BIOTECNOLOGIA

E
ENGENHARIA GENÉTICA

PROF. GUSTAVO ZACURA

[email protected]
[email protected]
[email protected]
 BIOTECNOLOGIA
Biotecnologia é o conjunto de conhecimentos que
permite a utilização de agentes biológicos
(organismos, células, organelas, moléculas) para
obter bens ou assegurar serviços.
 BIOTECNOLOGIA

 Envolve técnicas que permitem ao homem

utilizar organismos para a obtenção de
substâncias de utilidade para o ser humano.
 Por exemplo, cruzamentos experimentais para

obtenção de raças mais apuradas de gado e

cavalos e também de vegetais mais ricos em
determinados nutrientes.
 BIOTECNOLOGIA

• Tradicional - Fermentação
Sumérios
6000 a.C. – bebidas alcoólicas – grãos cereais
Babilônios
2000 a.C. – fermento – cerveja e pão
Egípcios

• Moderna - Maior escala

Kornberg 1967 – ponto de partida – síntese de DNA

Revolução genética – novas técnicas de manipulação genética /

tecnologia do DNA recombinante
 A Era Microbiológica
• Joseph Lister (1867) – tratou os ferimentos
cirúrgicos com fenol, reduzindo a infecção
hospitalar;
• Robert Koch (1876) – demonstrou que uma doença
infecciosa específica é causada por um
microrganismo específico;
Nos últimos 40 anos, houve o advento da
biotecnologia, possibilitando ao homem o
desenvolvimento de técnicas de manipulação de
microrganismos;
 1943 •Pr
em oduçã
esc o d
ala e P
1944 ind enic
•Id ust ilin
e r ial a
gen ntific
étic açã
1953 o od
om
•Es
tru ate
1956 t u r rial
•Sí
nte a do
se DN
•Có in A
1961-66 vitr
od
dec digo oD
ifra gen NA
1973 •Te do étic
o
rec c n o
om logia
bin do
a
1975 •De nte DNA
ant senvo
ico
rpo lvime
s m nto
•Pr ono de
1982 o
por duçã clo
nai
eng o d s
enh e Ins
a
1988 •Té
c
ria ulina
gen
em nica
cad de é tica
hum
ana
eia PCR
da
1990 •Pr Pol (Reaç
ime ão
gên imeiro ras
ica e)
HISTÓRICO – Eventos Importantes

uso
1996 •Cl da
o tera
pia
Do nage
ll y md
2000 -03 ao
vel
•Pr ha
oje
to g
en o
ma
 BIOTECNOLOGIA

Plantas e animais com características desejáveis, cultura de células

- Engenharia
• Multidisciplinar
e de tecidos, marcadores genéticos, produção de antibióticos,...
- Genética

É o conjunto de conhecimentos técnicos e métodos, de base

científica ou prática, que permite a utilização direta ou indireta de
organismos ou seres vivos como parte integrante e ativa do processo
de produção industrial de bens e serviços
 ENGENHARIA GENÉTICA

Envolve técnicas que permitem o transplante

de genes do DNA de uma espécie para o DNA
de espécie diferente.
Dessa maneira, é formado o chamado

DNA recombinante, que é a associação de

duas ou mais moléculas de DNA de espécies

diferentes que não são encontradas juntas na
natureza.
 APLICAÇÕES DA ENGENHARIA GENÉTICA

•Testes altamente preciosos de paternidade e de

identificação de criminosos.
•Localização de genes associados a doenças
genéticas.
•Detecção de genes relacionados com o
desenvolvimento de câncer.
•Terapia gênica.
•Produção de vacinas sintéticas.
Obtenção de organismos transgênicos.
 Bovinos
melhores reprodutores
melhor tamanho de carcaça
padrão de marmoreio e maciez da carne
maior produção de leite
testes de paternidade
 Suínos
melhores reprodutores
marcadores de prolificidade
maior leitegada

animais resistentes à doenças

resistência a agentes virais
resistência a agentes bacterianos
Diarréia em leitões causada por E. coli
 Suínos

Antes

Depois

Eliminação de genes que

estão implicados no alto
Eliminação do gene que deixa a carne teor de gorduras de certos
com aparência pálida e aqüosa. tipos de carne.
 Equinos
Alterações cromossômicas
danos reprodutivos

Testes de paternidade

Marcadores de força

Cavalos de corrida
 Aves
Tamanho da carcaça

Músculo

Poedeiras – número de ovos

 Peixes
Variabilidade genética
Identificação de diferentes populações em uma
mesma espécie comercial
População com melhor produção em cativeiro
Marcadores fisiológicos
Genes ou proteínas que determinam um estado
fisiológico
 ENZIMAS DE RESTRIÇÃO
São enzimas especiais também chamadas de
ENDONUCLEASES, que cortam a molécula de
DNA em pontos específicos.

