UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

Evaluacin del efecto cicatrzante de gel a base de mastuerzo (Tropaeolum majus)

en heridas por escisin en cobayos (Cavia porcellus).

AUTOR:

JUAN CARLOS MIRA NARANJO

LNEA DE INVESTIGACIN:

MEDICINA ALTERNATIVA

PERIODO:

OCTUBRE 2016 - MARZO 2017

FECHA DE PRESENTACIN:

14 de octubre del 2016

AMBATO ECUADOR

I.

TITULO

Evaluacin del efecto cicatrizante de gel a base de mastuerzo (Tropaeolum majus) en heridas
por escisin en cobayos (Cavia porcellus)

II.

INTRODUCCIN

A lo largo del tiempo la humanidad ha buscado en la naturaleza recursos para mejorar

su calidad de vida siendo las plantas el medio ms usado, se sabe que el empleo de
especies vegetales con fines de teraputicos a lo largo de la historia fue transmitido a
travs de sucesivas generaciones por medio de conocimientos empricos, empleados de
acuerdo a la flora propia de la zona, por ello se realizan estudios cientficos para
garantizar el uso de dichas plantas, constituyndose en la materia prima de los frmacos
utilizados hoy en da. (Taufner et al, 2006)
La medicina tradicional es usada en todo el mundo, representando un complemento
esencial en la prctica mdica correspondiente a la cultura de cada pueblo, los cambios
acelerados de las sociedades actuales y la medicina moderna han promovido la falta de
inters por preservar este tipo de teraputica. La Organizacin mundial de la salud
(OMS) la define como la suma total de los conocimientos, capacidades y prcticas
basados en las teoras, creencias y experiencias propias de diferentes culturas, bien sean
explicables o no, utilizadas para mantener la salud y prevenir, diagnosticar, mejorar o
tratar enfermedades fsicas y mentales. (Gualavis, 2008; OMS, 2013).
El Ecuador al igual que otros pases andinos conocidos por sus diversas culturas
ancestrales, ha consentido el uso de medicina tradicional la cual es practicada
principalmente por los pueblos del sector rural, quienes aplican sus conocimientos
adquiridos de sus antecesores, a pesar de la riqueza cultural de nuestro pas se ha ido
perdiendo est practica con el tiempo. (Orozco, 2013; Cabezas, 2014)
La piel se encuentra recubriendo todo el cuerpo, cumple la funcin de barrera protectora
que asla al organismo del medio externo. En el momento que se produce una herida se
desencadena un proceso inflamatorio, este es el primer paso en la fase de cicatrizacin
la cual es mediada por protenas solubles y clulas encargadas de reestablecer el tejido
celular. (Valencia, 2010). Es raro el da que no acuda a la clnica veterinaria un animal
con algn tipo de herida ya sea por pelea, golpe, atropellamiento, quemadura, etc.

Ciertos medicamentos tienen costos que pueden resultar elevados para las personas de
bajos recursos, un tratamiento alternativo en estos casos sera el uso de plantas nativas.
La planta Tropaeolum majus conocida vulgarmente como mastuerzo, capuchina o flor
de la sangre, originaria de Sudamrica y nativa del Ecuador cuenta con gran
adaptabilidad y rusticidad, crece en muchas partes del mundo. Es distinguida por sus
propiedades

medicinales,

ha

sido

usada

como

diurtico,

antiespasmdico,

antiinflamatorio, expectorante. Por otra parte, su aplicacin externa se emplea en

tratamientos de la piel en dermatitis, quemaduras, descamacin y cicatrizacin de
heridas. (Bazylko et al, 2013; Ribeiro et al, 2011; Borndani et al, 2016; Cabezas, 2014).
Este trabajo tiene como objetivo general el de evaluar tres vas de administracin de
extractos de mastuerzo (Tropaeolum majus) como cicatrizante en cobayos (Cavia
porcellus).

III.

REVISIN DE LITERATURA

3.1. ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS

En el trabajo de investigacin realizado por (Cabezas, 2014); determin el efecto
cicatrizante del extracto de Tropaeolum majus en heridas de ratones. Se usaron tres
concentraciones 20 %, 40 % y 80 %. Para obtener estos extractos se realizaron
diluciones tomando del extracto madre y diluyendo con alcohol. Se administr
tpicamente a cada grupo los tratamientos correspondientes, cada 12 horas, y se aplic
mediante hisopos, por aspersin y con jeringas. Los tipos de respuesta que se evaluaron
durante y despus de la aplicacin fueron: das de cicatrizacin de la herida, longitud
final de la cicatriz, examen histopatolgico. Como conclusin el extracto
hidroalcohlico de mastuerzo resulta eficaz aplicado en heridas inducidas, con mayor
efecto en concentracin al 80%, presentando cicatrizacin en 10 das, con una longitud
de la cicatriz de 1.4 cm.
Un estudio en la Universidad Estatal de Maring evalu el efecto del extracto
hidroetanlico de Tropaeolum majus en restauracin de lesiones cutneas. Fueron
utilizadas 15 ratas Wistar distribuidos en 3 grupos llamados G7, G14 y G21, segn el
perodo de observacin a los 7, 14 y 21 das despus de realizar dos heridas de 1cm de
dimetro en la regin dorsal mediante procedimiento quirrgico, la izquierda tratados

