Chaouali2018 Important

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TOXAC-207; No. of Pages 8 ARTICLE IN PRESS

Toxicologie Analytique & Clinique (2017) xxx, xxx—xxx
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ARTICLE ORIGINAL
Mise au point et validation d’une méthode

de dosage du plomb dans les matrices
végétales par spectrométrie d’absorption
atomique
Development and validation of an analytical method for the determination of
lead in plant matrices by atomic absorption spectrometry
Nadia Chaouali ∗, Anouar Nouioui , Manel Aouard ,

Omar Smaoui , Dorra Amira , Abderazzek Hedhili
Laboratoire de recherche en toxicologie et environnement LR12SP07, centre d’assistance

médicale urgente, Montfleury, 1008 Tunis, Tunisie
Reçu le 3 novembre 2017 ; reçu sous la forme révisée le 18 décembre 2017 ; accepté le 19
décembre 2017
MOTS CLÉS Résumé

Plomb ; Introduction. — Le développement industriel, agricole et urbain s’est accompagné lors des der-
Plantes ; nières décennies de véritables problèmes sanitaires liés à la pollution de l’environnement.
Nerium oleander ; Les sociétés industrielles, grandes productrices et consommatrices de métaux, relarguent dans
Spectrométrie l’environnement des quantités considérables d’éléments traces métalliques, principalement le
plomb.
Objectifs. — Le travail est articulé sur deux axes, la mise au point et la validation d’une méthode
analytique de dosage du plomb dans les matrices végétales par spectrométrie d’absorption ato-
mique électrothermique (SAA-ET) ainsi que l’application de cette méthode sur des échantillons
de plantes recueillis au niveau d’une zone industrielle.
Matériels et méthodes. — Trente échantillons de feuilles de laurier rose (Nerium oleander)
ont été prélevés à partir d’un site industriel qui héberge plusieurs usines de métallurgie et
de fabrication d’accumulateurs électriques pour le dosage du plomb total par spectrométrie
d’absorption atomique avec four graphite par la méthode des ajouts dosés.
∗ Auteur correspondant.
Adresse e-mail : [email protected] (N. Chaouali).
https://doi.org/10.1016/j.toxac.2017.12.002
2352-0078/© 2017 Société Française de Toxicologie Analytique. Publié par Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés.
Pour citer cet article : Chaouali N, et al. Mise au point et validation d’une méthode de dosage du plomb
dans les matrices végétales par spectrométrie d’absorption atomique. Toxicologie Analytique & Clinique (2017),
Modele +
2 N. Chaouali et al.
Résultats. — La détermination de la teneur du plomb dans les feuilles de laurier rose a été
réalisée par la méthode des ajouts dosés. Les limites de détection et de quantification étaient
respectivement 0,08 ␮g/g et 0,26 ␮g/g. La précision ainsi que la reproductibilité de la méthode
étaient jugées acceptables puisque les valeurs des coefficients de variation de répétabilité
étaient respectivement inférieures à 5 % et à 10 %. La justesse de la méthode était confirmée
puisque le taux de recouvrement était compris entre 90 et 110 %. D’autre part, cette étude
nous a permis de montrer l’impact de la pollution environnementale sur les plantes puisque
nous avons retrouvé des teneurs en plomb total très élevés (22 ± 29,711 ppm) par rapport à des
échantillons témoins (0,91 ± 0,231 ppm). Certaines teneurs ont atteint le seuil de phytotoxicité
de 30 ppm, tandis que d’autres ont même dépassé le seuil limite de 100 mg/kg de matière sèche
fixé par l’association française de normalisation (Afnor).
Conclusion. — La procédure analytique présentée pour la détermination du plomb total dans
les matrices végétales est conforme et nous a permis dans les conditions imposées, d’évaluer
la teneur en plomb total dans la matrice végétale. Les résultats de ce travail nous ont permis
de constater l’impact réel des usines et du trafic routier sur la pollution environnementale.
© 2017 Société Française de Toxicologie Analytique. Publié par Elsevier Masson SAS. Tous
droits réservés.
KEYWORDS Summary
Lead; Introduction. — In recent decades, industrial, agricultural and urban development have been
Plants; accompanied by real health problems linked to environmental pollution. Industrial companies
Nerium oleander; release considerable quantities of trace metals mainly lead into the environment.
Spectrometry Objective. — The work is articulated on two axes, the development and validation of an analyti-
cal method for the determination of lead in plant matrices by electrothermal atomic absorption
spectrometry (SAA-ET) as well as the application of this method on plant samples collected in
an industrial area.
Materials and methods. — Thirty samples of pink laurel (Nerium oleander) leaves were collected
from an industrial site that houses several metallurgy and electrical accumulator manufacturing
plants, for the determination of total lead by atomic absorption spectrometry with graphite
furnace by the standard addition method.
Results. — The limits of detection and quantification were respectively 0.08 ␮g/g and 0.26 ␮g/g.
The precision and reproducibility of the method were considered acceptable since the values of
the repeatability coefficients of variation were respectively less than 5% and 10%. The accuracy
of the method was confirmed since the recovery rate was between 90 and 110%. On the other
hand, this study showed the impact of environmental pollution on plants since we found very
high levels of total lead (22 ± 29.711 ppm) compared to control samples (0.91 ± 0.231 ppm).
Some levels reached the threshold of phytotoxicity of 30 ppm, while others have even exceeded
the threshold limit of 100 mg/kg of dry matter set by the French association of standardization
(Afnor).
Conclusion. — The analytical procedure presented for the determination of total lead in vege-
table matrices is consistent and allowed us, under the imposed conditions, to evaluate the total
lead content in the plants matrix. The results of this work allowed us to see the real impact of
factories and road traffic on environmental pollution.
© 2017 Société Française de Toxicologie Analytique. Published by Elsevier Masson SAS. All
rights reserved.
Introduction l’environnement des quantités considérables de métaux

