Extraccion-De-Luteina-Terminado No Lo Muevan
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VILLARREAL FACULTAD DE
OCEONOGRAFA, PESQUERA,
CIENCIAS ALIMENTARIAS Y
ACUICULTURA.
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA
ALIMENTARIA
TTULO:
EXTRACCIN DE LUTEINA EN ZANHORIA Y ESPECTROFOTOMETRA
AUTORES:
LLANO CHAVZ, YULIANA BARBARA
MEDINA ALBERCO, FIORELLA
QUILCA CHUCO, JOHN
AZABACHE PALOMINO, SUE
ASIGNATURA:
ANALISIS INSTRUMENTAL
DOCENTE:
ING. IGNACIO HINOJOSA
MIRAFLORES
2016
INDICE
ANALISIS INSTRUMENTAL
INTRODUCCIN................................................................................................
...........1
Objetivos.
.1
RESUMEN
.2
I. COLORANTES Y
PIGMENTOS....................................................................................3
1.1.
Colorantes............................................................
....3
1.2.
Pigmentos
..4
II.
CAROTENOIDES
7
2.1. Clasificacin de carotenoides: carotenos y
xantofilas7
III.
LUTENA..
.8
3.1. Estructura
qumica...............................................................................8
3.2. Beneficios de la
lutena...................................................................................9
3.3. Fuentes de la
lutena......................................................................................9
3.4. Propiedades nutraceuticas..
.9
3.5.
Toxicidad...........................................................................
..9
2
ANALISIS INSTRUMENTAL
3.6.
Espectrometra.............................................................................................10
3.7. Beneficios de usar colorante lutena y sustituirlo por un
colorante
artificial
11
IV. OBTENCIN DE LA
LUTENA11
4.1. Anlisis de lutena en
alimentos.................................................................. 11
4.1.1. Preparacin de la
muestra...................................................................11
4.1.2.
Extraccin.............................................................................................12
V. CARACTERSTICAS GENERALES DE LA HORTALIZA
ESTUDIADA.............................13
5.1.
Zanahoria
.13
5.1.1.
Origen...
..13
5.1.2. Descripcin
botnica.13
5.1.3. Caractersticas
fsicas14
5.1.4. Aporte
nutricional15
VI.
METODOLOGA
...17
6.1. Materiales y
solvente
17
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
6.2.
Equipos
.17
6.3.
Procedimiento
....17
VII.
RESULTADOS
.20
VIII.
CONCLUSIONES
22
IX.
BIBLIOGRAFA
22
INDICE DE TABLAS
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
INTRODUCCIN
Objetivos.
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
RESUMEN
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
I.
COLORANTES Y PIGMENTOS
I.1. Colorantes
Los colorantes pueden ser definidos como sustancias que cuando son aplicadas a un
substrato, imparten color al substrato. Los colorantes son retenidos en el substrato por
absorcin, retencin mecnica, o por un enlace inico o covalente, los colorantes son
usados comnmente en textiles, papel y piel.
El primer colorante sinttico que se prepar fuel la Mauvine que fue preparado por
William Henry Perkin en Inglaterra 1856, esto marco el inicio de la industria de los
colorantes sintticos.
Ilustracin 1 Obtencin de la
anilina
I.1.1. Anilina
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ANALISIS INSTRUMENTAL
I.2. Pigmento
Un pigmento puede ser definido como una partcula slida que es insoluble en su
vehculo liquido en el cual es dispersado. Este imparte color mediante absorcin de luz
visible. Un pigmento puede ser distinguido de un colorante principalmente por el
mtodo en que se aplica ms que por la constitucin qumica o composicin. Un
colorante es aplicado en forma soluble y los pigmentos tienen que ser dispersados por
un vehculo.
I.2.1. Tipos de pigmentos
Se identifican dos tipos de pigmentos orgnicos e inorgnicos estos se diferencian en las
siguientes caractersticas.
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
b) Pigmentos naturales
1. Carotenoides.
2. Clorofilas.
3. Pigmentos fenlicos: flavonoides, antocianinas y taninos. :
4. Betalanas
5. Hemopigmentos.
Los cuatro primeros son de fuentes vegetales, aun cuando llegan a estar presentes en
alimentos de origen animal, a los que ingresan a travs de la dieta. La mayora de los
pigmentos vegetales se localiza en el protoplasma de las clulas, dentro de los organelos
especializados llamados plsticos, que se observan al microscopio formando pequeas
plecas o agujas de estructura cristalina; en algunos casos, cuando son solubles en agua,
se encuentran disueltos en las vacuolas de las clulas.
