TEMA 2

Bacterya - Esther, grupos R son cidos grasos, menos resistentes al calor), pueden tener hopanoides Archea -Glicerol en regin hidrfoba, pero no cido graso sino isopreno, con enlace ether (ms resistentes al calor). Ni esteroles ni hopanoides. En vez de bicapa pueden hacer solo una nica capa porque se pueden unir por enlace covalente, las dos capas estn ms juntas porque hay ciclos, ms resistentes. Mycoplasmas - no pared externa, esteroles (antibioticos polienos). (Esteroles son los que presentan las clulas eucariotas sin pared celular que las proteja).

Transporte activo: protn H+ sale por la cadena de transporte de e-, protn entra y sale sodio (antiporte), el sodio se une a una protena transportadora y cambia su config, se une tambin un soluto (azcar o aa), cambia de nuevo y los dos son llevados al interior. -Transporte activo, consumo de ATP: Translocacin de grupo: sistema fosfotransferasa, el azcar antes de penetrar en cl se fosforila (adquiere grupo fosfato), se fosforila Enzima I, y pasa el grupo fosfato a HPr, a Enz IIa, luego a IIb luego a IIc que fosforila la glucosa, hay un gasto de energa, pero no hay gasto de energia neto porque se almacena en ese enlace fosfato: el balance final es que no hay gasto de energa. Como entra fosforilada, en la ruta del metabolismo no es necesaro que lo haga y no gasta un ATP.

Sistema ABC: Tanto en Gram- (en periplasma, libres) como en Gram+ (fijas a la membrana). Prot A reconoce nutriente (muy especfico) y lo presenta a la prot. transp. E por ATPasa. Velocidad adecuada aunque concentracin no sea favorable. Procariotas no mitocondrias, cadena de transp ecuando replicacin: Prot Fts, sensibles a T (tambin en cloroplastos y mitocondrias): FtsZ atrae ZipA (anclaje a membrana), atraen FtsA (anclarse mejor), FtsI (anclaje a pared, unin especfica a penicilina), FtsK (se anclan las dos copias formadas), luego se forma tabique que las separa, determinado por MinE en el plano ecuatorial, y es donde atrae prot. Fts.

Microorganismos producen sustancias quelantes, que salen al exterior y se unen al hierro Fe3+, penetran con l y lo reducen, y as as. No tienen cloroplastos. Poseen sistema de doble membrana que se repliega o clorosomas, sacos en cara interna de membrana que no son sistema doble sino nica membrana con pigmentos fotosintticos (no aparato fotos.), y transfieren energa capturada a centros de reaccin fotosinttica en membrana citoplasmtica y cadena d e-. Cianobacterias: sacos de doble membrana, similar a membrana citoplasm, con aparato fotosinttico: TILACOIDES. Ms parecidas a plantas, fotosntesis oxignica.

TEMA 3 Gram +, pared ms compacta (membrana citoplasm + peptidoglycanos gruesa). Clostridium perfrigens. Gram -, membrana citoplasm. + periplasma (con peptidoglicanos en medio, capa fina) + membrana externa, de liopolisacridos y prot. Staphylococcus aureus, E.coli. Archeas y mycoplasmas no tienen pared. Tincin de gram: gram + prpura, gram - rosa/rojo. Alcohol solubiliza lpidos y protenas y crea poros en pared de Gram-. Unidades repetidas de la pared de peptidoglicanos, formado por azcares, unidades de NAcetylglucosamina y cido N-Acetylmurmico, unidos por enlace glicosdico beta 1,4. cido propinico unido al aminoazcar mediante enlace ter, mediante grupo cido se une a aa, enlace peptdico = Monmero de peptidoglucao (dos azcares y una cadena de 4 aa: L-Alanina, D-acido Glutmico, cido meso-diamino-pimelico).

Peptidoglucano = peptidoglicano = murena.

En gram + caben todas las posibilidades, pueden establecerse interpuentes? (interbridge). Biosntesis de peptidoglicano: enzimas llamados autolisinas atraviesan la membrana citoplsmica, llegan al peptidoglipacon y rompen los enlaces peptdicos, y la pared se queda como si fuesen parches, esa bacteria tiene dos opciones, sintetizar nuevo peptidoglicano, transportarlo y engancharlo por los extrenos, o bien se lisa (porque el agua entrara y saldra libremente). Bactoprenol transporta lo precursores de los peptidoglicanos a travs de la membrana citoplasm. En citopasma se sintetiza los aa, se unen a los azcares, y la cadenita se forma con 5 aa y no con 4, murmico pentapptido, se une a la molcula "bactoprenol" o undecaprenol, un alcohol pero es una molec muy apolar, muy hidrofbica, con 55 tomos de carbono, envuelve el monmero de peptidoglucano (que est cargado y no podra llegar por s mismo al otro lado de la membrana) y es una molc. transportadora que lo ayuda a atravesar la membrana y llegar al exterior; se engancha al peptidoglucano persistente y repara esa rotura, aumentando la superficie de pared. Se hace la transpeptidacin, la D-Ala en verde se desecha, catalizada por transpeptidasa, rotura de un enlace peptdico y formacin de otro, y el DAP se une al D-Ala que se queda. Prot MreB: helice que se extiende por la cara interior de la membrana, similar a la actina en procariotas; son citoesqueleto en procariotas, mantienen forma; puntos donde hlice contacta con membrana se deposita el nuevo peptidoglucano en caso de los bacilos, en cocos a nivel de plano ecuatorial (carecen de protena MreB).

Crescentina (Caulobacter crescentus): parecida a la queratina que forma pared de algunas cl. eucariotas (ej. hongos); tambin sirve para dar forma a la cl. eso indica que existe alguna conexin evolutiva entre Fts y tubulina, MreB y crescentina, etc. Antibiticos con diana en el crecimiento de la pared: Cycloserina: homlogo de la L-alanina, impide qe pase a la forma D-alanina, porque bloquea esa isomerasa, y se para ah la ruta. Tambin impide que se unan D-Ala y D-Ala, porque es anlogo de la D-ala-D-ala-sintetasa. Beta-lactmicos (penicilina): inhiben transpectidacin, engaan transpeptidasa y no se cataliza la rotura de ese enlace. Bacitracn: cuando el bactoprenol ha transportado el monmero y lo ha dejado fuera, en su vuelta a citoplasma necesita tener un slo grupo fosfato, inhibe la desfosforilacin, y no puede perder uno de los dos grupos fosfato que leva y deja de funcionar como molcula transprtadora. Vancomicina: inhibe que se introduzca el monmero en la cadena de peptidoglicano, bloquea su unin.

La penicilina impide la transpeptidaci la unin de la D-Ala al DAP (en caso de E.coli) o L-Lys mediante interpuente de glicinas (en caso de S. aureus).

Antibitico ms efectivo en fase aguda (bacteria se est replicado, ms activa). Pared cel. Gram +: cidos teicoicos. En elace covalente con cido acetil murmico, anclados a la pared. Pueden estar salieno hacia el exterior (cidos lipoteicoicos, unidos a fosfolpidos). Pueden ser polmeros de ribitol o glicerol y pueden tener azcares o derivados aminados, y tambin abundante cantidad de aa. cidos myclicos (mycobacterias): cidos de cadena muy larga con grupos COOH al final, que proporcionan plaridad muy grande a la pared. Test de Koch,fucsina bsica fenicada mezclada con fenol reacciona con el grupo cido, la unin es fuerte y al lavar no se disuelve, vemos la tincin de color rojo.

Factor cuerda: bacilo de Koch se agrupa formando cadenita, lateralmente se pueden unir mediante esto, compuesto pegajoso que facilita que lateralmente se unan y enrollen, resistentes a tratamientos.

Pared celular de las gram - : cido meso-di-amino pimlico, 3 cido del peptidoglicano, ah se une la lisina, mediante enlace peptdico, el ltimo enlace es una cistena unida a una molcula de glicerol, y tambin a un cido graso que se proyecta hacia el centro de la membrana externa, y adems otros dos cidos grasos que sirven para anclar esa protena a esa membrana externa. Porina: 3 canales hidroflicos, hay porinas inespecficas pero hay otras que s son especficas de sustrato por ej. las maltoporinas. Proteger la bacteria del sistema de complemento. Ms resistentes a los jugos gstricos. Lipopoliacrido, lpido A hacia el centro de la membrana, hidrofbico; regin rosa es la regin intermedia o el code, formada por azcares, los verdes son cido ceto desoxi octnico, y lactosa, son imprescindibles para que funcione.

Pared da resistencia a la presin de turgencia; si la bacteria est en medio hipertnico, agua sale de dentro a fuera. No es imprescindible la pared si se encuentra en un medio isotnico. La lisozima acta sobre el peptidoglucano, rompe el enlace glicosdico, Beta (1-4), abriendo la pared.

Arqueas: grupo ms pequeo que dominio bacteria, pero resisten condiciones extremas. NUNCA PEPTIDOGLUCANOS EN PARED. Tres grupos principales. Bacterias metanognicas. Producen metano como consecuenca de su metabolismo, pared muy variada dependiendo del gnero. o Pared: pseudopeptidoglucano, en lugar de N-acetilmurmico tiene Nacetiltalosaminurnico, enlace beta (1,3) que hace resistente a accin de lisozima. o Gnero metanosarcina: pared por polisacridos, no aa, sobretodo galactosa y galactosamina, mucho acetato. Halfilas. Entornos con gran cantidad de sal. o Holococcus, presenta glucosa y amplia gama de azcares, y muchas cantidades de radicales sulfato. Termfilas extremas. Ambientes con T muy elevadas. o Gnero termoplasma. No pared, pero membrana plasmtica por tetraedres cuando fosfolpidos se encuentran unidos por centro mediante enlaces covalentes, largas cadenas.

Tema 4 Poderse mover implica una buena parte de su genoma. Apndices: estructuras que salen fuera del cuerpo celular. Flagelo hasta 10 veces long de la bacteria. Pueden tener flagelacin polar lofotrica (varios en el mismo polo), flagelacin peritrica (ocupar toda la superficie).

