Este documento presenta información sobre la biodiversidad de procariotas, protistas y hongos. Introduce los objetivos de identificar las características y estructuras distintivas de estos grupos taxonómicos, así como su importancia biológica y económica. Explica que los estudiantes observarán muestras de estos organismos para aprender a reconocerlos. Incluye detalles sobre las características de procariotas como las bacterias y arqueas, con énfasis en la tinción de Gram para distinguir entre bacterias.
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Este documento presenta información sobre la biodiversidad de procariotas, protistas y hongos. Introduce los objetivos de identificar las características y estructuras distintivas de estos grupos taxonómicos, así como su importancia biológica y económica. Explica que los estudiantes observarán muestras de estos organismos para aprender a reconocerlos. Incluye detalles sobre las características de procariotas como las bacterias y arqueas, con énfasis en la tinción de Gram para distinguir entre bacterias.
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Este documento presenta información sobre la biodiversidad de procariotas, protistas y hongos. Introduce los objetivos de identificar las características y estructuras distintivas de estos grupos taxonómicos, así como su importancia biológica y económica. Explica que los estudiantes observarán muestras de estos organismos para aprender a reconocerlos. Incluye detalles sobre las características de procariotas como las bacterias y arqueas, con énfasis en la tinción de Gram para distinguir entre bacterias.
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UNIVERSIDAD DE COSTA RICA
1 Prctica#9 INTRODUCCIN A LA BIODIVERSIDAD: PROCARIOTES, PROTISTAS Y HONGOS I. Objetivos * Estudiarla diversidad de formas de vida de los principales grupos taxonmicos. * Identificar las principales estructuras y caractersticas de los grupos taxonmicos expuestos. * Conocer la importancia biolgica, econmica y de salud de los principales grupos taxonmicos estudiados. II. Introduccin
Este laboratorio marca el inicio en el estudio de la biodiversidad. La diversidad biolgica o biodiversidad se define como la variedad de seres vivos que existen, producto de las diferentes fuerzas evolutivas que actan sobre ellos. Se incluye tambin dentro de este concepto, la diversidad gentica que los seres vivos presentan. Al final de esta serie de prcticas, se esperaque el estudiante adquiera una visin amplia de la enorme variabilidad de especies que se han generado producto de la seleccin natural. Una de las amenazas ms inmediatas de la prdida de biodiversidad es la disminucin drstica del acervo gentico. Esta disminucin de la variabilidad gentica tiene muchas consecuencias negativas que atentan contra la sobrevivencia de las especies y afectan tambin al ser humano, ya que depende de la biodiversidad como fuente de materia prima para medicinas, fibras, tintes, resinas y otros. En un pas tropical y rico en biodiversidad como Costa Rica, estudiar y proteger la biodiversidad es de vital importancia ante la amenaza constante que sufre en los ltimos aos: descontrolado desarrollo inmobiliario costero, la proliferacin de proyectos de marinas, uso irracional de los agroqumicos, auge de la explotacin minera, entre otros. El conocimiento integral de nuestra biodiversidad permite mejorar la relacin ser humano-ambiente, la conservacin y el uso sostenible de los recursos ambientales, as como una mejor calidad del ambiente En las siguientes prcticas de diversidad de los organismos vivos, se observarn algunos ejemplos de los grupos principales de organismos, aprender sus caractersticas distintivas, y un poco de su historia natural. Muchas veces, los niveles superiores de la clasificacin biolgica, como reinos y clases, no reflejan la filogenia de los organismos que incluyen. A menudo, son grupos que fueron establecidos hace mucho tiempo, y se sabe que son incorrectos. Sin embargo, se contina su uso por convencin. Recuerde esto al estudiar protistas y hongos, por ejemplo.