con el gel a base de carbopol, y el derecho con gel de Tropaeolum majus. Se realiz un
estudio comparativo entre los dos grupos de microanlisis y macroscpica, la
evaluacin histolgica, las lesiones tratadas con el extracto de mastuerzo tena una
cantidad menor de infiltracin inflamatoria y mayor angiognesis, demostrando que
favorece al proceso de curacin. (Santos et al, 2016)
En la Universidad Federal de Grande Dourados se estudi Cicatrizacin de heridas y el
efecto anti-inflamatrio del extracto etanlico de Tropaeolum pentaphyllum (EETP) en
ratones. Los animales a estudiar fueron pretratados con EETP, con dosis de 100, 300 y
500mg/kg por va oral, al grupo de control se le administr dexametasona 1mg/kg una
hora antes de inducir el edema con solucin salina y carragenina, teniendo como
resultado que el EETP fue efecto dependiente, sin embargo su efecto persiste hasta 2
horas despus de hacer su efecto biolgico a dosis de 300mg/kg. Para la prueba de
cicatrizacin se usaron 18 animales divididos en tres grupos de 6 animales, a los que se
les realizo una incisin de 6 mm; el grupo de control recibi solucin salina, el segundo
grupo se le administro 50L de EETP y al tercero se e administro EETP (30mg/mL)
incorporado en natrosol gel, aplicado tpicamente por 11 das y el grupo de colagenasa
comercial recibi 50 L de iruxol aplicado tpicamente por 11 das. Los grupos tratados
con iruxol y los grupos tratados EETP tenan un tiempo ms corto en la curacin de la
herida por escisin en comparacin con el grupo control. Sin embargo el tratamiento
EETP fue ms eficaz que el tratamiento con iruxol. Por otra parte se evalu la migracin
celular pleural y extravasacin de protena, pretratados con EETP, con dosis de 100, 300
y 500mg/kg por va oral, al grupo de control se le administr dexametasona 1mg/kg
una hora antes de inducir el edema con solucin salina y carragenina. La pleuresa fue
inducida por la inyeccin intrapleural de carragenina 1% (100 L), diluida en solucin
salina y administrada con una aguja en el lado derecho de la cavidad torcica. Los
ratones de control recibieron el mismo volumen (100 L) de solucin salina de
pirgenos estril. Despus de 4 horas, los animales fueron sacrificados y la cavidad
torcica se lav con 1 ml de solucin salina tamponada con fosfato (PBS). Se midi el
volumen de exudado, y una parte alcuota de 20 L se diluy en solucin Turk (01:20)
que se utiliza para determinar el nmero total de leucocitos en una cmara de Neubauer.
Para un recuento diferencial de leucocitos, el fluido restante se centrifug a 3200 rpm
durante 20 min, y se resuspendieron las clulas. El recuento total y diferencial de clulas
se realizaron bajo el microscopio ptico; La administracin oral de EETP (500 mg / kg)

inhibe la migracin de leucocitos y la exudacin de protenas en el modelo experimental

de pleuresa. La inhibicin de EETP (500 mg / kg) fueron 75 4% para la migracin de
leucocitos y 59 3% para la extravasacin de protenas, mientras que la inivicin de
dexametasona fue de 88 6% para la migracin de leucocitos y 77 6% para la
extravasacin de protenas. (Kassuya et al, 2015)
Bazylko et al (2013) realizaron un estudio comparativo de los efectos antioxidante,
antiinflamatorio, actividad antimicrobiana y composicin qumica entre extractos
acuoso e hidroetanlico de Tropaeolum majus. Ambos extractos son preparados en una
sala a 90C y secados por congelacin. Los extractos acuosos se caracterizaron por la
presencia de los dos steres de cido qunico con cidos cinmicos y flavonoides.
Mientras que los extractos hidroetanlico eran principalmente rico en los steres
mencionados anteriormente de los cidos, flavonoides fueron slo detectadas en
extractos de hierba secada por congelacin. Por otro lado la actividad antioxidante fue
probada in vitro y ex vivo, demostrando una disminucin de neutrfilos en humanos ex
vivo por la presencia de compuestos fenlicos y por el contenido de cido ascrbico (de
18.770.42 a 33.760.54 mg/g), dependiendo la concentracin usada pero no hubo
diferencias significativas entre los extractos en este aspecto. En el caso del efecto
antiinflamatorio se comprob que solamente acta sobre las COX1 a una concentracin
de 50ug/ml. Del mismo modo se determin que no tiene efecto antimicrobiano; se
concluy que los compuestos responsables de las actividades reportadas son steres de
cido qunico con cidos cinmicos, cido clorognico, y principalmente vitamina C ,
tambin no existe gran diferencia entre los extractos.
Zanetti et al. (2003) determinan la toxicidad aguda y antibacteriana de dos extractos de
Tropaeolum majus. Los extractos acuosos y etanlicos se prepararon por maceracin en
fro durante 14 das usando 578 g de la droga en polvo, las soluciones obtenidas fueron
filtradas y evaporadas, obteniendo 17,07% de extracto acuoso e 12,09% de extracto
etanlico. Para la evaluacin de la toxicidad aguda se usaron ratones albinos.
Dividindolos en 3 grupos siendo estos: grupo control (administrando agua destilada),
grupo extracto acuoso y grupo extracto etanlico. Los dos ltimos grupos fueron
divididos en 4 subgrupos recibiendo los extractos al 70% a dosis de 625 mg/kg, 1250
mg/kg, 2500 mg/kg y 5000 mg/kg va oral respectivamente. Realizando observaciones
a los 30, 60, 120, 240 e 360 minutos posteriores de la administracin, los parmetros
comprobados fueron nmero de muertes, comportamiento general, depresin,