El quinto grupo slo se encuentra en productos de origen animal. En el sexto grupo se
incluyen pigmentos que imparten color tanto a los tejidos vegetales como animales. Son
poco abundantes en la naturaleza, pero no por eso menos importantes, debido a las
caractersticas especficas de da uno.
II.
CAROTENOIDES
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
II.1.
Clasificacin.
II.1.2. Xantofilas
El grupo de carotenoides xantofilas sobrepasa a los carotenos, aunque el - caroteno, es
el carotenoide de mayor importancia en la tecnologa de los alimentos (Melndez, et al.,
2007).
Las xantofilas pueden estar presentes en forma de cidos, aldehdos o alcoholes y son
solubles en etanol, metanol y ter de petrleo (Badui, 2013).
Las xantofilas ms conocidas son (Coultate, 2002); (Linden, 1996):
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
La flavoxantina (plantas)
La rubixantina (plantas)
La cantaxantina (animales, vegetales)
La rodoxantina (animales, vegetales)
La capsantina (pimiento rojo)
La beta- citraurina (piel de la naranja)
La bixina (semilla de bija)
La corcetina (frutas)
La criptoxantina, que tiene actividad como vitamnica A
III.
LUTEINA (E 161b)
III.1.
Estructura qumica
Los carotenoides son isoprenoides que pueden variar en el tamao de sus cadenas, la
mayora contiene 40 tomos de carbono, que consiste en 8 unidades de isopreno que se
unen por la cola y la cabeza, a excepcin de una molcula del medio que se une colacola. Los carotenoides se pueden dividirse en 2 grupos principales: carotenos y
xantofilas. Tienen mucha facilidad para conjugarse con los cromoforos de polieno, y es
precisamente esta conjugacin, las que le da la mayor parte de su funcionalidad. Todos
los carotenoides se derivan de precursores aciclicos, con una cadena central larga de
enlaces dobles conjugados. Los carotenos pueden ser hidrocarbonos lineales o ciclicos
como el licopeno, alfa caroteno y beta caroteno. Por otra parte, las xantofilas son
derivados oxigenados de carotenos con diferentes combinaciones de grupos hidroxilo,
ceto, esteres, lactona, acido carboxlico, entre otros, dentro de ese grupo destocan la
lutena y la zeaxantina.
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
La ruta que sigue el alfa caroteno es la que da lugar a la lutena, mientras que el beta
caroteno origina la zeaxantina.
III.2.
Beneficios de la lutena
Son una proteccin eficaz de los ojos contra los dainos rayos UV de la luz solar. Se
puede retrasar el desarrollo de la degeneracin macular mediante una dieta rica en
lutena. El aporte adecuado de lutena mediante la alimentacin puede llevar a reducir el
riesgo de una degeneracin macular con la edad, a la vez que contribuye a mejorar la
salud de los ojos. El carotenoide se absorbe durante el proceso digestivo y es
transportado a los ojos a travs del torrente sanguneo, donde se produce una
concentracin de esta substancia en la mcula. La lutena del ojo despliega as su efecto
protector del tejido. De esta forma, por un lado se produce la destruccin de substancias
dainas como los radicales libres, mientras que por el otro se absorben los peligrosos
rayos UV procedentes de la luz solar.
III.3.
Fuentes de la lutena
Propiedades nutraceuticas
III.5.
Toxicidad
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
III.6.
Espectrometra
Clase : Carotenoide
Formula qumica: C40H56O2
Peso molecular: 568.88
Determinacin: Contenido de colorantes totales no inferior al 4.0%, expresados en
lutena. E1cm 1% 2.550 a aproximadamente 445 no en cloroformo /etanol (10+90) o en
hexano/etanol/acetona (80+10+10)
Disolventes para su extraccin
Metanol, etanol, propan-2-ol, hexano, acetona, metiletil cetona, diclorometano y
dixido de carbono.
Descripcin: Liquido oscuro de color marrn amarillento
A.Espectometria: Mximo en cloroformo /etanol (10+90) aproximadamente 445 nm
Ilustracin 3. Espectrometra de
la lutena
III.7.
Beneficios de usar colorante lutena y sustituirlo por un colorante
artificial
En la actualidad, los consumidores se han vuelto mucho ms exigentes y han obligado a
la industria a buscar otras alternativas que permitan mantener las caractersticas
atractivas que provoca el color del alimento, sin los efectos indeseables de los
colorantes sintticos. Es as como se han venido desarrollando diferentes
investigaciones para la aplicacin de colorantes naturales en diferentes tipos de
alimentos. Entre las ventajas que nos proporcionan los colorantes naturales como la
lutena podemos mencionar:
a) Funcionalidad
Solubles en aceite
Diferentes tonalidades
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ANALISIS INSTRUMENTAL
b)
Requisitos legales
Declaracin en etiqueta 100% natural
No colorantes artificiales
No alergnicos
Productos Naturales
IV.