Flagelo: Filamento constituido por protenas, formando hlice, la flagelina. Su secuencia de aa es lo que har que la conformacin de ese flagelo tenga una estructura u otra (una hlice ms abierta, menos, etc.). Hook une el filamento con el cuerpo basal. El cuerpo basal se incrusta en el cuerpo celular. En bacterias gram - est formado por 4 anillos, L Ring a la membrana externa y el P a la capa de peptidoglucano, el MS a la capa citoplasmtica ms externa, y C en la ms interna. Las protenas Mot constituyen el motor flagelar que permiten el movimiento del cuerpo basal en movimiento circular, en rotacin. Otras protenas entre los dos anillos internos, Fli, como conmutador del motor, obedecen a seales internas de la clula, que pondrn en marcha a las protenas Mot. La energa la proporciona la fuerza motriz de protones. En gram + el par de anillos externo no existen, por lo que no son imprescindible para la funcin flagelar. Los ltimos monmeros de flagelina se depositan en el extremo, o sea, crece en longitud pero no desde la base.

Flagelacin pertrica: rotacin flagelos en contra de las agujas del reloj, la bacteria va corriendo, de repente se para y gira a favor de las agujas, y se observa que tiene esa flagelacin peritrica, entonces se pone otra vez en contra de las agujas e inicia una nueva carrera. Flagelacin polar: no tiene capacidad para hacer esos virages en cualquier ngulo, en este caso es de 180, cuando va en contra de las agujas corre en una direccin y cuando va a favor en la contraria, en un nico plano, entonces se paran, gira 90 grados por rotacin a favor de las agujas e inician el movimiento, etc. No hay atrayente: movimiento random. Atrayente presente: la bacteria se mueve acercndose, pero no es una carrera directa sino que son carreras, paradas, virages, etc. sempre en el sentido de acercarse al atrayente. Quimiotaxis: Si lo tenemos con un repelente: estn implicadas las protenas quimioreceptoras en el periplasma, que captaran ese repelente y lo acercarian a la MCP, esas protenas se encuentran en contacto con dos protenas CheW y CheA (en membrana); MCP junto CheW producen cambio de conformacin en CheA y esta se fosforila; cuando el compuesto es un repelente, la velocidad de fosforilacin es muy alta, esa CheA pasa el grupo fosfato a la CheY y tambin puede pasarla a la CheB (a una velocidad ms baja); la CheY fosforilada si el flagelo se est moviendo en contra de las agujas del reloj y la bacteria est en carrera, hace que el motor flagelar gire en sentido contrario y sufre una parada repentina, inicia otra carrera, si la inicia hacia un lugar donde an hay repelente se repite el proceso y vuelve a cambiar de direccin, y esta vez puede que acierte y ya no vaya hacia un lugar con repelente. La CheB elimina un grupo metilo de la MCP, la desmetila, y la MCP desmetilada la CheR introduce grupos metilo, y cuando est otra vez metilada responde muy bien al repelente, es como resetear la MCP.

Fototaxis: lo mismo pero con la luz. Aerotaxis: si obedece a un gradiente de oxgeno. Magnetosomas: cristal de magnetita(Fe3O4), con forma de cubo o de octaedro que se dispone en filas paralelas al eje longitudinal de la clula; las bacterias se orienten magnticamente en elmedio ambiente. Vesculas de gas: estructura impermeable al agua pero permeable al gas.GvpA forma los ejes y presenta disposicin rgida en hoja beta. GvpC acta como agente de entrecruzamiento, presenta disposicin en hlice alfa.

Ej. cianobacterias, bacterias rojas del azufre (crecen en fondo y luego flotan).

Espiroquetas. Fibras axiales, cilindro periplsmico, vaina externa, poro de insercin.

Movimiento de deslizamiento. Flavobacterium. Tema 4-b Cpsulas: tincin negativa con tinta china (no penetra). Mayora por polsacrido, algunas de protenas. Bacillus anthracis cpsula de cido poli-D-glutmico que protege cl. de destruccin por defensas del hospedador. Glicocalix: las bacterias se conectan unas a otras y a la pared intestinal por su glicocalix, redes extendidas de fibras desde cl. Adherencia. Fimbrias: evaginaciones de la membrana citoplasmtica que asoman al exterior a travs de los poros de la pared celular y la cpsula. Las fimbrias son utilizadas por las bacterias para adherirse Pelos: evaginaciones de la membrana citoplasmtica a travs de los poros de la pared celular y la cpsula que asoman al exterior. Se utilizan en la conjugacin bacteriana para transferir material gentico. Algunas bacterias usan los pili para el movimiento. Prostecas: son apndices del cuerpo celular rodeados por membrana y pared celulares. Reproduccin o formacin de rosetas (mayor flotabilidad o captacin de nutrientes). Pednculos: estructuras filamentosas no vivas, terminadas en botones de anclaje (discos adhesivos), producidas por secrecin continua de materiales polisacardicos en una zona concreta de la superficie bacteriana. Unin de ciertas bacterias de hbitats acuticos a sustratos slidos, vivos o no. Vainas: estructura que engloba a clulas bacilares; heterpolimero que puede recubrirse de xidos de hierro o manganeso. Poly-beta-hydroxybutyrato (PHB): producido por ciertos microorganismos, aparentemente en respuesta a condiciones de estrs fisiolgico. El polmero es principalmente un producto de asimilacin de carbono (a partir de glucosa o almidn) y es empleado por los microorganismos como una forma de almacenamiento de energa para ser metabolizado cuando otras fuentes de energa comunes no estn disponibles. Cuerpos de inclusin: Grnulos de polifosfato (cianbacteria), PP, o volutina (Spirillum volutans). Reserva intracelular de fosfato para la sntesis de cidos nuclecos y ATP. Importantes en eliminacin biolgica de fsforo. Grnulos de azufre: bacterias fotosintticas rojas y algunas quimiolitotrofas del S almacenan en su interior inclusiones de S elemental. Cuando no hay H2S en medio, utilizan este S oxidndolo a SO42-.

 Tema 5

Carboxisoma: bacterias quimiolittrofas y algunas cianobacterias. Contiene ribulosa 1,5-difosfato carboxilasa, consttuyendo el lugar principal de la fijacin del CO2. Tilacoides: cianobacterias, albergan sistema fotoqumico. Membranas fotosintticas vesiculares. Invaginaciones de la membrana citoplasm. Con pigmentos receptores de energa pero sin el sistema fotoqumico adecuado. Clorosomas: Bacterias verdes, albergan pigmentos antena del sistema fotoqumico.

Actinomicetos: primero se pens que eran hongos (organismos eucariotas) y en general las bacterias filamentosas, porque su estructura era igual a la de un hongo, pero cuando se estudi ms en profundidad se vio que eran procariotas, pero especiales. Dentro de este grupo tenemos: Gnero Streptomyces. Muy importantes. Crecen en el suelo y producen una amplia diversidad de antibiticos. Producen la streptomicina. Cuando crecen en medios de cultivo producen estructuras algodonosas (como hongos), sintetizan geosmina que da ese olor cuando llueve Gnero Actinomyces. Tienen estructura filamentosa o micelar que se llama, alargada, su diferencia con las anteriores es que cuando el cromosoma se replica las dos copias se quedan dentro de ese filamento, entonces es como una estructua cenoctica, sin tabiques, y el filamento se va alargando. A continuacin los cromosomas se dividien y producen cuatro que se desplazan a los extremos y se alargan, etc. Copia mltiple y sucesiva que se va desplazando y se queda en ese filamento, que crece.

Cuando las condiciones en el medio de cultivo no son buenas, Se deja de replicar el material gentico, se tabica que va separando diferentes copias del material gentico, se fragmenta y se van liberando esporas, con una copia del material gentico, cuando las condiciones vuelven a ser idneas, vuelve a empezar el ciclo. Filamentos crecen y se ramifican, dependiendo de la forma de la ramificacin, color, etc. se distinguen unas especies de otras.

Endosporas: Formas de resistencia. No hay ninguna otra forma biolgica que resista tanto al calor como las esporas bacterianas (clula con espora: esporuando). Formacin: la divisin en una clula que est esporulando es asimtrica, espora crece en el citoplasma de la clula y finalmente es liberada. Introduce en su interior gran cantidad de iones Ca+, se sintetiza en el interior de la endospora gran cantidad de cido dipicolnico, y eso en conjunto forma enlaces inicos y se forma dipicolinato clcico que protege el DNA del calor; la cantidad que se forma puede ser hasta el 15% incluso ms del peso de la espora. Inicio: hay implicados muchos genes; en Bacillus se invierten ms de 200 genes (que ya es dedicar mucha info a eso); puede durar unas 8 horas; los factores fundamentales son los factores sigma, y dentro de estos est el sigma-f, sigma-e, sigma-g, y sigma-k; hay tambin implicadas protenas, que est fosforilada, si las condiciones son adversas se desfosforila y se activa, y a su vez captura esa otra protena unida al sigma-F es arrancada por la prot activada y se libera sigma-F y se convierte en un factor activo y se desencadena la esporulacin.

Ciclo de Hyphomicrobium. Con formacin de hifa, yema, septo transversal (para separar la yema), y finalmente citocinesis, que liberar la forma nadadora madura y dejar la hifa disponible para un nuevo ciclo. En este caso no ocurre esa divisin, solo tiene una rplica del DNA, la que le han pasado, ser una clula flagelada, nadadora, inmadura, cuando pierda el flagelo y desarrolle la prosteca estar en condiciones de duplicar el DNA, etc.

Ciclo de Caulobacter. Se produce tambin una clula nadadora, crece, pierde el flagelo, emite una prosteca, se alarga, y se divide, se produce una nadadora inmadura que empezar otra vez, y la clula prostecada puede nuevamente comenzar un nuevo ciclo. Regulacin: Fase nadadora G1: CtrA, no sntesis de DNA, regula sntesis de protena del flageo. Fase G1/S: prdida de CtrA, prdida de flagelo. Fase S: pocas protenas GcrA y DnaA,. formacin de prosteca. Fase S/G2: mucha DnaA, bastante GcrA, replicacin y formacin de la nadadora. Fase G2: No DnaA, poco CtrA, mucho GcrA, divisin celular, por un lado la nadadora (G1) y por otro la clula prostecada.

