Aislamiento de Hongos y Levaduras
Aislamiento de Hongos y Levaduras
Aislamiento de Hongos y Levaduras
DE MOHOS Y LEVADURAS EN
ALIMENTOS
Conocer las tcnicas ms comunes para la cuenta
de mohos y levaduras en alimentos, se observaran
adems
las
caractersticas
morfolgicas
y
fisiolgicas de los mohos que
comnmente contaminan a los alimentos.
HONGOS
LEVADURAS:
Hongos
unicelulares
esfricos u
ovoides.
-
MOHOS:
Hongos
pluricelulares
filamentosos.
Eucariotas
hetertrofos
Algunos son dimrficos
Ausencia de movilidad
Reproduccin sexual y asexual
Importantes en la industria y la medicina
La mayora son Aerobios
Muchos son Anaerobios facultativos (Levaduras)
Condiciones optimas:
- acidez, [sales y azucares]
- Temperaturas, [nutrientes]
LEVADURAS
-
Saccharomyces cerevisiae
MOHOS
-
Aspecto aterciopelado
MEDIOS DE CULTIVO
-
MEDIOS DE CULTIVO
- Azul de metileno:
Utilizado para la tincin
-MEDIO WICKERHAM:
Es utilizado para el aislamiento de levaduras, puede ser adicionado con agentes
selectivos
Agar bacteriolgico
15 g/L
Fuente de N y a.a.
Extracto de levadura 3 g/L
Fuente de Vitaminas
Extracto de malta
3 g/L
C, Protenas y Nutrientes
Dextrosa
10 g/L
Fuente de energa
Agar
20 g/L
Agente solidificante
Peptona
5 g/L
Nutrientes para rpido crecimiento
- Rafinosa:
La rafinosa es selectiva para una genero de levaduras
- Malta:
Deteccin y aislamiento de levaduras
PROCEDIMIENTO
CUENTA DE MOHOS Y LEVADURAS
Inicio
Preparar las soluciones decimales de la muestra
Sembrar sobre superficie (con varilla doblada) 0.1 ml de cada dilucin
(5x2) en placas de PDA.
Incubar las placas entre 25-30 C durante 2 a 5
Das
Sacar las cajas de incubacin y contar las colonias caractersticas de
mohos y levaduras.
Fin
PROCEDIMIENTO
Inicio
Cortar cada colonia caractersticas de mohos con un bistur.
Separar el agar con la colonia procurando no daarla.
Colocar estos fragmentos en portaobjetos limpios.
Observar morfologa miceliar area en microscopio de diseccin.
Transferir parte del micelio a otro portaobjeto y observarlo
en microscopio ptico
Dibujar las estructuras observadas y compararlas con bibliografa
Fin
PROCEDIMIENTO
OBSERVACIONES DE LAS CARACTERISTICAS DE LEVADURAS
Inicio
Preparar frotis de las colonias de levaduras, teirlas con azul de
metileno al 0.5 % durante 1 min y lavar con agua destilada.
Sembrar en tubos
(16x150mm) con medio
Incubar a
Wickerham y campana
25-30C
de Durham adicionado
durante 2 a
con rafinosa
8 dias.
Observar pelicula
Observar gas
superficial
y turbidez
Sembrar en
tubos (25x150mm)
con 10 mL de
caldo de
extracto de
malta esteril
Fin