la base) son
afines a la parte bsica del colorante, tiendo los grnulos citoplasmticos de color negro
azuloso y se denominan basfilos.
Los que tienen grnulos que no son muy acidfilos ni tampoco muy basfilos en soluciones de
pH normal dan a la clula un citoplasma de color azul rosado se denominan neutrfilos. (Ham,
1988).
Todas estas clulas cuentan con un ncleo segmentado por lo que tambin se llaman
leucocitos polimorfonucleares (PMN), pero en la actualidad se prefiere segmentados (Geneser,
2000).
Existen dos clases de leucocitos no granulosos, los ms y por lo comn ms pequeos se

denominan linfocitos, los monocitos son clulas ms grandes y menos numerosos que
contienen un ncleo grande, nico, en forma de herradura.
Para el estudio de un frotis sanguneo debe tomarse en cuenta que hay unos 1000 eritrocitos
por cada leucocito en la sangre normal, pero es fcil distinguirlos por que los leucocitos en
contraste con los eritrocitos tienen ncleos (Ham, 1988).
HEMATOPOYESIS
La gran mayora de los tejidos del cuerpo mantienen su estructura y funcin a travs de la vida
del individuo por la produccin de clulas dentro de cada tejido, reemplazando a aquellas que
se pierden por dao o envejecimiento. Uno de los procesos ms complejos para la formacin
de clulas es la que se lleva a cabo en la mdula sea (MO) mediante el proceso de
hematopoyesis (Chvez, 2006).
23
INTRODUCCIN
La hematopoyesis (hemat=sangre; poyesis=formacin) es el termino utilizado par describir el

mecanismo fisiolgico responsable de generar todas las clulas sanguneas a partir de una
clula madre hemopoytica pluripotente y se define como una clula capaz de dar origen a
cualquiera de la clulas sanguneas y de mantener su propia existencia por divisiones mitticas
(Geneser, 2000). Lo cual mantiene a los elementos figurados dentro de los lmites de la
normalidad en la sangre perifrica. Comprende la formacin, el desarrollo y la especializacin
de todas las clulas sanguneas funcionales.
La diferenciacin, proliferacin y maduracin de dichas clulas se lleva a cabo en el tejido

hematopoytico, el cual se encuentra principalmente en la mdula sea. Slo las clulas
maduras son liberadas hacia la sangre perifrica.
La hematopoyesis comienza en la pared del saco vitelino del embrin humano donde aparecen
en el mesnquima pequeas agrupaciones de clulas hematopoyticas, denominadas islotes
sanguneos desde el decimonoveno da despus de la fertilizacin, los sitios de la
hematopoyesis cambian varias veces desde el embrin, feto hasta adulto (Mckenzie, 2000;
Geneser, 2000; Roos et al, 2004; Rodak, 2005).
El sistema hematopoytico incluye tejidos y rganos involucrados en la proliferacin,

maduracin y destruccin de las clulas sanguneas. Organos y tejidos tales como bazo,
ganglios linfticos, timo, hgado y mdula sea (Mckenzie, 2000).
En general, las clulas tronco pluripotenciales (stem cells) se diferencian por accin de una red
compleja de factores de crecimiento hematopoyticos (Chvez, 2006; Florensa, 1995). Cada
lnea celular tiene su propia capacidad de desarrollo as tenemos la granulopoyesis,
linfopoyesis, eritropoyesis y la megacariopoyesis (CUADRO 1).
24
INTRODUCCIN
CUADRO 1.- DIFERENCIACIN DE CLULAS SANGUNEAS A PARTIR DE UNA CLULA

PROGENITORA PLURIPOTENCIAL. LA CLULA PROGENITORA PLURIPOTENCIAL Y LA
UNIDAD FORMADORA DE COLONIAS DE GRANULOCITOS. ERITROCITOS, MACRFAGOS Y
MEGACARIOCITOS (UFC-GEMM) TIENEN EL POTENCIAL PARA DIFERENCIARSE EN
CUALQUIERA DE VARIOS TIPOS CELULARES, POR TANTO SE LES DENOMINA CLULAS
PROGENITORAS MULTIPOTENCIALES De Mckenzie B. S. 2000 Hematologa Clnica
LEUCOPOYESIS
El precursor leucopoytico se denomina unidad formadora de colonia-bazo (CFU-S) o clula

troncal pluripotencial (PSC). Para la granulopoyesis, la PSC sufre estimulacin, mitosis y
maduracin hacia una clula troncal, que es especfica para clulas provenientes de la mdula
sea o mieloideas. Esta unidad formadora de colonias granulocito-eritrocito-monocito y
macrofago-megacariocito (CFU-GEMM) madura hacia otra clula troncal denominada unidad
formadora de colonia granulocito-monocito y macrofago (CFU-GM).
25
INTRODUCCIN
sta por ltimo madura y se convierte en la primera clula reconocible de la serie neutrfila el
mieloblasto (Geneser, 2000; Rodak, 2005). La cantidad de clulas y de sus funciones
permanece constante gracias al control ejercido por factores humorales como las interleucinas
(IL) que interactan con factores estimulantes de colonias (CFS). Los CFS se clasifican de
acuerdo con el tipo de clula estimulada. Por ejemplo, el GM-CSF estimula las clulas para
formar granulocitos y monocitos y macrfagos, mientras que el G-CSF estimula solo el
desarrollo de monocitos y macrfagos. La especificidad para los CSF es mediada por sitios
receptores en los precursores as como en clulas maduras para la diferenciacin en su funcin
(Rodak, 2005).
Las etapas del desarrollo de los granulocitos (granulopoyesis o leucopoyesis) en orden de

diferenciacin son de la siguiente manera: (Lesson, 1990; Ross et al, 1999; Mckenzie, 2000;
Geneser, 2000 Ross et al, 2004 y Rodak, 2005).
Mieloblastos Clulas inmaduras que normalmente se encuentran en la mdula sea;

por lo general son grandes (15-20 m); su ncleo suele ser redondo u oval y contiene
cromatina fina como encaje. Tiene de 3 a 5 nuclolos muy desarrollados, citoplasma es
basfilo, con una cantidad que va de reducida a moderada, no posee grnulos y se tie
de color azul oscuro. En leucemias mieloides las cifras estn aumentadas.
Promielocitos Se reconoce por la presencia de grnulos primarios llamados grnulos

azurofilos que son de color negro-azul; en esta etapa se aprecian varios nuclolos,
puede exceder las 20 m.
Mielocitos Cuando la clula deja de producir grnulos azurfilos primarios, aparecen

grnulos secundarios o neutrfilos. El citoplasma se vuelve acidfilo. El ncleo es de
tamao reducido, redondo u oval con frecuencia excntrico; la cromatina nuclear
aparece ms condensada y los nuclolos por lo general ya no son visibles.
26
INTRODUCCIN
Metamielocitos Su caracterstica diferencial ms aparente es el aspecto arrionado del

ncleo, no hay nuclolos visibles.
Banda neutrfila (forma no segmentada) La definicin y el nombre de esta forma

intermedia fueron objeto de controversia. En un sistema de clasificacin, su distincin
se basa en la presencia o ausencia de segmentos nucleares formados por
hemocromatina densa. Otra clasificacin requiere que la forma externa del ncleo
presenta un ancho uniforme o paralelo en forma de C o S como base, e identifica la
clula cuyo ncleo tambin se describe como una banda y las clulas con las otras
formas nucleares como PMN. El metamielocito se convierte en una banda cuando la
escotadura del ncleo es ms grande que la mitad del dimetro del ncleo redondo
hipottico. Esta hendidura da al ncleo un aspecto de herradura para los neutrfilos.
Neutrfilo segmentado Es conocido como polimorfonuclear (PMN) como su nombre

lo indica, en el ncleo celular la muesca es cada vez mayor, hasta que algunos
filamentos delgados de membrana y heterocromatina forman segmentos y crean un
ncleo lobulado o segmentado con dos o ms lbulos conectados por un filamento
nuclear delgado. Hay que entender que cuando se hace referencia a PMN se puede
pensar que son varios ncleos por lo cual hay que hacer hincapi que son segmentos,
son clulas en donde aparecen entre dos y cuatro lbulos nucleares, su citoplasma
posee muchos grnulos primarios (Makenzie, 2000; Abbott, 2002; Rodak, 2005).
NEUTRFILOS
Son el tipo de leucocitos ms numerosos en la sangre perifrica del adulto, constituyen del 60
- 70 % de los leucocitos, en nmeros absolutos se consideran normales de 3000 - 6000 por L
(Ham, 1988).
Son redondeados de tamao entre 12 y 14 m, su ncleo es nico y se encuentra segmentado

en 2-5 lbulos unidos por puentes cromatnicos delgados. El citoplasma tiene numerosas
granulaciones secundarias y contiene tres tipos de grnulos: los grnulos especficos, los
grnulos azufilos y grnulos terciarios los tres reflejan las funciones de la clula.
27
INTRODUCCIN
Los grnulos especficos son pequeos y muy abundantes. Contienen agentes bacteriostticos
y bactericidas como la lisozima, adems de diversas enzimas (colagenasa tipo IV, fosfolipasa),
as como activadores del complemento. Los grnulos azurfilos son ms grandes (0.5 m) y
menos numerosos. Contienen un centro denso y material finamente granulado, que contienen
mieloperoxidasa, enzimas lisosomales y protenas catinicas llamadas defensinas, cuya
funcin es anloga a la de los anticuerpos (Ross et al, 1999; Geneser, 2000 y Ross et al, 2004).
En el centro de la clula se encuentran pequeas cisternas de Golgi; son escasas las

mitocondrias. Son importantes en la reaccin inflamatoria del organismo, se ocupan de la
fagocitosis activa de las bacterias y de otros microorganismos extraos, y de la fagocitosis
pasiva de clulas de tejido conectivo, eritrocitos daados y fibrina.
Cuando una bacteria es fagocitada, los grnulos especficos se fusionan con la membrana del
fagosoma en 30-60 segundos y el contenido bactericida se vaca en el fagosoma. Tiempo
despus se fusionan los grnulos azurfilos con el complejo fagosoma-grnulo especfico; las
enzimas hidrolticas de los grnulos azurfilos lisosomales digieren al microorganismo.
Muchos neutrfilos perecen en este proceso; la acumulacin de bacterias y neutrofilos muertos
constituye el exudado amarillento espeso denominado pus (Ross, 1999; Ross et al, 2004).
La biometra hemtica determina la presencia de neutroflia o neutropenia. Neutrofilia

aumento en el nmero absoluto de neutrfilos como respuesta a microorganismos invasores y
a clulas neoplsicas.
La neutropenia ocurre cuando se producen muy pocos neutrfilos en la mdula sea, se

almacenan demasiados en los mrgenes de los vasos sanguneos (Fischbach, 1997; Mckenzie,
2000).
28
INTRODUCCIN
EOSINFILOS
El eosinfilo se origina de la clula multipotencial UFC-GEMM, la cual se intenta diferenciar
a la UFC-Eo por accin de los factores de crecimiento FEC-GM, IL-3 e IL-5. Slo este ltimo
tiene especificidad para linaje de eosinfilos y es la principal citosina requerida para su
produccin (Ross et al, 199; Mckenzie, 2000; Geneser, 2000 y Rodak, 2005).
Constituyen del 1 al 3 % de los leucocitos, en cifras absolutas se considera normal de 150 -

450 por mm3 de sangre. Tienen forma redondeada con tamao aproximado de 10-15 m de
dimetro tienden a ser ligeramente mayores que los neutrfilos. El ncleo generalmente se
presenta con dos lbulos que pueden verse libres o unidos por una hebra de material nuclear.
Por otra parte su citoplasma esta lleno de grnulos tambin de dos tipos, abundantes grnulos
especficos alargados y grandes especficos que miden de 0.5 - 1.0 m. y grnulos azurfilos.
El centro de los grnulos especficos contiene un cuerpo cristalino, estas inclusiones son
responsables de que los grnulos sean refringentes y voluminosos, contienen cuatro protenas
principales: una protena rica en arginina denominada protena bsica mayor o principal
(MBP) que fija fuertemente la eosina, y hace que en frotis se tian de color rojo o anaranjado,
La protena catinica de eosinfilo (ECP), la peroxidasa de eosinfilo (EPO) y la neurotoxina
derivada de eosinfilo. Los grnulos tambin contienen mieloperoxidasa, histaminasa,
arilsulfatasa, colagenasa, y catepsinas. Las MBP, ECP y EPO ejercen un efecto citotxico
intenso sobre protozoarios y helmintos parsitos. La histaminasa neutraliza la actividad de la
histamina (Ross et al, 1999; Ross et al, 2004).
Los grnulos azurfilos contienen una variedad de hidrolasas cidas lisosmicas habituales y
otras enzimas hidroliticas
Generan sustancias que regulan el proceso inflamatorio, se cree que la principal accin de los
eosinfilos es intervenir en la lucha contra las infestaciones parasitarias, son capaces de digerir
la pared de los metazoarios e intervienen en trastornos alrgicos (Ross et al, 1999; Mckenzie,
2000; Geneser, 2000 y Ross et al, 2004).
29
INTRODUCCIN
BASFILOS
Los basfilos se originan en la clula progenitora de mltiple linaje UFC-GEMM en la mdula
sea. La UFC-GEMM se induce a diferenciar la FC-Ba, tanto por FEC-GM como por IL-3.
Se desarrollan colonias basfilas a partir de UFC-Ba bajo la influencia de IL-3. El mielocito
basfilo, el metamielocito, la forma en banda y las formas segmentadas se distinguen con
facilidad de otros granulocitos debido a la presencia de grnulos grandes (0.2-1m) teidos
con intensidad: Poseen una forma irregular, estan distribuidos de manera irregular en toda la
clula, y cambian de color prpura oscuro a color negro.
Comprenden solo el 0.5 % aproximadamente de los leucocitos sanguneos.