lourds ou d’éléments traces métalliques (ETM) principale-
Le développement industriel, agricole et urbain s’est ment le plomb (Pb), éléments susceptibles de contaminer
accompagné lors des dernières décennies de véritables pro- l’environnement (eau, air, sol, végétaux. . .) et d’avoir un
blèmes sanitaires liés à la pollution de l’environnement. impact réel sur la santé humaine [1]. Les particules de
En effet, les sociétés industrielles, grandes produc- plomb métallique libérées par les activités anthropologiques
trices et consommatrices de métaux, relarguent dans (activité minière, industrie métallurgique, fabrication des
Modele +
Méthode de dosage du plomb dans les matrices végétales 3
accumulateurs électriques, traitement des eaux usées, inci- papier filtre et récupéré dans des fioles de 50 mL puis dilué
nération des déchets, utilisation agricole d’engrais et de par de l’eau désionisée jusqu’au trait de jauge.
pesticides, production de peintures et de pigments . . .)
s’accumulent dans le sol et dans les végétaux. Le plomb Étape de dosage
possède des propriétés cancérigènes et mutagènes, il altère
les voies respiratoires et le système digestif et perturbe le Le dosage du plomb dans nos échantillons a été réa-
système immunitaire ; ce métal est particulièrement nocif lisé à l’aide d’un spectromètre d’absorption atomique de
pour le système nerveux des enfants [2]. Les enjeux soulevés type Shimadzu modèle AA 6800, muni d’un four généra-
par l’émission du plomb dans l’environnement sont princi- teur de vapeur atomique (GFA-4B), d’un tube graphite à
palement sanitaires et ils sont liés à sa biopersistance, à haute densité, d’un échantillonneur automatique ASC 6100
son caractère bio-accumulateur dans l’environnement et à (Shimadzu), ainsi qu’un enregistreur et intégrateur RR5.
ses effets néfastes sur la santé [1]. C’est autour de cette L’appareil était contrôlé par le logiciel WISAARD. Une lampe
problématique que nous avons mis au point une méthode de à cathode creuse (Hamamatsu Photonics K.K.) a été utili-
dosage du plomb dans la matrice végétale par spectrométrie sée comme source de radiation. De l’argon de haute pureté
d’absorption atomique qui représente un outil performant (99,9 %) a été utilisé comme gaz vecteur. Les solutions stan-
pour l’étude des métaux traces, vu sa grande sensibilité et dard étaient préparées quotidiennement par dilution d’une
sélectivité [3]. solution mère de nitrate de plomb à 1000 mg/L (Waiko,
Pure Chemical Industries Ltd). La verrerie nécessaire a été
lavée avec un détergeant ensuite rincée avec de l’eau pure
Matériels et méthodes puis immergée dans de l’acide nitrique à 10 % pendant
24 heures suivi d’un rinçage à l’eau bidistillée. La méthode
Préparation des échantillons de dosage utilisée était celle des ajouts dosés (choix expli-
qué dans la suite de l’article). Cette technique est basée
Dans cette étude, nous avons choisi les feuilles du laurier sur une double détermination : une première détermination
rose (Nerium oleander) comme témoin de la contami- sur l’échantillon minéralisé brut (sans ajout) et une seconde
nation environnementale par le plomb, une trentaine détermination sur l’échantillon dopé (avec ajouts). La pré-
d’échantillons ont été soigneusement récoltés au niveau paration des ajouts dosés a été réalisée comme mentionné
d’une zone industrielle qui héberge des industries de métal- dans le Tableau 2.
lurgie à Ben Arous (Tunisie). Des échantillons de la même Les concentrations massiques en plomb total dans
espèce ont également été recueillis au niveau d’une zone les échantillons analysés sont exprimées en ␮g/g de
rurale située loin des industries et du trafic routier. Des matière sèche (ppm) selon l’équation suivante : Pb (ppm) =
précautions ont été prises lors de la conservation des échan- (C.V.F) /Pe
tillons afin d’éviter toutes contaminations supplémentaires Avec C : concentration de plomb mesurée par SAA (␮g/L) ;
en évitant notamment l’usage de tout matériel métallique. V : volume de dilution de l’échantillon en litre ; F : facteur
Chaque échantillon de feuilles était soigneusement lavé de dilution (4) ; Pe : prise d’essai de l’échantillon exprimé
avec de l’eau bidistillée puis séché à poids constant durant en g.
48 heures à 70 ◦ C. Ces feuilles ont été finement broyées dans
un broyeur à bille puis tamisées et homogénéisées.
Étape de minéralisation Résultats et discussion
L’étape de digestion est une étape essentielle car elle limite