Clamidiosporas: gnero del dominio bacteria muy importante en microbiologa clnica, se replica en el interior de clulas del organismo, parsitas intracel. obligadas. Ciclo. Dos formas: el cuerpo elemental (clamidiospora) y otra el cuerpo reticular, ms adelante cuerpo vegetativo; es decir, es capaz de esporular. La espora se encuentra en el medio ambiente, resistente. Cl. hospedadora que tienen receptores especficos para esa clamidiospora, sensibles a la tripsina, o sea que son proteicos (porque se degradan con proteasas), se fijan a la superficie; a continuacin es englobada mediante fagocitosis y se forma un fagosoma, en el interior tiene condiciones adecuadas y se libera de capas externas y se produce forma vegetativa, necesita la energa del hospedador, sintetiza compuestos que permeabilizan la membrana de la vacuola de manera que le pueden entrar nutrientes, componentes de la clula y ATP y se multiplica; forma cuerpo de inclusin (multiplicada muchas veces), cuando invade absolutamente esa cl. hospedadora muere, se rompe, y salen al exterior, es decir que producen necrosis (NO TIENEN PARED CELULAR, solo membrana) bacterias peligrosas porque todos los antimicrobianos contra la diana de la pared, no sirven, y si afectan a dianas en membrana cel. pueden afectar a nuestras clulas; adems como se desarrollan en el interior de la clula es ms difcil que el antimicrobiano llegue a ellas. Ciclo de Myxococcus xanthus. Habitan sobretodo en el ambiente, bacilos muy alargados, con gran elasticidad porque su peptidoglucano no es continuo. Crece y se divide en dos y as sucesivamente con bordes irregulares con condiciones favorables; segregan una sustancia dura que se seca y se queda en la base, y sirve para dar cohesin a la colonia, forman un montculo, y las bacterias empiezan a ser muchas, y empieza a haber condiciones adversas, entonces desarrollan cuerpos de agregacin (el arbolito, son muchas bacterias), cuando pasa un cierto

tiempo se rompen las vesculas y salen las esporas, "microcistos", cuando las condiciones son buenas germinan se rompe la cubierta y producen nuevamente el bacilo. Algunas se alimentan de otras bacterias: bacteriolticas.

Heterocistos: las cianobacterias son azuladas; son bacterias fotosintticas, realizan fotosntesis similar a la de las plantas verdes (lo ms cercano), misma clorofila a idntica; son tan abundantes que le dan el color azulado a los mares junto con otros factores; energa luminosa y en una segunda fase el carbono se fija y pasa a formar parte de compuestos orgnicos; forman una cadenita, CO2 como fuente de carbono, energa luminosa; cuando falta nitrgeno asimilable en el medio, son capaces de asimilar el nitrgeno atmosfrico (el N2), sin ellas el N atm no volvera de una forma asimilable para el resto de organismos; pero la formacin del N molec. que a partir de ese N se forma amoniaco, se hace mediante la nitrogenasa, es un sistema de enzimas muy sensibles al oxgeno, de manera que es incompatible la produccin de amoniaco a partir de N molec. y que pueda producir una fotosntesis oxignica; eso ocurre en heterocistes que no pueden fijar CO2 y convertirlos en compuestos orgnicos, de qu manera va a reducir el N? cul ser el dador de e- para reducirlo? lo que ocurre es que la clula que estn al lado (que no son heterocisto) le pasan ese compuesto de carbono reducido y usando esa fuente de reductor convierte el N en amoniaco, y le da a la cel. de al lado el compuesto nitrogenado, a travs de puentes de comunicacin. Permite a esas bacterias sobrevivir en ambientes donde no hay N asimilable, si de repente le ponemos nitratos etc. eso es reversible, no disparan el sistema de la nitrogenasa que para ellas supone un coste muy grande.

Tema 6 Proceso general de fisin binaria. crecimiento individual (celular) y crecimiento poblacional; en el caso de las bacterias, se estudian poblaciones, el comportamiento de una cl. individual obedece a ese comportamiento medio de la poblacin. ndice de crecimiento de un cultivo microbiano. Para medir la velocidad de crecimiento de esa poblacin nos sirve cualquier elemento medible de esa poblacin; si tengo una bacteria que est creciendo y sintetizando protenas, membrana, pared, etc. nos sirve para medir la velocidad de crecimiento porque todos estn creciendo a la misma velocidad; depende del tiempo de generacin de esa bacteria. Tiempo de generacin: tiempo que tarda en duplicarse la poblacin. N = N(sub0)2^n n = n de generaciones que han transcurrido Tiempos de generacin ms cortos, ventaja biolgica sobre tiempos de generacin ms largos.

Tpica curva de crecimiento de una poblacin.

ROJO-n de cl vivas VERDE-n de cel. totales (= que rojo siempre que la muerte suponga la lisis de las cl.; si la muerte no supone su lisis la recta en muerte ser paralela no descender porque tendremos las mismas cl.). Roja: primera fase desde el tiempo 0 hasta donde empieza la lnea donde no aumenta el n de clulas: FASE LAG o fase de latencia (puede ser ms o menos larga, depender del tiempo de generacin del microorganismo y de si el medio inicial contiene nutrientes ya o no; y tambin depende de si el medio al que se pasa es idntico al medio en el que estaba creciendo, porque tendr que adaptarse o no); FASE EXPONENCIAL, tambin ser ms o menos pronunciada segn el tiempo de generacin y nutrientes temperatura etc. disponibles; FASE ESTACIONARIA: se agota un nutriente, se produce compuesto txico, condiciones ambientales malas, etc... en el punto de inflexin entre una fase y otra, la curvita, hay un crecimiento desequilibrado... en ese punto es donde si en la clula se almacena compuestos de reserva; si medimos la cantidad de nitrgeno, si los grnulos que se han almacenado son de nitrgeno nos saldr una velocidad de crecimiento super alta, pero si medimos carbono y lo que falta es carbono la velocidad de crecimiento ser mucho ms baja; cualquier elemento de la poblacin no nos va a servir para medir la velocidad porque sus componentes van a estar en desequilibrio; cuando se trata de una bacteria capaz de esporular es aqu donde lo hace; es tambin donde se forman los metabolitos secundarios, si produce un antibiticos, es ah donde los produce, tambin las toxinas; despus hay algunas cl. que ya haban iniciado la replicacin y la terminan, otras que ya la haban acabado y mueren, entonces se mantiene constante, hasta que al final entran en FASE DE MUERTE, donde van muriendo, ms lentamente de lo que se multiplicaran, tambin exponencialmente, pero ms suave. Si tiene una g=20' (tiempo de generacin de 20 min), en 48 horas, podras alcanzar 4000 veces el peso de la tierra, y eso que una bacteria media pesa 10^-12 gramos. Cuando deja de aumentar es porque el nutriente que necesita para multiplicarse falta, o porque el medio desciende su temperatura drsticamente, o porque el organismo ha producido algn compuesto que le resulta txico (cidos), etc.

Procedimiento para recuento de viables usando dilucin seriada de la muestra y mtodo "pour plate". Tiempo 0, pasamos muestra a una disolucin salina pasada por autoclave, osea, estril; luego hacemos diluciones de la muestra; a placas petri en un cultivo adecuado esteril lo repartimos bien en un asa y lo ponemos a incubar. UFC(unidades formadoras de colonias)/ml o g; solamente las clulas vivas producirn colonias; ej. en la dilucin 10^-3 tenemos 159 colonias, en el tiempo Tsub0 tenemos 159 cel vivas que han dado lugar a una colonia. Pasar la muestra por un filtro. Al tiempo 0 cogemos tdeterminado vol. secamos y metemos a estufa, hasta que quedan solo cl. y se pesa. en tiempo 1 otra vez, y as as; el error de pesada tambin es muy importante, precisin extraordinaria se requiere en la balanza. ? Medida de turbidez. A medida que aumenta la densidad de cl. aumenta la densidad ptica. Chemostato. Si necesita aire para crecer, penetra aire esteril. Cultivo abierto: hay una entrada constante de medio fresco esteril (renovacin continua de nutrientes, as que no se agotan). La velocidad de crecimiento de ese microorganismo es mayor si aumentamos la velocidad de entrada del medio fresco. En cultivo cerrado, no est en contacto con el medio ambiente (en un cultivo abierto se van renovando los nutrientes a lo largo del tiempo). Relacin entre concentracin de nutrientes, ndice de crecimiento (curva verde) y rendimiento del crecimiento (curva roja).

Relacin en el chemostato: Si seguimos aumentando la velocidad con la que entra ese medio fresco, acabaramos lavando el cultivo y acabaramos eliminando todos los microorganismos de ese medio porque no les da tiempo a multiplicarse ms rpido porque su tiempo de generacin es el que es; se puede controlar la densidad de la poblacin, en el medio ponemos una fuente limitante por ej de nitrgeno, de modo que el microorganismo se multiplicar ms despacio. Si controlamos la velocidad de entrada y el factor limitante al mismo tiempo pues tendremos controlada la velocidad de multiplicacin y la densidad de poblacin del microorg.

Tema 7

Thermus aquaticus su polimerasa resiste temperaturas muy altas, se introduce en esa cubetita y se puede someter a 95C donde las hebras se abren, y se van a empezar a sintetizar las cadenas complementarias; cuando ya las tenemos otra vez se vuelve a poner a la temperatura, se abre y otra vez se copia; y de un trocito se hacen muchas copias iguales. Reaccin en cadena de la polimerasa implica una enzima que es resistente al calor, y sirve para amplificar regiones del DNA, tendramos la cubetita donde ocurre la reaccin y ah el fragmento a amplificar, con el primer y el enzima (TAC pol).