excitacin, convulsin, salivacin, piloereccin, lagrimeo, defecacin, respiracin y

locomocin. Mientras que para la evaluacin del efecto antiinflamatorio fueron usadas
cepas de: Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Staphylococcus aureus (ATCC
6538p), Escherichia coli (ATCC 11103), Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031) e
Salmonella setubal, visualizando los halos de inhibicin en agar. El extracto acuoso y
etanolico, en dosis de 0,625 1,25, 2,5 y 5 g / kg de peso corporal por va oral, que no dio
lugar a la toxicidad aguda. Y el extracto de etanol presenta actividad antibacteriana para
los microorganismos Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Escherichia
coli, Klebsiella pneumoniae y Salmonella Setubal.
En el trabajo de investigacin realizado por (Loureno et al., 2011) busc evaluar la
actividad de Tropaeolum majus sobre la migracin leucocitaria. Se us ratas Wistar
fueron tratados durante cinco das con tres dosis diferentes del extracto hidroalcohlico
de T. majus (75, 150 y 300 mg / kg). Los animales de control negativo recibieron el
volumen equivalente de solucin salina (5 ml / kg) y los del control positivo
indometacina (5mg/kg). Durante este perodo, los animales recibieron 10 ml de aire
estril en cavidad subcutnea en tres das alternos. En el quinto da, una hora despus de
los tratamientos, la respuesta inflamatoria se fue inducida mediante la administracin de
1 ml de carragenano (solucin 1%) por va subcutnea en la cavidad, y 6 horas despus,
la sangre y exudados se recogieron para la determinacin de los leucocitos totales y
contaje diferencial. Los resultados demostraron que la indometacina redujo el nmero
de leucocitos totales para el exudado en aproximadamente 65%. El EHTM a dosis de 75
y 300 mg / kg tambin redujo significativamente la migracin de estas clulas con
valores estimados 23 - 40%, respectivamente.
Existe gran variedad de preparados a partir de plantas medicinales como infusiones,
decocciones, tinturas, extractos, etc. Empricamente se usan un sinnmero de remedios
para tratar heridas, pero cientficamente son pocas las plantas que se han estudiado. En
la Escuela Superior Politcnica de Chimborazo se estudi el efecto cicatrizante de un
gel elaborado a base de extractos de Nogal (Juglans neotrpica Diels), Ortiga (Urtica
dioica L), Sbila (Aloe vera) con heridas inducidas en el dorso de ratones. Se realizaron
tres formulaciones: F1 (10% nogal, 10% Ortiga, 10% Sbila), F2 (15% Nogal, 10%
Ortiga, 5% Sbila), F3 (20% Nogal, 5% Ortiga, 5% Sbila), administrados tpicamente
dos veces al da por el tiempo requerido, corroborando su eficacia con examen
histopatolgico. Demostrando que F1 y F2 tuvo un 60% de regeneracin celular. Como

conclusin el gel posee actividad cicatrizante en heridas cutneas, debido a la presencia

de taninos nogal, flavonoides ortiga y mucilagos sbila, que combinados presentan
sinergia. (Quiroz, 2013)
Redrobn (2012) realiza una investigacin con el objetivo de comprobar la actividad
cicatrizante de los extractos hidroalcoholicos de Berro (Nasturtium officinale) y Llantn
(Plantago major) en ratones de la especie Mus musculus. Se hizo una herida con un
bistur en el dorso de 18 ratones previamente rasurados, de 1.5cm de largo por 2mm de
profundidad, para la posterior aplicacin de los 6 tratamientos siendo estos: C (Control
+) =Tratados con Eterol, D (control) = Tratados con alcohol al 50%, X, Y y Z
(Dosificaciones) = Tratados con el extracto fluido de Berro y Llantn en una proporcin
de dosificacin 60:40, 40:60 y 50:50 respectivamente , administrados va tpica con
hisopos estriles y 2 aplicaciones cada da por el lapso de 20 das. Se concluy que el
extracto fluido de berro y llantn en una proporcin de dosificacin 50:50 y 60:40 posee
actividad cicatrizante efectiva en un lapso de 6 a 7 das debido a la presencia de taninos
del llantn, y flavonoides del berro, por otro lado la proporcin de 40:60 no poseen
efecto cicatrizante sino que actan simplemente como antibacterianos.
Otras investigaciones comprueban la eficacia de sustancias de origen natural usadas
como terapia para heridas, Schencke et al (2015) estudian el efecto Cicatrizante de la
Miel de Ulmo (Eucryphia cordifolia) Suplementada con cido Ascrbico como
Tratamiento en Quemaduras. Se trabaj con 15 cobayos (Cavia porcellus) distribuidos
en tres grupos: MS (miel suplementada), M (miel), y Control+ (Hidrogel-Tull). Se
provoc una quemadura en seco en el dorso del trax de 1 cm de dimetro. Al da 10 de
tratamiento, se extrajeron las biopsias y se depositaron en PBS. Posteriormente, fueron
fijadas en formalina tamponada y procesadas para fines histolgicos, realizndose las
tcnicas de VGE, VGC, PAS, y Sirius Red. La miel proporciona un ambiente hmedo,
bajo pH, alta viscosidad, efecto higroscpico, y produccin de perxido de hidrgeno,
estos factores juegan un papel combinado en la eficacia para el tratamiento de heridas
por quemaduras. El grupo MS mostro un cierre epidermal en el 60% de las muestras,
observndose una fase proliferativa avanzada. El grupo M no regener la capa
epidrmica y present una fase proliferativa inicial. Los resultados de este estudio
evidenciaron que al suplementar la miel de ulmo con cido ascrbico se logra una
cicatrizacin ms rpida, con respecto a la miel de ulmo no suplementada, en heridas
causadas por quemaduras.

