Boas Práticas No Setor de Microbiologia

BOAS PRÁTICAS NO SETOR DE
MICROBIOLOGIA
Patricia Possamai*
RESUMO
O presente trabalho consiste na definição dos requisitos mínimos necessários para a
segurança, qualidade e bom funcionamento do setor de microbiologia. Propondo ações
destinadas à prevenção, controle e eliminação de riscos inerentes ás atividades que
possam comprometer a saúde humana. Da mesma forma, o mesmo tem como objetivo
estabelecer de forma básica a organização dos processos e das condições pelos quais as
análises microbiológicas são realizadas, desde seu planejamento, execução e
monitoramento, a fim de promover a qualidade e validação dos resultados.
Palavras chave: Boas práticas. Biossegurança. Microbiologia.
1 INTRODUÇÃO
Com o surgimento de novas tecnologias tem proporcionado novos riscos dentro

da área de trabalho, com isso a questão da biossegurança tem ganhado grande
repercussão. Em vista disso, os laboratórios têm deduzido a necessidade de, ao longo do
tempo, aprimorar práticas administrativas, a fim de implantar medidas voltadas para a
prevenção, controle, minimização ou eliminação de riscos.
A biossegurança em laboratório se expõe como uma perspectiva de se aplicar e

estimular conceitos e métodos que atuem diretamente na questão de segurança,
fornecendo inclusive a oportunidade de melhor empreendimento e desempenho, visto que
proporciona a interação do trabalhador e a gestão em laboratório.
As boas práticas também são destinadas a assegurar que as condições ambientais

não invalidem os resultados ou afetem adversamente a qualidade requerida de qualquer
medição.
*Biomédica. Pós graduanda em análise ambiental pela Univali – Itajaí. E-mail:

[email protected]
2
1.1 DEFINIÇÃO
Boas práticas no laboratório: É o conjunto de normas pertencente à organização e

às condições pelo qual o laboratório exerce seus ensaios, monitoramento e controle.
Biossegurança: É o conjunto de medidas voltadas para a prevenção, controle,

minimização e eliminação dos riscos presentes nas atividades de pesquisa, produção,
ensino, desenvolvimento tecnológico e prestação de serviços que podem comprometer a
saúde do homem, dos animais a preservação do meio ambiente e/ou a qualidade dos
trabalhos desenvolvidos.
2. ACOMODAÇÕES E CONDIÇÕES AMBIENTAIS
O laboratório deve monitorar, controlar e registrar as condições ambientais

conforme requerido pelas especificações, métodos e procedimentos pertinentes, ou
quando elas influenciam a qualidade dos resultados. Deve ser dada a devida atenção, por
exemplo, à esterilidade biológica, poeira, distúrbios eletromagnéticos, radiação, umidade,
alimentação elétrica, temperatura e níveis sonoros e de vibração, conforme apropriado
para as atividades técnicas em questão. Os ensaios/calibrações devem ser interrompidos
quando as condições ambientais comprometerem os resultados. (ISO 17025, 2005)
Deve haver uma separação efetiva entre as áreas vizinhas nas quais existam
atividades incompatíveis. Devem ser tomadas medidas para prevenir contaminação
cruzada.
O acesso e o uso de áreas que afetem a qualidade das análises ou das calibrações
devem ser controlados. O laboratório deve determinar o nível do controle, baseado em
suas circunstâncias particulares.
Devem ser tomadas medidas que assegurem uma boa limpeza e arrumação no
laboratório. Onde necessário, devem ser preparados procedimentos especiais.
2.1 MÉTODOS DE ENSAIOS E CALIBRAÇÃO E VALIDAÇÃO DE MÉTODOS
Deve-se utilizar métodos e procedimentos apropriados para todos os ensaios e/ou

calibrações dentro do seu escopo. Estes incluem amostragem, manuseio transporte,
3
armazenamento e preparo dos itens a serem ensaiados ou calibrados e, onde, apropriado

