Manual de Artemia Rotiferos Cenaim
Manual de Artemia Rotiferos Cenaim
Manual de Artemia Rotiferos Cenaim
Nemathelminthes o Aschelminthes
Rotatoria
Monogononta
Brachionidae
Brachionus
MORFOLOGIA
Rotatoria (= Rotifera) pertenecen a los ms pequeos metazoarios. Ellos raramente alcanzan
2 mm en la longitud del cuerpo. Los machos tinen un tamao reducido y son menos
desarrollados que las hembras; algunos miden tan solo 60 m. El cuerpo de todas las especies
consiste de un nmero constante de clulas, las diferente especies de Brachionus contienen
aproximadamente 1000 clulas las que no deben considerarse como identidades nicas sino
como un rea de plasma. El crecimiento del animal es asegurado por el aumento de plasma y
no por la divisin de la clula.
La epidermis contiene una capa densamente empaquetada de protenas similar a l a
queratina denominada la loriga. El cuerpo del rotfero se diferencia en tres partes distintas
que consisten de la cabeza, el tronco y pie. La cabeza lleva el rgano rotatorio o corona que es
reconocido fcilmente por sus cilios anulares. La corona retrctil asegura la locomocin y un
movimiento del agua en forma de remolino que facilita la captacin de pequeas partculas
alimentarias (principalmente algas y detrito).
El tronco contiene el tracto digestivo, consistiendo de un mastax que muele las partculas
ingeridas, el esfago, el estmago con glndulas gstricas y el intestino. El sistema
excretorio consiste de un par de protonefridios con clulas terminales (cyrtocitos), el conducto
y la vescula. Los protonefridios expulsa lquido excretorio y juegan un papel importante en
la regulacin osmtica. El rgano genital es impar (Monogononta) o pareado en los ordenes
Seisonidea y Bdelloidea. La apertura del conjunto externo de la vescula y el oviducto se
llama cloaca.
El pie es una estructura anillada retrctil sin segmentacin que termina en uno o cuatro dedos
poseyendo glndulas pedales que segregan una sustancia adhesiva en rotferos reptantes y
ssiles.
Tipos de cepas ( L y S)
Existen dos diferentes morfotipos de rotferos: el tipo pequeo (S) y el tipo grande (L). Ellos
difieren en la longitud de la loriga: 130-340 m (promedio 239 m) para el tipo L y 100-210
m (promedio 160 m) para el tipo S. Existen tambin diferencias en el peso, forma de las
espinas occipitales y de las temperaturas ptimas de crecimiento (el tipo L tiene un rango de
temperatura ms amplio, mientras el tipo S posee mayor resistencia a temperaturas ms
alta).
CICLO DE VIDA Y DESARROLLO
El ciclo de vida de Brachionus plicatilis presenta dos modos de reproduccin. Durante la
partenognesis las hembras amcticas producen huevos amcticos (diploide, cromosomas 2n)
los que se desarrollan nuevamente en hembras amcticas. Esta es la manera ms rpida de
reproduccin y por lo tanto la ms importante para la produccin intensiva de rotferos. Sin
embargo, el ciclo de vida puede volverse en reproduccin sexual ms complicada por
condiciones ambientales desfavorables. Durante la reproduccin sexual las hembras mcticas
y amcticas son producidas. Aunque ambas no son morfolgicamente diferentes, las hembras
mcticas producen huevos haploides (n cromosomas). Las larvas que son incubadas fuera de
estos huevos mcticos infrtiles se desarrollan en diminutos machos haploides. Estos machos
son aproximadamente un cuarto del tamao de la hembra; ellos no poseen tracto digestivo ni
vescula, pero tienen un sobredimensionado testculo que se llena esperma maduro. Los
huevos mcticos que eclosionarn en machos son significativamente menores en tamao,
mientras que los huevos mcticos fertilizados son ms grandes y consisten de una capa externa
gruesa y dbilmente granulada. Estos son los huevos latentes y nicamente eclosionarn
hembras amcticas bajo cambios repentinos en las condiciones ambientales. Estos pueden ser
originados por cambios en las condiciones climatolgicas eventualmente provocando
variaciones en la temperatura, salinidad o en las condiciones alimenticias. Se debe
enfatizar que la densidad de la poblacin del rotfero juega tambin un papel importante en
la estrategia del modo de reproduccin. Aunque el mecanismo no es entendido completamente
se acepta generalmente que el sentido biolgico de producir huevos latentes, por causa de
condiciones ambientales desfavorables como sequa o fro, permite asegurar la supervivencia
de la poblacin.