Choix des conditions analytiques
les interférences liées à la matière organique. Elle peut
La détermination de la concentration du Pb dans les miné-
être réalisée par voie sèche ou par voie humide. Dans notre
ralisâts de tissu végétal par spectrométrie d’absorption
étude, c’est la minéralisation par voie humide qui a été
atomique électrothermique SAA-ET n’est pas exempte de
privilégiée en utilisant un acide fort (HNO3 concentré) en
problèmes. Ces problèmes sont liés généralement à une
présence d’un agent oxydant comme l’eau oxygénée pur :
atomisation incomplète par les effets d’interférence, les
0,1 g de matériel végétal broyé et bien sec a été mélangé
valeurs élevées du bruit de fond, la perte d’analyte par
avec 5 mL d’acide nitrique (degré de pureté 65 %) et 2 mL
volatilisation sous forme d’halogénures ou de fumées de
d’eau oxygénée (H2 O2 ) à 32 % puis placé dans des réacteurs
composés organiques et la formation des résidus carbonés.
en téflon. Les godets en téflon sont délicatement placés
Ceux-ci peuvent conduire à un dépôt non reproductible des
dans le four à micro-ondes (Bergh of Speed Wave 2) selon
échantillons, à des variations des vitesses d’atomisation ou
le programme thermique illustré dans le Tableau 1. Après
même à une occlusion partielle du rayon lumineux. Pour cor-
refroidissement des godets, le minéralisât est filtré sur un
riger la plupart de ces effets, l’utilisation d’un four graphite
ou à plateforme, d’un modificateur de matrice, d’une inté-
Tableau 1 Programme thermique de la minéralisation. gration du signal d’absorbance et d’un système de correction
d’absorbance non spécifique est recommandée [4].
Étape 1 2 3 4 5
Rampe (min) 5 1 1 1 1
Temps (min) 10 15 10 10 1
Type du four
Température (◦ C) 170 200 75 75 75 L’absorption non spécifique constitue la principale
contrainte en SAA-ET. Elle prend naissance en phase
Modele +
Tableau 2 Mode de préparation des échantillons dopés par les solutions d’ajouts.
Sans ajout Ajout 20 ␮g/L Ajout 40 ␮g/L Ajout 60 ␮g/L
500 ␮L de minéralisât 500 ␮L de minéralisât 500 ␮L de minéralisât 500 ␮l de minéralisât
+ + + +
500 ␮L solution de 480 ␮l MM 480 ␮l MM 480 ␮l MM
modificateur de matrice + + +
(MM) 20 ␮L de solution d’ajout 20 ␮L solution d’ajout de solution d’ajout de
de plomb (20 ppm) plomb (40 ppm) plomb (60 ppm)
Figure 1. Absorption spécifique et absorption non spécifique pour un échantillon de minéralisât sans (a) et avec (b) ajout de modificateur
de matrice [(NH4 )2 HPO4 0,2 % + triton X-100 0,5 % +HNO3 0,1 %].
vapeur lors du processus d’atomisation. Elle est due à une de l’échantillon, pour éviter la formation des émulsions
nette différence de température entre la partie centrale et stables et diminuer l’adsorption de l’analyte sur les surfaces
