Examens de Labo ISPITS Tanger

EXAMENS DE LABORATOIRE
Cours élaboré par Mahrach Younes

Docteur en microbiologie
Enseignant à l’ISPITS de Tanger
Année universitaire 2022-2023

Examens de laboratoires ISPITS Tanger 2022 Y. Mahrach
Introduction
Les examens de laboratoire, les examens biologiques, les analyses de laboratoire, les analyses
biomédicales ou même les analyses biologiques… sont tous des nomenclatures synonymes de
la même discipline qui s’intéresse à étudier de point de vue biologique les matières produites
par l’organisme dans le but d’orienter de confirmer de diagnostiquer et/ou de suivre l’évolution
de la maladie, etc.
Pour réaliser les examens de laboratoire, différents types de prélèvements peuvent être
effectués: sang (veineux, artériel ou capillaire), urines, sperme, selles, expectorations et
crachats, pus, vomissements, sécrétions (de gorge, nasales, vaginales, urétrales…), etc.
Les examens de laboratoire ont une grande importance du fait qu’ils sont les piliers du
diagnostic clinique, du contrôle et de la surveillance thérapeutique.
Ces examens de laboratoires ont plusieurs buts par exemple :
 Dépistage des troubles biologiques
 Aider au diagnostic
 Estimer les facteurs de risque
 Suivre les fonctions biologiques (rénale, hépatique …)
 Contrôler l’efficacité et les effets du traitement
 Suivre l’évolution des maladies.
 Recherche scientifique.
 Etc.
Dans ce cours, plusieurs objectifs sont sollicités, parmi ses objectifs on compte :
 Définir les différents examens de laboratoires.
 Énumérer les indications et les conditions de réalisation de ses examens
 Maitriser les techniques de prélèvement.
 Connaitre la procédure de la conservation et de l’acheminement des prélèvements dans
de bonnes conditions vers le laboratoire.
 Énumérer les principales causes d’erreur au cours de la phase préanalytique
 Connaitre les valeurs normales et pathologiques de chaque examen.
 Être capable d’interpréter les résultats des examens biologiques, afin de prendre une
bonne décision vis-à-vis du patient.
2
Partie 1.
Différents types d’examens de
laboratoire
3
Il existe de nombreuses catégories des examens de laboratoire, certains se concentrent sur des
organes ou des systèmes corporels spécifiques, tandis que d'autres testent la présence ou
l'absence de diverses substances. Certains tests mesurent simplement le niveau de composants
chimiques dans les fluides corporels ou les tissus…
Les tests de laboratoire peuvent être regroupés en plusieurs grandes catégories en fonction de
leur objectif, des types d'informations qu'ils fournissent ou en fonction du type du prélèvement
étudier.
Parmi les catégories les plus courantes de tests de laboratoire, citons :
 Examens hématologiques
Les examens hématologiques regroupent l'analyse des cellules du sang, mais aussi d'éléments
dissous dans le plasma comme les facteurs de la coagulation.
Le sang est un tissu organisé qui se compose d’un liquide (plasma), dans lequel baignent des
cellules (globules rouges, blancs et plaquettes) et un grand nombre de substances.
N. B. Le sang est le plus important liquide biologique de notre corps. Il est composé à 55 % de
plasma et à 45 % de cellules. Il circule dans les vaisseaux sanguins et irrigue tous les organes;
il leur apporte l’O2 et éléments nutritifs et les débarrasse de leurs déchets.
 Examens biochimiques
Les analyses biochimiques consistent à mesurer les quantités des constituants des liquides
biologiques (sang, urine, etc.). La plupart des maladies ont des répercussions sur leur
composition et leur étude peut aider au diagnostic et au suivi de nombreuses maladies.
 Examens sérologiques
La sérologie est l'étude du sérum, c'est-à-dire le sang débarrassé de ses cellules et des facteurs
de coagulation et fibrinogène.
Communément, la sérologie consiste à évaluer l'immunité contre une maladie en mesurant la
quantité d'anticorps spécifiques de celle-ci. (On parle aussi de l’immunosérologie).
 Examens microbiologiques
Les analyses microbiologiques englobent la bactériologie, la parasitologie, la virologie et la
mycologie. Les examens microbiologiques consistent à rechercher par observation directe, mise
en culture ou encore techniques de biologie moléculaire, la présence de microorganismes dans
les échantillons prélevés.
 Examens histologiques
Étude microscopique des tissus vivants. L’histologie permet de connaitre la structure des tissus,
d’en comprendre le fonctionnement et d’y découvrir éventuellement des anomalies.
 Examen cytopathologies
Étude des caractères morphologiques et fonctionnels des cellules. La cytologie recourt
essentiellement à l’examen microscopique des cellules.
 Biologie moléculaire
Étude des molécules porteuses du message héréditaire (ADN, ARN), de leur structure,
synthèse, altérations (mutations), etc.
4
 Exploration fonctionnelle
Ensemble d’examens destinés à évaluer la fonction d’un organe (ex. EFR= exploration de la
fonction respiratoire).
5
Partie 2.
Expression des résultats
6
1. Unités de mesure
 Les résultats des examens sont exprimés d’une part en unités traditionnelles (g, mg, l,
ml…), d’autre part en unités SI (système international ex. mole).
 En chimie et en physique, la mole est une unité de mesure de quantité de
substance, c’est la quantité de substance qui renferme toujours le même nombre
de particules, soit 6,022 x 1023 (c'est le " nombre d'Avogadro "). C´est un très
grand nombre, et on utilise généralement les millimoles, micromoles ou
nanomoles. Pour convertir des grammes en moles, on divise le poids de la
substance en grammes par sa masse molaire.
 Pour convertir des grammes en moles, on divise le poids de la substance en
grammes par sa masse molaire. Par exemple, la concentration du calcium dans le
sang est de 95 à 105 mg/l et la masse molaire du calcium est 40. Donc le taux de calcium
est de 2,4 à 2,6 mmol/l.
 Les résultats des dosages d’enzymes sont indiqués en « unités enzymatiques » (U), car
l’unité officielle, le katal, n’est pratiquement pas utilisée.
 Le titre est l’unité de dosage des anticorps (c’est-à-dire l’inverse de la première dilution
sérique positive)
 Lorsque les résultats sont rendus en « unités arbitraires », c’est-à-dire en unités
n’appartenant pas au SI, mais proposées par les firmes qui fabriquent les réactifs, elles
sont symbolisées par UI « unité internationale ».
 Les valeurs dites « normales » ou « usuelles » varient d’une technique de dosage à
l’autre.
2. Facteurs influençant les résultats des examens de laboratoire en phase
pré-analytique.
Les résultats des examens de laboratoire sont influencés par plusieurs facteurs, ces derniers
peuvent être divisé en :
 Facteurs en rapport avec le patient
 Physiologiques :
 L’âge, le sexe, la race, la grossesse, le surpoids, le cycle menstruel, etc.
 Le jeune : l’idéal est d’effectuer le prélèvement 12 heures après
l’ingestion d’aliments, car certains paramètres comme le glucose, les
lipides … peuvent être influencés,
 Stress et anxiété: effet sur l’activité hormonale.
 La prise médicamenteuse.
 L’effort physique.
 Consommation de:
 L’alcool : augmentation des lactates, acide urique et
triglycérides, du cholestérol, GGT, acide urique…
 Les cigarettes : augmentation de la carboxyhémoglobine et de
l’hémoglobine
 La caféine, les boissons hypertoniques…
 Certains aliment ou compliment alimentaire (vitamine D,
vitamine C, magnésium, etc.)
 Pathologiques : la plupart des maladies affectent les résultats des examens de
laboratoire…
7
 Facteurs en rapport avec le praticien (infirmier, médecin …).

 Compétence et expérience…
 Conditions et charge de travail
 Niveau de formation
 Etc.
 Facteurs en rapport avec le prélèvement :
 Type de sang: les résultats obtenus différents selon le sang prélevé (veineux,
artériel ou capillaire).
 Horaire de prélèvement : rythme circadien pour certaines hormones (ex. le
cortisol) et les marqueurs cardiaques, l'heure idéale de prélèvement se situe
entre 7 et 9 heures du matin
 Les prélèvements avant les soins: la prise de sang doit s’effectuer avant les
soins ou la prise de médicaments.
 Effets d’un garrot serré (la stase prolongée provoque la fuite de l’eau du milieu
plasmatique vers l’espace interstitiel et le plasma obtenu sera concentré.
Majoration des valeurs)
 Volume insuffisant : néonatologie et pédiatrie (difficulté de réaliser tous les
dosages et risque de prélever des globules rouges)
 Anticoagulant non conforme (si vous ne choisissez pas le tube correct avec
l’anticoagulant correct également)
 Site de ponction inapproprié (à côté d’une perfusion).
 Facteurs en rapport avec les conditions et l’environnement
 La position debout/couchée: influence la concentration de nombreux
constituants. Une position debout diminue le volume plasmatique (effet sur
l’hémoglobine …).
 Étiquetage des tubes, il faut bien étiqueter les tubes et remplir soigneusement
fiches de renseignement…
 Transport : le transport jusqu'au laboratoire peut modifier certains paramètres :
ex. Bilirubine ; lactate; enzymes, etc.
 Réception : erreurs de transcription ; centrifugation.
 Autres1: les instruments utilisés, les conditions du travail, la manipulation, les
techniques appliquées, etc.
1
http://prel.sang.free.fr/cadre.php
8
Partie 3.
Prélèvements
9
1. Généralités
Un prélèvement en médecine est un acte qui permet la prise d’un échantillon destiné à être
analysé pour différencier ce qui physiologique de ce qui est pathologique.
C’est-à-dire le recueil d’un volume de liquides biologiques (sang, urine, pus…) ou tissus
modifiés d’un organe (prélèvement tissulaire ou biopsie) …
Il permet d’effectuer différents examens biologiques et/ou anatomopathologiques sur des
échantillons.
Il est réalisé selon son type par le médecin et/ou l’infirmier.
Remarque : la biopsie est un prélèvement d’un fragment de tissu.
2. Prélèvement sanguin
2.1. Prélèvements sanguins veineux
Un prélèvement veineux (intraveineux) est un acte de soin qui permet la prise d'un échantillon
de sang à travers la ponction d’une veine superficielle afin de réaliser des analyses biologiques.
Cette technique est facile, rapide et permet d’obtenir une quantité du sang suffisante.
Néanmoins elle doit être réalisée avec beaucoup de prudence.
2.1.1. Matériel nécessaire pour la réalisation d’un prélèvement veineux

 Chariot multiétage désinfecté
 Papier absorbant à usage unique pour la protection
 Le nécessaire pour l’hygiène des mains (gel hydrologique, source d’eau pour lavage des
mains)
 Gant à usage unique
 Équipement de protection personnelle (masque, visière …)
 Plateau stérile
 Seringue stérile en fonction de la quantité du sang demander, avec une aiguille
intraveineuse ou un épicrânien ou bien un vacutainer (un système pour
prélèvements sanguins sous vide sécurisé) selon le disponibilité et l’état du patient…
 Tubes adéquatent avec les examens demandés
 Garrot désinfecté
 Antiseptiques (de préférence alcool médicale à 70 °)
 Compresses ou boule de coton à défaut
 Sparadrap
 Conteneur (jaune) à déchet contaminé piquant et tranchant
 Haricot
 Deux poubelles une dotée d’un sac pour élimination des déchets ménagers
(généralement noir) et l’autre doté d’un sac pour les déchets médicaux contaminés
(généralement rouge).
 Désinfectant de surface et chiffonnette.
10
2.1.2. Déroulement du prélèvement veineux

 Installer le patient confortablement.
 Laver vos mains un lavage hygiénique (voir fiche technique en rapport avec le lavage
des mains).
 Mettre des gants jetables à usage unique (voir fiche technique en rapport avec enfilage
des gants).
 Vérifier:
 Tubes d’analyses adéquats,
 Nécessité d’être à jeun,
 Identité du patient++.
 Etc.
 Installer le patient confortablement
 Mettre une protection sous le membre (bras, main, pied…)
 Mettre le garrot 10 cm au-dessus du point de ponction
 Dans la mesure du possible, pas sur un membre malade ou occupé par une voie
veineuse, fistule artérioveineuse…
 Éviter de laisser le garrot plus que 3 min
 Repérer et choisir la veine à ponctionner de préférence une veine de gros calibre de
préférence sur le bras (figure 1).
 Demander au malade de faire serrer le poing, bras en déclive, tapoter afin de favoriser
la vasodilatation
 Antisepsie de la peau de bas en haut, sans repasser au même endroit, une compresse
pour un passage, de l’intérieur vers l’extérieur (ou des tours circulaires de l’intérieur
vers l’extérieur dit en escargot).
 Respecter le temps de contact de l'antiseptique (généralement 30 secondes).
 Immobiliser la veine en tendant la peau avec l’autre main
 Introduire l'aiguille à 45°, biseau vers le haut
 Remplir les tubes jusqu’à ce que la proportion anticoagulante / sang est adéquate
(jusqu’au trait).
 Mélanger immédiatement par renversement (les tubes contenant un anticoagulant),
éviter d’agiter trop fortement pour ne pas détruire les cellules
 Enlever le garrot
 Demander au patient de desserrer le poing
 Enlever le dernier tube puis l'aiguille (élimination immédiate)
 Point de compression 1 min pour éviter l’hématome (+ si le malade est sous
anticoagulants)
 Pansement
 Étiqueter et identifier les tubes et les envoyés au laboratoire le plus tôt possible
Remarque : pour l’exercice voire les travaux pratiques
11
Figure 1 : Schéma des principales veines utilisées dans le traitement intraveineux
2.1.3. Effets secondaires et complications

 Hématome au point de ponction
 Défaut de reflux du sang
 Douleur
 Choc vagal : stopper le soin et mettre le patient les jambes en l’air
 Infection.
 Etc.
12
2.2. Prélèvements capillaires

Le prélèvement par ponction cutané (ou capillaire) est une prise de microéchantillons sanguins
utilisés dans des cas particuliers pour obtenir de petites quantités de sang pour les analyses de
laboratoire.
2.2.1. Indications
Le volume prélevé par ponction cutanée est fiable par rapport aux prélèvements par ponction
veineuse.
Le prélèvement de microéchantillons sanguins par ponction capillaire est recommandé dans les
cas de:
 Impossibilité de faire un prélèvement veineux
 Pour les bébés naissants (limite de volume)
 Brulures étendues,
 Obésité extrême
 Gériatrie…
N. B. Le sang prélevé par ponction cutanée est un mélange provenant des artérioles des
veinules et des capillaires (mais on parle souvent dans la bibliographie d’un prélèvement par
ponction capillaire).
2.2.2. Contre-indications
 Ne jamais utiliser une lame de bistouri.
 Éviter de ponctionner:
 Le doit d’un enfant pesant moins de 9kg
 Une surface malade (infecté, cyanosé, œdématié, etc.)
 Un site en présence d’hématome
 Un site déjà ponctionné
 Le pouce, l’index et l’auriculaire
2.2.3. Matériel nécessaire pour le prélèvement capillaire
 Chariot multiétage désinfecté
 Plateau stérile ou désinfecté au préalable
 Papier absorbant à usage unique pour la protection
 Le nécessaire pour l’hygiène des mains (gel hydrologique, source d’eau pour lavage
des mains)
 Équipement de protection personnelle (masque, visière …)
 Gant à usage unique
 Compresses ou boules de coton à défaut.
 Antiseptique (de préférence alcool 70 °).
 Lancettes, aiguille ou vaccinostyle
 Matériel pour l’échantillon :
 Lame de microscope
 Bandelette (glycémie …)
 Microtubes (tube eppendorf…)
 Etc.
13
2.2.4. Déroulement du prélèvement capillaire