Efecto del in sodio: Nonhalfilo. Necesitan mucha cantidad de agua libre en el medio.

Halotolerant. A una cantidad de agua menos a 0.99 lo puede tolerar, sufrir pero lo tolerar. Halofilo. Crecen en un margen de concentracin de cloruro sdico en margen de 10 hasta un 15 o ms, habitan en el mar, por ejemplo Vibrio cholerae. Halfilas extremas. No es que lo tolere, es que lo necesita para crecer, son archeas que no tienen pared de peptidoglucano, sino glicoprotenas con cargas que hacen que esa membrana solamente presente cohesin cuando en el medio hay iones sodio que neutralizan parte de esas cargas y hacen que esas molculas no se repelan, sino se pierde estabilidad. Viven en salinas. Bombas en su membrana que introducen iones hasta que igualan presin osmtica y el agua ni sale ni entra. Sintetizan solutos que almacenan en citoplasma y que son compatibles con funciones citolgicas que no alteran el interior de la clula, solo aumentan el potencial para que no salga el agua (no varan pH ni nada ms).

aw= agua libre; aw=presin de vapor del sustrato/presin de vapor del solvente(agua), a una temperatura 0 es la mnima, sin agua disponible, y 1 el agua pura, sin soluto ni in, toda el agua disponible. Por debajo de 0.70 el agua disponible es muy poca y los organismos en general no viven. Solutos compatibles de los halfilos extremos: Aa : betana glicina, ectoina. Carbohidratos: sucrosa, trehalosa. Alcoholes: glicerol, manitol. Otros: dimetilsulfoniopropionato. Importante para la conservacin de alimentos; para conservar leche concentrada aadir azucar, o simplemente quitar el agua. Escala de pH. Los microorganismos modifican el medio. Para acidificar un medio, aadir HCL diluido, para basificarlo, xido sdico. Lo mismo en cl. pro y eu; +/- 1 unidad de 7 es el pH clular; pero del medio es el logaritmo de la concentracin de iones hidrgeno. Microorganismos acidfilos, neutrfilos o alcalfilos. Aerbico, anaerbico facultativo, microaeroflico, y aerotolerante anaerobio. a) necesita concentraciones de O2 similares a los que hay en la atm; b) anaerobios no la toleran, les resulta txico y letal bla bla c) anaerobios facultativos, crecen mejor en presencia de O2 pero se adaptan a la ausencia d) microaerfilos, necesitan O2 pero en concentraciones menores a la atm e) anaerobios aerotolerantes, son anaerobios pero lo pueden tolerar

El O2 cuando se reduce forma el perxido de hidrgeno, que se reduce y forma agua, esos compuestos son inocuos, pero el agua oxigenada y el ion superoxido son muy reactivos; P + luz -> P* P* + O2 -> 'O2 singlete, que tambin es muy oxidante Cuando reaccionan con protenas se inactivan y el organismo se muere. Microorganismos en los que acta la nitrogenasa para capturar el nitrgeno molecular y convertirlo en amonaco, nitrgeno asimilable. Hay muchos que a su vez viven en presencia de O2, que es incompatible con el proceso de captacin de nitrgeno, porque la nitrogenasa se inactiva con presencia de O2. qu pueden hacer? Ej. Azotobacter, tienen un metabolismo muy rpido, utilizan O2 como aceptor final de electrones en la respiracin, que lo convierten en agua y lo hacen desaparecer, lo hacen a una tasa muy alta y no le dejan estar ah concentrado, y no daa el sistema de la nitrogenasa. Otro, es el Bacillus polymixa, anaerobio facultativo, solo capaz de fijar nitrgeno en condiciones anaerobias, si hay O2 no puede fijarlo. Y tambin el de las Cianobacterias, la estrategia es la formacin de heterocistos, en estos no existe una respiracin aerobia pero son capaces de fijar nitrgeno. Anaerobios no tienen mecanismos para deshacerse de estos compuestos txicos (in superxido, perxido de hidrgeno, radical hidroxilo), no les hace falta. Estrategias para prevenirse de estos reactivos:

Radiacin. De infrarojos para arriba ni fi ni fa. Radiacin UV, la ms perjudicial es la de long de 260 nm porque son absorbidas por los cidos nucleicos, y de 280 nm por ser absorbidas por las prot., y ms bajas pues ya es peor, se llama radiacin ionizante, son los radicales oxidantes que se producen como consec. de la radiolisis del agua con las que actan sobre molc. esenciales produciendo su inactivacin. Es penetrante instantnea y muy profunda (la UV acta de forma superficial); a la radiacin ionizante somos mucho ms sensibles que los insectos o microorganismos.

Tema 8. En el medio debe haber 80-85% agua disponible. Factores de crecimiento: compuestos que el microorg. necesita y que no puede sintetizar; es necesario aadirlos al medio de cultivo; microorganismo auxotrofo para ese compuesto; un microorg. prototrofo no necesita fact. de crecimiento.

Tema 9 Quimitrofos aerobios y anaerobios. En la respiracin el compuesto se puede oxidar totalmente hasta CO2 por lo que se libera toda la E almacenada, requerimiento E mucho mayor, aceptor externo de e-, cadena de transporte de e-. I. Glucosa -> Piruvato. o Glicolisis (va de Embden-Meyerhof). La glucosa de 6 tomos de carbono se convierte en 2 de piruvato; el balance de ATP es que hemos gastado dos molc. de ATP y producimos dos molec. de ATP, por lo que el balance es 0, pero se producen otros dos ATP adicionales por la dihidroxiacetona, as que el balance neto sern 2 ATP, + los 6 metabolitos precursores y 2 NADH.

o Ruta Entner-Doudoroff. Solo la pueden llevar a cabo los procariotas que no tienen la anterior. Utilizan la glucosa, y se gasta un ATP pero se producen dos, el balance energtico es 1ATP as que es ms pequeo que el de la glicolisis, se producen 3 metabolitos precursores ms los 6 m. p. comunes con la anterior; sin embargo aqu se produce 1 NADH y 1 NADPH. o Ruta de las pentosa fosfato. Es una ruta metablica estrechamente relacionada con la gluclisis, durante la cual se utiliza la glucosa para generar ribosa, que es necesaria para la biosntesis de nucetidos y cidos nuclicos. La ventaja que tiene es que produce una cantidad enorme de molec. de piridinucletidos reducidos (mucho poder reductor) y metabolitos precursores que no se han producido en las rutas enteriores, por lo que complementa bien a las anteriores. Por cada glucosa-6-P produce una ribulosa-5-P + 2 NADPH + 2 H+ + CO2. II. Fermentacin. Reoxidacin del NADH. Produce 2 ATP. o Fermentacin lctica. Ej. las bacterias del yogur, bacterias lcticas, tejido muscular. Piruvato -> cido lctico. Utilizan los piruvidinucletidos reducidos del anterior metabolismo, y esos piruvidinucletidos que se oxidan vuelven al metabolismo de arriba para reducirse otra vez. Consume 1 NADH. o Fermentacin alcohlica. Produce etanol. Consume 2 NADH. Levaduras. o F. butrica. Produce 2,3-Butanediol. Consume 1 NADH. Clostridium. o Oxidacin de alanina y glicina a acetado. Alanina se oxida a acetato utilizando NAD+ y la glicina se usa para reoxidar el NADH generado por la oxidacin de alanina. Produce 1 ATP por cada alanina. o Fermentacin de succinato por Propionigenium modestum y fermentacin de oxalacetato por Oxalobacter formigenes. cidos dicarboxlicos, como el succinato o oxalato, con grupos cidos, la fermentacin de esos cidos no liberan suficiente E para acoplarse a la sntesis de ATP. Estrategias especiales: ese succinato penetra en el interior de cl. y se descarboxila, y se convierte en propionato con un solo grupo COH, esa reaccin est acoplada a la exportacin de sodio mediante protena ligada a la membrana, crea un gradiente de sodio, y aprovecha ese gradiente para sintetizar ATP, crece muy despacito pero crece.

III.

Respiracin.

La respiracin se caracteriza por que hay un aceptor externo de e-, el rendimiento energtico es espectaculara, mucho mayor que en fermentacin, vara depende del tipo de resp, la ms favorable, rinde ms, mayor crecimiento, es la aerobia, que ocurre cuando el compuesto final que acepta electrones es el oxgeno (externo a la cl.). a. Ciclo del cido ctrico (CAC) o ciclo de Krebs (respiracin aerobia). Entra el piruvato. Se produce GTP + 4 NADH + FADH, en total ser 15 ATP. CAC + glicolisis = 38 ATP por glucosa. b. Respiracin anaerobia. Se usa NO3- como aceptor de electrones. NADH donador de e-. No es una reduccin de los nitratos asimilativa para construir prot. o aa, es un nitrgeno que se pierde, por lo que es una reduccin de nitratos y nitritos desasimilativa, lo eliminan a la atmsfera.

Desnitrificacin: eliminacin de los nitratos (sobretodo en suelos cultivados; nitratos y nitritos son muy txicos; muy solubles en agua y con el agua de la lluvia acabaran todos en el mar y acabara la fuente de nitrgeno de la tierra) utilizan nitratos como aceptos final de electrones; el nitrgeno en la tierra pasa al nitrgeno molecular; es un punto muy favorable a los seres vivos, porque como hay procariotas que fijan ese nitrgeno molec. y lo convierten en amoniaco, facilitan la fijacin para los seres vivos.

c. Transporte de electrones en Pseudomonas stutseri durante desnitrificacin. Eliminan gran cantidad de nitratos del suelo. No identificados los donantes inmediatos. Aceptor NO3-. Usan nitrato, cido ntrico oxido, nitrito, xido nitroso oxido reductasas. d. Reduccin del sulfato. Asimilativa o desasimilativa. El sulfato acta como aceptor final de electrones, es un in ms estable que los nitratos (aunque el ms estable es el O2). Si acta la APS kinasa, y transforma el APS a PAPS, entonces se formar un sulfato asimilable. Si no, se excretar. e. Transporte de e- y conservacin de energa en bacteria reductora de sulfato. Hidrogenasa accionada por hidrgeno externo originado en catabolismo de componentes orgnicos. Aceptor de electrones SO42-.

f.