El lapso de vida de los rotferos depende de la temperatura del cultivo, pero en un ambiente
controlado (25 C) el perodo de vida se ha estimado en 3.4 a 4.4 das. Generalmente, las
larvas llegan a ser adultas despus de 0.5 a 1.5 das por lo cual las hembras comienzan a
poner huevos aproximadamente cada cuatro horas. Se cree que las hembras pueden producir
diez generaciones de progenie antes que ellas eventualmente mueran. La actividad de
reproduccin de Brachionus depende de la temperatura del ambiente.
ALIMENTO
Los rotferos del gnero Brachionus como filtrador no selectivo, puede ingerir partculas de
alimento de 20-30 m. En la naturaleza consumen microalgas, bacterias, levaduras y
protozoarios. Los animales cultivados se alimentan mayormente con algas unicelulares y/ o
levaduras. Nannochloropsis es una de las microalgas utilizadas usualmente como alimento
del rotfero. Tiene un tamao de 2-3 m. Sin embargo tambin Tetraselmis e Isochrysis son de
alta calidad nutricional. La levadura de pan ha sido tambin empleada para el cultivo de
rotferos, pero el valor nutritivo resultante de los rotferos es muy pobre. Desde hace algunos
aos, existen dietas artificiales y de enriquecimiento en el mercado, las cuales son
nutricionalmente completas y pueden reemplazar totalmente el uso de algas y/ o levadura.
NAUPLIOS DE ARTEMIA
SELECCION DEL LOTE DE ARTEMIA DE QUISTES
El valor de la Artemia como fuente econmico y nutricional para larvas de peces y de
camarones es determinado por un nmero de factores:
Responsable
productor
productor
productor
productor /distribuidor
distribuidor
acuacultor
Comentarios
producto limpio, humedad< 8%
al vaco o atmsfera inerte
refrigerado (2-10 C)
transporte refrigerado
almacenamiento refrigerado (2-10 C)
- almacenamiento refrigerado (2-10 C):
almacenamiento prolongado
- almacenamiento en fro (sala con aire
acondicionado ): perodo corto de almacenamiento
Ambas cepas pertenecen a la misma especies hermana Artemia franciscana, sin embargo a
veces los productores de Artemia tratan de confundir a sus clientes relacionando el nombre de
las especie hermana directamente e incondicionalmente al de la cepa de San Francisco con el
consiguiente tamao naupliuar y mayor costo.
En caso de duda la longitud de los nauplios recin eclosionados deber ser verificado por
medicin microscpica directa. Una manera indirecta confiable para la estimacin de la
longitud naupliar, es la medida del dimetro del quiste: un alto y positivo grado de
correlacin ha sido ciertamente demostrado entre esas dos medidas biomtricas.
Medicin del dimetro de los quistes de Artemia y de la longitud de los nauplios recin
eclosionados
- Materiales y equipos requeridos
- microscopio binocular
-dispositivo de calibracin (e. g. micrmetro ocular o hematocitmetro)
- cristalera: erlenmeyer, pipetas, cajas petri
- sistema en pequea escala para incubar quistes de Artemia (botellas de 1 l o conos
de Imhoff)
- reactivos:lugol
- agua de mar
- Procedimiento (vese tambin la ilustracin: SELECCION DE LA CEPA ADEQUADA DE
ARTEMIA, Determinacin del tamao de los nauplios recin eclosionados)
- calibracin del equipo de medicin
- medida de la longitud de los nauplios recin eclosionados
- incubar los quistes de Artemia bajo condiciones ptimas a una densidad de 1 gl-1
- cosechar los nauplios eclosionados al T90
- medir una muestra de por lo menos 100 nauplios teidos y calcular el valor
promedio
- continuar la medicin de muestras de 100 nauplios hasta que la desviacin
estndard se encuentre debajo del 10% del promedio de las longitudes de los
nauplios
- medicin del dimetro de los quistes
-hidratar alrededor de 0,1 g de quistes durante 2 h en agua de mar a 25 C
-medir una muestra de por lo menos 100 quistes y calcular el valor promedio
-continuar la medicin de muestras de 100 nauplios hasta que la desviacin
estndard se encuentre debajo del 10% del promedio de las longitudes de los
nauplios
-estimacin de la longitud de los nauplius en base al dimetro de los quistes
-aplicar la frmula: Y= 1.5 x X + 92.1 (R2= 0.80)
donde: Y= longitud de los nauplios
X= dimetro de los quistes
a y b son valores constantes igualando a a y b respectivamente
CARACTERSTICAS DE ECLOSION DE LOS QUISTES DE ARTEMIA
El potencial de eclosin de los quistes de Artemia es cuantificado por el porcentaje de
eclosin (E%) y la eficiencia de eclosin (EE). El E% es de valor biolgico ya que indica la
viabilidad de los quistes como tal. La EE toma enconsideracin no solamente los quistes pero
tambin las posibles impurezas. La EE es de importancia econmica para el acuacultor ya
que representa el nmero de nauplios que eclosionan de 1g de producto tomando en
consideracin el producto entero (i.e. quistes e impurezas posibles).
