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    INTRODUCTION

    Après des séances de cours de Microbiologie générale dans l’auditoire, il nous a été
    demandé de passer aux séances de laboratoire pour approfondir nos connaissances en ce
    qui concerne les microorganismes. D’où l’une de ces séances était consacré à la culture
    microbienne qui est une technique qui permet grâce un milieu de culture de favoriser
    l’accroissement et la multiplication des microorganismes.
    Nous avons utilisé plusieurs produits alimentaires pour effectuer ce travail, nous étions
    repartis en groupe de douze et chacun de ces groupes avait travaillé sur un produit
    spécifique choisi par l’assistant au préalable.
    En ce qui est de mon groupe nous avons travaillé sur le boudin que nous avons acheté chez
    un vendeur juste devant l’entrée de la Faculté des sciences et technologie ; Nous avons
    travaillé sur le boudin en vue d’observer par une identification macroscopique les
    microorganismes présents dans cet aliment que nous consommons tant.
    Nous allons dans la suite donner les détails de ce qui était fait lors de cette séance au
    laboratoire.
    II. MATÉRIELS ET MÉTHODES

    Comme matériels nous avons utilisé :

    - Pompe à filtre

    - Antoinoire

    - Pince

    - Boite de pétrie

    - Bec bezeme

    Comme Échantillon nous avons utilisé :

    - Boudin fumé

    MÉTHODE
    Voici les étapes que nous avons eu à faire pour réaliser nos différents milieux de culture au
    laboratoire :

    ÉTAPE 1: Lucufier le milieu de culture : qui est support nutritive utilisé pour la croissance et
    la multiplication des microorganismes et ensuite le refroidir, puis allumer le bec bezeme et la
    flamme doit être bleue, puis ouvrir le milieu de culture et le flamer puis couler dans le boîte
    de pétrie enfin flamer encore après ferme.

    ÉTAPE 2: Prendre la membrane filtrante est le déposer dans l'entonnoir et crée la pression
    requise pour forcer l'eau à travers le média filtrant à l'intérieur du filtre, enfin prendre la
    membrane filtrante à l'aide d'un pince et le déposer dans le boîte de pétrie puis ferme.

    Tout ça doit se passer plus près de la flamme pour éviter la contamination du milieu, et une
    fois changer l'échantillon il faut stériliser encore les matériels.

    ÉTAPE 3: Incubation : Pour PCA : 37°C pendant 24h, Pour CCC: 35°C pendant 24h , Pour
    Saboureaud : 25°C pendant 24h
    RESULTATS
    Après avoir fait la culture microbienne, on a procècé à l’identification et nous avons donc fait
    l’identification macroscopique et l’identification biochimique.

    Identification macroscopique: dans cet identification on a pu observer la forme, la taille, la


    couleur, l’aspect et l’odeur des colonies.

    - Pour le PCA :
    ❖ Couleur : jaune
    ❖ Taille : minime
    ❖ Aspect :
    ❖ Odeur : habille mouillé
    - Pour le Soboureux :
    ❖ Couleur : jaune
    ❖ Taille : minime
    ❖ Aspect :
    ❖ Odeur : boudin

    La culture faite sur le Mac concey n’avait pas poussé.

    Identification biochimique : pour cette identification nous avions fait le test de catalase.

    Pour le réaliser nous avions pris une goutte de Peroxy d’oxygène, on l’a déposée sur la lame,
    prélévé une colonie et on l’a mélangé avec le Péroxy.

    Pour le PCA et le Saboureux il y avait production de gaz donc les deux milieu était de gram
    positif.
    DISCUSSION
    Échantillon : eau de robinet, groupe (6).
    Résultats PCA; -Taille : Tapis
    -Couleur: un peu blanche.
    -Aspect: tapis des jeunes mousses
    -Odeur: Beurre d'arachide ( mwamba ).
    -Catalase: positif( + )
    Résultats CCC:
    -Taille : petits points partout sur le papier filtrant.
    -Couleur : bleu et rouge
    -Aspect : Petits pointiés
    -Odeur : orange pourri
    -Catalase : positif(+)
    Résultats Sabouraud :
    -Taille : 2 colonies
    -Couleur : un peu jaunâtre
    -Aspect : 2 aspects ;
    1) plat,
    2) bombé
    -Odeur : Alcool en fermentation
    -Catalase : Positif (+).

    Groupe 11: Échantillon eaux du puit


    *Forme de colonies : circulaire
    * Nombre de colonies : plus de 300
    * Couleur : bleue
    * Catalase : positif
    * Odeur : riz brûlé
    2. Milieu PCA
    * forme de colonies :
    * Nombre de colonies : plus de 300 colonies
    * Couleur : Maron
    * Catalase : positif
    * Odeur : patte d'arachide brûlé
    3. Milieu Sabouraud
    * forme de colonies : irrégulière
    * couleur : jaune
    * Nombre de colonies : plus de 300 colonies
    * catalase : Pas de catalase
    Odeur : patte d'arachide brûlé

    _Groupe 3 :Échantillon ; les arachides pourries


    Champignon ; aspergillus flavus
    Milieu de culture ; sabouraud
    Couleur : jaune brun
    Odeur : l'odeur de terre
    Catalase : positif

    Groupe 10: Échantillon : Jus conditionné


    PCA: taille : moyenne
    Couleur : violet
    Odeur : brûlé
    Forme: circulaire
    Production de gaz : non
    Nombre colonies :1.
    CCC: taille petite
    Couleur : rose
    Forme : circulaire
    Odeur : pourri
    Production de gaz: oui
    Nombre de colonies :1

    Groupe 4: échantillon : Yaourt


    Bactéries : lactobacilles
    Milieu de culture : M17 sa pousse
    Mac conkey: ça n'a pas poussé.

    CONCLUSION
    En définitif, cette séance nous a permis de comprendre
    le déroulement de la culture microbienne, les différents matériels de laboratoire et leurs
    utilités ainsi que les microorganismes presents dans ce que nous consommons.

    Cette séances nous a aidé à avoir un comportement digne et une discipline sur le choix de ce
    que nous consommons surtout en dehors de nos familles respécrtives.
    RÉFÉRENCE BIBLIOGRAPHIQUE

    1. Milieu de culture Sabouraud :

    - Émile Roux et Charles Nicolle : Ils ont développé ce milieu de culture riche en peptone et glucose,
    favorable à la croissance des champignons pathogènes comme Candida albicans.

    2. Milieu de culture PCA (Plate Count Agar) :

    - Robert Rettger : Ce microbiologiste américain a mis au point ce milieu de culture standard pour le
    dénombrement des bactéries aérobies hétérotrophes.

    3. Milieu de culture CCC (Cystine-Citrate-Carbonate) :

    - Sven Gard : Ce microbiologiste suédois a développé ce milieu sélectif pour la culture des bactéries
    du genre Brucella, agents responsables de la brucellose.

    Parmi les autres scientifiques ayant contribué à ces milieux de culture, on peut citer :

    - John Tyndall : Il a étudié les conditions de croissance des micro-organismes dans différents milieux.

    - Robert Koch : Le bactériologiste allemand a développé des techniques de culture sur milieux
    solides.

    - Louis Pasteur : Ses travaux sur la fermentation ont permis d'améliorer les milieux de culture.

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