Manual Premier

Premier Hb9210™ com Software AFFINITY™
SISTEMA ANALÍTICO DA HEMOGLOBINA GLICOSILADA
MANUAL DO OPERADOR (v11)

09-01-0001
SOMENTE PARA USO EM DIAGNÓSITCO IN VITRO
AVISO: Antes de usar o equipamento, leia as instruções contidas

neste manual.
EUA/Canadá/Porto Rico: Fora dos EUA:

Trinity Biotech USA Trinity Biotech
2823 Girts Road IDA Business Park
Jamestown, NY 14701 Bray, Co. Wicklow, Irlanda
1-800-325-3424 353 1 276 9898, Option 4
www.trinitybiotech.com Fax: + 353 1 276 9888
[email protected] www.trinitybiotech.com
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Revisão 11, 15 de junho de 2012

Premier Hb9210™
As aplicações do Teste de hemoglobinas variantes, hemoglobinas glicosiladas e outras
proteínas são cobertas por uma ou mais das seguintes patentes americanas:
5.843.788 5.719.053 6.020.203 5.801.053
Direitos Autorais© 2012
Informações do Proprietário
Os programas de software são protegidos por direitos autorais. Todos os direitos

são reservados. Este software foi desenvolvido somente para uso com o
equipamento pretendido e para aplicações de diagnóstico “in vitro” conforme
especificado nas instruções de operação. Todas as instruções de operação devem
ser seguidas. É proibida a cópia ou a reprodução do programa sem autorização
prévia por escrito da Trinity Biotech.
INTENÇÃO DE USO
Destina-se à determinação quantitativa da hemoglobina A1c (HbA1c) em sangue

total coletado por punção venosa ou picada no dedo. A HbA1c é útil no
monitoramento do controle da glicemia a longo prazo em indivíduos com diabetes
mellitus. Somente para uso em diagnóstico in vitro.
AVISO: Antes de usar o equipamento, leia as instruções contidas

neste manual.
CONTEÚDO
Capítulo 1: Guia de Início Rápido

1. Introdução ------------------------------------------------------------------------------------------------
2. Operação do Sistema-----------------------------------------------------------------------------------
3. Procedimento --------------------------------------------------------------------------------------------
4. Resultados e Interpretação ---------------------------------------------------------------------------
5. Substituição dos Reagentes---------------------------------------------------------------------------
Capítulo 2: Introdução
2.1 Introdução ----------------------------------------------------------------------------------------------
2.2 Características ------------------------------------------------------------------------------------------
2.3 Especificações -----------------------------------------------------------------------------------------
2.4 Intenção de Uso----------------------------------------------------------------------------------------
2.5 Registro 510(K) ----------------------------------------------------------------------------------------
Capítulo 3: Descrição do Sistema

3.1 Sistema Total -------------------------------------------------------------------------------------------
Capítulo 4: Princípios de Operação

4.1 Bioquímica & Análise das Proteínas Glicosiladas -----------------------------------------------
4.2 Histórico do Teste -------------------------------------------------------------------------------------
4.3 Importância Clínica da HbA1c ----------------------------------------------------------------------
4.4 Princípios da Análise ---------------------------------------------------------------------------------
4.5 Méritos do Teste---------------------------------------------------------------------------------------
4.6 Valores Esperados ------------------------------------------------------------------------------------
4.7 Características Específicas do Desempenho ----------------------------------------------------
4.8 Referências do Capítulo -----------------------------------------------------------------------------
4.9 Relatório 510(K) do FDA -----------------------------------------------------------------------------
Capítulo 5: Preparação do Local
5.1 Introdução ----------------------------------------------------------------------------------------------
5.2 Descrição do Sistema ---------------------------------------------------------------------------------
5.3 Requisitos do Sistema
5.4 Instalação------------------------------------------------------------------------------------------------
5.5 Símbolos Importantes --------------------------------------------------------------------------------
5.6 Inspeção -------------------------------------------------------------------------------------------------
5.7 Precauções de Segurança----------------------------------------------------------------------------
5.8 Instruções de Segurança Importantes ------------------------------------------------------------
Capítulo 6: Preparação para a Operação

6.1 Componentes do Teste-------------------------------------------------------------------------------
6.2 Uso dos Reagentes & Armazenagem -------------------------------------------------------------
6.3 Uso da Coluna & Armazenagem -------------------------------------------------------------------
6.4 Requisitos das Amostras ----------------------------------------------------------------------------
6.5 Limitações do Teste ----------------------------------------------------------------------------------
6.6 Preparação dos Calibradores & Controles de HbA1c ------------------------------------------
Capítulo 7: Componentes do Hardware

7.1 Introdução ----------------------------------------------------------------------------------------------
7.2 Sistema do Autoamostrador ------------------------------------------------------------------------
7.3 Bomba----------------------------------------------------------------------------------------------------
7.4 Aquecedor da Coluna --------------------------------------------------------------------------------
7.5 Detector -------------------------------------------------------------------------------------------------
7.6 Gerenciamento dos Dados --------------------------------------------------------------------------
7.7 Leitores de Código de Barras -----------------------------------------------------------------------
7.8 Protocolo de Descontaminação para Procedimentos de Manutenção e Descarte-----
Capítulo 8: Manutenção
8,1 Introdução, Visão Geral do Equipamento & Componentes----------------------------------
8,2 Iniciar -----------------------------------------------------------------------------------------------------
8.3 Detector -------------------------------------------------------------------------------------------------
8,4 Bomba----------------------------------------------------------------------------------------------------
8.5 Transportador de Amostras, Módulo da Seringa e Módulo da Sonda --------------------
8.6 Manutenção Geral ------------------------------------------------------------------------------------
1. Introdução
1.1 Histórico do Teste

A hemoglobina A1c (HbA1c) é de interesse clínico especial no estudo da diabetes mellitus. A
medição de HbA1c é um meio clinicamente útil de avaliar o controle glicêmico na diabetes. Os
valores de HbA1c refletem os níveis de glicose no sangue na meia vida de circulação dos
eritrócitos (cerca de 60 dias) e se correlaciona significativamente com os níveis médios de
glicose no sangue durante esse período. Portanto, a medição de HbA1c fornece uma média,
independentemente das múltiplas medições como os registros dos níveis de glicose
monitorados pelo próprio paciente, para avaliar a eficácia geral da terapia. Fatores como:
dieta, exercício, regime de insulina e estresse podem afetar o controle glicêmico, e
consequentemente, os valores de HbA1c. Na diabetes não controlada ou com controle
ineficaz, os valores de HbA1c podem estar duas a três vezes mais altos do que naqueles
indivíduos não portadores de diabetes, enquanto que na diabetes meticulosamente
controlada são observados valores de HbA1c normais ou próximos da faixa normal. Um melhor
controle da diabetes apresentará uma queda gradual nos níveis de HbA1c, atingindo um novo
equilíbrio em aproximadamente oito semanas. Há evidências significativas de que a
manutenção de um bom controle glicêmico tem um impacto positivo no desenvolvimento das
complicações a longo prazo da diabetes.
1.2 Explicação do Teste

As amostras de hemoglobina são injetadas no equipamento Premier Hb9210™ equipado com
uma coluna de ácido aminofenilborônico que foi equilibrado no que se refere ao pH e à força
iônica. Quando uma solução de hemoglobina (hemolisada) passa através da coluna, o
componente glicosilado é retido pela complexidade de seus grupos diol com o boronato.
Depois que o componente não glicosilado não retido elui da coluna, o componente glicosilado
é eluído da coluna com um reagente que o extrai do boronato.
1.3 Princípios do Procedimento

O Premier Hb9210™ emprega os princípios de afinidade com o boronato e cromatografica
líquida de alta performance (HPLC). A bomba transfere os reagentes através da coluna
analítica. A coluna analítica contém ácido aminofenilborônico ligado a um suporte de polímero
poroso (gel).
As amostras hemolisadas (diluídas) para a análise de HbA1c são injetadas automaticamente na
coluna durante o fluxo do Reagente Tampão A (Reagente de Eluição 1) do Premier Hb9210™. O
componente glicosilado se liga ao boronato, enquanto que o componente não glicosilado
passa através da coluna até o detector espectrofotomérico, onde é detectado a 413 ± 2nm.
Após a eluição do componente não glicosilado, o Premier Hb9210™ bombeia o Reagente
Tampão B (Reagente de Eluição 2), que extrai o componente glicosilado da coluna. Então o
componente glicosilado passa através do detector. As composições do Reagente Tampão A e
do Reagente Tampão B foram projetadas para exibir virtualmente absorção idêntica na faixa
de 413 ± 2nm para garantir uma linha de base estável.
Na etapa final do ciclo, a coluna é reequilibrada com Reagente Tampão A (Reagente de Eluição
1). Todas as seleções de reagente ocorrem numa sequência com tempo determinado
projetada para permitir eluição completa dos componentes glicosilados e não glicosilados.
Todas as funções são controladas por microprocessadores no computador. O software de
operação controla o computador que transfere instruções ao cromatógrafo líquido antes do
teste. O computador processa o sinal do detector espectrofotomérico e calcula o tempo de
retenção e a concentração em percentagem de cada espécie detectada.
O computador e a impressora produzem relatórios impressos incluindo identificação das
amostras, um gráfico do cromatograma, tempos de retenção e porcentagem da área.
Um software gerenciado por menus controla as funções básicas do sistema de identificação de
amostras, operação do equipamento, cálculo dos resultados e impressão de relatórios.
2. Operação do Sistema
Este Guia de Início Rápido tem o objetivo de ilustrar os principais princípios necessários para
operar o equipamento. Se qualquer uma das seguintes etapas não funcionar conforme o
esperado, favor consultar o manual de operação.
2.1 Componentes do Teste

Favor consultar as bulas dos kits individuais para obter mais detalhes sobre armazenagem,
estabilidade e preparação.
Reagentes
• Reagente Tampão A Premier Hb9210™ (Reagente de Eluição 1), 940 ml, (01-03-0095)
• Reagente Tampão B Premier Hb9210™ (Reagente de Eluição 2), 940 ml, (01-03-0096)
• Reagente de Diluição Premier Hb9210™ (para a Estação de Lavagem), 3,8 litros,
(01-03-0097)
• Reagente de Diluição Premier Hb9210™ (para a Seringa), 3,8 litros, (01-03-0097)
• Reagente de Lavagem Hb9210™, 940 ml, (01-03-0098)
Consumíveis
• Coluna de Afinidade com Boronato Premier Hb9210™, (09-06-0046)
• Filtro, 75 mícrons, (09-71-1905)
• Filtro, 2 mícrons, (03-11-0056)
Calibradores
• Calibradores de Hemoglobina A1c (normal e alto), (01-04-0018)
Controles
Itens adicionais necessários (não fornecidos pela Trinity Biotech)
• Frascos de amostras – tubos de teste não tratados 13 x 75 mm para preparações de
amostras hemolisadas e CQ (03-07-0152, Tubos de Teste, Vacutainer™, Transparente,
kit c/ 100).
• Pipetador ajustável para diluições de amostra – faixa 1-200 µl e 1000 µl.
• Ponteiras descartáveis para pipetagem
• Água purificada, filtrada, destilada e/ou deionizada para escorvar as linhas da cabeça
de lavagem da bomba – trocada semanalmente.
Itens adicionais recomendados, mas não necessários (não fornecidos pela Trinity Biotech)
• Autodiluidor (capacidade de amostragem 2 – 100 µl e dispensação 200 – 1000 µl).
• Álcool Isopropil.
• Pipetador ajustável – 1 ml com graduações de ≤ 5 µl, e 100 ml.
• Ponteiras descartáveis para pipetagem.
2.2 Antes de Iniciar
• Certifique-se de que haja níveis adequados de reagentes no sistema.

• Certifique-se de que o contêiner de resíduos não esteja cheio.
• Certifique-se de que haja papel na impressora.
2.3 Iniciar o Sistema
• Certifique-se de que o sistema esteja conectado à rede elétrica.

• Ligue o sistema usando o interruptor na parte traseira do equipamento.
• Ligue a CPU através do botão localizado à direita da caneta leitora de código de barras. O
interruptor de energia acenderá na cor azul quando a CPU estiver ligada, e piscará quando
a CPU estiver desligada.
• Efetue o login no Windows XP™ (não é necessária nenhuma senha).
• Clique duas vezes no ícone Premier na área de trabalho para iniciar o programa.
• Efetue o login no software Premier Hb9210™ usando sua senha ou 7235 se nenhuma
senha foi programada.
Figura 1: Interface do Login
• Na tela principal, selecione “Operation”.
Figura 2: Tela Principal

• Depois, selecione “Activate System”.
Figura 3: Activate System
3. Procedimento
3.1 Coleta de Amostras
• Preparação do paciente – é preferível, mas não necessário, coletar a amostra em

jejum para reduzir os efeitos de lipemia.
• Tipo – amostra de sangue fresca. É preferível sangue com anticoagulante EDTA (tubo
com tampa roxa, mas sangue heparinizado ou com fluoreto/oxalato também é
aceitável.
• Volume – Para uma amostragem de sangue completa, é necessário pelo menos 1 ml
no tubo primário. O teste pode ser realizado com pelo menos 2 µl de sangue total ou 1
µl de RBC’s agrupadas – quando realizado em um hemolisado manualmente.
• Para mais detalhes sobre estabilidade, armazenagem por longos períodos,
interferência de substâncias e tipos de amostras anormais, favor consultar os Capítulos
4 e 6 do Manual de Operação.
3.2 Preparação das Amostras
Dilua as amostras de sangue total com o Reagente de Diluição Premier Hb9210™ da Trinity
Biotech de acordo com a tabela abaixo.
• Por exemplo, 10 µl de sangue total com 1490 µl de Diluente Premier Hb9210™ da Trinity
Biotech para um volume final de 1,5 ml.
O volume mínimo de amostra é 1,0 ml, com 2 ml geralmente recomendado para garantir
volume para múltiplas injeções, se necessário.
Tabela 1: Proporção de Diluição Hemolisada para amostras de sangue total frescas, agitadas.
Proporção de Diluição Sangue Total agitado em µl Diluente em µl

1:150 10 1490
1:150 15 2235
1:150 20 2980
Tabela 2: Proporção de Diluição Hemolisada para amostras de sangue fresco assentadas,

compactadas ou centrifugadas.
Proporção de Diluição Sangue Total agitado em µl Diluente em µl
1:300 5 1495
1:300 10 2290
3.3 Carregar material de CQ (Controle de Qualidade)
Siga as instruções nos kits para orientações sobre reconstituição e pretensões de estabilidade.
• Clique no botão “Exit Menu” para acessar a tela do teste.
• Na barra de ferramentas, pressione o botão Load Cals / Ctrls (Carregar Calibradores /
Controles) conforme destacado abaixo.
Figura 4: Botão Load Cals / Ctrls (Carregar Calibradores / Controles)
• Pressione o botão CQ respectivo e o carrossel de CQ/Calibrador rodará até posição

correta para carregar/descarregar o tubo.
• Insira o tubo e depois saia da caixa de diálogo.
3.4 Carregar Amostras
• Retire todas as amostras analisadas anteriormente da área de transporte de amostras.