Hidrogenasas en bacteria aerbica del hidrgeno H2. Quimiolitoautotrofos. Litotrofos, organismo quimiotrofos, pero los compuestos de los que parten son inorgnicos; el ms favorable es el hidrgeno, cede e- a la cadena de e-, aceptor final es el oxgeno de un litotrofo.

g. Respiracin anaerbia en bacterias del hidrgeno H2, el aceptor final es el carbonato HCO3- que se reduce y produce metano o cido actico. Metanognesis (ms energtica) y acetognesis. Producen una fuerza motriz de protones (o sodio en acetognesis) que produce ATP. h. Oxidacin del sulfuro reducido por quimiolitotrofos sulfricos. Transporte de e- genera ATP. Transporte inverso de electrones con gasto de energa, parte de ese ATP se gasta para transportar e- en ese sentido de modo que se reduzca NAD+ para convertirlo en NADH, potencial reductor para la fijacin del dixido de

carbono va el ciclo de Calvin. La energa liberada por la conversin de compuestos de azufre en sulfito (SO32- ) y despus sulfato se transfiere a la cadena de transporte de electrones para la produccin de ATP y NADH. Bacterias coloreadas del azufre, las que son quimiolitotrofas, se les llamas as porque utilizan el sulfuro de hidrgeno como fuente de energa; cuando el sulfuro de H se acaba producen tiosulfato S2O32- que es ms oxidado y puede ceder electrones a la cadena pero de una forma ms desfavorable. produciran ATP y mediante flujo inverso de electrones produciran NADH
El azufre es energticamente mejor donante de electrones que el sulfuro inorgnico o el tiosulfato.

i. Oxidacin de hierro por acidfila Thiobacillus ferrooxidans. El potencal de reduccin del hierro es tan sumamente alto que entra a nivel del cyt c, tan sumamente corta la cadena que ni siquiera se genera una fuerza motriz suficiente para generar ATP. Son archeas, conviven con las bacterias coloreadas del azufre, en ambientes muy cidos, el gradiente de protones entre el exterior de la celula y el interior se establece ms por el propio ambiente, que ayuda a al ATPsa para la sintesis de ATP, y con ese ATP que se sintetiza mediante flujo inverso de e- se consigue el poder reductor. En condiciones aerobias en presencia de O2 el hierro es absolutamente inestable, si est a pH cido est en forma Fe2+ sino se vuelve frrico. Esto explica que compartan nicho ecolgico con las bacterias del azufre.

j. Oxidacin de amonaco en bacterias oxidantes del amonaco. k. Oxidacin de nitritos a nitratos por las bacterias nitrificantes. IV. Fijacin de CO2. Auttrofos. a. Ciclo de Calvin. Fijacin de CO2. 6 CO2 + 12 NADH + 18 ATP -> molcula orgnica (azcar-fosfato) + 12NADP+ + 18ADP + 17Pi b. Ruta de la acetilCoA. Modo de fijar carbono a partir de CO2 que no tiene que ver con el ciclo de Calvin. Organismos acetognicos: producen acetato. c. Reducen CO2 al grupo metilo y carbonilo y luego con esos hace el acetato (necesita 2 CO2). Se genera una fuerza motriz de sodio que sintetiza ATP, tambin se sintetiza ATP en la conversin de acetyl-CoA en acetato. d. Metanognesis. No todos son auttrofos, no todos utilizan CO2 como fuente de carbono, hay organismos que no ocurre utilizando CO2 sino utilizando compuestos inorgnicos, como metanol, y no sera una autotrofa, se produce metano al final. V. Hetertrofos. Compuestos orgnicos como fuente de carbono. a. Metfilos. Utilizan compuestos de carbono muy sencilitos como fuente orgnica: i. Metantrofos (compuestos orgnicos con un solo carbono o que tienen dos carbonos no unidos directamente carbono-carbono, pueden utilizar metano).

ii. Metiltrofos (pueden usar todo menos metano). Ruta ribulosa monofosfato. Bacterias metilotrficas de tipo 1. Tres formaldehido con ATP formar gliceraldehido-3-P, que es un precursor. Ruta de la serina. Bacterias metilotrficas de tipo 2. La glycina se une con el formaldehydo y se convierte en serina. El producto de la ruta es acetil-CoA. VI. El ciclo del glioxilato. Variante del ciclo de Krebs. Durante el crecimiento con acetato. Sntesis de oxalacetato desde acetato y acetil-CoA, para obtener succinato y CO2. La diferencia de este con el cido ctrico es que en ese el paso de isocitraro a succinato esos dos C se pierden en forma de CO2, pero aqu se conservan en el glyoxylato y es lo

que va a permitir el funcionamiento del ciclo, regenerar el aceptor. Permite generar glucosa a partir de cidos grasos. VII. Beta-oxidacin de cidos grasos. a) Necesitamos romper el cido graso de la molcula de glicerol, necesitamos lipasas que no son especficos (lo rompen de manera inespecficas, tambin se denominan estearasas, porque rompen el enlace ester). b) Hay algunas que s son especficas, hay un microorganismo (Clostridium perfringens) que produce unas lipasas especficas (fosfolipasas), tan especficas que que cada letra rompe un enlace especfico de un punto muy concreto del fosfolpido, A, B, C y D; producen una desaparicin casi completa de los hemates porque rompen de forma muy especfica la membrana: bacteriemias generalizadas, infecciones graves a menos que se controlen a tiempo.

Al final tendremos el cido graso unido a CoA con dos carbonos menos, se van rompiedo trocitos del extremo de la molcula con dos carbonos, y se queda el cido graso con dos carbonos menos. Ese cido graso del que se han desprendido los 2C vuelve a entrar en la ruta y se vuelve a romper dos fragmentos con dos trocitos, y al final junto con CoA se convierte en Acertil-Coa, ms el cido graso que es activado con otro CoA y vuelve a entrar en el ciclo, etc. As se oxidaran esos cidos grasos Durante esta ruta se produce tambin pirimidn nucletido reducido, almacenamiento de poder reductor (FADH y NADH). Se consume ATP. VIII. Oxidacin de un hidrocarburo aliftico. "La glucosa y la fructosa son los azcares ms favorables porque entran directamente en la glicosisis y a partir de ah se sintetizan metabolitos precursores; si no, pueden ser disacridos, en este caso el microorganismo debera producir glicosidasas, romper el enlace glicosdico y convertirlos en glucosa si no lo son ya, si el compuesto es un polmero ms complicado como el almidn o la celulosa o glucgeno (que son compuestos de glucosa, pero polisacridos), el microorg debera producir almidasas o celulasas o glucosidasas, para convertirlos en monosacridos; cuando tiene estos monosacridos porque los ha encontrado as o porque los ha producido a partir de otras molc. ms complicadas, entran en la glucolisis; cuando la fuente no son azcares sino lpidos pues tiene otra ruta, y con eso genera metabolitos precursores con los que genera otra clula." Existen compuestos llamados recalcitrantes, que son muy estables a la accin microbiana porque ya son muy complicados pero ocurre que a los microorg no se les resiste ningn compuesto, son dos grupos de compuestos: hidrocarburos alifticos y los compuestos aromticos (dentro de estos, los ms frec. hidrocarburos aromticos). Por ej. el n-octano tiene 8 carbonos, y la diferencia es que stos no tienen grupo COOH (grupo cido al final). Los microorg. pueden destruirlos en condiciones aerbias, permanecen estables en sitios anaerbios, en presencia de oxgeno con accin de monooxigenasas convierten ltimo CH3 en un grupo cido, lo oxidan y puede entrar en la beta-oxidacin. Estos

microorganismos pueden utilizarse para eliminar contaminacin de vertidos en el mar y cosas as.

El benzoato los microorganismos lo pueden utilizar tambin como fuente de carbono, se oxidara en condiciones aerobias mediante oxigenasas, lo convierten en catechol, lo convierten en un cido, que entrara en la beta-oxidacin como un cido que sera ya lineal.

Al tolueno le pasara algo parecido, hasta romper tambin el anillo e introducir grupos OH en el extremo.

Se han encontrado organismo que pueden romper tambin el benzoato en condiciones anxicas y ya no sera una degradacin aerobia, a partir de agua introducen los tomos de oxgeno correspondiente, y al final entraran en la beta-oxidacin. Los XENOBITICOS, que son los artificiales, producidos por el hombre, son an ms estables que todos los dems. DDT (dicloro difenil tricloroetano), era absolutamente estable y se acumulaba en el microorganismo, y resultaba ser un contaminante ambiental, se prohibi. Ya hay microorg. que lo pueden degradar y se usa desde hace 50 aos no ms, y ya ha habido mutaciones suficientes en los microorg. (se pasan por el plsmido, que llevan genes para la degradacin de ese DDT) pueden degradar contaminaciones producidas por el hombre, DDT. Es muy difcil encontrar un compuesto que no pueda ser degradado por los microorganismos. La microbiologa tard mucho en avanzar porque no se encontraba dnde cultivar los microorg. en superficie slida. El compuesto que se descubri y que sigue es el agar que es un polmero extrado de algas, muy estable a la accin microbiana, la ventaja es que no es soluble en agua pero cuando se calienta a ebullicin se hace lquido y cuando se enfra solidifica.

Tema 10 Quimiotrofos: obtienen energa (fuente de energa) a partir de compuestos qumicos: -organotrofos: energa a partir de compuestos orgnicos; -litotrofos, a partir de compuestos inorgnicos (en ambos deben ser compuestos reducidos, que puedan ceder electrones, sulfatos o nitratos no pueden dar electrones, no sern fuente de energa, osea de poder recutor; lo pueden recibir, pero no dar; se tratara de respiracin anaerobia, pero ya est; si tienes O2 sera respiracin aerobia; puede dar e- el azufre elemental, el tiosulfato, etc.) Tendremos quimioorganoauttrofos o hetertrofos y quimiolitoauttrofos o quimiolitohetertrofos. Esta vez como fuente de energa tenemos la luz: ya no son quimiotrofos sino fototrofos. Aparato fotoqumico: pigmentos antena o captadores de luz, centro de reaccin fotosinttica y cadena de transporte de electrones. Situado en sistema de membranas. Pigmentos pueden ser: clorofilas, bacterioclorofilas, carotenoides y ficobiliproteinas (cada grupo de procariotas fotosintticos tienen su grupo de pigmentos captadores de luz). Resto tienen bacterioclorofilas, muy parecidas a clorofila a.

