Estudo do perfil lipídico canino por idade e sexo

Estudio del perfil lipídico canino por edad y sexo José Henry Osorio1 / Yirli Johanna Suárez2 / Jorge Enrique Pérez3 Resumen Este trabajo se propone comparar el perfil lipídico en caninos criollos o sus cruces en el departamento de Caldas, Colombia, y analizar la correlación entre las cantidades lipídicas del suero de seis grupos. Se obtuvieron muestras de sangre de 156 caninos en estado de ayuno, diferenciados por sexo y edad (32 machos y 34 hembras menores de un año, y 42 machos adultos y 48 hembras mayores de un año); se determinaron triglicéridos, colesterol total y el colesterol de las lipoproteínas de alta densidad mediante el método enzimático colorimétrico. El colesterol de las lipoproteínas de muy baja densidad y de baja densidad se determinó usando las fórmulas de Friedewald. Las medias ± desviación estándar para colesterol total, triglicéridos y colesterol de las lipoproteínas de alta, muy baja y baja densidad en mg/dL fueron de: 214,91 ± 75,3; 50,01 ± 42,5; 133,73 ± 40,11; 10, 00 ± 8,51; 71,17 ± 57,12 respectivamente. Para el resto de los grupos, los triglicéridos, el colesterol VLDL y el colesterol LDL no fueron significativos (p ≥ 0,05). El colesterol HDL en los caninos jóvenes y adultos presentó un valor de 0,0377 en el valor p del test F, que mostró diferencia significativa (p < 0,05). En los resultados mostrados por los caninos jóvenes, especialmente los machos, se observa que estos presentan un colesterol total y un colesterol HDL más altos si se compara con los adultos. Palabras clave: lípidos, metabolismo, caninos, triglicéridos, colesterol. Study of Canine Lipid Profile According to Age and Sex Abstract 1 Laboratorio de Bioquímica Clínica y Patología Molecular, Departamento de Ciencias Básicas de la Salud, Universidad de Caldas, Manizales, Colombia.  [email protected] 2 Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Caldas, Manizales, Colombia.  [email protected] 3 Laboratorio de Microbiología, Departamento de Ciencias Básicas de la Salud, Universidad de Caldas, Manizales, Colombia.  [email protected] The purpose of this study is to compare the lipid profile in native-born canines or their crosses in the Colombian area of Caldas and to analyze the relationship between serum lipids levels of six groups. Samples of serum were collected from 156 canines, in fast state, differentiated by sex and age (32 male and 34 female under one year and 42 adult males and 48 adult females); levels of total cholesterol, triglycerides, and high density lipoprotein cholesterol were measured by enzymatic-colorimetric method; levels of very low-density lipoprotein cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol were determined using the Friedewald equation. Results: Mean ± standard deviation for total cholesterol, triglycerides and very low and low density lipoproteins cholesterol for native-born canines or their crosses in mg/dL were: 214.91±75.3; 50.01±42.5; 133.73±40.11; 10.00±8.51; 71.17±57.12; respectively. The P value for the F test lower to 0.05 (0.0379), shows statistically significant difference between the young and the adult males in the total cholesterol variable with a confidence level of 95 %; for the rest of the groups the triglycerides, the VLDL cholesterol and the LDL cholesterol the differences were not significant (p ≥ 0.05). The HDL cholesterol in young and adult canines had a value of 0.0377 in the P value of the F test demonstrating a relevant difference (p < 0.05). The results showed by the young canines particularly in males, demonstrate that those have higher total cholesterol and HDL cholesterol comparing with adults. Keywords: Lipids, metabolism, canines, triglycerides, cholesterol. Rev. Med. Vet. ISSN 0122-9354: N.