• Os tubos de amostra devem ter um septo perfurável ou as tampas deverão ser
retiradas.
• A etiqueta de código de barras em cada amostra deve estar voltada para a esquerda
para garantir que seja lida corretamente.
• Carregue as amostras de sangue total em racks de amostras que possuam um código
de barras que comece com W.
• Carregue as amostras hemolisadas nos racks de amostras que possuam um código de
barras que comece com H.
• Carregue as amostras anêmicas em racks de amostras que possuam um código de
barras que comecem com A.
• NÃO misture os tipos de amostras nos racks.
• Se estiver operando mais de 11 racks de amostras, pressione o ícone “Load Racks”
(Carregar Racks) conforme destacado abaixo:
• Isso permitirá que os racks carregados na frente sejam transportados para trás usando
a tela abaixo.
• Certifique-se de que o final do tubo processado esteja posicionado depois da última

amostra no último rack.
• Na tela do teste, pressione o ícone “run” (correr) conforme destacado abaixo.
Figura 5: Botão Run Samples (Processar Amostras)
• Ou, na tela principal, selecione Main Menu e depois selecione “Run Samples”.
Figura 6: Botão Run Samples
1. Verifique se os reagentes carregados são suficientes para completar o lote e

depois pressione o ícone “Run” (Correr) para iniciar o teste.
Figura 7: Tela de Diálogo Run Samples
A “Tela do Teste” abaixo será exibida durante o processamento conforme as amostras são
analisadas:
Figura 8: Tela do Teste durante o processamento

4. Interpretação dos Resultados
4.1 Verificação dos Controles
1. Verifique se os valores dos Controles de Nível I e Nível II estão dentro da faixa

especificada na bula do kit.
2. Verifique se o formato do pico tem as seguintes características:

• Linha de base plana antes do primeiro pico.
• Um “vale” entre os picos tem formato U e tem aproximadamente a altura da
linha de base principal.
• O segundo pico é acentuado e pontudo.
• O final do segundo pico retorna à altura da linha de base principal
4.2 Cromatogramas e Relatórios
Figura 9: Impressão Típica

Essa seção define cada elemento do relatório (veja a Figura 9):
1. “Batch xxx” indica o número do lote que foi atribuído ao teste pelo computador. Se
o lote precisar ser reimpresso, esse número será usado para rechamar o lote no
drive.
2. “Vial x: yyy” indica que amostra foi injetada. O valor “x” indica de que tipo de rack
a amostra é proveniente, W para racks de amostras de sangue total, H para racks
de amostras hemolisadas e A para racks de amostras anêmicas. O valor “yyy”
indica qual frasco no rack foi injetado.
3. “abcdewxay” (se houver) depois do número do frasco é a ID (identificação) do

paciente. As ID’s podem ser inseridas de três modos:
a) Insira o número dos frascos somente – nesse caso, o campo ID ficará em
branco.
b) Insira nomes – o nome aparecerá no campo ID.
c) Escaneie o código de barras – o código de barras aparecerá no campo ID.
4. Data e Hora em que a amostra foi injetada.
5. “Pressure = xx bar” – exibe a pressão do sistema no ponto de injeção. Os números

“(xx to yy)” exibem os extremos nas leituras da pressão durante o processamento
da amostra.
6. Dependendo das unidades selecionadas, os valores HbA1c = x.x% e/ou mMol

HbA1c/mol Hb = yy – é a porcentagem dos componentes glicosilados na amostra
calculada em relação à respectiva calibração.
7. O cromatograma é um gráfico da saída do sinal do detector. O primeiro pico é o

pico não glicosilado e o segundo pico é o pico glicosilado.
8. Tempo de retenção – o número impresso acima do pico é o tempo decorrido entre

o início do processamento e o ápice do pico.
9. Área total – a área combinada dos dois picos.
10. [FD484873564F865674] – é um identificador único do arquivo onde os dados do

teste são armazenados.
11. CONC = x.xx% é a porcentagem da área não calibrada do segundo pico.

5. Substituição dos Reagentes
O operador deverá substituir os reagentes em três situações:
1. Antes do teste, para garantir que haja

reagentes suficientes.
2. Durante um teste, conforme solicitado,

quando os níveis de reagente estiverem
críticos (conforme exibido na figura).
3. Durante um teste, conforme solicitado,

quando os níveis de reagente estiverem
abaixo do limite crítico e o equipamento
entrar no modo de parada de emergência.
As duas primeiras opções são preferíveis, pois a última opção requer reativação do sistema,
aumentando o tempo total para substituição.
Nas duas primeiras situações, é essencial que antes da substituição do frasco, as bombas
estejam paradas para evitar entrada de ar no sistema, conforme descrito na seção 5.1 abaixo.
Esse passo também se aplica às substituições de filtros e coluna.
5.1 Pausar o Sistema
• No menu principal, pressione “Devices”.

• Pressione o ícone “Pumps” (Bombas) e depois selecione “Solvent Control”.
• Defina a taxa de fluxo em Zero e depois pressione o botão verde para confirmar.
IMPORTANTE: O equipamento não deve ser deixado com uma taxa de fluxo zero
por longos períodos. Se não pretender iniciar um teste após a substituição do
reagente, retorne ao valor padrão (0,30 ml/min, 100% Reagente A), isto é, modo
de prontidão – ou desative o sistema.
5.2 Inserir Número de Lote
Os números de lote da coluna, calibradores, controles e reagentes líquidos devem ser

escaneados antes de serem colocados no equipamento.
• Na tela principal, clique em “Edit” e depois selecione “Lot Numbers” na tela abaixo:
• Selecione a tela apropriada para o primeiro reagente a ser escaneado [neste exemplo,
Buffers (Tampões)]:
• Pressione o ícone “Scan reagents” (código de barras amarelo) e depois escaneie o código
de barras do primeiro item a ser instalado. Depois de introduzir o código de barras
corretamente, siga as instruções na tela.
5.3 Substituição do Frasco de Reagente
1. Certifique-se de que a taxa de fluxo esteja ajustada em 0 ml/min conforme descrito na

seção 5.1.
2. Escaneie o código de barras do novo reagente conforme descrito na seção 5.2.
3. Tire a tampa do reagente e retire as mangueiras do frasco vazio.
4. Com um pano limpo, seque as mangueiras do frasco e evite que as pontas das mangueiras
toquem a bandeja de reagentes ou outras superfícies.
5. Retire o frasco vazio do sistema.
6. Retire a tampa e o selo do novo frasco de reagente e depois coloque o frasco na bandeja
de reagentes.
7. Insira as mangueiras do reagente no novo frasco e aperte a tampa. Certifique-se de que as
mangueiras não estejam torcidas ou cruzadas desde o equipamento até o topo do frasco.
8. Repita os passos 1 – 6 para a substituição de outros reagentes.
9. Deixe o sistema executar o Auto-Prime (Autoescorvamento) de todos os reagentes que
foram substituídos, de acordo com as caixas de diálogo.
10. Agora a análise das amostras pode prosseguir. Não é necessário calibrar, exceto se os
controles estiverem esgotados.
5.4 Substituição da Coluna

seção 5.1.
2. Escaneie o código de barras da nova coluna conforme descrito na seção 5.2.
3. Abra o forno soltando o botão preto na frente do forno (no sentido anti-horário).
4. Abra a porta do forno.
5. Solte o encaixe do topo da coluna.
6. Desenrosque a coluna da junta do forno (sentido anti-horário).
7. Desenrosque os plugues de transporte da nova coluna.
8. Instale a nova coluna no encaixe da junta do forno. Enrosque a coluna no encaixe (sentido
horário). Pare quando estiver apertado.
9. Coloque a mangueira do detector no topo da coluna, enrosque o encaixe (sentido horário)
até apertar.
10. Feche a porta do forno.
11. Enrosque o botão da porta do forno (sentido horário) para ajustar a porta.
12. Substitua os dois filtros (pré-filtro de 2 mícrons e filtro de amostras de 75 mícrons)
conforme descrito nas seções 5.5 e 5.6.
13. Ative o sistema.
14. Execute a calibração da linha de base e a calibração da HbA1c conforme descrito na seção
5.7.
15. Quando os controles estiverem dentro da faixa, a análise das amostras pode prosseguir.
5.5 Substituição do Filtro de Amostras
O filtro de amostras deve ser substituído a cada troca de coluna. O filtro de amostras está
localizado no tubo entre a porta de injeção e a válvula de injeção de amostras.

seção 5.1.
2. Solte o encaixe do tubo do gabinete do filtro de amostras, que prende o filtro de amostras
de 75 mícrons. O gabinete está conectado à válvula de injeção.
3. Retire o tubo laranja do gabinete do filtro de amostras.
4. Solte o gabinete do filtro de amostras.

5. Retire o filtro de amostras de 75 mícrons do gabinete. Vire o gabinete de cabeça para
baixo e dê leves batidas sobre uma toalha de papel ou outra superfície macia para soltar o
filtro.
6. Instale um novo filtro de 75 mícrons no gabinete. Certifique-se de que a superfície branca
do filtro esteja voltada para a parte inferior do gabinete (na direção da válvula de injeção).
O posicionamento incorreto reduzirá a capacidade de filtragem e poderá afetar os volumes
de injeção de amostras.
7. Monte na ordem inversa.
8. Certifique-se de apertar o encaixe na outra ponta do tubo laranja (abaixo da porta de
injeção), já que pode ter sido afrouxado durante a substituição do filtro de amostras.
5.6 Substituição do Filtro da Coluna
O filtro da coluna deve ser substituído a cada troca de coluna. O filtro da coluna está localizado
no tubo entre a válvula de injeção de amostras e o forno.
1. Certifique-se de que a taxa de fluxo esteja ajustada em 0 ml/min. Conforme descrito na

seção 5.1.
2. Solte os encaixes do tubo das duas pontas do gabinete do filtro da coluna, que prende o
filtro de 2 mícrons, que está conectado à válvula de injeção e ao forno.
3. Retire o gabinete de aço inoxidável do sistema.
4. Com duas chaves inglesas (de 7/16” ou 11 mm), abra o gabinete (veja foto abaixo).
5. Retire o filtro de 2 mícrons do gabinete. Vire o gabinete de cabeça para baixo e dê leves
batidas sobre uma toalha de papel ou outra superfície macia para soltar o filtro ou insira a
ponta de um clipe no orifício para retirá-lo.
6. Instale o novo filtro de 2 mícrons no gabinete, conforme exibido abaixo:
7. Com a ponta menor do gabinete virada para baixo, instale a parte superior do gabinete e
enrosque no sentido horário.
8. Aperte o gabinete com as chaves inglesas.
9. Monte o gabinete do filtro no sistema com a seta de orientação do fluxo na lateral
do gabinete apontando na direção do forno (ou distante da válvula de injeção).
10. Aperte os encaixes manualmente e verifique se há vazamentos.
5.7 Calibração
A calibração é necessária sempre que a coluna é substituída, conforme descrito na seção 5.4.
Para isso, com o equipamento no modo Standby (prontidão), faça uma primeira verificação da
linha de base.
• Na tela Main Menu, toque ou clique no ícone “Operation”.

• No Menu "Operation", selecione a opção “Run Baseline” conforme exibido abaixo e depois
pressione o ícone “Run” na próxima tela.
• Depois de concluir a verificação da linha de base, o equipamento retornará ao modo

Standby.
• Escaneie as informações do número de lote do calibrador conforme descrito na seção 5.2,
prepare-o conforme a bula do kit e carregue-o no equipamento conforme descrito na
seção 3.3.
• No menu principal, pressione o ícone “Operation”.
• No Menu "Operation", selecione a opção “Run Calibration” conforme exibido abaixo.
• A caixa de diálogo Calibration Run é exibida. Certifique-se de que haja reagente suficiente
e selecione qualquer opção adicional pressionando o ícone “Run”.
• Confirme a seguinte caixa de diálogo de calibração para iniciar a análise:
• Após concluir a calibração, o Premier Hb9210™ entrará no modo Standby. Antes de

analisar as amostras verifique se os valores do Controle de Qualidade são aceitáveis.
CAPÍTULO 2
INTRODUÇÃO
2.1 Introdução
O sistema Premier Hb9210™ é composto de quatro componentes principais usados para

fracionar e quantificar as hemoglobinas glicosiladas:
1. O cromatógrafo líquido Premier Hb9210™ AFFINITY é composto de um sistema de bomba
dual de alta pressão, forno e detector de comprimento de ondas variáveis.
2. O autoamostrador/transportador de amostras integrado é capaz de acomodar 210
amostras (mais amostras STAT adicionais permitidas durante o teste) para iniciar um teste
de lote individual, com a capacidade contínua de descarregar as amostras analisadas e
carregar novas amostras.
3. O sistema é conectado a um computador para controle do sistema e armazenamento de
dados.
4. O software AFFINITY compatível com Windows XP™ oferece cromatografia em tempo real
e monitoramento do sistema. A identificação das amostras dos pacientes é realizada
automaticamente durante o processo de amostragem através do módulo de código de
barras na área de transporte de amostras. Leitor de código de barras adicional para leitura
manual dos tubos com código de barras não lidos.
O fracionamento e a quantificação da hemoglobina glicosilada são realizados de acordo com os

princípios da cromatografia líquida de alta performance por afinidade com o boronato.
2.2 Características
1. Compatível com Windows XP™, tela de toque, administrado por ícones, software de fácil
utilização.
2. Pequeno volume de amostra exigido.
3. Capacidade de iniciar um lote de até 210 amostras com a habilidade contínua de
descarregar as amostras analisadas e carregar novas amostras.
4. Tempo de rendimento curto de 66 segundos.
5. Sistema automático de injeção e amostragem.
6. Processo integrado de amostragem e leituras dos código de barras das informações de
identificação das amostras dos pacientes.
7. Operação automatizada controlada por computador.
8. Resultados dos testes gerados por computador.
9. Relatórios de amostras individuais com unidades selecionáveis: %HbA1c (NGPS), e mMol
HbA1c/mol (IFCC), tempos de retenção e picos da área.
10. Armazenagem automática dos resultados do teste no computador.
11. Relatório resumido dos resultados dos testes de cada lote – para revisão na tela e/ou
impressão.
12. Capacidade de reimprimir os relatórios resumidos e cromatogramas a partir da memória
do computador.
13. Exibição em tempo real na tela para monitoramento da operação do sistema.
14. Quantificação das hemoglobinas glicosiladas.
2.3 Especificações
1. Amostras Hemolisadas feitas de sangue total ou células

sanguíneas vermelhas agrupadas. O sangue
pode ser fresco ou descongelado.
2. Elementos da análise Quantificação das hemoglobinas glicosiladas.
3. Princípio Cromatografia líquida de alta performance

por afinidade com o boronato.
4. Divisão mínima de leitura Porcentagem da área = 0,01%.
5. Requisito mínimo de amostra 10-µl (sangue total para fazer diluição

hemolisada 1:150, volume hemolisado
mínimo de 1,25 ml).
5-µl (células sanguíneas vermelhas agrupadas
para fazer diluição de 1:300, volume mínimo
hemolisado de 1,25 ml).
~2,0 ml (sangue total agitado para fazer
injeção direta).
6. Capacidade de amostras 210+ amostras
7. Período de rendimento 66 segundos por injeção
8. Coluna Analítica Boronato ligado a um suporte em gel de

polímero poroso.
9. Temperatura da coluna 55,0°C ± 0,2°C
10. Autoamostrador Transportador integrado de 210 amostras
11. Autoinjetor Distribui volume de amostra com <1% de erro

com volume de injeção de 5 µl.
12. Detecção Detector LED de comprimento de onda, 413 ±

2nm.
2.4 Intenção de Uso
O sistema Premier Hb9210™ destina-se à determinação quantitativa da hemoglobina A1c

(HbA1c) em sangue total a partir de coleta venosa e punção digital. A HbA1c é útil no
monitoramento a longo prazo do controle glicêmico de indivíduos com diabetes mellitus.
Somente para uso em diagnóstico in vitro.
2.5 Registro 510 (K)
Número de referência: K112015

CAPÍTULO 3
DESCRIÇÃO DO SISTEMA
3.1 Sistema Total
O Sistema Premier Hb9210™ é composto de um sistema HPLC integrado (bombas, válvulas de

injeção, forno e detector), sistema compacto de preparação de amostras (porta de
injeção/sonda, módulo da seringa e transporte de amostras) e a estação de trabalho (CPU,
impressora e tela de toque) com o software AFFINITY.
Figura 1: Premier Hb9210™ da Trinity Biotech

3.1.1 Notas sobre a estação de trabalho do computador
1. A estação de trabalho do computador vem pré-configurada com o sistema operacional

Windows XP da Microsoft.
2. Adições de software e/ou hardware ao computador sem a autorização da Trinity Biotech

não são permitidas. Qualquer alteração no computador pode interferir na validade dos
resultados dos pacientes e na integridade do sistema.
3. O cabo da impressora para conexão com o computador deve ser compatível com o
Windows XP e do tipo USB.
CAPÍTULO 4
PRINCÍPIOS DE OPERAÇÃO
4.1 Bioquímica e Análise das Proteínas Glicosiladas do Sangue
4.1.1 Hemoglobina Glicosilada – Estrutura, Formação e Medição
Muito da heterogeneidade da hemoglobina normal de um adulto (Hb) é resultado da glicação.