Los basfilos son los granulocitos ms pequeos suelen ser de 10 - 13 m de dimetro; son del
mismo tamao que los neutrfilos. La mitad de la clula est constituida por el ncleo que
tiene generalmente 2 o 3 lbulos unidos por puentes cromatnicos y pueden ser segmentado y
de forma irregular. Al principio se crea que los grnulos eran basfilos (de ah su nombre);
ahora es bien demostrado que los grnulos basfilos en realidad son metacromticos. Los
grnulos contienen heparina, condroitinsulfato, histamina, enzimas lisosmicas y peroxidasa.
La histamina es un agente vasoactivo que dilata los vasos sanguneos de pequeo calibre, entre
otras funciones; la heparina es un mucopolisacarido muy cido que fija azur de metileno (azul
oscuro casi morado) en sus grnulos (FIGURA 2) (Ross et al, 1999; Geneser, 2000; Mckenzie,
2000; Ross et al, 2004 y Rodak, 2005).
El basfilo y la clula cebada funcionan como mediadores de las respuestas inflamatorias, en

especial de las de hipersensibilidad. Estas clulas tienen receptores de membrana para IgE.
Cuando la IgE se fija al receptor, la clula se activa y se inicia la desgranulacin, la cual libera
enzimas vasoactivas, broncoconstrictoras y quimioatrayentes (especialmente para neutrfilos).
Su funcin al parecer es que contienen la mitad aproximadamente de la histamina que hay en
la sangre, y los relacionan en las reacciones anafilcticas, tambin se relacionan con
enfermedades mieloproliferativas e inmunidad contra parsitos y alergias de contacto o
rechazo injerto contra husped (Hamm, 1988; Fischbach, 1997; Mckenzie, 2000; Geneser,
2000).
30
INTRODUCCIN
FIGURA 2.- LEUCOCITOS GRANULOSOS: IZQUIERDA UN NEUTRFILO, EN MEDIO UN

EOSINFILO Y A LA DERECHA UN BASFILO De Carrillo F.J. 2005, Atlas digital de
Hematologa.
DESARROLLO DE AGRANULOCITOS:
Los monocitos se producen en la mdula sea a partir de una clula progenitora bipotencial
(UFC-GM) capaz de madurar, ya sea a monocito o greanulocito. La diferenciacin y
crecimiento de UFC-GM a monocitos en cultivo depende de la accin de FEC-M, IL-3 y FEC-
M (Mckenzie, 2000).
MONOCITOS
Monoblastos Tiene citoplasma azul gris agranuloso abundante. Por lo regular, tiene un
ncleo ovoide o redondeado que puede estar plegado o con muescas. La cromatina
nuclear est finamente dispersa (en encaje) y se identifican con facilidad varios
nuclolos. Se encuentran en bajas cantidades en la mdula sea, y su nica funcin se
produce durante la mitosis (Mckenzie, 2000; Rodak, 2005)
31
INTRODUCCIN
Promonocitos Luego de la mitosis y la maduracin, el blasto se convierte en

promonocito. Es una forma intermedia entre el monoblasto y el monocito. La clula es
grande (12-20 m de dimetro), con abundante citoplasma azul gris. El ncleo suele
ser irregular y con muescas profundas, con una red fina de cromatina; logran percibirse
nuclolos.
Monocitos Slo constituyen del 3 al 8 % de los leucocitos de la sangre normal, son las
clulas blancas ms voluminosas que se observan en un frotis, tienen de 12 -20 m de
dimetro. Presentan gran variabilidad morfolgica, adquiriendo hasta formas
cuadrangulares y ovales; su ncleo es voluminoso ocupa cerca de la mitad del rea
celular, generalmente est ubicado en una posicin excntrica y adopta una forma
irregular (mellado o curvo), descrita por lo comn como clula en herradura no
lobulado donde se encuentran los centrolos y un aparato de Golgi bien desarrollado;
tambin contiene retculo endoplsmatico liso y rugoso y pequeas mitocondrias. En el
interior del ncleo puede distinguirse una caracterstica cromatina reticular con
pequeos grumos. El citoplasma abundante de color azulado grisceo del monocito
esta lleno de grnulos diminutos (0.4 m de dimetro), que se deben considerar como
lisosomas primarios (idnticos a grnulos azrfilos) que contienen hidrolasas cidas,
peroxidasa, fosfatasa cida y arilsulfatasa. La membrana citoplasmtica puede ser
bastante irregular. Los psreudpodos y las vacuolas fagocticas son comunes (Hamm,
1988; Fischbach, 1997; Ross et al, 1999; Mckenzie, 2000; Geneser, 2000; Abbott,
2002; Ross et al, 2004 y Rodak, 2005).
En los monocitos se identificaron ms de 50 compuestos secretores, como protenas de

transporte, agentes inflamatorios inespecficos, materiales de depsito y agentes humorales
(Geneser, 2000).
Los monocitos tambin penetran en el tejido conectivo durante la inflamacin y se

transforman en macrfagos que fagocitan clulas y restos tisulares, fibrina, bacterias
remanentes y pueden destruir clulas tumorales (Ross et al, 1999; Mckenzie, 2000; Abbott,
2002) (FIGURA3).
32
INTRODUCCIN
Macrfago El monocito finalmente abandona la sangre y penetra en los tejidos donde

madura a macrfago. La transicin de monocito a macrfago se caracteriza por
crecimiento celular progresivo. El ncleo se vuelve redondo, aparecen nuclolos y el
citoplasma se aprecia de color azul, adems de evidenciar gran cantidad de grnulos y
vacuolas claras. Los macrfagos activados se distinguen por sus notables pseudpodos.
El sistema monocito-macrfago o fagoctico mononuclear desempea una funcin
importante en el inicio y regulacin de la respuesta inmunitaria (Mckenzie, 2000;
Abbott, 2002).
LINFOCITOS
Los linfocitos son los leucocitos sanguneos del ser humano que se desarrollan no solo en
la mdula sea sino tambin en tejidos denominados rganos linfticos primarios y
secundarios. En los seres humanos los rganos primarios son el timo y la mdula sea,
mientras que los lugares secundarios son bazo, placas de peyer en el tracto gastrointestinal,
el anillo de Waldermyer en las amgdalas y adenoides, y ganglios linfticos distribuidos en
todo el cuerpo (Rodak, 2005).
Los linfocitos de la misma manera que el resto de los leucocitos, derivan de la clula
troncal pluripotencial (PSC) que probablemente como resultado de un estimulo hormonal
especfico, la maduracin inicial de la PSC produzca una clula troncal para la clula
linfoide (CFU-L). De esta manera se distinguen tres precursores comprometidos con la
diferenciacin en linfocitos B, T o NK: clulas pro B, clulas pro T y clulas pro NK. A
partir de all, la diferenciacin en linfocitos B y NK continuara en la mdula sea, mientras
que la correspondiente a los linfocitos T prosigue en el timo. Las IL-4, 7 actan sobre el
precursor del linfocito B, mientras que las IL-1, 2, 7 actan sobre el precursor del linfocito
T (Geneser, 2000; Abbott, 2002).
Linfoblasto Es una clula de tamao pequeo a mediano (10-18m) con un ncleo de

de redondo a ovalado que contiene cromatina fina con aspecto de encaje fino y 1 o 2
nuclolos bien definidos de color azul plido; el citoplasma agranular es escaso y se
tie de color azul oscuro (Mckenzie, 2000; Rodak, 2005).
33
INTRODUCCIN
Prolinfocitos Es muy difcil de distinguir en las muestras de mdula sea normal. La

comatina nuclear levemente ms condensada se encuentra formando grumos, por lo
comn hay nuclolos. Presenta una reduccin de la prominencia nucleolar y un
cambioen el grosor de la membrana nuclear. El citoplasma es de color azul claro y
agranular (Mckenzie, 2000; Rodak, 2005).
Linfocitos Despus de los neutrfilos, los linfocitos son los leucocitos ms comunes,
son los ms pequeos de las cinco clases de leucocitos (linfocito = pequeo). De 20 -
30 % de los leucocitos que se encuentran en un frotis normal son linfocitos; en
nmeros absolutos hay 2000 por milmetro cbico de sangre.
Existen tres grupos de linfocitos de acuerdo con su tamao: linfocitos pequeos, medianos y
grandes, con un dimetro que va de 6 a 30 m. En la circulacin casi todos los linfocitos son
pequeos y medianos, con un dimetro que va de 6 a 15m, pero en su mayora, ms del 90%
son linfocitos pequeos
La forma ms comn es el linfocito pequeo con citoplasma escaso, aparece con un muy fino
reborde azul plido alrededor del ncleo, que es redondo u oval, y su patrn de cromatina es
en bloque. En general no se ven organelos citoplasmticos, salvo por uno que otro grnulo
azurfilo fino. En el centro celular, hay un par de centrolos y un pequeo aparato de Golgi.
En el linfocito mediano el citoplasma es ms abundante razn por la cual se distinguen con

ms claridad sus grnulos azurfilos, el ncleo es ms grande y el aparato de Golgi esta ms
desarrollado. Hay una cantidad mayor de mitocondrias y polirribosomas y pequeas cisternas
del retculo endoplasmtico rugoso. Los ribosomas son la causa de la leve basofilia que exiben
los linfocitos en los frotis de sangre coloreados.
El linfocito grande es el ms raro en sangre perifrica. Su citoplasma es ms generoso suele

adquirir un color azul ms oscuro cuando se tie. Contienen grnulos citoplasmticos. Se
denominan grandes linfocitos granulares. Son linfocitos activados que poseen receptores
superficiales que interaccionan con un antgeno especfico o bien linfocitos NK destructores
naturales, denominados clulas NK (ing. natural killer cells) (Ross et al, 2004; Rodak, 2005).
34
INTRODUCCIN
Por lo general, los linfocitos comprenden dos subpoblaciones, denominadas linfocitos T-

(clulas T) se llaman as porque llevan a cabo el proceso de diferenciacin en el timo y
linfocitos B (clulas B) reciben este nombre porque en su momento se identificaron como una
poblacin separada en la bolsa de Fabricio de las aves y luego en los rganos
bursaequivalentes de los mamiferos (p. ej., la mdula sea) (Ross et al, 2004). No presentan
diferencias morfolgicas, la caracterizacin de los tipos linfocticos tiene su fundamento en la
funcin de las clulas y se pueden separar sobre la base de la determinacin de marcadores de
superficie. Adems de los linfocitos B Y T tambin pueden aparecer linfocitos NK (Geneser,
2000; Ross etal, 2004; Rodak, 2005).
La funcin principal del linfocito es la regulacin de la funcin inmunitaria ya que juegan un

papel fundamental en las reacciones inmunolgicas. Si un material extrao (materia antignica
exgena; material endgenoalterado como clulas muertas, en proceso de destruccin o
malignas) se engloba por completo, se degrada y se elimina por accin de los fagoctos y no se
produce respuesta inmune. Sin embargo, si no se produce el englobamiento completo, se
desencadena una serie de reacciones, factores, acontecimientos bioquimicos y morfologicos
que estimulan la activacin de los linfocitos (Rodak, 2005).
Los linfocitos T tienen una vida media prolongada y participan en la inmunidad mediada por
clulas.
Los linfocitos B tienen una vida media variable y participan en la produccin, sntesis y
secrecin de anticuerpos (Mckenzie, 2000; Ross et al, 2004).
Los linfocitos intervienen en infecciones virales como sarampin, rubola, varicela y

mononucleosis infecciosa (Fischbach, 1997).
35
INTRODUCCIN
FIGURA 3.- LEUCOCITOS AGRANULOSOS: DERECHA UN LINFOCITO, A LA IZQUIERDA UN

MONOCITO. De Carrillo F.J. 2005 Atlas digital de hematologa.
TRASTORNOS EN LAS CONCENTRACIONES DE LOS LEUCOCITOS
La leucocitosis es un incremento de leucocitos mayor a 10 000 por L, suele deberse al

aumento de un solo tipo de glbulo blanco, algunas causas de leucocitosis son:
a) Infecciones agudas en las cuales el grado de aumento de glbulos blancos depende de

la gravedad de la infeccin, la resistencia y edad del paciente, eficiencia y reservas de
la mdula.
b) Hemorragias agudas
c) Traumatismo o lesin a los tejidos como en las cirugas
d) Neoplasias malignas
e) Frmacos, en particular ter, cloroformo, quinina, adrenalina.
f) Leucemias
36
INTRODUCCIN
La leucopenia es la disminucin del nmero de leucocitos por debajo de 4000 por L y es

debido a:
a) Infecciones virales
b) Depresin de la mdula debido a frmacos
c) Quimioterapia del cncer
d) Radiaciones
e) Alcoholismo
f) Diabetes
(Fischbach, 1997)
CUENTA LEUCOCITARIA
La cuenta leucocitaria llamada tambien recuento diferencial constituye una gua muy til sobre
la gravedad de una enfermedad, esta cuenta (que es el nmero de los distintos tipos de
leucocitos) identifica a los individuos con una mayor probabilidad de infeccin. La cuenta
leucocitaria total circulante se divide entre los cinco tipos de leucocitos FIGURA 4.
La cuenta diferencial se expresa en forma de porcentaje del nmero total de leucocitos. Es

importante tanto la distribucin de los glbulos blancos como el tipo de leucocitos y el grado
con que aumenta o disminuye. El porcentaje es el nmero relativo de cada tipo de leucocito
presente en sangre; la cuenta absoluta se obtiene de manera matemtica al multiplicar el valor
porcentual de un tipo de leucocito por la cuenta leucocitaria total.
FORMULA
Valor absoluto de valor relativo cuenta leucocitaria
Leucocitos / mm3 = (%) X total (clulas / mm3)
37
INTRODUCCIN
FIGURA 4.- CINCO TIPOS DE LEUCOCITOS De Carrillo F. J. 2005 Atlas digital

de Hematologa.
1.3 ERITROCITOS
La sangre tiene como una de sus funciones primordiales la oxigenacin de los tejidos, a travs
de la hemoglobina. El eritrocito, (eritro=rojo) tiene la misin fundamental de proteger y
transportar la hemoglobina para que esta pueda realizar su funcin respiratoria. En la sangre
hay de 500 a 1000 veces ms eritrocitos que leucocitos, cada milmetro cbico de sangre
contiene unos 5 millones por L de eritrocitos (Ham, 1988; Fischbach, 1997).
La eritropoyesis (formacin de eritrocitos) tiene lugar en la mdula sea, es el proceso

mediante el cual los eritrocitos se forman de una nica clula madre pluripotente o
progenitora; pasan a travs de diferentes estados de maduracin transformndose en clulas
cada vez ms especializadas y maduras, hasta alcanzar la circulacin sangunea.
38
INTRODUCCIN
La formacin y la liberacin de eritrocitos son reguladas por la eritropoyetina, una hormona

glucoproteica secretada por el rin en respuesta a la hipoxia celular (Mckenzie, 2000; Ross et
al, 2004). Los estados de diferenciacin de los hemates pueden dividirse de la siguiente
manera (Rapaport, 2002).
Los eritrocitos se desarrollan a partir de la clula madre mieloide multipotencial (CFU-