Brondani et al (2016) realizan una recopilacin de artculos cientficos acerca del uso
tradicional, fitoqumico, actividad biolgica y toxicolgica del Tropaeolum majus. Las
bases de datos revisadas fueron SciELO, PubMed, ScienceDirect y Portal da Capes,
teniendo en cuenta los estudios entre 1963 y 2014 y mediante la bsqueda de trminos
como Tropaeolaceae, Tropaeolum majus constituyentes, usos y toxicidad. Se sintetizo
informacin que revela las propiedades medicinales de T. majus, presenta valor
medicinal, alimenticio y ornamental. A partir del extracto y las fracciones de la planta se
han encontrado actividades biolgicas, que incluyen efecto diurtico, antihipertensivo,
anti-inflamatorio, antimicrobiano, antioxidante y cicatrizantes .Adems, efectos
protectores sobre la sangre y el hgado, tratamiento del escorbuto, actividad
antitrombina y prevencin contra la degeneracin macular. Contiene compuestos
biolgicamente activos como flavonoides, glucosilonates, cidos grasos, aceite esencial,
cido clorognico, aminocidos, cucurbitacinas, protenas y carotenoides. Estudios de
toxicidad aguda y subcrnica demostraron una falta de efectos toxicolgicos, pero los
extractos de esta planta pueden tener consecuencias perjudiciales durante el embarazo.
3.2. CATEGORA FUNDAMENTALES O MARCO CONCEPTUAL
3.2.1 MASTUERZO (Tropaeolum majus)

Nombres populares

Cachaco de muladar (Colombia); marauela (Cuba); mastranto de indias, espuela de

galn, llagas de Cristo (Espaa); capuchina (Brasil); cress nasturtium (en ingls)

Descripcin botnica

El mastuerzo es una planta herbcea anual casi trepadora, decumbente y subcarnosa, de

0,50-1 m de altura. De los tallos crecen peciolos delgados, lisos y carnosos; de un color
rojizo en la base y verde hacia la hoja. Tiene hojas alternas redondas, de 4-10 cm de
dimetro; peciolos largos, enrollados en espiral. Flores amarillas o anaranjadas con
pednculos mayores que las hojas, cliz campanulado, amarillento, de 1,2 - 1,7 cm de
largo, espoln de 2-3 cm de long, Los frutos estn formados por tres drupas separables
de 1 a 1,5 cm de dimetro, cuyas semillas tienen un aspecto rugoso. Pertenece a la
familia de las tropeolceas tiene un solo gnero y abarca 95 especies de plantas entre
tuberosas y perennes, est familia es cultivada de forma ornamental pero generalmente

crece de forma silvestre como maleza. Su importancia radica en sus bondades

medicinales para combatir mltiples dolencias, ya sea oral o de uso externo, mediante
infusiones, diluciones, macerados o extractos. (Nanzi, 1999; Hogares familiares, 2010;
Rosales et al, 2015; Cabezas, 2014).

Clasificacin Taxonmica del Mastuerzo

Reino: Plantae
Filo: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Geraniales
Familia: Tropaeolaceae
Gnero: Tropaeolum
Especie: Majus (Cabezas, 2014)

Habitad

Nativa de la regin Andina de Sudamrica, ms precisamente de Per, actualmente se

encuentra distribuida por todo el mundo, puede resultar invasiva, compitiendo con la
flora propia del rea. (Hogares familiares, 2010)

Usos teraputicos

Es usada para el tratamiento de diversas dolencias como problemas cardiovasculares,

infecciones del tracto urinario, asma y constipacin. Tienen accin antibacteriana
principalmente contra Staphylococcus aureus, Bacilus subtilis, Micrococcus luteus,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Bordetella bronchiseptica; antioxidante
especialmente en sus flores, antiescorbtica, antisptica a nivel urinario y respiratorio.
La mejor manera de utilizarla es como tintura. En los ltimos aos tambin ha sido
utilizado como antidepresivo, antihipertensivo y en afecciones de la piel como eczema,
descamacin, hongos. (Zeller y Schneeberger, 1982; Brondani et al, 2016; Santos et al,
2016; Loureno et al, 2011)

Segn Souto et al (2014), las hojas, flores y semillas de la capuchina se caracterizan por
su alto contenido de vitamina C y se usan para prevenir gripes. Por otro lado, las hojas
se consideran expectorantes naturales.

Composicin Qumica

Estudios fotoqumicos de esta planta aportan la presencia de:

-

Flavonoides (isoquercitrina, quercetina, lutena, astragalina y kaempferol).

cidos grasos (cido ercico, cido oleico y linolico).
cidos esenciales con hetersidos sulfurados: glucotropeolsido, que liberan
isotiocianato de bencilo cuya actividad antimicrobiana ha sido ampliamente

documentada.
Glucosinolatos (benzilglicosinolatos), poseen actividad inhibitoria in vitro sobre

algunas clulas tumorales humanas.

Triterpenos tetracclicos previamente aisladas de sus hojas.
Las hojas contienen cido ascrbico e isoquercitrsido.
Las flores contienen helenina, mirosina.
Adems posee pigmentos: la sorbusina y carotenoides, resinas, pectinas. (Nanzi,
1999; Loureno et al, 2011; Cabezas, 2014; Bazylko et al,2013; Brondani et al,
2016)

3.2.2 CICATRIZACIN
El enunciado cicatrizacin de heridas se refiere exclusivamente para describir el
proceso que se da en la piel cuando el organismo reestablece tejido daado o perdido a
travs de la formacin de una cicatriz de colgeno. Cualquier tipo de lesin desencadena
un complejo proceso celular y bioqumico que culmina con la reparacin del tejido.
La cicatrizacin de heridas es un proceso complejo que comprende una sucesin de
eventos independientes. Se puede entender como un conjunto de 3 fases
interconectadas, dependientes de la activacin y de la accin celular que estimulan el
crecimiento, reparacin y remodelacin del tejido, a continuacin se detallan ests
fases:
1. Hemostasia e inflamatoria
2. Fibroproliferativa
3. Maduracin y remodelacin (Guarn et al, 2013; Fowler y Wiliams, 2013)

Hemostasia e inflamacin

En todas las heridas siempre hay un cierto grado de hemorragia, la rotura de los vasos
deja expuesto el colgeno subendotelial, provocando agregacin plaquetaria y activando
la va intrnseca de la cascada de coagulacin (Figura 1).
-Factores de coagulacin
I.
II.
III.