Installer le patient confortablement
Laver vos mains un lavage hygiénique.
Choisir le point de ponction qui doit être indemne de toute contre-indication, il existe
différents points pour la ponction cutanée par exemple:
 La surface plantaire du talon (enfant de moins de 9kg)
 Face palmaire d’un doigt
 Le lobe de l’oreille
 La surface plantaire du gros orteil (brulures étendues)
 Réchauffer le point de ponction à 40 °C pendant 5min, cela va permettre une
augmentation de l’écoulement sanguin… si la quantité demandée est limitée à une
goutte vous n’avez pas besoin de réchauffer.
 Nettoyer avec de l’alcool, essuyer ensuite avec un tampon stérile.
 Faire une piqure nette de 2 à 3mm de profondeur avec une aiguille, une lancette ou un
vaccinostyle stérile jetable.
 Essuyer la première goutte de sang (pour éviter une contamination)
 Laisser le sang coule naturellement (ne pas presser) et collecté.
 Si la ponction est correcte, il est possible de prélever jusqu’à 1cc de sang
 Étiqueter et identifier les tubes.
 Tube capillaire
 Placer une extrémité du tube capillaire au centre de la goutte de sang sans effectuer de
pression sur la peau (figure 2).
 Laisser le capillaire à l'horizontale ou légèrement en pente vers le doigt pour éviter
l’infiltration d’air.
 Sceller rapidement le capillaire avec les bouchons de plastique.
 Mélanger le sang à l’anticoagulant (se trouvent sur les parois du verre) en déplaçant
la limaille sur toute la longueur du capillaire.
 Microtube
 Appuyer le récipient sur la goutte en évitant de racler la surface de la peau, réduisant
ainsi les chances d’hémolyse et les micros caillots (figure 2).
 Placer les tubes perpendiculaires à la surface de la peau.
 Mélanger délicatement au cours de la collecte par secousses successives.
 Respecter la proportion sang/additif indiquée sur le tube (entre les 2 lignes).
 Respecter l'ordre des tubes et le nombre de retournements.
14
Figure 2 : À : Un prélèvement de sang à l’aide d’un tube, B : Un prélèvement de sang à

l’aide d’un tube capillaire ou d’une pipette,
 Bandelette-test (Glucomètres)
 Appliquer l’échantillon sanguin au bout de la bandelette-test (glycémie).
 Ne jamais ajouter de sang si le décompte ne part pas tout de suite; reprendre avec une
autre bandelette (figure 3).
Figure 3 : image d’un prélèvement capillaire à l’aide d’une bandelette-test
 Test sur papier buvard

C’est un test réalisé en prélevant des gouttes de sang sur un buvard, après ponction de la peau,
il existe plusieurs applications pour ce test par exemple pour le Dépistage néonatal, qui est
systématiquement proposé, mais l'accord des parents est obligatoire.
 Imbiber de sang chacun des cercles du papier buvard (figure 4)
 L’idéal consiste à laisser tomber une seule goutte dans le milieu des cercles,
si plus d’une goutte est nécessaire pour réaliser un prélèvement adéquat, on doit
chercher à l’obtenir avec des gouttes aussi grosses que possible en une seule
séquence et sans surcharge.
 Appliquer le sang sur un seul côté du papier et s’assurer que celui-ci est
imprégné de part en part sur une grande partie du cercle imprimé
15
 Il est impératif de laisser sécher le papier buvard à la température pièce avant de

le mettre à la poste
Attention : pas de séchoir ou autre source de chaleur, ne pas insérer le papier buvard non sec
dans un sac de plastique
Figure 4 : Dépistage néo-natal sur papier buvard
3. Prélèvement des urines

Le prélèvement des urines est un acte qui permet:
 La recherche des composants des urines (ex.: protéines, Na+ …)
 La recherche d’une infection urinaire, de déterminer le germe en cause et de solliciter
le traitement.
 La détection de la présence de cellules, de cristaux …
 Le dosage de certains paramètres biochimiques dans les urines.
 Etc.
Ce prélèvement est effectué par le patient lui-même après éducation; ou par l’infirmier si le
patient est incapable d’effectuer le prélèvement (malade mentale, malades handicapés, malade
avec sonde urinaire, nouveau-né, enfant...).
Les prélèvements des urines diffèrent selon l’indication:
3.1. Prélèvement pour de la protéinurie de 24h

 Recueil des urines de 24 h: le patient vide sa vessie aux toilettes à une heure
précise (ex. 8h du matin, les urines correspondantes sont jetées).
 Toutes les urines des mictions sont ensuite recueillies jusqu’au lendemain à la
même heure, dans un récipient propre et stérile une fois rempli le récipient doit
être transféré au laboratoire le plutôt possible.
3.2. Prélèvement pour l’examen cytobactériologique des urines (ECBU)
 L’ECBU est un examen bactériologique, donc le prélèvement doit être effectué
d’une façon stérile et en dehors de toute antibiothérapie pour éviter de fausser
les résultats.
 Il est souvent effectué sur un flacon stérile de 50 ml avec un couvercle rouge ou
sur une poche autocollante stérile pour les nourrissons (figure 5).
 Le prélèvement est effectué de préférence le matin.
 Il faut jeter les premières gouttes et recueillir le reste.
16
Figure 5 : À : Image d’une poche autocollante utilisée chez les nourrissons pour prélèvement des
urines, B : Flacon stérile utilisé dans le prélèvement des urines pour ECBU
4. Prélèvements cutanéo-muqueux
Ce type de prélèvement est effectué par écouvillonnage grâce à un écouvillon (figure 6).
Plusieurs types de prélèvements figurent dans cette catégorie telle que:
 Le prélèvement naso-pharyngé (exemple : Covid-19).
 Le prélèvement vaginal ou urétral.
 Les prélèvements du pus,
 etc.
Figure 6 : A écouvillon, B : Prélèvement naso-pharyngé, C : Prélèvement vaginal
17
5. Autres
 Prélèvement artériel (acte médical), il est principalement recommandé pour l’étude des
gaz du sang et les mesures acido-basiques, effectuées principalement sur tube à
héparine, au niveau de l’artère radiale ou fémorale.
 Prélèvement du liquide céphalo-rachidien (acte médical), la ponction lombaire permet
de prélever le LCR.
 Prélèvement du liquide d’ascite (acte médical)
 Prélèvement articulaire (acte médical)
 Etc.
N. B. Plusieurs types de prélèvements ne relèvent pas de la tache de l’infirmier.
6. Différents types de tubes des analyses biologiques
Il existe une panoplie des tubes destinés aux analyses du laboratoire, l‘utilisation de chaque
tube est conditionnée par la nature de l’analyse (figure 7) :
 Les dosages sur sérum se font à partir de prélèvements sur tube sec.
 Les dosages sur plasma se font évidemment sur tube contenant un anticoagulant
(exemples: Héparine, EDTA, Citrate, Fluore …).
 En biochimie, les analyses peuvent être effectuées sur sérum ou sur plasma sauf
quelques exceptions, exemple: la glycémie est effectuée exclusivement sur tube sec (à
bouchon rouge) ou tube contenant le fluor comme anticoagulant (tube à bouchon gris)
 Les prélèvements destinés à des recherches d’anticorps (sérodiagnostics, complément,
autoanticorps, agglutinines, etc.) se font sur tube sec (bouchon rouge).
 En hématologie, les prélèvements pour NFS-VS se font sur éthylène diamine tetra
acétique (bouchon violet/mauve), mais la vitesse de sédimentation (VS) est réalisée
également sur tube citrate noir (qui contient un volume de citrate pour 4 volumes de
sang)
 Les prélèvements pour les examens de l’hémostase se font sur tube citrate bleu.
(Contenant 1 volume de citrate pour 9 volumes de sang).
Remarque:
 Beaucoup de dosages peuvent se faire soit sur sérum soit sur plasma en fonction de la
technique choisie par le laboratoire.
 Dans l’énorme majorité des cas, dosez sur plasma ou sur sérum n’influence pas les
résultats.
 Parmi les dosages que nous allons voir, un seul donne des résultats différents selon
qu’il est fait sur plasma ou sérum, c’est celui du glucose.
 Le remplissage des tubes par le prélèvement de sang doit être effectué selon un ordre
qui assure l’ergonomie du travail et qui respecte les recommandations internationales
des institutions expertes au laboratoire comme le CLSI (Clinical and Laboratory
Standards Institute) (figure 7).
18
Figure 7 : Différents tubes des examens biologiques classés par ordre de prélèvement selon les
recommandations du CLSI
7. Facteurs affectant l’intégrité de l’échantillon

Plusieurs facteurs peuvent porter atteinte à notre échantillon qui deviendra inutile, parmi ces
facteurs on compte :
 Hémolyse: consiste en la destruction des globules rouges présents dans le sang, ces
causes les plus fréquentes sont:
 Résidus d'alcool au point de ponction
 Une trop forte pression exercée sur les tissus environnants le point de ponction
 Brise mécanique en frottant la peau avec le contenant (racler)
 Brise mécanique par agitation trop forte de tube
 Coagulation et formation des caillots de sang (en présence d'anticoagulant) :
 Cela élimine les éléments qu’on recherche et affecte de façon importante tous
les résultats
 Mélanger délicatement le sang à l'anticoagulant par petites secousses
(retournements) de tube pendant le prélèvement.
 Boucher immédiatement le tube, le tube micro-collecteur ou le tube capillaire et
mélanger par retournements successifs complets après le prélèvement (utilisant
l'aimant pour mélanger les tubes capillaires).
 Délai de transport: plus vous attendez, plus les résultats s’éloignent des valeurs réelles
 Température de transport (ne pas placer l'échantillon directement sur la glace)
 Le froid ralentit les réactions chimiques.
 Le froid relâche les pompes à électrolytes des globules rouges (hausse du
potassium).
 Une chaleur excessive peut également affecter l’échantillon.
19
 La lumière (la lumière du jour (UV) détruit la bilirubine).

 Quantité insuffisante : tous les tubes ont une zone cible à respecter (le trait ou parfois
entre deux lignes), le contenu en anticoagulant du tube dilue le sang et fausse les
résultats.
 Quantité supérieure à la demande : il ne faut pas dépasser la ligne indiquée dans le
tube surtout pour certains examens comme ceux d’hémostases ou de la VS (la quantité
d’anticoagulant est proportionnelle à la quantité du sang).
 Dilution : il faut limiter le plus que possible la dilution par le liquide se trouvant dans
les tissus.
 Toujours éliminer la première goutte de sang après la ponction
 Éviter les pressions trop importantes ou trop prolongées
 Eviter le prélèvement sur un membre qui porte une perfusion…
 Remarque :
 Les analyses biologiques sont des données d’une grande importance, certaines
erreurs peuvent être évitées : exemple. Les erreurs pré-analytiques, certaines
erreurs analytiques et post-analytiques;
 Un mauvais prélèvement est pire qu’un prélèvement répété.
20
Partie 4.
Examens hématologiques
21
1. Groupage sanguin
1.1. Généralités
Le groupage sanguin est la détermination d’un groupe sanguin, consiste à mettre en évidence,
à la surface des globules rouges, la présence ou l’absence des antigènes A et B et la présence
ou l’absence de l’antigène Rhésus standard (Rh ou D) (figure 10).
Figure 8 : Schéma des antigènes sur la surface des hématies

Les hématies comportent plusieurs antigènes de membrane, génétiquement déterminés, et
définissant les groupes sanguins.
On connaît plusieurs systèmes antigéniques caractérisant autant de groupes, présents
simultanément chez le même individu, mais les plus importants pour la transfusion sont le
système ABO et le système Rhésus.
Prélèvement : Sang veineux ou artériel (2-5 cc) sur tube avec anticoagulant (de préférence
citrate ou EDTA) en se gardant de toute hémolyse qui gênerait l’interprétation.
1.2. Système ABO

Le système A, B, O est défini par la présence à la surface des érythrocytes soit d’un antigène A
(groupe A), soit d’un antigène B (groupe B), soit des deux (groupe AB), soit d’aucun d’entre
eux (groupe O), ce qui permet de classer tout sang humain dans un des quatre groupes A, B,
AB, O.
Le sérum d’un sujet donné contient l’isoanticorps naturel (anti-A ou anti-B) correspondant à
l’antigène absent de ses érythrocytes (hématies), lorsque l’hématie porte les deux antigènes, le
sérum ne contient aucun isoanticorps. Il contient les deux anticorps anti-A et anti B si l’hématie
ne contient aucun des deux antigènes (figure 9).
Les anticorps du système ABO sont des anticorps naturels (apparaissant dès les premiers mois
de la vie) réguliers (présents chez tous les sujets) de classe IgM.
22
Remarque:
 Pour déterminer le groupe sanguin par le système ABO, il est obligatoire que deux
épreuves soient réalisées sur deux prélèvements différents par deux techniciens
différents.
 Il existe des sujets qui n’ont pas les antigènes du système ABO: leur groupe sanguin est
appelé "Bombay". Il est exceptionnel.
Figure 9 : tableau qui résume les différents types d’antigène sur la surface des hématies
et les anticorps correspondants dans le système ABO
1.3. Système Rhésus

Le système Rhésus est un système complexe à plusieurs antigènes. Sur les hématies des sujets
dits Rhésus positif se trouve un antigène D (ou Rh) qui est absent chez les sujets d (ou Rh-).
Par convention, on note « d » l’absence d’antigène D.
Sur les hématies se trouvent également :
 Un antigène grand C ou Rh2, ou un antigène petit c ou Rh4 ;
 Un antigène grand E ou Rh3 ou un antigène petit e ou Rh5.
Pour les besoins de la clinique, il suffit généralement de distinguer les sujets Rh+ et Rh–. Il est
toutefois préférable de déterminer le phénotype Rhésus complet.
1.4. Autres systèmes

D’autres systèmes peuvent être recherchés, d’intérêt variable, on compte une vingtaine de
systèmes… par exemple:
 Système Lewis,
 Système Kell,
 Système Duffy,
 Etc.
23
1.5. Intérêt du groupage

L'importance de connaitre son groupe sanguin vient du fait qu'en cas de nécessité de transfusion,
le sang reçu doit être compatible avec le sien. Il ne faut pas que soient mis en contact des
anticorps et antigènes du même type au risque d'engendrer une coagulation du sang qui peut
être mortel.
Les personnes du groupe O- sont des "donneurs universels", car tous les autres groupes peuvent
recevoir leur sang puisqu'il ne contient aucun antigène, mais ne reçoivent du sang que des
personnes du même groupe. Les personnes du groupe AB+ sont "receveurs universels" et ne
peuvent donner du sang qu'au groupe AB+ (figure 10).
À noter que cette règle est inversée en cas de plasma (figure 10)
Remarque : Cette règle est limitée par le fait qu’on choisit toujours le sang iso groupe pour la
transfusion sauf en cas de manque devant une grande urgence.
Figure 10 : A : Schéma de la compatibilité sanguine entre donneurs et receveurs