Com a ação das enzimas de restrição é

possível a retirada de um gene do DNA
permitindo a introdução de outro gene
pertencente ao DNA de outra espécie, obtendo
o DNA recombinante.
É feita uma comparação entre os DNAs
fingerprint dos indivíduos em análise. Aqueles
que tiverem o maior número de bandas em
comum, apresentam alguma relação entre eles.
 MELHORAMENTO GENÉTICO
O conhecimento da hereditariedade tem gerado
tecnologias de grande utilidade para o ser humano.

As espécies de animais e plantas que constituem

nossa alimentação básica, foram domesticadas e
“melhoradas” em várias regiões do mundo.


O melhoramento genético consiste em selecionar e
aprimorar as características das espécies visando a
utilização pelo ser humano.

O melhoramento genético é um processo
antigo, que no início era realizado por maneira
intuitiva. Por exemplo, se um agricultor desejava
obter espigas de milho com maior número de
grãos, ele apenas selecionava as sementes de
milho com tal característica.


Atualmente, o processo de melhoramento
genético é feito baseado no conhecimento da
genética.
 EXEMPLO DE MELHORAMENTO
GENÉTICO ANIMAL
Gado Santa Gertrudes,
produzido no King Ranch, em
Kigsville no Texas, EUA.
É um ótimo produtor de carne
e resistente a doenças
parasitárias e ao calor

Resultante do cruzamento
de dois tipos

Gado Shorthorn Gado Braham ( Zebu )

Ótimo produtor de carne, Menor produção de carne e é
mas sensível a doenças e resistente a doenças e ao
ao calor calor
 Problemas em relação ao
melhoramento genético
Um dos principais problemas relacionados ao
processo é a obtenção de linhagens com baixa
variabilidade genética, ou seja, poucas
diferenças entre os indivíduos da população.

Tal fato poderia levar a uma diminuição da

adaptação dos indivíduos a variações
ambientais.
 TRANSGÊNICOS OU ORGANISMOS
GENÉTICAMENTE MODIFICADOS ( OGMs )
São organismos que recebem genes de
outras espécies.
São obtidos visando a produção de

substâncias de utilidade para o ser

humano.
As plantas são muito utilizadas na

obtenção de transgênicos que produzam

toxinas contra pragas.
Bactérias transgênicas vem sendo utilizadas
para a produção de insulina, hormônio de
crescimento, anticorpos específicos, fator VIII
(necessários aos hemofílicos).
Pode-se, por exemplo, introduzir um gene

humano em
um camundongo ou um gene de inseto em uma

planta. Por esses mecanismos foram obtidos

camundongos gigantes e planta de fumo que

brilhava.
PRODUÇÃO DE INSULINA HUMANA A PARTIR DE BACTÉRIAS

- O gene da insulina humana é isolado

utilizando-se enzimas de restrição
para cortar o DNA humano;

- O gene humano é inserido em um

plasmídeo bacteriano que também
foi submetido a enzima de restrição;

- Ativa-se o plasmídeo, para a transcrição

do gene e produção da proteína (insulina);

- Retira-se a insulina da bactéria.

EXEMPLOS DE ORGANISMOS TRANSGÊNCOS

Planta de algodão
resistentes às lagartas.
Reduz a necessidade de utilização de
pesticidas. Os gastos de produção
diminuem e a poluição ambiental
também é reduzida.

Golden Rice.
Arroz geneticamente modificado que contém um
gene que codifica a produção de β-caroteno. Foi
produzido para evitar que as populações pobres
da Ásia adoecessem por avitaminoses.
 CLONAGEM

Processo famoso pela técnica que resultou, em
1996, na ovelha Dolly. Nessa técnica, a um óvulo de
ovelha teve seu núcleo removido. Uma célula da
glândula mamária de outra ovelha teve seu núcleo
igualmente retirado. De posse de um óvulo
anucleado e do núcleo da célula mamária, foi
provocada uma eletrofusão. Assim, o núcleo
somático fundiu com o citoplasma do gameta sem
núcleo resultando em uma célula que se comportou
como zigoto.

A partir do zigoto, formou-se uma blástula que foi
implantada no útero de uma ovelha adulta.