Fibringeno
Protrombina
Tromboplastina tisular

IV.

Calcio

V.

Proacelerina, globulina acelerada o factor lbil

VI.

Desconocido

VII.

Proconvertina

VIII.

Factor antihemoflico o factor antihemoflico A

IX.

Factor Christmas o factor antihemoflico C

X.

Factor Sterat-Prower

XI.

Precursor plasmtico de la tromboplastina (PTA)

XII.

Factor Hagemen

XIII.

Factor estabilizador ( Cubillos, 2006)

Figura 1. Esquema simplificado de la cascada de coagulacin (Anjos et al, 2007)

El contacto entre el colgeno y las plaquetas, en presencia de trombina, fibronectina,
provocan la liberacin de citoquinas y factores de crecimiento que provienen de las
plaquetas y tejidos circundantes. El coagulo de fibrina se encarga de sellar
temporalmente la herida y proporcionar una matriz para la migracin de neutrfilos,
monocitos, fibroblastos y clulas endoteliales; por otro lado, tambin afecta a la
cicatrizacin ya que incrementa la cantidad de restos celulares que deben ser
eliminados, aumentando el espacio muerto de la herida y proporcionando un medio de
cultivo bacteriano.
La migracin celular al interior del tejido ocurre de forma secuencial, primero hay un
incremento en la permeabilidad vascular y liberacin de prostaglandinas junto a
sustancias quimiotcticas (interleuquinas, factores de crecimiento, factor- de necrosis
tumoral, factor de crecimiento transformador, factor plaquetario 4) y productos
bacterianos, todo esto estimula la migracin de neutrfilos al rea de infeccin, seguido
de fibroblastos, monocitos y linfocitos; estos dos ltimos ejercen un papel crtico
durante el proceso curacin.
Las clulas que participan en la fase de cicatrizacin deben ser activadas por
mediadores locales fsicos y qumicos, puede ser por expresin de nuevos antgenos en
la superficie celular, incremento en la liberacin de citoquinas y factores de crecimiento.
Los macrfagos presentes en la herida se derivan de los monocitos que llegan al sitio de
la infeccin a travs del torrente sanguneo, el primer estmulo para su activacin es la
liberacin de factores quimiotcticos y de crecimiento por parte de las plaquetas, la
fagocitosis de los restos celulares, como el colgeno tambin contribuye con su
activacin. Los macrfagos se ven implicados en varias fases de la cicatrizacin como
son: desbridacin, sntesis de matriz, angiognesis y fibroplasia, mediadas por la
liberacin de xido ntrico a consecuencia de la activacin del macrfago. Por el
contrario, provoca la salida de sustancias como FNT- e interleuqina-1 (IL-1),
interferones, que activan a los linfocitos; la tasa de produccin y vida media de
sustancias preinflamatorias regulan de forma directa la actividad del macrfago y
modulan el proceso de cicatrizacin.

Los fibroblastos tienen la funcin de sintetizar y depositar proteoglicanos y colgeno,

componentes principales de la matriz extracelular del tejido conjuntivo. Los fibroblastos
que se encuentran en la herida derivan de la clulas mesenquimatosas perivasculares
luripotenciales o de los fibroblastos de tejidos cercanos. Se son estimuladas por las
citoquinas provenientes de los macrfagos, la matriz que rodea las clulas, presencia de
fibronectina, contenido de oxgeno y acidez el tejido. (Fowler y Wiliams, 2013)

Fibroproliferativa

Despus de 24-36 horas de haberse producido la herida, las clulas endoteliales y

fibroblastos presentes en los mrgenes de la herida empiezan a dividirse, por accin de
los factores de crecimiento y citoquinas que se encuentran en las plaquetas, macrfagos
activados y almacenadas en el coagulo de fibrina.
Las clulas endoteliales proliferan a partir de las vnulas sanas que se encuentran cerca
del borde de la herida, forman nuevos capilares en un proceso denominado
angiognesis. En lo capilares se desarrollan los brotes endoteliales, cada uno se uno con
otro en una herida abierta, despus de la fusin dicho brote endotelial es canalizado y
empieza a fluir la sangre. La actividad mittica de las clulas mesenquimatosas
aumentar conforme aumenta el flujo sanguneo. A medida que avanza la cicatrizacin
algunos capilares aumentan de calibre para convertirse en vasos, mientras que otros
desaparecen. Por otro lado, los conductos linfticos se desarrollan ms lentamente por lo
que el drenaje linftico de la injuria es ms lento durante la fase inicial de cicatrizacin.
El tejido que queda debajo de la herida es tejido de granulacin, una mezcla de asas
capilares en ramificacin rodeada por clulas mesenquimatosas y matriz extracelular,
este tejido es muy resistente a infecciones. (Fowler y Wiliams, 2013)

Maduracin y remodelacin

Esta fase empieza alrededor de 15 das despus de la lesin, durante esta fase se
desarrolla una resistencia a la tensin debido a que el colgeno sufre una modificacin
estructural. Una vez que el tejido de granulacin a cubierto el defecto se produce una
disminucin gradual del colgeno del nmero de fibroblastos, hay regresin de la red
capilar y reduccin de la sntesis de colgeno.

