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ERMINACIN DE VITAMINA C POR ESPECTRO

PADTEURIZADOR DE TUBOS PARA 100 ml

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERIA
E.A.P. INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

ASIGNATURA : Anlisis Instrumental de Prod.

Agroind.
TEMA : Determinacin de vitamina C por
espectrofotometra

DOCENTE : Ing. Gilbert Rodrguez

Paucar

GRUPO :A
INTEGRANTES :
o Cruzado Caldern Lisbet
o Orbegozo Mattos Antony

Nuevo Chimbote, 2016

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DETERMINACIN DE VITAMINA C POR

ESPECTROFOTOMETRA

I. INTRODUCCIN:
Las vitaminas son parte esencial de nuestro desarrollo, porque en el
metabolismo de muchas sustancias ayudan a liberar energa necesaria para las
actividades que el cuerpo necesita llevar a cabo, en nuestra vida diaria.

Una adecuada alimentacin es la fuente perfecta de vitaminas, minerales y

dems elementos necesarios para un buen desarrollo.

Todas las vitaminas son importantes ya que cada una de ellas desempea
papeles diferentes, una sola vitamina no puede sustituir a las dems ya que no
poseen propiedades iguales.

Adems de esto la vitaminas son importantes por su uso en la industria , como

en la medicina con los suplementos vitamnicos para prevenir enfermedades

El consumo de suplementos dietticos ha aumentado considerablemente y con

ellos la competencia industrial por producir mayores cantidades para cubrir la
demanda.

Debemos destacar su importancia en nuestro campo de la agroindustria,

conocer el contenido de vitaminas en nuestros productos ayudara a mejora la
calidad de nuestros productos como futuros ingenieros agroindustriales
Las vitaminas farmacuticas, al ser consideradas como complemento
alimenticio de comidas, no se someten a los controles de seguridad que se les
exige a otros productos mdicos. Investigaciones realizadas por asociaciones
de consumidores en algunos pases revelan que no siempre los suplementos

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vitamnicos cumplen con la pureza y cualidades anunciadas por el fabricante y

hasta incluso pueden variar de pldora a pldora en un mismo frasco.

II. OBJETIVOS:

Cuantificar vitamina C mediante anlisis por espectrometra molecular.

III. FUNDAMENTO TERICO:

III.1. Las vitaminas
Las vitaminas son sustancias orgnicas, de naturaleza y composicin variada
imprescindibles en los procesos metablicos que tienen lugar en la nutricin
de los seres vivos. No aportan energa, ya que no se utilizan como
combustible, pero sin ellas el organismo no es capaz de aprovechar los
elementos constructivos y energticos suministrados por la alimentacin.
Normalmente se utilizan en el interior de las clulas como antecesoras
coenzimas, a partir de las cuales se elaboran miles de enzimas que regulan
las reacciones qumicas de las que viven las clulas.

Las vitaminas deben ser aportadas a travs de la alimentacin, puesto que el

cuerpo humano no puede sintetizarlas. Una excepcin es la vitamina D, que
se puede formar en la piel con la exposicin al sol, y las vitaminas K, B1, B12
y cido flico, que se forman en pequeas cantidades en la flora intestinal.

El cido ascrbico o vitamina C. Este antioxidante es un agente reductor

debido a los grupos hidroxilo adyacentes que pueden perder hidrgeno formar
un radical semideshidroascorbato y oxidarse a cido deshidroascrbico.
La vitamina C se oxida rpidamente y por tanto requiere de cuidados al
momento de exponerla al aire, calor y agua. Por tanto cuanto menos calor se
aplique, menor ser la prdida de contenido. Las frutas envasadas por haber
sido expuestas al calor, ya han perdido gran contenido vitamnico, lo mismo
ocurre con los productos deshidratados. En los jugos, la oxidacin afecta por

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exposicin prolongada con el aire y por no conservarlos en recipientes

oscuros. (Harris, 2001)

De acuerdo a su solubilidad la podemos clasificar en:

A. Hidrosolubles:
a) Complejo B:
Liberadoras de Energa: Tiamina (B1), Riboflavina (B2), Niacina (B3),
Biotina y cido Pantotnico.
Hematopoieticas: cido Flico y Vitamina B12
Otras: Piridoxina (B6), Piridoxal y Piridoxamina.

b) No Complejo B:
Vitamina C (cido Ascrbico)

B. Liposolubles
Vitamina A (Retinol, -Catotenos), Vitamina D (Colecalciferol),
Vitamina K (Filoquinonas, Menaquinonas) y Vitamina E (Tocoferoles).
La Vitamina C o cido Ascrbico (objetivo de nuestra prctica) la
podemos encontrar en carnes, cereales, frutas (ctricos, sanda,
meln, papaya, mango, kiwi) hortalizas, leche de vaca, verduras, entre
otros.