A hemoglobina é composta de quatro cadeias de polipeptídios, cada uma com um grupo
heme.
Mais de 90% da hemoglobina de adultos, HbA, é composta de duas cadeias alfa e duas
cadeias beta. Pequenas quantidades de HbF e HbA2 também estão presentes. Alien et al1
relataram nos anos 1950 que a hemoglobina de um humano adulto contém pequenas
frações de movimentos rápidos e lentos separáveis por carga. Esses componentes são
mencionados pela sua ordem de eluição a partir de uma resina de troca catiônica HbA1, a
primeira fração a eluir da resina é decomposta em HbA1a, HbA1a2, HbA1b e HbA1c. HbA2
elui após HbA.
As frações de movimento rápido são formadas por ligações não enzimáticas à

hemoglobina da glicose, fosfato-6-glicose ou frutose-1, difosfato-62. Bunn et al3, 4
propuseram em 1976 que a HbA1 é uma adução formada não enzimaticamente entre a
glicose e o amino-terminal da cadeia β e apresenta evidências de que a ligação envolve a
formação de uma base Schiff, seguida de um rearranjamento Amadori para produzir uma
cetoamina Figura 4-1):
FORMAÇÃO DA GHb
Figura 4-1: Formação da GHb ou GPP

Quando a ligação é feita no amino-terminal da cadeia β, a modificação concede carga negativa
suficiente à molécula para elevar-se acima das frações de Hb “rápidas” encontradas pelas
técnicas de análise dependente de carga. No entanto, a glicação não enzimática da
hemoglobina ocorre em vários locais. Tanto 50% da glicação da hemoglobina pode ocorrer no
amino-terminal da cadeia α quanto em certos grupos ε-amino5,6. A tabela 4-1 resume a
estrutura de vários componentes da hemoglobina (exibindo a variedade de locais onde a
glicose se liga):
Hemoglobina Estrutura
Hba α2β2
HbF α2γ2
HbA2 α2δ2
HbA1a1 α2(β-N-frutose-1, 6-difosfato)2
HbA1a2 α2(β-N-glicose-6-fosfato)2
HbA1b α2(β-N-carboidrato não
identificado)2
(instável) HbA1c α2(β-N=glicose)2
(estável) HbA1c α2(β-N=glicose)2

α2(β-LysN-glicose)2
HbA Glc (α-LysN-glicose)2β2
(α-N-glicose)2β2
Tabela 4-1: Estrutura da Hemoglobina7
A hemoglobina glicosilada em locais diferentes da cadeia β não sofre alteração significativa em

carga como a hemoglobina modificada na cadeia β, e co-elui com a HbA da resina de troca
catiônica. Portanto, os métodos dependentes de carga medem somente a hemoglobina
modificada no término da cadeia β. A forma estável da hemoglobina glicosilada da cadeia β e
da cadeia não β é detectada pelas técnicas de análise específica da glicação como o teste do
ácido tiobarbitúrico (TBA) e cromatografia por afinidade com o boronato.
Linha Inferior: Os métodos específicos de glicação detectam todas as espécies de Hb

glicosiladas; os métodos dependentes de carga não detectam todas as espécies de Hb
glicosiladas1.
Os diversos métodos de análise usados para medir a hemoglobina glicosilada são apresentados
na Tabela 4-2:
Dependente de Carga Específico de Glicação
• Cromatografia de Troca • Cromatografia de
Iônica Afinidade do Boronato
• Foco Isoelétrico • Ácido Tiobarbitúrico (TIA)
• Eletroforese
• Cromatografia de
Afinidade Móvel
Espécies Medidas: • Glicação do Amino- • Todas as hemoglobinas
Terminal da Cadeia β glicosiladas estáveis
• HbA1a • Glicação terminal da
• HbA1b cadeia β
• HbA1c (instável e estável) • Glicação terminal da
cadeia α
• Glicação do grupo ε-
amino
Interferências Analíticas: • Hemoglobina fetal (HbF) • Nenhuma

• Hemoglobinas variantes
(Hbs, HbC, HbD, etc)
• Modificações não
glicosiladas
(carbamilação,
acetilação, etc)
• Hemicromos formados
durante a armazenagem
Tabela 4-2: RESUMO DOS MÉTODOS GHb7
A investigação de Bunn et al sobre a síntese da HbA1c em humanos4 apresentou um modelo

em que a glicação da hemoglobina ocorre lenta, contínua e quase irreversivelmente durante a
vida útil dos eritrócitos, aproximadamente 120 dias em humanos. Os achados em que células
vermelhas jovens contêm concentrações mais baixas de GHb que outras células mais velhas8,9
e que valores GHb são mais baixos em pacientes com anemias hemolíticas10 também são
consistentes com as observações em que a hemoglobina é formada continuamente durante a
vida útil das células vermelhas numa taxa proporcional à concentração de glicose no interior
dos eritrócitos num tempo médio. Em contraste com a HGb estável (cetoamina ligada), a forma
da base Schiff (aldimina ou “instável”) da hemoglobina glicosilada flutua com alterações
agudas na concentração de glicose no plasma11, 12.
4.2 Histórico dos Testes
Allen et al relataram primeiro que a hemoglobina humana contém frações separáveis por
carga1. A descoberta que pacientes com diabetes apresentam um aumento de HbA1c é
creditada a Rahbar. Trivelli et al são reconhecidos por iniciar o estudo sistemático da relação
entre diabetes mellitus e hemoglobina glicosilada15. Dunn et al identificaram a HbA1c como
adução da glicose à hemoglobina e postulou que ela foi ligada por uma cetoamina através de
uma base Schiff intermediária. A síntese in vitro da HbA1c foi realizada por Fluckiger e
Winterhalter16.
O primeiro relato da medição de GHb por cromatografia de afinidade do boronato veio de
Mallia et al17, embora o trabalho de P.D.G Dean provavelmente precedeu o de Mallia18
Goldstein, et al19 e Nathan, et al20 são amplamente reconhecidos como os primeiros
proponentes da rotina de monitoramento dos pacientes diabéticos com o uso do teste GHb. O
teste de GHb foi publicado por comitês de especialistas12,21. A normatização interlaboratorial
dos valores GHb foi proposta e permanece um assunto de muita discussão22. Para uma melhor
revisão dos testes de hemoglobina glicosilada, consulte Goldstein et al e Fluckiger7,23.
4.3 Importância Clínica da HbA1c
A hemoglobina A1c (HbA1c) é de interesse clínico especial no estudo da diabetes mellitus. A

medição de HbA1c é um meio clinicamente útil de avaliar o controle glicêmico na diabetes. Os
valores de HbA1c refletem os níveis de glicose no sangue na meia vida de circulação dos
eritrócitos (cerca de 60 dias) e se correlaciona significativamente com os níveis médios de
glicose no sangue durante esse período. Portanto, a medição de HbA1c fornece uma média,
independentemente das múltiplas medições como os registros dos níveis de glicose
monitorados pelo próprio paciente, para avaliar a eficácia geral da terapia. Fatores como:
dieta, exercício, regime de insulina e estresse podem afetar o controle glicêmico, e
consequentemente, os valores de HbA1c. Na diabetes não controlada ou com controle
ineficaz, os valores de HbA1c podem estar duas a três vezes mais altos do que naqueles
indivíduos não portadores de diabetes, enquanto que na diabetes meticulosamente
controlada são observados valores de HbA1c normais ou próximos da faixa normal. Um melhor
controle da diabetes apresentará uma queda gradual nos níveis de HbA1c, atingindo um novo
equilíbrio em aproximadamente oito semanas. Há evidências significativas de que a
manutenção de um bom controle glicêmico tem um impacto positivo no desenvolvimento das
complicações a longo prazo da diabetes30, 31, 32, 33,34.
4.4 Princípios da Análise
4.4.1 Cromatografia de Afinidade do Boronato
As proteínas glicosiladas (hemoglobinas e proteínas do plasma) diferem das proteínas não

glicosiladas pela ligação de uma fração de açúcar àquelas nos vários locais de ligação através
de uma cetoamina. A GHb e a GPP contêm, portanto, grupos 1,2-cis-diol não encontrados nas
proteínas não glicosiladas. Esses grupos diol fornecem a base de separação dos componentes
glicosilados e não glicosilados pela cromatografia de afinidade do boronato17,24. Nessa técnica
de análise, um boronato como o ácido fenilborônico é ligado à superfície do suporte da coluna.
Quando a solução de proteínas (hemolisadas ou plasma diluído) passa através da coluna, o
componente glicosilado é retido pelos complexos dos grupos diol com o boronato (Figura 4-2).
Depois que o componente não retido elui da coluna, o componente glicosilado é eluído da
coluna com um reagente que o extrai do boronato17,35.
Afinidade da Ligação da Proteína Glicosilada
Figura 4-2: Afinidade da Ligação da Proteína Glicosilada
4.4.2 Premier Hb9210™ Affinity
O Premier Hb9210™utiliza os princípios de afinidade do boronato e da cromatografia líquida

de alta performance (HPLC). As bombas transferem os reagentes para a coluna analítica, que
contém ácido aminofenilborônico ligado a um suporte de polímero poroso (gel).
As amostras hemolisadas para a análise de HbA1c são injetadas automaticamente na coluna
durante o fluxo do Reagente Tampão A do Premier Hb9210™. O componente glicosilado liga-se
ao boronato enquanto o componente não glicosilado passa pela coluna até o detector
espectrofotométrico, onde é detectado a 413 ± 2 nm.
Após a eluição do componente não glicosilado, o sistema bombeia o Reagente Tampão B
Premier Hb9210™, que extrai o componente glicosilado da coluna. O componente glicosilado
passa então através do detector. Veja a Figura 4-3 de um diagrama da ligação da hemoglobina
glicosilada no sistema Affinity.
Figura 4-3: Diagrama da Afinidade da Ligação
As composições dos Reagentes de Eluição 1 e 2 são projetadas para apresentar virtualmente

absorção idêntica na faixa 413 ± 2 nm para garantir uma base estável. O sinal do detector
também é dirigido pela técnica de feixe dividido.
Na etapa final do ciclo, a coluna é reequilibrada com Reagente de Eluição 1. Toda a seleção do
reagente ocorre em uma sequência com tempo determinado para permitir eluição completa
dos componentes glicosilados e não glicosilados.
Todas as funções são controladas por computador, que processa o sinal do detector
espectrofotomérico e calcula a concentração de hemoglobina glicosilada ou proteína do
plasma como uma porcentagem do total detectado. A integração é feita pela área do pico em
Unidades de Absorbância (UA)/segundo.
O computador emite relatórios impressos analisando o sinal à medida que é recebido pelo
detector. Um relatório resumido do lote é impresso no final do teste.
O software, especialmente criado para a análise de HbA1c, controla as quatro funções básicas
do sistema: identificação das amostras, operação do equipamento, cálculo dos resultados e
impressão (e armazenagem) dos relatórios completos. Dependendo da capacidade do disco
rígido, muitos anos de dados (cromatogramas e relatórios resumidos dos lotes) podem ser
armazenados automaticamente.
O cálculo da porcentagem da GHb na amostra é obtido através da fórmula abaixo, com área do
pico em AU/segundo:
Área do Pico 2 X 100

(Área do Pico 1 + Área do Pico 2)
O resultado final é obtido através da comparação das amostras de referência usando uma
calibração de dois pontos.
4.5 Méritos do Teste
4.5.1 Teste de HbA1c por Afinidade do Boronato
Conforme ilustrado na Figura 4-2, a medição da HbA1c por cromatografia de afinidade do

boronato é livre de interferências comuns como variantes da hemoglobina, alterações sem
glicação e hemicromos relacionados à armazenagem7. A cromatografia de afinidade do
boronato não exige tratamento prévio da amostras para retirar o componente instável (base
Schiff ou aldimina), pois somente hemoglobinas glicosiladas estáveis (ligadas a cetoaminas)
são retidas pelo boronato. Comparada às técnicas de troca iônica, a separação por afinidade
também é menos sensível a erros quantitativos causados por flutuações menores no pH do
reagente e na força iônica24,25. O sistema tem a temperatura controlada para oferecer máxima
precisão e teste rápido e menos dispendioso comparado ao teste com ácido tiobarbitúrico.
4.5.2 Premier Hb9210™ Affinity
O Premier Hb9210™ combina as vantagens da separação por afinidade do boronato com a

precisão, conveniência e automação da cromatografia líquida de alta performance. Depois que
as amostras são carregadas e identificadas, o Premier Hb9210™ permite uma operação
automatizada. O lote do Premier Hb9210™ processa até 210 amostras incluindo duas posições
dedicadas para controles baixo e alto, e a capacidade de processar amostras STAT.
4.5.3 Interconversões da Hemoglobina Glicosilada
O sistema Premier Hb9210™ atualmente reporta nas seguintes unidades (selecionáveis pelo
usuário):
• %HbA1c (NGSP)
• mMol HbA1c/mol Hb (IFCC)
A Tabela 4-3 apresenta todas as interconversões entre as várias medições de unidades da
HbA1c. As recomendações das organizações NGSP e IFCC foram utilizadas para criar essa
tabela.
%HbA1c (NGSP) • Faixa Normal de HbA1c (NGSP) = 4,0 – 6,0 %HbA1c NGSP
mMol • Equação da Conversão HbA1c: nMol HbA1c/mol Hb (IFCC)

HbA1c/mol Hb %HbA1c (NGSP)
(IFCC) o mMol HbA1c/mol Hb (IFCC) = (%HbA1c NGSP – 2,15)
/0,0915
o %HbA1c NGSP = (0,0915 (mMol HbA1c/mol Hb (IFCC))
+ 2,15
Tabela 4-3: Interconversões da Hemoglobina Glicosilada
Referências da Tabela 4-3:
4.6 Valores Esperados

O valor esperado da %HbA1c em pacientes com diabetes depende do critério médico. A mais
recente Recomendação de Prática Clínica da Associação Americana de Diabetes (ADA) sobre
diabetes especifica uma meta de tratamento de 7% ou menos e sugere ações adicionais
quando o nível de HbA1c estiver acima de 8%*.
4.7 Características Específicas do Desempenho
O resumo do relatório 510k do teste de HbA1c por afinidade do boronato do Premier

Hb9210™ da Trinity Biotech é o seguinte:
4.7.1 Exatidão do Teste de HbA1c
No teste de exatidão do Premier Hb9210™ da Trinity Biotech vs. ultra2, o método dos mínimos
quadrados ordinários da regressão linear foi utilizado com o coeficiente de correlação (r2) =
0,9962.
• A rampa e a intercessão da linha de regressão linear é y = 1,0069x – 0,1214 onde no eixo x
estão os resultados do ultra2 e no eixo y estão os resultados do Premier Hb9210™.
• O Premier Hb9210™ demonstra desempenho linear de 3,8 % a 18,5% de HbA1c.
• O número total de pontos usados na regressão foi 48 por equipamento (resultados

individuais do Premier Hb9210™, média do ultra2 de duas análises por amostra).
• A tendência calculada a partir da linha de regressão no ponto de decisão médica de
6,5% a 8,0% de HbA1c foi aproximadamente de 0,3% de HbA1c (geralmente nos
pontos de decisão médica reconhecidos).
• A faixa de dados incluídos na regressão: o valor mais baixo foi 4,4% de HbA1c e o valor
mais alto foi 16,2% de HbA1c.
• O ultra2 (Método X) foi o método comparativo usado na regressão.
• O erro padrão da estimativa dos dados foi -0,067.
• O intervalo de confiabilidade na tendência geral é 0,047 (a 95% CI).
• O método dos quadrados mínimos ordinários da regressão linear foi usado com o
coeficiente de relação (R2) = 0,9962.
4.7.2 Linearidade / Faixa Mensurável
Nota: O operador do analisador de HbA1c da Trinity Biotech precisa verificar

periodicamente se o equipamento produz resultados lineares em relação à faixa de %HbA1c
reportada.
Os resultados desse estudo orientarão a gerência do laboratório em estabelecer faixas

aceitáveis de resultados de HbA1c (resultados mínimos e máximos de HbA1c permitidos).
Para isso, cada laboratório deve verificar se cada resultado está dentro da faixa de
linearidade dos resultados de HbA1c. O software possui sinalizadores definíveis pelo
usuário para permitir que cada laboratório insira seus resultados de HbA1c máximo e
mínimo e os valores fora dessa faixa são sinalizados e um valor 0,0% é atribuído a esse
paciente para impedir liberação de um resultado fora da faixa de linearidade da HbA1c.
No teste de linearidade da HbA1c o Premier Hb9210™ da Trinity Biotech, sete amostras

combinadas a partir de uma amostra baixa e alta foram analisadas. O Premier Hb9210™. O
Premier Hb9210™ demonstrou ser linear entre 3,8% de HbA1c e 18,5% de HbA1c com um
coeficiente de correlação (r2) = 0,9958.
4.7.3 Especificidade Analítica da HbA1c
Muitos estudos foram realizados nos quais amostras sanguíneas com %HbA1c com níveis
normais e anormais (>8% de HbA1c) foram comparadas diretamente com sangue contendo
uma substância específica potencialmente interferente. Diferentes concentrações de
substâncias interferentes foram testadas em dois níveis de %HbA1c. Como um método de
controle, uma amostra de sangue agrupado inalterado foi analisada. Como um método de
avaliação, uma substância interferente foi acrescentada ao sangue agrupado inalterado. O
critério de aceitação da interferência foi uma variação no valor da %HbA1c na faixa de ± 5% do
valor original (sem substância interferente). Os dados são apresentados abaixo:
• HbA1c instável – nenhuma interferência até 1.500 mg/dl