GEMM) bajo la influencia de eritropoyetina, GM-CSF, IL-3 e IL-4. La CFU-E, clula
progenitora eritroctica sensible a la eritropoyetina, da origen al primer precursor eritroctico
reconocible el proeritroblasto (Abbott, 2002; Ross et al, 2004, Rodak, 2005).
9 Proeritroblasto Clula unipotencial, redonda de gran tamao 12 a 20 m de dimetro,

originada de la clula madre. Contiene un ncleo esferoidal voluminoso, ocupa el 80 %
del volumen celular total con uno o dos nuclolos visibles. El citoplasma exhibe
basofilia leve como consecuencia de sus ribosomas libres.
9 Eritroblasto Basfilo Es ms pequeo que el proeritroblasto del cual se origina por

divisin mitotica Miden de 16-18 m de dimetro. El ncleo es ms pequeo (10 a 16
m de dimetro) ocupa las tres cuartas partes del rea con ausencia de nuclolo; el
citoplasma exhibe basofilia intensa por la gran cantidad de ribosomas libres
(polirribosomas) que sintetizan hemoglobina.
9 Eritroblasto Policromatfilo. Es la etapa en que el citoplasma en la que el citoplasma

muestra acidofilia (porque se tie la hemoglobina) y basofilia (porque se tien los
ribosomas). Es ms reducido de tamao de entre 12 y 15 m de dimetro y su ncleo
ocupa menos de la mitad del rea celular.
9 Eritroblasto Ortocromtico. Clula de 10 a 15 m de dimetro se reconocen por su

citoplasma bien acidfilo por la gran cantidad de hemoglobina. Posee un ncleo bien
condensado, pequeo, compacto e hipercromtico que ocupa tan slo un cuarto del
rea celular y se dispone en una ubicacin excntrica. En esta etapa, el eritroblasto
ortocromtico ya no es capaz de dividirse (Figura 5).
39
INTRODUCCIN
9 Reticulocito. Es un eritrocito joven sin ncleo, pero con RNA residual y mitocondrias
en el citoplasma, este, retiene algunos polirribosomas capaces de seguir sintetizando
hemoglobina. Estos polirribosomas imparten un grado leve de basofilia al citoplasma
que por otra parte es eosinfilo. El RNA residual proporciona a la joven clula un
matiz azulado en la tincin de Wright. La clula es descrita de manera apropiada como
un Eritrocito policromatfilo.
Estas clulas pueden identificarse in vitro mediante una reaccin con tinciones
supravitales, como el nuevo azul de metileno o el azul de cresil brillante, los cuales
provocan precipitacin del RNA, as se distingue la ribonucleoproteina como una red
azul (retculo) en el eritrocito eosinfilo. Estas clulas son denominadas reticulocitos.
Los reticulocitos son un poco ms grandes (8 a 10 m de dimetro) que los eritrocitos
maduros y significan ms o menos 1% de los eritrocitos circulantes (50 x 109 /L).
Permanecen un da en la sangre perifrica antes de convertirse en eritrocitos maduros.
(Ross, 1999; Mckenzie, 2000; Geneser, 2000; Abbott, 2002; Ross et al, 2004; Rodak
2005).
La cuenta de reticulocitos se utiliza para distinguir el grado de eficacia de la actividad en la

mdula sea. El nmero de reticulocitos se calcula al identificar el nmero de reticulocitos en
1000 eritrocitos. La cuenta de reticulocitos suele reportarse como porcentaje, pero tambin es
posible hacerlo en nmeros absolutos, es decir, el nmero de reticulocitos por litros de sangre.
Valores Normales.
El porcentaje de reticulocitos en la sangre es de 0.8 a 4.0 % o cerca de 18 a 50 x106 / L en un

individuo sano.
40
INTRODUCCIN
Reticulocitosis: La cuenta reticuloctica aumentada, indica que existe mayor produccin de

glbulos rojos, conforme la mdula sustituye a las clulas que se pierden o se destruyen en
forma precoz; existe reticulocitosis en:
a) Anemia hemoltica
b) Tres o cuatro das despus de una hemorragia
c) Despus del tratamiento de la anemia
Cuenta reticuloctica baja: significa que la mdula sea no produce suficientes eritrocitos y
ocurre en:
a) Anemias
b) Infeccin crnica
c) Radioterapia
d) Tumor en mdula sea
(Fischbach, 1997)
9 Eritrocito La serie roja de la sangre la forman las clulas sanguneas rojas, eritrocitos,
hemates o glbulos rojos. Tienen una forma redondeada de un disco bicncavo de
color naranja, de ms o menos 7 a 8 m de dimetro y de 80 a 100 fL de volumen.
Debido a su elevada especializacin, el ncleo y las estructuras citoplasmticas,
propias de toda clula, han sido reemplazadas por hemoglobina y una pequea
dotacin enzimtica, para mantener un reducido metabolismo celular; ha perdido su
RNA residual y sus mitocondrias (Difiore, 1986).
Una fina membrana plasmtica rodea al eritrocito; es un componente funcional rico en

enzimas, no solo un recipiente para el protoplasma. La forma biocncava del eritrocito
maduro es influenciada por fuerzas osmticas y mantenida por protenas como el filamento
proteico intermedio especfico, la espectrina, que se fija a la cara interna de la membrana en
asociacin con el citoesqueleto (Ross et al, 1999; Geneser, 2000; Ross et al, 2004).
41
INTRODUCCIN
El estiramiento de la membrana del eritrocito lo hace permeable, por lo que se filtra la

hemoglobina hacia el exterior de la clula. De este modo quedan las estructuras casi incoloras,
los fantasmas (Geneser, 2000).
Son extremadamente elsticos y se deforman con facilidad, cuando es necesario para pasar por
los vasos pequeos. Se tien uniformemente con eosina de rosa a naranja debido a la gran
cantidad de hemoglobina (Ross, 1999; Geneser, 2000).
Cuando los eritrocitos no circulan por el torrente sanguneo tienen tendencia a agruparse en
columnas, denominadas pilas de monedas. Se cree que este fenmeno se debe a
modificaciones de la carga elctrica en la superficie de los eritrocitos despus de una
extraccin de sangre (Fischbach, 1997; Geneser, 2000).
Los eritrocitos actan slo dentro del torrente circulatorio, contienen hemoglobina, una
protena especializada que transporta oxgeno y dixido de carbono. La forma del disco
hemtico facilita el intercambio gaseoso. (Ross et al, 2004).
Despus de abandonar la mdula sea, el eritrocito sobrevive en la circulacin unos 120 das,
despus de los cuales, la mayora (90% aproximadamente) va perdiendo progresivamente su
membrana, aumenta en forma relativa la CHCM (concentracin media de hemoglobina
corpuscular), y disminuye su deformabilidad, entonces son fagocitados por los macrfagos del
bazo, la mdula sea y el hgado. Se separa el hierro de la hemoglobina y se almacena como
ferritina en el bazo, para ser reutilizado en la sntesis de hemoglobina. El resto de los
eritrocitos envejecidos (10%) se desintegran dentro de los vasos con liberacin de la
hemoglobina hacia la sangre (Abbott, 2002; Ross et el, 2004).
La serie roja se compone con la determinacin de los ndices eritrocitarios primarios y

secundarios que son de extrema utilidad para clasificar a los eritrocitos de acuerdo con su
tamao y contenido de hemoglobina (Difiore, 1986; Fischbach, 1997; Mckenzie, 2000).
42
INTRODUCCIN
1.- Los ndices eritrocitarios primarios se determinan en el laboratorio directamente a

partir de la muestra de sangre total del paciente y son: la determinacin de hemoglobina,
hematocrito y nmero de eritrocitos / mL. Se usa para diagnosticar normalidad, anemia y
policitemia en el paciente.
2.- Los ndices eritrocitarios secundarios son de extrema utilidad para clasificar a los
eritrocitos de acuerdo con su tamao, y contenido de hemoglobina. Para determinarlos se
requiere de los valores de hemoglobina, hematocrito y cuenta eritrocitaria: volumen
corpuscular medio (VCM), concentracin media de hemoglobina corpuscular
(CMHC) y hemoglobina corpuscular media (HCM).
Valores normales de la Cuenta Eritrocitaria
Hombres 4.2 a 5.4 x 106 / l

Mujeres 3.6 a 5.0 x 106 / l
La concentracin eritrocitaria vara de acuerdo al sexo, edad y ubicacin geogrfica.
Disminucin de eritrocitos: Situacin en la que existe reduccin en el nmero de eritrocitos

circulantes, existe reduccin de eritrocitos en:
a) Hemorragia
b) Linfoma, Mieloma mltiple y Leucemia.
c) Poca produccin de eritrocitos de la mdula sea
d) Deficiencia de hierro, vitamina B12 y cido flico
43
INTRODUCCIN
Eritrocitosis: Aumento en el nmero de eritrocitos por arriba de su valor normal, algunas

causas:
a) Enfermedad renal
b) Tumores
c) Altitud elevada geogrficamente
d) Enfermedad pulmonar
(Fichbach, 1997)
HEMOGLOBINA
La hemoglobina (Hb) es el componente mayoritario de los eritrocitos maduros y su funcin

principal es la oxigenacin de los tejidos, as, transporta oxgeno de los pulmones a los tejidos
y el dixido de carbono desde los tejidos hacia los pulmones. Aproximadamente el 33 % del
volumen del eritrocito es de la protena conjugada y participa en 90% del peso seco total de la
clula. Cada clula contiene entre 27 y 32 pg (picogramos) de hemoglobina (Mckenzie,
2000). La hemoglobina es una protena eritrocitaria intracelular altamente especializada, esta
formada por aminocidos que constituyen una sola protena llamada globina y de cuatro
(subunidades) cadenas polipeptdicas, cada una de las cuales forman un complejo con un
grupo llamado hem, que contiene tomos de hierro y el pigmento rojo porfirina, que concede
a la sangre su color rojo caracterstico (Fischbach, 1997).
Cada hem logra transportar una molcula de oxgeno; por tanto cada molcula de hemoglobina
puede transportar cuatro molculas de oxgeno (Mckenzie, 2000; Ross et al, 2004). Cada
gramo de hemoglobina puede llevar 1.34 ml de oxgeno. La capacidad de la sangre para
combinarse con el oxgeno es directamente proporcional a la concentracin de hemoglobina y
no al nmero de eritrocitos, debido a que algunos glbulos rojos contienen ms hemoglobina
que otros (Ham, 1988; Fischbach, 1997).
44
INTRODUCCIN
La concentracin de hemoglobina en el cuerpo es el resultado de un equilibrio entre la

produccin y destruccin de eritrocitos. La concentracin de hemoglobina celular en un adulto
masculino es de aproximadamente 15g / dL, con un volumen sanguneo total cercano a 5 000
mL. Por tanto, la masa corporal total de hemoglobina es de ms o menos 750 gramos
(Mckenzie, 2000).
Valores Normales
Mujeres 12.0 a 16.0 g / 100 ml
Hombres 14.0 a 17.4 g / 100 ml
Hemoconcentracin: Valores de hemoglobina aumentados a una cifra mayor de 20 g / 100 ml,

posibles causas:
a) Neumopata obstructiva crnica

b) Insuficiencia cardiaca
c) Quemaduras intensas
Anemia: Reduccin en los valores normales de hemoglobina

a) Hipertiroidismo
b) Hemorragia abundante
c) Cirrosis heptica
d) Leucemia
La cifra preocupante de hemoglobina es < 5.0g / 100 ml, ya que provoca insuficiencia cardiaca
y muerte en forma aguda.
La anemia (disminucin de la masa eritrocitaria) es uno de los trastornos ms comunes que se

encuentran en la medicina clnica. Sin embargo, no se trata de una enfermedad, sino ms bien
de la expresin de un trastorno o enfermedad subyacente, es un marcador importante de una
alteracin que puede ser bsica o compleja; por tanto, una vez que se establece el diagnstico,
el mdico debe determinar su motivo exacto.
45
INTRODUCCIN
Desde el punto de vista funcional, la anemia se define como una disminucin en la capacidad
de la sangre para transportar oxgeno a los tejidos, lo que provoca hipoxia tisular. En medicina
clnica se refiere a una disminucin en la concentracin normal de hemoglobina o eritrocitos.
Despus del examen fsico y de la historia clnica del paciente, el mdico ordenar pruebas de
laboratorio cuando haya una probable anemia. Al principio se practican las pruebas regulares
para determinar la posible presencia de anemia y evaluar la produccin y destruccin o
prdida de eritrocitos. Entre estas pruebas se incluyen determinacin de hemoglobina y
hematcrito, recuento de eritrocitos y reticulocitos, as como el clculo de los ndices
eritrocitarios. Todas estas pruebas son englobadas dentro de una biometra hemtica
(Mackenzie, 2000).
HEMATOCRITO
La palabra hematocrito significa separar la sangre y forma parte de la biometra hemtica.