Carotenoides son pigmentos accesorio; absorben esa energa, la transforman y emiten luz con una longitud de onda de manera que la clorofila la puede procesar, el rendimiento es mayor; no participan en la fotosntesis, capturan luz pero no se encuentran en los centros de reaccin fotosinttica; absorben con una longitud de onda y despus emiten con fluorescencia que pueda absorber la clorofila. Tambin absorben oxigeno en estado de singlete y no daa el aparato fotoqumico. Ficobiliprotenas: presentan grupo prosttico, forman un grupo proteico capaz de captar luz. Un poco la misma funcin que carotenoides; absorben espectro que no pueden ni carotenoides, ni clorofila. Ms conocidos: Ficocianina (en cianobacterias, de color azulado). Ficoeritrinas (de color rojo).

Los procariotas no tienen cloropastos. En bacterias verdes lo tienen un poco fraccionado, captacin de luz en el clorosoma y el aparato fotoqumico est en membrana citoplasmtica pero es un poco atpico. En el caso de las bacterias rojas o prpuras se encuentra en unas invaginaciones formando vesculas, sistema de doble membrana de fosfolpidos, tpico, y ah es donde se aloja el aparato fotoqumico. Los fottrofos anoxignicos tienen membrana lamelar, tambin de invaginaciones de membrana, pero en vez de formar vesculas, forman estructura similar a los tilacoides. Energa y sntesis de poder reductor en: Fottrofos anoxignicos. Energa: luz. Se sintetiza ATP, por otra parte los compuestos que actan cediendo electrones son distintas al agua; con lo que se genera la bacteria podr fijar CO2.

Fotosntesis anoxignica en bacteria prpura. Completo proteico en la membrana fotosinttica

Esquema general del fujo de electrones. Una bacteriofeofitina, es una bacterioclorofila que no tiene un tomo de magnesio, y si es una feoficina es la clorofila a sin el tomo de magnesio; se oxida y cede electrones a una cadena de transporte de ey se genera una fuerza motriz de protones, el dador externo de electrones son compuestos del azufre o hierro reducido, los e- tienen que volver pa'tras y necesitan gasto de ATP. Quiere decir que la vuelta de e- genera ATP, para que los e- de estos compuestos que actan como dadores externos pasen al NAD(P)H y lo reduzcan, necesitan gastar parte del ATP ese que han generado, porque es eso, necesitan dar la vuelta

Fottrofos oxignicos. Energa la luz. Oxidacin de agua a oxgeno. Dador de e- es el agua, se produce O2, y los electrones que cede el agua junto con ATP sirve para fijar CO2. *Pueden ser fototrofos cuando tienen luz (con fotosntesis aerobia) pero tambin pueden estar en condiciones anaerobias y utilizar compuestos qumicos como el piruvato y producir fermentaciones (no es una respiracin anaerobia, sino una respiracin), como un quimiotrofo.

Comparacin del fujo de e- en bacteria prpura, bacteria del sulfuro verde y heliobacteria.

Flujo de electrones en fotosntesis oxignica (plantas verdes), esquema Z. Fotosntesis oxignica la realizan las cianobacterias, lo ms cercano a una clula eucariota de una planta. Pueden crecer en condiciones aerobias o anaerobias, en cuyo caso se adaptan con un fotosistema que les permite esas condiciones, pero en ambos casos generan ATP y poder reductor. Si tienen suficiente cantidad de ATP pueden anular fotosisII y funcionar solo con el I. En ningn caso anterior se produca O2, aqu s, como reductor acta el agua. Bacteria del sulfuro. Procariotas que pueden utilizar energa luminosa y convertirla en energa qumica, pero no son fotosintticas, porque no tienen ni clorofilas ni bacterioclorofilas, que son pigmentos en el centro de reaccin fotosinttica; lo que tienen son otros pigmentos distintos: carotenoides, no es una fotosntesis. Halobacterium. Archeas halfilas extremas capaces de sintetizar bacteriorrodopsinas y bacteriorruberinas, que las acumulan en membrana citoplsmica. Dan un color rojizo a los lagos; cuando las condiciones de oxgeno disminuye, las bacterias sintetizan ms cantidad de estos pigmentos (bacteriorodopsinas) y va aumentando el color rojo. Modelo del mecanismo de funcionamiento de la bacteriorrodopsina. Tambin presentan rodopsinas sensoras, que lo que hacen es producir una respuesta fototctica, la bacteria mediante flagelos se mueve en busca de la luz. Rodopsina conjugada a un carotenoide llamado retinal, y que est normalmente en trans, cuando recibe energa luminosa verde (570 nm) se activa el retinal y se convierte en forma cis y esa transformacin va acompaada de salida de un protn, se genera un gradiente de protones, y se sintetiza ATP. Se bombea protones hacia el interior a favor de un gradiente, y al tiempo la bacteria saca sodio por antiporte del interior de la clula al exterior y se genera un gradiente de sodio (poco dentro y mucho fuera), esto lo utiliza la bacteria para introducir iones potasio por simporte junto al sodio a favor de un gradiente. Presentan halorrodopsinas, que son otras rodopsinas, que llevan un retinal, un carotenoide conjugado, que es capaz cuando se activa con la luz de introducir iones cloro en el interior de la clula; ese cloro nos servir para neutralizar el potasio que ha entrado, se produce cloruro potsico que se acumula como soluto compatible, que le permite vivir en un ambiente hipersalino y no perder agua.

Extisten proteobacterias, en mar abierto con pocos nutrientes, que pueden realizar este tipo de reacciones mediante proteorrodopsinas. Ciclo de Calvin. La bacteria tiene ATP y NADH. Procariotas heterotrofos que se comportan como auttrofos fijan CO2 con ciclo de Calvin. RUBISCO. Rutas nicas auttrofas en bacteria verde fottrofa. Fijacin de CO2. Ciclo de Krebs invertido (ciclo del cido ctrico) entra piruvato, acetil Coa, y acaba saliendo del ciclo en forma de CO2; son enzimas reversibles, pero hay enzimas clave que son los que hacen que el ciclo gire hacia un sentido u otro, y esta vez hace que gire al contrario. Se obtiene triosa-P. Ruta del hidroxipropionato. Bacterias verdes no del sulfuro. A partir de Acetil-CoA obtenemos metilmalonil-CoA, que se divide en acetil-CoA (inicio ciclo) y glioxilato (sntesis de material celular).

Tema 11 Asimilacin de nitrgeno: Conversin de N2 a NH3 mediante complejo enzimtico nitrogenasa. Sntesis de glutamina (cido gutmico + NH3). Consumo de ATP. S. de 2Glutamato (1cido alfa-ketoglutarico + 1glutamina). Consumo de NADPH. Transaminasas lo usan para sintetizar aminocidos.

Heterocistos. Obtiene el reductor que necesitan para la fijacin de la materia orgnica de las clulas vegetativas adyacentes. La glutamina es la forma de nitrgeno fijado transportado a las clulas vegetativas.

Asimilacin de azufre. Mediante PAPS. Entra como SO42- y se asimila como H2S Asimilacin de hierro. El hierro es introducido en el grupo hidroxamato e introducido en la clula como Fe3+, dentro se convierte en Fe2+. El hidroxamato sale y repite.

Tema 12. A tiempo que se duplica DNA del genoma, se replica tambin el del plsmido, y si tiene virus tambin constituye parte del genoma. Intrones: lo que no codifica para nada. Clulas muy simples con genoma ms pequeo y clulas capaces de formar endosporas, y solo para esta se necesitan 200 genes, genoma con tamao mayor. En clulas eucariotas hay reproduccin sexual, en procariotas no hay reproduccin sexual as que deben existir mecanismos de recombinacin gentica para que haya variabilidad. Conjugacin, transformacin y transduccin.

Recombinacin bacteriana: Conjugacin, transformacin y transduccin. Entra el DNA exgeno en el interior (merozigoto) y puede sufrir diferentes destinos. Si encuentra regin homloga en genoma se recombina, entonces est salvado de los mecanismos de defensa de clula y se transmitir a la descendencia (se integra). Puede ser que se genere un clon en el que parte del genoma sea diploide (clon diploide), si ese DNA que entra se recirculariza (ya no tiene extremos que son los ms vulnerables a la degradacin) y constituye un elemento estable (clula diploide). Si se queda de manera lineal, los enzimas de restriccin del procariota van a notar que eso es una molcula extraa y la eliminan, y no habr recombinacin gentica porque la informacin se pierde (restriccin del hospedador).

Modelo de Holliday para la recombinacin general recproca. Rotura en cada uno de los DNA. Los extremos rotos invaden a la doble cadena contraria. Tiene lugar una migracin del punto de cruce de las cadenas. Esta migracin origina una regin de DNA heterodplex, doble cadena de distinta procedencia.

Conjugacin. Clula puede sobrevivir sin plsmido. Pueden tener uno o varios plsmidos. Algunos plsmidos presentan fenmeno de incompatibilidad: protege a la clula de la entrada de otros plsmidos del mismo grupo que ese que ya presente. Demostracin de Lederberg y Tatum: Cogieron cepa de E. coli que presentaba auxotrofa triple (si ese elemento no se adiciona al medio la clula no puede crecer porque no puede sintetizarlo) para X. Y cogieron una clula que presenta auxotrofa para justo lo contrario que la E. coli. Las dos en su medio crecan bien, luego combinadas en el mismo medio sin ningn aminocido de los 6 hay crecimiento, la informacin gentica de una de las cl. que codificaba para + ha pasado a la otra, y se seleccionan las colonias prototrficas que tienen capacidad para sintetizarlo todo: corresponder a los recombinantes. Experimento del tuvo en U (Bernard Davis): tubo en forma de U y en el centro una membrana, que dejaba pasar el medio de cultivo pero no las bacterias, coloc en un lado las que presentaban unas propiedades y en el otro las complementarias. Pero no se observ colonias recombinantes, as que se lleg a la conclusin de que las bacterias deban estar en contacto mediante el pelo conjugativo.