• Icterícia – nenhuma interferência até 20 mg/dl
• Lipemia – nenhuma interferência até 3.317 mg/dl
• HbA1c carbamilada – nenhuma interferência até 65 mg/dl
• Acetaldeído – nenhuma interferência até 25 mg/dl
• Ácido acetisalisílico – nenhuma interferência até 90 mg/dl
• Heparina sódica – nenhuma interferência até 450 USP
• Fluoreto de sódio – nenhuma interferência até 1.157 mg/dl (~3x a concentração
aceitável no tubo de coleta de sangue)
• EDTA – nenhuma interferência até 1.440 ml/dl (~8x a concentração aceitável no tubo
de coleta de sangue)
Os estudos das interferências na hemoglobina variante (HbV) foram realizados com amostras
de pacientes contendo HbAS, HbAD, HbAE e HbAC em um método de avaliação em relação
direta com o método comparativo K891235. Os critérios de aceitação mostraram que a HbV
apresenta interferência se a variação % de um método conhecido for maior que ± %7.
Nenhuma interferência foi observada em HbAS até uma concentração de 35,8%, HbAD até
uma concentração de 28,9%, HbAE até uma concentração de 16,9% ou HbAC até uma
concentração de 34,8%. Nos níveis anormais de HbF até uma concentração de 20,9%.
4.7.4 Carryover da HbA1c
Nota: O operador do analisador de HbA1c da Trinity Biotech precisa verificar

periodicamente se o equipamento trabalha com níveis aceitáveis de carryover.
No teste de linearidade do Premier Hb9210™ da Trinity Biotech, o método demonstrou um

carryover menor que 0,1%HbA1c. Foram realizados 20 testes durante cinco dias com dados de
dez amostras compostos de amostras de %Hb1Ac com nível baixo, alto e ponto de decisão.
Após o cálculo das médias cumulativas, desvios padrão, coeficientes de variação e tendências
de cada um dos níveis de amostras agrupadas, a aceitabilidade determinada foi a seguinte:
1. Os coeficientes de variação de cada nível não excederam a pretensão aceitável do

produto.
2. O desvio padrão das amostras de níveis alto-baixo deve estar ≤3x o desvio padrão das
amostras de níveis baixo-baixo.
Estatísticas Cumulativas
Média 5,46 8,37 11,23
SD 0,103 0,152 0,182
% CV 1,89 1,81 1,62
Média Baixo-Baixo 5,41

SD Baixo-Baixo 0,089
Média Alto-Alto 5,51
SD Alto-Baixo 0,110
Aprovado? Sim
4.7.5 Efeitos na Matriz de HbA1c – Métodos de Coleta e Anticoagulantes
Estudos de comparação na matriz foram realizados para abranger toda a faixa de medição
de 3,8 a 18,5 %HbA1c no Premier Hb9210™. Concentrações diferentes de substâncias
interferentes foram testadas em dois níveis de HbA1c. Como método de controle, foi analisado
sangue agrupado inalterado. Como método de avaliação, uma substância interferente foi
adicionada ao sangue. Os critérios de aceitação da interferência foi uma variação no valor da
HbA1c na faixa de ± 5% do valor original (sem interferentes). Os dados são apresentados
abaixo:
• Heparina sódica – nenhuma interferência até 450 USP

• Fluoreto de sódio – nenhuma interferência até 1.157 mg/dl (~3x a concentração
aceitável no tubo de coleta de sangue)
• EDTA – nenhuma interferência até 1.440 mg/dl (~8x a concentração aceitável no tubo
de coleta de sangue)
4.7.6 Efeitos na Matriz de HbA1c – Amostras Congeladas e Não Congeladas
Para testar os efeitos na matriz no congelamento de tipos de amostras de sangue (sangue

venoso de EDTA – tubos de coleta de sangue tratados e as respectivas amostras
hemolisadas) na %HbA1c com medições de hemoglobina glicosilada no Premier Hb9210™,
20 amostras de pacientes foram comparadas como segue:
• Amostra hemolisada congelada vs. amostra hemolisada não congelada

• Lisados de sangue total congelado vs. amostra hemolisada não congelada
• Amostra hemolisada congelada vs. lisados de sangue total congelado
A análise no Premier Hb9210™ indicou que a amostra congelada não afetou os resultados
da amostra. A tendência calculada a partir da linha de regressão no ponto de decisão médio de
6,5% a 8,0% de HbA1c foi igual ou menor que 0,1% de HbA1c (geralmente reconhecidos nos
pontos de decisão).
4.7.7 Precisão da HbA1c
Precisão intra-ensaio – Todos os locais – Hemolisado: Os estudos de precisão entre os ensaios

compreende três amostras hemolisadas representando os níveis normal, ponto de decisão e
anormal de %HbA1c. As amostras foram analisadas durante 20 dias não consecutivos em um
local interno e dois locais externos. Cada local foi guarnecido com o mesmo conjunto de
amostras (sangue total fracionado e congelado) e conduzidos a realizar duas análises de cada
amostra por processamento com dois testes por dia (um total de 80 réplicas de cada nível por
local, 240 réplicas no geral). O estudo durou 35 dias. A imprecisão estimada de cada resultado
de amostra obtido a partir da análise dos três locais de estudo (resultados médios) é
apresentada abaixo:
Duração real do teste e número de locais: 35 dias, 3 locais

Número total de testes (se aplicável): 120 testes
Número total de observações (incluindo controles): 1.200 observações
Número de equipamentos usados na avaliação e como os 3 equipamentos, valores
resultados foram agrupados: individuais não agrupados
Número de lotes de reagentes: 1 número de lote por
reagente/coluna
Número de ciclos de calibração e lotes de calibração: 16 recalibrações após o início
do estudo, 1 lote de
calibrador usado.
Todos os locais:
Todos os laboratórios
Concentrações nas quais a pretensão é realizada; %HbA1c 5,76 7,07 10,96
Repetibilidade estimada do SD (Desvio Padrão), (Sr) 0,07 0,05 0,09
Repetibilidade do %CV = (Sr/média)*100 1,26 0,72 0,85
Estimativa do SD no equipamento, (ST) 0,09 0,09 0,16
%CV no equipamento = (ST/média)*100 1,62 1,28 1,50
Precisão intra-ensaios – Locais individuais – Hemolisado:

Os dados do estudo intra-ensaios de cada local individual são:
Local A: Externo
Local B: Externo
Local C: Interno
4.8 Referências do Capítulo
4.9 Relatório 510k do FDA
Relatório 510(k) – Premier Hb9210

Número: 510 (k)
Por meio deste, a Trinity Biotech submete-se ao tradicional

Introdução: relatório 510(k) para o equipamento Premier Hb9210 de
acordo com os requisitos da norma 21 CFR 807.92 para
demonstração da segurança, eficácia e equivalência
substancial do analisador por Cromatografia Líquida de
Alta Performance (HPLC) de afinidade do boronato e o
teste HbA1c com patente K891325.
Trinity Biotech
4231 E. 75th Terrace
Kansas City, MO 64132 USA
Contato: Britt Einspahr, Gerente de

Qualidade & Conformidade
E-mail: [email protected]
Proprietário e Telefone: 716-483-7402
Solicitante Fax: 816-214-4410
Contato: Bonnie DeJoy, Vice-Presidente

Corporativo de Assuntos
Regulatórios (Correspondente
Oficial)
E-mail: [email protected]
Telefone: 716-483-3851 Ramal 1030
Fax: 716-488-1990
Data: 8 de julho de 2011
Nome Patenteado: Analisador de HbA1c Premier Hb9210

Nome Comum: Premier Hb9210
Nome do Premier HbA1c

Equipamento Premier – A1c
Nome de Classificação: Teste de Hemoglobina Glicosilada

Classificação: Classe II, IVD
Código do LCP
Produto
O Premier Hb9210 é uma atualização do equipamento

predicado de HPLC, o Ultra2, que é o modelo atual sob a
Descrição do patente K891235. O Premier Hb9210 é um sistema de
Equipamento HPLC integrado, compacto e uma estação de trabalho com
o software Trinity Biotech AFFINITY para a determinação
quantitativa de hemoglobina glicosilada usando a química
de afinidade do boronato patenteada com cromatografia
líquida de alta performance.
Para a determinação quantitativa da hemoglobina A1c

(HbA1c) em sangue total coletado por punção venosa ou
Intenção de Uso picada no dedo. A HbA1c é útil na monitoração do controle
glicêmico a longo prazo em indivíduos com diabetes
mellitus.
Somente para uso em diagnóstico in vitro.
Equipamento K891235 – Método HPLC de Afinidade do Boronato –

Predicado: Modelo Atual: Ultra2
Comparação A tabela a seguir apresenta a comparação do Premier

com o Hb9210 e do teste HbA1c com o equipamento predicado.
Predicado:
Aspecto ou Característica Predicado Premier Hb9210
(K891235)
Destina-se à medição Para a determinação quantitativa

quantitativa da porcentagem de da hemoglobina A1c (HbA1c) em
Intenção de Uso hemoglobinas glicosiladas totais sangue total coletado por
no sangue total. Para uso em punção venosa ou picada no
diagnóstico in vitro. dedo. A HbA1c é útil na
monitoração do controle
glicêmico a longo prazo em
indivíduos com diabetes mellitus.
Somente para uso em
diagnóstico in vitro.
Substância Química Afinidade do Boronato Idem

patenteado
Tipos de Amostra EDTA Venoso ou Picada no EDTA venoso, Heparina ou

Dedo Fluoreto de Sódio ou Picada no
Dedo
Método HPLC Idem
Separação das Amostras de Cromatografia Idem

HbA1c
Controle do Equipamento Sistema Operacional Windows Idem

com Software do Teste do
Fabricante
Automação Totalmente automatizado Idem
Operação Contínua Idem
Coluna Matriz de Afinidade do Idem

Boronato
Matriz da Coluna Reabastecida, Reutilizada Idem
Reagentes Reagentes de Afinidade do Idem

Boronato
Fases de Solução 2 Idem

(K891235)
Fases Óticas 1 Idem
Integração da Separação do Pico e Idem

Cromatografia Determinação da Área
Comprimento de Onda do 413 nm Idem

Detector UV
Iluminação do Detector UV Lâmpada Incandescente LED
Calibração Com cada teste Idem

são usados dados da Cal de
cada amostra
ID da Amostra Inserida pelo Operador ou pelo Idem

Leitor de Código de Barras
Controles Com cada teste de acordo com Idem

as normas laboratoriais
Padrões / Rastreabilidade IFCC, NGSP Idem
Tempo do Teste 1 resultado / 2 minutos 1 resultado / minuto
Produção de Resultados Na tela e impresso Idem
Impressão Automática, selecionada pelo Idem

usuário
Unidades do Relatório %HbA1c (NGPD / DCCT) %HbA1c (NGPD / DCCT)

mmol/mol (IFCC)
Equação usada para o Valor %HbA1c = 0,558 * %GHb + %HbA1c = 0,558 * %GHb + 1,706
Final de HbA1c 1,706 mmol/mol = (%HbA1c -2,15) /
0,0915
Normas de Segurança dos Certificado IEC61010 Idem

Equipamentos Elétricos para
Uso IVD e Lab
(K891235)
Compatibilidade Certificado EMC Idem

Eletromagnética
Precisão intra-ensaio – Todos os locais – Hemolisado: Os estudos

de precisão entre os ensaios compreendem três amostras
hemolisadas representando os níveis normal, ponto de decisão e
anormal de %HbA1c. As amostras foram analisadas durante 20
dias não consecutivos em um local interno e dois locais externos.
Cada local foi guarnecido com o mesmo conjunto de amostras
(sangue total fracionado e congelado) e conduzidos a realizar duas
análises de cada amostra por processamento com dois testes por
dia (um total de 80 réplicas de cada nível por local, 240 réplicas no
geral). O estudo durou 35 dias. A imprecisão estimada de cada
resultado de amostra obtido a partir da análise dos três locais de
estudo (todos resultados médios) é apresentada abaixo:
Duração real do teste e número de

locais: 35 dias, 3 locais
Número total de testes (se 120 testes
aplicável):
Número total de observações 1.200 observações
Relatório do (incluindo controles):
Teste de Número de equipamentos usados na 3 equipamentos,
Desempenho avaliação e como os resultados valores individuais não
foram agrupados: agrupados
Número de lotes de reagente: 1 número de lote por
reagente/coluna
Número de ciclos de calibração e 16 recalibrações após o
lotes de calibração: início do estudo, 1 lote
de calibrador usado.
Todos os locais:
Concentrações nas quais a 5,75 7,05 10,94
pretensão é realizada; %HbA1c
Repetibilidade estimada do SD 0,07 0,05 0,09
(Desvio Padrão), (Sr)
Repetibilidade do %CV = 1,28 0,68 0,85
(Sr/média)*100
Estimativa do SD no equipamento, 0,09 0,09 0,16
(ST)
%CV no equipamento = 1,62 1,26 1,50
(ST/média)*100
Precisão intra-ensaios – Locais individuais – Hemolisado:
Os dados dos estudos intra-ensaios de cada local individual são:
Local A: Externo
(Sr/média)*100
(ST)
(ST/média)*100
Local B: Externo
(Sr/média)*100
(ST)
(ST/média)*100
Local C: Interno
(Sr/média)*100
Estimativa do SD do equipamento, 0,09 0,07 0,14
(ST)
%CV do equipamento = 1,55 1,04 1,27
(ST/média)*100
2
Exatidão – O valor r quando analisa padrões IFCC de HbA1c é
2 2
0,9998 e o valor r quando analisa 40 amostras vs. ultra é 0,9947.
Linearidade – A linearidade apresentada é de 3,8% - 23,1%HbA1c.

O Premier Hb9210 da Trinity Biotech e o equipamento predicado
fundamentam-se no mesmo método, tecnologia, materiais e
engenharia, sendo o Premier Hb9210 um novo modelo na linha de
Equivalência produtos de afinidade do boronato por cromatografia líquida de
Substancial alta performance. Todos os elementos essenciais e aspectos de
desempenho são idênticos ou funcionalmente equivalentes.
Concluiu-se que o Premier Hb9210 é funcionalmente equivalente,
seguro e eficaz para o uso pretendido.
CAPÍTULO 5
PREPARAÇÃO DO LOCAL
5.1 Introdução
Esta seção define os requisitos ambientais, físicos e elétricos do Sistema de Afinidade
Premier Hb9210™.
5.2 Descrição do Sistema
O sistema é composto do Sistema de Cromatografia Líquida de Afinidade do Premier Hb9210™

com HPLC, preparação/transporte de amostras, computador e impressora integrados.
Dimensões do Equipamento Altura: 29” (74 cm)

Largura: 21” (54 cm)
Profundidade: 26” (66 cm)
Peso do Equipamento 137 libras (62 kg)
5.3 Requisitos do Sistema
5.3.1 Requisitos Ambientais
Temperatura 10 – 40°C (50-140°F)

Umidade 10 – 90% (sem condensação)
Espaço Necessário da Bancada 30” (76 cm) de espaço na bancada com pelo
menos 30” (76 cm) de profundidade, com
capacidade de suportar 100 lbs (45 kg)
5.3.2 Requisitos Elétricos1
Voltagem da rede 110/120 VAC + 5%, -10%

220/240 VAC + 5%, -10%
Nota: 1A rede elétrica à qual o equipamento está conectado NÃO deve ser compartilhada
com outros equipamentos devido à potencial interferência e problemas de energia. Para
proteção do operador, os painéis do equipamento e o gabinete devem ser aterrados.
Verifique o sistema de aterramento antes de instalar o Sistema.
Frequência da Rede 48-66 Hz
Distúrbios da Rede Oscilações e quedas não devem ultrapassar ± 20% da
voltagem normal da rede. A tensão deve retornar ao
normal em 15 ms, transientes da rede > 10µs de largura do
pulso e >50% data taxa normal pode causar mal
funcionamento do equipamento.
Voltagem da Rede 100-240 VAC
Conexão Elétrica Tomada aterrada de 3 pinos
Consumo de Energia Máximo 250 watts
Classificação do Fusível 3,0 Amp, 250VAC, Qtd: 2, Tipi: GMA
5.4 Instalação
A instalação do Sistema de Afinidade Premier Hb9210™ somente pode ser realizada por
representantes autorizados da Trinity Biotech. A instalação não autorizada invalidará a
garantia do equipamento.
5.4.1 Transporte e Armazenagem dos Componentes antes da Instalação
1. Os componentes e o gabinete do sistema devem ser transportados em suas

embalagens individuais com as espumas. O SISTEMA NÃO PODE SER TRANSPORTADO
COM OS COMPONENTES DENTRO DO GABINETE.
2. Todo o sistema paletizado somente admite empilhamento de 1 unidade.
3. Observe todos os símbolos nas embalagens, conforme exibido na figura 5.5 abaixo.
4. Os componentes do sistema devem ser transportados e armazenados em um local
fresco e seco, a 10 – 40°C (50 – 104°F) e umidade relativa entre 10 e 90% (sem
condensação).
5.4.2 Técnicas Seguras de Levantamento
Ao içar o Sistema de Afinidade Premier Hb9210™, é importante usar técnicas seguras de

levantamento, conforme as instruções a seguir:
1. Posicione-se próximo ao equipamento.