uma estimativa de incerteza de medição, bem como as técnicas estatísticas para análise
dos dados de ensaio e/ou calibrações. (ISO 17025, 2005)
É necessário que o laboratório tenha instruções sobre o uso e a operação de todos

os equipamentos pertinentes, sobre o manuseio e a preparação dos itens para ensaios e/ou
calibrações, ou de ambos, onde a falta de tais instruções possa comprometer os resultados
dos ensaios e/ou calibrações. Todas as instruções, normas, manuais e dados de referência
aplicáveis ao trabalho do laboratório devem ser mantidos atualizados e disponíveis para
o pessoal. Todo desvio de método e calibração devem ser documentados, tecnicamente
justificados, autorizados e aceitos pelo cliente. (ISO 17025, 2005)
NOTA: Antes do preparo de meios de cultura e de caldos, estes devem ser validados. No
qual é passado uma cepa certificada para verificar se os requisitos específicos são
atendidos.
3 EQUIPAMENTOS
Os equipamentos devem ser manuseados por pessoas autorizadas. Instruções

atualizadas sobre o uso e manutenção do equipamento precisam estar prontamente
disponíveis para uso.
Todos os equipamentos devem ser identificados, mantidos registros de cada item

contendo verificações de que o equipamento atende às especificações; instruções do
fabricante; datas, resultados e cópias de relatórios e certificados de todas as calibrações,
ajustes, critério de aceitação e a data da próxima calibração.
Os equipamentos que tenha sido manuseado incorretamente, que produza

resultados duvidosos, que apresentam defeitos ou demonstre estar fora dos padrões,
devem ser retirados de serviço. Os mesmos devem ser isolados para impedir sua utilização
e devem ser visivelmente identificados como fora de serviço, até que seja reparado e
comprovado por meio de calibração que está funcionando corretamente. Qualquer efeito
ou desvio dos limites causados pela falha do equipamento, deve ser identificado e
colocado em prática o procedimento para “controle de trabalho não-conforme”.
4
Todo equipamento utilizado em análises ou em calibrações, que tenha efeito

significativo sobre a exatidão ou validade do resultado do ensaio, deve ser calibrado antes
de entrar em serviço.
3.1 ESTERILIZAÇÃO
É o processo de eliminação total de todos os microrganismos na forma vegetativa

e esporulada. O método mais tradicional de esterilização é por meio físico em suas formas
seca e úmida.
Autoclavação é a esterilização por calor úmido, é um processo que pode ser

efetuado de 15 a 30 minutos, dependendo do material, a uma temperatura de 121ºC, sob
pressão. São indicados para esterilização de materiais termorresistentes.
Procedimento para uso:
✓ Os materiais devem ser envoltos por papel crepado, por serem permeáveis ao
calor.
✓ Materiais contaminados devem ser autoclavados por 30 minutos em temperatura
de 121ºC.
✓ Materiais limpos são autoclavados por 15 minutos em temperatura de 121ºC.
✓ Antes de iniciar a autoclavação, é necessário verificar o nível de água que deve
estar sobre o apoio da “cesta”.
✓ Em cada pacote é preciso colocar uma fita adesiva termossensível, esta irá indicar
se o material realmente foi exposto a altas temperaturas.
✓ Os materiais devem ser colocados de maneira folgada dentro da autoclave para
que o vapor circule livremente.
✓ É importante deixar os materiais com tampa semiaberta para que o vapor possa
penetrar no seu conteúdo.
Monitoramento:
✓ Uma vez por semana é realizado teste biológico sempre na primeira carga do dia,
colocando indicador biológico durante a autoclavação.
✓ É realizado o controle de temperatura através do termômetro colocado em cada
autoclavação.
5
✓ É feito o registro de todos os materiais colocados na autoclave e gerado um lote

interno, para eventual rastreabilidade dos mesmos.
NOTA: É indispensável realizar a limpeza e a manutenção de todo equipamento

regularmente, tendo em vista as instruções do manual de uso do aparelho. É recomendado
o uso de luvas térmicas para a retirada dos materiais da autoclave.
3.2 CAPELA DE FLUXO LAMINAR
Utiliza-se com a finalidade de criar áreas de trabalho estéreis dentro do

laboratório, para garantir que os materiais biológicos e químicos estéreis sejam
manipulados de forma segura e sem risco de contaminação.
Procedimento para uso:
✓ Ligar a lâmpada UV por 30 minutos antes de iniciar a operação.