les extrémités du tube graphite qui inhibe le processus de des récipients [3]. L’ajout de l’acide nitrique (HNO3 ) dans la
dissociation en atomes libres par simple recondensation de solution de modificateur sert à produire un environnement
l’analyte aux endroits les plus froids du tube (extrémités). oxydant à l’intérieur de l’atomiseur [7]. L’utilisation de ce
La solution envisagée est l’utilisation d’un four en graphite modificateur de matrice assure la formation de complexes
de haute densité [5]. stables ayant une température de pyrolyse plus élevée [8]
(Fig. 1).
Système de correction du fond continu
Le minéralisât de feuille de laurier rose peut contenir
Optimisation du programme thermique du
d’autres éléments traces métalliques ou des traces de
matières organiques qui peuvent créer une absorbance non four par la méthode univariable
spécifique pouvant atteindre 90 % de l’absorbance totale
Le programme thermique du four graphite se divise en
[3]. Pour la correction des absorptions non spécifiques, nous
quatre étapes : étape de séchage, de décomposition,
avons utilisé une lampe à deutérium.
d’atomisation et une étape de pyrolyse. Chaque étape
a une durée et une température optimale. La méthode
Choix du modificateur de matrice d’optimisation adoptée est la méthode univariable qui
Les modificateurs de matrice présentent l’intérêt de réduire consiste à fixer le paramètre « temps » et à faire varier
totalement ou partiellement les interférences et le bruit le paramètre « température » et à noter à chaque fois
de fond en augmentant la stabilité thermique des composés l’absorbance et le bruit de fond. Les paramètres qui ont
à analyser à des températures de décomposition plus éle- donné la meilleure absorbance et le bruit de fond le plus
vées [3]. Pour atteindre cet objectif, plusieurs modificateurs faible ont été retenus. Le Tableau 3 résume les paramètres
ont été proposés dans la littérature (mélange palladium et optimisés du programme thermique.
magnésium ou les métaux du groupe platine comme le rho-
dium, ruthénium, platine. . .). Cependant, l’utilisation de
certains modificateurs n’est plus exempte des problèmes Validation
tels que la valeur élevée du blanc [6], la croissance perpé-
tuelle du bruit de fond et la diminution de la durée de vie du Nous avons procédé à la validation de la méthode selon les
four [7]. Dans le présent travail, le modificateur de matrice recommandations de la norme XPT 90—210 [9]. Dans l’étude
utilisé est une solution aqueuse contenant du (NH4 )2 HPO4 de validation proposée, les paramètres suivants ont été pris
0,2 %, du triton X-100 0,5 % et du HNO3 0,1 %. Le triton X- en compte : spécificité, linéarité, reproductibilité et répé-
100 est recommandé pour modifier les propriétés physiques tabilité.
Modele +
Tableau 3 Programme thermique optimisé.