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 2 III. Procedimiento El principal objetivo de ste laboratorio es a aprender a identificar y caracterizar representantes de procariotas, protistas y virus, a partir de las caractersticas diagnsticas que presentan. Algunas especies estn representadas por lminas preparadas que usted debe observar al microscopio, otros sern organismos vivos o preservados los cuales deber manipular con cuidado para identificar sus caractersticas distintivas y relacionarlas con el grupo al que pertenece. Para lograr este objetivo el grupo de laboratorio ser dividido en 8-10 subgrupos de trabajo conformados por 3-4 estudiantes cada uno Cada grupo de trabajo estudiar y analizar el material disponible . Ejercicio 1.- PROCARIOTES Las ARQUEBACTERIAS y BACTERIAS son procariontes. Su ADN no est asociado a protenas, y no tienen ncleo ni organelas delimitados por membranas. La divisin celular ocurre por fisin binaria. La variabilidad gentica la obtienen de ciertos procesos parasexuales como la conjugacin o transformacin bacteriana. Hay procariontes hetertrofos y auttrofos, estos ltimos pueden ser quimiosintticos o fotosintticos (cianobacterias). Las bacterias quimiosintticas y fotosintticas usan una variedad de sustancias (por ejemplo, H 2 S) como donante de electrones. Su fotosntesis es anaerbica, pues no producen oxgeno como producto de desecho. Los procariontes se encuentran distribuidos en dos dominios biolgicos: el dominio Archaea, en el cual se encuentran las arquebacterias, y el dominio Bacteria (a) Dominio Eubacteria Las bacterias se pueden clasificar de varias formas: morfolgicamente (bacilos, cocos, espirilos y vibriones), presencia de flagelos (montricas, loftricas, anftricas y pertricas), de acuerdo al medio en que crecen (halfilos, metangenas, termo-acidfilas), entre otros. Los mtodos de identificacin de bacterias incluyen una serie de pruebas fsicas y bioqumicas de separacin que incluye la realizacin de cultivos a partir de muestras obtenidas para anlisis. Con la utilizacin de tcnicas de biologa molecular, ha sido posible clasificar bacterias en base a las similitudes en la secuencia de ADN.
Una de las principales pruebas que se utiliza es la Tincin de Gram. La tincin de GRAM, desarrollada por el microbilogo dans Hanz Christian Gram,es un mtodo emprico que se basa en la tincin diferencial de diversas especies de bacterias en presencia del colorante violeta de genciana, debido a las diferencias en complejidad y composicin qumica de la pared celular de las bacterias. Las bactarias Gram+ poseen una pared celular de peptidoglicano gruesa como estructura fundamental mientras las Gram posee paredes celulares ms delgadas, a dems de una membrana externa de lipopolisacridos-lipoprotenas. Gram+ Gram-
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 3 Los cristales de violeta de genciana son lo suficientemente pequeos como para penetrar a travs de la matriz de la pared en ambos tipos de bacterias pero al formarse el complejo yodo-violeta (colorante primario) no puede ser removido con un agente decolorante (alcohol-acetona) y las clulas permanecen de color azul violeta, en cambio las bacterias Gram-, al decolorarse, no retienen el colorante y pueden ser reconocidas por el colorante diferencial (safranina) Para la interpretacin de los resultados de la tincin de Gram se debe tomar en consideracin las caractersticas de la tincin, tamao y forma celular, que pueden ser afectadas por muchas variables, incluyendo; edad del cultivo, medio, atmosfera de incubacin, metodo de coloracin y la presencia de sustancias inhibitorias. 1. Observe las lminas disponibles de cocos, bacilos y espirilos. Haga un esquema de sus observaciones. Anote la magnificacin que us. 2. Su instructor le dar una breve demostracin del procedimiento de Tincin de Gram a seguir. Fijacin 1. En un portaobjetos colocar una gota de agua destilada 2. Con un asa previamente esterilizada con la llama del mechero, coloque sobre la gota de agua una pequea cantidad de cultivo de bacterias. 3. Dispersar el material con el asa sobre la gota de agua. 4. Pasar rpida y varias veces el portaobjetos sobre la llama. No deje el portaobjetos sobre la llama porque se puede quebrar. 5. Dejar enfriar. Coloracin Este paso debe ser realizado con mucho cuidado y sobre una bandeja para evitar manchar el mesn de trabajo con colorante 1. Despus de enfriar, colocar una o dos gotas de violeta genciana sobre la preparacin en el portaobjetos y djelo 2-3 minutos. 2. Despus de este tiempo decantar el colorante cuidadosamente sobre papel absorbente. 3. Lavar rpidamente el portaobjetos con agua destilada para eliminar el exceso de colorante.En este punto, todas las clulas se observarn de color prpura Mordente 1. Poner una-o dos gotas de solucin lugol sobre la preparacin y dejar por un minuto. 2. Decantar el exceso de lugol y lavar con agua destilada Decoloracin 1. Lavar con alcohol-acetona hasta eliminar el color violeta. Las bacterias Gram + permanecern prpura y las Gram no retendrn ninguna coloracin. 2. Lavar rpidamente con agua destilada. Tincin diferencial 1. Coloque una gota de safranina y djelo por 15 segundos. 2. Decante el exceso de tintura y lvelo rpidamente con agua destilada. 3. Deje secar la preparacin al aire o cuidadosamente con un papel. La tincin diferencial colorea tanto las gram como gram +. Sin embargo, la presencia de la coloracin prpura en las gram + no se altera por la presencia de safranina
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Cuando la preparacin est completamente seca, aadir una gota de aceite de inmersin y observarla al microscopio con el objetivo de inmersin (100 x), no use cubreobjetos. 3. Observe detenidamente su preparacin y haga una descripcin detallada de sus observaciones 4. Cuando termine de observar las bacterias se debe limpiar el lente con papel para microscopio.