B : Schéma de la compatibilité des plasmas entre donneurs et receveurs
2. Cross-match
Le cross match est une étude de compatibilité réalisée systématiquement pour prévenir le
phénomène de rejet.
En pratique, il s'agit de prélever le sérum du receveur et de le mélanger avec le sang du donneur
afin de vérifier la compatibilité in vitro. À défaut ont utilisé le sang total du malade en receveur
avec le sang du donneur pour la même finalité.
Prélèvement : Sang veineux (3 cc) sur tube avec anticoagulant de préférence citrate ou EDTA
en se gardant de toute hémolyse qui gênerait l’interprétation.
24
3. Test de Coombs
Test de Coombs ou test à antiglobuline: est un examen de laboratoire qui permet de détecter
des anticorps dirigés contre les globules rouges du patient.
On distingue le test de Coombs direct et le test de Coombs indirect (figure 11).
Ce test est négatif chez un sujet normal et positif chez un sujet atteint.
 Le test de Coombs direct (TCD): recherche la présence des anticorps à la surface des
hématies. Ce test de Coombs direct est indiqué surtout dans:
 Anémie hémolytique auto-immune.
 Anémie hémolytique chez les nouveau-nés (l’action des anticorps de la mère sur
les hématies du nouveau-né)
 Accidents transfusionnels
 Etc.
 Le test de Coombs indirect (TCI) permet de mettre en évidence ces anticorps (dirigé
contre les hématies), non plus fixés sur les globules rouges, mais présents dans le sérum.
Ce test de Coombs indirect est indiqué surtout dans la recherche des anticorps anti-D
chez une femme de rhésus négatif.
N. B: La prise de certains médicaments est aussi susceptible d'induire la formation d'auto-
anticorps et donc un test de Coombs positif.
Prélèvement : Sang veineux (2-5 cc) sur tube avec citrate ou EDTA en se gardant de toute
hémolyse qui gênerait l’interprétation.
25
Figure 11 : explication de la technique des tests de Coombs direct et indirect
4. Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)

Cet examen est d’ordinaire appelé « Recherche d’agglutinines irrégulières », mais il est plus
correct de l’appeler « Recherche d’anticorps irréguliers », car les anticorps recherchés sont des
hémolysines de classe IgG et non pas des agglutinines de classe IgM.
Ce sont des anticorps dirigés contre des antigènes de groupe sanguin autre que ceux du système
ABO. Ils sont dits irréguliers, car, in vitro, ils n’agglutinent pas directement les globules rouges
porteurs de l’antigène. Pour les mettre en évidence, il faut traiter les hématies par des enzymes
(papaïne, trypsine) ou les placer en milieu albumineux.
La RAI est systématiquement réalisée dans le but de prévenir les accidents transfusionnels ou
fœto-maternels:
 Chez toute personne susceptible d'être transfusée.
 Après toute transfusion (dans le cadre du suivi d'hémovigilance)
 Chez toutes les femmes enceintes
Prélèvement : Sang veineux (2-5 cc) sur tube avec citrate ou EDTA en se gardant de toute
hémolyse qui gênerait l’interprétation.
26
5. Numération formule sanguine (NFS)

5.1. Généralités
La numération formule sanguine (NFS) ou l’hémogramme est un examen hématologique réalisé
sur un prélèvement de sang dans le but d’analyser quantitativement et qualitativement les
différents éléments du sang.
L’hémogramme est considéré comme l’examen le plus demandé en pratique quotidienne,
apportant des renseignements dans des domaines dépassant largement celui de l’hématologie.
La numération-formule sanguine (ou hémogramme) comprend:
 La numération des éléments figurés du sang (globules rouges, globules blancs,
plaquettes, réticulocytes, …)
 Le dosage de l’hémoglobine.
 La mesure de l’hématocrite.
 Le calcul du nombre et du pourcentage des différentes catégories de globules blancs
(formule blanche).
 Etc.
Rappel anatomique de l’hématopoïèse: L'hématopoïèse est le processus par lequel des
cellules souches hématopoïétiques primitives prolifèrent et se différencient en n'importe quel
type de populations cellulaires sanguines (figure 12).
Figure 12 : Schéma de l’hématopoïèse
27
5.2. Indications
 Des signes évoquant une diminution d'une ou plusieurs lignées sanguines:
 Syndrome anémique : pâleur et/ou signes d'anoxie (palpitations, dyspnée…)
 Des signes évoquant une augmentation d'une ou plusieurs lignées sanguines :
 Érythrose cutanée ou prurit à l'eau,
 Thromboses artérielles ou veineuses,
 Syndrome tumoral : adénopathies, splénomégalie…
 Syndrome hémorragique aigu, purpura, ecchymoses ou hématomes anormaux…
 Syndrome infectieux inexpliqué, persistant, récidivant ou grave.
 Syndrome inflammatoire.
 À la recherche de l’origine de l’un de ces signes ou symptômes :
 D’une fatigue.
 D’une pâleur (jaunisse).
 D’une cyanose.
 D’une déshydratation.
 D’une hyper ou hypotension artérielle.
 D’une fièvre.
 D’un purpura.
 D’une infection.
 D’une inflammation.
 Une atteinte de l'état général : Asthénie, anorexie, amaigrissement, fièvre au
long cours, douleurs osseuses…
 Etc.
 Pour la surveillance d’un traitement
 Certaines situations systématiques ou bilans :
 Grossesse
 Médecine du travail
 Médecine de dépistage
 Bilan d’hospitalisation
 Bilans per-opératoires
 Bilans post-opératoires
 Bilans pré-thérapeutiques
 Suivis thérapeutiques
 Etc.
5.3. Prélèvement
Prélèvement minimum 2cc de sang veineux sur tube contenant l’EDTA (éthylène diamine tétra-
acétique qui est un anticoagulant sec, ce qui permet d’éviter les erreurs de comptage dues à la
dilution du sang par un excès d’anticoagulant liquide comme l’héparine).
S’il y a lieu il faut respecter le trait indiqué sur le tube à prélèvement.
Parfois du sang capillaire dans des micro-tubes calibrés (pulpe du doigt, talon) chez le
nourrisson et le nouveau-né.
Il est inutile que le patient soit à jeun, mais il doit être au repos, car l’effort physique intense
peut provoquer des hyperleucocytoses.
28
5.4. Interprétation des résultats

 Valeurs usuelles
 Hémoglobine (Hb) est la protéine des globules rouges qui transporte l’oxygène aux
tissus et qui est responsable de la couleur rouge du sang. La concentration
d’hémoglobine est exprimée en g/dL.
 Globules rouges (GR) sont des cellules anucléées de 7 à 8 de diamètre. Elles
contiennent essentiellement de l’hémoglobine.
 Hématocrite (Ht) est le % du volume sanguin occupé par les globules rouges.
 Volume des globules rouges (VGM) = Hématocrite/Nombre de globules rouges,
exprimé en femtolitres (1 fl. = 10-15 litres)
 Concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine (CCMH) = Hémoglobine /
Hématocrite, exprimée en g/dL (ou en %).
 Teneur corpusculaire moyenne en hémoglobine (TCMH). La quantité
d’hémoglobine contenue dans un globule rouge, la TCMH = Hémoglobine / Nombre
de globules rouges, exprimés en pg/cellule (1 pg = 10-12 g).
Tableau 1 : résumé des valeurs usuelles dans l’hémogramme
GR (X 106 CCMH TCMH
Hb (g/dL) Ht (%) VGM (fl)
E/μL) (g/dL) (pg)
Homme 4,5 à 6 13 à 18 40-54
85 - 95 27 à 32
Femme 4 à 5,4 12 à 16 35-47
32 à 36
Enfant 3,6 à 5,4 12 à 16 36-44 70 - 85 24 à 31
Nouveau-né 4,5 à 6 14 à 20 44-60 100 -110 29 à 37
 Variations pathologiques
 Attention aux variations physiologiques (âge, sexe, effort…)
 Un taux d’hémoglobine inférieur à la normale traduit une anémie.
 Un nombre des GR inférieurs à la normale traduit une hémorragie ou une anémie
également, mais il est moins représentatif que le taux d’hémoglobine…
 Un taux d’hématocrite au-dessus des valeurs de référence peut être le signe d’une
polyglobulie, il peut également être constaté lors d’une déshydratation sévère de
l’organisme (cas des brulures étendues…) tandis que la diminution de l'hématocrite
traduit, dans la plupart des cas, une anémie (diminution de globules rouges ou
d’hémoglobine) …
 Un VGM inférieur à la normale définit la microcytose, un VGM supérieur à la normale
définit la macrocytose.
 Une CCMH inférieure à la normale traduit une hypochromie, une CCMH normale
traduit une normochromie (il n’y a pas d’hyperchromie).
 Moins utilisée que la CCMH, la TCMH est plus sensible pour juger d’une hypochromie.
 Etc.
29
5.5. Formule leucocytaire

La formule leucocytaire ou formule blanche est la numération de chacune des catégories de
leucocytes par unité de volume.
 Le nombre normal des leucocytes varie entre 4000-10000 E/mm3.
 En dessous de 4000/mm3 on parle de leucopénie.
 Au-dessus de 10000/mm3 d'hyperleucocytose.
On retrouve à l'état normal 5 types de leucocytes dans le sang.
 Les polynucléaires neutrophiles (PNN) ont un rôle dans l'élimination par
phagocytose des particules étrangères en particulier les bactéries. Chiffres normaux :
2000 à 7500 E/mm3
 Les polynucléaires éosinophiles ont un rôle dans l'allergie et la lutte antiparasitaire.
Chiffres normaux: 100 à 500 E/mm3
 Les polynucléaires basophiles ont un rôle dans l'hypersensibilité immédiate. Chiffres
normaux : 0 à 150/mm3
 Les lymphocytes ont un rôle dans l'immunité cellulaire et humorale (synthèse
d'anticorps). Chiffres normaux : 1500 à 4000/mm3
 Les monocytes ont un rôle dans la phagocytose et l'immunité. Chiffres normaux : 200
à 1000/mm3
Remarque :
 L’interprétation d’une formule sanguine doit se faire à partir des nombres absolus (les
pourcentages sont source de confusion)
 La formule leucocytaire est plus importante que le chiffre total de leucocytes.
5.6. Plaquettes
Les plaquettes sont des petites cellules anucléées circulant dans le sang. Elles ont un rôle
essentiel dans la coagulation à travers l'hémostase primaire (clou plaquettaire).
 Le taux habituel des plaquettes varie entre 150 000 et 450 000 /mm3.
 Si la valeur est inférieure à 150000 E/mm3 on parle d’une thrombopénie.
 Devant une valeur supérieure à 450000 E/mm3 on parle d’une thrombocytose
(ou d’hyperplaquettose).
5.7. Réticulocytes
Les réticulocytes sont les précurseurs immédiats des globules rouges encore capables de
synthétiser de l’hémoglobine. En circulation depuis moins de 48 heures, ils sont reconnaissables
au réticulum (réticulocytes).
 Le taux normal des réticulocytes est de 25000 à 75000 / mm3 soit : 1 à 3% des GR (il
est toujours exprimé en nombre absolu).
 Lorsque le chiffre des Réticulocytes est supérieur à 120.000/ mm 3, on dit que
l’anémie est dégénérative (hémorragie, hémolyse…).
 Lorsque ses chiffres sont inférieurs à la normale, on parle d’une anémie non
dégénérative (carence en fer, en vitamine B12 …).
30
6. Vitesse de sédimentation
6.1. Généralités
Ce test mesure la sédimentation des hématies dans un échantillon de sang rendu incoagulable
et laissé dans un tube vertical en verre (tube de Westergren).
Son résultat et exprimé en millimètres après 1 h.
La VS est influencée par la concentration plasmatique des protéines impliquées dans
l’inflammation et les immunoglobulines sériques.
 Remarque:
 C’est un test non spécifique de l’inflammation.
 La VS dépend pour une part du nombre et de la forme des globules rouges.
 Même si cet examen reste demandé, il tend à être remplacé par des examens plus
fiables comme le dosage de la CRP qui a l’avantage de ne pas varier avec l’âge.
6.2. Indications
 Recherche d’une inflammation.
 Devant une céphalée unilatérale : recherche d’urgence d’une maladie de Horton.
 Examen prescrit quasi systématiquement par certains médecins en même temps que la
NFS (pratique à éviter).
6.3. Prélèvement
Prélèvement de 1,6 cc de sang dans un tube contenant 0,4 cc d’une solution de citrate à 3,8 %,
dans un tube de couleur noir, de préférence au laboratoire et de préférence à jeun.
6.4. Interprétations des résultats

 Valeurs normales après une heure :
Homme femme
Jeune 15 20
65 ans et plus 30 35
 Variations :
 Les mesures de la VS à la deuxième heure et plus, sont inutiles, car elles n’apportent
pas plus de renseignements qu’une mesure unique à la 1ère heure.
 La VS augmente avec l’âge. Il est dit parfois que la valeur normale de la VS d’un
homme est égale à la moitié de son âge (35 mm pour un âge de 70 ans) pour une
femme à la moitié de son âge+10 (40 mm pour un âge de 70 ans).
 La mesure de la VS n’est pas pratiquée pendant la grossesse, car elle est
régulièrement élevée > 40–50 mm à partir du 2e trimestre.
 La VS est augmentée dans tous les états inflammatoires quelle qu’en soit la cause
(maladies infectieuses ou rhumatismales, maladies auto-immunes, cancers, nécroses
tissulaires, etc.)
 Les gammapathies sont parmi les affections qui donnent les VS les plus élevées.
C’est pourquoi il est de règle de rechercher un myélome, une maladie de
Waldenström, éventuellement un lymphome B, chaque fois que la VS > 120 mm.
 Beaucoup de patients âgés ont une VS élevée sans cause apparente.
 La VS dépend pour une part du nombre et de la forme des globules rouges.
31
7. Hémoglobine glyquée
7.1. Généralités
Le glucose plasmatique se fixe sur toutes les protéines y compris l’hémoglobine selon une
réaction de glycation. Cette réaction, dont l’intensité est proportionnelle à la glycémie, est un
processus continu qui se poursuit pendant toute la vie du globule rouge.
L’hémoglobine glyquée (HbA1c) résulte de la fixation du glucose sur l’hémoglobine A1c qui
constitue 98 % de l’hémoglobine chez l’adulte.
Le pourcentage d’HbA1c est un reflet cumulatif des glycémies des 4 mois précédents
(correspondant à la durée de vie moyenne d’un globule rouge : 120 jours). D’où son intérêt pour
le dépistage et le contrôle du diabète.
L’avantage de l’hémoglobine glyquée est qu’elle n’est pas sensible aux aléas d’un jeûne.
7.2. Prélèvement
Prélèvement du sang veineux minimum 2 cc prélevé sur tube contenant de l’éthylène diamine
tétra-acétique (EDTA) ou l’héparine (à défaut).
7.3. Interprétation des résultats
Valeur normale: Chez un sujet normal la valeur normale de l’HbA1c est comprise entre de 4
et 6 %.
Variations pathologiques:
 Une hémoglobine glyquée comprise entre 5,7 et 6,4 % indique un risque de voir se
développer un diabète ultérieurement.
 Le diabète se définit par une hémoglobine HbA1c > 6,5 %.
 Chez le diabétique bien équilibré HbA1c reste proche du taux du sujet normal et reste
donc < 7 %, l’ensemble des diabétologues recommandent aux diabétiques de rester au
alentour de 7 %.
 Lorsque le diabète est mal équilibré, les taux d’hémoglobine glyquée se situent entre 8
%et 12 %
8. Examens d’hémostases
8.1. Généralités
 L’hémostase :
C’est un mécanisme physiologique qui englobe une série de processus cellulaires et
biochimiques assurant l’obturation de la brèche tissulaire et le contrôle de l’hémorragie…
L’hémostase comprend plusieurs étapes intriquées et interdépendantes qu’il convient d’isoler
par souci descriptif en :
 Hémostase primaire, première étape d’urgence du contrôle hémorragique, conduisant
au thrombus plaquettaire en une durée de 3 à 5 minutes ;
 Hémostase secondaire, ou coagulation plasmatique, dont le rôle est de consolider le
thrombus plaquettaire par la constitution d’un réseau protéique de fibrine en une durée
de 5 à 10 minutes ;
 Fibrinolyse assurant secondairement la dégradation enzymatique de la masse
fibrinoplaquettaire à l’issue de la réparation vasculaire en une durée de 48 à 72 heures.
32
 Les voies de coagulation :