º 23 enero-junio del 2012 páginas 65-72 Recibido: 30 de octubre del 2011. Aceptado: 17 de febrero del 2012 65 José Henry Osorio / Yirli Johanna Suárez / Jorge Enrique Pérez Estudo do perfil lipídico canino por idade e sexo Resumo Este trabalho propõe comparar o perfil lipídico em caninos crioulos e seus cruzamentos no departamento de Caldas, Colômbia, e analisar a correlação entre as quantidades lipídicas do soro de seis grupos. Foram obtidas amostras de sangue de 156 caninos em estado de jejum, diferenciados por sexo e idade (32 machos e 34 fêmeas menores de um ano, e 42 machos adultos e 48 fêmeas maiores de um ano); determinaram-se triglicérides, colesterol total e colesterol das lipoproteínas de alta densidade mediante o sistema enzimático colorimétrico. O colesterol das lipoproteínas de muito baixa densidade e de baixa densidade foi determinado usando as fórmulas de Friedewald. As médias ± desvio padrão para o colesterol total, triglicerídeos e colesterol das lipoproteínas de alta, muito baixa e baixa densidade em mg/ dL foram de: 214,91 ± 75,3; 50,01 ± 42,5; 133,73 ± 40,11; 10, 00 ± 8,51; 71,17 ± 57,12 respectivamente. Para o resto dos grupos, os triglicerídeos, o colesterol VLDL e o colesterol LDL não foram significativos (p ≥ 0,05). O colesterol HDL nos caninos jovens e adultos apresentou um valor de 0,0377 no valor p do teste F, que mostrou diferença significativa (p < 0,05). Nos resultados apresentados pelos caninos jovens, especialmente os machos, observa-se que estes apresentam um colesterol total e um colesterol HDL mais alto quando comparado com os adultos. Palavras chave: lipídios, metabolismo, caninos, triglicerídeos, colesterol. Introducción Los lípidos representan una importante fuente de reserva energética para los caninos y, en general, para todos los mamíferos, desempeñan funciones de protección frente al frío y los traumatismos, y ayudan a la formación de enzimas, hormonas y mensajeros (1). La fuente principal de colesterol y de triglicéridos procede de la dieta, aunque en ocasiones estos pueden ser sintetizados por el hígado y otros tejidos (2, 3). Las lipoproteínas se encargan del transporte de los lípidos en el plasma para su posterior metabolismo o almacenamiento (1, 4-6). Debido a que el metabolismo lipídico difiere entre especies, el canino es considerado como patrón HDL, que además se cree que influye en la protección para enfermedades coronarias que son tan comunes en los humanos (7-9). La digestión de las grasas empieza en la boca donde se producen una serie de estímulos que activan 66 enzimas, ya en el estómago los triglicéridos son transformados a ácidos grasos y diacilglicéridos; en el intestino, principalmente en el yeyuno, se da la emulsión con ayuda de las sales biliares para luego ir al enterocito, aquí el glicerol y los ácidos grasos libres son utilizados para sintetizar triglicéridos y estos últimos, junto con el colesterol, los fosfolipidos y las proteínas, forman los quilomicrones, los cuales se dirigen hacia los vasos linfáticos y de allí al conducto torácico para llegar a las carótidas y así entrar a la circulación sanguínea y finalmente ser absorbidos por el hígado y el tejido adiposo (10, 11). Existen muchas patologías asociadas al aumento de las concentraciones de los lípidos en el plasma, como son la diabetes mellitus, el hipotiroidismo, la pancreatitis y la obesidad, que son muy comunes en mascotas y, en ocasiones, sus causas son desconocidas por sus dueños (12, 13, 14). Rev. Med. Vet. ISSN 0122-9354: Bogotá (Colombia) N° 23: 65-72, enero-junio del 2012 Estudio del perfil lipídico canino por edad y sexo Materiales y método Se tomaron muestras de sangre de 156 caninos criollos o sus cruces, en estado de ayuno, diferenciados en 6 grupos, por género y edad (32 machos y 34 hembras menores de un año y 42 machos adultos y 48 hembras