✓ Deixar na capela apenas o material a ser utilizado.
✓ Realizar a limpeza do piso e da janela da capela com álcool 70%, toda vez que for
utilizada.
NOTA: É recomendado ligar a lâmpada UV por 15 minutos quando houver a manipulação

frequente de materiais de fora pra dentro da capela, assim como aplicar álcool 70% nas
mãos.
3.3 BANHO MARIA
O banho maria no laboratório é realizado com intuito de aquecer, de forma lenta

e uniforme qualquer substância (líquida ou sólida) que estiver em um recipiente.
É necessário fazer a limpeza e desinfecção regulares, pois pode haver imensa

multiplicação de microrganismos no interior desses equipamentos. Para esse
procedimento o uso de luvas e guarda pós são obrigatórios.
Procedimento para limpeza:
✓ Desligar o aparelho da tomada antes de fazer a limpeza e desinfecção.

✓ Esperar esfriar, em seguida retirar toda a água.
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✓ Realizar a limpeza da superfície interna e externa com água e sabão.

✓ Secar com pano limpo.
✓ Untar as superfícies com álcool 70% durante 2 minutos.
3.4 GELADEIRAS E FREEZERS
Todos os materiais guardados dentro desses equipamentos devem ser

identificados. Deve ser realizado o registro diário da temperatura desses equipamentos,
assim como o controle das mesmas.
É necessário realizar a limpeza externa e interna mensalmente. Para isso deve se

desligar o equipamento retirando os materiais, transferindo-os para outra
geladeira/freezer ou para uma caixa de isopor. Após, ligar a geladeira/freezer e recolocar
os materiais quando a mesma atingir a temperatura ideal.
NOTA: É necessário uso de guarda-pó e luvas para realizar a limpeza.
4 EQUIPAMENTO DE PROTEÇÃO INDIVIDUAL – EPI
São equipamentos de contenção de uso individual com a finalidade de proteger o

profissional do contato com microrganismos patogênicos, agente químicos, calor ou frio
excessivo, entre outros riscos. São importantes também para evitar a contaminação de
materiais durante o processamento.
4.1 GUARDA-PÓ
Este deve ser utilizado somente na área técnica, mesmo quando não for realizar
algum procedimento. Permanecendo no setor em cabides ou vestiários específicos. O
guarda-pó deve ser utilizado fechado, é necessário que o mesmo tenha manga longa, e
que seja confeccionado em tecido de algodão ou misto.
É recomendado lavar sempre que sujar, ou no mínimo uma vez por semana,
mesmo com aparência limpa.
Será permitido o uso em áreas comuns apenas para o transporte de materiais

biológicos, químicos ou resíduos. Para isso, é necessário utilizar um guarda-pó específico
para esta prática.
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4.2 ÓCULOS DE SEGURANÇA OU PROTETOR FACIAL
São importantes ao realizar todas as atividades que possa ocorrer respingos e

aerossóis, projeção de estilhaços procedente da quebra de vidraria que tenha risco químico
ou biológico ou quando ocorrer a exposição de radiação ultravioleta.
No setor de microbiologia é importante utilizar o protetor facial quando for

manusear meios de cultura utilizando o microondas.
Após o uso é recomendado lavar o material com água e sabão, ou com hipoclorito.
Não utilizar álcool, pois danifica o material com que são produzidos os óculos e protetores
faciais.
4.3 MÁSCARAS
No laboratório são utilizadas as máscaras do tipo cirúrgica, com a finalidade de