10
11
12
ROTIFEROS
APLICACION DE ROTIFEROS EN LA LARVICULTURA DE CAMARON
Sin duda el rea mas importante para el uso de rotferos en la acuacultura se situa el la
larvicultura de peces marinos. Para la mayora de las especies, el rotfero es indispensable
como primer alimento vivo debido al hecho que el nauplio de Artemia es inaccesible para
las larvas.
En la larvicultura del camarn el rotfero no es muy utilizado.
justifica por varias razones:
- tamao intermedio
por su tamao de 180 - 250 m, siendo intermedio entre algas (< 20 m) y nauplios de
Artemia ( 500 m), el rotfero es una presa adecuada para los estadios de zoea 1 - mysis 3:
a partir de la muda zoea 1-zoea 2 la larva es capaz de capturar e ingerir rotferos.
- movimiento lento
larvas que se encuentran en fases crticas de su desarrollo que por varias razones estn
dbiles, pueden tener dificultades para capturar nauplios de Artemia:; proporcionando
rotferos durante esas etapas se ayuda a la larva a conseguir ms fcil su paquete nutritivo
- biologa de la alimentacin
debido a la alimentacin por filtracin no-selectiva de los rotferos al igual que la Artemia ,
son presas excelentes para ser enriquecidas
- tasa metablica
el metabolismo muy accelerado del rotfero da la ventaje al larvicultor de poder reaccionar
muy rpido en condiciones crticas: para enriquecer rotferos con sustancias profilcticas se
necesita solamente unas pocas horas (comparado con las 24 horas de eclosin + 12/24horas de
enriquecimiento de los nauplios de Artemia)
La figura 1 muestra la ubicacieon del rotfero en el esquema alimenticio de larvas de
penaeidos.
PREY
SIZE
(m)
II
POSTLARVA
MYSIS
III
II
III
II
III
IV
VI
VII
VIII
IX
1000
800
ROTIFERS
600
400
200
0
INSTAR I ARTEMIA
ENRICHED ARTEMIA
TETRASELMIS
CHAETOCEROS
Fig. 1.- Esquema alimenticio para larvas de camarn a base de alimentos vivos
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PRODUCCION DE ROTIFEROS
CULTIVO DE ROTIFEROS
Ilustraciones: PRODUCCION DE ROTIFEROS, Esquema de la produccin y rutina de trabajo
En el proceso de cultivo de rotferos se observa dos fases distintas: el mantenimiento de un
stock (cultivo en volumenes pequeos) y el cultivo masivo (cultivo en gran volumen)
Mantenimiento del stock de rotferos
Para este propsito se inocula volumenes pequeos (p.ej. tubos de ensayo de 20 ml) con unos 20
rotferos (densidad de no ms de 1 rotfero por ml - R.ml-1). Alimentando con algas
unicelulares (Tetraselmis maculata o Nannochloropsis oculata) estos cultivos llegan a
densidades de 10 R.ml-1 dentro de un periodo de 2 a 3 semanas. Posteriormente se filtra la
suspensin del cultivo utilizando una malla de 60 m, se enjuagan los rotferos y se los
transfiere a fiolas de 1 litro diluyndolos hasta 1 R.ml -1 en agua de mar conteniendo las
mismas algas. Cuando se estima una vez ms una densidad de 10 R.ml-1 en las fiola se cosechan
y se utiliza la cantidad requerida de rotferos previamente limpios para re-inocular tubos de
ensayos y el ciclo empieza nuevamente. Para el mantenimiento de los stock de rotferos se debe
utilizar agua de mar normal (35 ppt), filtrada y esterilizada. Se alimenta los cultivos
solamente una vez (al inicio). Los recipientes estn almacenados en un rea termostatizada
donde se observa muy estrictamente las medidas para que el riesgo de contaminacin sea
mnimo.