III.1.1. La vitamina C o cido ascrbico

El cido Ascrbico acta como un fuerte agente reductor y en su oxidacin
cede dos tomos de hidrgeno para transformarse en cido dihidroscrbico,
que tambin tiene actividad de Vitamina C.

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La ausencia de sta vitamina da como resultado la enfermedad conocida

como Escorbuto la cual se caracteriza por un defecto de la sntesis de
colgeno, que queda de manifiesto por la falta de cicatrizacin de heridas,
defectos de la formacin de los dientes, rotura de capilares que conducen a
la aparicin de abundantes petequias, debilidad muscular, prdida del
cabello, entre otros. Ya que el cido ascrbico tiene un doble enlace en su
estructura: (kimball, 1991)

cido ascrbico

III.2. Zumo de Naranja

El zumo de naranja es un zumo de frutas en forma de lquido obtenido al
exprimir el interior de las naranjas, generalmente con un instrumento
denominado exprimidor.

III.3. cido oxlico

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El cido oxlico est clasificado dentro de los cidos carboxlicos, estos son
compuestos qumicos cuya caracterstica principal es el poseer un grupo
funcional llamado carboxilo o carboxi. Dentro de su composicin, el cido
carboxlico cuenta con el grupo carboxilo, esto se nota cuando observamos su
frmula qumica: HOOCCOOH.

III.4. Absorbancia
La absorbancia es definida como la intensidad de la luz con una longitud de
onda especfica y que es pasada por una muestra es la intensidad de la luz
antes de que entre a la muestra (Duram, M.H, 2000).

Curva estndar para vitamina C

1.5

1 f(x) = 0.15x + 0.08

R = 1
Absorbancia (L1-L2) 0.5

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8

mg vit. C/100ml

Fuente: Association of Official Analytical Chemist (AOAC, 1990)

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Curva estndar para vitamina C 2

absorbancia
f(x) = L1-12
0.04x - 0.01
R = 1
mg vit.c/100ml

Fuente: AOAC, Official, Methods of Analysis; (1995)

IV. MATERIALES:
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IV.1. Equipos e Instrumentos

Fiolas
Pipetas
volumtricas
Graduadas

Acido
Acido oxlico
cido oxlico
ascrbico

Filtrador

Espectrofotmetro
Espectrofotometra

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V. PROCEDIMIENTO:
DIAGRAMA DE FLUJO

MUESTRA Acido oxlico (polvo)

NARANJA 0.4%
PESAR 4 gramos

DILUIR 1000ml agua destilada

DISOLVENTE

Figura 1. Diagrama de flujo, preparacin de cido oxlico

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MUESTRA
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Solucin estndar (madre)

PESAR 100 gramos Ac. Ascrbico

DILUIR 100 ml con Ac. Ascrbico al 0.4%

AGITA
R

DISOLVENTE

Figura 2. Diagrama de flujo, preparacin de solucin estndar (madre)

MUESTR Solucin coloreada (colorante)

A

PESAR 12 gramos de 2, 6-diclorofenolindofenol

DILUIR 100 ml de agua destilada

(hirviendo)

AGITAR

ALMACENAJ 15 das en frasco

E ocuro

REFRIGERACI Dilucin color violeta

ON congelada
Figura 3. Diagrama de flujo, para solucin coloreada (colorante)

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TUBOS DE
PRUEBA
1Oml
1m 1m 1ml
H20 destilada Ac. Oxlico (E.T) ms Estndar de trabajo
0.4% agua (E.T)

ABSORBANCI
A Ajusta 0,
520nm
2 9ml +
+Colorante absorbancia
3 + agua 9ml + 0+

4+ 9ml+color+absorv
colorante

Figura 4. Diagrama de flujo, para preparacin de la curva estndar

MUESTRA

PESAR 5 ml de muestra

DILUIR 35 ml de Ac. Oxalico

FILTRAR

Figura 5. Diagrama de flujo, para preparacin de muestra

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VI. RESULTADOS:
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Cuadro N 01: determinacin de vitamina C tabla de datos