mayores de un año). Luego de centrifugarlas a 3500 rpm durante 15 min, se obtuvieron los sueros, y se conservaron a -30 °C hasta su análisis. Los niveles de colesterol total fueron determinados por medio del método enzimático colorimétrico, el colesterol HDL fue precipitado en presencia de ácido fosfotungístico y determinado mediante el método de colesterol total enzimáticocolorimétrico. Las determinaciones del colesterol LDL y colesterol VLDL se estimaron mediante la fórmula de Friedewald: VLDL-C= TG/5 y para LDL-C= CT-(HDL-C+VLDL) (15), teniendo en cuenta que este método ha sido validado en especies con patrón HDL como son los caninos, felinos, equinos, bovinos y ovinos (16). Se utilizaron los reactivos de la casa comercial BioSystems. Procedimiento: los sueros caninos y los reactivos se dejaron 10 min a temperatura ambiente para su descongelación, luego las muestras fueron homogeneizadas. Para la medición de TG, fueron pipeteados 10 µl de la muestra, se mezclaron con 1000 µl de reactivo de colesterol ref. 11506; luego de agitar bien, se llevó a baño María a 37 ºC por 5 min, y finalmente se hizo la lectura. El mismo procedimiento se realizó para la medición de CT a diferencia que el reactivo utilizado fue TG ref. 11529, y antes de medir se dejó a temperatura ambiente durante 15 min. Para el HDL-C fueron pipeteados 200 µl del suero de la muestra y mezclados con 500 µl de reactivo Col HDL ref. 11649; dicha mezcla, luego de ser homogeneizada, se dejó a temperatura ambiente durante 15 min, posteriormente se centrifugó a 4000 rpm por 15 min para luego ser pipeteados 100 µl de sobrenadante de cada muestra y este último se mezcló con 1000 µl de Col ref. 11506, después se deja a baño María a 37 ºC por 10 min para finalmente realizar su lectura. Análisis estadístico Los resultados fueron analizados por medio de Anova simple, se obtuvo el cálculo del promedio, la varianza, la desviación estándar y los rangos mínimo y máximo para la cuantificación de CT, TG, HDL, LDL Y VLDL en cada uno de los seis grupos determinados (hembras jóvenes frente a machos jóvenes, hembras adultas frente a machos adultos, hembras jóvenes frente a hembras adultas, machos jóvenes frente a machos adultos, hembras frente a machos y jóvenes frente a adultos). Se evaluaron las diferencias sobre los distintos grupos por medio de un análisis de varianza usando el programa Statgraphics Plus 5.1; se aceptaba diferencia estadísticamente significativa cuando p < 0,05. Resultados Los valores obtenidos de la media ± desviación estándar expresados en mg/dl para el colesterol de forma general fueron de 214,91 ± 75,3; para triglicéridos de 50,01 ± 42,5; col-HDL 133,73 ± 40,11; col-VLDL 10, 00 ± 8,51; col-LDL 71,17 ± 57,12. Los valores reportados (mg/dl) para cada grupo se encuentran en la tabla 1. Al hacer las comparaciones entre los seis grupos (hembras frente a machos, jóvenes frente a adultos, hembras adultas frente a machos adultos, hembras jóvenes frente a macho jóvenes; machos jóvenes frente a machos adultos, y hembras jóvenes frente a hembras adultas) con los diferentes datos se encontró que en los machos jóvenes y los machos adultos la variable colesterol total presenta diferencia estadística significativa con un nivel de confianza del 95,0%, ya que el p-valor del test F es inferior a 0,05 (p = 0,0379), siendo más alto en los machos jóvenes (tabla 1). Para el resto de los grupos no se encontró diferencia estadística significativa puesto que el p-valor del test F es superior o igual a 0,05. Rev. Med. Vet. ISSN 0122-9354: Bogotá (Colombia) N° 23: 65-72, enero-junio del 2012 67 José Henry Osorio / Yirli Johanna Suárez / Jorge Enrique Pérez Tabla 1. Comparación del perfil lipídico en caninos machos adultos frente a caninos machos jóvenes Parámetro Colesterol total * TAG C-HDL C-VLDL C-LDL * Machos jóvenes Media 234,207 Desv 66,104 138,17 48,529 42,931 144,699 34,594 9,706 8,586 79,803 59,146 Machos adultos Rang. Min Rang. Max Media 486,435 201,592 8,511 182,979 80,28 1,702 49,164 P-valor Co. -F 65,458 121,135 409,463 0,0379 4,47 50,453 4,255 280,851 0,9546 0,00 60,034 261,087 0,0984 2,8 Desv Rang. Min Rang. Max 232,365 129,619 41,01 36,595 9,833 10,09 0,851 56,17 0,9546 0,0 36,058 0,436 153,76 0,1167 2,52 4,616 318,149 62,14 Indica diferencia estadísticamente significativa con p < 0,05. Desv: desviación estándar; C-HDL: colesterol de lipoproteína de alta densidad; C-VLDL: colesterol de lipoproteína de muy baja densidad; C-LDL: colesterol de lipoproteína de baja densidad. Para las variables triglicéridos, colesterol VLDL y colesterol LDL no se encontró diferencia estadística significativa para ninguno de los 6 grupos, por lo tanto, el p-valor del test F es superior o igual a 0,05 (tablas 2 y 3); en cambio, para la variable colesterol HDL se encontró diferencia estadística significativa con un valor de 0,0377 (p < 0,05) en el grupo jóvenes y adultos con un nivel de confianza del 95,0% siendo más alto en caninos jóvenes (tabla 4), mientras que en los otros cinco grupos no hay diferencia estadísticamente significativa (p ≥ 0,05). Tabla 2. Comparación del perfil lipídico en caninos machos frente a caninos hembras Parámetro Colesterol total TG C-HDL C-VLDL C-LDL Machos Media Desv 215,696 67,282 48,89 136,14 Hembras Rang. Min Rang. Max Media Desv 214,195 82,281 P-valor Co.-F 626,498 0,9016 0,02 163,83 0,7553 0,10 242,724 0,4780 0,51 Rang. Min Rang. Max 121,135 486,435 116,779 47,037 4,255 280,851 51,025 38,277 6,383 38,851 60,034 261,087 131,558 41,336 52,971 9,778 9,407 0,851 56,1702 10,205 7,655 1,276 32,766 0,7553 0,10 69,778 47,889 0,436 318,149 72,432 64,603 8,147 460,331 0,7730 0,08 No hay diferencia estadísticamente significativa, p ≥ 0,05. Desv: desviación estándar; C-HDL: colesterol de lipoproteína de alta densidad; C-VLDL: colesterol de lipoproteína de muy baja densidad; C-LDL: colesterol de lipoproteína de baja densidad. Tabla 3. Comparación del perfil lipídico en caninos hembras jóvenes frente a caninos hembras adultas Parámetro Hembras jóvenes Media Desv Rang. Min Hembras adultas Rang.Max Media Desv 338,17 TG 51,675 36,276 6,383 143,617 50,565 40,006 6,383 81,457 242,724 126,637 41,859 52,971 28,7234 10,113 8,001 11,9168 207,787 79,037 C-HDL 138,507 40,169 10,335 7,255 C-LDL 63,107 42,191 1,2766 626,498 0,8366 0,04 163,83 0,8981 0,02 94,508 116,779 62,353 117,981 C-VLDL Co. -F Rang.Max Colesterol 211,948 total 215,787 P-valor Rang. Min 76,39 222,007 0,2021 1,65 1,2766 32,766 0,8981 0,02 8,1476 460,331 0,2740 1,21 No hay diferencia estadísticamente significativa, p ≥ 0,05. Desv: desviación estándar; C-HDL: colesterol de lipoproteína de alta densidad; C-VLDL: colesterol de lipoproteína de muy baja densidad; C-LDL: colesterol de lipoproteína de baja densidad. 68 Rev. Med. Vet. ISSN 0122-9354: Bogotá (Colombia) N° 23: 65-72, enero-junio del 2012 Estudio del perfil lipídico canino por edad y sexo Tabla 4. Comparación del perfil lipídico en caninos jóvenes frente a caninos adultos Jóvenes Parámetro Media Col - Total 222,741 TAG * Adultos 626,498 0,2672 1,24 280,851 0,9726 0,0 Rang. Max Media 64,68 117,981 486,435 209,163 82,106 116,779 6,383 182,979 49,911 44,926 4,255 261,087 0,0377 4,39 56,17 0,9726 0,0 0,9957 0,0 39,365 C-HDL * 141,509 37,412 C-VLDL 10,03 C-LDL 71,202 80,28 Rag. Min Co.