Existe un aumento lento y regular en la resistencia de tensin debido a la unin gradual

intermolecular e intramolecular de tropocolgeno y a la remodelacin. Al cabo de una
semana solo hay un 3% de resistencia final y pasadas tres semanas, el 20%, despus de
tres meses tendr el 80%. (Fowler y Wiliams, 2013)

Metabolitos secundarios que participan en la cicatrizacin

Flavonoides: son pigmentos amarillos presentes en los vegetales, Se encuentran

como O- glicsidos o en forma de C- glicsidos. Son solubles en etanol, los
flavonoides que presentan actividad cicatrizante son quercetina, kaempferol; en
presencia de vitamina C producen un aumento de fibronectina extracelular y
colgeno al producir la proliferacin de fibroblastos normales de la piel,
favorecen la angiognesis y protegen los vasos sanguneos de infecciones.

Adems brindan actividad antiinflamatoria y analgsica.

Mucilagos: No se absorben por uso tpico, pero se estratifican en los tejidos o
sobre las mucosas manifestando una accin protectora, vulneraria, antiulcerosa y

hemosttica
Glucosinolatos: usado para tratar quemaduras de sol, promueve la cicatrizacin

de heridas
Taninos: cumplen funcin cicatrizante al acelerar la curacin de las heridas y
hemosttica al detener el sangrado. Forman puentes de hidrogeno al unirse con
las protenas dando lugar a la formacin de costras. Por otro lado, cuenta con
accin astringente, antioxidante y antibacteriano. (Quiroz,2013; Cabezas,2014;

Asto, 2015)
Vitamina C: Su uso tpico tiene un gran poder antinflamatorio y estimulante de
la sntesis de fibras de colgeno. Los fibroblastos aumentan su proliferacin en 4
veces y aumentan su sntesis de vitamina C. Tambin participa en la
angiognesis y cuenta con actividad antioxidante. (Schencke et al, 2015)

3.2.3 Origen, clasificacin y generalidades el Cobayo (Cavia porcellus)

El Cavia porcellus ha sido domesticado desde el siglo XVI con el fines alimenticios,
desde entonces se ha consumido en pases latinoamericanos y mediterrneos, es un
animal de gran adaptabilidad, sus caracterstica se detallan en la tabla 1.

Uno de los principales productores de carne de cobayo es Per. En el mbito rural la

explotacin de cuyes fue generalizada ya que solo estaba destinada para el
autoconsumo, actualmente es exportada a pases de Europa y Asia. Otros nombres con
los que se le conoce al cobayo son: cuy en Ecuador, huanco en Bolivia, conejillo de
indias, curito en Venezuela y curi en Colombia. (Mota et al., 2012; Atter., 1998)

Clasificacin taxonmica del cuy

Reino: Animal
Clase: Mamfero
Orden: Roedor
Suborden: Hystricomorpha
Familia: Caviidae
Gnero: Cavia
Especie: Cavia aparea aparea
Cavia porcellus especie domstica (Mayorga, 2016)
Tabla 1. Caractersticas generales del cuy
Caractersticas

Descripcin

Longevidad media

4 a 8 aos

Temperatura corporal

37,2C a 39,5C

Peso adulto

500 g a 1200 g (macho) 700 g a 900g (hembra)

Longitud corporal

20 cm a 25 cm

Cabeza

Grande y hocico corto

Frmula dentaria

I 1/1; C 0/0; PM 1/1; M 3/3 (no tiene caninos)

Cuello

Fuerte, bien insertado al tronco y compuesto por 7

vrtebras cervicales

Tronco

De forma alargada y redondeada, conformado por 13

vertebras dorsales

Abdomen

Voluminoso y con gran capacidad, se sostiene por 7

vrtebras lumbares

Extremidades

Miembros posteriores ms largos y gruesos que los

anteriores

Nmero de dedos

Miembros anteriores: 4; Miembros posteriores 3.

Color del pelo

De un solo color: blanco, bayo, negro, rojizo

Capa combinada: en el cuerpo, 2 o ms colores de los
primeros mencionados.

Forma del pelo

Puede presentar las siguientes formas; corto , largo,

liso y/o crespo, de pelo corto y liso, de pelo largo y
liso, etc.

Vista

Buena

Odo

Muy bueno

Olfato

Muy bueno

(Manual Agropecuario, 2002)

Utilizacin del Cobayo

Puede ser usado en diversas actividades como:

-

Animal productor de carne: En todos los pases andinos es comn su cra para
la produccin de carne, el consumo de carne se remonta a la poca incaica en

donde los chasquis la usaban principalmente por su alto valor nutritivo.

Animal productor de Lana: Es usado por la industria farmacutica para

pruebas de tintes para el cabello humano.

Animal de investigacin: Al igual que las ratas, conejos, hmster, tienen una
alta susceptibilidad a enfermedades que sufren los seres humanos, por ello es
muy utilizado en investigaciones. Es reconocido mundialmente por sus
contribuciones con la ciencia sometido a experimentacin como animal de

laboratorio. (Nuwanyakpa et al., 1997; Esquivel., 1994)

Clasificacin

Se lo clasifica de acuerdo a la conformacin del cuerpo:

-

Tipo A: son cuyes de gran desarrollo muscular, con buena base sea. Fciles de

manejar de temperamento tranquilo y buena conversin alimenticia.

Tipo B: tienen escaso desarrollo muscular, su manejo es dificultoso debido a que
son animales nerviosos, se diferencian de los anteriores por su cabeza angulosa y
triangular

Tambin se los clasifica segn el pelaje:

-

Tipo 1: son de pelo corto lacio y pegado al cuerpo, en ocasiones presentan un

remolino en la frente. Tienen gran ganancia de peso con buenas caractersticas
para la produccin de carne.
Tipo 2: de pelo lacio y corto pero dispuestos en forma de roseta o remolino

distribuidas por todo el cuerpo. Tiene buenas propiedades para produccin de

carne pero con menor rendimiento que el tipo 1.
Tipo 3: se caracteriza por ser de pelo largo, liso pero pegado al cuerpo y

distribuido en forma de rosetas. Usa gran parte de nutrientes en su pelaje, por lo

que no es un buen productor de carne
Tipo 4: al nacer presenta pelo ensortijado pero luego se hace spero y erizado.