Cultivo masivo de rotferos
Utilizando los rotferos remanentes de las fiolas se inocula tanques de 50 litros, se alimenta
con algas hasta conseguir despus de 4 das una densidad promedio de 150 R.ml-1. Luego sern
transferidos a tanques de 200 litros, 500 litros hasta llegar a 5,000 litros, por un lapso de 4
das en cada fase. El alimento a utilizar vara de acuerdo a las necesidades, pudiendo ser
ste algas, levaduras, combinacin de los mencionados o levadura manipulada. De acuerdo
al alimento se obtienen diferentes densidades de rotferos (150-800 R.ml-1 proporcionando
algas y levadura manipulada respectivamente; la levadura de pan, posiblemente
complementado con algas da resultados intermediarios).
La tcnica implantada de produccin de rotferos, se basa en el tipo de cultivo de recoleccin
completa (cultivo batch). Consiste en inocular el cultivo y una vez que se ha alcanzado
densidad mxima se realiza la cosecha completa. Para alimentar con algas, inicialmente se
realiza un bloom fitoplanctnico en agua de mar (35 ppt), se pone dichas algas en los tanques
de produccin de rotferos y se inocula los animales a una densidad de 10-30 R.ml-1, para
despus de 4 das cosechar todo el volumen. De cada cosecha se utilizar el 80% para
alimentar las larvas y el remanente 20% sirve como inculo de un nuevo tanque. Cuando se
administra levadura de pan levadura manipulada se trabaja con salinidad de 20 ppt,
salinidad en que se observa mayor reproduccin de los rotferos. La densidad inoculada es de
alrededor de 200 R.ml-1 y la racin diaria usualmente utilizada de levadura de pan es de 1
g.10-6 de rotferos mientras que de la levadura manipulada se utiliza 300 - 550 mg.10 -6 de
rotferos. Esta tcnica de cultivo tiene dos variantes: una consiste en el mantenimiento de un
volumen constante de cultivo con un incremento en la densidad de rotferos o el
mantenimiento de una densidad constante de rotferos con un incremento en el volumen de
cultivo.
ENRIQUECIMIENTO DE ROTIFEROS
Ilustracin: PRODUCCION DE ROTIFEROS, Enriquecimiento
Igual que en la Artemia, donde la tcnica es ampliamente conocida, se puede enriquecer el
rotfero con una variedad de componentes activos.
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El componente activo debe ser presentado en forma accessible lo que significa en el caso del
rotfero: partculas con tamao inferior a 20 m o gotas de aceite emulsificadas en el agua
(dimetro alrededor de 1 m).
Las condiciones de enriquecimiento son similares a las mencionadas para la Artemia. Se
puede ejecutar el processo al final de un cultivo masivo (en el medio de cultivo mismo) o en un
medio fresco despus de la cosecha del cultivo masivo. Por lo tanto el tanque de
enriquecimiento, la calidad del agua, la aereacin y la temperatura son idnticos a los del
cultivo masivo.
- tanque de enriquecimiento
tanques cilindro-cnicos (de preferencia) con fondo plano
- calidad del agua
agua desinfectada (clorinada y consecutivamente neutralizada con tiosulfato de sodio)
el agua pude ser agua de mar normal ( 35 ppt) o diluida con agua dulce hasta 18-22 ppt)
- densidad de rotferos
400-600 rotferos.ml-1
- aireacin
moderada, sin embargo evitando que la concentracion de oxgeno baje hasta 5 ppm
- temperatura
25-30 C
- preparacin del alimento
bien licuado con agua de manera que el producto de enriquecimiento se presente en forma de
partculas individualizadas con un tamao mximo de 20 m o en forma de glbulos
aceitosos emulsificados con dimetro de 1m
- alimentacin
se agrega el producto de enriquecimiento en 2 raciones iguales de 150 ppm (0.15 g.l-1)
- primera racin: 6 horas antes de la cosecha
- segunda racin: 3 horas antes de la cosecha
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toma corriente
aire
suspensin de alimento
al tanque
de cultivo
temporizador
resevorio para
suspensin de
alimento
A: Parte electrnica
(temporizador y
aireador)
B: Reservorio para
la suspensin de
alimento
C: Air-water-lift
bomba de aire
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FILTRO Y BOMBA
tubo de PVC
Marco del
filtro
Malla intercambiable
SEPARADOR DE PLACAS
El separador de placas consiste de un tanque rectangular dividido en un compartimento
pequeo de entrada y un compartimento de sedimentacin. Existe una placa vertical
localizada a 2 cm del fondo del tanque que separa a los dos compartimentos,. En el
compartimento de sedimentacin estn ubicadas varias placas, de esta manera se incrementa
la superficie de sedimentacin. La inclinacin de las placas es de 30-45 grados (en l a
direccin del flujo).