‐F Rag. Min 50,15 Desv. P‐valor Desv. 242,724 128,028 41,259 52,971 7,873 1,2766 36,595 9,982 8,985 0,851 51,408 4,6166 318,149 71,152 61,257 Rang. Max 0,4364 460,331 Indica diferencia estadísticamente significativa con p < 0,05. Desv: desviación estándar; C-HDL: colesterol de lipoproteína de alta densidad; C-VLDL: colesterol de lipoproteína de muy baja densidad; C-LDL: colesterol de lipoproteína de baja densidad. Discusión En esta investigación, al comparar el perfil lipídico canino por sexo y edad, se encontró que los valores del colesterol total y colesterol-HDL son más altos, mientras que los valores de triglicéridos, colesterol-VLDL y colesterol-LDL son más bajos que los reportados por otros autores (5, 9, 17, 18). Esta diferencia entre los resultados se puede deber a la utilización de diferentes técnicas de laboratorio, al igual que a la diferencia entre raza, edad, sexo, nutrición, factores ambientales y variables fisiológicas (9). La comparación que se tiene entre caninos machos y hembras no arroja diferencia alguna entre sexos, al igual que otros estudios (5, 9), sin embargo, para otros autores es evidente que las concentraciones de colesterol total y colesterol HDL son más altas en hembras enteras que en machos enteros (14, 19). Al hacer la relación entre los caninos jóvenes con los adultos se encontró diferencia significativa para colesterol total y colesterol HDL entre este grupo, especialmente entre machos, donde los valores registrados por los jóvenes son más altos, estos mismos resultados fueron encontrados en otros estudios (5). Los animales adultos presentaron un colesterol total más bajo, siendo esta situación inversa a lo reportado en humanos ya que el colesterol total tiende aumentar con la edad; sin embargo, este mismo grupo de adultos presentó un HDL bajo, lo que resulta desfavorable por el riesgo de padecer enfermedades coronarias, especialmente infartos al miocardio (5). Para algunos autores, la edad no influyó significativamente en los valores de col-total, col-HDL ni col-LDL, no obstante, en otros trabajos se halló que al avanzar la edad de los perros las concentraciones de colesterol total y HDL disminuyen tanto en hembras como en machos alcanzando valores estables entre los 3 y 8 años de vida, y los valores mínimos en la senectud (9, 14). Existen reportes que muestran que cachorros menores de un año presentan niveles de col-LDL altos debido a que tienen inmaduros los receptores hepáticos para este colesterol, y por esto presentan menos actividad para esta lipoproteína (19), además que el colesterol puede disminuir con la madurez debido a las demandas de los tejidos cuando el animal está en crecimiento y desarrollo (20). En cuanto a los triglicéridos, estos no se ven afectados en ninguno de los grupos y tampoco por factores externos (la edad, el sexo, la raza y la dieta), pero sí hay que tenerlos en cuenta para interpretar los valores cuando se presente una hipercolesterolemia ya que tienden aumentar en dietas ricas en grasas (19, 21). Existen muchas variables que pueden contribuir a la alteración del perfil lipídico de los caninos y, en consecuencia, a un aumento de este; entre estas variables se encuentra la obesidad, Rev. Med. Vet. ISSN 0122-9354: Bogotá (Colombia) N° 23: 65-72, enero-junio del 2012 69 José Henry Osorio / Yirli Johanna Suárez / Jorge Enrique Pérez que se puede dar por numerosos factores, tanto ambientales como sociales, ya que la falta de ejercicio de los animales, la sobrealimentación o una dieta desequilibrada con una alimentación ad libitum de dietas ricas en grasa, la raza, la genética, la esterilización, medicamentos como los corticoesteroides y los progestágenos están relacionados como causantes de la obesidad (22). Por eso numerosos análisis identificaron que los perros obesos presentan un col-total, triglicéridos, col-VLDL, col-LDL, más alto que los caninos normales, mientras que el col-HDL es menor en los obesos presentándose una situación poco deseable por el riesgo de enfermedades cardiovasculares (5, 9, 22, 23). Por otra parte, se encontró que una modificación en la composición de la dieta, y un control en el consumo