La coagulation est une cascade d'événements qui conduit à l'hémostase. Elle permet une
guérison rapide et la prévention des saignements spontanés. Deux voies, intrinsèques et
extrinsèques, débutent séparément, mais convergent en un point spécifique, conduisant à
l'activation de la fibrine. Le but est de stabiliser à terme le bouchon plaquettaire avec un
maillage de fibrine (figure 13).
Figure 13 : la cascade de la coagulation
33
 Les différents facteurs de coagulation (tableau)

Les facteurs de coagulation sont au nombre de 13. Ils sont en libre circulation dans le sang et
n'interviennent que lors de la réaction de coagulation qui est initiée par les plaquettes sanguines.
Ils sont fabriqués par le foie.
Tableau : résumé des différents facteurs de coagulation
8.2. Prélèvement
Prélèvement sanguin pour test d’hémostase, il est indispensable de respecter les précautions
suivantes :
 Patient de préférence à jeun (pas obligatoire);
 Pas de prélèvement sur cathéter.
 Recueillir le sang sur citrate à la concentration d’un volume de citrate pour neuf volumes
de sang (tout autre anticoagulant est proscrit).
 Respecter strictement le volume de sang à prélever tel qu’il est indiqué sur le tube fourni
par le laboratoire;
 Ne pas laisser le garrot en place plus de 1 min.
 Homogénéiser le sang et l’anticoagulant par huit à dix retournements successifs;
 Envoyer au laboratoire immédiatement.
34
8.3. Fibrinogène
Protéine qui intervient dans la coagulation, c’est le facteur numéro I parmi les facteurs de la
coagulation (tableau).
 Indication :
 Troubles d’hémostase
 Infections bactériennes ou virales
 Syndromes néphrotiques
 Rhumatisme inflammatoire
 Insuffisances hépatiques
 Etc.
 Valeur normale: 2 à 4 g/L
8.4. Taux de prothrombine

Le taux de prothrombine (TP) ou le temps de Quick explore la voie extrinsèque (exogène) de
la coagulation, c’est aussi le facteur numéroté II parmi les facteurs de la coagulation.
Il se fait par une simple prise de sang, le patient n'ayant pas besoin d'être à jeun. Le résultat peut
être disponible en moins d'une heure.
Le taux de prothrombine est la transformation d'un temps de coagulation (temps de Quick) en
pourcentage. Ce taux est exprimé en pourcentage ou en secondes.
 Indications
 Bilan systématique (d’admission, préopératoire...)
 Trouble d’hémostase (diagnostic d’un syndrome hémorragique…)
 Insuffisances hépatiques
 Suivi et réglage des traitements par anticoagulants oraux.
 Recherche d’une coagulation intravasculaire disséminée (CIVD)
 Valeur normale : Le taux de prothrombine (TP) est normalement supérieur à 70%
8.5. Taux de céphaline kaoline
Le taux de céphaline kaoline (TCK) ou taux de céphaline activateur (TCA) est un test qui
explore les facteurs plasmatiques de la voie intrinsèque (endogène) de la coagulation.
 Indications:
 Troubles d’hémostase
 Bilan systématique à l’admission ou préopératoire.
 Recherche d’une insuffisance hépatocellulaire,
 Recherche d’une coagulation intravasculaire disséminée (CIVD).
 Suivi des traitements par héparine non fractionnée.
 Recherche d’un anticoagulant circulant de type lupique.
 Etc.
 Valeur normale : Le résultat est exprimé en second il est souvent exprimé par
comparaison du temps du malade à celui d’un plasma témoin normal. Ce rapport temps
de coagulation du sang du malade / temps de coagulation du sang témoin est compris
entre 0,8 et 1,2.
35
8.6. International Normalized Ratio

L’international Normalized Ratio ou L’INR est un rapport entre deux temps de coagulation
(celui du plasma à tester et celui d’un plasma témoin) élevé à la puissance ISI (indice de
sensibilité international, spécifique de la thromboplastine utilisée).
 Indication:
 La surveillance d’un traitement anticoagulant par les antivitamine K les résultats
du TP est exprimée en INR (International Normalized Ratio), qui pallie les
inconvénients de l’absence de standardisation des réactifs et limite les
différences observées entre deux laboratoires.
 Valeurs normales : L’INR normale est comprise entre 1 et 1,30 (entre 2 et 3 si le
malade est sous antivitamine K).
8.7. D-dimère
Les D-dimères sont issus de la dégradation de la fibrine (protéine finale de la coagulation
sanguine) lors du processus de fibrinolyse.
Quand la coagulation sanguine est insuffisante, elle peut être à l’origine de saignements
spontanés (hémorragies). Au contraire, lorsqu’elle est excessive, elle peut être associée à
la formation de caillots sanguins pouvant avoir des conséquences néfastes (thrombose veineuse
profonde, embolie pulmonaire). Dans ce cas, un mécanisme de protection se met en place pour
dégrader la fibrine en excès et la réduire en fragments, certains d’entre eux étant les D-dimères.
Leur présence peut donc témoigner de la formation d’un caillot sanguin.
 Indications : Le dosage sanguin des D-dimères aide au diagnostic de:
 Une thrombose veineuse profonde (phlébite)
 Une embolie pulmonaire
 Accident vasculaire cérébral
 Valeurs normales : Le taux des D-dimères normal est inférieur à 500 μg/l.
Ce taux est peut-être augmenté, chez les personnes âgées, la femme enceinte, devant une
maladie inflammatoire, une hémorragie, une maladie du foie, prise de certains médicaments …
36
Partie 5.
Examens biochimiques
37
1. Examens biochimiques du sang

1.1. Glycémie
La glycémie est le taux de glucose dans le sang, ou plus exactement dans le plasma sanguin.
Il constitue la principale source énergétique des cellules, transportée par le plasma dans les
différents tissus de l’organisme, il est catabolisé en substrats nécessaires à l’anabolisme des
lipides ou acides aminés. Le glucose est stocké principalement dans le foie, sous forme de
glycogène, qui est dégradé par les cellules en fonction de leurs besoins.
 Prélèvement: minimum 2cc du sang veineux dans un tube sec ou hépariné, ou fluorure,
effectué à jeun depuis 12 heures ou 2 heures après un repas (Si glycémie postprandiale).
 Valeurs normales:
 La glycémie à jeun normale comprise entre 0,7 et 1,1 g/l
 La glycémie post-prandiale est généralement inférieure à 1,4 g/l.
 Variations pathologiques:
 Hypoglycémie : Une valeur de glycémie inférieure à 0,7g/l. Rencontré en cas de
mauvais apport alimentaire ou en cas d’utilisation excessive (chez les
diabétiques sous insulinothérapie…)
 Hyperglycémie : Une valeur de glycémie à jeu nsupérieure à 1,26g/l.
(l’hyperglycémie persistante est rencontrée chez les diabétiques).
Remarque :
 Le diagnostic du diabète est posé quand la glycémie est supérieure à 1,8 g/L à
n’importe quel moment de la journée y compris en postprandial et confirmé par
un taux d’hémoglobine glyquée, HbA1c supérieur à 6,5 %.
 Dans ce cours le plasma ou le sérum sanguin sont utilisés dans le même sens.
1.2. Urémie
L’urémie est le taux de l’urée dans le plasma sanguin.
L’urée est un déchet azoté provenant de la dégradation des protéines par le foie, filtré par les
reins et éliminé dans les urines. Le taux d’urée dépend à la fois de la fonction rénale, des apports
alimentaires protéiques, de la destruction des protéines de l’organisme, de l’âge et de l’état
d’hydratation de la personne.
 Prélèvement: minimum 2 cc du sang veineux dans un tube sec ou hépariné.
 Chez l’adulte soit 0,10 - 0,50 g/L
 Chez le nouveau-né 0,10 - 0,25 g/L
 Diminution : Jeûne prolongé, malnutrition, hépatite et insuffisance hépatique.
 Augmentation: Effort prolongé, insuffisance rénale aiguë ou chronique (associé
à la clairance de la créatinine).
1.3. Créatinémie
La créatinémie est le taux de la créatinine dans le plasma sanguin.
La créatinine est un déchet de la dégradation de la créatine, éliminée en majeure partie par les
reins. Son taux dans l'organisme dépend de la capacité d'élimination rénale et de la masse
musculaire.
38
 Prélèvement: >2cc du sang veineux dans un tube sec ou hépariné.

 Valeurs normales: Chez l’adulte <15 mg/l
 Diminution : taux de créatininémie est abaissé dans les atrophies musculaires et
pendant la grossesse ;
 Augmentation : Insuffisance rénale aigüe ou chronique.
1.4. Uricémie
L’uricémie est le taux de l’acide urique dans le plasma sanguin.
L’acide urique ou l’urate est le produit de la dégradation des purines. Ces derniers proviennent
pour une part de l’alimentation et, pour l’essentiel, de la purinosynthèse endogène qui résulte
du catabolisme des acides nucléiques au cours de la destruction et du renouvellement cellulaire.
 Indications:
 Diagnostic et suivi de certaines maladies : goutte, insuffisance rénale chronique,
syndrome de lyse, syndromes myéloprolifératifs, toxémie gravidique, etc.
 Contrôle de certains traitements : par le pyrazinamide ou l’allopurinol,
chimiothérapiques ou radiothérapiques, etc.
 Prélèvement: 2cc de sang veineux chez un sujet à jeun est au repos (efforts physiques
importants affecte le résultat) recueil le sang sur tube sec ou hépariné.
 Homme : 40 à 60 mg/L (240 à 360 mmol/L).
 Femme : 30 à 50 mg/L (180 à 300 mmol/L).
 Enfant : 20 à 40 mg/L (120 à 240 mmol/L).
 Hypouricémie, une valeur d’acide urique inférieur à la normale rencontrée en
cas de grossesse, la prise de certains médicaments ou une insuffisance
hépatocellulaire.
 Hyperuricémie, une valeur d’acide urique supérieur à la normale rencontrée
dans : la goutte, l’obésité, l’alcoolisme, l’insuffisance rénale chronique, la
déshydratation, le jeûne prolongé, certains cancers, etc.
1.5. Ionogramme sanguin
L'ionogramme est le dosage des principaux électrolytes d’un liquide organique (sang, urines,
liquide céphalo-rachidien).
Ces électrolytes sont des sels, acides, bases. C'est un examen biologique très courant et très utile
pour dépister les troubles ioniques qui surviennent dans les maladies rénales, hormonales,
maladies iatrogènes, les troubles de l'hydratation, les troubles gastro-intestinaux (diarrhée,
vomissements), les malnutritions, et dans toute perturbation de l’équilibre acido-basique de
l’organisme. Cet examen fait partie des éléments de surveillance d'un malade sous traitement
(diurétiques par exemple).
Ces électrolytes, capables de se dissocier en solution pour former des ions. Ces ions sont de
deux types :
 Les cations (ions positifs attirés par la cathode) tels que :
 Sodium Na+,
 Potassium K+,
 Calcium Ca2+,
39
 Magnésium Mg2+.
 Les anions (ions négatifs attirés par l’anode) tels que :
 Chlorure Cl-,
 Bicarbonates HCO3-,
 Phosphates HPO42-,
 Protéines.
Remarque : les acides nucléiques sont également des molécules chargées négativement
1.6. Protéinémie
La protéinémie c’est le taux des protéines dans le plasma sanguin. Les protéines sont des
macromolécules complexes d'acides aminés, constituant essentiel des matières organiques et
des êtres vivants. On trouve plus d’une centaine de protéines différentes en circulation dans le
sang (albumines, globulines …).
 Indications: Le dosage des protéines totales dans le sang (protéinémie) à plusieurs
indications :
 C’est un examen très courant qui permet d’évaluer la fonction de certains
organes (le foie, les reins) et de mettre en évidence certaines anomalies
(syndrome inflammatoire, maladies auto-immunes, lymphomes, etc.), par la
suite il permet orienter un diagnostic, préciser la gravité d’une maladie ou suivre
l’efficacité d’un traitement.
 Ainsi, ce dosage peut être prescrit, en cas de syndrome inflammatoire,
d’altération de l’état général, d’anomalies de l’hémogramme, des douleurs
osseuses ou articulaires inexpliquées, des troubles hépatiques, d’insuffisance
rénale, etc.
 Prélèvement: Minimum 2cc de sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné
 Valeur normale : Entre 60 et 80 g/L
 Variations pathologiques
 L’hypoprotéinémie: états de dénutrition, insuffisance hépatique, cirrhose, état
de choc…;
 L’hyperprotéinémie (> 80 g/l): Hémoconcentration (diarrhée, vomissements,
acidose diabétiques)
Remarque: en cas de variations pathologiques, une électrophorèse des protéines s’impose.
1.7. Albuminémie
L’albuminémie est le taux de l’albumine dans le sang. L’albumine est la protéine la plus
abondante dans le sérum sanguin (60 % des protéines sériques), synthétisé par le foie,
l’albumine est un transporteur de nombreux éléments (bilirubine, Ca2+, hormones, vitamines,
médicaments…) et joue un rôle capital dans le maintien de la pression oncotique du plasma.
 Indications: l’albuminémie est indiquée dans les cas de:
 Diagnostic d’une insuffisance hépatocellulaire au cours d’une affection
hépatobiliaire
 Confirmation du diagnostic de syndrome néphrotique.
 Bilan d’une malabsorption découverte à l’occasion d’une diarrhée chronique
40
 Prélèvement: Minimum 2 cc de sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné.