Esta prueba determina la masa eritrocitaria (Fischbach, 1997). El volumen de eritrocitos
separados de los otros elementos de la sangre despus de la centrifugacin, en relacin con el
volumen de la sangre total expresada en litro/litro; los resultados son expresados como
porcentaje.
En porcentaje, el hematcrito representa aproximadamente tres veces la concentracin de la

hemoglobina. El hematcrito difiere de acuerdo con la edad, sexo y localizacin geogrfica, de
modo parecido a lo descrito para los eritrocitos (Mckenzie, 2000).
Valores Normales
Hombres 40 a 52 %
Mujeres 35 a 47 %
46
INTRODUCCIN
Hematcrito bajo Reduccin en los valores del hematocrito y se observa en:

a) Leucemia
b) Hipertiroidismo
c) Hemorragia masiva
Hematcrito alto Aumento del hematcrito en el paciente por:

a) Eritrocitosis
b) Deshidratacin intensa
Los ndices eritrocitarios secundarios son de gran utilidad para diferenciar las anemias. Con
base en los ndices eritrocitarios, los eritrocitos se clasifican en normales o anormales en
cuanto a volumen o contenido de hemoglobina se refiere. En las deficiencias, las anemias se
clasifican, segn el tamao de los glbulos rojos, en macrocticas, normocticas, microcticas
simples o segn el tamao de la clula y en cuanto al color en microctica hipocrmica. A
continuacin se proporciona una explicacin de cada medicin.
VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO (VCM)
El VCM indica el volumen promedio de los eritrocitos individuales expresado en femtolitro

(fL). El mejor ndice para clasificar las anemias es el tamao de cada clula; el VCM se
utiliza para clasificar a los eritrocitos como normocticos, (clulas normales) que tienen un
VCM de entre 80 y 100 fL, los microcticos (clulas menores), tienen menos de 80 fL mientras
que los macrocticos (clulas mayores), tienen ms de 100 fL. La combinacin de macrocitos
y microcitos dan como resultado un VCM normal. Las anormalidades en el VCM son indicios
de procesos patolgicos en el sistema hematopoytico (Fischbach, 1997; Mckenzie, 2000).
En los contadores Coulter, al pasar los eritrocitos individuales a travs de un orificio en el cual
fluye una corriente elctrica, la clula produce una intermitencia de voltaje donde su magnitud
es proporcional al volumen celular.
47
INTRODUCCIN
El VCM tambin puede determinarse a partir del hematcrito y el recuento de eritrocitos

mediante esta formula:
VCM (fL) = hematocrito L/L

Cuenta eritrocitaria (x 10 12 / L)
CONCENTRACIN MEDIA DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR CHCM
Es una prueba que sirve para medir la concentracin promedio de hemoglobina en los glbulos
rojos; expresada en un decilitro de eritrocitos (g / L en unidades SI). Relaciona la cantidad
promedio (peso) de la hemoglobina en los eritrocitos con el volumen promedio de los
eritrocitos.
Es muy til para vigilar el tratamiento de la anemia.
La MHMC es una cifra que se calcula:
CHCM (g/dL) = Hemoglobina g/dL

Hematocrito (L/L)
El ndice seala si la poblacin celular general es normocrmica, que esta entre 32 y 36 g/d, es
una concentracin de hemoglobina normal, hipocrmica por debajo de 32 g/dL, concentracin
de hemoglobina baja, contiene menos hemoglobina de lo normal y las clulas hipercrmicas
que tienen un CHCM superior a 36 g/dL, que es una elevada concentracin de hemoglobina en
el eritrocito, contienen ms hemoglobina de lo normal (Fischbach, 1997: Mckenzie, 2000).
48
INTRODUCCIN
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA HCM
La cuantificacin del HCM es una valoracin del promedio del peso de la hemoglobina en
eritrocitos individuales; es un valor calculado y se expresa en picogramos (pg) de
hemoglobina por medio de la siguiente formula:
HCM (pg) = Hemoglobina (g/dL) x 10

Cuenta de eritrocitos (x 1012 /L)
Valores Normales
26 a 34 picogramos (pg)
Este ndice es muy importante en el diagnstico de pacientes con anemias graves.

La HCM elevada acompaa a la anemia macroctica.
La HCM reducida acompaa a la anemia microctica (Fischbach, 1997; Mckenzie, 2000).
AMPLITUD DE LA DISTRIBUCIN DE LOS ERITROCITOS ADE
Como el VCM representa un promedio del volumen eritroctico, es menos confiable para
describir la poblacin de eritrocitos cuando hay una anisocitosis, que describe la variacin
general en el tamao de los eritrocitos. El ADE indica bsicamente el grado de anisocitosis. Es
una prueba automatizada til para investigar algunas alteraciones hematolgicas. El ADE es el
coeficiente de variacin de la distribucin del volumen de los eritrocitos, se determina como:
ADE = Desviacin estndar x 100

VCM medio
El ADE normal es de 11.5 y 13.5 %

Macrocitos son eritrocitos ms grandes de lo normal, con un dimetro mayor a 8.0 m y un
VCM por encima de 100 fL. La clula suele contener una cantidad adecuada de hemoglobina,
lo cual da como resultado una CMHC normal.
Microcitos son eritrocitos con un dimetro inferior a 7.0 m y volumen corpuscular medio
inferior a 80 fL. La clula suele ser hipocrmica, pero tambin puede ser normocrmica
(Fischbach, 1997 Mckenzie, 2000; Abbott, 2002).
49
INTRODUCCIN
1.4 PLAQUETAS
Son tambin denominados trombocitos, son fragmentos citoplasmticos provenientes de una

clula conocida como megacariocito. Desempean un papel central en la hemostasia (gr.
haima, sangre; stasis estado estable), es decir, detencin de la hemorragia, pero tambin
parecen tener importancia para el mantenimiento del endotelio de los vasos sanguneos por la
liberacin de factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), que estimula los procesos
de reparacin titulares (Geneser, 2000; Rodak, 2005). El desarrollo de las plaquetas se produce
en la mdula sea y derivan a partir de la misma clula progenitora o troncal (stem cel)
pluripotencial (PSC) bajo la influencia de factores estimuladores de colonias (CFS)
producidos por macrfagos, fibroblastos, linfocitos T y clulas endoteliales estimuladas. La
diferenciacin de las clulas troncales a en megacarioblastos productores de plaquetas esta
influenciada por las interleucinas 3, 6 y 11 (IL-3, IL-6 y IL-11), y el CFS granulocito (G-CSF)
estimulan de manera sinrgica la produccin de clulas progenitoras. As tenemos que las
plaquetas (trombocitos) se derivan de la UCF-GEMM. La UFC-Meg es estimulada a proliferar
y diferenciarse por los factores de crecimiento IL-3 y FEC-GM, mientras los megacariocitos
se estimulan para crecer en tamao y producir plaquetas mediante una sustancia llamada
trombopoyetina (TPO) (Mckenzie, 2000; Rodak, 2005).
A diferencia de su actividad respecto de los eritrocitos o leucocitos, el bazo cumple un papel

activo en la regulacin de la cantidad de plaquetas. Alrededor del 30% de las plaquetas de
sangre perifrica son secuestradas en el bazo en cualquier momento. La trombopoyetina
produce la maduracin de los megacarioblastos para producir una respuesta medular igual a la
prdida de plaquetas. Debido a que la accin de la trombopoyetina es similar a la de la
eritropoyetina, cualquier incremento en la trombopoyetina acelera la maduracin de los
megacariocitos (Rodak, 2005).
El primer progenitor plaquetario identificable en la mdula sea es el megacariocito.
50
INTRODUCCIN
Existen diversos estados de maduracion en el megacariocito que van de la siguiente manera:
Megacarioblasto. Etapa I. La primera clula en la secuencia de maduracin. Tiene un

tamao de entre 6 a 24 m de dimetro, citoplasma basfilo que se colorea de azul
oscuro, sin grnulos y es frecuente la presencia de prolongaciones pseudopdicas. El
ncleo es nico, de forma elptica con dos a seis nuclolos; la cromatina es laxa.
Promegacariocito. Etapa II. Su tamao oscila entre 14 y 50 m, el citoplasma

contiene grnulos azrfilos visibles, formados en la regin perinuclear o de Golgi; el
ncleo es lobulado y puede aparecer con muescas o en forma de herradura. Los
nuclolos han desaparecido. En esta etapa comienza a desarrollarse el sistema de
membrana citoplasmtica denominada sistema de membrana de demarcacin (SMD).
Megacariocito. Etapa III. Se caracteriza por su tamao ms grande 16 - 56 m de

dimetro, y nmeros crecientes de grnulos y membranas de demarcacin. El ncleo
tiene mltiples lbulos y aumenta considerablemente la cantidad de citoplasma.
Megacariocito Maduro. Etapa IV. Liberador de plaquetas, clula de 20 a 60 m de

dimetro, en ocasiones puede llegar alcanzar hasta 100 m. Son clulas gigantes
caractersticas de la mdula sea de todo mamfero adulto. El ncleo est compactado,
pero lobulado. El citoplasma es abundante y ms rosado con muchos grnulos rojo-
violceos (azurfilos) que se encuentran organizados dentro de zonas que estn
separadas por la membrana de demarcacin. Generalmente, se ubican en la cercana de
los capilares sanguneos. En la etapa final de la maduracin, el megacariocito maduro
libera segmentos citoplasmticos, la membrana que reviste a los canales de
demarcaciones originan por invaginacin de la membrana plasmtica; por lo tanto,
estos canales estn en comunicacin con el espacio extracelular. El posterior desarrollo
y fusin de las membranas de demarcacin plaquetaria hace que los fragmentos
citoplasmticos se separen por completo para formar las plaquetas individuales en
grupos llamados proplaquetas. Cada megacariocito produce de 7 a 8 proplaquetas. Se
piensa que las proplaquetas se fragmentan despus en plaquetas, aunque el proceso an
no se ha observado (Leeson, 1990; Mckenzie 2000; Abbott, 2002; Ross et al, 2004;
Rodak, 2005).
51
INTRODUCCIN
Plaquetas. Son los elementos de sangre perifrica de menor tamao, pueden variar
entre 1 y 4 m y estn desprovistas de ncleos, por lo que no son clulas verdaderas,
sino fragmentos citoplasmticos provenientes del megacariocito. Presentan forma
redonda u ovalada, planas y con forma de disco y emitiendo prolongaciones delgadas
Su vida media es de aproximadamente 10 das. Exhiben un centro intensamente teido,
el granulmero, y una periferia menos coloreada, el hialmero. Los principales
componentes del hialmero son microtbulos y filamentos de actina. El citoplasma de
las plaquetas incluye dos tipos de grnulos, los grnulos lisosmicos y los grnulos
muy densos (que contienen serotonina). Normalmente 66% de las plaquetas se localiza
en la circulacin de la sangre y 33% se localiza en el bazo.
La actividad de las plaquetas es necesaria para la coagulacin de la sangre, integridad vascular

y vasoconstriccin y su adherencia y agregacin es indispensable para que se forme un tapn
que obstruye las roturas en los vasos pequeos. Su indispensable participacin en el
mantenimiento de la hemostasia demuestra que para ser importante no es necesario contar con
un gran tamao FIGURA 5 (Ham, 1988; Leeson, 1990; Mckenzie 2000; Abbott, 2002; Ross et
al, 2004; Rodak, 2005).
Valores Normales de plaquetas

150 a 440 x 103 / mm3
Trombocitopenia: es la reduccin anormal en el nmero de las plaquetas y se observa en

diversas alteraciones:
a) Anemias
b) Transfusin sangunea masiva
c) Infecciones por virus y bacterias
d) Insuficiencia cardiaca congestiva
e) Quimioterapia y radioterapia para cncer.
f) Infeccin por VIH.
g) Lesin de la mdula sea
h) Leucemias
i) Hemorragias
52
INTRODUCCIN
Trombocitosis es el exceso de plaquetas debido a:

a) Cncer
b) Leucemias
c) Artritis Reumatoide
d) Infecciones agudas
e) Enfermedades inflamatorias
FIGURA 5.- PLAQUETAS De Carrillo F.J. 2005 Atlas digital

De hematologa.
53
DESARROLLO EN EL REA DE TRABAJO
2. DESARROLLO EN EL REA DE TRABAJO
En el rea de hematologa se brinda atencin a enfermos con neoplasias hematolgicas,

leucemias agudas y crnicas, linfomas malignos, mieloma mltiple y otros tumores slidos
que requieren apoyo hematolgico intenso.
El servicio brinda apoyo a pacientes externos (ambulatorios) y pacientes internos que son
aquellos pacientes hospitalizados en diferentes servicios como son: hospitalizacin (1, 2 y
3er piso), Unidad de Transplante de Mdula sea (UTMO), Unidad de Terapia Intensiva
(UTI) y Urgencias.
Se participa en la formacin de tcnicos en Servicio Social de diferentes escuelas, as como en

prcticas profesionales de qumicos en el postgrado de Qumica Clnica de la Facultad de
Qumica de la UNAM.
Cabe mencionar que el Instituto cuenta con una jornada acumulada de trabajo que comprende
los das sbados, domingos y das festivos, en los cuales el Laboratorio ofrece un servicio de
urgencias.
2.1 RECOLECCIN DE LA MUESTRA
Los estudios de laboratorio se inician con la preparacin del paciente, continan con la
obtencin de la muestra por estudiar, el anlisis clnico que es la observacin o medicin de
uno o ms magnitudes biolgico-clnicas y el informe de los resultados.
La sangre entera (sin centrifugar) debe colectarse de manera asptica por medio de una
puncin venosa, con una previa preparacin del paciente, que consiste en cumplir con un
ayuno mnimo de cuatro horas. La manera ms comn de recoleccin de las muestras de
sangre es el empleo de un sistema de tubos al vaco. Este sistema presenta un tubo, que puede
ser de plstico o vidrio, una aguja y un adaptador, que se utiliza para asegurar la aguja y el
tubo; otra manera de recoleccin es por medio de una jeringa. Cuando se usa un sistema de
tubo al vaco el ltimo tubo en ser tomado debe ser la muestra de biometra hemtica (tubo
54
con tapn color lila o morado) para evitar la interferencia del anticoagulante con los otros
tubos o muestras que se toman al mismo tiempo.
Una vez tomada la muestra los tubos deben invertirse varias veces para asegurar la mezcla
adecuada despus de la recoleccin (Rodak, 2005).
Para estos tubos debe ser usado un anticoagulante, esta sustancia impide la formacin de
cogulos, que en este caso es cido etilendiaminotetraactico (EDTA) liofilizado (Na2),
EDTA lquido o en spray, que al igual que otros anticoagulantes atrapa los iones de calcio
para evitar que la sangre se coagule, pero adems las muestras con EDTA se pueden conservar
toda la noche a 4 C sin inconvenientes; permite que se realicen recuentos de glbulos rojos,
blancos y hematocrito an al cabo de muchas horas. As mismo pueden prepararse 3 o 4 horas
despus de la puncin buenos frotis por ser el que mejor conserva la morfologa de las clulas
sanguneas, tanto de leucocitos como eritrocitos, esta sustancia tiende a impedir que las
plaquetas se aglutinen o se peguen a superficies, por tanto, se hace posible efectuar recuentos
bastante exactos (Lynch, 1972).
El volumen mnimo requerido de sangre es de 1.0 mL y el mximo de 3.0 mL El volumen

