Practica Nº01 Concentración de Biomasa
Practica Nº01 Concentración de Biomasa
Practica Nº01 Concentración de Biomasa
AUTORES:
ASESOR:
CICLO:
IX
GUADALUPE PER
2016
III-FUNDAMENTO TERICO:
Una suspensin celular se caracteriza por presentar un nmero de
partculas microscpicas dispersas en un fluido. Habitualmente ser
necesario determinar tanto la densidad de las clulas en la suspensin
como el porcentaje de stas que son viables. Para determinar la densidad
de las clulas se emplean diferentes tcnicas, desde la relativamente simple
cmara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre
ellas la que empleamos (cmara de Neubauer), hasta equipos automticos
de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.
IV- MARCO TEORICO:
A- CMARA DE NEUBAUER
La cmara de Neubauer es una cmara de contaje adaptada al
microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un
portaobjetos con una depresin en el centro, en el fondo de la cual se ha
marcado con la ayuda de un diamante una cuadrcula como la que se ve en
la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separacin entre dos
lneas consecutivas de 0.25 mm. As pues el rea sombreada y marcada L
corresponde a 1 milmetro cuadrado. La depresin central del cubreobjetos
est hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se
cubre con un cubreobjetos ste dista de la superficie marcada 0.1
milmetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos
es de 0.1 milmetro cbico, es decir 0.1 microlitro.
Para contar las clulas de un cultivo lquido, se agrega una gota de este
entre estas dos placas y observar al microscopio ptico la cantidad de
clulas presentes en un campo determinado de las grilla.
Gradilla.
Agua de cao.
B- EQUIPOS
Microscopio.
Cmara de Neubauer.
C- METODOLOGIA
VI-
RESULTADOS Y DISCUSIONES
CUADRO DE RESULTADOS:
SUSPENSIONES DE
LEVADURAS
(g de lavadura/mL de agua)
N
Clulas/mL
Desviaci
Coeficiente
Promedi
n
de
o
Estndar
Variabilidad
1.4x107
6.12
56
10.94%
3.3x107
19.15
130.4
14.69%
1.0x107
6.26
40.8
15.35%
4.9x106
3.78
19.6
19.29%
5.3x107
30.38
210.6
14.43%
CUADRADOS (5 x 5)
7
9
13
17
9
10
10
3
7
12
8
10
14
8
15
12
Promedio 12
56
8
10
Desviacin10
Estndar 11
6.12
6
Coeficiente50
de Variabilidad
10.94%
61
64
TOTAL
19
14
10
10
4
6
9
53
896
56 cel
0.2 mm0.2 mm0.1 mm
N de Celulas /mL=
56 cel
3
3
4 x 10 mm
N de Celulas /mL=
14000 cel
3
mm
de Celulas
7 cel
=1.4 x 10
mL
mL
8
9
11
12
7
5
52
CUADRICULAS
(4 x 4)
1
3
6
11
14
16
SUMA
19
23
18
22
20
20
122
TOTAL
2086.4
CUADRADOS (5 x 5)
9
13
17
15
16
16
19
23
22
15
24
24
17
20
115
113
17
19
26
22
26
24
28
23
149
25
26
23
21
28
30
153
130.4 cel
0.2 mm0.2 mm0.1 mm
N de Celulas /mL=
130.4 cel
4 x 103 mm3
N de Celulas /mL=
32600 cel
mm3
de Celulas
cel
=3.3 x 107
mL
mL
130.4
19.15
14.69%
CUADRADOS (5 x 5)
9
13
9
5
7
6
10
9
4
7
8
6
8
8
7
7
7
6
2
10
38
39
49
1
3
6
11
14
16
SUMA
TOTAL
17
19
3
5
7
13
10
7
45
652.8
40.8 cel
0.2 mm0.2 mm0.1 mm
N de Celulas /mL=
40.8 cel
3
3
4 x 10 mm
N de Celulas /mL=
10200 cel
mm3
3
40.8
6.26
15.35%
7
6
5
4
5
6
33
de Celulas
7 cel
=1.0 x 10
mL
mL
CUADRADOS (5 x 5)
9
13
2
2
5
3
4
4
3
4
2
1
1
3
1
3
1
7
6
3
17
20
18
1
3
6
11
14
16
SUMA
TOTAL
17
19
1
5
2
5
2
2
17
313.6
19.6 cel
0.2 mm0.2 mm0.1 mm
N de Celulas /mL=
19.6 cel
4 x 103 mm3
N de Celulas /mL=
4900 cel
mm3
19.6
3.78
19.29%
4
5
4
5
3
5
26
de Celulas
6 cel
=4.9 x 10
mL
mL
1
3
6
11
14
16
SUMA
30
32
44
28
31
33
198
TOTAL
3369.6
CUADRADOS (5 x 5)
9
13
42
31
38
35
46
43
48
47
40
39
34
42
248
237
17
19
23
33
34
30
40
33
193
30
32
24
31
22
38
177
210.6 cel
0.2 mm0.2 mm0.1 mm
N de Celulas /mL=
210.6 cel
3
3
4 x 10 mm
210.6
30.38
14.43%
SUSPENSIONES DE LEVADURAS
(g de lavadura/mL de agua)
N Clulas/mL
1.4x107
3.3x107
1.0x107
4.9x106
5.3x107
de Celulas
7 cel
=5.3 x 10
mL
mL
VII-
CONCLUSIONES:
SUSPENSIONES DE
LEVADURAS
(g de lavadura/mL de agua)
N
Clulas/mL
1.4x107
6.12
56
10.94%
3.3x107
19.15
130.4
14.69%
1.0x107
6.26
40.8
15.35%
4.9x106
3.78
19.6
19.29%
5.3x107
30.38
210.6
14.43%
VIII-
RECOMENDACIONES:
IX-
Desviaci
Coeficiente
Promedi
n
de
o
Estndar
Variabilidad
BIBLIOGRAFA:
ANEXOS
ANEXO 1: Fotos observadas en el microscopio (Objetivo 10X)
IMAGEN 1: Observacin de
Cuadro 4 x 4
IMAGEN 2: Observacin de
Cuadro 5 x 5