Son de tamao grande (Mayorga., 2016)

IV.

HIPTESIS

El uso de gel a base de mastuerzo es eficaz en la cicatrizacin de heridas en cobayos

V.

OBJETIVOS.

Objetivo General.

Evaluar diferentes dosis de gel a base de mastuerzo (Tropaeolum majus) como

cicatrizante en cobayos (Cavia porcellus).

Objetivos Especficos.

Determinar la concentracin adecuada (20%,40%,80%) de gel a base de

mastuerzo para generar efecto cicatrizante en heridas de cobayos

Valorar el grado de cicatrizacin por medio examen histopatolgico en heridas

de cobayos.
Cuantificar la evolucin de la cicatriz mediante medicin diaria de la herida.

VI.

MATERIALES Y MTODOS

6.1.

Ubicacin del experimento

La presente investigacin se realizar en el Hospital Docente Veterinario de la Facultad

de Ciencias Agropecuarias perteneciente a la Universidad Tcnica de Ambato, en el
campus Querochaca ubicado a 1km de la va Cevallos- Quero, provincia de Tungurahua
cuyas coordenadas geogrficas son: Latitud 122'3.45"S, Longitud 7836'30.75"O y una
altitud de 2883 msnm
Tabla 2. Condiciones meteorolgicas
PARMETRO
Temperatura:

VALOR
13C

Humedad relativa:

78 %

Precipitacin:

10mm

Vientos:
Fuente: INAMHI (2015)

11 Km/hora

6.2.

Caractersticas del lugar

Cevallos es un cantn perteneciente a la provincia de Tungurahua. Se ubica en el sector

centro-sur de la provincia y al sur-oriente de la ciudad de Ambato.
6.3.

Equipos y Materiales

6.3.1. Equipos
- Balanza analtica
- Espectrofotmetro
- Micrometro
6.3.2. Materiales
-

Bistur
Mango de bistur
Jaulas
Jeringas
Guantes quirrgicos
Vaso de precipitacin
Agitador
Pipeta
Probeta

6.3.3. Frmacos
-

Lidocana

6.3.4. Reactivos
-

Etanol 96

Carbopol ultrez 21

Agua destilada

Propilenglicol

TEA (Trietanolamina)

Fenova (propilparabeno y metilparabeno)

EDTA (cido etilendiaminotetraactico)

Formol

6.3.5. Animales
- Cobayos machos
Edad: 5 meses
Peso: 500-1000 g
Estado fisiolgico normal
6.4. Mtodos
Los animales para la presente investigacin sern obtenidos del criadero Seor Cuy de la ciudad
de Riobamba perteneciente a la provincia de Chimborazo. Ubicado en el cantn Chambo calles
Carlos Cuadrado y 16 de Diciembre.
Una vez obtenidos los cobayos sern clasificados por: sexo, peso y edad. Para posteriormente
ser ubicados en jaulas individuales y alimentados con alfalfa; donde pasaran un periodo de
adaptacin de 30 das en el que se verificar que los animales cuenten con un ptimo estado de
salud.

Recoleccin de las hojas y flores

La recoleccin se realizar despus de la floracin cuando las flores estn completamente

abiertas, por cada cuatro hojas se recoger una flor; se efectuar en la ciudad de Riobamba
perteneciente a la provincia de Chimborazo. Es recomendable cosechar las hojas al terminar el
da y las flores a media maana.

Elaboracin del gel a base de mastuerzo

Obtencin del extracto

Se deja secar la planta en un lugar ventilado y obscuro por 24 horas.

Una vez seca la planta se tritura en pedasos de uno o dos centmetros y se pesa.
En un recipiente de vidrio con su respectiva tapa, se transfiere la planta triturada y
pesada, se humedece directamente con el etanol a 96, procurando que no quede
lquido residual. (Generalmente se emplea por cada gramo de droga, 2 mL de
alcohol para la humectacin).
Se macera por 3-5 das, despus se transfiere a un erlenmeyer de 1000 mL todo el
material lquido obtenido, en un proceso de decantacin, vaciando as todo el
contenido lquido.
Con ayuda de un embudo cuyo se cubre con papel filtro el orificio de salida,
transferimos el lquido decantado a otro erlenmeyer de 1000 mL. De sta manera
filtramos las impurezas que pudo contener el extracto.
Se coloca en un baln esmerilado (previamente pesado) el contenido obtenido por
filtracin y se inicia el proceso de concentracin del extracto por medio del
rotavapor.
Se envasa en un recipiente de vidrio y obscuro para que no est en contacto con la
luz.
Preparacin de gel
Dispersar el carbopol ultrez 21 en una determinada cantidad de agua destilada y
agitar.
Adicionar fenova, propilenglicol y EDTA con agitacin constante y dejar en reposo
por 24 horas para obtener una buena hidratacin.
Adicionar TEA con movimiento lento procurando no incorporar burbujas de aire
hasta que adquiera caractersticas de gel o de pH 6.5.
Finalmente se incorpora el extracto.
Envasar y etiquetar.