2. Dobre os joelhos ao levantar o equipamento. NÃO ENCURVE AS COSTAS!
3. Deixe as pernas executar o levantamento enquanto mantém as costas retas.
4. Peça ajuda a outras pessoas, se necessário.
Figura 1: À esquerda: Técnica de À direita: Técnica de Levantamento
Levantamento Inadequada Adequada
5.4.3 Avisos sobre a Instalação do Equipamento

1. A tubulação de resíduos do sistema deve ser inspecionada para verificar se a drenagem
para um contêiner rotulado como bioperigoso ou um sistema sanitário de drenagem
está correta e adequada. A DRENAGEM INCORRETA DAS SOLUÇÕES DO SISTEMA PODE
RESULTAR EM BIORRISCO ÀS PESSOAS.
2. O descarte dos resíduos do sistema dever ser realizada de acordo com as normas
locais.
5.5 Símbolos Importantes
Símbolos Importantes (da esquerda para a direita):

• Biorrisco
• Aterramento
• Aterramento
• Aviso: Superfície Quente
• Interruptor de Energia Ligado/Desligado
• Transporte com cuidado
• Componentes Frágeis
• Não molhe
• Não use ganchos
• Não exponha os componentes a campos magnéticos intensos
• Caixa e componentes recicláveis
• Não empilhe mais de “X” unidades
• Essa extremidade para cima
• Ponto de aperto
• Ponto de esmagamento
• Não descarte os componentes em lixo doméstico (Diretiva WEEE)
A Figura 2, abaixo, exibe outros símbolos importantes listados na parte traseira do

equipamento.
Figura 2: Exemplo de etiqueta no painel traseiro
5.6 Inspeção
Inspecione todas as caixas. Se verificar algum sinal de danos externos, entre em contato com a
Trinity Biotech. Não abra as caixas até que um representante chegue ao local de instalação.
5.7 Precauções de Segurança
5.7.1 Verificações Regulares do Sistema de Aterramento
Requisitos: A resistência da conexão entre o terminal terra de proteção ou o contato aterrado

e as peças que precisam ser aterradas não deve ultrapassar 0,1 ohm. Isso é para segurança do
equipamento no caso de falha ou defeito.
Método do Teste: Uma corrente de teste AC ou DC passa entre o terminal terra de proteção e
as peças que precisam ser aterradas. A queda de tensão é medida e a resistência calculada. A
resistência do fio-terra do cabo da fonte de alimentação não está incluída.
Se a voltagem nominal da corrente do circuito sob teste for 16A ou menor, a corrente de teste,
a voltagem e a duração do teste são determinados como segue:
• A corrente de teste é 1,5 vezes a potência nominal da corrente do circuito sob teste;
• A voltagem do teste não deve ultrapassar 12V;
• A duração do teste é de 60 segundos;
• A resistência do condutor de ligação potencial, calculada a partir da queda de tensão,
não deve ultrapassar 0,1 ohm.
Observe que esse teste é realizado em condições de alta corrente, simulando uma falha no
aterramento. Medir a resistência com um DVM não é considerado suficiente, pois pode
ocorrer “pontos quentes” em condições de alta corrente.
Referências: Requisitos completos são fornecidos na IEC 60950, Cláusula 2.6.3.3 (2.5.11).
• Certifique-se de que o sistema esteja posicionado de modo a permitir acesso aos
dispositivos desconectados – cabo de força ou interruptor de energia – no caso de
perigo.
• O uso desse equipamento de maneira não especificada pelo fabricante pode prejudicar
ou desativar os recursos de segurança.
• Os contêineres para resíduos bioperigosos que podem ser retirados do equipamento
durante uso normal devem ser etiquetados com o símbolo de biorrisco mostrado na
seção 5.5 acima.
5.8 INSTRUÇÕES DE SEGURANÇA IMPORTANTES
PERIGO: O uso incorreto de equipamentos elétricos pode causar eletrocussão, queimaduras,

incêndio e outros riscos. Precauções básicas de segurança devem ser observadas, incluindo
todas as precauções listadas abaixo. LEIA ANTES DE USAR O EQUIPAMENTO.
• Verifique se os ajustes de voltagem são compatíveis com a voltagem da fonte de

alimentação.
• Conexão com a rede elétrica: onde o aterramento de proteção for necessário, conecte
o equipamento a uma tomada com conexão aterrada.
• Não coloque o equipamento sobre líquidos nem onde possa cair sobre líquidos.
• Se o equipamento for molhado, desconecte-o da rede elétrica antes de tocá-lo.
• Use o equipamento somente para o propósito descrito nas instruções de uso.
• Não use acessórios não fornecidos ou não recomendados pelo fabricante – isso
cancelará a garantia, reclamações e registros.
• Não use o equipamento se não estiver funcionando adequadamente ou se sofreu
algum dano. NOTA: Exemplos de defeitos típicos incluem:
1. Dano ao cabo de força flexível ou ao seu plugue;
2. Dano causado por queda do equipamento;
3. Dano causado por queda do equipamento na água ou respingos.
• Não deixe o equipamento ou o cabo flexível entrar em contato com superfícies muito
quentes;
• Não bloqueie as entradas de ar nem coloque o equipamento sobre uma superfície
macia que possa bloqueá-las, e mantenha as entradas de ar sem fiapos, pêlos, poeira,
etc.
• Não coloque nenhum objeto sobre o equipamento.
• A não ser que tenha sido especificamente instruído no manual de uso, não coloque
nada na abertura do equipamento ou em qualquer orifício ou acoplamento.
• Não use o equipamento onde sprays aerossóis são utilizados ou onde oxigênio seja
administrado.
• Não use o equipamento em ambientes externos.
NOTA IMPORTANTE: Guarde essas instruções para possíveis consultas futuras.

CAPÍTULO 6
PREPARAÇÃO PARA A OPERAÇÃO
6.1 Componentes do Teste
6.1.1 Requisitos para a Operação (com número da peça):
Reagentes
• Reagente Tampão A Premier Hb9210™ (Reagente de Eluição 1), 940 ml, (01-03-0095)
• Reagente Tampão B Premier Hb9210™ (Reagente de Eluição 2), 940 ml, (01-03-0096)
• Reagente de Diluição Premier Hb9210™ (para a Estação de Lavagem), 3,8 litros,
(01-03-0097)
• Reagente de Diluição Premier Hb9210™ (para a Seringa), 3,8 litros, (01-03-0097)
• Reagente de Lavagem Hb9210™, 940 ml, (01-03-0098)
• Água purificada
Calibradores
Controles
Software
Instalado no disco rígido da CPU do Premier Hb9210™
Coluna
Coluna de Afinidade do Boronato Premier Hb9210™ (09-06-0046)
Itens adicionais necessários (não fornecidos pela Trinity Biotech)

• Frascos de amostras – tubos de teste não tratados 13 x 75 mm para preparações de
amostras hemolisadas e CQ (03-07-0152, Tubos de Teste, Vacutainer™, Transparente,
kit c/ 100).
• Pipetador ajustável para diluições de amostra – faixa 1-200 µl e 1000 µl.
• Ponteiras descartáveis para pipetagem.
• Água purificada, filtrada, destilada e/ou deionizada para escorvar as linhas da cabeça
de lavagem da bomba – trocada semanalmente.
Itens adicionais recomendados, mas não necessários (não fornecidos pela Trinity Biotech)
• Autodiluidor (capacidade de amostragem 2 – 100 µl e dispensação 200 – 1000 µl).
• Álcool Isopropil.
6.2 Uso dos Reagentes e Armazenagem
1. Os reagentes estão prontos para uso.

2. Armazene-os em temperatura ambiente. Não use se o prazo de validade impresso na
etiqueta estiver vencido. Os frascos de reagentes ainda não abertos são estáveis até a data
da validade.
3. Os reagentes são estáveis por 30 dias em temperatura ambiente depois de abertos.
4. Mantenha os frascos de reagentes tampados enquanto estiverem sendo usados.
5. Os reagentes devem ser transparentes e incolores. Não use se estiverem turvados ou
manchados.
6. Não ingira ou pipete com a boca. Evite contato com os olhos.
Todos os reagentes não abertos são estáveis até a data de expiração da validade indicada no
frasco. Depois de abertos, o Reagente Tampão A Premier Hb9210™ e/ou o Reagente Tampão B
Premier Hb9210™ são estáveis por 30 dias. Não deixe o Reagente Tampão A Premier
Hb9210™ ou o Reagente Tampão B Premier Hb9210™ destampados. O Reagente de Diluição
Premier Hb9210™ e/ou o Reagente de Lavagem Premier Hb9210™ são estáveis por 30 dias.
Mantenha os frascos tampados quanto estiverem no equipamento ou guardados.
Para instalar os reagentes, veja o Capítulo 10.2.1.
Nota sobre o frasco de Água Purificada do Premier Hb9210™: a função desse líquido de
recirculação é limpar a parte traseira de cada vedação da cabeça da bomba. Como tal, não
afeta a química, já que nunca entra em contato com outros reagentes ou amostras de
pacientes ou a rota das amostras através do equipamento.
Na teoria, somente é necessário que seja água limpa para retirar os debris – por isso o nome
de “Água Purificada” na etiqueta. O operador do sistema pode escolher usar outros tipos de
água para limpeza como água deionizada, destilada e/ou Reagente de Lavagem Hb9210™da
Trinity Biotech.
6.3 Uso da Coluna e Armazenagem
1. Se uma coluna não for instalada imediatamente, ela deve ser armazenada em um
refrigerador a 2 – 8°C.
2. Deixe a coluna atingir a temperatura ambiente antes de instalá-la no sistema.
3. Se o equipamento não for usado por um período de sete dias ou mais, retire a coluna após
a desativação. Tampe cada extremidade e armazene em temperatura ambiente até estar
pronta para uso.
4. Siga todas as instruções contidas no capítulo 8.2.6 para a instalação da coluna. Veja a
seção 6.3.3 para uma consulta rápida sobre a instalação da coluna.
5.
Nota: Os reagentes e colunas são para uso no Premier Hb9210™ somente.
AVISO: Não adquira colunas ou reagentes de outras fontes ou vendedores.
6.3.1 Informações Gerais sobre as Colunas
A coluna HbA1c da Coluna Trinity Biotech é uma coluna de afinidade do boronato usada nos
analisadores de HPLC. Possuímos padrões altos de Garantia da Qualidade e cada coluna é
testada individualmente e passam por critérios rígidos antes de serem despachadas.
6.3.2 Armazenagem das Colunas
As colunas são transportadas em temperatura ambiente em uma caixa específica que oferece
proteção contra temperaturas excessivamente altas ou baixas e danos físicos. Ao receber as
colunas no laboratório, elas devem ser armazenadas em temperatura ambiente, embora seja
recomendada refrigeração em caso de longos períodos de armazenagem (acima de 7 dias). As
colunas devem ser protegidas contra congelamento. Quando uma nova coluna é instalada em
um equipamento, a coluna antiga deve ser retirada e descartada como resíduo bioperigoso.
6.3.3 Instalação da Coluna
Ao substituir a coluna, as seguintes etapas rápidas serão exibidas na tela:
Instruções para a Substituição da Coluna Premier Hb9210™:

1. Certifique-se de que o sistema esteja INATIVO. Caso contrário, DESATIVE o sistema.
2. Certifique-se de que o fluxo esteja em 0 ml/min.
3. Abra o forno desatarraxando o botão preto na frente do forno (sentido anti-horário).
5. Retire o encaixe na parte superior da coluna usando as pontas dos dedos.
6. Desenrosque a coluna da junta do forno (sentido anti-horário).
7. Escaneie o código de barras da nova coluna no sistema (na tela dos números de lote).
8. Solte os plugues de transporte da nova coluna.
9. Instale a nova coluna no encaixe da junta do forno. Rosqueie a coluna no encaixe (sentido
horário). Pare quando estiver apertada.
10. Coloque o tubo do detector no topo da coluna, rosqueie o encaixe (sentido horário) até
apertar.
11. Feche a porta do forno.
12. Rosqueie (sentido horário) o botão da porta do forno para prender a porta.
13. Substitua os dois filtros (pré-filtro de 2 mícrons e filtro de amostras de 75 mícrons).
15. Execute a calibração de base.
16. Executa a calibração da HbA1c.
17. Quando os controles estiverem dentro da faixa, proceda com a análise das amostras.
Prenda o tubo de modo que sua ponta esteja bem presa ao encaixe da
coluna. É imperativo que não haja vácuo entre a ponta do tubo e a entrada
ou saída da coluna.
CUIDADO:
6.3.4 Uso da Coluna
O uso e os cuidados apropriados da coluna incluem ativação e encerramento através do

software do equipamento com a coluna no lugar. Esses dois processos limpam e preparam a
coluna para uso. A ativação melhora o equilíbrio químico na coluna e o encerramento elimina
impurezas e a formação de sal no sistema e na coluna. Qualquer curto-circuito nesses
processos pode reduzir a vida útil de uma coluna. Até mesmo em laboratórios pequenos, onde
o equipamento é ativado (processando amostras ou em prontidão) 24 horas ao dia, deverá
haver uma rotina regular de encerramento e ativação.
6.3.5 Vida Útil da Coluna
A vida útil esperada da coluna é de 500 injeções.
6.3.6 Resumo
Manter o equipamento bem conservado e a prática de uma rotina diária de manutenção

garantirá a vida útil esperada da coluna. É muito importante que o laboratório mude seu
protocolo de modo que as colunas não sejam substituídas, exceto quando sua vida útil tenha
se esgotado e que essas instruções sejam seguidas. Entre em contato com o representante
local da Trinity Biotech, caso tenha alguma dúvida. O Depto. de Assistência Técnica pode ser
contactado diretamente para responder suas perguntas.
6.4 Requisitos das Amostras
6.4.1 Coleta
As amostras de sangue total devem ser coletadas assepticamente através de punção venosa
ou coleta capilar. EDTA é o anticoagulante recomendado. Heparina e fluoreto também são
aceitáveis para esse teste. Veja o Capítulo 4 para verificar as limitações das concentrações de
anticoagulante.
Nota: Certifique-se de que as amostras tenham sido completamente misturadas ao

anticoagulante.
6.4.2 Estabilidade da Armazenagem de Amostras de Pacientes
Em um estudo realizado pelo registro 510k da FDA para o Premier Hb9210™, uma análise da
estabilidade das amostras com amostras de sangue total (e hemolisado associado) em três
níveis diferentes de HbA1c foi realizada pelo teste de afinidade do boronato Premier Hb9210™
no dia 0, depois dividido em alíquotas armazenadas em cinco temperaturas diferentes (37°C,
20-25°C, 2-8°C, -20°C e -70°C) para análises em intervalos de amostragem subseqüentes
(dados da armazenagem de sangue total do 180° dia do estudo de 360 dias, dados da
armazenagem das amostras hemolisadas concluído através do 60° dia). Os limites de aceitação
são considerados aceitáveis se os resultados estiverem em 5% da tendência do resultado da
%HbA1c no tempo 0. Qualquer amostra fora da tendência matemática de 5% a partir do
tempo 0 é considerada inaceitável.
Estudo da Estabilidade da Armazenagem de Amostras no Premier Hb9210™
As pretensões da estabilidade da armazenagem das amostras hemolisadas e de sangue total

são listadas na tabela abaixo:
Temperatura de Armazenagem das Amostras

Tipo de Amostra -70°C -20°C 2-8°C 20-25°C 37°C
Sangue total 180 dias 45 dias 30 dias 6 dias 1 dia
Hemolisada 15 dias 10 dias 30 dias 6 dias 1 dia
Estabilidade da Armazenagem das Amostras Hemolisadas no Premier Hb9210™
Estabilidade da Armazenagem das Amostras de Sangue Total no Premier Hb9210™