Muestra(m Ac
g/ml) ascrbi
co. L1 L2 L1 - L2
1 0.0153 0,1644 0,1626 0,0018
2 0.0306 0,1644 0,0968 0,0676
3 0.0459 0,1644 0,0819 0,0825
4 0.0612 0,1644 0,0572 0,1072
5 0.0765 0,1644 0,0514 0,113

CURVA ESTANDAR PARA VITAMINA "C"

0.12
f(x) = 0.03x - 0
R = 0.86
0.1

0.08

Linear ()
Absorvancia (L1-L2) 0.06
Linear ()
0.04

0.02

0
0.0153 0.0306 0.0459 0.0612 0.0765

ml Vit.C/100 ml

Cuadro N 02: determinacin de vitamina c tabla de datos

Muestra

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L1 L2 L1 - L2
Maracuy 0,1644 0,1553 0,00914
Limn 0,1644 0,0724 0,092
kiwi 0,1644 0,1142 0,0502
Mandarina 0,1644 -0,0079 0,1723

CURVA ESTANDAR DE VITAMINA "C"

0.18

0.16

0.14

0.12

0.1
Absorvancia (l1-L2)
0.08

0.06

0.04

0.02

0
Maracuya Limon kiwi Mandarina

ml Vit.C/100ml

Como podemos observar en el cuadro N 01, el procedimiento bien

0realizado de toda la curva estndar y al buen uso de los instrumentos
nos arroj datos muy cercanos que a la vez sus absorbancias L1 Y L2
van decreciendo y por el cual era lo que se esperaba.

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Notamos que los datos de absorbancia de las muestras obtenidas se

asemejan a la lnea de tendencia.

En el proceso para determinar la vitamina C, vemos que de las 4

muestras la mandarina fue la que obtuvo ms porcentaje de vitamina C
donde tambin se puede comprobar tericamente; en el caso de la
maracuy fue e que obtuvo menor porcentaje de vitamina C.

VII. DISCUSIONES:
PWAESOM. Nos dice que el cido L-ascrbico (vitamina C) es muy
soluble en agua, posee propiedades cidas y fuertemente reductoras.
Tales propiedades se deben a su estructura enediol que esta conjugada
con el grupo carbonilo de una lactona.

En solucin, el hidroxilo en la posicin C3 se ioniza con rapidez (pK1 =

4.04 a 25C) y una solucin de cido libre tiene un pH de 2.5. El
segundo grupo hidroxilo es mucho ms resistente a la ionizacin (pK2 =
11.4)
Se oxida con facilidad en solucin, en especial cuando se expone al
calor. La oxidacin puede acelerarse por la presencia de hierro, cobre o
PH alcalino. Su forma oxidada, el cido dehidroascrbico tambin posee
actividad vitamnica ya que es la reaccin xido-reduccin es reversible.

Es por ello que la vitamina C es un fuerte reductor que cambia el color

de la disolucin de 2-6 diclorofenol indofenol al pasar este de su estado
oxidado a reducido.

La disolucin patrn de vitamina C es de concentracin conocida: 0.1%

en masa Sabiendo esto podemos calcular la cantidad de vitamina C que
contienen los distintos zumos investigados segn el nmero de gotas
que necesitemos para producir la decoloracin.

El cido ascrbico puede ser sintetizado a partir de glucosa y galactosa

por las plantas y muchos mamferos, pero no por el hombre.

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En el anlisis espectrofotomtrico la medicin de la absorbancia se hace

ordinariamente en una longitud de onda que corresponda a un pico de
absorcin, porque el cambio de la absorbancia por unidad de
concentracin es mayor en este punto, se obtiene as la sensibilidad
mxima.

Las variables que influyen en la absorbancia; es la naturaleza del

disolvente, el pH de la solucin, la temperatura la concentracin elevada
de electrlitos y la presencia de substancias que interfieren.

La determinacin de relacin existentes entre absorbancia y

concentracin; es necesario preparar para ello una curva de calibracin
partiendo de una serie de solucin patrn del cido ascrbico.

Estos patrones tienen que aproximarse a la composicin general de las

muestras reales y abarcar una razonable escala de concentracin de las
especies que se determinan en este caso vitamina C.