El agua es continuamente bombeada hacia el separador donde pasa entre las placas. Para
resultados ptimos, el volumen del separador debe ser no menos del 10% del volumen del
tanque de cultivo. Se ajusta el flujo de la bomba de tal manera que el tiempo de retencin en
el separador sea entre 15-30 minutos. La instalacin del sistema igual como su
funcionamiento estn representados en la figura 2.3.
18
inyeccin de aire
para crear el efecto
air-water-lift
tubo PVC
separador de placas
a
tanque de
cultivo
c
b
filtro para
retencin de
Artemia
a: tubo PVC
b: compartimento de entrada
c: placas (inclinacin: 30-45
direccin del flujo de agua
Fig. 2.3.- Instalacin de un sistema para la purificacin primaria de agua por medio de un separador
de placas
Preparacin de la infraestructura
Despus de la desinfeccin del tanque de cultivo con hipoclorito de sodio se lo enjuaga con
agua de mar hasta que no se detecta mas el olor del cloro. De igual manera se trata el
separador de placas, la tubera y las mallas. Inmediatamente antes de la inoculacin se
llena el tanque con agua de mar filtrada.
Origen de la cepa de Artemia
Para todo cultivo intensivo realizado durante el proyecto se utiliz Artemia del Gran Lago
Salado (Utah, EE.UU.).
Inoculacin del cultivo
Se inocul los tanques con nauplios recin eclosionados aplicando una densidad alrededor de
5,000 nauplios.l-1.
Operacin del cultivo
Durante los 3 primeros das del cultivo no oper el sistema de filtracin del agua mediante
el separarador de placas y la alimentacin se ejecut manualmente, de manera que l a
turbidez del medio de cultivo se mantenga alrededor de los 25 cm. A partir del cuarto da se
instal el sistema de filtracin utilizando en el filtro malla de 100 m. Al mismo tiempo
tambin se oper la alimentacin automtica. Durante el cultivo se calibr la frecuencia de
la alimentacin para llegar a obtener una turbidez de 25 cm. Dos veces por da se prepar
una nueva suspensin de alimento y diariamente se limpi las mallas. Desde el momento que
el tamao de la Artemia lo permiti se reemplaz la malla por otra con orificios ms
grande.
Debido a que no se aplic sistema de calentamiento el crecimiento de la Artemia vari
significativamente segn la estacin y los cultivos duraban entre 15-19 das.
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20
21
capa de agua
dulce
evacuacin de agua
dulce
capa de salmuera
Fig. 2.4.- Evacuacin de la capa de agua dulce formada encima de la salmuera de una piscina para
la produccin de Artemia.
Consecuentemente, en caso de que fuertes lluvias azoten la zona se debe tomar acciones
inmediatas para la evacuacin del agua dulce. Con este fin se coloca un tubo vertical en la
estructura de drenaje, abrindose unos centmetros debajo de la superficie del agua, de
manera que el agua dulce sea selectivamente drenada (figura 2.4).
Fertilizacin
Manteniendo un florecimiento de algas para proveer el principal alimento a las poblaciones
en desarrollo de Artemia, es uno de los objetivos ms difciles de conseguir en el cultivo
extensivoArtemia. Frecuentemente no se consigue una buena respuesta del fitoplancton con la
fertilizacin.
Varios productos (orgnicos y inorgnicos) combinaciones de productos pueden ser
utilizados para inducir y mantener florecimientos de algas unicelulares.
A continuacin se recomiendan cantidades de fertilizantes a utilizar:
Produccin de biomasa
La cosecha de la biomasa puede ser efectuada con una versin pequea del
piernn, siendo la malla la tpicamente utilizada por los larveros que pescan las postlarvas
en el mar. Las cosechas son determinadas por el principio de la produccin substituible
(PS) lo que significa que la fraccin de la biomasa cosechada puede ser regenerada durante el
tiempo entre dos cosechas consecutivas (figura2.5).
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Biomasa en la piscina
A
B
.
.
.
. DIARIAS
.
.
.