 Valeur normale: Entre 40 et 50 g/L.
 Hypoalbuminémies, c’est une valeur d’albumine inférieure à la normale, cette
dernière est un excellent signe d’hémodilution. Sinon, elle témoigne soit d’une
insuffisance de synthèse (états de dénutrition, insuffisance hépatique,
cirrhose…), soit d’une exagération des pertes protidiques.
 Hyperalbuminémie, c’est une valeur d’albumine supérieure à la normale,
cette dernière ne reconnaît qu’une seule cause, l’hémoconcentration.
1.8. Phosphorémie
La phosphorémie (HPO42- ) ou phosphatémie est le taux de phosphore à l'état
de phosphates dans le plasma sanguin.
Le phosphore lié au calcium constitue la trame minérale de l’os. Le phosphore intervient aussi
dans l’équilibre acido-basique (tampon phosphates) et dans de nombreuses voies métaboliques.
 Indications: insuffisance rénale, exploration des troubles du métabolisme
phosphocalcique, exploration des affections parathyroïdiennes, etc.
 Prélèvement: minimum 2cc de sang veineux recueilli sur un tube sec ou sur Héparine,
de préférence à jeun.
 Valeur normale: comprise entre 25 et 50 mg/L chez l’adulte.
 L’hypophosphorémie correspond à une diminution anormale du taux de
phosphate dans le plasma. Observé dans l’hyperparathyroidie, le rachitisme et
l’ostéomalacie (carence en vit D)…
 L’hyperphosphorémie: corresponds à une élévation anormale du taux de
phosphate dans le plasma. Observé dans insuffisance rénale,
l’hypoparathyroidie, l’hypervitaminose D, tumeurs osseuses, leucémies...
1.9. Chlorémie
La chlorémie (Cl-) correspond à la quantité de l’ion chlorure dans le plasma sanguin.
 Indications:
 En cas de déshydratation;
 Déséquilibre acido-basique;
 Coma diabétique;
 Insuffisance rénale.
 Prélèvement: minimum 2 cc de sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné.
 Valeur normale comprise entre 95 à 105 mmol/L
 Variations pathologiques :
 Hypochlorémie, un déficit d'ions chlorures peut être dû à :
 Un déficit d'apport de sodium : pertes digestives, rénales;
 Une augmentation de la quantité d'eau (hyperhydratation) : insuffisance
cardiaque, rénale, hépatique;
 Une hyponatrémie de dilution.
 Hyperchlorémie, un excès d'ions chlorures (hyperchlorémie) peut avoir comme
conséquences :
 Déshydratation (une diminution de la quantité d’eau) : pertes digestives,
diminution d'apport hydrique, perte d'eau importante, sudation
 Une surcharge de sodium
41
1.10. Bicarbonate
Les bicarbonates plasmatiques (HCO3-), principaux constituants, avec le chlore, de
l’ionogramme sanguin, constituent le tampon extracellulaire le plus important (d’où le nom des
réserves alcalin).
Ils se comportent « comme une éponge » capable d’absorber puis d’éliminer les ions hydrogène
H+ : en se combinant aux ions hydrogène, ils forment de l’acide carbonique (H2CO3) qui va
donner le dioxyde de carbone (CO2) et l’eau.
 Indications: Le dosage des bicarbonates est inclus dans l’ionogramme sanguin et dans
la mesure des gaz du sang. Sa concentration permet de reconnaître et d’évaluer les
acidoses et les alcaloses métaboliques.
 Prélèvement : minimum 2 ml de sang veineux recueilli dans un tube sec ou héparine.
 Valeurs normales: est entre 22 et 26 mmol/L
 Variations pathologiques :
 Augmentation :
 Les insuffisances respiratoires chroniques.
 Les alcaloses métaboliques dues à des vomissements répétés
accompagnés de diarrhées …
 L’acidose respiratoire.
 Diminution :
 Acidoses métaboliques (chez les diabétiques, acidocétose diabétique
lors des états de choc…).
 Insuffisance rénale et hépatique sévère.
 Alcalose respiratoire …
1.11. Natrémie
La natrémie est le taux du sodium dans le sérum sanguin. Le sodium (Na+) est le cation le plus
important du secteur extracellulaire dans lequel il se trouve sous forme de chlorures et de
bicarbonates. Les sels de sodium constituent les principaux électrolytes osmotiquement actifs
du secteur extracellulaire, de sorte que les variations de l’eau et du sodium sont liées.
 Indications:
 Pour apprécier l'état de l'hydratation intracellulaire du patient et pour la détection
des troubles hydroélectrolytiques en association avec d’autres examens
biologiques.
 Détection: des néphrites, des problèmes rénaux, dont l’insuffisance rénale, des
pertes salines (diarrhées, vomissements …), de l’insuffisance corticosurrénale,
des hépatites, des cardiopathies...
 Prélèvement: > 2cc du sang veineux à jeun recueilli dans un tube sec ou hépariné.
 Valeurs normales: 135 - 145 mmol/L
 Quand la natrémie baisse (hyponatrémie), l’eau rentre dans les cellules, les
cellules gonflent. On parle d’hyperhydratation intracellulaire. En clinique il se
traduit par une:
 Déshydratation extracellulaire: perte de poids, pli cutané, hypotension
orthostatique, tachycardie
 Hémoconcentration: hématocrite, protidémie et urée plasmatique élevés
 Insuffisance rénale fonctionnelle
 Signe d’inflation hydrique : œdèmes, ascite, pleurésie…
42
 Quand la natrémie augmente (hypernatrémie), l’eau sort des cellules, les cellules
rétrécissent. On parle de déshydratation intracellulaire. Elle est rare par rapport
à l’hypernatrémie et se voit surtout aux extrêmes d’âge et chez les hospitalisés
en réanimation il se traduit par:
 La soif, déshydratation, faiblesse musculaire et signes neurologiques
(agitation, confusion, convulsions) avec risque d’hématome cérébral.
1.12. Kaliémie
La Kaliémie c’est le taux du potassium dans le plasma sanguin.
Le potassium est le principal cation (k+) intracellulaire, en particulier dans les cellules
musculaires. Il existe un très fort gradient de concentration entre le potassium intracellulaire et
extracellulaire, entretenu par des pompes situées dans les membranes cellulaires. Il intervient
dans les phénomènes suivants :
 Entretien d'un gradient ionique et donc la polarisation membranaire
 Contraction musculaire
 Automatisme cardiaque
 Indications: La kaliémie est un examen d’extrême urgence, surtout dans les acidoses
graves (coma diabétique, insuffisance rénale aiguë, etc.). Il fait également partie des
bilans hydrominéraux et acido-basiques.
 Prélèvement: > 2cc du sang veineux à jeun recueilli dans un tube sec ou hépariné.
 Valeurs normales: 3,5 - 4,5 mmol/l
 Interprétation: La kaliémie est très finement régulée, en particulier au niveau du rein,
les variations pathologiques de la kaliémie sont:
 Hypokaliémie rencontrée lors du vomissement, diarrhée, sténose du pylore ou
lors d’un traitement par des corticoïdes, les sulfamides, les diurétiques, etc.
 Hyperkaliémie rencontrée lors d’une insuffisance rénale, problèmes
cardiaques, coma diabétique, état de choc (brulures, choc transfusionnel), etc.
1.13. Calcémie
La calcémie est le taux du calcium dans le sérum sanguin.
 Intérêt: Le calcium est un minéral très important pour la formation des os. Il participe
à la régulation de la perméabilité des membranes cellulaires, à la coagulation
sanguine… Sa répartition dans l'organisme est régulée par des hormones et son analyse
peut permettre le diagnostic de désordres hormonaux, de pathologies des os… Il est
déterminé essentiellement en cas de troubles acido-basiques importants.
 Indications:
 Bilan systématique de dépistage d’une hypo ou hypercalcémie;
 En urgence, devant toute crise convulsive chez le nouveau-né et le jeune
enfant;
 Avec les phosphates (bilan phosphocalcique), diagnostic et surveillance des
maladies osseuses (rachitisme, ostéomalacie…).
 Prélèvement: 2 à 5 ml de sang veineux recueilli sur un tube sec ou sur Héparine, de
préférence à jeun.
 Valeur normale: chez l’adulte est comprise entre 90 mg/l et 110 mg /l
 Hypocalcémie: observer en cas d’apports insuffisants, d’hypoprotéinémie,
d’hypomagnésémie, d’hypoparathyroïdie, de tétanie, de néphrite, de
rachitisme, chez les prématurés et parfois le nouveau-né.
43
 Hypercalcémie: observée en cas d’hypervitaminose D, d’hyperparathyroïdie,

de décalcification,
 Etc.
1.14. Magnésémie
Le magnésium est l’un des cations principaux du milieu intracellulaire. Il est indispensable au
fonctionnement de très nombreuses enzymes. Le besoin quotidien alimentaire chez l’adulte est
de 300 mg; les principales sources alimentaires sont le lait et les végétaux.
 Intérêt: est demandé dans l’insuffisance rénale aiguë, le coma diabétique
acidocétosique et dans le cadre d’un bilan nutritionnel.
 Prélèvement: 2 à 5ml du sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné.
 Valeur normale : 0,75 - 1 mmol / L (17 – 22 mg/L)
 Hypermagnésémie: dépression du système nerveux central;
 Hypomagnésémie: Diminution de l’absorption digestive : dans les maladies de
l’intestin grêle, dans les malnutritions, en cas d’insuffisance rénale, par perte
urinaires excessives ou emploi de diurétiques et en cas d’hypercalcémies.
1.15. Sidérémie
La sidérémie ou fer sérique et le taux du fer en circulation libre dans le plasma. Le fer est un
constituant essentiel de l’hémoglobine. Il est également indispensable à d’autres fonctions de
l’organisme, comme la synthèse de l’ADN ou certaines réactions enzymatiques…
70% du fer de l’organisme est lié à l’Hb, le reste est fixé à des protéines de
transport (la ferritine ou la transferrine) ou stocké dans certains tissus du corps (ex. la moelle
osseuse), le fer est stocké et il est utilisé pour fabriquer de nouveaux GR.
Le fer provient de l’alimentation (le foie et autres viandes, les œufs, le poisson, ou encore les
légumes verts). Il est particulièrement nécessaire pendant la croissance, la grossesse,
l’allaitement ou encore après un important saignement.
 Indications: Le dosage du fer sérique permet d’évaluer le taux de fer dans l’organisme
et la manière dont il est métabolisé. Cela permet de diagnostiquer par exemple:
 Une carence martiale,
 Une anémie ferriprive,
 Hémoglobinopathie (thalassémie, drépanocytose …)
 Une hémochromatose (excès de fer dans l’organisme),
 Vérifier l’état nutritionnel du patient.
 Prélèvement: 2 à 5ml du sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné (aiguille
en nickel).
 Valeur normale: comprise entre 70 et 190 mg/dL
 Variation pathologique:
 Un taux élevé de fer sérique peut-être le signe, d’une hémochromatose
(surcharge en fer), une anémie hémolytique (destruction prématurée des
globules rouges dans le sang), une nécrose hépatique, une hépatite, une cirrhose,
l’alcoolisme chronique, la répétition de transfusions sanguines, etc.
44
 Un niveau bas de fer est peut-être lié à une perte de sang importante, notamment
lors de menstruations abondantes, une grossesse, une carence en fer (carence
martiale) liée à l’alimentation, une carence liée à une incapacité à absorber
correctement le fer, des saignements dans le tractus intestinal (des ulcères, un
cancer du côlon, des hémorroïdes).
1.16. Ferritinémie
La ferritinémie est le dosage du taux de ferritine dans le sang.
La ferritine est une protéine qui se trouve à l’intérieur des cellules et se lie au fer, de sorte qu’il
soit disponible en cas de besoin (stock du fer). Elle est présente dans le foie, la rate, les muscles
squelettiques, la moelle osseuse et dans la circulation sanguine en plus petite quantité.
 Indications: Le dosage de la ferritine mesure indirectement la quantité de fer dans le
sang. Il peut être prescrit pour:
 Repérer une cause en cas d’anémie
 Détecter la présence d’une inflammation
 Détecter une hémochromatose (excès de fer dans l’organisme)
 Évaluer le bon fonctionnement d’un traitement visant à augmenter ou diminuer
le niveau de fer dans l’organisme.
 Prélèvement: 2 à 5ml du sang veineux recueilli de préférence le matin à jeun dans un
tube sec ou hépariné.
 Chez l’homme : 30 et 300 ng/ml
 Chez la femme: 20 et 200 ng/ml
 Une hyperferritinémie (un taux élevé de ferritine) peut être le signe de:
 Une hémochromatose
 Un alcoolisme chronique
 Une maladie inflammatoire
 Une atteinte du pancréas, du foie ou du cœur
 Certains types d’anémie, ou encore à une poly transfusion sanguine, etc.
 Une hypoferritinémie (un taux bas de ferritines) est généralement le signe d’une
carence en fer à cause de:
 Grossesse
 Manque de fer provenant de l’alimentation
 Des saignements (métrorragies, ulcères, un cancer du côlon, des
hémorroïdes, etc.) …
1.17. Transferrinémie
La transferrinémie est le taux de la transferrine dans le plasma sanguin.
La Transferrine ou la sidérophiline est une protéine synthétisée par le foie. Elle est chargée du
transport des ions de fer.
 Indications: est utile dans:
 Anémies macrocytaires ;
 Anémies inflammatoires;
 Surveillance des polytransfusés;
 Carences martiales.
45
 Prélèvement: 2 à 5ml du sang veineux recueilli de préférence le matin à jeun dans un

tube sec ou hépariné.
 Le taux normal de transferrine dans le sang oscille entre 2 et 4 g/L.
 Taux de transferrine élevé (hypertransferrinémie): rencontré en cas de grossesse,
carence en fer, hémorragie aigüe…
 Taux de transferrine bas (hypotransferrinémie): rencontré en cas d’une
surcharge en fer, processus inflammatoire, insuffisance hépatique, syndromes
néphrotiques, atransferrine congénitale….
1.18. Gazométrie
La gazométrie artérielle (gaz du sang ou GDS dans le langage courant) est une analyse de
laboratoire qui permet d'évaluer la fonction respiratoire et acidobasique d'un patient. L’analyse
des gaz du sang (gazométrie sanguine) consiste à mesurer l’acidité, les niveaux d’oxygène et
de dioxyde de carbone dans le sang artériel.
 Prélèvement :
2 à 5 cc du sang artériel pour dosage des gaz du sang (acte médical)2.
Le sang est prélevé par ponction de l’artère radiale après test d’Allen, qui consiste à comprimer
les deux artères, radiales et ulnaires, afin de vider la main de son sang, lorsque celle-ci est
devenue blanche, l’artère ulnaire est libérée. Si la main se recolore, la ponction est autorisée,
car cela montre qu’en cas de lésion de l’artère radiale au cours ou au décours du geste, l’artère
ulnaire (cubitale) prendrait le relais.
Prélèvement en anaérobiose stricte, sans garrot, avec seringue jetable stérile.
Après la ponction, comprimez l’artère pendant 5 min avec une compresse imbibée
d’antiseptique.
Les éventuelles bulles d’air doivent être chassées immédiatement pour éviter toute altération de
la pression partielle en oxygène.
La ponction peut aussi se faire dans l’artère fémorale ou humérale.
Dosage des gaz du sang dans les 15 min qui suivent le prélèvement
 Les paramètres mesurés sont les suivants :
 PaO2 (pression partielle d’oxygène)
 PaCO2 (pression partielle de dioxyde de carbone)
 pH : il reflète la concentration d’hydrogène et permet de mesurer l’acidité du
sang.
 HCO3- (bicarbonate) : il « tamponne » le pH du sang et participe ainsi à
maintenir un équilibre acido-basique.
 SaO2 (saturation en oxygène) : elle permet d’évaluer la quantité d’oxygène fixée
sur l’hémoglobine.
 Indications :
 En cas de difficultés respiratoires : essoufflement, hypo ou hyperventilation,
asthme.
 Afin de surveiller le bon fonctionnement d’un traitement de maladie pulmonaire
2
https://www.elsevier.com/fr-fr/connect/ifsiinfirmier/realisation-dun-gaz-du-sang-arteriel
46
 En cas altération de l’état de conscience