La concentracin (mg/mL) encontrada de cido ascrbico en las

muestras fueron 0.096mg/ml en jugo de naranja al 0.1%.

Creemos que dichos resultados se deben a la gran inestabilidad del

cido ascrbico o que a pesar de que existen numerosos mtodos
analticos para le deteccin del cido ascrbico, inclusive la
espectroscopia UV, ningn procedimiento es totalmente satisfactorio
debido al a falta de especificidad y a la existencia en la mayora de los
alimentos, de numerosas sustancias que interfieren.

Segn L.CARRASCO. En cualquier discusin de soluciones el primer

requisito consiste en especificar sus composiciones: esto es, las
cantidades relativas de los diversos componentes. Para explicar en
forma didctica, consideremos una solucin de dos componentes, A
(soluto) y B (disolvente o solvente).
Las medidas de composicin para soluciones liquidas son las siguientes:
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1 Gramos de soluto por volumen de solucin.

2 Gramos de soluto por 100 gr de disolvente.
3 Gramos de soluto por 100 gr de solucin.
4 Mililitros de soluto por 100 gr de disolvente.
5 Mililitros de soluto por 100 ml de solucin.
6 Moles de soluto por 1 litro de solucin (molaridad).
7 Moles de soluto por 100 gr de disolvente (molalidad).

Segn L.CARRASCO. La cantidad de una sustancia que se disuelve en

otra depende de la naturaleza del soluto y del solvente, de la
temperatura y la presin. En general, el efecto de la temperatura es muy
pronunciada y su direccin depende del calor de solucin.
Si una sustancia se disuelve hasta la saturacin con desprendimiento de
calor, la solubilidad disminuye con el aumento de la temperatura. Por
otra parte, si una sustancia se disuelve con absorcin de calor, la
solubilidad se incrementa cuando se eleva la temperatura. En general,
los compuestos de carcter qumico anlogo, son ms fcilmente
solubles entre s que los caracteres diferentes.

Segn L.CARRASCO. La solubilidad es la capacidad que tiene una

sustancia para disolverse en otra, la solubilidad de un soluto es la
cantidad de este. Algunos lquidos, como el agua y el alcohol, pueden
disolverse entre ellos en cualquier proporcin. En una solucin de
azcar en agua, puede suceder que, si se le sigue aadiendo ms
azcar, se llegue a un punto en el que ya no se disolver ms, pues la
solucin est saturada.

La solubilidad de un compuesto en un solvente concreto y a una

temperatura y presin dadas se define como la cantidad mxima de ese
compuesto que puede ser disuelta en la solucin. En la mayora de las
sustancias, la solubilidad aumenta al aumentar la temperatura del
solvente. En el caso de sustancias como los gases o sales orgnicas de

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calcio, la solubilidad en un lquido aumenta a medida que disminuye la

temperatura.
En general, la mayor solubilidad se da en soluciones que molculas
tienen una estructura similar a las del solvente.

VIII. CONCLUSIONES:
Concluimos que la prctica fue meritoria los datos han sido precisos pero
no exactos en cuanto al grado estndar del R 2 , dando a mostrar as que
la determinacin de vitamina C se encontraba en un rango del 0.8636-
0.895 prximos al 0.999 la cual se puede concluir que poseen cierto
porcentaje de vitamina C.

Con respecto a los cidos, el ascrbico y el oxalato, ellos cumplieron una

funcin importante, la de dar solucin en cuanto a vitamina C, pues
dicha mezcla originaron el 1.53 mg/ml de cido ascrbico.

Tener en cuenta que en prctica utilizamos la espectrometra molecular;

pues como su nombre mismo lo dice hemos analizado de una muestra
sus molculas utilizando patrones o espectros conocidos por otras
muestras, la cual se pudo determinar su composicin cuantitativa y
cualitativa de una muestra.
Con los datos que se obtuvo de la muestra de zumo algn error debi a
ver tenido puesto que sus grados de absorbancia aumentaron con
respecto a los valores estndares determinndose as que dichas
medidas estn fuera de rango, lo que significa que est mal.