Étapes Température Temps (s) Mode Débit du gaz (l/min)
(◦ c)
Séchage 90 20 Rampe 0,1
150 20 Rampe 0,1
Décomposition 800 10 Rampe 1,00
800 10 Palier 1,00
800 3 Palier 0
Atomisation 1500 4 Palier 0
Nettoyage 2000 2 Palier 1,00
Spécificité cet effet, la détermination de la teneur du Pb dans les

feuilles de laurier rose a été réalisée par la méthode des
La spécificité a été évaluée globalement par la recherche ajouts dosés.
d’effet de matrice non significatif [10]. La spécificité de la
méthode d’analyse mérite une mention toute particulière, Les limites de détection et de quantification
car elle renseigne sur le fait que la réponse mesurée n’est
pas perturbée par des espèces physicochimiques autres que Les limites de détection et de quantification ont été calcu-
l’analyte considéré [10]. Deux approches ont été rappor- lées à partir des résultats d’analyse de dix blancs analytiques
tées utilisées pour évaluer la spécificité de notre méthode selon les équations suivantes :
analytique [3] :
• la première approche évalue la présence d’interférence LD = (3.s blanc) /a
en dopant des échantillons réels avec différentes concen- LQ = (10.s blanc) /a
trations obtenues par dilution à partir d’une solution
mère de plomb 1000 mg/L puis en comparant le signal
Avec s blanc = écart-type du blanc analytique ; a : pente
d’absorbance de l’analyte avant et après ajout. Ainsi, un
de la droite de régression de la linéarité. (le blanc analytique
élément est jugé interférent s’il entraîne une variation de
est constitué uniquement d’acide nitrique et de peroxyde
5 % du signal d’absorbance [6]. En effet, cette approche
d’hydrogène traités de la même façon que les échantillons
traite plutôt l’interaction d’un élément avec l’analyte et
de plantes).
ne donne pas une estimation globale de l’effet de matrice
LD = 0,08 ␮g/g et LQ = 0,26 ␮g/g.
en sa totalité ;
• la deuxième approche consiste à comparer la pente de
la courbe d’étalonnage obtenue en milieu simple et La répétabilité
celle de la courbe des ajouts dosés. En absence des
effets de matrice, les droites d’étalonnage obtenues en En l’absence d’une méthode de référence, seule la sta-
milieu simple et en milieu complexe (méthodes des ajouts bilité de répétabilité a été étudiée en comparant Cobs à
dosés) sont parallèles et ont des pentes identiques. En Cx (une valeur critique de la table de Cochran au risque
revanche, si le milieu complexe entraîne des interfé- d’erreur 1 %) [11]. Pour vérifier la stabilité de la répéta-
rences chimiques, le changement de cette pente par bilité de la méthode dans tout le domaine d’application,
rapport au milieu simple interdit l’utilisation d’un mode deux mesures de valeurs de l’absorbance (ni = 2) ont été
direct d’étalonnage [11]. Les résultats sont rapportés réalisées sur dix échantillons de plantes (p = 10). Il suf-
dans le Tableau 4. Les résultats statistiques montrent une fit que Cobs soit inférieure ou égale à Cx [11]. Selon les
différence significative (p < 0,05) entre les deux méthodes résultats expérimentaux, Cobs est égale à 0,27416. Cette
de dosage, c’est-à-dire, une surestimation des concentra- valeur est inférieure à Cx = 0,718. Par conséquent, la répé-
tions par la méthode de la courbe d’étalonnage, attribuée tabilité de la méthode est constante dans tout le domaine
à l’existence des effets de matrice. Ainsi, pour corriger expérimental.
Tableau 4 Comparaison de la méthode d’analyse par courbe d’étalonnage par rapport à la méthode des ajouts dosés.
No. de répétition Analyse par courbe d’étalonnage Analyse par méthode des ajouts dosés
Concentration en ␮g/L Concentration en ␮g/L
1 36,8955 23,2195
2 37,7714 27,5128
3 38,3790 27,3164
Moyenne 37,6820 26,0162
Écart-type 0,7457 2,4240
Variance 0,5562 5,8759
Modele +
Tableau 5 Résultats relatifs à l’étude de la reproducti- Application : dosage du plomb total dans les
bilité interne. échantillons de laurier rose
Paramètres Échantillon 1 Échantillon 2 Les échantillons témoins de laurier rose ont été prélevés
à partir d’une zone montagneuse située au Nord-Est du
Moyenne générale 18,11 29,05
pays. Cette zone est située loin du trafic routier et est
Nombre totale de 6 6
dépourvue de toutes activités industrielles ou agricoles. Les