requerido por el equipo es de 300 L.
La muestra debe estar perfectamente identificada, con una etiqueta con cdigo de barras que
contiene los datos del paciente: nombre completo, nmero de registro, fecha de la toma y
ubicacin del paciente (nmero de cama) en caso de que el paciente este hospitalizado
(FIGURA 6).
FIGURA 6.- IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA DE UN PACIENTE
55
Las muestras deben cumplir con ciertas condiciones que de no ser as debern ser rechazadas
para garantizar resultados correctos de la misma. Las muestras rechazadas son aquellas que
presenten por lo menos uno de los siguientes puntos:
Muestras Hemolizadas
Muestras mal etiquetadas
Presencia de macropartculas
Muestras coaguladas
Volumen insuficiente La cantidad de muestra ideal u ptima es la especificada segn
la marca comercial de tubos, ya que una cantidad de aditivo puesta en un tubo es
proporcional para un cierto volumen de sangre.
Cuando una muestra es rechazada, el responsable del rea debe comunicarlo a la recepcionista
para que de aviso al mdico encargado del servicio, solicitando nueva muestra o cancelando el
anlisis y llenar un repote de no conformidad (FR-AC-10) como se establece en el
procedimiento general de control de producto no conforme (PG-JEF-03).
Es ideal que dicha muestra se procese en el momento o en un plazo no mayor de dos horas. Si
la muestra va ser procesada despus de este tiempo lo ideal es que se mantenga a una
temperatura de refrigeracin entre 2 y 8C, evitando la deformacin celular provocada por las
bacterias.
Si la muestra requiere salir del laboratorio debe ser colocada en contenedores rgidos de
plstico perfectamente bien cerrados, los cuales deben proporcionarle seguridad y facilidad de
transporte a la muestra.
EQUIPO NECESARIO
Guantes
Gradillas
Gasas
Portaobjetos
Capilares o Dispensores
56
Microscopio
Aceite de inmersin
Contador de clulas
Analizador Automatizado GEN-S de COULTER
Reactivos propios del equipo
Los reactivos usados por el GEN-S de Coulter cumplen diferentes funciones:

LYSE S III DIC (COULTER LYTIC REAGENT) Destinado solo para usarse con
Isoton III y con el agente limpiador Coulter Clenz,
Rpidamente lisa los eritrocitos dejando libre la hemoglobina
Causa una conversin substancial de la hemoglobina en un pigmento que contiene
cianida
COULTER CLENZ (CLEANIIG AGENT) Es un agente limpiador como su nombre lo
indica
Limpia y enjuaga las superficies internas de los componentes del instrumento
Prev la acumulacin de protenas y las elimina
ISOTON III (Biodegradable) Solucin isotnica electroltica balanceada
Verifica recuentos de fondo antes de analizar muestras de paciente
Diluye la muestra de sangre completa
Estabiliza las membranas de la clula completa
Lava los componentes del instrumento entre cada anlisis
SCATTER PAK Compuesto de dos componentes, Eritrolyse II y un estabilizador
ERITROLYSES II Reactivo ltico de eritrocitos cuya funcin es:

Diluir la muestra de sangre
Lisar rpidamente los eritrocitos
Reducir las membranas celulares a insignificantes
STABILYSE (Pak preservativo)
Estabiliza y preserva los leucocitos
Mantiene a los leucocitos en estado casi natural
Permite a los leucocitos ser diferenciados en sus subpoblaciones a travs de su
57
Volumen, conductividad y dispersin de la luz

RETIC PAK Contiene un reactivo A y un reactivo B.
Reactivo A Formulado especialmente Nuevo azul de Metileno
Tie los reticulocitos
Reactivo B Solucin limpiadora
Remueve la hemoglobina de los eritrocitos sin remover el precipitado del complejo
RNA y membranas intactas.
2.2 MANTENIMIENTO Y CONTROL DE CALIDAD
El manejo del sistema automatizado requiere de una previa preparacin antes de su uso
adecuado, este consiste en un mantenimiento y un proceso de control de calidad que son
necesarios para verificar un excelente funcionamiento del instrumento, tanto en su sistema de
electrnica (el analizador electrnico), como de mecnica (sistemas hidrulicos y sistemas
neumticos); al mismo tiempo que se evalan las condiciones de los reactivos usados, lo cual
se utiliza para asegurarse que los resultados de la prueba cumplan con los requerimientos de
calidad (Rodak, 2005). El Control de Calidad es un conjunto de procedimientos que mediante
el uso de parmetros estadsticos, garantizan de una manera fcil y rpida la confiabilidad de
los resultados. Para tener la certeza y confiabilidad de los resultados es indispensable manejar
una serie de controles que nos van a indicar la precisin y exactitud con la que estamos
reportando los resultados. Una muestra control es una muestra especial insertada en el proceso
de comprobacin y tratada como si fuera la de un paciente. Debe tener concentraciones
apropiadas en niveles significativos, tienen un valor asignado con precisin que ya se prob
segn el mtodo de referencia (Rodak, 2005).
Para este fin se utilizan controles o estndares conocidos (Latron y 5C), que deben ser 3
niveles diferentes (bajo, normal y alto) para poder establecer una relacin matemtica
predecible entre el valor verdadero del analito y el resultado del instrumento, con lo cual se
confirma la exactitud del instrumento comparando el resultado del mismo contra un valor
estndar aceptable.
58
EL analito es el componente (elemento, compuesto o ion) de inters analtico de una muestra.

La informacin analtica que se obtiene sobre el analito en la muestra puede ser cualitativa (si
el analito esta presente o no en una determinada concentracin en la muestra), cuantitativa (la
proporcin en la que se encuentra) y estructural, en este caso nuestros analitos son el valor de
cada uno de los parmetros que componen la biometra hemtica (LEU, Hg; HCT, etc.).
Una vez concluido el procedimiento se puede tener la seguridad de que tanto el instrumento
como los reactivos estn en perfectas condiciones para trabajar las muestras. Al proceso en
conjunto se le llama Control de Calidad.
En las poblaciones, la distribucin de muchas determinaciones mdicas se aproxima a la curva

de Gauss. El valor en el centro de una distribucin de Gauss es la media (X). La media es una
medida de tendencia central y se calcula mediante la divisin de la suma de todos los
resultados entre su cantidad. La distribucin gaussiana de los resultados cerca de esta media se
expresa como desviacin estndar (s), que es un a medicin estadstica de la imprecisin
entre las observaciones de resultados analticos (Ross et al, 2004)
El Control de Calidad se puede representar de manera grfica o estadstica. De manera grfica

se usan las grficas de Levey- Jennings, son grficas de control en donde los datos son
registrados uno a uno en funcin del tiempo y expresan la precisin y la exactitud de los
resultados, indica la media y los lmites de desviacin estndar 1, 2 y 3 previamente
establecidas a ambos lados de la media; la desviacin de esta distribucin indica la presencia
de un error sistemtico. Por consiguiente, en una distribucin aleatoria, alrededor del 65 % de
los valores estar entre los lmites 1s (desviacin estndar) y se distribuir de manera
uniforme a ambos lados de la media. En un sistema operativo adecuado, el 95 % de los valores
debe estar comprendido entre los lmites 2s y el 99 % entre los lmites de 3s por cada cien
anlisis, significa que se produjo un error y debe ser investigado. Los lmites de 2 s se
consideran lmite de alerta. Los valores que exceden los limites de 2s y 3s son los de rechazo.
Cuando un punto excede los lmites esperados, el anlisis debe detenerse, los resultados de los
pacientes deben conservarse y es preciso investigar el sistema (Rodak, 2005). En la forma
59
estadstica se utiliza la media (X), desviacin estndar (DS) y coeficiente de variacin (CV);
es una estadstica descriptiva que nos proporciona herramientas para poder interpretar los
datos recolectados, nos permite evaluar el desempeo de la metodologa empleada, facilita la
toma de decisiones y nos auxilia a enfocarnos en reas especficas del sistema para tomar
acciones correctivas. La interpretacin de los resultados permite verificar que el sistema est
teniendo un comportamiento normal. Los lmites para aceptar un control como bueno
corresponden a 2 desviaciones estndar (DE) en funcin de la media establecida en el
inserto, o bien, calculada a partir de 20 datos obtenidos, estableciendo como lmite de
imprecisin un coeficiente de variacin (CV) mximo de 4 %.
El valor de cada analito puede variar de lote a lote y los lmites de aceptacin se observan en
las grficas de Levey Jenning las cuales son presentadas por el propio instrumento. (FIGURA
7)
En caso de que una corrida sea rechazada, debe repetirse el ensayo, si despus de ello no se
corrigen los valores deben indagarse las posibles causas de error, en hematologa, las
tendencias pueden producirse por un deterioro de reactivo, ya sea caducado y / o
almacenamiento inadecuado del mismo o del control o problemas con la tubera de la bomba o
fuente de luz, si al corroborar estos detalles el error persiste, se busca alguna falla sencilla en
el equipo, si despus de esto el error contina es conveniente dar aviso al servicio de soporte
tcnico especializado del proveedor del instrumento.
FIGURA 7.- REGISTRO DE UNA GRFICA DE LEVEY JENNING PARA EVALUAR LOS
LOS RESULTADOS DE QC PARA LEUCOCITOS OBTENIDO DEL GEN-S
60
METODOLOGA
La manera de poner en prctica el control de calidad es la siguiente.
El primer paso consiste en darle al equipo un arranque o inicio STAR UP que se encarga de
realizar un lavado y purgado de los reactivos correspondientes en mangueras y tuberas;
inmediatamente realiza lecturas de fondo ya que hace lecturas de voltaje, revisando al mismo
tiempo las presiones, que valora el sistema neumtico. Las funciones que valora deben ser
aceptadas por el mismo equipo, el procedimiento tarda alrededor 11- 15 minutos.
El siguiente paso consiste en hacer pasar dos controles llamados Latron 1 (cebador) y Latron
2:
Latron 1. Es una solucin que prepara la lnea de muestras del analizador que elimina las
partculas que pudieran interferir, los residuos en la lnea de muestra pueden afectar el
rendimiento del control a travs de coeficientes de variacin aumentados para los parmetros
del volumen, la conductividad y la dispersin de la luz lser.
Latron 2. Los analizadores hematolgicos Coulter con tecnologa VCS (volumen,

conductividad y dispersin de la luz) requieren un material de control de calidad estable de
tamao uniforme, con caractersticas de dispersin de la luz lser adecuadas.
El control supervisa la estabilidad del procesamiento elctrico y los sistemas de evaluacin del
flujo fludico usados para medir el volumen, la conductividad y la dispersin de la luz lser.
Despus de que el instrumento ha aspirado el primer Latron se examinan los resultados del
recuento los cuales deben ser menores o iguales a 500 si esto es afirmativo se procede con el
segundo Latron.
El Latron 2 es una suspensin de partculas de latx. Estas partculas pasan a travs de la

clula de flujo y producen seales elctricas que se miden como volumen, conductividad y
dispersin de la luz para el control de calidad de los analizadores hematolgicos.
61
Esta vez se examina la media de los resultados del canal y el coeficiente de variacin de
volumen, conductividad y dispersin de la luz, los resultados obtenidos se deben comparar con
los de la TABLA DE RESULTADOS ESPERADOS que ya han sido configurados
previamente en el archivo de controles del instrumento.
Si un resultado excede los lmites del ensayo es necesario averiguar la causa.
El tercer paso en el control de calidad es trabajar los controles celulares 5C (tres niveles) que
se utilizan para controlar y evaluar el funcionamiento del analizador Coulter. Los valores y los
intervalos esperados que aparecen en la TABLA DE RESULTADOS ESPERADOS pueden
ser utilizados para controlar la actuacin del instrumento y tambin para establecer los valores
promedio del laboratorio.
El control celular 5C es un producto de referencia preparado sobre la base de sangre humana

estabilizada y esta diseado para confirmar y controlar la exactitud y precisin del
instrumento, mediante mediciones para el recuento, la determinacin de tamao, la
determinacin de la hemoglobina y la diferenciacin de leucocitos mediante la tecnologa
VCS.
El control celular 5C es un preparado de hemates humanos tratados y estabilizados en un

medio isotnico y bacteriosttico.
Despus de seguir las instrucciones de uso como son el que los controles alcancen la
temperatura ambiente y la adecuada homogenizacin, los tres niveles (bajo, normal y alto) son
manejados en el instrumento como las muestras de un paciente. Se colocan en un rack el
cual lee la etiqueta de cada uno por medio del lector de cdigo de barras, los controles son
aspirados y los resultados obtenidos por el instrumento son comparados con los resultados
designados, que figuran en la TABLA DE RESULTADOS ESPERADOS.
Una vez que se observa que el 95% de los valores obtenidos de los controles se encuentran
dentro de los LMITES ESPERADOS del valor asignado por la compaa y que los valores
obtenidos no muestran una tendencia a aumentar o a disminuir fuera de los lmites esperados,
se considera que el instrumento est bien mantenido y funcionando correctamente.
62
2.3 PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
El termino citometra hemtica CH es el ms adecuado para referirse a la medicin de las

clulas de la sangre. La interpretacin correcta de la CH supone el anlisis detallado de cada
uno de los datos que informa, los cuales pueden dividirse en tres grupos: datos de la serie roja,
de la serie blanca y de la serie tromboctica. Idealmente, la medicin de todos los parmetros e
ndices eritrocticos debe hacerse empleando contadores de partculas por citometra de flujo
(Ruiz, 2004).
Beckman Coulter, Inc. fabrica una extensa lnea de analizadores hemticos, entre los que se
encuentra el ms nuevo el GEN-S System, este equipo proporciona un anlisis completo de
eritrocitos, plaquetas y leucocitos con recuento diferencial de cinco componentes y anlisis de
reticulocitos en lnea automatizado por completo
La medicin de cada uno de los parmetros que conforman la biometra hemtica se realiza en
un instrumento GEN-S de Coulter, el cual es un analizador hematolgico automatizado para
uso de diagnstico in vitro en el laboratorio clnico.
El GEN-S es un citmetro de flujo que utiliza la tecnologa VCS (Volumen, Conductividad y