 Afin de s’assurer qu’une personne hospitalisée reçoit la bonne quantité
d’oxygène
 Pour mesurer le niveau acido-basique chez des patients souffrant d’une
insuffisance cardiaque, d’une insuffisance rénale, de troubles du sommeil, d’une
infection ou encore après une overdose de drogue
 etc.
 PaO2 : supérieure à 80 mm Hg (millimètre de mercure)
 PaCO2 : entre 35 et 45 mm Hg
 pH : entre 7,35 et 7,45
 HCO3- (bicarbonates) : entre 22 et 28 mmol/l (millimoles par litre)
 SaO2 (saturation en oxygène) : entre 95 et 100 %
 Les valeurs des gaz du sang ne suffisent pas à poser un diagnostic précis, mais peuvent
être le signe de problèmes au niveau des poumons, des reins, ou faire suspecter une
maladie métabolique.
1.19. Cholestérolémie
Définition: La cholestérolémie est le taux de cholestérol total dans le plasma sanguin. Le
cholestérol est un lipide (corps gras) dont le rôle est essentiel dans l’organisme, car il sert à la
fabrication des hormones produites par les glandes. Il est pour partie fabriqué par le foie, le
reste provient de notre alimentation. Il existe deux types de cholestérol, HDL et LDL.
 Intérêt du dosage du cholestérol total: il permet de dépister une
hypercholestérolémie isolée ou associée à une hypertriglycéridémie.
 Prélèvement: 2 à 5ml du sang veineux à jeun dans un tube sec ou hépariné.
 Valeur normale: de 1,5 g/l à 2,5 g/l
 Variations pathologiques:
 Hypercholestérolémie: trouble de métabolisme des lipides, diabète, les
maladies hépatiques, des pancréatites aigües, etc.
 hypocholestérolémie: Insuffisance hépatocellulaire (cirrhose, hépatite…)
insuffisance surrénalienne, etc.
1.20. Cholestérol HDL et cholestérol LDL
 Le cholestérol HDL (high density lipoprotein) connu comme le "bon
cholestérol" élimine le cholestérol des artères et l’entraîne vers le foie pour être détruit.
 Valeur normale: entre 0,4 et 0,6 g/L chez l’adulte.
 Le cholestérol LDL (low density lipoprotein) connu comme le « mauvais
cholestérol » bien qu’il soit critiqué, le cholestérol est un nutriment indispensable au
bon fonctionnement du corps humain. Ce lipide participe à la structure des membranes
cellulaires, à la synthèse de nombreuses molécules et à la production des sels biliaires
nécessaires à la digestion…
 Valeur normale: entre 0,9 et 1,6 g/L chez l’adulte.
1.21. Triglycérides
Les triglycérides (TG) font partie comme le cholestérol des composés lipidiques ou graisses
de l'organisme.
47
Les triglycérides constituent une des sources principales d’énergie pour l’organisme. Ils sont
stockés dans nos tissus graisseux (adipeux)
 Indications: (Diagnostic et classification des hyperlipidémies, surveillance du diabète
et des maladies cardiovasculaires, HTA …)
 Prélèvement: 2 à 5 cc du sang veineux dans un tube sec ou hépariné à jeûne (12h de
jeûne).
 Valeur normale: chez l’adulte variée de 0,5 g/L à 1,5 g/L
 Les hypertriglycéridémies se rencontrent dans le diabète sucré, les hyper et
hypothyroïdies, la goutte, les maladies hépatiques, les pancréatites aigües… et
au cours des traitements de longue durée par les corticoïdes, et chez la femme
pratiquant une contraception orale par les oestroprogestatifs.
1.22. Transaminases
Les transaminases ou les aminotransférases sont des enzymes qui se trouvent dans les
cellules. Il en existe deux types :
 ASAT (aspartate aminotransférases), ou GOT (glutamyl-oxaloacétate-transférase) surtout
présent dans le foie, les muscles, le cœur, les reins, le cerveau et le pancréas.
 ALAT (alanine aminotransférases), ou GPT (glutamyl-pyruvate-transaminase)
relativement spécifiques du foie.
 Indications (intérêt): de suspicion de maladies telles que l’hépatite, maladie auto-
immune, l’infarctus du myocarde ou une atteinte du foie, etc. Le taux dans l’organisme
est peut-être modifié en cas de lésion hépato-cellulaire, cardiaque, rénale ou musculaire.
 Prélèvement: >2 cc du sang veineux à jeun dans un tube sec ou hépariné
 Valeurs normales:
 ALAT entre 10 et 40 UI/L
 ASAT entre 10 et 40 UI/L
 Variations:
 Diminution : Grossesse, déficit en vitamine B6.
 Augmentation : en parallèle de l’ASAT et de l’ALAT reflète l’étendue de la
cytolyse hépatique dans les hépatites infectieuses, virales ou toxiques, la
cirrhose hépatique;
N. B: Dans l’infarctus du myocarde, l’élévation de la ASAT est plus importante que l’élévation
de la ALAT.
1.23. Phosphatase alcaline

La phosphatase alcaline (PAL): enzyme présente dans des tissus, surtout dans le foie, la
muqueuse intestinale, l’os, le rein, le poumon, ainsi que les GR.
 Indications: cet examen est demander généralement lors de l’exploration des affections
hépatiques et des voies biliaires ou en cas des affections du tissu osseux, etc.
 Prélèvement 2 à 5 ml de sang veineux à jeun recueilli dans un tube sec ou hépariné.
 Valeurs normales: chez l’adulte elle varié entre 50 et 130 UI/L
48
 Variations pathologiques: On note une augmentation dans:

 Les maladies hépatobiliaires (lithiases, cholécystite, hépatites, cirrhoses…)
 Chez l’enfant, en cas de phosphatasémie est du rachitisme (carence en vit D).
 Chez l’adulte, dans les ostéomalacies, les fractures, l’hyperparathyroidie…
1.24. Bilirubinémie
La bilirubinémie est le taux de la bilirubine dans le sérum sanguin.
La bilirubine libre (indirecte) est un pigment non soluble dans l’eau, produit de la dégradation
de l’hème provenant principalement de l’hémoglobine.
Produite dans les cellules de la rate, la moelle osseuse et du foie, elle est transportée par
l’albumine du plasma vers l’hépatocyte pour y être conjuguée à l’acide glucuronique
(bilirubine conjuguée (directe), soluble dans l’eau), avant d’être excrétée dans les voies
biliaires.
 Indications: le dosage de la bilirubine est prescrit dans les affections hépatobiliaires,
les syndromes hémolytiques, l’ictère chez le n-né ou l’adulte…
 Prélèvement 2 à 5 ml de sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné.
 Bilirubine directe ou conjuguée < 2 mg/L (soit 4 UI)
 Bilirubine indirecte (libre ou non conjuguée) < 10 mg/L (soit 17 UI)
 Bilirubine totale < 12 mg/L (soit 20 UI)3
 Augmentation: anémies, accident de transfusion, incompatibilité fœto-
maternelle, ictère du nouveau-né.
 Diminution: hépatites et inflammation des voies biliaires.
1.25. Amylasémie
L’amylasémie est le taux d’amylase dans le sérum sanguin.
L’Amylase est une enzyme sécrétée par les glandes salivaires et le pancréas. Dans le sérum, il
existe principalement deux grands types:
 Amylase type P (d’origine pancréatique);
 Amylase type S (d’origine salivaire).
 Indications: c’un examen d’urgence devant toute crise douloureuse abdominale.
La détermination de cette enzyme est demandée dans les affections des glandes salivaires
(Oreillons …) ou les affections pancréatiques (pancréatites…)
 Prélèvement 2 à 5 ml de sang veineux recueilli sur un tube sec.
 Valeurs de référence: entre 10 et 45 UI/L
 Variations pathologiques: l’amylasémie peut augmenter dans trois situations :
• Douleurs abdominales : infection de la vésicule biliaire, UGD perforé, etc.
3
La bilirubine totale n’est pas la somme de la bilirubine directe et indirecte (il englobe les deux + d’autres
éléments)
49
• Inflammation aiguë du pancréas.

• Affection des glandes salivaires : oreillons, cancer, calcul salivaire, etc.
1.26. Lipasémie
La lipasémie est l’analyse du taux de lipase dans le sang (plasma précisément).
La lipase est une enzyme sécrétée principalement par le pancréas, elle permet la digestion des
graisses. On la trouve en quantité très faible la muqueuse gastrique, les hématies et les
leucocytes.
 Indiquée dans l’exploration de la fonction pancréatique…
 Prélèvement >2 cc du sang veineux dans un tube sec.
 Valeur normale: entre 60 et 240 UI/L
 Variation pathologique : l'augmentation de la lipase plasmatique (hyperlipasémie) se
rencontre dans : les affections du pancréas (pancréatite aiguë, phase inflammatoire des
pancréatites chroniques, pancréatite pseudo-kystique, carcinome, obstruction des
canalicules, traumatisme).
Remarque: La lipasémie est un examen d’urgence, comme l’amylasémie, devant toute crise
douloureuse abdominale.
1.27. Lactate déshydrogénase

Le lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme importante dans la transformation des
sucres en énergie.
 Indications (Intérêt): son augmentation témoigne d’un dommage tissulaire dans
l’organisme, qui peut être le résultat d’une grande variété de situations pathologiques.
 Prélèvement: >2 cc du sang veineux dans un tube sec.
 Valeur normale: chez l’adulte elle est entre 100 et 240 UI/L
 Variations pathologiques: Taux de l’LDH augmente dans l’infarctus de myocarde, les
atteintes hépatiques, affections prostatiques et pulmonaires…
1.28. Troponine
La troponine est un ensemble de protéines qui intervient dans la régulation de la contraction
musculaire cardiaque…
 Indication: détection des lésions du myocarde…
 Prélèvement: minimum 2cc du sang veineux dans un tube sec ou hépariné.
 Valeur normale: inférieur à 100 ng/L
 Variations pathologiques: un taux de troponine élevé peut-être le signe :
 D’un infarctus du myocarde. Dans ce cas, les troponines sont libérées dans le
sang 2 à 4 heures après le début de la souffrance myocardique ;
 D’une embolie pulmonaire ;
 D’une myocardite ou une péricardite
 D’une chirurgie cardiaque.
 Tous autres problèmes cardio-vasculaire.
50
1.29. Créatine phosphokinase

La créatine phosphokinase (CPK), ou créatine Kinase CK, est une enzyme répartie
essentiellement dans les muscles squelettiques, le myocarde et en petite quantité dans le
cerveau.
La CPK est libérée dans le sang lors de lésions tissulaires avec lyse cellulaire. Son dosage
permet de distinguer l'origine de la destruction cellulaire.
 Prélèvement: minimum 2 cc du sang veineux à jeun dans un tube sec.
 Indications: Examen d’urgence dans le cadre d’un bilan d’infarctus du myocarde, et
aussi dans les atteintes du muscle strié…
 Valeur normale: la CPK totale variée entre 22 et 170 UI/L
 Variations pathologiques: une élévation rencontrée dans d’infarctus du myocarde, les
maladies du muscle strié, l’écrasement des masses musculaires en traumatologie…
1.30. Protéine C réactive
La protéine C réactive (CRP) est une protéine très précoce de la réaction inflammatoire,
synthétisée par le foie. Elle apparait 12 à 24 heures après le début du processus pathologique et
peut augmenter jusqu’à 1000 fois le taux de base. Elle revient rapidement à la normale lors de
la disparition de l’affection responsable.
 Indication : la CRP est indiquée dans le diagnostic précoce et le suivi d’un syndrome
inflammatoire (un bon marqueur de l’inflammation) et/ou infectieux.
 Prélèvement : minimum 2 cc de sang recueilli sur un tube sec ou hépariné (le jeune
n’est pas nécessaire).
 Valeurs de référence: Inférieur à 6 mg/L
1.31. Autres
D’autres examens biochimiques du sang sont également réalisés tel que:
 Les vitamines: La vitamine D, ou calciférol (calciférol : « qui porte le calcium »), etc.
 Les hormones:
 Hypophysaires : (FSH, TSH, ADH (vasopressine), ACTH (Adreno
CorticoTropic Hormone), Ocytocine, Prolactine …).
 Surrénaliennes (corticoïdes, aldostérones …)
 Thyroïdiennes (T3, T4 …)
 Ovarienne : œstrogène, progestérone
 Etc.
 Les marqueurs tumoraux (PSA; antigène prostatique spécifique, CEA antigène
carcino-embryonnaire
 Électrophorèses des protéines.
 Etc.
51
2. Examens biochimiques des urines

Tout comme dans le sang, il existe un nombre des éléments biochimiques dans les urines d’une
grande valeur clinique, on compte :
2.1. Glycosurie
 La glycosurie est la présence de glucose dans les urines. Son apparition est liée à une
glycémie supérieure à 1,8g/L.
 Indication : suspension de diabète ou un problème rénal.
 Mise en évidence: à la bandelette grâce à un indicateur coloré (figure).
 Valeur normale: elle est nulle.
 Interprétation: La présence de sucre dans les urines est principalement due au diabète
sucré.
Remarque:
 Faussement négative, en cas d’urine diluée, contenant certains médicaments (Vit C,
salicylé...)
 Faussement, positive, en cas d’oxydants sur les parois de verre (eau de javel), en cas
de bandelettes périmées, ou conservées à la lumière, de traitement par les
céphalosporines ou les quinolones, la Vit C.…)
2.2. Cétonurie
La cétonurie est la présence de corps cétoniques dans les urines. Ce sont des produits du
catabolisme lipidique.
Remarque : Les corps cétoniques sont trois métabolites
 L'acétylacétate (H3C–CO–CH2–COO–),
 Le β-D-hydroxybutyrate (H3C–CHOH–CH2–COO–)
 L’acétone (H3C–CO–CH3).
Produits par le processus de cétogenèse dans le foie à partir de la dégradation des lipides, et plus
particulièrement des acides gras, lorsque l'organisme ne dispose plus de réserves suffisantes en glucides,
et notamment en glucose.
 Mise en évidence: à la bandelette grâce à un indicateur coloré.
 Indications : Leur dosage dans les urines (ou dans le sang) est utilisé pour aider au
diagnostic d'une complication pouvant survenir chez des personnes diabétiques, le coma
"acidocétosique".
 Valeur normale: La cétonurie est normalement nulle. (Tandis que l'acétonémie est
généralement inférieure à 0.3 mmol/l). Il est notablement affecté par le jeûne surtout
prolongé, par la prise de certains médicaments ou certains aliments…
 Interprétation des résultats:
 La détection des corps cétoniques dans les urines indique que l’organisme ne
dispose pas d’assez de glucides pour répondre à ses besoins énergétiques et doit
produire de l’énergie à partir des corps gras.
 Une cétonurie très élevée peut survenir dans un diabète mal équilibré alors que
se développe une « acidocétose » pouvant mener à un coma.
52
 Une cétonurie faible peut être retrouvée chez les patients sous jeûne prolongé ou
encore suivant des diètes hypoglucidiques.
 On retrouve également des résultats positifs pendant les nausées qui marquent
la grossesse.
 Certains médicaments utilisés pour traiter l’hypertension comme le Captopril, et
d’autres médicaments peuvent donner un résultat faussement négatif.
2.3. Protéinurie de 24 heures