Cianobacterias Son procariontes fotosintticos que poseen clorofila y tienen un tipo especial de fotosntesis que es similar a la de las plantas. Son bacterias que tienen la capacidad de fijar nitrgeno en forma de nitrato (NO 3 ) y juegan un papel importante en la fertilizacin de suelos y aguas. Muchas cianobacterias forman asociaciones con hongos, llamadas lquenes. Contienen diversas sustancias de reserva como el almidn de cianofcea (entre los tilacoides), la cianoficina y la volantina que es una nucleoprotena con fosfatos para reserva energtica. Una caracterstica nica en ellas es que poseen una pared celular con 4 capas y una envoltura en forma de vaina gelatinosa. Los pigmentos que poseen son clorofila a, y pigmentos accesorio como -caroteno, ficocianina, y ficoeritrina. A las cianobacterias se les conoce tambin con el nombre de algas azul-verdosas [Pero este nombre es incorrecto, porque las algas son eucariticas]. Algunas de ellas, forman colonias que pueden verse a simple vista. Por ejemplo, tal vez usted haya observado una masa verde gelatinosa que suelen formarse en las piedras de los ros, o en los caos de la calle. Algunos gneros muy comunes en agua dulce y en caos son Nostoc, Anabaena y Oscillatoria. Dado que estas especies pueden presentar reproduccin explosiva en aguas contaminadas, pueden servir como organismos para monitorear la contaminacin del agua. Algunas especies poseen vacuolas gaseosas que les permiten flotar en el agua y forman natas en la superficie de estanques y charcos. Ciertas especies producen sustancias txicas que liberan en el agua y pueden causar problemas en el suministro del agua potable. 1. Haga observaciones de las lminas fijas disponibles de cianobacterias. Observe los heterocistes, que se observan como abultamientos en las cianobacterias filamentosas Para qu sirven? 2. Si lo hubiera, observe el material disponible en vivo. Trate de observar el color, A qu se debe el color que presenta el organismo? Ejercicio 2 - EUCARIOTES Dominio Eukarya Los organismos que usted estudiar de ahora en adelante son eucariontes. La caracterstica principal de las clulas eucariotas es la presencia de un ncleo y otros organelos (mitocondria, cloroplastos) rodeados de membrana, y mltiples cromosomas los cuales forman junto con el ADN y protenas un complejo llamado Aplicacin de Aplicacin de Decoloracin Coloracin con Violeta de Genciana Ioduro (alcohol-acetona) Safranina
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 5 cromatina. Las clulas eucariotas son caractersticas tanto de los protistas como de organismos multicelulares ms completos que se encuentran en los otros 3 reinos de eucariotas: hongos, animales y plantas. La reproduccin sexual tambin es caracterstica de los eucariotas Estudie y anote las diferencias entre procariotas y eucariotas. (a) Reino protista El reino de los protista constituye una coleccin diversa y compleja de linajes evolutivos. Se puede definir a los protistas como organismos eucariotas que poseen organizacin, unicelular, colonial, filamentosa o multicelular, y que poseen distintas formas de nutricin, locomocin, reproduccin. Historicamente, los protistas fueron agrupados en base a la presencia de caractersticas comunes con grupos de animales, plantas u hongos. Luego se fueron incorporando, organismos eucariotes que no era posible clasificarlos en ninguno de los otros 3 reinos de eucariotas (por exclusin).Posteriormente, y como resultado de investigaciones ms recientes, se determin que algunas especies de protistas que se habian agrupado en base a caractersticas comunes, realmente pertenecian a linajes evolutivos independientes que divergieron muy temprano en la historia de los eucariotas. As, grupos de protistas con pocas carctersticas comunes, en realidad comparten un ancestro comn. Los nombre de muchos de los grupos de protistas y sus gneros ha sufrido tantos cambios que el esquema de clasificacin parece incierto, confuso y dista mucho de estar completo. Sin embargo, los bilogos han desarrollado mltiples maneras de clasificar a los protistas, incluyendo nuevos nombres para los taxones principales. As mismo, dado el origen de este reino, no es fcil establecer un cuadro de caractersticas generales; sin embargo podemos mencionar algunas caractersticas que comparten representantes de cada grupo En general, los miembros del grupo de los METAMONADINOS (= EXCAVADOS, incluye diplomonados y parabaslidos) tienen flagelos, son hetertrofos y no tienen mitocondria cloroplastos ni sistema de Golgi. Se postula que son parecidos a los eucariontes ancestrales que perdieron las mitocondrias. Su principal caracterstica derivada es la posesin de uno o dos ncleos rodeados por un sistema de microtbulos asociados con dos pares de flagelos. Son parsitos patgenos, de vida libre o simbiontes. Se reproducen asexualmente. En el grupo de los EUGLENOZOOS (tambien llamados discicristados), agrupa