Vago O

PRACTICA N3
A) COLORACION DE ZIEHL NEELSEN (coloracin acido resistente o baciloscopia).

FUNDAMENTO. Es el alto contenido de lpidos en la pared celular de ciertas
bacterias permite que el colorante una vez fijado por el calor no se desprende por
accin de los agentes colorantes (alcohol acido ).

OBJETIVOS. Diagnosticar TBC y observar BAAR en esputo.

MATERIALES:
Lamina porta objetos
Aplicador de madera
Esputo de pacientes sospechoso de tuberculosis
Colorantes: fucsina fenicada y azul de metileno
Reactivos: alcohol acido
Aceite de xilol , aceite de imersion
Microscopio

PROCEDIMIENTOS.
Extender y fijar la muestra de esputo empleando un aplicador de madera.
La fijacin se realiza despus que seque el extendido
Cubrir con fucsina fenicada y calentar la lamina en forma suave a la
llama del mechero hasta el desprendimiento de vapores , repetir esto hasta
por tres veces consecutivas sin llegar a la ebullicin .
Eliminar el exceso de colorante y lavar intensamente a chorro de agua
Decolorar con alcohol acido hasta que no desprenda el colorante .
Lavar con agua corriente y agregar gotas de azul de metileno .Dejar
actuar por 1 a 2 minutos donde acta como colorante de de contraste.
Lavar, secar y observar.

RESULTADOS.
Las observaciones se reportan como bacilos de alcohol acido resistentes
(BAAR).
Leucocitos polimorfos nucleares
Fibras musculares.

De acuerdo con la OPS:

B) COLORACION DEL VAGO.

FUNDAMENTO. Las bacterias fusoespirales y espiroquetas comnmente no se
tien con las tcnicas usuales el mtodo se basa primeramente en la
impregnacin con mercurio cromo a nivel de la pared celular de dichos
microorganismos y solo as se podrn teir con violeta de genciana.

OBJETIVOS. Observar las bacterias que se encuentra en el sarro dentario:
espiroqueta, fusoespiraladas y fusobacteria.

MATERIALES.
Lamina porta objeto
Palito mondadientes
Mercurio cromo al 2%
Colorante violeta genciana
Muestra de sarro dentario
Aceite de imersion
Microscopio.

PROCEDIMIENTO.
Prepara la extensin del sarro dentario, empleando el palito mondadientes
sobre la lmina porta objetos, usando una gota de solucin salina
fisiolgica y la fijacin se realiza solo al ambiente.
Impregnar con mercurio cromo al 2% por espacio de 3 minutos. Lavar
con agua corriente.
Cubrir con violeta genciana por espacio de 3 minutos.
Lavar secar y observar.

RESULTADOS. Esquematizar las observaciones
espiroqueta, fusoespiraladas y fusobacteria.
BAAR CAMPOS RESULTADOS INTERPRETACION
1-9 En 100 + Recin empieza
1-9 En 100 ++ TBC con necrosis
caseosa
1-9 E1 +++ Cavernas
pulmonares ,
hemoptisis
0 En >100 - negativo

CUESTIONARIO

1. Por qu la tincin de ZIEHL NIEHLSEN es importante para el diagnstico
clnico?

Es muy til para el diagnstico de MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS Y
M. LEPRAC.

Debido a la gran resistencia de las Mycobacterias y actinomicetes a pesar de ser
Gram positivas. Crean dificultades cuando se les intenta colorear por el mtodo
Gram, debido a que ello requiere otro tipo de tcnicas de coloracin y para ello
es necesaria la coloracin de ziehl neelsen o acido resistente.

2. Qu fenmeno se presenta cuando se aplica el colorante durante la tincin de
ZIEHL NIEHLSEN?

Las bacterias acido alcohol resistente poseen una pared celular rica en lpidos y
cidos carboxlicos (cido mico lico) que tiene la propiedad de unirse
excepcionalmente fuerte al colorante 1 ero (fusila de Ziehl) cuando se usa el
calor como mordiente.
Una vez que se forma este complejo colorante - pared, ni siquiera la accin
conjunta del cido y del alcohol pueden deshacerlo, ya que las paredes retienen el
colorante en forma RESISTENTE. De esta forma se identifica las bacterias
acido - resistentes.
3. Es posible reemplazar el azul de metileno por la safranina en la coloracin de
ZIEHL NIEHLSEN?

Simples. Utilizan un solo colorante. Se basan en el hecho de que las clulas
tienen una composicin qumica diferente a la de su entorno, de modo que ambos
se comportan de forma diferente frente a un colorante. El colorante tie las
clulas (azul de metileno, safranina) o no (nigrosina).

La safranina (tambin llamada Safranina o rojo bsico 2), es un colorante
biolgico, de contraste que se utiliza en la Tincin de Gram para proporcionar un
color violeta ms intenso a las bacterias Gram+ y tie de rosa a las bacterias G- ;
en histologa y en citologa. La safranina se usa como lquido de contraste en
algunos protocolos de tincin, coloreando el ncleo celular de rojo. Tambin
para detectar cartlago, mucina y grnulos de mastocitos.

ZAFRANINA

Composicin:

Alcohol etlico de 50-----100 ml

Safranina (C.I. 50240)-------1 g

La preparacin se realiza en fro.

En los manuales tando de histologa animal como vegetal, figuran preparados con
frmulas distintas, tanto en las concentraciones de colorante como en la de disolvente
(Martoja, 1970; Purvis-Collier-Walls 1966), Johansen 1968; Gabe, 1968; etc.). Nuestra
experiencia es que, a concentraciones mayores de colorante, ste precipita fcilmente,
siendo poco limpias las tinciones; y el exceso de colorant conlleva un exceso de
coloracin.

El azul de metileno se prepara en fro a distintas concentraciones dependiendo del uso
que se quiera dar. Las dos ms frecuentes son:

Composicin: Existen diferentes formulaciones dependiendo del libro al que se consulte,
las ms usadas son las siguientes

1)Azul de metileno (C.I. 52015)--1 g

Agua destilada --------------1000 ml

2)Azul de metileno (C.I. 52015)--1 g

Boraz-----------------------------1g

Agua destilada ---------------100 ml
4. Seale la importancia de la coloracin de ZIEHL NIEHLSEN

Esta tincin es til en la deteccin de bacterias del gnero Micobacterium en muestras de
esputo. La presencia de bacilos rojos sobre fondo azul constituye un diagnstico casi
definitivo de tuberculosis.

Vago O

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Vago O

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Vago O

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

PRACTICA N3

A) COLORACION DE ZIEHL NEELSEN (coloracin acido resistente o baciloscopia).

También podría gustarte