Dispersin) que permite la clasificacin de las clulas segn el tamao volumtrico y
caractersticas fsicas de las mismas con una fuente de luz lser realizadas en forma
simultnea.
Un lser es un tubo hueco, cerrado, que contiene un gas inerte, como argn, helio o nen. Con
el paso de una corriente elctrica a travs de este tubo lleno de gas se produce una luz de lser
intensa denominada monocromtica, ya que se emite como una longitud de onda individual,
que excita las molculas gaseosas inertes en un nivel de energa ms alto. Cuando estos iones
excitados retroceden a su estado natural de entropa baja, la energa se libera en forma de un
fotn de luz. La luz en el tubo lser se intensifica con una serie de espejos y por ltimo se
emite como un haz de luz estrecho de una sola longitud de onda especfica. La longitud de
onda de la luz monocromtica es caracterstica del gas dentro del tubo lser.
63
Se aspira una muestra dentro de la tubera que contiene una corriente de lquido que se mueve
hacia la periferia (la cubierta) y una corriente central de lquido (la muestra con las clulas). La
corriente de la muestra se centra en forma hidrodinmica en una sola lnea de partculas o
clulas mediante el ajuste de la presin externa sobre la cubierta y la velocidad de la corriente.
Esto hace que las clulas se muevan en una sola hilera delante del haz de lser, como cuentas
en un cordn en el centro de la corriente del lquido. El trmino utilizado para el movimiento
de dos lquidos que pasan entre s sin mezclarse es el flujo laminar.
El haz lser se enfoca en clulas individuales mediante una serie de lentes y prismas. Esta luz
puede medirse a medida que se refleja o se dispersa fuera de las clulas.
Para el funcionamiento de este equipo se utilizan sobre todo dos principios bsicos: la
impedancia electrnica y la dispersin ptica.
Impedancia electrnica
El principio de la impedancia o resistencia a la corriente continua de bajo voltaje fue

desarrollada por Wallace Coulter en 1950. Se basa en la deteccin y la medicin de cambios
en la resistencia elctrica producida por las clulas cuando atraviesan una apertura pequea.
Las clulas suspendidas en un diluyente conductor de la electricidad, como solucin
fisiolgica, se arrastran a travs de una apertura (orificio) en un tubo de vidrio. En la cmara
de recuento, o ensamblaje del transductor, se aplica la corriente elctrica de baja frecuencia
entre un electrodo externo (suspendido en la dilucin celular) y uno interno (alojado dentro del
tubo de apertura). La resistencia elctrica entre los dos electrodos, o la impedancia en la
corriente, se produce a medida que las clulas atraviesan la apertura, que tiene sensores y
produce pulsos de voltaje medibles (FIGURA 8).
El nmero de pulsos es proporcional al nmero de clulas contadas. El tamao del pulso de

voltaje es directamente proporcional al tamao (volumen) de la clula, lo que permite la
discriminacin y el conteo de clulas de tamao especfico mediante el uso de circuitos
umbral. Los pulsos se renen y ordenan (canalizan) segn su amplitud mediante analizadores
de la altura de los pulsos (Mckenzie, 2000; Rodak, 2005).
64
FIGURA 8.- MTODO ELECTRNICO De Carrillo F. J. 2005 Atlas de

Hematologa.
Dispersin ptica
Una serie de detectores de luz denominados fotodiodos o tubos fotomultiplicadores colecta la

luz dispersa alrededor de las clulas y a travs de ellas en la lnea del haz lser.
A medida que las clulas atraviesan la zona sensora e interrumpen el haz, la luz se dispersa en
todas las direcciones. La luz dispersa como resultado de la interaccin entre los procesos de
absorcin, difraccin (cambia de direccin alrededor de los ngulos o la superficie de la
clula), refraccin (cambia de direccin debido a un cambio en la velocidad) y reflexin (los
rayos se dirigen hacia atrs a causa de la obstruccin).
La deteccin y la conversin de los rayos dispersados en seales elctricas se logran mediante

los fotodiodos en ngulos especficos.
La dispersin frontal de la luz (0) refleja caractersticas celulares nativas o intrnsecas, se

correlaciona con el volumen celular o el tamao, debido sobre todo a la difraccin de la luz.
La dispersin lateral u ortogonal de la luz se refiere a la luz desviada a travs de las clulas o
alrededor de ellas en un ngulo de (90) al haz lser, es consecuencia de la refraccin y la
reflexin de la luz provenientes de las estructuras ms grandes dentro de las clulas y revela
informacin acerca de la densidad celular, la complejidad nuclear o la granularidad celular.
65
La luz desviada fuera de las clulas nativas por lo general se convierte a un diagrama de
dispersin donde cada punto representa una sola clula de un tamao y densidad
determinados. Las plaquetas, los linfocitos, los monocitos, los neutrfilos granulares y otras
clulas neoplsicas aparecen en localizaciones especficas en el diagrama de dispersin, que se
utiliza para aislar en forma electrnica o seleccionar poblaciones celulares (Mckenzie, 2000;
Rodak, 2005).
El analizador hemtico tiene algunos componentes bsicos como: el sistema hidrulico,

neumtico y elctrico. El sistema hidrulico incluye la unidad de aspiracin, los
dispensadores, los diluyentes, las cmaras de mezclado, los baos de apertura, el flujo de
clulas o ambos y un hemoglobinmetro. En el sistema neumtico se incluye el vaco y las
presiones requeridas para que operen las vlvulas y transporten la muestra a travs del sistema
hidrulico. El sistema elctrico controla las secuencias operacionales del sistema total e
incluye analizadores electrnicos y circuitos computarizados para el procesamiento de los
datos generados (Rodak, 2005).
El equipo Coulter tiene dos canales de medicin en el sistema hidrulico para determinar los
datos de la biometra hemtica: los recuentos de eritrocitos y leucocitos, y la determinacin de
hemoglobina (HGB) se miden en forma directa.
Las muestras se colocan en un rack con el cdigo de barras de frente, para que la muestra sea
identificada por el lector de cdigo de barras del equipo y sean analizadas. La muestra de
sangre entera (anticoagulada con EDTA) aspirada se divide en dos porciones y cada una se
mezcla con un diluyente isotnico. La primera dilucin se entrega a la cmara de apertura de
eritrocitos y la segunda a la cmara de apertura de leucocitos. En el primer caso se cuentan los
eritrocitos y las plaquetas, y se diferencian por la impedancia elctrica a medida que las
clulas pasan a travs de cada una de las tres aperturas con sensores (50 de dimetro, 60 de
longitud). Las partculas entre 2 y 20 femtolitros (fL) se cuentan como plaquetas y las de ms
de 36 fL, como eritrocitos. En la cmara de leucocitos, se agrega un reactivo para lisar los
eritrocitos y liberar la hemoglobina antes de contar los leucocitos en forma simultnea por la
impedancia en cada una de las tres aperturas sensoras (100 de dimetro, 75 de longitud).
66
Los pulsos elctricos generados en los ciclos de conteo se envan al analizador para la
revisin, correccin de la coincidencia y conversin digital. Dos de los tres recuentos
obtenidos en los recipientes de eritrocitos y leucocitos deben concordar.
HEMATOCITMETRO VS CITMETRO DE FLUJO
La evolucin de la instrumentacin en hematologa se inicio a mediados de 1950.

Tradicionalmente, la clasificacin y el diagnstico de las neoplsias hematopoyticas
incluyeron el examen microscpico de sangre perifrica, mdula sea, ganglio linftico, bazo
u otros tejidos. Los profesionales del laboratorio clnico practicaban en ese tiempo
manualmente conteos de eritrocitos en el hematocitmetro (cmara de Neubauer),
hematcritos con centrifugacin, hemoglobinas determinadas espectofotomtricamente y
exmenes microscpicos de frotis de sangre.
El hematocitmetro consiste en dos plataformas de vidrio rayadas de manera idntica y

montadas en un sujetador de vidrio. Cada plataforma contiene un cuadro rayado que mide 3 x
3 mm (9mm2) y se subdivide al cuadrado rayado en 9 cuadros grandes, cada uno de los cuales
mide 1 x 1 mm (1 mm2). Los cuadros grandes de las esquinas se usan para el conteo de los
leucocitos y cada uno se divide en 16 cuadros menores. El cuadro grande central (1 mm2) se
usa para el conteo de plaquetas y eritrocitos. Este cuadro se divide en 25 cuadros ms
pequeos, cada uno con un rea de 0.04 mm2; y cada uno de los 25 cuadros se divide
adicionalmente en 16 cuadros ms pequeos. Los cinco cuadros se usan para practicar el
conteo de eritrocitos, mientras que el cuadro central completo se usa para realizar el conteo de
las plaquetas.
A cada lado de las dos plataformas de vidrio rayado del hematocitmetro hay un borde
elevado sobre el cual se coloca un cubreobjetos. La distancia entre el cubreobjetos y la
superficie del rea rayada (profundidad) es exactamente de 0.1 mm.
67
Los adelantos en la tecnologa permitieron el diseo de citmetros de flujo fciles de utilizar y

desplazaron al hematocitmetro o cmara de Neubauer cuando se observan las ventajas que el
clitmetro tiene frente al hematocitmetro. Son varias las ventajas que ofrece la
automatizacin. La evaluacin morfolgica de muchas neoplasias hematopoyticas puede ser
difcil y propensa a una variacin importante entre los microscopistas experimentado.
En el hematocitmetro la separacin celular puede ser difcil desde el punto de vista tcnico,
se invierte tiempo y es muy laboriosa; mientras el examen microscpico de las clulas teidas
con colorantes consume mucho tiempo y es subjetivo, y puede evaluar solo unos cientos de
clulas, en el anlisis de clulas por citrometra de flujo el nmero de clulas contadas por
muestra es aproximadamente 100 veces mayor que los recuentos microscpicos, reduciendo el
error estadstico aproximadamente 10 veces y proporciona un registro impreso y cuantitativo
(Beckman y Coulter, 2001). La hoja 1 representa un registro impreso del GEN-S de un
paciente normal (sano).
El instrumento emplea un sistema de medicin no ptico que provee un rango de medicin

que excede las 6,000 clulas individuales por segundo con un intervalo de conteo de 15
segundos (Beckman y Coulter, 2001).
Los sistemas de deteccin de luz en los citmetros de flujo moderno son ms sensibles que el
ojo humano.
Sin embargo, el uso apropiado de un citmetro de flujo requiere la presencia de personal

experimentado y entrenado para mantener y operar este instrumento.
Por esto la automatizacin permite el manejo ms eficiente del volumen de trabajo, as como
el diagnstico y el tratamiento ms oportuno de la enfermedad (Rodak, 2005).
68
RECUENTO DE LEUCOCITOS
Este parmetro es medido directamente por el analizador, y para generar los datos de la
biometra hemtica incluyendo el recuento leucocitario, utiliza la tecnologa VCS de la marca
registrada Coulter en un canal separado para evaluar la determinacin diferencial leucocitaria
en cinco componentes. La tecnologa VCS permite la clasificacin segn el tamao
Volumtrico de las clulas mediante la impedancia, las mediciones de Conductividad de las
clulas y la dispersin (en ingles Scatter) de la luz lser todas realizadas en forma simultnea
para cada clula. Las partculas de entre 35 y 90 fL se consideran linfocitos, entre 90 y 160 fL,
mononucleares (monocitos, blastos, granulocitos inmaduros y linfocitos), y entre 160 y 450
fL granulocitos de esta forma es posible realizar el clculo de las cifras relativas y absolutas de
estas poblaciones.
Despus de lisar los eritrocitos y tratar los leucocitos con un reactivo estabilizador para
mantenerlos en un estado casi nativo, una corriente de la muestra centrada en forma
hidrodinmica se dirige a travs del paso del flujo celular por la zona sensora. La corriente
continua de baja frecuencia mide el tamao mientras una sonda electromagntica de alta
frecuencia mide la conductividad, un indicador del contenido interno celular. Cada clula
tambin se analiza con la luz lser monocromtica que revela informacin sobre la superficie
celular como su estructura, forma y reflectividad, que es la capacidad de reflejar una cierta
cantidad de luz (Rodak, 2005).
En cada muestra se analizan ms de 8,000 leucocitos.
PORCENTAJE DE DIFERENCIAL AUTOMATIZADO %NEUTROFILOS (NE), %LINFOCITOS

(LIN), %MONOCITOS (MONO), %EOSINOFILOS (EOS) y %BASOFILOS (BASO)
Tres mediciones directas (Volumen, Conductividad y Dispersin de Luz) son tomadas en

cuenta para cada leucocito a medida que pasa a travs de la apertura de una celda de flujo.
Estos datos son registrados tridimensionalmente, las poblaciones de clulas son identificadas y
los porcentajes son reportados (FIGURA 9).
69
FIGURA 9.- ANLISIS TRIDIMENSIONAL DE LOS LEUCOCITOS
NMEROS ABSOLUTOS #NEU, #LIN, #MONO, #EOS y #BASO
El nmero absoluto para cada una de las cinco poblaciones de leucocitos es calculado
multiplicando el porcentaje diferencial para cada poblacin por el recuento de leucocitos que
fue determinado en el bao de la abertura de LEU.
#DIF = %DIF X LEUC