OBTENCION DE LUTENA
IV.1.2. Extraccin
Los mtodos tradicionales para la extraccin de componentes bioactivos desde
plantas, incluyen: la destilacin por vapor y la extraccin con solventes orgnicos
(maceracin o tcnicas Soxhlet). Especficamente los pigmentos carotenoides son
compuestos liposolubles, que normalmente se extraen con solventes orgnicos tales
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ANALISIS INSTRUMENTAL
como: acetona, ter de petrleo, benceno, hexano, ter dietlico, cloroformo, etanol
y metanol (Park y cols., 2007). Sin embargo, los solventes presentan algunas
desventajas como: la degradacin y prdida de los componentes bioactivos, los
grandes volmenes de solventes que se utilizan, el tiempo de los procesos y el alto
costo de los insumos y mano de obra (Sovov y cols., 2004), adems de obtener
extractos con residuos de solvente. El inters en alternativas a la extraccin con
solventes convencionales, tales como el dixido de carbono supercrtico (SC-CO2)
es cada vez mayor, ya que el CO2 no es inflamable y no ocasiona dao al medio
ambiente (Gao y cols., 2009).
Los principales parmetros para la seleccin de una tecnologa de extraccin son: las
caractersticas bioqumicas de las molculas extradas, la rapidez, la limitacin del
uso de solventes, reproducibilidad, rendimiento de la extraccin, la selectividad, la
proteccin de las molculas extradas para que no sufran transformacin qumica y
costo (Pasquet y cols., 2010).
Estudios realizados han demostrado que la luz, el oxgeno y la alta temperatura
promueven la degradacin e isomerizacin de la lutena (Calvo, 2005). Uno de los
mecanismos utilizados para estabilizar la lutena es la microencapsulacin, la cual
permite la incorporacin de sustancias dentro de una matriz o sistema pared con el
objeto de proteger estos compuestos, impidiendo que sufran reacciones debido a la
luz y/o al oxgeno (Pedroza, 2002).
IV.1.3. Microencapsulacin
La microencapsulacin es definida como la tecnologa que incorpora cantidades
microscpicas de materiales slidos, lquidos o gaseosos sellados en cpsulas, que
pueden liberar su contenido a una velocidad controlada bajo condiciones especficas
(Desai y Park, 2005). Dicha tecnologa ha sido utiliza por la industria de los
alimentos por ms de 60 aos. La seleccin del proceso de microencapsulacin est
dado por las propiedades (fsicas y qumicas) del material del ncleo y el
recubrimiento. Diferentes tcnicas se utilizan para la encapsulacin, tales como:
secado por atomizacin, enfriamiento por atomizacin (spray cooling/chilling),
recubrimiento por lecho fluidizado, extrusin, extrusin centrifuga, liofilizacin,
coacervacin, separacin por centrifuga, cocristalizacin, liposomas, complejacin
por inclusin entre otros (Desai y Park, 2005).
V.
V.1.
ZANAHORIA
13
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ANALISIS INSTRUMENTAL
V.1.1. Origen:
Se cree nativa de Afganistn y reas adyacentes. Muchas especies silvestres han sido
encontradas en Asia. La zanahoria comn, llamada del 69 Mediterrneo, por haberse
conocido por muchos aos en esta rea, posiblemente lleg del Asia menor.
Forma
13
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ANALISIS INSTRUMENTAL
V.1.3.2.
Tamao y peso
V.1.3.3.
Color
El color normal es rojo anaranjado, uniforme y profundo, siendo el mismo para su carne
y la calidad del fruto se distingue segn sea el volumen del corazn interior que va
desde las hojas hasta la base. Durante su desarrollo la raz cambia de blanco amarillo,
cuando est muy tierna a amarillo oscuro, anaranjado o amarillo rojizo cuando se
desarrolla debido a acumulaciones diferenciales de caroteno, las cuales alteran la
intensidad de color.
V.1.3.4.
Sabor
Cuando son tiernas y frescas tienen un sabor delicado con un gusto ligeramente dulce.
(Jaramillo y col., 1980)
En la siguiente Tabla N2, se observa la composicin de la zanahoria, segn resultados
del Instituto de Nutricin de Centroamrica y Panam (INCAP), 2007.
Caloras
27 Kcal
Protenas
0.6 g
Grasa
0.1 g
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ANALISIS INSTRUMENTAL
Carbohidratos
6.2 g
Calcio
21 mg
Fsforo
18 mg
Hierro
0.4 mg
Tiamina
0.03 mg
Riboflavina
0.03 mg
Niacina
0.4 mg
Vitamina C
4 mg
Carotenos totales
12000.00
V.1.4.1.