organismos unicelulares flagelados, con nutricin fotoauttrofos o hetertrofos (euglnidos, kinetoplastdios). La Euglena, por ejemplo, es de vida libre (muy comunes en el agua dulce), posee cloroplastos (clorofila a y b, xantfilos y - carotenos) y granos de una sustancia similar al almidn llamada paramilo. Una caracterstica representativa en ste grupo es la presencia de una mancha ocular que le sirve al organismo para guiarse hacia los sitios mejor iluminados para realizar la fotosntesis. Los cinetoplstidos son en su mayora parsitos. Tienen una sola gran mitocondria tubular que contiene ADN y protenas asociadas dentro de estructuras denominadas cinetoplastos. Tienen uno o ms flagelos. Se multiplican en forma asexual por fisin binaria (mitosis y
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 6 citocinesis) y, en algunas formas, sexualmente por singamia. En este grupo se encuentran las especies que producen la leishmaniasis, la enfermedad del sueo y la enfermedad de Chagas en los humanos. La principal caracterstica de todos los representantes del grupo de los RIZOPODOS (= AMEBOZOARIOS), es la presencia de prolongaciones citoplasmticas (pseudpodos) que surgieron por evolucin convergente en varios grupos. En general, habitan el suelo, agua dulce, ocanos y otros organismos. Poseen una vacuola pulstil, otra nutritiva y algunos producen flagelos durante estadios determinados de su ciclo vital o en condiciones ambientales particulares. La reproduccin es asexual y sexual. Algunos son parsitos de los humanos. Dentro de este grupo, se encuentran especies de gran importancia mdica como la Entamoeba histolytica responsable de la disentera amebiana y de algunos casos de encefalitis amebiana. Dentro del grupo de los rizopodos se ubicaban anteriormente los mohos mucilaginosos. Mas recientemente se propone como un grupo aparte (MICETOZOARIOS) cuya caracterstica derivada ms importante es la presencia de mitocondrias tubulares con crestas ramificadas. Presentan variados colores y se subdividen en plasmodiales (mixomicetos) y celulares (acrasiomicetos). Los mohos plasmodiales son cenocticos. Forman esporangios donde ocurre la meiosis y luego esporas que producen clulas haploides flageladas. stas pueden producir ms clulas flageladas, fusionarse entre s y formar un cigoto o, si las condiciones son desfavorables, formar un quiste. La fase vegetativa de los mohos plasmodiales forma masas multinucleadas de citoplasma (plasmodio) que se trasladan entre el humus y troncos hmedos en descomposicin, y a medida que avanzan se van alimentando de bacterias, levaduras, y materia orgnica en descomposicin. Los mohos celulares no tienen clulas flageladas. Pasan por una etapa en la que constituyen un enjambre de pequeas clulas ameboides, haploides y libres, pero reunidas en un pseudoplasmodio cuyos componentes no se fusionan. La reproduccin sexual tiene lugar por la fusin de dos clulas que forman un cigoto y ste por meiosis genera nuevas clulas haploides. A diferencia de los amebozoos, los CERCOZOOS (foraminferos y actinpodos) y RADIOLARIOS agrupan organismos fundamentalmente marinos cuyos pseudpodos son delgados y se prolongan a travs una cubierta externa dura (teca) de carbonato de calcio o slica (radiolarios). Entre las caractersticas que agrupan a los ALVEOLADOS (ciliados, apicomplexa, dinoflagelados) lo ms resaltante es la presencia de vesculas aplanadas localizadas justo debajo de la membrana plasmtica que almacena calcio y las semejanzas en las secuencias de ADNr. En este grupo se incluyen organismos parsitos (apicomplexa), depredadores y otros son fotosintticos (dinoflagelados). Dentro de los ciliados encontramos organismos unicelulares acuticos que poseen mltiples especializaciones tales como cilios que cubren la superficie del organismo, utilizados fundamentalmente para la locomocin y alimentacin. Poseen dos tipos de ncleo, un macroncleo para las funciones vegetativas y un microncleo involucrado en la reproduccin sexual por medio de conjugacin. Todos son hetertrofos y solo el gnero Balantidium se ha reportado como parsito intestinal. Los apicomplexos son todos organismos parsitos que forman esporas, algunos de los cuales causan enfermedades al humano. Carecen de aparato especfico de locomocin y en su lugar se desplazan por flexin. Dentro de este grupo se encuentran especies de importancia mdica como el Plasmodium vivax responsable de la mayora de casos de malaria en Costa Rica y el Toxoplasma gondii, que produce la toxoplasmosis. Los dinoflagelados son protistas fotosintticos con 2 flagelos que van en surcos. Cada uno se mueve en su canal y hacen que la clula gire sobre s misma al moverse por el agua. La mayora son fotosintticos con clorofila a y c, adems de carotenoides, incluyendo fucoxantinas. Son casi todos marinos formando parte del plancton y algunos de ellos como Symbiodinium forman endosimbiosis con los corales (zooxantelas).