Escisin de la herida

Se realizara la tricotoma en el lomo de los cobayos y un embrocado con clorhexidina al 0,05%

Se usar acepromacina como tranquilizante a dosis de 0,08 mg/kg y se realizar anestesia local
con lidocana a dosis de 0,1 ml por

cm 2 . A continuacin con punch para biopsias de 1

cm de dimetro realizamos una herida por escisin de 1cm de dimetro a la altura de T3 y

T4.
Se usarn 48 cobayos a los que se los dividir en 4 grupos con 12 animales por grupo. T0 se le
aplicar 1 ml de violeta de genciana, T1 se les administrara gel a base de mastuerzo en
concentraciones de 20% en el rea de la herida, T2 se les administrara gel a base de mastuerzo
en concentraciones de 30% en el rea de la herida y T4 se les administrara gel a base de
mastuerzo en concentraciones de 40% en el rea de la herida. Cada aplicacin de gel se har dos
veces al da durante 7 das.

Toma de biopsias

La biopsia har a los 7 das de haber inducido la herida, con infiltracin de anestesia local con
lidocana a dosis de 0,1 ml por

cm 2

en la zona donde se va a hacer la extraccin. Con la

ayuda de un sacabocados de 6mm se coloca sobre la herida y se gira de tal manera que se
introduzca en la piel hasta obtener la muestra deseada. Una vez obtenida la muestra se realizar
una sutura con puntos simples con nylon. La muestra se coloca en un recipiente con formol al
10% para su conservacin.

6.5. Factores en estudio

Los factores en estudio sern:
Cobayos machos de 5 meses de edad

Se usar gel a base de mastuerzo en heridas de cobayos

Va de administracin:

Tpica

Concentraciones:

0% (T0)
20% (T1)
30% (T2)
40% (T3)

6.6. Tratamientos
Los tratamientos que se van a utilizar en este estudio son un testigo (T0) y tres
diferentes concentraciones de gel a base de mastuerzo (T1, T2, T3), cada tratamiento
con cuatro repeticiones
Tabla 3. Tratamientos
Tratamientos

Cdigo

Unidades

Total de Unidades

Experimentales
2

Repeticiones
4

Experimentales
8

Violeta de
genciana
20% de gel
30% de gel

T0
T1
T2

2
2

4
4

8
8

40% de gel
Total

T3

8
48

6.7. Diseo experimental

El diseo experimental que se realizar en esta investigacin ser completamente al azar
con cuatro repeticiones.
6.8. Variables respuesta
En la presente investigacin se medir las siguientes variables:
-

Dimensiones de la herida

Se tomar las medidas de la herida con un micrmetro digital, midiendo longitud mayor
y anchura mayor (cm). Multiplicar las dos y obtener la superficie aproximada en
centmetro cuadrados. Las mediciones se realizarn diariamente.
-

Tipo de Tejido

Se observar las clulas presentes en el tejido por medio de examen histopatolgico

Examen histopatolgico
Tcnica de impregnacin con parafina: el tejido obtenido a partir de un animal es
cortado inicialmente en piezas menores. Ests piezas se sumergen en formol taponado.
Luego de la fijacin, se deshidrata el espcimen sumergindolo sucesivamente en
alcohol en graduacin creciente hasta llegar al alcohol absoluto (100%). A continuacin
se lo sumerge en xilol, que es miscible tanto en alcohol al 100 % como en parafina.
Durante la impregnacin la parafina fundida reemplaza al xilol. Este proceso se realiza
en una estufa a una temperatura ligeramente superior del punto de fusin de la parafina.
Una vez que se completa la impregnacin el espcimen es transferido a un molde con
parafina fresca fundida y se lo deja solidificar. Luego se quita el molde y se remueve el
exceso de parafina alrededor de la muestra. Se coloca y se asegura el bloque de parafina
en un micrtomo y se lo orienta apropiadamente con respecto a la cuchilla. Con cada
vuelta del micrtomo el espcimen avanza sobre la cuchilla y se obtiene una nueva
rebanada de grosor deseado, cada rebanada sucesiva se adhiere a la precedente
formando as una tira continua de cortes. Posteriormente se separa con cuidado uno o
dos cortes de la tira y si depositan sobre la superficie de agua de un bao de agua
caliente. Esto ablanda la parafina y estira las arrugas de la muestra. Los cortes son
transferidos a un portaobjetos que se colocan sobre una placa caliente. A medida que el
preparado se seca, el corte se adhiere a la superficie del portaobjetos.

Se desparafina el corte con xilol y se lo rehidrata. Luego se lo tie y se lo vuelve a

deshidratar y aclarar con xilol y se lo cubre con un cubreobjetos previa adicin de una
gota de resina de montaje. La tincin se realiza con hematoxilina y eosina. (Bacha y
Bacha, 2001)
6.9. Procesamiento de la informacin
Se aplicar prueba de significancia de Tukey en el programa InfoStat,

VII.
7.1.

MARCO ADMINISTRATIVO

Presupuesto

Rubro
Insumos y materiales:
Rollo de gasas
Alcohol 96%
Lidocana
Acepromacina
Cuyes

Cantidad
1
10
2
2
48

Viajes
Alfalfa
Publicaciones
Bistur
Exmenes

10
15
5
16
16

Unidad

Unidades
ml
Unitario
Unitario
Unitario
Diario
Kg
Unitario
Unitario
Unitario

Costo unitario
USD ($)
20
10
2
5
5
0,50
5
3
0,50
20

Costo total
USD ($)
20
10
4
10
240
5
80
15
8
320

SUBTOTAL
Imprevistos 5%
TOTAL

7.2.

462
23.1
485.1

Cronograma de actividades

MESES

ACTIVIDADES
MES

MES

MES

MES

MES

MES

MES
7

Elaboracin del anteproyecto

Aprobacin del anteproyecto
Instalacin del ensayo

X
X
X

Inicio del ensayo

Evaluacin del ensayo

Sistematizacin de los resultados

Elaboracin de la tesis

Entrega de tesis

X
X

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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(Consultado

Octubre

2016)

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