de energía mejoran las concentraciones de lípidos en estos animales produciendo así un beneficio (22, 23), ya que en el estudio los caninos alimentados con regímenes hipergrasos presentan valores altos de colesterol total, col-LDL y niveles bajos de col-HDL (9, 19-21). Otro factor que se encontró para contrarrestar estos riesgos antes mencionados es el aumento del ejercicio físico de los animales más sedentarios, ya que estudios revelan que los caninos menos activos presentan niveles significativamente altos de col-VLDL y col-LDL en comparación con animales que tienen una rutina de ejercicio o de trabajo (21). Asimismo, se deben tener en cuenta las razas, ya que animales como el collie y el border collie presentan niveles de col-total, col-LDL y col-HDL más altos si se comparan con caninos mixtos (23), otras razas que presentan este mismo comportamiento en sus lípidos son: basset, dachshunt, rottweiler, cocker, gran danés, perro de montaña de los pirineos, schnauzer miniatura, pastor shetland, labrador y dobermann (19). Las razas antes mencionadas también están predispuestas presentar signos de hiperlipidemia (14, 24, 25), donde se encuentran patológicamente niveles aumentados de colesterol total y col-LDL, y más si 70 los animales padecen enfermedades como la diabetes mellitus, hipotiroidismo, pancreatitis, hiperadrenocorticismo y obesidad (9, 23). Conclusiones Este estudio realizado a los diferentes caninos que pertenecen a la región de Caldas, Colombia, ha demostrado que las variables de colesterol HDL y triglicéridos son más altas y, a su vez, el colesterol VLDL y el colesterol LDL son más bajos que los encontrados en otras investigaciones tanto a nivel nacional como internacional. Probablemente esta diferencia se deba a la existencia de eventualidades fisiológicas atribuibles a la edad, la raza, el sexo, la nutrición y factores ambientales. Además, los resultados mostrados por los caninos jóvenes, especialmente los machos, demuestran que estos presentan un colesterol total y un colesterol HDL más alto si se compara con los adultos, siendo una situación inversa a lo reportado por los humanos, ya que el colesterol tiende a aumentar con la edad, pero a la vez es una situación poco deseada en cuanto al HDL de los perros adultos ya que tienden a disminuirlo con la senectud llevándolos a padecer enfermedades coronarias que son poco conocidas en esta especie. Se deben tener en cuenta factores que alteren el perfil lipídico, como es el caso de la obesidad, las enfermedades (diabetes mellitus, hipotiroidismo, pancreatitis), las razas —especialmente las que presentan riesgo—, las dietas ricas en grasa, el estado físico del animal o el sedentarismo, puesto que una modificación en el estilo de vida puede ser beneficiosa para ayudar a controlar dichos factores o a mejorar la calidad de vida. Se recomienda realizar otros estudios en nuestras poblaciones caninas, teniendo en cuenta los parámetros antes mencionados, además del estado de salud y el medio ambiente donde se desarrolla. Rev. Med. Vet. ISSN 0122-9354: Bogotá (Colombia) N° 23: 65-72, enero-junio del 2012 Estudio del perfil lipídico canino por edad y sexo Agradecimientos Al centro veterinario Mascotas de la ciudad de Manizales, por su colaboración en la toma de muestras y en la separación del suero para el perfil lipídico; al Laboratorio de Microbiología del Departamento de Ciencias para la Salud, para la determinación de los perfiles lipídicos. Referencias 1. Xenouli PG, Steiner JM. Lipid metabolism and hyperlipidemia in dogs. Vet J 2010;183(1):12-21. 2. Kirk RW, Bonagura JD. Terapéutica veterinaria de pequeños animales. 13 ed. Madrid: McGraw Hill; 2001. 3. King MW. Introduction to Cholesterol Metabolism. The Medical Biochemistry Page Org. 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