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 7 Algunos presentan bioluminiscencia. A veces, bajo ciertas condiciones, pueden reproducirse explosivamente (fundamentalmente asexual) y formar las mareas rojas. Los dinoflagelados poseen varios tipos de sustancias que resultan altamente txicas para los vertebrados, por ello es peligroso ingerir moluscos filtradores y ciertos otros organismos que consumen a los dinoflagelados cuando se dan las mareas rojas. Finalmente, el grupo de los ESTRAMINPILOS (= heterocontos, cromistas incluye algas pardas, mohos acuticos y diatomeas) surge a partir de estudios a nivel molecular que confirmaron la relacin existente entre las algas pardas y algas doradas con protistas no algas como los mohos acuticos. En este grupo se incluye tambin a las diatomeas. A primera vista pareciera que no poseen caractersticas en comn, pero fundamentalmente agrupa a organismos que poseen clulas mviles con dos flagelos, uno de ellos con proyecciones finas a modo de pelos (en algunos estraminpilos, los flagelos se presentan slo en ciertas etapas del ciclo de vida). Los mohos acuticos forman un pequeo grupo de protistas que forman micelios (similar a los hongos) cenocticos sobre materia orgnica, con pared celular compuesta de celulosa (como en plantas), quitina (como en hongos) o ambas. Algas Las algas (la mayora clasificadas anteriormente dentro del reino Cromophyta) son en realidad un grupo artificial de organismos, es decir, contienen muchos organismos no emparentados entre s. Tienen en comn el ser simples, generalmente acuticos, fotosintticos con pigmentos, con gametos que generalmente se liberan en el agua. En todo lo dems son muy variables. En este grupo artificial encontramos protistas como las diatomeas (Bacillariophyceae) algas amarillas (Xanthophyceae), algas doradas (Chrysophyceae), algas pardas (Phaeophyceae). Por el contrario, las algas rojas (Rhodophyceae) y algas verdes (Chlorophyceae) se encuentran ubicadas dentro del reino de las plantas. Las diatomeas son algas principalmente unicelulares acuticas. Tienen clorofila a y c, y fucoxantina. Almacenan el alimento en forma de aceite. Sus paredes celulares contienen compuestos de slice (y no celulosa) y forman dos tapas o valvas ornamentadas que calzan una sobre otra. Los ornamentos son poros que conectan el protoplasma (interior de la clula) con el exterior. Existen dos rdenes que corresponden con dos tipos morfolgicos de diatomeas: redondeadas como una moneda, del orden Centrales (simetra radila)y las que son alargadas como una pluma, que son el orden Pennales (simetra bilateral) presentan reproduccin sexual y reproduccin asexual Las algas rojas (Rhodophytas) son protistas que forman estructuras multicelulares. Tienen clorofila a, clorofila d, carotenoides y ficobilinas (que les dan su color distintivo). Almacenan el alimento en forma de un tipo especial de almidn, llamado almidn de floridea. Carecen de formas flageladas en su ciclo de vida. La mayora de las especies de algas marinas son algas rojas, y hay algunas algas rojas de agua dulce. Existen dos grandes grupos de algas rojas: las talosas y las incrustantes. Las algas rojas incrustantes forman estructuras muy rgidas con carbonato de calcio que pueden ser parecidas a pequeos corales o a una costra entre rojiza y rosada sobre las rocas del arrecife. El otro grupo son algas filamentosas parecidas a otros grupos de algas pero que se pueden diferenciar por su consistencia similar a cartlago o plstico al tacto. Son muy importantes porque producen gran porcentaje de la arena en las playas. De ellas se obtienen carragenina y agar. El gnero Porphyra se utiliza para hacer el sushi. Las algas pardas (Phaeophytas) son multicelulares y contienen clorofila a y c y fucoxantina, igual que las diatomeas. Almacenan el alimento en forma del polisacrido laminarina, y a veces como aceite. Sus paredes celulares contienen celulosa. A menudo son grandes, y las gigantes llegan a tener hasta 60 metros de largo (lo que representa el crecimiento de slo l ao).