1. Plsmidos bacterianos. Plsmido F. Exclusivamente en enterobacterias. Genes tra estn los que codifican para los genes de la autotransferencia, y las regiones amarillas se ecuentran tambin en E. coli y son regiones homlogas donde se producen la recombinacin que se ha dicho, se pueden integrar en el genoma de la bacteria.

2. Mecanismos de la conjugacin bacteriana. Cruce F+ x F-

Cruce Hfr x F-

Los F+ forman el pelo y transmiten. 3. Procedimiento para la deteccin en el laboratorio de la conjugacin gentica. En el caso de los azcares, lo que recibe el microorganismo es capacidad para usarlos (debe haber en el medio); en los aa es capacidad para sintetizarlos (si no hay en el medio); si a una clula Lac- la convierto en Lac+ podr ponerle lactosa al medio porque la clula podr usarla (no significa que la sintetice). I. Esta vez no hablan de Thr ni Leu, as que solo hablo de lactosa, pondr los aa para que crezca porque no s si los genes para su sntesis se han mezclado. Si yo no hago referencia al gen de la lactosa, no hablo de la lactosa para elegir el medio, as que pondr otra fuente de carbono (probablemente no querr comprobar recombinantes para Lac+, sino para aa u otra cosa).

II.

No poda crecer ninguna de las dos clulas de partida, slo la clula recombinante. 4. Conjugacin F'. Puede pasar que el plsmido que estaba integrado, se desintegra y forma el plsmido, y ser F+, puede ser que al romperse se lleve un trocito del cromosoma bacteriano, y se produce una bacteria llamada F', que lleva el plsmido F pero que no tiene exactamente la info gentica del plsmido F, y como clula F+ puede construir un puente conjugativo y transferir el plsmido a una F-, y formar un recombinante (porque lleva un trozo de cromosoma integrado en el plsmido, a la otra clula le da igual dnde est, el caso es que recibe un trozo del cromosoma). 5. Plsmidos bacterianos. a. Plsmidos FP. Hay otras como pseudomonas que tienen los plsmidos FP que es similar al plsmido F y que establece conjugacin entre pseudomonas que llevan plsmido FP y las que no lo llevan. b. El plsmido R100. Existen adems otros muy importantes, plsmidos R, que codifican para resistencia a antibitico, se transfieren de una cl a otra a travs de los pelos F y de los pelos I; si la bacteria que tiene un plsmido F y puede formar un pelo, adems tiene un plsmido R, pues tambin lo puede pasar, y lo mismo con plsmidos I que tambin pueden formar pelo ; Si una bacteria no es patgena, nos da igual que sea resistente, pero cuando tenemos una infeccin con un microorganismo que s es patgeno... y entonces esa bacteria le transmite el plsmido R a esa otra bacteria que s es patgena, esa bacteria ser difcil de tratar >3< Tambin hay plsmidos R que codifican para resistencia a mltiples antibiticos, codifican para la adenilacin del antibitico.

Transformacin bacteriana. No es necesario que estn las dos clulas, puede estar la clula que lo recibe y el trocito de dna que tiene que recibir. Trabaj con streptococcus pneumoniae, que produca la muerte de los ratones de lab, las colonias lisas cuando estaban vivas producan virulencia pero muertas no pasaba nada, en las rugosas cuando estaban vivas no pasaba nada; las puso en el mismo medio (lisas muertas con rugosas vivas) y las inyect en el ratn que mora, y recuperaba colonias vivas de las virulentas; las rugosas adquirian los genes de las lisas y codificaban para cpsulas Hay clulas que pueden recibir ese DNA de forma natural, y exiten procariotas que no son capaces de sufrir una transformacin natural, aunque pongamos DNA en el medio no son capaces de captarlo, E. coli no es capaz de hacerlo por ej. pero s se puede lograr mediante mtodos artificiales.

1. Mecanismos de transformacin. Puede ser DNA lineal, plasmdico, cadena simple, doble, etc. a. Streptococcus pneumoniae (gram +) sufre una transformacin natural, el DNA exgeno que se va a introducir en la clula puede tener cualquier origen. b. Haemophilus influenza (gram -) transformacin natural, en membrana externa presenta 10 vesculas y en ellas se encuentra una protena que se une especficamente a una secuencia de DNA cortita de 11 pb, una vez unido la vescula sufre una invaginacin y el DNA se queda englobado en su interior, esa secuencia es muy frecuente; el DNA exgeno no puede ser de cualquier origen, suele ser de otro Haemphilus o muy cercano. Si el DNA que se va a introducir sustituye al endgeno y son idnticos, llevan la misma info gentica y la bacteria no sufre ningn cambio. i) Plsmidos. Para transformar una bacteria, se permeabiliza a ese DNA exgeno mediante tcnicas muy variables: se rompe la pared con enzimas, y se deja solo rodeada por la membrana citoplsmica (protoplasto) y se introduce polietilenglicol, los iones divalentes desestabilizan la membrana y se permeabiliza a la entrada de DNA exgeno; se puede hacer as o mediante pistola de partculas; o por electroporacin. Una vez que ha entrado ese DNA debe cerrarse covalentemente y constituir un plsmido y entonces ya llevar la informacin estable, para que eso ocurra, para que tenga xito, ese plsmido cuando se rompe antes de penetrar en la clula, esa rotura tiene que ocurrir por una regin que sea homloga con la de una secuencia complementaria que se encuentre en el interior de la bacteria que puede estar situada en el cromosoma o en otro plsmido.

ii) Mediada por un fago o bacterifago (a un virus no se le puede llamas clula, porque no es). Transduccin generalizada o especializada; cuando el DNA del fago penetra en el interior de la bacteria puede ocurrir que ese DNA se circularice y se produzcan muchas copias del DNA del fago, se rodean de su cpsida, se rompe la clula y salen al exterior, ciclo ltico; puede ocurrir que ese DNA se integre en el cromosoma de la clula, entonces estara en un estado lisognico, mientras que el fago se quede integrado, al tiempo que se replica el cromosoma de la bacteria lo

hace el del fago y las clulas hijas reciben tambin esa informacin: ciclo lisognico. Puede ocurrir que en cualquier momento el DNA se suelte, circularice y haga mucha copias y bla bla. (1) Generaizada. Puede ocurrir que uno de los trocitos del DNA de la clula se englobe de manera atpica y poco probable dentro de una de las cpsidas, no es un virus viable porque no lleva la informacin de virus viable, lo nico que lleva bueno es la cpsida, que encontrar receptores especficos e inyectar el DNA en el interior. ese DNA no provocar lisis ni crear copias en el interior, pero si tiene "suerte" se integrar en el cromosoma, tambin puede ocurrir que no se integre y se elimine; puede introducirse cualquier gen en la cpsida. (2) Especiaizada por bacterifago atemperado. Lo que se transduce son genes muy concretos, no cualquiera; por ejemplo el bacterifago lambda (con genoma DNA de doble cadena) en E. coli que se integra en el cromosoma de coli en un sitio muy concreto (zona ATT) entre el gen que codifica para sntesis de biotina (gen BIO) y entre el gen GAL; puede ser que la escisin no sea por extremos exactos y se lleve un trocito del DNA de coli; el DNA circular har muchas rplicas, con ese trocito de DNA de coli, se produce la cpsula y se liberan muchas partculas fgicas; el 100% de partculas llevan ese trocito de DNA; cualquier de estos fagos infectara una clula de e.coli e introduce ese DNA en su interior; qu genes puede transferir? el gen GAL o el BIO, dependiendo de dnde ha ocurrido la escisin.

Recombinacin en virus. Mapas genticos. Virus son entes biolgicos de organizacin subcelular, necesitan clula hospedadora; se construyen muchas copias de los dos DNA de doble cadena; lo normal es que la copia de uno de los virus (dos cepas distintas) se rodee de su correspondiente cpsida y el otro pues en la suya, pero puede ocurrir que ocurra esa recombinacin y puede ocurrir que se introduzcan en la misma cpsida una cadena de cada DNA y se recombinen; si usamos esto para infecta E. coli, cada uno da unas calvas distintas (colonias constituidas por esos virus).

Tema 16.1. Factores de virulencia. Toxina diftrica de Corynebacterium diphteriae. a) Factor 2 de elongacin (EF-2) normalmente se une a la ribosa y transporta el aa en el tRNA al ribosoma, elongacin de protena. b) Toxina se une a membrana, es hidrolizada, fragmento A cataliza ADP-ribosilacin del factor 2 de elongacin (EF-2*). No ayuda a la extensin de la prot. Sntesis proteica se interrumpe, clula muere.