6.4.3 Diluições de Amostras Anêmicas, Normais, pRBC e RBC Lavadas
Diluições on-line (amostras de sangue não diluídas) e off-line (amostras hemolisadas) com
baixa concentração de hemoglobina (amostras anêmicas) em níveis de %HbA1c de 5,85%,
8,0% e 9,5% podem ser consideradas equivalentes quando testadas no analisador Premier
Hb9210™, a tendência nos resultados da mesma amostra em concentração normal de
hemoglobina foi menor que 5%.
Diluições on-line (amostras de sangue não diluídas) e off-line (amostras hemolisadas) com alta
concentração de hemoglobina (amostras de células sanguíneas vermelhas agrupadas - pRBC)
em níveis de %HbA1c de 5,85%, 8,0% e 9,5% podem ser consideradas equivalentes quando
testadas no analisador Premier Hb9210™, a tendência nos resultados da mesma amostra em
concentração normal de hemoglobina foi menor que 5%.
Diluições on-line (amostras de sangue não diluídas) e off-line (amostras hemolisadas) com alta
concentração de hemoglobina que foram lavadas com solução salina (amostras de pRBC
lavadas) em níveis de %HbA1c de 5,85%, 8,0% e 9,5% podem ser consideradas equivalentes
quando testadas no analisador Premier Hb9210™, a tendência nos resultados da mesma
amostra em concentração normal de hemoglobina foi menor que 5%.
6.4.4 Diluições de Amostras de HbA1c
Para medir a HbA1c, sangue total agitado ou células vermelhas agrupadas (pRBCs) podem ser
usadas para diluições on-line (preparadas no equipamento) ou off-line (pipetagem manual).
Volume de Amostra: normalmente é necessário um mínimo de 1 ml de hemolisado, 1 ml de
células vermelhas agrupadas ou 2 ml de sangue total agitado. As diluições adequadas para uso
no Sistema de Afinidade Premier Hb9210™ são as seguintes:
Função do Rack de Amostras de Sangue Total

• O Premier Hb9210™ diluirá automaticamente amostras de sangue total sedimentado
(incluindo amostras anêmicas com uma camada de pRBC suficiente) a uma diluição
1:150 quando essa função específica for selecionada no equipamento.
Função do Rack de Amostras Hemolisadas

• Preparação das Amostras Anêmicas Hemolisadas: diluição manual (off-line) 1:75 de um
tubo de sangue total agitado de uma amostra anêmica.
• Preparação das Amostras Normais Hemolisadas: diluição manual (off-line) 1:150 de um
tubo de sangue total agitado de uma amostra com hematócritos normais.
• Preparação de pRBC Hemolisadas: diluição manual (off-line) 1:300 de um tubo de
sangue total não agitado de uma amostra anêmica.
Função do Rack de Amostras Anêmicas
• O Premier Hb9210™ diluirá automaticamente amostras anêmicas não sedimentadas a
uma diluição 1:75 quando essa função específica for selecionada no equipamento.
Enquanto que na maioria das vezes uma amostra anêmica pode ser analisada no rack
de sangue total se existir uma camada de pRBC suficiente, pode não haver pRBCs
suficientes para amostragem (e a área total da amostra pode não estar acima da área
total mínima aceitável). Nesse caso, o tubo pode ser agitado, colocado no rack de
amostras anêmicas e depois esse rack ser analisado imediatamente. O parâmetro de
diluição do rack de amostras anêmicas eleva a quantidade geral de amostra tirada para
análise. Se a agitação da amostra anêmica antes de ser colocada no rack produzir uma
área total abaixo do mínimo, uma diluição off-line da amostra será necessária. A
diluição final pode ser ajustada manualmente para produzir uma área total dentro da
faixa aceitável do equipamento.
6.4.5 Erros comuns nos tubos de amostras
Os erros comuns relacionados aos tipos de amostra e ao carregamento de amostras (e como

evitá-los) no Premier Hb9210™ são os seguintes:
1. Sempre que possível, posicione a etiqueta de código de barras do tubo de amostra

desejado voltada para a abertura esquerda do rack.
2. Não coloque as amostras de sangue total no rack H (amostras hemolisadas). Isso injetará
uma amostra não diluída no sistema. A área total da amostra estará acima dos limites
máximos de aceitação. Execute várias calibrações de base para limpar o sistema e garantir
uma linha de base plana.
3. Não coloque as amostras hemolisadas no rack W (amostras de sangue total) ou no rack A
(amostras anêmicas). A colocação de amostras diluídas (hemolisadas) em um rack W ou A
resultará e uma amostra muito fraca (“curta”). Utilize o rack correto para cada tipo de
amostra.
4. Não coloque (ou deixe) mais de três etiquetas de código de barras em um tubo de
amostra. A presença de muitas etiquetas em um tubo de amostra não permitirá que o
tubo gire corretamente durante a leitura do código de barras (quando ativada). Como
sempre, a etiqueta de código de barras deve ser alinhada à esquerda, de modo que não
seja necessária nenhuma rotação para a leitura do código de barras.
5. Retire o septo (tampa) do tubo dos tipos de amostra a seguir:
a. Amostras de Calibradores e Controles
b. TODAS as amostras hemolisadas
c. Qualquer tubo de amostra hemolisada/sangue que será amostrada repetidamente pelo
sistema.
6.4 Limitações do Teste
Além dos interferentes listados no Capítulo 4, há as seguintes limitações do teste de HbA1c:
• Sobrevivência de RBC Anormal – a análise correta de HbA1c depende de hemoglobina

normal com vida útil típica. Como em todas as metodologias de análise de HbA1c,
pacientes com RBC com vida útil reduzida, como ocorre em anemias hemolíticas,
apresentarão um decréscimo nos valores de HbA1c, com redução da vida útil
dependendo da gravidade da anemia e/ou presença de hemoglobinas instáveis como
HbSS, HbCC e HbSC. Pacientes com células vermelhas com vida útil estendida, como
ocorre na policetemia ou após esplenectomia, podem apresentar aumento nos valores
de HbA1c. Anemia por deficiência de ferro pode produzir resultados altos falsos.
Testes de GPP e frutosamina são recomendados para essas condições.
• Amostras Degradadas
Não congele/descongele amostras mais de uma vez. Não mantenha as amostras além
dos prazos de estabilidade apresentados na seção 6.4.2. Devido ao potencial
descongelamento existente em um freezer “frost-free”, quando possível, evite
armazenar amostras nesse tipo de freezer. A transparência das amostras congeladas (-
20°C a -80°C) deve ser verificada. Amostras hemolisadas que parecerem turvas ou
apresentar precipitação devem ser filtradas (.45 mícrons) ou centrifugadas antes da
análise. Isso protege as linhas do equipamento e aumenta a vida útil do filtro e da
coluna analítica. Se for necessário armazenagem por longos períodos, cada laboratório
deve investigar a estabilidade das amostras em suas instalações.
6.6 Preparação dos Calibradores e Controles da Hemoglobina HbA1c
6.6.1 Calibradores da Hemoglobina HbA1c da Trinity Biotech
Instruções para reconstituição dos calibradores, seus valores e pretensão de estabilidade são
encontradas na Bula do Calibrador da Hemoglobina HbA1c da Trinity Biotech.
O sistema deve ser recalibrado:
1. Quanto o equipamento for instalado pela primeira vez.

2. Quando uma coluna for substituída.
3. Se os valores dos controles estiverem fora da faixa aceitável.
4. Quando forem alterados os números de lote ou os valores do material de
referência.
5. A cada seis meses para fins de inspeção.
Liofilizados: Frascos liofilizados do Calibrador de Hemoglobina Glicosilada da
Trinity Biotech armazenados a ≤8°C são estáveis até a data de validade na
etiqueta.
Reconstituídos: Uma vez reconstituído, o Calibrador de Hemoglobina
Glicosilada da Trinity Biotech é estável a 2°C a 8°C por 30 dias.
Diluídos: Amostras diluídas do Calibrador de Hemoglobina Glicosilada da
Trinity Biotech são estáveis por 8 horas a 20°C-25°C.
NÃO USE depois de expirada a data de validade.
6.6.2 Calibradores da Hemoglobina HbA1c da Trinity Biotech
Os controles de nível normal e diabetes devem estar inclusos em cada lote para monitorar o
desempenho do sistema. Instruções para reconstituição dos controles e suas faixas/valores
alvo são encontrados na Bula dos Controles da Hemoglobina HbA1c da Trinity Biotech.
Liofilizados: Frascos liofilizados do Controle de Hemoglobina Glicosilada da

Trinity Biotech armazenados a ≤8°C são estáveis até a data de validade na
etiqueta.
Reconstituídos: Uma vez reconstituído, o Controle de Hemoglobina
Glicosilada da Trinity Biotech é estável a 2°C a 8°C por 30 dias.
Diluídos: Amostras diluídas do Controle de Hemoglobina Glicosilada da Trinity
Biotech são estáveis por 8 horas a 20°C-25°C.
NÃO USE depois de expirada a data de validade.

CAPÍTULO 7
COMPONENTES DO HARDWARE
7.1 Introdução
Esta seção apresenta os requisitos ambientais, físicos e elétricos, operação básica e descrição
do Sistema Premier Hb9210™, que é composto de autoamostrador, bomba, detector e sistema
de gerenciamento de dados. Todos os componentes do Premier Hb9210™ são controlados
pelo software AFFINITY. Os requisitos elétricos do sistema são encontrados no Capítulo 5,
Seção 3. A Figura 1 abaixo apresenta o sistema Premier Hb9210™ sem as tampas para que
todos os módulos possam ser identificados claramente.
Figura 1: Sistema Premier Hb9210™ sem as tampas

Legenda da Figura 1:
- Reagent Storage = Depósito de Reagentes - Barcode Wand = Leitor de Código de Barras

- Detector Module = Módulo do Detector - Syringe Module = Módulo da Seringa
- Pump Module = Módulo da Bomba - Display = Monitor
- Oven Module = Módulo do Forno - CPU Module = Módulo da CPU
- Injector Module = Módulo de Injeção - Probe Module = Módulo da Sonda
- Sample Transport Module = Módulo de
Transporte de Amostras
7.2 Sistema do Autoamostrador
O Sistema do Autoamostrador é composto de um módulo de transporte de amostras

(transportador), um módulo da sonda e um módulo da válvula de injeção.
7.2.1 Descrição do Módulo de Transporte
O módulo de transporte de amostras tem a função de acomodar até 21 racks (cada rack linear
comporta 10 tubos de amostra). Existem três tipos de rack: para amostras de sangue total,
amostras hemolisadas e amostras anêmicas. Cada rack possui uma letra e um número de
identificação único com um código de barras correspondente. W é para sangue total, H é para
amostras hemolisadas (diluição off-line 1:150) e A para amostras anêmicas (uma diluição final
de hemoglobina aumentada será preparada automaticamente). Todos os racks acomodam
tubos de amostra padrão 13 x 75 mm com septo (BD™ e Sarstedt™ padrão). Amostras de
sangue total não precisam ser agitadas. Os materiais de Controle de Qualidade (CQ) são
acomodados em um carrossel de CQ com cinco posições para um processamento totalmente
personalizado, com amostragem de CQ repetidas de uma preparação hemolisada individual de
cada material.
NÃO USE racks de amostras diferentes daqueles fornecidos pela Trinity

Biotech. A não observância desse aviso acarretará erros de amostragem,
erros na identificação das amostras, erros/danos na sonda e/ou
erros/danos no transportador de amostras.
AVISO:
7.2.2 Descrição do Módulo da Sonda
O módulo da sonda é composto de uma sonda de perfuração do septo (com rotação da sonda
para leitura do código de barras durante a amostragem) e uma estação de preparação de
amostras integrada (placa de imersão). A sonda consiste de uma sonda de perfuração de septo
funcionando no eixo z. Sob a sonda, a estação de preparação de amostras se move para dentro
e para fora, permitindo que a sonda entre em quatro pontos distintos (começando da parte
posterior):
1. Estação de Lavagem – As diluições das amostras e a lavagem da sonda ocorrem aqui.

Uma bomba introduz Reagente de Diluiçao Premier Hb9210™ na estação de lavagem
entre as amostras. Consulte também a seção “Ativar Estação de Lavagem”.
2. Porta de Injeção – Depois que uma amostra diluída é obtida (sangue total diluído na
estação de lavagem ou uma amostra direta hemolisada), ela é injetada na porta de
injeção que está conectada ao circuito de amostras. Após a injeção, o tubo da porta de
injeção e a parte superior da porta de injeção são lavados com o Reagente de Diluição
Premier Hb9210™preparando o sistema para a próxima amostra.
3. Guia da Sonda – estabiliza a sonda enquanto realiza a amostragem dos tubos de
sangue na área de transporte de amostras e também auxilia na retirada da sonda do
septo da amostra.
4. Amostras STAT – Sangue total, sangue total anêmico ou hemolisado, conforme
selecionado através da interface com o software.
NÃO retire o módulo da sonda do analisador puxando o cabo giratório! Use

os pegadores nas laterais da sonda. A não observância desse aviso
acarretará erros de amostragem, erros de identificação das amostras,
erros/danos na sonda e/ou erros/danos no transportador de amostras.
AVISO:
7.2.3 Descrição do Módulo de Injeção
O módulo de injeção é composto de uma válvula de injeção com seis portas e duas posições
com circuito de amostragem de 5 microlitros posicionado verticalmente. O circuito de
amostragem permite que a amostra de sangue diluída seja introduzida em um circuito de
amostragem com volume fixo em baixa pressão. Ao ativar a válvula, o jato do fluido da bomba
é conduzido através do loop para empurrar a amostra para a coluna e o detector. Depois de
alguns segundos, a amostra é injetada e a válvula volta a ser ativada (de modo que o circuito
de amostragem possa ser limpo e a próxima amostra ser carregada). A amostra é introduzida
da parte inferior esquerda e pré-filtrada antes de entrar na válvula de injeção através de uma
tela de 75 mícrons. Os resíduos da injeção de amostras são expelidos da parte superior direita,
os reagentes da bomba são introduzidos a partir da parte inferior direita e do filtro de
amostras, e o pré-aquecedor da coluna é conectado à parte superior direita.
7.3 Bomba
7.3.1 Descrição do Sistema
A bomba é um microprocessador controlado por um sistema binário capaz de distribuir perfis

gradientes de reagentes. O sistema utiliza uma caixa solenóide removível para injetar
automaticamente reagente de lavagem para lavar as bombas, tubos, coluna e a célula de fluxo
quando o sistema realiza um encerramento automático. Um canal de lavagem na cabeça da
bomba ajuda a manter os pistões limpos, lavando-os continuamente enquanto o sistema é
bombeado. Um T estático de agitação é usado para agitar os reagentes. Uma válvula de
purificação é fornecida para ajudar na escorvamento do sistema.
7.4 Aquecedor da Coluna
7.4.1 Descrição do Sistema
O aquecedor da coluna está localizado acima da válvula de injeção. O aquecedor garante

temperatura estável da coluna de afinidade do boronato. À esquerda do forno um cambiador
de calor cilíndrico contendo ~0,5 metros de tubo I.D. de 0,010” para pré-aquecer o reagente
que é introduzido.
7.4.2 Especificações do Desempenho
Faixa de Temperatura 30-80°C

Estabilidade da Temperatura ±0,2°C
Repetibilidade da Temperatura ±0,5°C
Exatidão da Temperatura ±0,5°C
Cutout de Segurança 90°C
7.5 Detector
7.5.1 Descrição do Detector
O detector é um microprocessador com base em LED controlado por um detector de

absorbância de comprimento de onda. A lâmpada LED é ajustada no comprimento de onda
apropriado para a operação do Sistema Premier Hb9210™. O detector possui uma faixa de
sensibilidade entre 0,001 a 2,0 AUFS (Unidade de Absorbância, Escala Completa). O detector é
controlado através do Software AFFINITY.
7.6 Gerenciamento dos Dados
7.6.1 Descrição do Gerenciamento de Dados
USE somente software fornecido pela Trinity Biotech em seu Sistema

Premier Hb9210™. Recursos da CPU e/ou softwares maliciosos (vírus)
podem causar erros na operação do sistema. Em caso de dúvida, entre em
contato com o representante local da Trinity Biotech.
AVISO:
O sistema de gerenciamento de dados é composto de uma CPU, um monitor touchscreen

colorido, impressora e um scanner de código de barras portátil combinado com o Software
AFFINITY. A CPU funciona com o sistema operacional Windows™.
7.6.2 Características Físicas
Devido à rápida evolução dos computadores de hoje, os parâmetros específicos não serão
incluídos neste manual. Se precisar de informações específicas sobre o seu computador, entre
em contato com a Trinity Biotech.
7.7 Leitores de Código de Barras
7.7.1 Caneta Leitora de Código de Barras
A caneta leitora de código de barras é usada para a introdução rápida de informações sobre o
número de lote (e outros) a partir das etiquetas dos consumíveis. Notas importantes:
1. A caneta deve iniciar o processo de leitura do código de barras na lateral do símbolo

de código de barras sem linhas.
2. A caneta deve prosseguir através do centro de todo o símbolo do código de barras
numa velocidade constante, sem parar.
3. Enquanto efetua a leitura, a caneta deve ser segurada em um ângulo pequeno (não
superior a 45 graus) em relação à etiqueta para um melhor desempenho da leitura
(veja a figura 2).
Figura 2 – Vista lateral da superfície da etiqueta de código de barras com ângulo ideal da
caneta
A caneta emitirá um “beep” após uma leitura bem sucedida de uma etiqueta de código de
barras.
Precauções ao ler as etiquetas de código de barras:
1. Deixe a etiqueta o mais plana possível (quando estiver distorcida).