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 8 Algas relacionadas con las plantas terrestres Se ha propuesto que las algas verdes, en realidad constituyen un grupo ms de plantas, es decir que deben ser incluidas en el reino Plantae. Algunos gneros como Chara y Nitella, poseen estructuras similares a flores as como nudos y entrenudos caractersticos de la plantas. Las algas verdes son el grupo ms diverso de algas. Hay especies unicelulares y multicelulares (incluso formas coloniales y filamentosas). La mayora viven en agua dulce. Algunas algas verdes son flageladas, o poseen algn tipo de zospora, con 2 flagelos iguales. Muchas son de tamao microscpico, pero algunas llegan a tener hasta 8 metros de largo. Contienen clorofila a y b como las plantas, adems caroteno y xantfilos. Viven en aguas poco profundas. Almacencan almidn (como las plantas) y grasa. Importancia de las algas Las algas estn presentes en practicamente todos los ecosistemas de la bisfera y juegan un papel importante y fundamental en la composicin de la atmsfera que respiramos y el ciclo global del carbono. En simbiosis con otros organismos, permiten el funcionamiento de ecosistemas complejos como los arrecifes de coral. As mismo, son un componente indispensable de los lquenes, organismos colonizadores por excelencia de la roca desnuda y de ambientes extremos. Por otra parte, contribuyen de manera decisiva al mantenimiento y productividad de la cadena trfica en ambientes marinos y dulceacucolas. Son de vital importancia en el fitoplancton, donde contituyen menos del 1% de la biomasa fotosintetizadora de la Tierra, sin embargo, son responsables de mas del 45% del total de la produccin primaria neta del planeta. En la zona litoral, las algas mantienen importantes ecosistemas en los que viven y se alimentan numerosos peces y mamferos. Desde un punto de vista comercial, algunas microalgas se cultivan en fitorreactores para producir suplementos alimenticios y cosmticos, se emplean en los procesos de depuracin de aguas residuales y de desechos industriales. Diversas macroalgas se consumen directamente (Porphyra, Laminaria, Undaria) y en otros casos, se obtienen agentes gelificantes de alto valor y amplio uso industrial (agar, agarosa). Clorofitas Faeofitas Rodofitas Crisofitas Euglenofitas Nombre comn Algas verdes Algas pardas Algas Rojas Diatomeas Euglenoides
Pigmentos presentes Clorofila a, b Fucoxantinas Ficobilinas Chlorofila a,c Xantofilas Clorofila a,b Organization celular Unicelular Colonia filamentosa Filamentosa Unicelular
Unicelular
Movimiento Ssil & motil Ssil Ssil Motil Motil Ejemplos(s) Chlamydomonas Cladophora Volvox Quelpos Fucus Polysiphonia Porphyra Diatomeas Euglena 1. Observe todos los especmenes que se encuentran en lminas fijas, vivientes o preservadas que se exponen en el laboratorio. 2. Compare cada organismo con la descripcin que se encuentra en el folleto u otro libro que tenga como referencia 3. Complete el cuadro comparativo del reporte con las principales caractersticas de cada grupo. (b) Reino Fungi Los hongos son organismos eucariotas unicelulares o que forman filamentos microscpicos, delgados, en forma de hilos llamados hifas. Crecen sobre o dentro del sustrato, en forma entretejida; similar a un algodn y es denominada micelio. Las hifas pueden ser sin divisiones internas (cenocticas) formadas de clulas
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 9 alargadas formando un protoplasma multinucleado. Existen tambin hifas con paredes transversales llamadas septos, con poros que permiten que el citoplasma fluya entre las clulas, distribuyendo los nutrientes. Las paredes celulares de los hongos presentan quitina (sustancia que se encuentra en los artrpodos). La reproduccin de los hongos puede ser sexual o asexual. Al igual que en algunos protistas, la fase diploide es menos conspicua y dependiendo del grupo al que pertenece el organismo, domina la fase haploide o dicaritica. La dispersin es a travs de esporas que se originan a partir de la mitosis (esporas asexuales) o por meiosis (esporas sexuales) puede ser flagelada o no. Los hongos no presentan plastidios ni pigmentos fotorreceptores y por ello no fabrican su alimento. Para sobrevivir digieren materia orgnica, pero a diferencia de los animales que lo hacen dentro de su cuerpo, los hongos liberan enzimas en el sustrato del que se alimentan y stas degradan la materia a formas ms simples y luego absorben estas