mesures n
teneurs en plomb total dans ces échantillons sont illustrés
Nombre moyen corrigé 3 3
dans la Fig. 2. Les valeurs retrouvées varient entre 0,5 et
de répétitions n’
1,2 ppm. La teneur moyenne de plomb était de l’ordre de
Somme 4,91 1,72
0,91 ± 0,23 ppm. Cette moyenne est aussi faible que celles
inter-échantillon
retrouvées dans des études similaires réalisées sur la conta-
Somme 4,54 1,19
mination des végétaux par le plomb et dont les teneurs en
intra-échantillon
plomb dans les échantillons témoins étaient aux alentours
Variance 1,26 0,47
de 1 mg/kg de matière sèche. Ces faibles teneurs de plomb
inter-échantillon
retrouvées aux niveaux des échantillons témoins sont pro-
Variance 1,14 0,30
bablement liées à la présence naturelle du plomb dans le
intra-échantillon
sol. En effet, il est important de rappeler que le plomb est
Variance de 2,39 0,77
un élément minéral naturellement présent dans la croûte
reproductibilité
terrestre, en général à de faibles teneurs (0,002 %, c’est le
interne
36e élément de la croûte terrestre), son origine est liée au
CVR 8,55 % 3,02 %
gisement de la roche mère [13].
Les teneurs en plomb total retrouvées au niveau des
La précision échantillons de laurier rose recueillis au niveau de la
zone industrielle sont illustrées dans la Fig. 3. La teneur
La précision de la mesure a été calculée en effectuant six moyenne en plomb total dans ces échantillons était de
mesures répétitives sur deux échantillons différents dans 22 ± 29,71 ppm. Cette teneur est statistiquement supérieure
les conditions de répétabilité. La précision de la méthode aux teneurs retrouvées au niveau des échantillons témoin
est jugée acceptable puisque les valeurs des coefficients de (p < 0,05). Cette moyenne est inférieure aux normes interna-
variation de répétabilité CV étaient inférieures à 5 %. tionales fixées par l’Association française de normalisation
(Afnor) qui fixe un seuil de 100 ppm de plomb pour les plantes
Reproductibilité interne ou fidélité non comestibles par l’Homme [14]. Certaines teneurs de
intermédiaire notre série dépassent le seuil de phytotoxicité de 30 ppm.
Par ailleurs, la teneur moyenne en plomb retrouvée dans
La fidélité intermédiaire est la mesure de la fidélité lorsque notre série est 5 fois et 10 fois supérieure à celles retrouvées
les répétitions sont faites par plusieurs opérateurs et/ou dans les études menées sur la pollution en Espagne et en Ita-
à des intervalles de temps importants au regard de la lie respectivement, nettement inférieure à l’étude turque
méthode. Elle est estimée à travers sa variance SR2(x). La (2820 ± 345 ppm) dont les teneurs ont largement dépassé
reproductibilité interne de la méthode a été vérifiée en le seuil de 100 ppm. Les résultats des études similaires
déterminant la concentration du plomb dans deux échan- sont récapitulés dans le Tableau 6. Nous avons constaté
tillons différents de plante à raison de trois répétitions par d’après la littérature que plusieurs études ont choisi le lau-
jour (ni = 3) pendant deux jours (p = 2) (Tableau 5). rier rose (N. oleander) comme plante témoin de la pollution
La reproductibilité de la méthode est jugée acceptable atmosphérique et environnementale par le plomb. Selon
puisque le coefficient de variation de la reproductibilité Kaya et al., N. oleander L. est une espèce apte à évaluer
(CVR) est inférieur à 10 % (domaine de traces). la pollution par les métaux lourds dans les zones indus-
trielles et peut être utilisé dans la biosurveillance de la
Justesse contamination environnementale par le plomb [15]. Selon
Zakrzewski et al., les zones proches des usines de production
En l’absence de matériaux de référence certifiés (MRC),
de batteries électriques présentent des problèmes environ-
la justesse de la méthode a été évaluée en calculant les
nementaux, en raison des niveaux de plomb relégué dans la
taux de recouvrement. De ce fait, des concentrations bien
nature qui contamine les sols et par conséquent, la végéta-
déterminées ont été ajoutées aux échantillons et le taux de
tion [15]. La contamination des plantes par le plomb peut
recouvrement a été calculé selon l’équation suivante :
avoir plusieurs origines notamment les rejets industrielles.