COSECHAS
Tiempo (das)
Fig. 2.5.- Representacin esquemtica de la produccin sustituible: PS = A-B.
Estanque de produccin
1 . . . . . . x
l
d
1
.
.
). 100 %
b
a, b:
d
v
1 .... x
1 ... y
c
d
d - h.tg() .
( o 2.z
) 100 %
del volumen
(dependiendo de la direccin, z = a b)
Ejemplo: haciendo tramos paralelos a la direccin principal del viento
estanque : - z =a= 75 m
piernn : - d= 1.5 m
- b = 100 m
- =60
- h = nivel del agua sobre el fondo
produccin substituible (PS) estimada = 15%
nmero de tramos : h = h 1= 0.4 m
x = 10.84 ~ 11 tramos
h = h 2= 0.8 m
x = 8.86 ~ 9 tramos
Fig. 2.6.- Clculo de la cosecha de cantidades sustituibles de Artemia
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Introduccin
Observaciones realizadas in situ demostraron que los depredadores principales de Artemia
son los coppodos y un miembro del grupo de la familia Corixidae (localmente conocida como
mosquilla). No se determin estos organismos hasta el nivel de especie. Experimentos
realizados en laboratorio revelaron que ambos depredadores prefieren diferentes tamaos
de Artemia. Los coppodos son solamente perjudiciales cuando la Artemia es pequea
(nauplio recin eclosionado hasta metanauplio de 4 das). Por el contrario, la mosquilla solo
toma como presa a los juveniles y adultos de Artemia, esta ltima siendo frecuentemente
capaz de escapar del ataque del depredador.
Para evitar la entrada de coppodos a los estanques, se utilizan mallas de 60 m que se
ubican en las estructuras de la entrada de agua. Las mosquillas son insectos que invaden los
estanques por el aire. Durante el tiempo que stas pasan en la columna del agua,
regularmente necesitan subir a la superficie para respirar. Una medida probada para
erradicar depredadores de iguales hbitos en estanques de camarones y de peces es l a
aplicacin de pequeas cantidades de diesel. La delgada capa de diesel previene que los
insectos alcancen la superficie, sofocndolos eventualmente.
Se pens que este tipo de cultivo de Artemia, a pesar de las medidas rigurosas,
eventualmente debera estar invadido de depredadores a parte de los mencionados
coppodos y mosquillas (e.g.cangrejos que pasan por los diques e inmediatamente comienzan
a reproducirse o peces que entran en los estanques como huevos transportados en las plumas de
los pjaros). Por lo tanto, la duracin anticipada para cada cultivo de Artemia debera
preferentemente estar restringida a una generacin.
Preparacin del estanque
Al inicio de las pruebas de cultivo, el estanque es tratado de manera similar a los estanques
de camarn entre dos producciones consecutivas siendo drenado, secado y calado. Secciones
del estanque que debido a la topografa no pueden ser drenados completamente, debern ser
especialmente tratados. Dichas reas indudablemente pueden ser infestadas con coppodos
que despus servirn de inculo en el siguiente cultivo de Artemia.
Toma de agua
Mediante anlisis de muestras de agua filtrada se demostr que la ausencia absoluta de
coppodos en el estanque de produccin es garantizada slo utilizando un filtro con orificios
no mayores a 100 m. Sin embargo, aunque el flujo de entrada se reduca, la malla de 100 m
se taponaba y eventualmente era expulsada. Por lo tanto, este mtodo es solamente
recomendado cuando pequeos volmenes de agua deben ser filtrados y/o cuando grandes
superficies de filtracin pueden ser instaladas. Para eliminar completamente los coppodos
del agua del estanque se sugiere construir una estructura de toma de agua consistente de una
bomba porttil y un filtro de acero inoxidable del tipo cross flow. Debido a la propiedad
de auto limpieza, grandes flujos de agua pueden pasar a travs de este tipo de filtro sin que
su superficie de filtracin sea taponada.