100
CONTEO MANUAL DE LEUCOCITOS
En el hematocitmetro la sangre entera se diluye con una solucin de cido actico al 3 % que
hemoliza a los eritrocitos maduros y facilita el conteo de los leucocitos. La dilucin estndar
para el conteo de los leucocitos es de 1:20 y se prepara con pipetas para dilucin de leucocitos.
La dilucin de leucocitos se mezcla bien y se monta en un hematocitmetro; se permite que las
clulas se asienten y luego se cuentan en cuatro cuadros de las esquinas en la cmara con el
uso de un objetivo de bajo aumento (10x). Con el ajuste apropiado de la luz, los leucocitos
deben presentarse como puntos oscuros.
70
El nmero de leucocitos se calcula por L (x109/L) de sangre. Para hacer esta determinacin,
el nmero total de clulas contadas debe corregirse por la dilucin inicial de la sangre en el
volumen de sangre usado. La dilucin clsica de la sangre para el conteo de los leucocitos es
de 1:20; por lo tanto el factor de dilucin es 20. El volumen de sangre usado se basa en la
superficie y profundidad del rea de recuento. La superficie es de 4 mm2 y la profundidad de
0.1 mm; por lo cual el factor volumen (superficie x profundidad) es de 4 mm3 (Mckenzie,
2000).
RECUENTO DE ERITROCITOS
En el sistema automatizado el recuento de eritrocitos es un parmetro medido directamente. La

dilucin de ERIT contiene eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Los umbrales de tamao son
usados para separar los pulsos de plaquetas, los cuales son mucho ms pequeos, de los
impulsos de eritrocitos y leucocitos. Las partculas que son de 36 fL o mayores son contados
como eritrocitos. Los leucocitos presentes en la dilucin son incluidos en el recuento de
eritrocitos, no obstante, su interferencia es normalmente insignificante debido a que son
solamente unos pocos de miles en comparacin con los millones de eritrocitos.
El volumen corpuscular medio (VCM) eritrocitario es su promedio tomado de los datos de

distribucin de tamao. El hematcrito (Hto), la hemoglobina corpuscular media (HCM) y la
concentracin hemoglobnica corpuscular media (CMHC) se calculan a partir de valores
medidos y derivados. La amplitud de la distribucin de los eritrocitos (ADE) se calcula
directamente a partir del histograma como el coeficiente de variacin (CV) de la distribucin
del volumen eritrocitario (Rodak, 2005).
CONTEO MANUAL DE ERITROCITOS
La sangre entera se diluye con solucin salina a 0.85 % lo cual evita la lisis de los eritrocitos y
facilita su conteo. La dilucin estndar para el conteo de los eritrocitos es de 1:200. Esta
dilucin puede prepararse con pipetas para dilucin de eritrocitos. La dilucin se mezcla bien
y se monta en la cmara de Neubauer. Se permite que las clulas se asienten y luego se cuenta
en cinco de los lados ms pequeos dentro del cuadro central, con el uso de objetivo alto seco
(40x).
71
Se calcula el nmero de eritrocitos por L (x1012/L) de sangre con el uso de la frmula de

clculo para conteos de clulas del hematocitmetro. Las variaciones se dan con el factor de
dilucin y con el factor de volumen. Para el conteo de los eritrocitos el factor de dilucin es
200y el factor de volumen de 0.02 mm3 (superficie = 0.2 mm2; profundidad 0 0.1 mm)
(Mckennzie, 2000).
CONCENTRACIN DE HEMOGLOBINA
La concentracin de hemoglobina es un parmetro medido directamente. Despus de que se

completan los ciclos de recuento, la dilucin de leucocitos pasa al hemoglobinmetro para la
determinacin de la hemoglobina. El reactivo ltico es aadido a la dilucin de LEU para lisar
o romper los eritrocitos y convertir la hemoglobina liberada en un pigmento estable de cianuro
que puede ser medido fotomtricamente (lectura de transmitancia de la luz a una longitud de
onda de 525 nm). Mientras ms hemoglobina hay presente en la muestra, ms luz es
absorbida.
RECUENTO DE PLAQUETAS
Aunque las plaquetas son medidas directamente usando el Principio Coulter, se utilizan 64
canales para el anlisis de las plaquetas. Las plaquetas se cuentan dentro de los lmites de 2 a
20 fL y se construye un histograma de distribucin de tamao. S esta cumple los criterios
especificados, a los datos en bruto se les aplica el ajuste estadstico por cuadrados mnimos, lo
que los adapta a una curva logartmica normal. Esta ltima se extrapola de 0 a 70 fL y el
recuento final deriva de esta curva extendida. Este procedimiento de ajuste elimina las
partculas que interfieren en la regin de ruido como los detritos, micro burbujas, fragmentos
de eritrocitos y en la regin ms grande, como eritrocitos excepcionalmente pequeos. El
resultado final es un recuento de plaquetas ms preciso. Por lo general, el tamao de las
plaquetas es inversamente proporcional al recuento de plaquetas (Rodak, 2005).
72
CONTEO MANUAL DE PLAQUETAS
La sangre entera se diluye con una solucin de oxalato de amonio al 1 %. La dilucin

estndar para los conteos de plaquetas es de 1:100. La dilucin se mezcla bien y se monta en
ambos lados de la cmara. Se permite que las clulas se asienten y con el uso de objetivo a
seco fuerte (40x) se cuentan las plaquetas en el cuadro central grande (1 mm2) de ambas
cmaras de conteo (la superficie total contada es de 2 mm2). Con microscopia de fase las
plaquetas se observan como cuerpos redondos u ovales.
El nmero de plaquetas se calcula por L (x 109/L) de sangre con el uso de la frmula de

clculo para conteo de clulas del hematocitmetro. Para las cuentas de plaquetas el factor de
dilucin es de 100 y el factor de volumen es 0.2 mm3 (Mckenzie, 2000).
RETICULOCITOS
Los analizadores evalan los reticulocitos por dispersin ptica despus de tratar los
eritrocitos con colorantes para cidos nucleicos ello viene sealado por la existencia de RNA
residual que precipita con ciertos colorantes, tales como el azul de metileno. El mtodo
Coulter utiliza una coloracin supravital como el nuevo azul de metileno con el anlisis de la
citometria de flujo y la tecnologa VCS descrita antes (Rapaport, 2002 y Rodak 2005).
El RNA residual de los eritrocitos es teido con el nuevo azul de metileno (reactivo A), una
porcin de la sangre teida es lavada con el reactivo B que elimina la hemoglobina pero
preserva el RNA teido en la clula. Esta porcin de muestra es aspirada en la celda de flujo y
las clulas son medidas usando la tecnologa VCS.
Los reticulocitos inmaduros se relacionan con el volumen celular y con la dispersin de la luz,
entre ms inmaduros son ms grandes y tienen ms RNA esto causa un incremento en la
dispersin de la luz y el volumen celular, as la dispersin de la luz aumenta con la inmadurez
de la clula. El clitmetro de flujo analiza aproximadamente 10 000 clulas para determinar el
porcentaje de reticulocitos as como su cifra absoluta (Mckenzie, 2000).
73
RESULTADOS
3. RESULTADOS
Los resultados obtenidos se usan en el pronstico y/ diagnstico definitivo de una diversidad

de afecciones que incluyen anemias, leucemias, infecciones y trastornos hereditarios de los
leucocitos y en la vigilancia de la teraputica de diversos padecimientos oncolgicos.
Los resultados de una biometra hemtica en el servicio de Hematologa del INCan son muy
diferentes a los obtenidos en hospitales generales, ya que no se esta buscando solo anemias o
infecciones, sino que se habla de afecciones que comprometen a todo el cuerpo humano,
Leucemias, Linfomas, Mielomas, Tumores slidos etc. Es muy importante trabajar en
conjunto con los mdicos para que al momento de observar un valor fuera de rango. No se
debe aceptar ni propiciar, que el servicio se limite a proveer la impersonal informacin tcnica
de resultados numricos como respuesta a la requisicin de estudios del mdico tratante si no
buscar el origen de ello, siendo tal vez por la misma enfermedad o debido al tratamiento, etc.
(Ruiz, 2004). Muchas veces se puede confundir un resultado de leucopenia con un mal
funcionamiento de la mdula sea cuando sabemos que en muchos casos de leucopenia y
neutropenia se presentan por complicaciones de tratamientos de quimioterapia. As mismo,
una leucopenia con un valor menor a 3.0 x 103de /L de leucocitos se usa como ndice para
continuar o suspender un tratamiento de quimioterapia para un paciente y al mismo tiempo se
puede evaluar si la quimioterapia esta dando resultados. Otro aspecto importante es la
hemovigilancia que permite monitorear y prevenir los efectos adversos de una transfusin
sangunea; ya que, proveer datos fehacientes de los efectos adversos a las transfusiones
sanguneas a la comunidad mdica para su anlisis, permite realizar una toma de medidas
correctivas encaminadas a prevenir la causa del efecto adverso para disminuir su recurrencia o
evitarla (Malagn y Martnez, 2005).
En el laboratorio clnico dentro del turno de sbados, domingos y das festivos se trabajan
alrededor de 620 pacientes internos y 440 pacientes externos mensualmente, para el presente
reporte se elabor un anlisis estadstico de los distintos trastornos que se manejan para los
pacientes internos y externos de este hospital (CUADRO 2).
74
RESULTADOS
PACIENTES
TRASTORNOS INTERNOS EXTERNOS
LEUCOPENIA 44 % 45.4 %
LEUCOCITOS
37 % 43.3 %
NORMALES
LEUCOCITOSIS 19 % 11.3 %
ANEMIA 67 % 18.6 %
HEMOGLOBINA
32 % 79 %
NORMAL
HEMOCONCENTRADOS 11 % -
TROMBOCITOPENIA 34 % 6%
PLAQUETAS
41 % 77.3 %
NORMALES
TROMBOCITOSIS 11 % 16.5 %
CUADRO 2.- TRASTORNOS VINCULADOS CON CAMBIOS EN LAS CONCENTRACINES DE

LEUCOCITOS, ERITROCITOSY PLAQUETAS
INTERVALOS DE REFERENCIA
La hoja 2 muestra un reporte impreso de un paciente normal (sano) del resultado final de una
biometra hemtica que es incorporado al expediente de los pacientes con los valores de
referencia manejados para el laboratorio del INCan:
75
RESULTADOS
Valor normal de Leucocitos: 4.8 a 10.8x 103/L
Valor normal de Eritrocitos: 4.5 a 5.5 x 106/ L
Valores normales de Hemoglobina
Mujeres: 12.0 a 16.5 g/dL
Hombres: 13.5 a 18.0 g/dL
Valores Normales de Hematcrito
Mujeres: 36 a 47 %
Hombres: 40 a 54 %
Valor normal de volumen corpuscular medio: 81 a 99 fl
Valor normal de concentracin media de hemoglobina: 27 a 31 pg
Valor normal de concentracin media de hemoglobina corpuscular: 33 a37 g/dl
Valor normal de ancho de distribucin de eritrocitos: 12 a 14 %
Valor normal de plaquetas: 130.000 a 400.000 /mm3
Valor normal de volumen plaquetario medio: 7.5 a 10 fl
RECUENTO TOTAL DE LEUCOCITOS:
Neutrfilos: 40 a 75 % neutrfilos absolutos: 1.4 a 6.5

Monocitos: 2 a 15 % monocitos absolutos: 0.1 a 0.6
Eosinfilos: 0 a 5 % eosinfilos absolutos: 0.0 a 0.7
Basfilos: 0 a 2 % basfilos absolutos: 0.0 a 0.2
Valor normal de Reticulocitos: Hasta 2.0 %
76
RESULTADOS
3.1 VALORES CRTICOS
La revisin de los resultados es importante y de gran ayuda para la toma de decisiones del
mdico, para esto el personal que labora en el laboratorio deber de tener mucho cuidado con
el manejo de los valores crticos, que son aquellos resultados de laboratorio que
potencialmente pueden en forma inminente poner en riesgo la vida de algn paciente.
El rea de hematologa reporta los resultados crticos tan pronto como stos hayan sido
verificados. El comunicado se har a quien corresponda (mdico o enfermera), por medio del
formato FR-TM- 01. El reporte es realizado de acuerdo con el manual de procedimientos del
rea PNT-JEF-01 y con la tabla de valores crticos FR-TM-02, la cual maneja un rango
mnimo de 6.0 g/dL para la hemoglobina, y 10 x 103/L para plaquetas.
Con la experiencia adquirida, se realizo un aporte dentro del rea de hematologa, con la cual
se logr modificar la tabla de valores crticos para los pacientes de UTI (Unidad de Terapia
Intensiva), los cuales manejan valores de hemoglobina de 7.0 g/dL y entre 10 y 20 x 103/L de
plaquetas, ya que su compromiso cardiopulmonar y de vida son muy diferentes a los de los
pacientes internados en otras reas.
Evidencias recientes sugieren que la mayora de los pacientes de cuidados intensivos

hemodinmicamente estables, no toleran menos de 7.0 g/dL de hemoglobina y que las
posibilidades de una hemorragia inminente se presentan en paciente s con un rango de entre 10
y 20 x 103 /L de plaquetas (Fink, 2005; Marini, 2006).
77
EVALUACIN
4. EVALUACIN
Para evaluar las actividades profesionales desarrolladas en este trabajo es necesario realizar un
anlisis de la situacin que la biologa y por ende los profesionales dedicados a esta materia
los bilogos (as) viven actualmente.
Desde mediados del siglo pasado, la biologa se ha colocado en un lugar prominente del
desarrollo cientfico mundial. A principios del siglo XX hubo descubrimientos de la fsica que
revolucionaron la tecnologa, filosofa y otros aspectos culturales; el principio del siglo XXI
ser de la biologa.
As, tenemos que la Biologa es la ciencia de la vida, porque se basa en la observacin de la

naturaleza y experimentacin para explicar los fenmenos relacionados con la vida y, estudia
de manera integral los procesos vitales de los organismos, desde las molculas hasta un
ecosistema, a fin de conocer su organizacin, funcin y diversidad tomando en cuenta su
origen y evolucin.
4.1 LA BIOLOGA EN LA ACTUALIDAD
A pesar del considerable aumento del nmero de instituciones que imparten la profesin, en
los ltimos aos la poblacin de bilogos se ha visto mermada; lo anterior resulta
contradictorio con el surgimiento de reas en las cuales la participacin del bilogo es
deseable y en ocasiones insustituible, pero puede explicarse cuando se observan problemas de
tipo remunerativo y de desempleo.
El INEGI (1993), reporta que en la dcada de los 90s existan un total de 23,771 bilogos
(considerndose como profesionistas a quien hubiera aprobado cuatro aos de la carrera y
contara con un mnimo de 25 aos de edad), de los cuales el 81% tena empleo.
78
EVALUACIN
A pesar del buen porcentaje de ocupacin, al analizar las reas en donde trabajan los bilogos
se perciben incongruencias entre stas y la naturaleza o el grado de preparacin de este
profesional. Dentro de las reas de ocupacin, el 47% se dedican a la educacin, 20.5% lo
hacen en cargos directivos y en actividades administrativas, slo el 14% se dedica a la
investigacin y el resto realiza actividades ajenas a la profesin.
Generalmente el profesional de la Biologa en Mxico esta asociado con el modesto desarrollo