proteção do sistema respiratório durante o manuseio de material biológico, bem como
para impedir a contaminação do material analisado.
4.4 BOTAS DE BORRACHA
Tem como finalidade a proteção dos pés em áreas molhadas, no transporte de

material e resíduo e na limpeza de locais contaminados. Em algumas situações podem
proteger contra descargas elétricas, dependendo do material com que foi fabricado.
4.5 GORRO DESCARTÁVEL
É utilizado na proteção dos cabelos contra aerossóis e respingos, assim como

proteger o material a ser analisado de contaminação.
4.6 PRO -PÉ OU SAPATILHA
Utiliza se para proteger os calçados em áreas contaminadas, ou podem ser usados

para trabalhar em áreas estéreis.
8
4.7 LUVAS
São utilizadas para a proteção das mãos. São de uso obrigatório para o manuseio
de qualquer material biológico ou químico. São feitas de materiais diferentes, de acordo
com a atividade laboratorial.
Na microbiologia é utilizado as luvas de látex nitrílica, que exercem proteção

química com alta sensibilidade, e as luvas de fio de Kevlar tricotado que protegem nas
atividades com temperatura de até 250°C, sendo estas utilizadas na retirada de materiais
da autoclave.
5. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO COLETIVA – EPC
São instrumentos de contenção que promovem a proteção do funcionário, do

ambiente e do material ou pesquisa desenvolvida. Podem ser utilizados por um ou mais
trabalhadores.
Os equipamentos mais comuns e utilizados no setor de microbiologia são:
✓ Capela;
✓ Coletores de resíduos;
✓ Extintores de incêndio;
✓ Saída de emergência.
A responsabilidade coletiva é um conceito que todos os colaboradores de um

laboratório devem respeitar, independente dos materiais manipulados no mesmo. É
essencial que se tenha consciência coletiva de que os equipamentos de proteção salvam
vidas.
6. REFERÊNCIAS
QUEMIS. Capela de fluxo laminar. Disponível em

<http://www.quimis.com.br/equipamentos-laboratorio/capela-fluxo-laminar-
preco>.Acesso em: 20 Agosto. 2017.
9
QUEMIS. Banho maria. Disponível em <http://www.quimis.com.br/equipamentos-

laboratorio/banho-maria-laboratorio>.Acesso em: 20 Agosto. 2017.
MEDEIROS, S R Andrea. Boas práticas de laboratório aplicadas ao programa 5S.

Disponível em http://www.fcav.unesp.br/Home/gidrh/bpl.pdf>.Acesso em: 20 Agosto.
2017.
LACEN. Manual de biossegurança. Disponível em

<http://lacen.saude.sc.gov.br/arquivos/MBS01.pdf>.Acesso em: 21 Agosto. 2017.
ANVISA. Segurança e controle de qualidade no laboratório de microbiologia clínica.

Disponível em <
http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/manuais/microbiologia/mod_2_2004.pdf>.
Acesso em: 21 Agosto. 2017.
EMBRAPA MEIO AMBIENTE. Boas práticas de laboratório (BPL). Disponível em

<http://www.cnpma.embrapa.br/nova/mostra2.php3?id=448>.Acesso em: 21 Agosto.
2017.
ARAÚJO, F S G LANA; MEDEIROS, GILCA. Biossegurança em laboratório. Revista

Inovação, Brasil, v.1, n.1, Jan/Jun 2012. Disponível
em<http://189.43.21.151/revista/index.php/inovaacao/article/view/475/pdf>.Acesso em:
22 Agosto. 2017.
ABNT NBR ISSO/IEC 17025. Requisitos gerais para a competência de laboratórios de

ensaio e calibração. Disponível em
<http://www.smarnet.com.br/qualidade/metrologia/17025.pdf>.Acesso em: 22 Agosto.
2017.