La protéinurie de 24h est le taux des protéines dans les urines collectées sur 24h. Elle peut
être liée à de nombreuses pathologies, en particulier rénales.
 Mise en évidence: peut-être découverte grâce à un test urinaire simple avec bandelette.
 Prélèvement: (voir chapitre des prélèvements).
 Valeur normale: est de 50 mg/L de protéines (les protéines contenues dans les urines
sont principalement de l’albumine).
 Interprétation des résultats:
 La protéinurie n’est pas forcément grave. Dans la majorité des cas, elle est
bénigne et se voit parfois en cas de fièvre, d’exercice physique intense, de
grossesse, de stress, d’exposition au froid. Elle disparaît dans ces cas rapidement
et ne pose pas de problème.
 En cas d’excrétion de protéines supérieure à 150 mg/24 heures dans l’urine, hors
de toute grossesse, la protéinurie est considérée comme pathologique.
 Elle peut survenir dans le cadre d’une maladie rénale (insuffisance rénale
chronique), mais aussi en cas de diabète, des MCV, HTA, pré-éclompsie, etc.
2.4. Autres
Il existe d’autres examens biochimiques des urines tel que:
 Hématurie: dosage du sang dans les urines
 Créatininurie: dosage de la créatinine dans les urines
 pH des urines
 Etc.
53
3. Examens biochimiques dans d’autres liquides biologiques
3.1. Test de Rivalta

La réaction de Rivalta met en évidence une protéine précipitable dans l’eau acétique.
Cette protéine n’est présente que dans les liquides d’épanchement ayant les caractères d’un
exsudat.
Épreuve permettant de différencier un épanchement d'origine inflammatoire d’un épanchement
d'origine mécanique.
L’épreuve consiste à mettre quelques gouttes de sérosité (prélevées) dans de l'eau distillée à
laquelle on a rajouté de l’acide acétique. Dans ce cas le liquide devient trouble quand il provient
d'un exsudat. Quand il s'agit d'un transsudat, le liquide reste limpide.
Remarque :
 L'exsudat, est un liquide organique riche en protéines, soit séreux (ayant des
caractéristiques du sérum sanguin), soit de nature fibrineuse (la fibrine est une
variété de protéines du plasma sanguin fabriquée par le foie), soit de nature
muqueuse (glaireuse, quand il y a inflammation).
 Le transsudat, par rapport à l’exsudat, est composé de substances : eau, sels
minéraux, substances… D'autre part, ce liquide ne contient pas ou très peu de
leucocytes (globules blancs) et de protéines. Les transsudats doivent être distingués
des exsudats, qui sont le résultat d'un mécanisme inflammatoire alors que le
transsudat est un épanchement de liquide d’origine mécanique pure.
3.2. Dans le liquide céphalo-rachidien (LCR)
3.2.1. Glycorachis
La glycorachis est le terme utilisé pour désigner le taux de glucose dans le liquide céphalo-
rachidien (LCR).
Sa valeur normale est en rapport avec la glycémie, (glycorachis = 40 à 50% de la glycémie)
3.2.2. L’albuminorachis
L’albuminorachis est le terme utilisé pour désigner le taux de l’albumine dans le liquide
céphalo-rachidien (LCR).
Sa valeur normale est entre 0,15 et 0,50 g/L chez l’adulte.
3.3. Autres
 La chromatographie est une technique physique de séparation d'espèces chimiques,
basée sur les différences d'affinités des substances à analyser. La
chromatographie analytique est utilisée pour identifier ou doser les composés
chimiques d'un mélange et apprécier leur concentration.
 Electrophorèse est une technique de la biologie qui consiste à la séparation des espèces
(protéines, acides nucléiques, etc.) se fait en fonction de leur charge électrique et pour
des charges identiques, en fonction de leur taille, elle permet donc de différencier des
espèces chargées, après leur déplacement dans un champ électrique.
 Etc.
54
Partie 6.
Examens microbiologiques
55
1. Examen cytobactériologique des urines

L'examen cytobactériologique des urines, ECBU, consiste à recueillir et à analyser les urines
de la première miction du matin. (Figure 14)
 Il repose sur l'analyse cytologique et bactériologique de l'échantillon d'urine
recueillie.
 Il sert notamment à déterminer la numération des hématies et des leucocytes, la
présence de cristaux et de germes (image).
 L’examen cytobactériologique urinaire est l’analyse bactériologique la plus
fréquemment pratiquée au laboratoire.
 Indications: l’ECBU permet de mettre en évidence:
 Une infection urinaire.
 Une pathologie liée à des troubles urinaires (cystite, néphrite, prostatite …).
 Prélèvement: (voir chapitre des prélèvements).
 Valeurs usuelles:
 Moins de 10000 leucocytes/ml (10/mm3)
 Moins de 10000 hématies/ml
 Culture négative, moins de 105 UFC/ml (UFC: unité formatrice de colonie)
 Résultats pathologiques
 Examen cytologique : Présence de leucocytes parfois très nombreux, altérés
 Examen bactériologique : identification d'un ou plusieurs germent ; quantité >
105/ml
Figure 14 : Résumé des différentes étapes de l’ECBU au laboratoire
56
2. Examen cytobactériologique des crachats

Un crachat est un mélange de matières corporelles expectorées depuis les voies
respiratoires (notamment mucus) et de salive qui est éjectée de la bouche pouvant être utilisée
pour des examens cytobactériologiques (ECBC) lors de pathologies respiratoires. Dans l'idéal,
le crachat ne contient qu'un minimum de salive afin d'éviter toute contamination avec des
bactéries de la flore orale.
 Indications:
 L’ECBC, peut aider à faire un diagnostic microbiologique d'infection respiratoire
basse en isolant le (les) micro-organisme(s) responsable(s), en le (les) identifiant, en
déterminant sa(leur) sensibilité aux anti-infectieux.
 Le diagnostic d'une tuberculose pulmonaire.
 Le diagnostic d'une pneumopathie à germe atypique (Legionella, Chlamydia,
Coxiella, Mycoplasma). Dans ce cas, bien le préciser sur la fiche de demande.
 L'aide au diagnostic d'une pneumopathie à germes classiques,
 En dehors de ces indications, cet examen est à proscrire, car il est inutile et peut être
trompeur…
Remarque : le diagnostic microbiologique d'infection respiratoire basse est réalisé également
par d'autres prélèvements tel que l’hémocultures (systématiques en cas de fièvre), le recueil
des sécrétions broncho-pulmonaires lors de prélèvements protégés (ou lavage broncho-
alvéolaire (LBA)), l’aspiration endotrachéale (AET), les examens sérologiques (Legionella,
Chlamydia, Mycoplasma…), etc.
 Prélèvement du crachat
 Recueille de l’expectoration le matin au réveil pendant 3 jours consécutifs.
 IL doit se faire le matin au réveil, après rinçage bucco-dentaire à l’eau du robinet,
au cours d’un effort de toux aider si besoin d’une kinésithérapie
 Expliquer au patient l'importance de l’examen
 Recueillir des expectorations dans un poudrier stérile.
 Identifier le prélèvement et le placer dans un sac en plastique.
 Remplir la fiche de demande d'examen
 Le prélèvement doit se faire en dehors de toute antibiothérapie si possible
 L’acheminement doit être effectué le plus rapidement possible au laboratoire pour
éviter la prolifération des bactéries…
 Ne jamais conserver ce prélèvement au froid.
 Résultats normaux:
 Le crachat doit être issu de l’arbre respiratoire profond. Il existe certaines constantes
qui permettent de juger la qualité du prélèvement. Celui-ci doit contenir plus de 25
polynucléaires (globules blancs) par champ et moins de 10 cellules épithéliales.
 Résultats anormaux:
 Les germes habituellement retrouvés dans les pneumonies sont le pneumocoque,
l'Haemophilus influenzae, les streptocoques. Ces germes sont facilement mis en
évidence lors des cultures. D’autres microbes tels les mycoplasmes, les chlamydiae
et surtout les légionelles sont difficilement cultivables. Leur diagnostic doit être
établi par des méthodes spécifiques sérologiques.
57
3. Examens de liquide céphalorachidien

C’est l’analyse biologique du liquide céphalorachidien (LCR) du point de vue: cytologique (par
microscope), culture (des bactéries), et chimique par dosage du glucose (glycorachis) et des
protéines (protéinorachis) contenu dans ce LCR.
Le liquide céphalorachidien est un liquide limpide, eau de roche, stérile
 Indications : les méningites
 Prélèvement: par ponction lombaire (PL) minimum deux tubes stériles (acte médical)
 La glycorachis est comprise entre 40 et 50 % de la glycémie soit (0,40 à 0,50 g/L)
pour une glycémie normale.
 La protéinorachis est comprise entre 0,15 et 0,45 g/L
 Examen direct et culture négative
4. Prélèvement de gorge
Un prélèvement de gorge est un prélèvement de mucosités ou de pus sur les amygdales. Le
médecin utilise un coton monté sur une tige.
 Indications:
 En cas d'infection : Il permet de chercher le streptocoque A (Streptococcus
pyogenes) qui est le principal agent étiologique des angines bactériennes. Pour
décider s'il faut un traitement antibiotique. La culture demeure la méthode
microbiologique de référence pour la mise en évidence de cette bactérie.
 À titre de dépistage: On peut le faire dans l'entourage d'un malade ayant
une infection à méningocoque, une diphtérie : cela permet de trouver un
portage asymptomatique.
 En médecine du travail, ce prélèvement permet de déceler les porteurs sains de
certains microbes qui doivent subir une éradication pour pouvoir travailler : c'est le
cas dans la restauration, dans le secteur de santé.
NB: le prélèvement de gorge remplace le prélèvement nasal à la recherche (par PCR) du virus
SARS-COV-2 agent causal de la maladie Covid -19.
 Conditions de prélèvement: de préférence pas d'antibiothérapie et à jeun.
 Le patient doit ouvrir la bouche la langue tirée; éclairer avec la lampe d'examen;
 Dégager la cavité buccale à l'aide d’un abaisse-langue;
 À l'aide d'un écouvillon, bien racler les amygdales des 2 côtés, la muqueuse
pharyngée ou toute zone présentant une inflammation en évitant de toucher la
langue…
 Si possible réaliser un frottis sur lame au moment du prélèvement, l'autre étant
destiné à la mise en culture. Si la mise en culture est différée de plus de 2 heures,
l'utilisation d'un milieu de transport est nécessaire.
Remarque : le frottis est prélèvement de cellules ou germes effectué en grattant une zone de
peau à l’aide d’un bâtonnet ou d’une curette (instrument en forme de cuillère). Les plus connus
sont ceux pratiqués pour l’examen du fond de gorge ou lors d’un examen gynécologique. Cette
technique ne demande pas de préparation particulière.
58
5. Hémoculture
C’est la culture du sang sur un ou plusieurs milieux au laboratoire dans le but de détecté des
germes dans ce sang.
 Elle a pour objectif :
 La mise en évidence de microorganismes dans le sang normalement stérile.
 L’identification de ces microorganismes et leur sensibilité aux antibiotiques dans les
meilleurs délais.
 La présence de bactéries dans le sang est la conséquence d’une décharge
microbienne dans la circulation sanguine, qui peut être:
 Continue: (infection endovasculaire, endocardite…);
 Intermittente (septicémie avec foyers infectieux localisés…);
 Transitoire (au cours de soins dentaires, examen urologique, traumatisme,
manipulation d’un foyer infectieux…).
 Indications:
 Toute fièvre non expliquée (particulièrement chez un cardiaque, une femme
enceinte, un sujet immunodéprimé) après une intervention chirurgicale, altération
de l’état général, matériel étranger implanté…
 Infections localisées sévères: méningite, pneumonie…
 Chocs inexpliqués.
 Prélèvement, 5 à 10 ml de sang, par ponction veineuse après une asepsie rigoureuse, il
doit se faire le plus tôt possible, dans l’évolution de la maladie et avant tout traitement
antibiotique, effectués si possible au moment d'un pic d'hyperthermie ou
d'hypothermie ou lors de frisson qui traduit une décharge microbienne (on utilise deux
flacons, l’un pour les bactéries aérobies, l’autre pour les anaérobies).
 Résultat normal: Culture négative.
 Résultat pathologique : culture positive (les agents infectieux les plus fréquemment
isolés sont: Streptocoques, Staphylocoques, pneumocoques, Escherichia coli et autres
entérobactéries…)
6. Prélèvement génitaux
 Prélèvement génital chez la femme
Le prélèvement génital chez la femme est un prélèvement vaginal qui a pour but la mise en
évidence de l’agent responsable de l’infection génitale. Les infections génitales féminines
peuvent être provoquées par de très nombreux agents pathogènes, bactéries, champignons,
parasites, virus. Certains germes appartiennent à la flore normale du vagin, provoquant une
infection à la suite d’un déséquilibre de l’écosystème que constitue cette flore.
 Indications:
 Leucorrhées, prurit, brûlures;
 Lésions génitales externes;
 Chez une femme asymptomatique dont le partenaire est atteint d’une maladie
sexuellement transmissible;
 Découverte d’une lésion lors d’un examen gynécologique systématique.
59
 Etc.
 Prélèvements: effectué à plusieurs niveaux selon l’indication médicale, le prélèvement
et effectué par le médecin, la sage-femme ou l’infirmière, les sites du prélèvement sont
généralement :
 L’appareil génital bas (vulve, vagin, exocol…):
 Une ulcération génitale.
 L’endocol.
 Résultats normaux:
L’appareil génital bas est normalement contaminé par la flore vaginale normale qui comprend
avant tout la flore de Doberlein, il s’agit de bacilles et de coccobacilles Gram+ appartenant à
de nombreuses espèces de lactobacilles. L’appareil génital haut est normalement stérile.
 Résultats pathologiques:
Les agents infectieux incriminés dans ces infections sont les candida albicans, trichomonas
vaginalis, Gardnerella vaginalis, entérocoques, entérobactéries, Staphylocoques, anaérobies
divers, etc.
 Prélèvement génital chez l’homme
Le prélèvement génital chez l’homme est un prélèvement urétral qui a pour but la mise en
évidence de l’agent responsable de l’infection de l’appareil génital masculin, par l’examen
direct et la mise en culture du prélèvement, ceci permet d’authentifier la majorité des agents
responsables de ces infections (gonocoque, trichomonas, Treponema pallidum…);
 Indications:
 Écoulement urétral;
 Brûlures mictionnelles;
 Ulcère génital;
 Dysurie
 Etc.
 Prélèvements: de préférence matinale avant toute émission d’urine. Pour l’examen
direct, lorsque les sérosités apparaissent, on applique des lames porte-objet sur le méat
urétral et on réalise des frottis. Pour la mise en culture, un écouvillon stérile est introduit
dans le méat urétral sur 1cm et chargé par rotation des sécrétions urétrales.
 Résultats: l’appareil urinaire masculin est stérile, mais plusieurs agents microbiens
peuvent être responsable de l’infection tel que: les gonocoques responsables des
urétrites gonococciques, Chlamydia, le Trichomonas, etc.
7. Examen parasitologique des selles