de la Ciencias Biolgicas, por las condiciones del pas que limitan la actividad cientfica. A
pesar de que la biologa tiene un amplio campo de accin, bsicamente slo se realizan dos
funciones: la investigacin y la docencia.
Este problema puede deberse al desconocimiento del perfil del bilogo, ya que
tradicionalmente se le conceptualiza como un profesional que solo se dedica al estudio de la
diversidad y la ecologa; sin embargo, en la prctica de su profesin se puede extender a otras
reas como: la administracin, el apoyo tcnico en el desarrollo tecnolgico explosivo desde la
biologa molecular hasta la macrobiologa, en el control de plagas en bosques, ciudades
agricultura y reforestacin; en la asesora cientfica en dependencias del gobierno, en industria
alimenticia, en fibras qumicas y en farmacologa en la medicina, el bilogo puede participar
de manera importante en el cultivo de clulas, en la observacin y descubrimiento de nuevas
lneas celulares, en la asignacin de funciones a las innumerables protenas que se descubren;
ya que esta preparado y capacitado profesionalmente para ello.
Otra explicacin es la competencia actual por las plazas disponibles con otros profesionales
afines como los qumicos, ingenieros bioqumicos, qumicos bilogos parasitlogos, qumicos
frmaco bilogos, agrnomos, mdicos y oceangrafos entre otros, as como el surgimiento de
carreras hibridas en el rea, cuya consecuencia frecuentemente es la exclusin del bilogo ante
la mayor especializacin de aquellos.
79
EVALUACIN
El sector gubernamental ha abierto espacios en los que pueden ingresar bilogos. Las polticas
que se desprenden de lo anterior, generan una amplia gama de posibilidades para estos
especialistas, quienes tienen la capacidad no slo de incorporarse, sino de organizar y
dictaminar las polticas de manejo de los recursos naturales. Adems de la importante
formacin de recursos humanos y la generacin del conocimiento para avance de la disciplina.
Paralelo al desarrollo de la ciencia bsica, la aplicacin de los mtodos cuantitativos para la
descripcin, explicacin, anlisis y prediccin de procesos se ha incrementado
significativamente. La poca de los bilogos taxologos ha quedado atrs; ahora prcticamente
cualquier rea de la biologa requiere de la aplicacin de, al menos, mtodos estadsticos
bsicos que permitan dilucidar causas y efectos en los fenmenos estudiados.
Derivado de este anlisis se puede concluir que, en general entre la comunidad de los bilogos
existe una inconformidad por la falta de atencin del gobierno, lo que provoca que tareas
especficas del Bilogo sean realizadas por otros profesionales, adems de la enorme
desaprobacin, entre la oferta creciente de profesionales y las limitaciones del mercado de
trabajo.
4.2 APLICACIN DE LA BIOLOGA
En la experiencia profesional, el bilogo aplica su formacin integral lo que le permite

desarrollar la capacidad de anlisis, sntesis e interpretacin e integracin de fenmenos
biolgicos para llevar a cabo actividades de investigacin formal que sirven tanto en el campo
como en el laboratorio.
De lo anteriormente dicho resulta claro que el bilogo es perfectamente capaz de desempear

las actividades requeridas en el laboratorio de hematologa donde se realizan diversas pruebas
de diagnstico entre las que destaca la biometra hemtica.
Para llevar a cabo de manera correcta una biometra hemtica, el profesionista debe tener
conocimientos bsicos para realizar diversas funciones en el laboratorio, los cuales fueron
adquiridos a travs de las materias de Qumica I y II, Fsica, Fisicoqumica y Bioqumica.
80
EVALUACIN
Otra herramienta de gran importancia y que se aplica de forma directa en el trabajo cotidiano
es Biologa General debido a que su contenido se aplica en la interpretacin estadstica al
evaluar las grficas del control de calidad y para entender el desarrollo, la variabilidad y
transformacin de las diferentes lneas celulares se aplican los conocimientos de Biologa
Celular.
Por otra parte, la Histologa es una herramienta fundamental que le permite al bilogo conocer
la morfologa y fisiopatologa de los diversos componentes de la sangre como son: los
leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Gracias a esto se puede ofrecer a mdicos y pacientes
resultados confiables y oportunos que sirvan de apoyo al diagnstico de las distintas
alteraciones hematolgicas.
Es importante mencionar que dentro de la formacin integral del bilogo, las disciplinas
complementarias como la informtica y el manejo del ingls son de gran utilidad actualmente
debido a que de esta manera el flujo del trabajo rutinario es ms eficiente.
En base a la formacin y la experiencia laboral adquirida, no es precipitado proponer que se

revise el plan de estudios y, se realicen modificaciones que satisfagan las necesidades actuales
del pas, la modernidad y el desarrollo de la vida misma. De tal modo que las ciencias
biolgicas cuenten con contenidos actualizados, donde las actividades del mtodo cientfico
sirvan para obtener una formacin integral ms que un conocimiento exhaustivo de conceptos.
Probablemente sea necesario un tronco comn en los primeros semestres de la Licenciatura de

Biologa que abarque materias bsicas como Fsica; Biologa General, Qumica,
Fisicoqumica, Gentica, Embriologa, Histologa etc. y posteriormente se establezcan
mdulos de Biodiversidad, Recursos Naturales, Ecologa, Impacto Ambiental, Administracin
de Biologa, Biotecnologa y Biomedicina entre otras; de tal manera que exista una variedad
de opciones de acuerdo a los diferentes intereses personales.
Es importante realizar seguimiento de egresados con el fin de conocer el campo de accin

idneo y trabajo del bilogo para de esta manera, adecuar paulatinamente el plan de estudios
de la carrera.
81
CONCLUSIONES
5. CONCLUSIONES
La biometra hemtica es un estudio primordial para el diagnstico y manejo de las

enfermedades hematolgicas. En pocas disciplinas el mdico puede hacer un diagnstico
especfico y dar seguimiento al tratamiento con las muestras de un tejido tan accesible y con
metodologa fcilmente disponible.
La precisin y confiabilidad de los resultados dependen del conocimiento cientfico del

laboratorio clnico acerca del procedimiento de la prueba y su aplicacin, as como de los
posibles problemas que surgen durante la realizacin de la misma.
Los instrumentos utilizados para la realizacin de sta tcnica requieren de personal altamente
calificado capaz de evaluar los datos del anlisis, as como las caractersticas de las clulas
individuales. Por medio de la revisin cautelosa de estos datos pueden surgir nuevas
aplicaciones de estos instrumentos que ayudarn a la deteccin temprana de anormalidades. La
automatizacin ha mejorado la precisin y la exactitud dentro del laboratorio de hematologa y
acortado el tiempo necesario para el anlisis, pero ha aumentado la necesidad de destrezas
interpretativas individuales.
Es importante observar como la poblacin de bilogos se diversifica involucrndose en nuevas

reas; actualmente de 32 profesionistas que forman parte del Laboratorio Clnico del INCan
11 son Tcnicos Laboratoristas, 13 Qumicos y 8 Bilogos, cuando hasta hace seis aos slo
se contaba con la mitad del nmero actual.
Posiblemente muchos bilogos desearamos dedicarnos al trabajo de campo pero, las

circunstancias de la vida y la poltica del pas nos han llevado a otros mbitos, que nuestra
formacin y capacidad de adaptacin permite que nos incorporemos sin problemas. Si las
poblaciones de bilogos evolucionan habrn expandido su nicho, pues estarn viviendo en
condiciones y lugares que antes le impedan subsistir.
82
CONCLUSIONES
Nunca terminar la polmica entre lo que debe ser primordial en los estudios de biologa: las
clulas y sus molculas, o los organismos y los ecosistemas en que nacen, se desarrollan y
mueren. Lo que si es cierto es que el Bilogo es un profesional dedicado al estudio de
organismos e individuos, con capacidad para coadyuvar de diversas maneras a la
conservacin, control y mejoramiento cientfico de las especies vegetales y animales.
Para concluir deseo expresar que mi labor como biloga en el laboratorio clnico del INCan
representa una grata experiencia y ha enriquecido mi formacin acadmica gracias, en parte a
la interaccin con profesionistas de distintas especialidades en el rea Mdica y Qumico
Biolgica.
83
HOJA 1
HOJA 1.- REGISTRO DE UNA BIOMETRA HEMTICA OBTENIDA DEL GEN-S

DE UN PACIENTE NORMAL
84
HOJA 2
HOJA 2.- REPORTE FINAL DE UNA BIOMETRA HEMTICA DE UN PACIENTE NORMAL
85

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA

IMPORTANCIA DE LA BIOMETRA HEMTICA

REPORTE DE TRABAJO PROFESIONAL

DIRECTOR DE TESIS: Q.F.B. DULCE MARIA ROBLES DENETRO

A TODAS LAS PERSONAS QUE ME HAN INSPIRADO A ALCANZAR MIS METAS:

FINALIZAR ESTE TRABAJO ME PRODUCE UNA GRAN SATISFACCIN EN MUCHOS

PARA TODO HAY UN TIEMPO OPORTUNO (ECLESIASTES 3:1)

PUES EL SEOR ES QUIEN DA LA SABIDURA; LA CIENCIA Y EL CONOCIMIENTO BROTAN

S QUE LAS VENTANAS SE PUEDEN

A LA MEMORIA DE VICTOR MANUEL QUINTANA S.

PAP LAMENTO MUCHO QUE NO HAYAS

DISFRUTADO DE ESTE XITO DEL QUE TU FORMASTE PARTE

FUNDAMENTAL, DONDE ESTS SE QUE ESTARS

A CATALINA NIETO VALLES

MAM ERES UNA PERSONA EXCEPCIONAL, UNA GRAN AMIGA, LA MEJOR

TE ADMIRO MUCHO POR TU ENTUSIASMO, TU ALEGRA, TU ENORME FORTALEZA DE

SUPERACIN Y DE LUCHA Y ESE ENORME DON DE ESTAR SIEMPRE

DISPUESTA A DAR APOYO, TU EJEMPLO ME HA INSPIRADO EN TODA MI VIDA

MIL GRACIAS PORQUE LO QUE SOY TE LO DEBO A TI.

NELSON EN TU APARTADO Y SOLITARIO MUNDO TIENES UN LUGAR MUY ESPECIAL

EN MI VIDA, TE ASEGURO QUE AUNQUE A VECES PAREZCA TODO LO CONTRARIO, MI

VIDA NO SERA IGUAL SI NO ESTUVIERAS AQU. MIL GRACIAS POR TU APOYO

QUE NUNCA ESTARE SOLA. TE QUIERO MUCHO.

A MIS PEQUEOS GRANDES TESOROS

LO NICO QUE DESEO ES SER UN BUEN EJEMPLO PARA USTEDES

SON UNA FUENTE DE INSPIRACIN Y UNA GRAN BEDICIN EN LA VIDA

MI QUERIDO GRILLO LA VIDA CONTIGO ES UN RETO CADA DA

QUE ESPERO AYUDARTE A LOGRAR SUPERAR PARA QUE SALGA EL VERDADERO

CHICO GRANDIOSO Y MARAVILLOSO QUE ERES. ADMIRO TU GRAN NOBLEZA

TE SIRVA PARA TU BIEN Y LLEGAR MUY LEJOS, ERES GENIAL ME ENCANTA

TU CHISPA Y TU MODO DE VER LA VIDA, ERES NICO Y MARAVILLOSO

A LA NICA, INIGUALABLE Y GIGANTESCA FAMILIA NIETO

ZENAIDA HASTA EL LTIMO INTEGRANTE:

ORGULLOS; OJAL MS GENTE TUVIERA LA FORTUNA DE CONTAR Y FORMAR PARTE DE

UNA FAMILIA TAN MARAVILLOSA. LOS QUIERO MUCHO.

HAY UNA PERSONA MUY ESPECIAL QUE MERECE UN RECONOCIMIENTO

MUY ESPECIAL QUE FUE QUIEN SUFRI, PADECI Y VIVI TODO EL

PROCESO HASTA HOY A TI QUE NO ME DEJASTE CLAUDICAR CUANDO EL

MIEDO ME PARALIZABA Y ME ALENTABAS Y ME ANIMABAS CADA DA

A MARCO ANTONIO DELGADO LOPEZ EL PIBE

EL GRAN AMOR Y MOTOR DE MI VIDA.

NUNCA DEJAR DE DAR GRACIAS POR LA ENORME OPORTUNIDAD DE

TENER JUNTO A M A LA PERSONA MS MARAVILLOSA QUE HE

CONOCIDO, ERES LO MEJOR QUE ME HA PASADO EN LA VIDA, DE MIS

MEJORES BENDICIONES ERES MI MEJOR AMIGO, COMPAERO Y SOCIO

EN UNA FORMIDABLE EMPRESA TE ADMIRO DE LA A a la Z.

GRACIAS POR TU PACIENCIA, TUS PALABRAS DE ALIENTO, TU APOYO

INCONDICIONAL ERES LO QUE SIEMPRE SO, LLENAS MI VIDA, SIN TI

MI MUNDO NO SERA LO QUE ES.

DOY GRACIAS A DIOS POR ESTA OPORTUNIDAD DE CONCLUIR UN CICLO EN MI VIDA,

AMISTAD, POR BRINDARME UNA OPORTUNIDAD AUNQUE FUERA BIOLOGA Y POR

HABERTE INVOLUCRADO EN ESTA AVENTURA CONMIGO. TE ADMIRO MUCHO, CUANDO

CREZCA QUIERO SER COMO TU.

CON MI ADMIRACIN Y RESPETO AGRADEZCO A LA DRA. ELVIRA ESTADA F. POR HABER

ACEPTADO PARTICIPAR EN LA REVISIN DE ESTE TRABAJO. SI HUBIERAMOS MS

PERSONAS COMO ELLA, TAN COMPROMETIDA CON SU TRABAJO, CON SU DISPOSICIN Y

ENTREGA; ESTE PAS SERA OTRO.

A LA DRA. PATRICIA RIVAS M. POR HABERME DADO SU VOTO DE CONFIANZA Y FORMAR