2. O scanner não consegue ler as etiquetas sob luz direta do sol ou locais extremamente
iluminados.
3. É possível a leitura dos códigos de cabeça para baixo.
4. Mova a caneta da esquerda para a direita através da seção mediana da etiqueta,
conforme mostrado na Figura 3:
Leitura Correta Leitura Incorreta
Figura 3 – Movimento correto (e incorreto) da caneta através da etiqueta de código de

barras
7.7.2 Leitor de Código de Barras no Transportador
O leitor de código de barras no transportador de amostras identifica o tipo de rack de

amostras (H – amostras hemolisadas, W – sangue total ou A – amostras anêmicas) e também
identifica a ID da amostra a partir da etiqueta de código de barras no tubo de amostra. O
diagrama abaixo exibe o alinhamento correto (e o incorreto) do leitor de código de barras
sobre a etiqueta (o exemplo A é o único correto):
Entre em contato com o Depto. de Assistência Técnica do representante da Trinity Biotech

para melhorar o alinhamento do código de barras e do rack se os códigos de barras não forem
identificados corretamente. Quando o leitor de código de barras está alinhado corretamente e
a etiqueta no tubo de teste está visível no lado esquerdo do rack, normalmente a taxa de
leitura é >95%.
7.8 Protocolo de Descontaminação para Procedimentos de Manutenção e
Descarte
O Sistema Premier Hb9210™ deve ser descontaminado antes dos procedimentos de

manutenção, reparo, transporte ou descarte. Execute a descontaminação completa antes
desses procedimentos. Salvo quando especificado, o Técnico de Serviço ainda precisará
observar as precauções de biorrisco a seguir, como sempre.
Segue abaixo o processo de descontaminação:
1. Antes da limpeza, utilize equipamentos de proteção pessoal como luvas, máscaras,

óculos e jaleco.
2. Limpe a sonda e a área da porta de injeção com cotonete e álcool isopropil 70% ou
superior. Descarte o cotonete em contêiner para materiais bioperigosos.
3. Limpe as superfícies externas com solução de limpeza (uma solução de 10% de
alvejante em água morna – preparada com menos de 7 dias de antecedência) e deixe
secar ao ar. Ao limpar, preste atenção às áreas que são mais tocadas/manipuladas:
a. Tela de toque
b. Teclado
c. Área de transporte de amostras
d. Tampas externas
e. Leitor de código de barras
f. Racks de amostras
4. Execute uma rotina de limpeza enzimática manual (se aplicável) e depois o
encerramento/desativação padrão do sistema.
Para o descarte, devolva o(s) módulo(s) e/ou o equipamento ao distribuidor local, de acordo
com a diretiva 2002/96/EC para descarte de equipamentos eletroeletrônicos, se aplicável. A
Diretiva para Descarte de Equipamentos Eletroeletrônicos (Diretiva WEEE) é a diretiva
2002/96/EC da Comunidade Europeia sobre descarte de equipamentos eletroeletrônicos
(WEEE) que, juntamente com a Diretiva 2002/95/EC, tornou-se Lei Europeia em Fevereiro de
2003, estabelecendo os objetivos de coleta, reciclagem e recuperação de todos os tipos de
produtos eletroeletrônicos.
Orientações importantes da diretiva WEEE:
1. Não descarte os equipamentos eletroeletrônicos em lixo doméstico e colete-os

separadamente;
2. A Trinity Biotech disponibiliza sistemas de devolução e coleta de equipamentos
eletroeletrônicos;
3. Cada laboratório tem a função de contribuir com a reutilização, reciclagem e outras
formas de recuperação dos produtos eletroeletrônicos;
4. Há efeitos potenciais no ambiente e na saúde humana devido à presença de
substâncias potencialmente perigosas nos equipamentos eletroeletrônicos;
5. O símbolo exibido abaixo indica que nenhum produto eletroeletrônico deve ser
descartado em lixo doméstico e que esse equipamento contém peças
eleltroeletrônicas que devem ter um procedimento de coleta especial.
CAPÍTULO 8
MANUTENÇÃO
8.1 Introdução, Visão Geral do Equipamento e Componentes

Esse capítulo apresenta uma visão geral e figuras detalhadas de cada componente do Premier
Hb9210™. Além disso, serão explicados os procedimentos de ativação e manutenção específica
de cada componente. As listas de verificação de manutenção incluem sugestões de
procedimentos diários, semanais e gerais e podem ser incorporadas a um livro de registro do
laboratório. Cada procedimento apresenta as ferramentas e os materiais necessários. Todas as
ferramentas necessárias para o procedimento estão inclusas no equipamento.
Figura 1: Vista frontal do Premier Hb9210™ (sem as tampas)

Legenda da Figura 1:
- Reagent Storage = Depósito de Reagentes - Barcode Wand = Leitor de Código de Barras

- Detector Module = Módulo do Detector - Syringe Module = Módulo da Seringa
- Pump Module = Módulo da Bomba - Display = Monitor
- Oven Module = Módulo do Forno - CPU Module = Módulo da CPU
- Injector Module = Módulo de Injeção - Probe Module = Módulo da Sonda
- Sample Transport Module = Módulo de
Transporte de Amostras
1. Módulo do Detector: contém os elementos óticos, célula de fluxo e lâmpada LED.

2. Módulo da Bomba: contém as cabeças da bomba dual, módulo manométrico e válvula
de purgação.
3. Módulo do Forno: pré-aquece a amostra e acomoda a coluna de boronato.
4. Transportador de Amostras / Módulo de Transporte: um transportador de racks que
move automaticamente os racks de amostras e o material de CQ no Carrossel de
Controles para a posição de amostragem.
5. Módulo da Sonda: usando uma sonda de perfuração do septo, o módulo da sonda
obtém e dilui as amostras com Reagente de Diluição Premier Hb9210™ para serem
injetadas no caminho de fluxo de alta pressão onde são filtradas, separadas e
detectadas.
6. Módulo da Seringa: Controla uma seringa de 500 microlitros.
7. Módulo da CPU, Monitor e Impressora.
NOTAS:
1. Não ative o sistema se as tampas ou os painéis de acesso tiverem sido retirados ou se
estiverem danificados.
2. Se as partes em movimento estiverem inevitavelmente expostas durante o uso normal,
esteja ciente de que os procedimentos podem causar ferimentos, mesmo se executados
por pessoal treinado. Somente operadores que foram avisados dos riscos potenciais e que
receberam treinamento adequado sobre como executar os procedimentos da maneira
mais segura possível podem tentar os procedimentos. Entre em contato com a Trinity
Biotech para obter mais informações.
3. Não tente realizar nenhum procedimento no equipamento até que a descontaminação
tenha sido concluída. O fabricante ou o distribuidor deve ser consultado se houver
qualquer dúvida sobre a compatibilidade dos agentes de descontaminação ou limpeza.
4. As pressões no sistema podem chegar a 100 bar (1470 psi) em raras circunstâncias.
Devido ao volume muito baixo de reagente no sistema, o risco é mínimo.
Afrouxar o encaixe na cabeça da bomba enquanto é coberta com uma toalha pode
eliminar a pressão no sistema. Entre em contato com a Trinity Biotech para obter mais
informações.
8.1.1 Manutenção Diária
• Verificar os volumes de reagentes/água purificada. Tempo exigido: 5 minutos.

• Extrair o ar da tubulação de reagentes, se necessário. Tempo exigido: 5 minutos.
• Verificar a alimentação de papel da impressora. Tempo exigido: 3 minutos.
• Registrar a pressão do sistema, trocar o filtro de 2 mícrons se for superior a 75 bar.
Tempo exigido: 5 minutos.
8.1.2 Manutenção Semanal
• Trocar a água purificada para lavagem da cabeça da bomba. Tempo exigido: 5 minutos.
8.2 Iniciar
8.2.1 Instalar os Reagentes
Materiais necessários:
1. Reagente Tampão A Premier Hb9210™, 01-03-0095

2. Reagente Tampão B Premier Hb9210™, 01-03-0096
3. Reagente de Diluição Premier Hb9210™ (para a Estação de Lavagem), 01-03-0097
4. Reagente de Diluição Premier Hb9210™ (para a Seringa), 01-03-0097
5. Reagente de Lavagem Hb9210™, 01-03-0098
6. Água purificada (água purificada, filtrada, destilada e/ou deionizada), 01-03-0099
Ferramentas necessárias: Nenhuma
Tempo exigido: 10 minutos
Procedimento:
1. Antes de instalar os reagentes, os números de lote devem ser escaneados. Isso é mais fácil
se os reagentes não forem colocados na bandeja de reagentes do equipamento.
2. Selecione a tela apropriada para o primeiro reagente a ser escaneado (neste exemplo,
Buffers [Tampões]):
3. Pressione o ícone SCAN REAGENTS (imagem com código de barras amarelo) e depois
escaneie o código de barra do primeiro reagente a ser instalado. Depois de introduzir o
código de barras do primeiro frasco corretamente, o sistema exibirá a seguinte caixa de
diálogo:
Instruções para Substituição do Frasco de Reagente do Premier Hb9210™:

1. Com o fluxo do sistema em 0,0 ml/minuto (no modo Standby ou Inativo) e após o código
de barras de um novo frasco de reagente ter sido escaneado, retire o frasco antigo do
analisador.
2. Desenrosque a tampa do reagente e retire as mangueiras do frasco. CUIDADO – não puxe
as mangueiras do reagente – isso pode prejudicar o desempenho do sensor de nível de
líquidos e/ou danificar as mangueiras.
3. Seque as mangueiras do frasco com um pano limpo e evite que as pontas das mangueiras
toquem a bandeja de reagentes ou outras superfícies.
4. Retire o frasco vazio do sistema.
5. Retire a tampa do novo frasco de reagente. Retire o selo do frasco e coloque-o na bandeja
de reagentes.
6. Introduza as mangueiras do reagente no novo frasco e aperte a tampa. Certifique-se de
que as mangueiras não estejam torcidas ou cruzadas desde o equipamento até o topo do
frasco.
7. Repita os passos 1 – 6 se precisar substituir outros reagentes.
8. Deixe o sistema realizar o Auto-Prime (Autoescorvamento) de todos os reagentes que
foram substituídos, de acordo com a(s) caixa(s) de diálogo.
9. Quando todos os controles estiverem dentro da faixa, a análise da amostras pode
prosseguir. Não é necessário calibrar, exceto se os controles estiverem fora da faixa.
Ao instalar os reagentes pela primeira vez, as linhas de reagentes são codificadas por cor
conforme abaixo (cada linha inclui uma mangueira para o reagente e uma mangueira
maior para o sensor de nível de líquidos – uma mangueira transparente maior):
1. A linha vermelha vai para o frasco de Reagente Tampão A Premier Hb9210™.

2. A linha azul vai para o frasco de Reagente B Premier Hb9210™.
3. A linha transparente individual vai para o frasco de Reagente de Lavagem Premier
Hb9210™.
4. As linhas duplas transparentes (sem a linha do sensor de nível de líquidos) vão
para o frasco de Água Purificada (o conteúdo do frasco de Água Purificada deve ser
substituído semanalmente).
5. A segunda linha amarela da parte traseira do equipamento (do topo do gabinete)
abastece o módulo da sonda e vai para o frasco de Diluente Premier Hb9210™ à
esquerda.
6. A linha amarela mais ao fundo (do topo do gabinete) abastece o módulo da
seringa e vai para o frasco de Diluente Premier Hb9210™ à direita.
Legenda:
- Rinse Diluent = Diluente de Lavagem
- Syringe Diluent = Diluente da Seringa
- Wash Reagent = Reagente de Lavagem
- Reagent A = Reagente A
- Reagent B = Reagente B
- Purified Water = Água Purificada
8.2.2 Bombas de Escorvamento A & B / Lavagem
Será necessário escorvar a fase móvel sempre que o caminho do fluxo do solvente for aberto
na bomba (por exemplo, para substituir a válvula de retenção ou as vedações da bomba), se
houver bolhas nas linhas do solvente ou se a flutuação de pressão for inaceitável. Tudo isso
pode ser feito através do software, seguindo este procedimento simples:
Materiais necessários: Reagentes instalados (passo 8.2.1)

Tempo necessário: 5 minutos
Procedimento:
1. Na tela Main Menu, selecione “Devices”, “Pumps” e depois “Purge Pumps”.
2. Defina o tempo de escorvamento em pelo menos 2 minutos.
3. Depois de concluído, inspecione o sistema para verificar se há bolhas de ar ou se a bomba
não foi escorvada.
Certifique-se de remover todas as bolhas de ar dos extratores de bolhas

diariamente, durante e depois da escorvamento. Os extratores de bolhas
estão localizados nas linhas de abastecimento para as bombas A e B. Para
remover as bolhas dos extratores: retire a tampa, deixe o extrator ser
AVISO: preenchido com reagente e aperte a tampa.
8.2.3 Escorvar a câmara de lavagem do pistão com água purificada
A lavagem do pistão é feita com Água Purificada (purificada, filtrada, água deionizada e/ou
destilada) que é usada continuamente para lavar o pistão enquanto a bomba está
trabalhando. É o frasco com dois tubos transparentes na tampa. Essa água purificada recicla
através das duas bombas e deve ser trocada semanalmente. O escorvamento (ausência de
bolhas de ar grandes) nas linhas de Água Purificada até as cabeças das bombas deve ser
verificado diariamente. NOTA: é normal que pequenas bolhas de ar se movimentem nas
linhas.
Materiais necessários: Água Purificada (purificada, filtrada, deionizada e/ou destilada)

Ferramentas necessárias: Seringa de Escorvamento
Procedimento:
1. Certifique-se de que o sistema esteja no modo STANDBY (PRONTIDÃO).
2. No Software AFFINITY, selecione DEVICES e depois PUMPS/SOLVENT SYSTEM. Ajuste o
fluxo em 1,00 ml/min, 50% Pump B e selecione Mobile Phase (o botão radial está
selecionado). Pressione SET.
3. Coloque a seringa de escorvamento na conexão T localizada à direita da bomba em uma
das duas linhas de lavagem da cabeça da bomba de recirculação. Gire o braço da conexão
T para baixo (para longe do frasco) e puxe de volta o êmbolo da seringa. Gire o braço do T
de escorvamento na direção do ponto de conexão da seringa. Retire a seringa e ejete a
água purificada. Repita o procedimento até que todo o ar seja retirado da linha do
solvente entre o frasco de Água Purificada e a válvula de escorvamento.
4. Coloque a seringa de escorvamento no mesmo T, mas gire o braço do T de escorvamento
para cima. Puxe o êmbolo da seringa. Gire o braço do T de escorvamento na direção do
frasco. Pressione a seringa para empurrar a água purificada através das cabeças da bomba.
Repita o procedimento até que todo o ar tenha sido extraído das linhas de lavagem da
cabeça da bomba e retornado ao frasco.
8.2.4 Escorvar o Diluidor (Reagente de Diluição Premier Hb9210™)
O Reagente de Diluição Premier Hb9210™ é usado pelo módulo da seringa para aspirar as
amostras e para ajudar a limpar a sonda de perfuração do septo. A presença de ar na linha
entre o frasco do Reagente de Diluição Premier Hb9210™ e a sonda de perfuração do septo
causará diluições incorretas. O escorvamento do Reagente de Diluição Premier Hb9210™ é
totalmente realizado através do software.
Materiais necessários: Reagente de Diluição Premier Hb9210™, 3,8 litros, 01-03-0097

Procedimento:
1. Verifique se a linha de entrada da válvula de bronze está totalmente submersa no
Reagente de Diluição Premier Hb9210™.
2. Verifique se as duas pontas da seringa do diluidor estejam bem apertadas com a mão.
3. Verifique se a tubulação de entrada e transferência esteja bem presa ao tubo da seringa
(bloco de bronze acima da seringa).
4. No Software AFFINITY vá para DEVICES, Injector e clique em Prime Dilutor.
5. Uma caixa de diálogo aparecerá, o Autoamostrador executará a sequência inicial e a sonda
de perfuração do septo se moverá sobre a estação de lavagem. A seringa iniciará a
ciclagem a 100% de sua capacidade.
6. Quando todas as bolhas de ar tiverem sido extraídas das linhas de entrada e transferência,
clique no botão OK para parar a ciclagem.
8.2.5 Escorvar a Estação de Lavagem Ativa (ARS)
O Reagente de Diluição Premier Hb9210™ é usado como reagente da Estação de Lavagem