En ausencia del filtro de acero inoxidable (como fue el caso de los experimentos) se consider
necesario aplicar un sistema de filtracin doble. Se instal una serie de dos filtros
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consecutivos con orificios de 800 y 200 m respectivamente (figura 2.7). Con la malla de 200
m la eliminacin total de los huevos de depredadores mayores (peces y crustceos) fue
asegurada mientras que la cantidad de coppodos que entraron al estanque fue
significativamente reducida. Como consecuencia, cualquier florecimiento de estos organismos
sera retardado y se increment las posibilidades que el nauplio de Artemia pase por los
periodos crticos en los cuales es presa fcil de los coppodos.
dique
filtro 800 m
dique
filtro 200 m
canal
piscina
Figura 2.7.- Toma de agua para cultivos extensivos de Artemia: infraestructura con filtracin doble
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26
ECLOSIN
COSECHA
ENJUAGUE
CONCENTRACIN
RE-SUSPENSION DE LOS
NAUPLIOS
OOCC
7
8
9
/*
4
5
6
1
2
3
0+. -=
clculo de la cantidad del producto
de enriquecimiento
- medio de enriquecimiento
- enriquecimiento en agua de mar normal
filtrada, previamente desinfectada y
neutralizada con 5 ppm de hipoclorito de
sodio y tiosulfato de sodio respectivamente
-
t = 12 h
segunda adicion: 0.3 g.l-1
aireacin
- fuerte, garantizando una concentracin de
oxgeno superior a 5 ppm
- adicionar suficientes difusores de aire
temperatura: 25-30 C
t = 24 h
COSECHA
ECLOSIN
COSECHA
ENJUAGUE
Preservacin a temperatura
ambiente durante 24 h
25 - 30 C
CONCENTRACIN
aireacin suave
2000-4000 Artemia.ml -1
500 Artemia.ml
-1
ESTADIO
Preservacin a temperatura
ambiene durante 24 h
Instar I
Instar II-III
0h
24 h
24 h
LONGITUD
480 m
700-900 m
480 m
PESO SECO
100 %
61 - 78 %
97 - 98 %
ENERGIA
100 %
66 - 84 %
EDAD
Instar I
HIPOC
DE
SODIO
HIP
OC
PROCEDIMIENTO
25-30 C
- disinfectar el agua con hipoclorito de sodio:
e.g. agregar 0.5 g de cloro activo por cada
100 litros de agua y aplicar aireacin suave
durante 1 h
- neutralizar el agua desinfectada: agregar 0.5
de tio-sulfato de sodio por cada litro de agua
- ajustar la temperatura: 25 - 30 C
- agregar los quistes
en
cantidades
equivalentes a 1 - 2 g.l-1
Na2
COSECHA
Iluminacin
- continua con intensidad en
la superficie del agua de
2000 lux
Temperatura
- 25 - 30 C
Aireacin
- agitacin fuerte del agua:
el nivel de oxgeno debe
ser > 2 ppm durante el
proceso de la eclosin
Densidad de
quistes
- 1 - 2 g.l-1
AA
Tanque de eclosin
- con fondo cnico
rh
PROCEDIMIENTO
- interrumpir la aireacin por 10 - 15 minutos
- dentro de este tiempo los nauplios se separan
de las cscaras vacas
- las cscaras flotan
- los nauplios se acumulan en el fondo del cono
- colectar los nauplios en una malla sumergida
con orificios de 120 m
filtro
tanque para la
coleccin de los
nauplios
drenaje del
filtro
RH
aireacin fuerte
50 g.l-1
rh
art
30 - 60
minutos
hidratacin
PROCEDIMIENTO
recoleccin y
eliminacn del agua
OOCC
7
8
9
/*
4
5
6
1
2
3
0+. -=
clculo de las cantidades de
cada producto
Neutralizacin
- Tiosulfato de sodio: Na2S2O3 : solucin al 0.1 %
EJECUCION DE LA DESCAPSULACION
PROCEDIMIENTO
- llenar el tanque para la descapsulacin con agua de mar e instalar las lneas de aireacin
- adicionar los productos en el orden siguiente:
- quistes de Artemia
- Hidrxido de Sodio (NaOH)
- Hipoclorito de Sodio (NaOCl)
- verificar la temperatura, la descapsulacin es una reaccin exotrmica: para garantizar la viabilidad del embrin la
temperatura del medio de descapsulacin debe ser siempre menos de 40 C; con temperaturas crticas se debe
adicionar hielo
- verificar microscpicamente cada 30 segundos el progreso de la descapsulacin (la disolucin de la cscara)