Toxina botulnica de Clostridium botulinum. a) Con una estimulacin nerviosa la acetilcolina (A) es liberada de vesculas mediante el nervio motor. Se une a receptores especficos en el msculo, induciendo la contraccin. b) La toxina botulnica acta en la placa motora y previene la liberacin de la acetilcolina, provocando la falta de estmulo de las fibras musculares, la relajacin irreversible de los msculos y una parlisis flcida. Toxina tetnica de Clostridium tetani. a) La glicina(G) induce la relajacin muscular producida por neuronas inhibidoras. La glicina actua en las neuronas motoras para bloquear la excitacin y liberar acetilcolina. b) La toxina tetnica bloquea la liberacin de glicina, inhibiendo la relajacin de las neuronas motoras. La liberacin constante de acetilcolina produce una contraccin irreversible de las fibras musculares y parlisis espstica. En herida, anaerbico estricto. No se podra eliminar con antibiticos porque aunque no la tengamos la toxina sigue haciendo sus cosas. Toxina colrica (enterotoxina) de Vibrio cholerae. 1. Proceso normal de trfico de iones en el intestino 2 y 3. Las toxina (A-B) de V. cholerae se unen al gangliosido GM1, entra la subunidad A y activa la adenilato ciclasa 4. Bloqueo del flujo normal de sodio 5. Prdida de agua en el lumen y diarrea. Llega el microorganismo y se fija mediante receptores especficos a las vellosidades y produce las enterotixinas; el fragmento A de la enterotoxina acta sobre la adenylciclasa que lo que hace es pasar ATP a AMPc y ese proceso va acompaado de bloqueo de la entrada de sodio y salen otros electrolitos y en la luz intestinal se almacenan muchos iones y la presin osmtica aumenta fuera y se pierde agua hacia la luz intestinal y se traduce en una diarrea gravsima, y con las heces se elimina el microorganismo; el individuo muere por deshidratacin; se eliminara con antibiticos. Staphylococcus aureus tambin produce enterotoxina, en el alimento, es una toxinfeccin alimentaria, como el Clostidrium botulinum. Se ingiere la toxina en el alimento; est en los granos; y cuando un manipulador de alimentos toca un alimento con eso pues produce toxinas y tal. Aparece a las 2 o 3 h despus de la ingestin.

Endotoxinas y la respuesta pirgena. En bacterias Gram -, cuando la membrana externa bacteriana es hidrolizada en la vacuola se libera ese lpido A (que es parte de la membrana) y el fagocito sintetiza y libera la IL-1 que a travs de sangre llega al cerebro, al hipotlamo, donde tenemos el centro que regula la T corp., cuando llega las clulas de ah sintetizan prostaglandina y ese termostato regula a T ms elevadas -> fiebre; la aspirina, paracetamol, etc. inhiben la sntesis de prostaglandinas; esa fiebre alta es un mecanismo defensivo para impedir que el microorganismo se multiplique ms rpido. El fagocito puede liberar el factor de necrosis tumoral FNT; cuando se libera lo que hace es que llega tambin a los vasos sanguneos y aumenta la permeabilidad del vaso, el suero sanguneo sale y la presin sangunea baja y el corazn no funciona, los riones no funcionan, los rganos no funcionan, y se produce el shock anafilctico, y el asunto no tiene remedio; eso ocurre con algunas bacterias Gram - especialmente virulentas como Salmonella typhi.

Factores de virulencia importantes en Salmonella.

Eucariotas. a) Entamoeba histolytica. Se puede presentar en forma de trofozoito o en forma de quiste (forma resistente a condiciones ambientales): el protozoo penetra en el organismo en forma de quiste, atraviesa la barrera gstrica y llega hasta el intestino grueso y es ah donde encuentra las condiciones idneas para crecer, se rompen las paredes del quiste y se forma la forma vegetativa, el trofozoito, se multiplica por fisin binaria, a partir de ah puede tener diversos caminos: eliminadas por heces (se enquistan rpidamente, forma infectiva); se pueden multiplicar en el intestino, y romper la pared intestinal debido a que producen enterotoxinas y enzimas, como proteasas, y producirse diarreas con sangre, y peritonitis. Sintomatologa muy similar a la que puede producir una bacteria, as que tiene que determinarse que debe tratarse de una entamoeba.

b) Giardia lamblia. Tiene un ncleo con dos nucleolos, y 8 flagelos, por arriba tiene el disco suctorio por el que se puede pegar al intestino, y por ah absorbe los nutrientes,; y lo del centro es un engrosamiento axostilo; la giardia lamblia afecta a humanos. Penetra va oral en forma de quiste y atraviesa barrera gstrica en forma de quiste, y se desarrolla en el intestino delgado, se libera y multiplica, y se une por el disco al intestino y forma como un tapiz, y nos produce una desnutricin casi total, compitiendo por los nutrientes, producen diarreas brillantes; factor de virulencia fundamentalmente las enterotoxinas. Micotoxinas. Muchas son cancergenas, estn en muchos alimentos de los que ingerimos todos los das: la A llega por cerveza (todas tienen), pan (todos tienen), etc.; hay ms. Aspergillus, penicillium, Fusarium, Alternaria, Claviceps spp.

Tema 16.2. Defensas inespecficas. La piel y mucosas. Aparato lacrimal. Escalador mucociliar (tracto respiratorio).

Macrfago: clula que engloba bacterias con forma bacilar, fagocitosis.

Accin de las enzimas fagocticas en la generacin de especies txicas del oxgeno.

Proceso de inflamacin. 1) Dao tisular. 2) Qumicos como histamina, kinina, prostaglandina, y leukotrienos son liberados por las clulas daadas. 3) Vasodilatacin e incremento de permeabilidad de vasos sanguneos 4) Se forman cogulos de sangre. 5) Se forma un absceso. 6) Fagocitos (macrfagos, neutrfilos) se mueven al endotelio (marginacin). 7) Se mueven entre clulas endoteliales (migracin. 8) Fagocitosis de bacteria invasora. 9) Reparacin del tejido daado. Sistema de complemento. 1) Activacin por va clsica. Iniciada por reaccin Ag-Ac, escisin de C3 en Cea y C3b inicia cascada que produce citolisis, inflamacin y fagocitosis. 2) Act. por va alternativa. Iniciada por contacto entre C3 y factores B, D y P y un producto patgeno (no Ac implicados). Se forman C3a y C3b y sigue por la va clsica. 3) Va de la lectina. Lectina de unin a manosa se une a esta en superficie de microorganismo, MBL funciona como opsonina y aumenta fagocitosis y activa complemento a travs va clsica y alternativa. Citolisis. C9, C5b, C6, C7, C8 se insertan en membrana plasmtica microbial y abren un poro. Inflamacin. C3a y C5a se unen a mastocitos, basfilos y plaquetas desencadenando liberacin de histamina que aumenta permeabilidad de vasos sanguneos. C5a factor quimiotctico que atrae fagocito a sitio de activacin del complemento.

Opsonizacin. C3b marca a un patgeno para su ingestin y destruccin por un fagocito.

Interferones. Accin antiviral.

Tema 16.3. Defensas especficas.

Respuesta humoral: Sntesis de anticuerpos. Respuesta celular: Generacin de clulas que van a contribuir a la eliminacin del antgeno. Estas respuestas tienen la caracterstica de ser especficas de antgeno. Anticuerpos. Los anticuerpos que se forman pueden reaccionar con un determinante antignico (protenas de membrana). Pueden reaccionar por ambos extremos, con lo que consiguen la aglutinacin de los antgenos. i) Eptopos: determinantes antignicos. Cada Ag posee ms de un eptopo. Cada molcula de Ac tiene al menos dos sitios de unin que pueden unirse a un eptopo especfico de un Ag. Ac puede unirse a eptopos idnticos de dos clulas diferentes al mismo tiempo. Facilita la aglutinacin, que impide que se desperdiguen por el organismo llegando a las clulas diana. ii) Haptenos. Molc. demasiado pequeas para estimular formacin de Ac. Cuando se combinan con molcula transportadora ms grande, se forma conjugado que s estimula respuesta inmunitaria. iii) Inmunoglobulinas. Presentan 2 cadenas pesadas. Las cadenas tienen una regin muy constante, de forma que se pueden diferenciar los anticuerpos segn la regin conservada: tenemos 5 tipos distintos de Ig. Las regiones variables son las que van a permitir el reconocimiento y acople con un antgeno.

Al rodearse de anticuerpos, el antgeno no puede reconocer a la clula diana con lo que la infeccin se detiene. Esto pasa tanto para microorganismos como toxinas. Se estimula la liberacin por parte de los granulocitos que liberen enzimas para matar al parsito. Diferenciacin de linfocitos B. Las clulas responsables de la respuesta celular se encuentran en la mdula sea o en el timo (2 lneas celulares distintas). En los tejidos limfoides es donde contactan con el antgeno que nos llega.

i)

Cuando llega un antgeno es seleccionado por especifidad el linfocito B. Este prolifera y algunas se quedarn como clulas memoria, pero otras se convierten en clulas plasmticas que proliferan y sintetizan anticuerpos. ii) Linfocito B T-dependiente.El antgeno es procesado en la clula b y se integra (se digiere parcialmente). Una vez dentro se une a protenas del complejo mayor de histocompatibilidad (esto permite que el organismo no las reconozca como antgenos para que el sistema inmunolgico las respete). Son presentadas en la superficie de los linfocitos B. En ese momento, un linfocito T especfico que reconoce el antgeno presentado se une. Esta unin hace que ambas clulas se estimulen. Los B forman anticuerpos (cl. plasmtica) y el T comienza a proliferar para ayudar en la reaccin. iii) Linfocitos B T-independientes (Ag polisacridos). No necesitan la intervencin de linfocitos T. Estos linfocitos forman especialmente igM. iv) Mediada por clulas: Intervienen linfocitos T ayudantes o TH. EL macrfago (presentador de antgenos, junto con las clulas dendrticas) captura el antgeno, lo procesa y partes de estos los presenta a los linfocitos TH . Que libera citocinas que estimulan a las clulas TH a proliferar. v) Los linfocitos T citotxicos, lo que hacen es eliminar las clulas que son infectadas evitando la propagacin. Con la unin el linfocito T citotxico induce la apoptosis de la clula. Con perforinas genera unos agujeros en las membranas por las que introduce grazninas que destruyen la clula por dentro. Los linfocitos T citotxicos tambin acaban con las clulas cancerosas.

Ac monoclonales. Se inyecta el antgeno a un organismo. En el organismo se seleccionan unos linfocitos correspondientes al antgeno. Se extrae el bazo y se hace un cultivo selectivo para hbridos entre los linfocitos B extrados del bazo y linfocitos cancerosos (los primeros mueren rpido y los segundos no tienen capacidad para generar anticuerpos) y obtenemos as clulas inmortales que pueden generar anticuerpos.