Que con la ayuda de equipos e instrumentos, especialmente del

espectrofotmetro se pudieron obtener los clculos inmediatamente,
cosa que mucho ms antes se realizaban por procesos, que demoraban;
pues en conclusin la maquina nos ayud con los clculos.
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Para la Control de la linealidad fotomtrica El estudio de la linealidad

fotomtrica permite establecer el rango de absorbancia en el que el
instrumento tiene respuesta proporcional a los cambios de
concentracin. Para ello se determina la respuesta del espectrofotmetro
a diferentes concentraciones de una sustancia que cumpla con la ley de
Lambert-Beer.

Hay que tener en cuenta la LINEALIDAD, que es el intervalo de

concentraciones del cromgeno entre las cuales existe una relacin
lineal entre Absorbancia y Concentracin. Cuando la concentracin del
cromgeno sobrepasa los lmites de linealidad se deja de cumplir la Ley
de Beer, convirtindose la recta en una curva. La lectura de la
Absorbancia fuera de los lmites de linealidad se traduce en una
concentracin falsamente baja de cromgeno. En esta situacin, hay
que diluir la muestra para que su concentracin entre en los lmites de la
linealidad.

Como futuros ingenieros agroindustriales para obtener una buena

calidad nutritiva de un producto debemos evitar la degradacin de la
vitamina C; que es muy importante para nuestro organismo.

Se complement satisfactoriamente nuestros conocimientos en clase

con la prctica ejecutada; y pudimos ver la linealidad de los equipos y los
contenidos de vitamina C en diferentes concentraciones.

IX. REOMENDACIONES:
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Tener en cuenta que para poder realizar alguna practica de laboratorio,

se debe de estar bien equipados con los accesorios correspondientes;
como guantes, tapa boca, guardapolvo; higiene personal, al cumplir ello
se puede garantizar una muy buena prctica.

Los instrumentos a usar tienen posiciones en cuanto a su manejo,

cualquier descuido puede causar algn accidente como romper, o
cortarse y ensuciar el laboratorio.

De debe de prestar atencin al asesor de la clase, ello garantiza un

mejor entendimiento y aprendizaje para la realizacin de las prcticas de
laboratorio.

En practica todos los integrantes deben de participar en equipo, para ello

se les da cargos, para poder trabajar todos y as realizar la prctica ms
rpida pero segura; si estn juntos sin hacer nada ello provoca que
conversen y no toman las cosas en serio.

Por ltimo tener en cuenta que el estar en un laboratorio implica tener

respeto tanto para los profesores como para los materiales, reactivos e
instrumentos, el mal uso de ellos puede generar costos, que en algunos
casos no estn a costa del bolsillo, en practica rompieron una Fiola, todo
por jugar y no tomar las cosas en serio.

X. BIBLIOGRAFA:
PWAESOM, Anlisis Instrumental, 4ta Edicin.2000, Editorial Mc Grauw
Hill interamericana Pg. 1999-230
www.monografias.com
L. Carrasco (Qumica)
Gua De Prcticas De Laboratorio De Qumica Inorgnica- Uns.
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BROWN, Theodore L.; LEMAY, Jr. H. Eugene y BURSTEN, Bruce E.

Qumica. La Ciencia Central. 5 ed. Mxico: Prentice-Hall 1993.
Skoog, West, Holler, Qumica analtica, Sptima edicin, Editorial
McGraw-Hill, 2001, Mxico.
BURNS, Ralph A., Fundamentos de Qumica. 2 Ed, Mxico-Nueva Cork:
Prentice-Hall Hispanoamericana., 1996.
Gruda. z; Poltosky J.194. Tecnologa de la congelacin de los alimentos.
Editorial Acribia Zaragoza-Espaa
http://perso.wanadoo.es/sergioram1/espectrofotometria.htm
http://www.fotonostra.com/glosario/espectrofotometro.htm
http://www.quiminet.com/articulos/usos-y-aplicaciones-del-acido-oxalico-
2652706.htm
http://fisica.udea.edu.co/~labgicm/Laboratorio%20Fisica
%202_2011/2011_Practica%20no%20linealidad.pdf
http://inta.gob.ar/documentos/guia-para-la-verificacion-de-
espectofotometros-uv-visible-utilizados-en-el-analisis-de-suelo-y
agua/at_multi_download/file/Guia_espectrofot%C3%B3metros_UV.pdf
http://es.slideshare.net/jestval/actividad-experimental-no-11
http://www.lacomet.go.cr/documentosweb/quimica/2011/Publicaciones/sa
ndra.pdf.

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