Naranja
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ANALISIS INSTRUMENTAL
V.1.4.2.
Lutena
V.1.4.3.
Morada
V.1.4.4.
Blanca
V1. METODOLOGA
Placa Petri
Fiola 10 ml
Beacker
Mortero
Parafilm
Hexano
6.2 Equipos
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ANALISIS INSTRUMENTAL
Estufa
Espectrofotmetro
6.3. PROCEDIMIENTO
Ilustracin 9: Zanahoria
secada a 80C en la estufa.
13
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ANALISIS INSTRUMENTAL
Ilustracin 14:
Procedemos a la
lectura en el
espectrofotmet
ro.
13
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ANALISIS INSTRUMENTAL
VII. RESULTADOS
1) Recopilacin de los datos del Espectrofotmetro: Longitud onda y
absorbancia. Tabla N3: Datos obtenidos en el espectrmetro respecto al
pigmento de la zanahoria.
Lmite de onda
Absorbancia (m(-1)
400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600
610
620
630
640
650
660
670
680
690
700
710
720
730
740
750
760
1.772
1.909
2.01
2.067
2.123
2.173
2.221
2.266
2.295
1.808
0.737
0.249
0.108
0.073
0.059
0.052
0.047
0.059
0.069
0.054
0.047
0.042
0.036
0.034
0.033
0.047
0.03
0.03
0.03
0.029
0.03
0.028
0.032
0.032
0.033
0.037
0.033
LAMBA
ESPECICO
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
770
0.033
780
0.034
790
0.034
800
0.027
2) Grfico del Espectro de absorcin en la hortaliza elegida: Zanahoria
Ilu
stracin 15: Grfica donde se observa el espectro de absorcin de lutena en zanahoria .
3) Segn la siguiente tabla donde nos da una relacin entre rango de longitudes de
onda en que absorbe el alimento, color absorbido y transmitido; confirmaremos
el color observado en la prctica.
Tabla N4: Mximos de absorcin y lista de la banda visible.
(Informacin otorgada por el ingeniero Hinojoza).
en nm
Color absorbido
Color transmitido
400 - 465
Violeta
Amarillo verde
465 - 482
Azul
Amarillo
482 - 487
Verde azul
Anaranjado
493 - 498
Verde azulado
Rojo
498 - 530
Verde
Rojo prpura
530 - 559
Verde amarillento
Prpura rojizo
559 - 571
Amarillo verde
Prpura
571 - 576
Amarillo verdoso
Violeta
576 - 580
Amarillo
Azul
580 - 587
Anaranjado amarillento
Azul
587 - 597
Anaranjado
Azul verdoso
597 - 617
Anaranjado rojizo
Azul verde
617 - 780
Rojo
Verde
El color observado o transmitido es amarillo, as confirmando la presencia de lutena
en la zanahoria siendo su absorbancia de 2.295 m (-1).
13
13
ANALISIS INSTRUMENTAL
VIII. CONCLUSIONES
IX.
BIBLIOGRAFA
Comit de Proteccin de Alimentos (1971). Colorante alimentario. Academia
Nacional de Ciencias.
Delwiche, Jeannine (2004). El impacto de las interacciones de percepcin sobre
el sabor percibido.
Administracin de Drogas y Alimentos Estadounidense (2015) .Datos de la FDA
/ CFSAN Alimentos de color.
Douglas R (2007).Qumica Analtica, Skoog and West. Anlisis Instrumental.
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http://es.calameo.com/read/0017523139dd3a95aa24c. Fecha de acceso: 26 de
Agosto del 2016]
Barros,C. (2009) .Los aditivos en la alimentacin de los espaoles y la
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Jaramillo Vzquez y Lobo Arias. Hortalizas. Manual de asistencia tcnica N28
Zanahoria .[En lnea].URL disponible en :
http://www.bejo.es/Files/Billeder/Bejo_ES/Assortiment/Wortelen/Zanahorias
%20de %20Colores_web.pdf. [Fecha de acceso: 26 de Agosto del 2016]
PARK, P.K, KIM, E.Y, CHU, K.H. Chemical Disruption of Yeast Cells for the
Isolation of Carotenoid Pigments. Separation and Purification Technology, 53:
148-152, 2007
Badui Dergal, S.(2013). Quimica de los alimentos.Carotenoides. Mexico
Coultate, T. (2002). Manual de qumica y bioqumica de los alimentos. Espaa.
Melndez, A.(2007). Pigmentos carotenoides: consideraciones estructurales y
fisicoqumicas. Recuperado el 7 de Noviembre de 2014, de Archivos
latinoamericanos: alanrevista.org.
Pineda, D. (S.A).Aplicacion de los colorants naturales en los alimentos. El
Salvador.
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