TR = concentration trouvé e − concentration ajouté e Selon une étude nigérienne, les teneurs de Pb détectées
dans les feuilles de Talinum triangulare cultivées à proximité
/concentration ajouté e d’une grande unité industrielle de textile sont nettement
plus élevées que celles cultivées en zone rurale. En effet, le
Pour toutes les concentrations ajoutées, la justesse de taux de Pb dans les échantillons de plantes cultivés autour
la méthode est confirmée puisque le taux de recouvrement des tanneries diminue au fur et à mesure que la distance par
était compris entre 90 et 110 % ; intervalle pour lequel la rapport au point de décharge augmente [21].
justesse est considérée acceptable pour l’analyse des élé- Le trafic routier est aussi une source importante de conta-
ments traces [12]. mination environnementale par le plomb. Plusieurs études
Modele +
Figure 2. Teneurs en plomb (mg/kg de matière sèche) dans les échantillons témoins de feuilles de laurier rose.
160
137,8 ppm
140
120
100
80
60
40
30
20
1,37 ppm
0
E1
E2
E3
E4
E5
E6
E7
E8
E9
E10
E11
E12
E13
E14
E15
E16
E17
E18
E19
E20
E21
E22
E23
E24
E25
E27
E28
E29
E30
100 ppm Seuil fixé par AFNOR pour les plantes contaminées par le pb
30 ppm Seuil de phytotoxicité
Figure 3. Teneurs de plomb total (ppm) dans les échantillons de feuilles de laurier rose prélevés dans la région étudiée par rapport aux
valeurs de référence.
Tableau 6 Tableau comparatif des teneurs en plomb retrouvées dans notre étude et celles des études similaires.
Auteurs Pays Espèces Plomb (ppm) Plomb (ppm) Références
et année de l’étude étudiées témoins Echantillons
Notre étude (2016) Tunisie Nerium oleander 0,91 ± 0,231 22 ± 29,711 —
Kaya et al. (2010) Turquie Nerium oleander 1 ± 0,203 2820 ± 345 [15]
Rossini et al. (2004) Espagne Nerium oleander 0,43 ± 0,060 2,40 ± 0,051 [16]
Mingoranec et al. (2006) Italie Nerium oleander 0,43 ± 0,050 2,15 ± 0,045 [17]
Alushllari et al. (2014) Albanie Setaria sp. — 2,83 ± 0,038 [14]
Verbascum sp. — 4,57 ± 0,024
Dougnon et al. (2013) Bénin Solanum 0,40 ± 0,201 1,80 ± 0,223 [18]
macrocarpon
(la grande morelle)
Akinola et al. (2008) Nigéria Talinum 0,74 ± 0,563 0,86 ± 0,681 [19]
triangulare
Nawazish Pakistan Calotropis procera 0,20 ± 0,012 2,40 ± 0,020 [20]
et al. (2012)
Modele +
ont montré que le dépôt du plomb au niveau des plantes by electrothermal atomic absorption spectrometry. Anal Chim
est positivement corrélé avec la densité de trafic routier Acta 1982;142:183—8.
[20]. Les taux élevés de plomb au niveau des zones urbaines [7] Jankowski K, Ciepiela AG, Jankowska J, Szulc W, Kolczarek
sont principalement imputables à l’échappement des auto- R, Sosnowski J. Content of lead and cadmium in aboveground
mobiles et aux émissions du trafic en particulier, l’essence plant organs of grasses growing on the areas adjacent to a route
of big traffic. Environ Sci Pollut Res Int 2015;22:978—87.
au plomb et les huiles lubrifiantes [22]. Selon une étude
[8] Nessa F, Khan SA, Abu Shawish KY. Lead, cadmium and
menée au Bénin, les légumes cultivés à proximité des routes
nickel contents of some medicinal agents. Indian J Pharm Sci
à trafic intense sont pollués par le plomb contenu dans la 2016;78:111—9.
fumée dégagée par les véhicules, provenant elle-même de [9] Afnor XPT. 90—210, protocole d’évaluation d’une méthode
la consommation de l’essence contenant du plomb tétra- alternative d’analyse physicochimique quantitative par rap-
éthyle [23]. Selon le service d’études techniques des routes port à une méthode de référence; 1999.
et autoroutes français, l’essentiel de la déposition des par- [10] Feinberg M. La validation des méthodes d’analyse : une
ticules de plomb se réalise dans les 20 premiers mètres approche chimiométrique de l’assurance qualité au labora-
de l’axe routier. Les concentrations du plomb déposé au toire. Paris: Masson; 1996. p. 396.
niveau du sol et/ou au niveau des végétaux sont inverse- [11] Dabeka RW. Graphite-furnace atomic absorption spectrome-
tric determination of lead, cadmium, cobalt and nickel in
ment proportionnelles à la distance de la route [24]. Ces
infant formulas and evaporated milks after nitric-perchloric
données orientent vers l’existence d’un lien de causalité
acid digestion and coprecipitation with ammonium pyrrolidine
entre la densité du trafic routier et la contamination de dithiocarbamate. Sci Total Environ 1989;15:271—7.
l’environnement par les métaux lourds notamment par le [12] Amiard JC, Pineau A, Boiteau HL, Metayer C, Amiard-Triquet