Examen des selles macroscopique et/ou microscopique
 Prélèvement: selles fraichement émises en avant tout traitement
 Indications: L'examen parasitologique des selles est généralement prescrit au patient :
 En présence de symptômes évoquant une parasitose intestinale : diarrhées,
douleurs abdominales, amaigrissement, nausées, troubles digestifs divers.
 Cas de séjour récent dans un pays où les conditions d'hygiène étaient précaires.
 Les parasites qui peuvent être présents dans les selles: Ténia, Kystes d'amibes,
Oxyurose, Ascaris, Giardia, etc.
60
8. Coproculture
La coproculture est la culture bactériologique de selles dans le but de détecté la présence
de germes pathogènes normalement absents du tube digestif ou anormalement nombreux.
Examen bactériologique des selles après culture
 Prélèvement: selles fraichement émises en avant tout traitement
 Indications:
 Dysenterie
 Diarrhée fébrile ou diarrhée survenant dans un contexte épidémique
 Etc.
Remarque : pour les examens des selles souvent le médecin demande les deux examen
coproculture et parasitologie des selles à la fois.
9. Examen cytobactériologique de pus et d’autres liquides

L’examen cytobactériologique d'un produit pathologique (pus, etc.) débute par l'examen
macroscopique, puis l'examen microscopique. Simultanément à cet examen microscopique, le
prélèvement (produit pathologique) est ensemencé pour un éventuel isolement d'un ou plusieurs
germes (figure 15).
Figure 15 : L’examen cytobactériologique d'un produit biologique (pus, sérosité, …)
61
10. Antibiogramme
Un antibiogramme est une technique de laboratoire visant à tester la sensibilité d'une souche
bactérienne vis-à-vis d'un ou plusieurs antibiotiques.
Le principe consiste à placer la culture de bactéries en présence d’un ou des antibiotiques et à
observer les conséquences sur le développement et la survie de celles-ci (figure16).
Figure 16 : représentation d’un antibiogramme
11. Spermogramme et spermoculture

 Spermogramme
L'analyse du sperme est l'examen le plus important dans l'évaluation de la fertilité masculine.
Principal examen, le spermogramme mesure avec précision des paramètres comme le nombre
de spermatozoïdes, la mobilité des spermatozoïdes, la taille et la forme des spermatozoïdes, le
volume du sperme, ainsi que le dosage de certaines substances normalement présentes.
Les substances présentes dans le sperme, comme le liquide prostatique, sont également
analysées, afin d’être sûr que les spermatozoïdes baignent bien dans les fluides adéquats.
 Indications:
 Diagnostiquer une infection génitale (prostatite…).
 Définir au mieux la part de responsabilité masculine dans le bilan de l’infertilité
du couple.
 Prélèvement : Le recueil du sperme s'effectue de préférence au laboratoire (cela permet
d’éviter la dégradation des spermatozoïdes entre l’éjaculation et l’analyse), par
masturbation. L'examen devra être précédé de trois jours d'abstinence de toute relation
sexuelle avant le spermogramme. Cette abstinence permet d’avoir un volume de
semence suffisamment important pour réaliser l’analyse. Bien noter l'heure d'émission
du sperme.
62
 Volume de l'éjaculation : entre 2 et 5 ml
 Concentration des spermatozoïdes : supérieure à 20 millions/ml de spz (entre 50
et 200 millions/ml)
 Mobilité des spermatozoïdes : 80% mobiles après 30 mn, 50 à 60 % de forme
mobile après une heure,
 Morphologie (forme) des spz : supérieure ou égale à 50 % de formes normales
(correctement formés);
 Vitalité: 75% d’entre eux au moins vivants à l’éjaculation;
 Taux d'acidité normale : ph compris entre 7,2 et 7,8
 Anomalies:
 Une oligospermie quand la concentration en SPZ est inférieure à 20 millions/ml
 Une azoospermie quand la concentration est inférieure à 10 millions/ml
 Une asthénospermie quand le nombre de spermatozoïdes mobile est inférieur à
60 %
 Une tératospermie quand il existe plus de 50 % de spermatozoïdes anormaux
 Une aspermie, c'est-à-dire une absence de sperme
 L'azoospermie absence totale de spermatozoïdes dans le sperme éjaculé;
 Hypospermie: volume inférieur à 2ml;
 Hyperspermie: volume supérieur à 6ml
 Nécrospermie: taux supérieur à 30% des formes mortes
 Spermoculture
La spermoculture est la recherche d'une infection (essentiellement bactérienne) dans le sperme.
Elle consiste en l'examen direct au microscope d'un échantillon de sperme suivi de sa mise en
culture sur milieux appropriés à la croissance des bactéries.
La spermoculture fait partie de l'exploration d'une infertilité masculine et est normalement
couplée au spermogramme. La spermoculture guide le choix vers une
thérapeutique antibiotique.
Elle est aussi systématiquement réalisée avant un acte de procréation médicalement assistée,
pour s'assurer de l'absence d'infection qui pourrait être responsable d'un échec de fécondation.
Une spermoculture négative ne garantit pas l'absence d'infection surtout en présence
d'une leucocytose.
 Indications: recherche des germes de type entérobactéries, Gonocoque,
Chlamydiae ainsi que des champignons, etc.
 Prélèvement: idem que pour le spermogramme.
 En l'absence d'infection, ni de globules blancs, ni de bactéries dans le sperme.
 Il existe une infection si: Nombre des globules blancs dans le sperme est
supérieur à 105/ml + présence une bactérie pathogène.
63
Partie 7.
Examens sérologiques
64
Les tests sérologiques visent à déterminer la présence actuelle ou ancienne d’une infection par
un microorganisme (virus, bactéries ...).
Pour y parvenir, on mesure le taux des protéines présent le sérum sanguin, ces protéines sont
généralement des anticorps.
1. Sérologie VIH
Le Virus d’Immunodéficience Humaine (VIH) est le virus responsable de la maladie SIDA
(syndrome d'immunodéficience acquise), il s’agit d’un virus à ARN qui attaque le système
immunitaire de l’Homme.
 Indications: Suspension de SIDA
 Prélèvement: minimum 2 cc dans un tube sec pour test rapide ou dans un tube EDTA
pour le test de confirmation (Elisa et western blot) et pour étudier de la charge virale.
 Résultats: Négatif ou positif
Le dépistage est réalisé forcément par 2 techniques différentes : un test de dépistage immuno-
enzymatique (techniques ELISA) et western blot ou PCR.
 Si la recherche par les 2 techniques est négative, le sujet est séronégatif.
 Si l'un des tests un nouveau prélèvement est demandé pour effectuer un test de
confirmation. Une fois le test de confirmation est positif, la séropositivité du
sujet au VIH est certaine.
N.B:
 Le SIDA est la conséquence de l'infection au VIH, son diagnostic se fait par la détection
des anticorps dans le sang qui apparaissent entre 2 et 12 semaines après la contamination
(séropositivité).
 IL existe un test simple et rapide du VIH qui peut être effectué à partir un prélèvement
par ponction cutané.
2. Sérologie de la syphilis
La syphilis est une maladie infectieuse sexuellement transmissible et contagieuse due à une
bactérie nommée Treponema pallidum.
Le sérodiagnostic (recherche des anticorps spécifiques dans le sérum (ou plasma), témoins
d'une réaction de l'organisme contre cette bactérie, à l’aide d’antigènes (bactériens)
treponémiques fixés sur un support). Ce sérodiagnostic est basé sur plusieurs types de réactions,
les plus fréquentes étant le:
 VDRL (Veneral Disease Research Laboratory)
 TPHA (Treponema pallidum haemaglutination assay).
 Indications : suspicion de syphilis
 Prélèvement : minimum 2 cc du sang dans un tube sec ou EDTA
 Résultat: Négatif ou positif.
65
3. Sérologie Widal
Mise en évidence de la salmonelle typhique et paratyphique A et B ou bacille d’Eberth
(Salmonella Enterica Typhi)
 Indications: fièvre typhoïde et paratyphoïde
 Prélèvement: minimum 2 cc du sang dans un tube sec.
 Résultat: Négatif ou positif.
4. Sérologie de la rubéole
La rubéole est une infection virale contagieuse. Elle est le plus souvent bénigne et passe
inaperçue dans la moitié des cas. Lorsque l’infection est symptomatique, elle se traduit
principalement par une éruption (lésions cutanées).
Si l’infection survient chez la femme enceinte au cours du premier trimestre de grossesse, elle
peut avoir des conséquences graves pour le bébé.
La vaccination permet de se protéger contre cette infection et ainsi d’éliminer le risque de
contamination pendant la grossesse.
La sérologie recherche les anticorps, qui sont les défenses immunitaires fabriquées par notre
corps pour lutter contre le virus de la rubéole. Dans le cadre du dépistage pendant la grossesse,
seuls les anticorps de type IgG sont recherchés : ce sont les anticorps qui persistent toute la vie
et nous protègent contre le virus.
 Indication : grossesse ou suspicion de la maladie (rubéole)
 Prélèvement : minimum 2 cc du sang sur tube sec ou héparine.
 Résultat : Si la recherche des anticorps IgG est positif en début de grossesse, quelque-
soit le taux, on peut considérer que la femme est protégée ou immunisée.
5. Antistreptolysine O
Antistreptolysine O ou ASLO, est la recherche des anticorps antistreptococciques (famille des
bactéries aérobies Gram positif)
 Prélèvement: minimum 2 cc du sang dans un tube sec
 Indications: RAA, glomérulonéphrite, atteinte cardiaques, angine à répétition ….
 Valeur normale:
 Chez l’enfant < 200 U/ml.
 Chez l'adulte < 400 U/ml.
6. Sérologie de l’hépatite
 Sérologie de l’hépatite B : Il existe plusieurs examens utiles pour détecter la présence
d’anticorps dirigés contre le virus de l’hépatite B (virus à ADN de la famille des
Hepadnavirdae). Ces anticorps sont produits par le patient afin de permettre une protection
contre les antigènes.
 L’antigène viral HBs (HBs Ag) est une protéine d’enveloppe (« s » pour
surface). Elle apparaît 4 à 12 semaines après le comptage…
 L’antigène c (HBc) : antigène de capside (c), qui n’est pas exprimé dans le
sang…
 Etc.
 Indications: hépatites
66
 Prélèvement : minimum 2 cc du sang dans un tue sec

 Résultat : Négatif ou positif
NB: Les anticorps dirigés contre les antigènes de surface (anti-HBs) sont l’examen le plus
usuel.
 Sérologie de l’hépatite C : L’hépatite C, due à un virus à ARN simple brin, se transmet
habituellement par le sang : elle est fréquente chez les toxicomanes… Les marqueurs de
l’hépatite C omprennent :
 L’ARN du virus (VHC),
 Les anticorps anti-VHC.
L’ARN du VHC peut être recherché (test de détection qualitative) ou dosé (on parle alors de la
charge virale). Les anticorps anti-VHC sont recherchés en ELISA
 Indications : hépatites
 Prélèvement : minium 2cc du sang dans un tube sec.
 Résultat : Négatif ou positif
7. Autres
 Les sérologies parasitaires : la toxoplasmose est la plus connue et la plus pratiquée
 La goutte épaisse technique d’observation au microscope du sang, dont on étale une
grosse goutte sur une lame de verre. Une fois séchée, traitée et colorée, cette goutte
permet de mettre en évidence le parasite du paludisme dans les globules rouges. Elle
est surtout utilisée pour diagnostiquer le paludisme.
 Beta HCG: L’hCG (hormone chorionique gonadotrophique) est l’hormone de
grossesse. Ce test mesure une partie très spécifique de l’hCG dans le sang, sa sous-unité
bêta.
 HLA (détermination du phénotype HLA, groupage HLA): Le complexe majeur
d’histocompatibilité (CMH), ou système HLA (Human Leukocyte Antigens), est un
ensemble de glycoprotéines membranaires présentes à la surface des cellules.
 Le caryotype (ou cartogramme) est l'arrangement standard de l'ensemble des
chromosomes d'une cellule, à partir d'une prise de vue microscopique.
 Etc.
67
Références
 Caquet, René. "250 examens de laboratoire." 250 Examens de
Laboratoire (2015): 9.
 Caquet, René. Guide infirmier des examens de laboratoire. Elsevier
Masson, 2017.
 Brooks, Geo F., Janet S. Butel, and Stephen A. Morse. "Medical
microbiology." United States, 25th (2006).
 Ryan, Kenneth J., and C. George Ray. "Medical microbiology." McGraw
Hill 4 (2004): 370.
 Autres.
68

Examens de Labo ISPITS Tanger

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Examens de Labo ISPITS Tanger

Transféré par

Informations du document

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Examens de Labo ISPITS Tanger

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

EXAMENS DE LABORATOIRE

Cours élaboré par Mahrach Younes

Année universitaire 2022-2023

 Facteurs en rapport avec le praticien (infirmier, médecin …).

2.1.1. Matériel nécessaire pour la réalisation d’un prélèvement veineux

2.1.2. Déroulement du prélèvement veineux

Figure 1 : Schéma des principales veines utilisées dans le traitement intraveineux

2.1.3. Effets secondaires et complications

2.2. Prélèvements capillaires

2.2.4. Déroulement du prélèvement capillaire

Figure 2 : À : Un prélèvement de sang à l’aide d’un tube, B : Un prélèvement de sang à

Figure 3 : image d’un prélèvement capillaire à l’aide d’une bandelette-test

 Test sur papier buvard

 Il est impératif de laisser sécher le papier buvard à la température pièce avant de

Figure 4 : Dépistage néo-natal sur papier buvard

3. Prélèvement des urines

3.1. Prélèvement pour de la protéinurie de 24h

Figure 6 : A écouvillon, B : Prélèvement naso-pharyngé, C : Prélèvement vaginal

7. Facteurs affectant l’intégrité de l’échantillon

 La lumière (la lumière du jour (UV) détruit la bilirubine).

Figure 8 : Schéma des antigènes sur la surface des hématies

1.2. Système ABO

1.3. Système Rhésus

1.4. Autres systèmes

1.5. Intérêt du groupage

Figure 10 : A : Schéma de la compatibilité sanguine entre donneurs et receveurs

Figure 11 : explication de la technique des tests de Coombs direct et indirect

4. Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)

5. Numération formule sanguine (NFS)

Figure 12 : Schéma de l’hématopoïèse

5.4. Interprétation des résultats

Nouveau-né 4,5 à 6 14 à 20 44-60 100 -110 29 à 37

5.5. Formule leucocytaire

6.4. Interprétations des résultats

 Les voies de coagulation :

Figure 13 : la cascade de la coagulation

 Les différents facteurs de coagulation (tableau)

8.4. Taux de prothrombine

8.6. International Normalized Ratio

1. Examens biochimiques du sang

 Prélèvement: >2cc du sang veineux dans un tube sec ou hépariné.

 Prélèvement: Minimum 2 cc de sang veineux recueilli dans un tube sec ou hépariné.

 Hypercalcémie: observée en cas d’hypervitaminose D, d’hyperparathyroïdie,

 Prélèvement: 2 à 5ml du sang veineux recueilli de préférence le matin à jeun dans un

 En cas altération de l’état de conscience

1.23. Phosphatase alcaline

 Variations pathologiques: On note une augmentation dans:

• Inflammation aiguë du pancréas.

1.27. Lactate déshydrogénase

1.29. Créatine phosphokinase

2. Examens biochimiques des urines

2.3. Protéinurie de 24 heures

3. Examens biochimiques dans d’autres liquides biologiques

3.1. Test de Rivalta

1. Examen cytobactériologique des urines

Figure 14 : Résumé des différentes étapes de l’ECBU au laboratoire

2. Examen cytobactériologique des crachats

3. Examens de liquide céphalorachidien

7. Examen parasitologique des selles

9. Examen cytobactériologique de pus et d’autres liquides