- cambio del color de los quistes: caf gris naranja (color del embrin)
- al final del proceso cosechar los embriones rpidamente, se los enjuaga con agua de mar abundantemente
- para neutralizar cualquier remanente de cloro, suspender los embriones ligeramente en la solucin de tiosulfato de
sodio y los enjuaga otra vez con agua de mar
PROCEDIMIENTO
28C
24
PROCEDIMIENTO
LUGOL
N x V
=
42 x 1000
= 210000 nauplios.g-1
=
M C
0.1 2
PROCEDIMIENTO
- la muestra previamente fijada con LUGOL y
analizada para la EE ser tratada con
HIPOCLORITO DE SODIO
las cscaras vacas y los quistes que no
eclosionaron se disuelven (descapsulacin)
de estos ltimos quedan los embriones
- observacin microscpica y conteo de los
embriones: E (=9 en el ejemplo ilustrado)
-clculo del PORCENTAJE DE ECLOSIN (E%)
- nmero de nauplios: N (= 42 en el ejemplo
ilustrado)
- nmero de embriones: E (= 9 en el ejemplo)
- PORCENTAJE DE ECLOSIN
E% =
N
N+E
42
42 + 9
= 82.3 %
HIPOCLORITO
28C
14
15
16
24
duracin
de la eclosin (h)
PROCEDIMIENTO
LUGOL
- eclosin bajo condiciones estndar (iluminacin permanente,
temperatura constante: 28 C)
- tiempo t=0: incubacin de 2 g de quistes en 800 ml de agua
de mar
- tiempo t=2: aadir 200 ml de agua de mar (para resuspender quistes pegando a la pared del recipiente)
- tiempo t=14: toma de la primera muestras (100 l utilizando
una micro-pipeta automtica) y determinacin del E%
- tiempo t = 15 , t = 16, ... t = 24: repite las acciones de t =14
EJEMPLO
Al final de la experiencia se calcula la para cada muestra la EE relativa a la EE despus 24 h:
EE t
ERt =
100
EE 24
t: duracin de la
eclosin (h)
EE ( 106 nauplios.g-1 )
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
10
25
50
100
140
165
185
195
205
210
ER
2.4
4.8
11.9
23.8
47.6
66.7
78.6
88.1
92.9
97.6
100
100
nauplio de Artemia
LUGOL
preparacin de la
muestra
PRODUCCION DE ROTIFEROS
Enriquecimiento
OOCC
7
8
9
/*
4
5
6
1
2
3
0+. -=
clculo de la cantidad del
producto de enriquecimiento
peso de la cantidad requerida
t=0h
primera adicin: 0.15 g.l-1
t=3h
segunda adicin: 0.15 g.l-1
- aireacin
- moderada, garantizando una concentracin
de oxgeno superior a 5 ppm
- agregar difusores de aire
- temperatura: 25-30 C
t=6h
-1
COSECHA
PRODUCCION DE ROTIFEROS
Esquema de produccin
Mantenimiento del stock
Tubo de ensayo
Cultivo masivo
Tanque cnico
-1
densidad (rotiferos.ml-1 )
inoculacin : 30
cosecha
: 150
densidad (rotferos.ml )
inoculacin :
1
cosecha
: 10
20 ml
50 l
densidad (rotferos.ml-1 )
inoculacin : 30-150
cosecha
:150-800
tiempo de cultivo (das)
4
200 l
Fiola
densidad (rotferos.ml-1 )
inoculacin :
1
cosecha
: 10
1000 ml
densidad (rotferos.ml-1 )
inoculacin : 30-150
cosecha
:150-800
500 l
densidad
de rotferos
(rotferos.ml-1 )
alimentacin
(mg.10-6 .da-1 )
200
550
250
440
350
340
450
310
600
----
PRODUCCION DE ROTIFEROS
Rutina de trabajo
DA 0: INOCULACION DEL CULTIVO
Preparacin del tanque para un nuevo cultivo
- instalar las lneas de aireacin
- llenar el tanque con el medio de cultivo, clorinar y
neutralizar; si se aplica el mtodo Cultivo con
Volumen Constante (CVC) tambin proporcionar la
cantidad requerida de algas
aireracin
inculo
Inoculacin
- alrededor de 200 rotferos.ml-1
tanque de cultivo
cultivo de algas
(opcional
)
suspensin
de alimento
Alimentacin
- a base de 1 g de levadura de pan.d-1 por cada milln
de rotferos dividido en 4-6 raciones, para la levadura
manipulada se consulta la tabla de alimentacin
adicin de algas
(opcional)
conteo
alimentacin
(4x/d)
cultivo de
algas
(opcional)
preparacin del
alimento
tanque de
cultivo
20 %
tanque de
cultivo
produccin
neta
inculo
malla de 60 m
hipoc
hlo
de
limpiar y desinfectar el tanque
cosechado
vaco sanitario
(1 da)