plomb. C. Application of atomic absorption spectrophotometry using
zeeman effect to the determination of eight trace elements
(Ag, Cd, Cr, Cu, Mn, Ni Pb and Se) in biological materials. Water
Conclusion Res 1987;21:693—7.
[13] Cecchi M [Thèse] Devenir du plomb dans le système sol-plante.
In: Cas d’un sol contaminé par une usine de recyclage du plomb
Les résultats analytiques et l’évaluation statistique de cette
et de deux plantes potagères (fève et tomate). Toulouse: École
étude de validation ont mené aux conclusions suivantes :
doctorale de sciences écologiques vétérinaires agronomiques
la procédure analytique présentée pour la détermination et bio-ingénieries; 2008.
du plomb total dans les matrices végétales est conforme [14] Alushllari M, Civici N. Determination of lead accumulation
et peut être utilisée à cette fin dans les conditions impo- leaves of different vegetation grow in soil pollution. Eur Sci
sées. D’autres part, le présent travail nous a permis de J 2014;10:208—73.
constater l’impact réel des usines et du trafic routier sur la [15] Kaya G, Okumus N, Yaman M. Lead, cadmium and copper
pollution environnementale et en particulier des végétaux. concentrations in leaves of Nerium oleander L. and Robinia
Néanmoins, cette étude nécessite d’être approfondie par le pseudoacacia L. as biomonitors of atmospheric pollution. Fre-
dosage du plomb dans d’autres parties de la plante (tiges senius Environ Bull 2010;19:669—75.
[16] Rossini O, Mingorance MD. Study of the impact of industrial
et racines) et le recours à d’autres espèces de plantes afin
emission on the vegetation grown around Huelva (South of
de comparer le profil bio-accumulateur de chaque espèce
Spain) City. J Atmosph Chem 2004;49:291—302.
et designer l’espèce la plus apte à être utilisée dans la [17] Mingoranec MD, Rossini O. Heavy metals in N. Oleander
phytoremédiation. leaves as urban pollution assessment. Environ Monitor Assess
2006;119:57—68.
[18] Dougnon V, Edorh P, Bankole H, Dougnon J, Klotoe JR, Loko F.
Déclaration de liens d’intérêts Présence du plomb dans les feuilles de Solanum macrocarpon
Linn cultivé à Cotonou (Bénin) : rôle des fientes de poulets mal
Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens d’intérêts. compostés. C R Biol 2013;336:261—4.
[19] Akinola MO, Njoku KL, Ekeifo BE. Determination of lead, cad-
mium and chromium in the tissue of an economically important
plant grown around a textile industry at Ibeshe, Ikorodu Area
Références of Lagos State, Nigeria. Adv Environ Biol 2008;2(1):23—5.
[20] Nawazish S, Hussain M, Ashraf M, Yasin M, Jamil A. Effect
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2005;17:35—52. [21] Battaglia A, Calace N, Nardi E, Petronio BM, Pietroletti M.
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trophotometry (AAS) for analysis of cadmium and lead levels soils due to paper mill sludge addition. Effects on Pb and Zn
in the plant material. Rocz Panstw Zakl Hig 1990;41:223—9. transferability to barley. Bioresource Technol 2007;98:2993—9.
[4] Guardia M, Durrieu F, Voinovitch IA, Louvrier J. Amélioration, [22] Sharma P, Dubey RS. Lead toxicity in plants. Braz J Plant Physiol
par emploi de tensio-actifs, de la sensibilité et de la répé- 2005;17:35—52.
tabilité du dosage du plomb en spectrométrie d’absorption [23] Atidegla S, Agbossu E, Huat J, Glele Kakai R. Contamination
atomique avec atomisation électrothermique. Spectrochim métallique des légumes des périmètres maraîchers urbains et
Acta B Atom Spectrosc 1983;38:617—24. péri urbains : cas de la commune de Grand-Popo au Bénin. Int
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the determination of cadmium, copper and lead in seawater les éléments traces métalliques. 2004;73:12.

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TOXAC-207; No. of Pages 8 ARTICLE IN PRESS

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Mise au point et validation d’une méthode

Nadia Chaouali ∗, Anouar Nouioui , Manel Aouard ,

Laboratoire de recherche en toxicologie et environnement LR12SP07, centre d’assistance

MOTS CLÉS Résumé

Introduction l’environnement des quantités considérables de métaux

Étape de minéralisation Résultats et discussion

L’étape de digestion est une étape essentielle car elle limite

Tableau 3 Programme thermique optimisé.

Spéciﬁcité cet effet, la détermination de la teneur du Pb dans les

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