Nasceu Dolly, a ovelha clonada.
CLONAGEM
 CLONAGEM
Clone (grego:klon, broto, ramo)
População de geneticamente idênticos,
produzidos assexuadamente ou a partir de
progenitor comum;
Cópia idêntica de moléculas, células,
tecidos e organismos adultos.
Ex: população de bactérias, plantas.
 POTENCIAIS DA CLONAGEM
HUMANA
Problemas no fígado e nos rins.
Poderá ser possível clonar fígados
humanos para transplante dos
mesmos;
A Leucemia. Este espera-se ser um
dos primeiros benefícios a vir desta
tecnologia.
Ate aqui
Ferimento da coluna vertebral.
Aprenderemos a fazer crescer, outra
vez, os nervos ou a parte posterior da
coluna vertebral, quando magoada.
Tetraplégicos poderão sair das suas
cadeiras de rodas e voltar a andar.
Testar algumas doenças genéticas. A
clonagem pode ser usada para testar,
e talvez curar, doenças genéticas.
 Exemplos
Vítimas de infarto receberiam implante de
células musculares cardíacas;
Pessoas com mal de Parkinson ou mal de
Alzheimer receberiam neurônios sadios;
É preciso conhecer o processo de
diferenciação, depois reproduzir toda a
delicada operação físico-química em
laboratório.
 APLICAÇÃO
Obtenção de produtos orgânicos em grande
escala: insulina, interferon, interleucina,
proteínas do sangue, vacinas;

Costeletas de porco sem colesterol;

Vacas com leite humano para bebês órfãos;

Bactérias produzem insulina para diabéticos.

 PROBLEMAS ÉTICOS

Manipulação da herança genética com fins

eugênicos (depuração da espécie);

Obtenção de microorganismos com

características antes inexistentes
(resistência a antibióticos; produção de
toxinas, doenças).
Foi enxertado no milho, gene de
bactéria Bacillus thuringiensis (Bt), com
instruções para fabricar substância
tóxica para insetos,
mas não para o homem.
A planta tornou-se um inseticida;

Em 1999 foi feita experiência com pólen

de milho transgênico e 44% das
borboletas monarca (não alvo)
morreram.
 Colocou-se gene da castanha-do-pará no
feijão para corrigir a proteína, pobre em
Metionina (aminoácido essencial).

O novo feijão (PGM), acabou fugindo do

controle e, ao assumir mais metionina,
assumiu também as substâncias
alergênicas presentes na castanha-do-
pará.
“Deve-se usar a ciência para saber e a ética para
decidir”.

“A ética do laboratório terá de ser decidida em

conjunto com a ética da sociedade” (Carlos
Alberto do Vale – USP).

“Assim como se diz que a guerra é assunto grave

demais para ser decidido pelos generais, a
ciência é perigosa demais para ser decidida
apenas pelos cientistas”. Steve Greve (EUA).
 ALERGENICIDADE
Algumas das críticas que os transgénicos
têm recebido têm a ver com a potencial
reacção alérgica dos animais/humanos a
estes alimentos. O caso mais conhecido
foi a utilização de um gene de uma noz
brasileira com vista ao melhoramento
nutricional da soja para alimentação
animal. A noz em causa era já
conhecida como causadora de alergia
em determinados indivíduos.
 ALERGENICIDADE
O gene utilizado para modificação da
soja tinha como função aumentar os
níveis de Metionina,um aminoácido
essencial. Estudos realizados
verificaram que a capacidade
alergénica da noz tinha sido
transmitida à soja, o que levou a que
a empresa responsável terminasse o
desenvolvimento desta variedade.
 LEGISLAÇÃO
OGM é, segundo o art. 3º, inciso V, da Lei
Federal brasileira nº 11.105, de 24 de
março de 2005, organismo cujo material
genético (DNA/RNA) tenha sido modificado
por qualquer técnica de engenharia
genética, excluídos desta classificação
aqueles organismos "resultantes de
técnicas que impliquem a introdução direta,
num organismo, de material hereditário,
desde que não envolvam a utilização de
moléculas de DNA/RNA recombinante ou
OGM, tais como: fecundação in vitro,
conjugação, transdução, transformação,
indução poliplóide e qualquer outro
processo natural.
 Princípios de Biossegurança
Os equipamentos de segurança são barreiras
primárias de contenção, visando proteger o
trabalhador e o ambiente laboratorial;

EPI EPC
 Princípios de Biossegurança

O design do laboratório é importante na medida que

proporciona uma barreira física capaz de proteger o
trabalhador dentro do laboratório, contribuindo
tanto para a confiabilidade dos experimentos
realizados como para a proteção da saúde humana e
do meio ambiente;
“Se deixássemos a natureza seguir seu
curso não fabricaríamos remédios;
esperaríamos que nossos anticorpos
vencessem os germes, que a pele
queimada se recompusesse sozinha,
que o osso fraturado se religasse.
Quer queira ou não, o homem tem
alterado a seleção da espécie”.