Ativa (ARS). A ARS é usada pelo módulo da sonda para facilitar a diluição das amostras de
sangue total e para limpar a estação de lavagem e a sonda de perfuração do septo. Se a ARS
não estiver bombeando o Reagente de Diluição Premier Hb9210™, o resultado pode
apresentar injeções de sangue total superconcentrado e/ou carryover. Normalmente, o
escorvamento da ARS é realizado pelo software.
Materiais necessários: Reagente de Diluição Premier Hb9210™, 01-03-0097

Procedimento:
1. Verifique se o tubo transparente da ARS está totalmente submerso no frasco Reagente de
Diluição Premier Hb9210™.
2. No Software AFFINITY vá para DEVICES, Injector e clique em Prime Rinse Station Pump.
3. Uma caixa de diálogo aparecerá e a bomba da ARS será ativada. Deixe a bomba ligada até
que uma pequena quantidade do Reagente de Diluição Premier Hb9210™ apareça para
circular do topo da inserção de bronze da estação de lavagem.
4. Clique no botão OK na caixa de diálogo para desligar a bomba.
8.2.6 Instalar a coluna
Se uma coluna não for instalada imediatamente, ela deve ser armazenada em um refrigerador
a 2°-8°C. Deixe a coluna atingir a temperatura ambiente antes de instalá-la no sistema. Se o
equipamento não for usado por um período de sete dias ou mais, retire a coluna após a
desativação. Tampe cada extremidade e armazene em temperatura ambiente até estar pronta
para uso. Deixe a coluna atingir a temperatura ambiente antes de usá-la. O forno da coluna
está localizado à esquerda das bombas.
Materiais necessários: Coluna de Afinidade do Boronato Premier Hb9210™, 09-06-0046
Tempo necessário: 40 minutos (incluindo purgação, ativação, linha de base e calibração).
Não ative o sistema sem que os reagentes estejam instalados e as bombas

e extratores de bolhas tenham sido escorvados.
Se houver alguma dúvida, entre em contato com o representante local da

AVISO: Trinity Biotech.
Procedimento: Quando a coluna for substituída, os passos a seguir serão exibidos na tela:
Instruções para Substituição da Coluna Premier Hb9210™:

1. Certifique-se de que o sistema esteja INATIVO. Caso contrário, desative-o.
2. Certifique-se de que o fluxo esteja em 0 ml/min.
3. Abra o forno desenroscando o botão preto na frente do forno (sentido anti-horário).
5. Retire o encaixe no topo da coluna.
6. Desenrosque a coluna da junta do forno (sentido anti-horário)
7. Escaneie o código de barras da coluna no sistema (na tela dos números de lote)
8. Desenrosque os plugues de transporte da nova coluna.
9. Instale a nova coluna no encaixe da junta do forno. Rosqueie a coluna no encaixe (sentido
horário) e pare quando estiver apertado.
10. Coloque o tubo do detector no topo da coluna, rosqueie o encaixe (sentido horário) até
estar apertado.
11. Feche a tampa do forno.
12. Rosqueie (sentido horário) o botão da porta do forno para apertá-la.
13. Substitua os dois filtros (pré-filtro de 2 mícrons e filtro de amostras de 75 mícrons).
15. Execute a calibração da linha de base.
16. Execute a calibração da HbA1c.
17. Quando os controles estiverem dentro da faixa, a análise das amostras pode prosseguir.
8.2.7 Substituir o Filtro de Amostras
Se as amostras não estiverem sendo injetadas no sistema (curtas ou sem

picos), verifique se o filtro de amostras está bloqueado. O filtro deve ser
substituído a cada troca de coluna. Um filtro de 75 mícrons bloqueado
restringirá a amostra injetada e causará vazamento no gabinete do filtro ou
AVISO: retorno da amostra ao redor da agulha enquanto está na porta de injeção.

Trinity Biotech.
É necessário substituir o filtro de amostras a cada troca de coluna. O filtro de amostras está
localizado no tubo entre a porta de injeção e a válvula de injeção de amostras. É um
procedimento relativamente fácil:
Materiais necessários: Filtro, 75 mícrons, Número da Peça: 09-71-1905

Procedimento:
Use Equipamento de Proteção Pessoal ao trabalhar nas proximidades da

área de amostras, incluindo o filtro de amostras.

1. Solte o encaixe do tubo do gabinete do filtro de amostras, que acomoda o filtro de 75

mícrons. O gabinete está preso na válvula de injeção.
2. Retire o tubo laranja do gabinete do filtro de amostras.
3. Solte o gabinete do filtro de amostras.

4. Retire o filtro de 75 mícrons do gabinete. Dê uma leve batida no gabinete virado para
baixo sobre uma toalha de papel ou outra superfície macia para soltar o filtro.
5. Instale o filtro de 75 mícrons no gabinete.
Certifique-se de que a superfície branca do filtro de 75 mícrons esteja

voltada para a parte inferior do gabinete (na direção da válvula de injeção).
O posicionamento incorreto reduzirá a eficiência da filtragem e pode afetar
os volumes de injeção de amostras.
AVISO:
6. Monte na ordem inversa.

7. Certifique-se de apertar o encaixe na outra ponta do tubo laranja (abaixo da porta de
injeção), pois pode ter se afrouxado durante a substituição do filtro de amostras.
1. Quando o sistema apresenta alta pressão, o filtro de 2 mícrons da

coluna deve ser inspecionado para verificar se está bloqueado. O
filtro deve ser substituído a cada troca de coluna.
2. NUNCA tente reutilizar ou inverter a ordem de um filtro que foi
AVISO: instalado no sistema. Os contaminantes presentes no filtro podem
ser liberados na coluna e no detector, causando danos.

Trinity Biotech.
É necessário substituir o filtro d coluna a cada troca de coluna. O filtro da coluna está
localizado no tubo entre a válvula de injeção de amostras (marcada como a posição #6) e o
forno. É um procedimento relativamente fácil:
Materiais necessários: Filtro, 2 mícrons, Número da Peça: 03-11-0056

Ferramentas necessárias: 2 chaves inglesas (7/16” e/ou 11 mm)
Procedimento:
Use Equipamentos de Proteção Pessoal ao trabalhar nas proximidades da


1. Solte os encaixes do tubo das duas extremidades do gabinete do filtro da coluna, que
acomoda o filtro de 2 mícrons, preso à válvula de injeção na posição # 6 e também
conectada ao forno.
2. Retire o gabinete de aço inoxidável do sistema.
3. Com as duas chaves inglesas (7/16” ou 11 mm), abra o gabinete (veja a foto abaixo).
4. Retire o filtro de 2 mícrons do gabinete. Dê uma leve batida no gabinete virado para baixo
sobre uma toalha de papel ou outra superfície macia para soltar o filtro ou insira a ponta
de um clipe no orifício para retirá-lo.
5. Instale o novo filtro de 2 mícrons no gabinete. Veja foto abaixo.

6. Com a extremidade menor do gabinete virada para baixo, instale o topo do gabinete e
enrosque no sentido horário até apertar.
7. Aperte o gabinete com as chaves inglesas. Conforme as chaves apertam o gabinete, o anel
de plástico do filtro se comprimirá até estar comprimido no centro no nível do filtro de
metal. Esse é o ponto em que o gabinete não pode ser mais comprimido e o filtro está
instalado corretamente. Veja a foto abaixo do novo filtro (à esquerda) e filtro comprimido
corretamente (à direita). Observe como o anel de plástico foi comprimido ao nível do
centro de metal.
Certifique-se de apertar o gabinete completamente. A extremidade de

plástico do novo filtro deve ser comprimida ao nível da superfície do filtro
de metal para evitar vácuo no sistema que poderá causar problemas na
cromatografia.
AVISO:
Trinity Biotech.
8. Monte o gabinete no sistema com as setas de direção à esquerda do gabinete do filtro
apontando na direção do forno (ou distante da válvula de injeção). Veja a foto abaixo.
9. Aperte bem os encaixes. Verifique se há vazamentos.

8.3 Detector
8.3.1 Retirar as Bolhas de Ar da Célula de Fluxo
Bolhas de ar podem ficar presas na célula de fluxo, causando linha de base fraca e resultados
errados. Uma vez em operação, é improvável que uma bolha de ar fique presa, a não ser que o
sistema não tenha sido escorvado ou a célula de fluxo foi aberta. Veja abaixo dois
procedimentos para retirada de bolhas de ar presas na célula de fluxo.
Materiais necessários: Nenhum

Ferramentas necessárias: Desvio da Coluna, Número da Peça 09-41-1704
Procedimento:
1. No Software AFFINITY, selecione DEVICES e depois PUMP/SOLVENT SYSTEM.
2. Pressione o botão Set Flow to Zero. Deixe a pressão abaixar para menos de 10 Bar.
3. Retire a coluna do sistema e instale uma junta de desvio da coluna (é uma junta de metal
com volume morto incluída no kit de ferramentas).
4. Na caixa de diálogo Solvent Control, defina o fluxo em 100% A e 3,0 ml/min e pressione
Set. Isso permite um fluxo alto de reagente através da célula de fluxo e a remoção de
qualquer bolha de ar da célula de fluxo.
5. Deixe esse fluxo passar pela célula de fluxo por pelo menos 5 minutos.
6. No Software AFFINITY, selecione DEVICES e depois DETECTOR e Zero analog output.
7. Então, selecione DEVICES, DETECTOR e depois Acquire data.
8. A saída do detector será monitorada por 50 segundos e é representada por uma linha
horizontal azul na tela. A linha de base deve ser plana.
9. Se a linha de base estiver plana, defina o fluxo em zero e reinstale a coluna.
8.4 Bomba
Não há nenhum componente da bomba que possa ser substituído pelo usuário. Os itens com
desgaste são substituídos periodicamente durante a manutenção preventiva realizada Depto.
de Assistência Técnica da Trinity Biotech ou de seu representante local.
Os componentes são substituídos em um nível modular. A abertura dos

módulos individuais anulará a garantia.

8.5 Transportador de Amostras, Módulo da Seringa e Módulo da Sonda
Não há nenhum componente do Transportador de Amostras, Módulo da Seringa e Módulo da

Sonda que possa ser substituído pelo usuário. Os itens com desgaste são substituídos
periodicamente durante a manutenção preventiva realizada Depto. de Assistência Técnica da
Trinity Biotech ou de seu representante local.
Muitos componentes do Transportador de Amostras e do injetor do

Módulo da Sonda entram em contato direto com amostras de sangue. O
Premier Hb9210™ deve ser operado através de um ciclo de encerramento e
limpo com desinfetante antes de trabalhar em uma dessas unidades ou de
AVISO: serem retiradas. Equipamentos de proteção pessoal apropriados devem ser
usados e as devidas precauções devem ser tomadas ao trabalhar em uma
dessas unidades.

Trinity Biotech.
Os componentes são substituídos em um nível modular. A abertura dos

módulos individuais anulará a garantia.

8.6 Manutenção Geral
8.6.1 Descontaminação
Use Equipamentos de Proteção Pessoal ao trabalhar nas proximidades da


Antes de realizar qualquer procedimento, o sistema precisa ser descontaminado. Uma solução
de 10% (1:10) de alvejante com água, preparada no momento do uso, é eficaz para a
descontaminação. Borrife as superfícies com essa solução de alvejante. Deixe-a no sistema por
um minuto. Não deixe que gotas dessa solução caiam sobre os componentes do sistema.
Seque totalmente as superfícies com um pano ou toalha. Nas superfícies verticais, use um
pano ou toalha embebida nessa solução de alvejante fresca. Aguarde um minuto. Seque as
superfícies.
Antes de devolver os componentes a Trinity Biotech, preencha o Certificado de

Descontaminação (na próxima página).
Certificado de Descontaminação
Nota: Este certificado deve acompanhar toda(s) a(s) peça(s) e sistema(s) devolvidos a Trinity
Biotech, que foram expostos a fluidos de qualquer natureza.
Favor preencher com letra legível
Organização / pessoa responsável pela descontaminação: ______________________________

Enviado por:
_____________________________________________________________________________
Empresa / Instituição: ___________________________________________________________
Departamento: ________________________________________________________________
Endereço: ____________________________________________________________________
Cidade, CEP: __________________________________________________________________
Nome de contato: ______________________________________________________________
Telefone: ___________________________________ Fax: ______________________________
Listar toda(s) a(s) peça(s) e/ou sistema(s) que estão sendo devolvidos a Trinity Biotech com
o(s) número de série (se aplicável)
N° da Peça e / ou N° de Série do Sistema: ___________________________________________
Certifico que todos os itens descritos aqui foram descontaminados adequadamente de acordo
com as recomendações do fabricante, antes do envio, para minimizar a possibilidade de
qualquer pessoa ser exposta a riscos à saúde ao manusear os itens referidos. Qualquer item
devolvido a Trinity Biotech sem este formulário devidamente preenchido e anexado estará
sujeito a taxas de descontaminação.
Método de Descontaminação: ____________________________________________________

Solução Usada: ________________________________________________________________
Assinatura: ___________________________________ Carimbo: _______________________
DHR #18138.2-1 11/05

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Premier Hb9210™ com Software AFFINITY™

SISTEMA ANALÍTICO DA HEMOGLOBINA GLICOSILADA

MANUAL DO OPERADOR (v11)

SOMENTE PARA USO EM DIAGNÓSITCO IN VITRO

AVISO: Antes de usar o equipamento, leia as instruções contidas

EUA/Canadá/Porto Rico: Fora dos EUA:

Revisão 11, 15 de junho de 2012

5.843.788 5.719.053 6.020.203 5.801.053

Direitos Autorais© 2012

Os programas de software são protegidos por direitos autorais. Todos os direitos

Destina-se à determinação quantitativa da hemoglobina A1c (HbA1c) em sangue

AVISO: Antes de usar o equipamento, leia as instruções contidas

Capítulo 1: Guia de Início Rápido

Capítulo 3: Descrição do Sistema

Capítulo 4: Princípios de Operação

Capítulo 6: Preparação para a Operação

Capítulo 7: Componentes do Hardware

1.1 Histórico do Teste

1.2 Explicação do Teste

1.3 Princípios do Procedimento

2.1 Componentes do Teste

2.2 Antes de Iniciar

• Certifique-se de que haja níveis adequados de reagentes no sistema.

2.3 Iniciar o Sistema

• Certifique-se de que o sistema esteja conectado à rede elétrica.

• Na tela principal, selecione “Operation”.

Figura 2: Tela Principal

Figura 3: Activate System

3.1 Coleta de Amostras

• Preparação do paciente – é preferível, mas não necessário, coletar a amostra em

Proporção de Diluição Sangue Total agitado em µl Diluente em µl

Tabela 2: Proporção de Diluição Hemolisada para amostras de sangue fresco assentadas,

3.3 Carregar material de CQ (Controle de Qualidade)

Figura 4: Botão Load Cals / Ctrls (Carregar Calibradores / Controles)

• Pressione o botão CQ respectivo e o carrossel de CQ/Calibrador rodará até posição

• Retire todas as amostras analisadas anteriormente da área de transporte de amostras.

• Certifique-se de que o final do tubo processado esteja posicionado depois da última

Figura 6: Botão Run Samples

1. Verifique se os reagentes carregados são suficientes para completar o lote e

Figura 8: Tela do Teste durante o processamento

4.1 Verificação dos Controles

1. Verifique se os valores dos Controles de Nível I e Nível II estão dentro da faixa

2. Verifique se o formato do pico tem as seguintes características:

4.2 Cromatogramas e Relatórios

Figura 9: Impressão Típica

3. “abcdewxay” (se houver) depois do número do frasco é a ID (identificação) do

4. Data e Hora em que a amostra foi injetada.

5. “Pressure = xx bar” – exibe a pressão do sistema no ponto de injeção. Os números

6. Dependendo das unidades selecionadas, os valores HbA1c = x.x% e/ou mMol

7. O cromatograma é um gráfico da saída do sinal do detector. O primeiro pico é o

8. Tempo de retenção – o número impresso acima do pico é o tempo decorrido entre

9. Área total – a área combinada dos dois picos.

10. [FD484873564F865674] – é um identificador único do arquivo onde os dados do

11. CONC = x.xx% é a porcentagem da área não calibrada do segundo pico.

O operador deverá substituir os reagentes em três situações:

1. Antes do teste, para garantir que haja

2. Durante um teste, conforme solicitado,

3. Durante um teste, conforme solicitado,

5.1 Pausar o Sistema

• No menu principal, pressione “Devices”.