sustancias. Por su capacidad de descomponer materia viva o muerta pueden actuar como parsitos, saprfitos, simbiontes y algunos pocos son depredadores. Debido a esto juegan un papel muy importante en la ecologa de los bosques; pero tambin pueden ocasionar problemas en cultivos, animales y en el hombre. Los principales grupos son Quitridiomicetes (nicos hongos con clulas reproductoras flageladas y mviles), Zigomicetes (hifas cenocticas), Ascomicetes y Basidiomicetes (hifas septadas), y Deuteromicetes, un grupo artificial que rene a los hongos sin fase sexual conocida. DIVISIN ZIGOMICETE Son organismos terrestres, la mayora saprfagos, algunos parsitos de animales; otros forman asociaciones micorrzicas. Todos se reproducen sexual y asexualmente. Como producto de la reproduccin sexual se produce la zigspora (espora diploide de paredes gruesas). Ejemplo, Rhizopus (moho negro del pan). Moho del pan y las frutas (Rhizopus sp) 1. Observe al estereoscopio el moho que cubre el pan y de las frutas. Identifique el micelio, estoln, hifas y esporangio 2. Con unas pinzas, tome una pequea parte del micelio y colquela en el portaobjetos con una gota de agua y cbrala con un cubreobjetos. 3. Observe el ciclo de vida del Rhizopus que se muestra en su reporta y localice las estructuras que se sealan en el diagrama y que son visible en su muestra DIVISIN ASCOMYCOTA: Estos hongos reciben este nombre ya que sus esporas sexuales se desarrollan dentro de unas mini estructuras similares a un saco, llamado asco. Las esporas all formadas se denominan ascsporas y el cuerpo reproductor en el que se producen se llama ascocarpo. Ejemplos de ascocarpos: tipo copa gnero Cookeina, tipo copa compuesta gnero Morchella (hongo comestible). Muchos ascomicetes forman lquenes y sus ascocarpos pueden verse en la superficie de los mismos. Algunos ascocarpos son cerrados y distintos como en los hongos dedos de muerto, o en algunos parsitos. A algunos ascomicetes no se les conoce una fase sexual y antes eran clasificados como deuteromycetes. Un ejemplo es Pennicillium hongo del cual se aisl la penicilina. Un tipo distinto de ascomicetes que forma sus ascos sin formar un ascocarpo y son unicelulares son las levaduras.
1. Tome una gota del cultivo de levadura y colquelo sobre un porta objetos. Usando un palillo, extiende bien el lquido, de manera que forme una fina pelcula.
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 10 2. Coloque encima el cubreobjetos y observe con el objetivo de mediano y mayor aumento. Usted podr observar clulas redondeadas generalmente aisladas y algunas unidas en corto nmero, formando cadenas de clulas que estn en divisin mediante un proceso llamado gemacin. Las clulas tienen pared celular, un citoplasma granuloso y una vacuola central al que est unido el ncleo. 3. Aada una gota de lugol, observar granulaciones de color pardo-rojizo en el citoplasma, que estn constituidas por glucgeno, sustancia semejante al almidn desde el punto de vista qumico. 4. Si hay disponibilidad, observe un ejemplar de Peziza o Cookeina. Haga un esquema de sus observaciones e identifique las ascas, esporas, hifas y micelio DIVISIN BASIDIOMICETE Organismos que producen sus esporas o basidisporas en una estructura microscpica denominada basidio. Su posicin en el basidio es externa. El cuerpo reproductor en el que se produce se llama basidiocarpo. El hongo entero es una especie de sombrilla que se llama vulgarmente seta y presenta coloraciones muy diversas. En la parte inferior del sombrero existe una especie de lminas transversales que se disponen como las hojas de un libro. Estas estructuras laminares que aparecen en la parte inferior del hongo, contienen esporas. A veces no son lminas sino poros. Cuando el hongo ha alcanzado su desarrollo o su madurez, las esporas se desprenden y son esparcidas por el viento. Si caen sobre un suelo que ofrezca buenas condiciones, germinan y emiten una especie de filamento y se desarrollar en un nuevo hongo. Ejemplos de hongos con basidiocarpo carnoso tipo sombrilla, Agaricus bisporus (hongo comestible = champin) y basidicarpo duro tipo oreja de palo, gnero Ganoderma, muy comunes en el bosque lluvioso tropical. 1. Observe y describa con cuidado cada uno de los ejemplares de hongos disponibles. 2. Haga un diagrama de sus observaciones e identifique las partes que componen el hongo 3. Despus, crtelo transversalmente de manera que observe la parte inferior del sombrero.