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Com o surgimento de novas tecnologias tem proporcionado novos riscos dentro

A biossegurança em laboratório se expõe como uma perspectiva de se aplicar e

As boas práticas também são destinadas a assegurar que as condições ambientais

*Biomédica. Pós graduanda em análise ambiental pela Univali – Itajaí. E-mail:

Boas práticas no laboratório: É o conjunto de normas pertencente à organização e

Biossegurança: É o conjunto de medidas voltadas para a prevenção, controle,

2. ACOMODAÇÕES E CONDIÇÕES AMBIENTAIS

O laboratório deve monitorar, controlar e registrar as condições ambientais

2.1 MÉTODOS DE ENSAIOS E CALIBRAÇÃO E VALIDAÇÃO DE MÉTODOS

Deve-se utilizar métodos e procedimentos apropriados para todos os ensaios e/ou

armazenamento e preparo dos itens a serem ensaiados ou calibrados e, onde, apropriado

É necessário que o laboratório tenha instruções sobre o uso e a operação de todos

Os equipamentos devem ser manuseados por pessoas autorizadas. Instruções

Todos os equipamentos devem ser identificados, mantidos registros de cada item

Os equipamentos que tenha sido manuseado incorretamente, que produza

Todo equipamento utilizado em análises ou em calibrações, que tenha efeito

É o processo de eliminação total de todos os microrganismos na forma vegetativa

Autoclavação é a esterilização por calor úmido, é um processo que pode ser

Procedimento para uso:

✓ É feito o registro de todos os materiais colocados na autoclave e gerado um lote

NOTA: É indispensável realizar a limpeza e a manutenção de todo equipamento

3.2 CAPELA DE FLUXO LAMINAR

Utiliza-se com a finalidade de criar áreas de trabalho estéreis dentro do

Procedimento para uso:

✓ Ligar a lâmpada UV por 30 minutos antes de iniciar a operação.

NOTA: É recomendado ligar a lâmpada UV por 15 minutos quando houver a manipulação

3.3 BANHO MARIA

O banho maria no laboratório é realizado com intuito de aquecer, de forma lenta

É necessário fazer a limpeza e desinfecção regulares, pois pode haver imensa

Procedimento para limpeza:

✓ Desligar o aparelho da tomada antes de fazer a limpeza e desinfecção.

✓ Realizar a limpeza da superfície interna e externa com água e sabão.

3.4 GELADEIRAS E FREEZERS

Todos os materiais guardados dentro desses equipamentos devem ser

É necessário realizar a limpeza externa e interna mensalmente. Para isso deve se

NOTA: É necessário uso de guarda-pó e luvas para realizar a limpeza.

4 EQUIPAMENTO DE PROTEÇÃO INDIVIDUAL – EPI

São equipamentos de contenção de uso individual com a finalidade de proteger o

Será permitido o uso em áreas comuns apenas para o transporte de materiais

4.2 ÓCULOS DE SEGURANÇA OU PROTETOR FACIAL

São importantes ao realizar todas as atividades que possa ocorrer respingos e

No setor de microbiologia é importante utilizar o protetor facial quando for

No laboratório são utilizadas as máscaras do tipo cirúrgica, com a finalidade de

4.4 BOTAS DE BORRACHA

Tem como finalidade a proteção dos pés em áreas molhadas, no transporte de

4.5 GORRO DESCARTÁVEL

É utilizado na proteção dos cabelos contra aerossóis e respingos, assim como

4.6 PRO -PÉ OU SAPATILHA

Utiliza se para proteger os calçados em áreas contaminadas, ou podem ser usados

Na microbiologia é utilizado as luvas de látex nitrílica, que exercem proteção

5. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO COLETIVA – EPC

São instrumentos de contenção que promovem a proteção do funcionário, do

Os equipamentos mais comuns e utilizados no setor de microbiologia são:

A responsabilidade coletiva é um conceito que todos os colaboradores de um

QUEMIS. Capela de fluxo laminar. Disponível em

QUEMIS. Banho maria. Disponível em <http://www.quimis.com.br/equipamentos-

MEDEIROS, S R Andrea. Boas práticas de laboratório aplicadas ao programa 5S.

LACEN. Manual de biossegurança. Disponível em