ASOCIACIONES SIMBITICAS Lquenes Liquen, es una asociacin simbitica entre algas verdes unicelulares o cianobacterias y un hongo (generalmente un ascomycete); por ello juntos forman un organismo compuesto. El alga simbionte, mediante la fotosntesis, produce alimento para ella y el hongo. El micelio del hongo da apoyo y proteccin al alga contra la deshidratacin.Las algas encontradas en lquenes pueden vivir libres, pero las especies de hongos que forman lquenes no pueden sobrevivir en la naturaleza sin el alga. Debido a esto, los lquenes se clasifican segn la especie del hongo (Ascomycete o Basidiomycete). Los lquenes absorben las sustancias del agua de lluvia. Por eso, son muy susceptibles a los compuestos txicos que haya en el ambiente y pueden ser usados como indicadores de la contaminacin del aire. Atendiendo a la morfologa de sus talos y a la manera de adherirse al sustrato se pueden distinguir 6 tipos de lquenes:
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 11 Fruticulosos. Unidos al sustrato por una superficie de fijacin reducida y con forma de pequeos arbustos. Pueden ser cilndricos, Usnea y Alectoria, o laciniados, Evernia, Ramalina y Cetraria. Foliceos. Se extienden sobre el sustrato, fijndose a l mediante un conjunto de ricinas, Xanthoria o Physcia, o por un solo punto Umbillicaria y Dermatocarpon. Escuamosos. Se caracterizan por estar formados por un conjunto de escamas cer- canas entre s y por presentar un borde no adherido al sustrato, Psora. Gelatinosos. Adquieren una textura cuando menos flexible y pulposa al encontrarse hmedos. En este estado pueden llegar a ser traslcidos. Filamentosos. Estn constituidos por una maraa de filamentos finos y de aspecto lanoso, Cystocoleus, Racodium. Crustceos. Son el grupo ms numeroso, agrupando a las partes de los lquenes que se conocen. Fuertemente adheridos al sustrato, son mayoritariamente saxcolas (viven sobre la roca), pero tambin hay especies cortcolas que viven sobre superficies leosas; folcolas que aparecen sobre hojas persistentes; ligncolas, sobre madera muerta; terrcolas, sobre la tierra desnuda y humcolas sobre el humus. Compuestos. Formados por dos tipos de talos: uno principal, generalmente crustceo o escuamoso y mas raramente foliceo, y otro secundario de tipo fruticuloso. 1. Examine el material suministrado por el instructor y de acuerdo a su morfologa y clasifquelo de acuerdo a estas categoras el liquen estudiado. Micorrizas Las micorrizas son una asociacin simbitica mutualista entre races de plantas superiores y ciertos grupos de hongos del suelo. Estos hongos dependen de la planta para el suministro de carbono, energa y de un nicho ecolgico, a la vez que entregan nutrimentos minerales (especialmente los poco mviles); adems, les imparten otros beneficios como: estimulacin de sustancias reguladoras de crecimiento, incremento de la tasa fotosinttica, ajustes osmticos cuando hay sequa, aumento de la fijacin de nitrgeno por bacterias simbiticas o asociativas, incremento de resistencia a plagas, tolerancia a estrs ambiental, mejoramiento de la agregacin del suelo y mediacin en muchas de las acciones e interacciones de la microflora y microfauna, que ocurren en el suelo, alrededor de las races.
Prohibida la reproduccin parcial o total de este manual UNIVERSIDAD DE COSTA RICA 12 Las micorrizas se han clasificado con base en su estructura, morfologa y modo de infeccin en dos tipos principales: ectomicorrizas y endomicorrizas. Se ha estimado que alrededor del 95% de las especies de plantas vasculares pertenecen a familias que son caractersticamente micorrcicas.